Herramientas estadísticas aplicadas a la validación de métodos analíticos.

Analítica Experimental III

P. en F. Romero Martínez Marisol

Revisión: Dra. Silvia Citlalli Gama González

1 Analítica Experimental III. RMM

Validación

Sensibilidad

Curva de calibración

Linealidad

Análisis de residuales

Coeficientes de determinación y correlación

Límites de detección y

cuantificación

Mediciones repetidas del

blanco

Exactitud

Precisión

Repetición de las curvas de calibración.

Veracidad

Recobro

Muestra fortificada

Robustez

Prueba de t

Analítica Experimental III. RMM 2

Validación

Analítica Experimental III. RMM 3

Un nuevo método desarrollado para un problema específico.

Un nuevo método ya establecido revisado para incorporar

mejoras o extenderlo a un nuevo problema.

Cuando el control de calidad indica que un método ya

establecido está cambiando con el tiempo.

Un método establecido usado en un laboratorio diferente o

con diferentes analistas o con diferente instrumentación.

Es el proceso de definir una necesidad

analítica y confirmar que el método en cuestión tiene

capacidades de desempeño

consistentes con las que requiere la aplicación.

Sensibilidad del método

Es la relación entre la señal obtenida de

un sistema de medición y la

correspondiente concentración de

analito.

Analítica Experimental III. RMM 4

Concentración Concentración

Resp

uest

a

Resp

uest

a

¿Qué gráfica representa a un método más sensible y por

qué?

Sensibilidad del método Curvas de calibración

Representación gráfica de la señal de

medición como una función de la cantidad

de analito.

Forma algebraica

donde b es la pendiente y a es la

ordenada al origen

La sensibilidad se reporta como la

pendiente de la curva de calibrado.

Analítica E

xperim

ental III. R

MM

5

Linealidad

Se refiere al intervalo de concentraciones

del analito en el que la respuesta del

sistema de medición es una función lineal

de la concentración.

Analítica E

xperim

ental III. R

MM

6

Intervalo lineal

Es el que comprende desde el límite de

cuantificación hasta el límite de linealidad.

Casi siempre, una desviación de 5% de la

linealidad se considera como el límite

superior.

Analítica Experimental III. RMM 7

Evaluación de la linealidad (1)Análisis visual del gráfico de residuales

Analítica Experimental III. RMM 8

Evaluación de la linealidad (II) Análisis visual de la curva de calibrado

Analítica Experimental III. RMM 9

Evaluación de la linealidad (III)Coeficientes de correlación y determinación

Coeficiente de correlación:

Sirve para estimar la bondad con la que se ajustan los puntos experimentales a una línea recta.

Coeficiente de determinación

Es el cuadrado del coeficiente de correlación, nos proporciona el porcentaje de la variación expandida.

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Ejemplo: Si tenemos un coeficiente de

correlación de 0.85, el coeficiente de

determinación será de 0.72.

Por lo cual 72% de la variabilidad en y

es explicada por la variabilidad en x.

Analítica Experimental III. RMM 11

Evaluación de la linealidad (III)Coeficientes de correlación y determinación

Límite de detección, LD

Concentración mínima de un analito en la

matriz de una muestra que puede ser

detectada, pero no necesariamente

cuantificada, bajo condiciones analíticas

específicas .

LD = yLD expresado en unidades de x con

ayuda la curva de calibración promedio.

Analítica Experimental III. RMM 12

demuestrablandemuestrablanLD sxy coscos *3

Límite de cuantificación, LC

Es aquel valor de concentración mínimo

que puede obtenerse con una imprecisión

aceptable.

LC = yLC expresado en unidades de x con

ayuda la curva de calibración promedio.

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demuestrablandemuestrablanLC sxy coscos *10

Exactitud

Es la proximidad de concordancia entre el

resultado de una medición y el valor de

referencia aceptado.

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Exactitud

Precisión Veracidad

Exactitud Veracidad

Es una expresión de que tan cercana se encuentra la media de un número infinito de resultados (generados por el método) con un valor de referencia.

Como no es posible hacer un número infinito de mediciones, entonces la veracidad no se puede medir. Sin embargo podemos tener una aproximación práctica a la veracidad.

Esta aproximación se expresa normalmente en términos de sesgo

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Exactitud Veracidad

Una determinación práctica del sesgo se obtiene comparando el promedio de una serie de resultados obtenidos con el método propuesto (x) contra un valor de referencia aceptado.

◦ El sesgo puede expresarse en términos absolutos

◦ En términos de porcentaje

◦ En términos del porcentaje de recobro de una adición

Analítica Experimental III. RMM 16

refxxb 100(%) x

x

xxb

ref

ref

100(%)' xx

xxR

icionadacantidadad

dicionadamuestraNOacionadamuestraadi

Exactitud Precisión

Es una medida de que tan cercanos están

los resultados unos con respecto a los

otros y por lo general se expresa

mediante medidas tales como la

desviación estándar (que describe la

dispersión absoluta de los resultados) o

el coeficiente de variación (que describe

la dispersión relativa de los resultados)

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Recobro

El porcentaje de recuperación (%R) entre las muestras fortificadas y sin fortificar se calcula como:

Donde CF es la concentración de analito medida en la muestra fortificada; CU es la concentración de analito medida en la muestra sin fortificar; CA es

la concentración del analito adicionado

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Robustez

La robustez de un método analítico es la

medida de su capacidad para permanecer

inalterado por pequeñas variaciones

deliberadas en el método y provee de un

indicio de su veracidad durante su uso

normal.

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Referencia

The Fitness for Purpose of Analytical

Methods, A laboratory Guide to Method

Validation an Related Topics, Eurachem,

Second Edition, 2014.

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