Bacilos Gram negativos exigentes - … · 2013-04-30 · Bacilos gram negativos pleomórficos....

Bacilos Gram negativos exigentesexigentes

Género Haemophilus

Género Bordetella

Género Legionella

Género Brucella

Género Francisella

HaemophilusEspecie Localización

H. influenzae Tracto respiratorioH. haemolyticus y bocaH. parahaemolyticus

H. aegyptius Ojo

H. aphrophilus Placa dentalH. paraprophilus “ “H. seguis “ “

H. ducreyi Tracto genital

Haemophilus

�BGN pleomórficos. Nuticionalmente exigentes.

�Aerobios estrictos.�Requiere factores especiales en los medios de cultivo para su crecimiento:

Factor X = Hemina Factor V = NAD (nicotinamida adenindinucleótido)

Hematíes lisados(sangre precalentada)AGAR CHOCOLATE

Haemophilus

EspecieFactor

X V

H. influenzae + +

H. parainfluenzae - +

H. ducreyi + -

Haemophilus influenzae• NIÑOS- CEPAS CAPSULADAS

Meningitis.Epiglotitis aguda.Celulitis.Artritis.

• NIÑOS/ADULTOS- CEPAS NO CAPSULADAS.Sinusitis.Otitis mediaNeumonía (enf. pulm. crónica).Reacción EPOC.

Haemophilus influenzaeMENINGITIS:

�Niños no vacunados (3m – 6a).�Fase inicial: cuadro respiratorio leve (1-3 d).�Fiebre elevada, cefalea intensa,rigidez de nuca. �Mortalidad con tto. precoz: < 10%.�Baja incidencia de secuelas neurológicas.�Baja incidencia de secuelas neurológicas.

EPIGLOTITIS:�Niños no vacunados (2 – 4 a).�Fase inicial: faringitis, fiebre, disnea.�Progresión muy rápida: Celulitis, inflamación tejidos

supraglóticos (obstrucción TR, muerte). �Alta mortalidad si no se inicia el tratamiento

rápidamente.

Haemophilus influenzaeObtención de muestras clínicas:

LCR, sangre, exudado ótico, esputo,

• Tinción de GRAM • Cultivo (PVX o agar de Levinthal)• Cultivo (PVX o agar de Levinthal)

Colonias opacas y lisasSatelitismo

Haemophilus influenzae

– Identificación bioquímica • Factores X y V

– Identificación serológica: Serotipos a-f

Aglutinación con partículas de latex• Aglutinación con partículas de latex

Técnicas moleculares (LCR)

Haemophilus influenzae

� Infecciones sistémicas:� Precoz.� Alta tasa mortalidad sin tto.� Cefalosporinas amplio espectro.� Cefalosporinas amplio espectro.

� Inf. TR (sinusitis, otitis):� Ampicilina.� Si R (30%): cefalosporina 3ª generación,

azitromicina, quinolona.

Haemophilus influenzae

�VACUNAS CONJUGADAS (serotipo b)

�Quimioprofilaxis : � Rifampicina.� Rifampicina.� Niños portadores con alto riesgo de desarrollar la

enfermedad.

Bordetella

� Bacilos gram negativos pleomórficos.� Aerobios estrictos.� Oxidasa catalasa positivo� Bacterias exigentes y crecimiento lento

Requieren medios de cultivo especialesRequieren medios de cultivo especialescon sangre, albumina, carbón y almidón (Bordet-Gengou).

Especies:B. pertussisB. parapertussisB. bronchiseptica

Bordetella pertussis

� Transmisión vía respiratoria (gotitas de pfluge).� Adherencia al epitelio traqueobronquial ciliado.

Adhesión, inmovilización de los cilios y destrucción del epitelio.epitelio.

� Producción local de toxinas y enzimas: Toxina pertussis. Pertactina. Toxina dermonecrótica. Hemaglutinina. Citotoxina. Toxina adenilatociclasa.

� Inflamación y exudado bronquial: TOSFERINA

Bordetella pertussis

� P. INCUBACIÓN: 7-14 días.� P. CATARRAL: 1-2 semanas: Mayor contagiosidad

Rinorrea. Tos. Conjuntivitis. Febrícula. � P. ESTADO: 4-6 semanas.� P. ESTADO: 4-6 semanas.

Accesos de tos (10-15 días).Vómitos. Desnutrición. No fiebre alta.

� COMPLICACIONES:Respiratorias: Otitis. Neumonía.Abdominales: Hernias. Prolapso rectal.Hemorragias: Petequias. Epixtasis.Nerviosas: Convulsiones. Coma.

� P. DECLINACIÓN: 2-3 semanas.

Bordetella pertussis• TOMA DE MUESTRAS (toxicidad):

Ex. o aspirado nasofaringeo (Periodo catarral).Transporte inmediato (medios especiales).

• INMUNOFLUORECENCIA DIRECTA:50% Sensibilidad. Falsos positivos.

• CULTIVO: Medio Bordet-Gengou. Medio con carbon de Regan-Lowe.

35ºC, atm húmeda, 7-10 dias

• MÉTODOS MOLECULARES: PCR en lavado nasofaringeo.

• DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO : no disponible.

Bordetella pertussis� Reservorio: humano.� Distribución universal. Endémica.� Mayor riesgo de infección: niños <1 a. Aumento de

prevalencia de enfermedad en niños mayores y adultos.� Frecuencia: estacional.� Frecuencia: estacional.� Brotes: cada 3-4 años.� Contactos: cercanos.

TTO: macrolidos.Fluorquinolonas o cotrimoxazol

Género LegionellaEnfermedad de los legionarios

Enfermedad de Pontiac

Legionelosis

Legionellaceae

Legionella

Género Legionella

• Cocobacilos gramnegativos• Aerobios estrictos• No esporulados, no encapsulados• Morfología bacilar, pleomórfica, formas filamentosas• Móvil (flagelos polares o subpolares)

Fisiología y estructura

• Móvil (flagelos polares o subpolares)

Género Legionella

•Metabólicamente poco activas � pruebas bioquímicas

•Oxidasa variable

•Catalasa positiva débil

•Reducción de nitrato y ureasa negativas.

Fisiología y estructura

•No fermentadores

•Aa como fuente de energía

•Crecimiento lento. Medios cultivo especiales.

•L-cisteína /sales de hierro

•agar BCYE-α (“buffered charcoal yeast extract”) enriquecido con

alfa-cetoglutarato con o sin agentes selectivos añadidos.

Especies de

Legionella

Nº de

serogrupos

Patogenicidad

en humanos

Especies de

Legionella

Nº de

serogrupos

Patogenicidad

en humanos

L. adelaidensis 1 - L. londiniensis 2 -

L. anisa 1 +a L. longbeachae 2 +a

L. Beliardensis 1 - L. lytica 1 +a

L. Birminghamensis 1 +a L. maceachernii 1 +a

L. Bozemanii 2 +a L. micdadei 1 +a

L. Brunensis 1 - L. moravica 1 -

L. Busanensis 1 - L. nautarum 1 -

L. Cherrii 1 - L. oakridgensis 1 +a

L. Cincinnatiensis 1 +a L. parisienses 1 +a

L. Drankourtii 1 - L. pneumophila 16 +a

L. Drozanskii 1 - L. quateirensis 1 -

Género Legionella

90% de las infecciones

L. Drozanskii 1 - L. quateirensis 1 -

L. Dumoffii 1 +a L. quinlivanii 2 +b

L. Erythra 1 +a L. rowbothamii 1 -

L. Fairfieldensis 1 - L. rubrilucens 1 +b

L. Fallonii 1 - L. sainthelensi 2 +a

L. Feeleii 2 +a L. santicrucis 1 -

L. Geestiana 1 - L. shakespearei 1 -

L. Gormanii 1 +a L. spiritensis 2 -

L. Gratiana 1 - L. steigerwaltii 1 -

L. Gresilensis 1 - L. taurinensis 1 -

L. Hackeliae 2 +a L. tucsonensis 1 +a

L. Impletisoli 1 - L. wadsworthii 1 +a

L. Israelensis 1 - L. waltersii 1 +a

L. Jamestowniensis 1 - L. worsleiensis 1 +b

L. Jordanis 1 +a L. yabuuchiae 1 -

L. Lansingensis 1 +a

Género Legionella

Especies de Legionella implicadas en patología humana

Ecología

Microorganismo ambiental ubicuoFactores de supervivencia y replicación

Temperatura 20-45ºC

Calidad pH, turbidez, conductividad

Infección

Agua conductividad

Estancamiento Escaso flujo

Presencia de otros

microorganismos

Producción de biofilm

Protozoos Relación intracelular

Ecología y patogenia

Agua sanitaria

doméstica y otros

sistemas

Instalaciones artificiales

Ambiente natural

(lagos, ríos, aguas

termales ...)

Género Legionella

porina

Receptor CR3

Inhibición de la unión de los fagosomas

QuimiocinasCitoquinas

Enzimas proteolíticasFosfatasasLipasasNucleasas

Inmunidad celular

macrófagos activados por los linfocitos Th1

Género Legionella

• a) adhesión del microorganismo a los receptores de la superficie de las células,

• b) endocitosis y penetración del microorganismo en los fagocitos,

• c) vacuolización y escape del ataque bactericida,

Interacción Legionella-Células fagocíticas

• c) vacuolización y escape del ataque bactericida,• d) formación de la vacuola replicativa,• e) multiplicación intracelular y,• f) liberación de las bacterias y muerte celular.

Proceso neumónico potencialmente grave

Género Legionella

Manifestaciones clínicas

Fiebre de Pontiac

– P.incubación 5h-5días– 2-5 días.– 2-5 días.– Similar a una gripe.– Sin neumonía.– Resolución espontánea sin tratamiento.– L. pneumophila serogrupos 1, 4 y 6, L. micdadei y L. anisa

Género Legionella

Manifestaciones clínicas

Enfermedad de los legionarios

– P. incubación 2-15 días– 2-10 días– Fiebre, malestar, letargo, anorexia– Tos leve no productiva (50% esputo purulento, hemoptisis)– Tos leve no productiva (50% esputo purulento, hemoptisis)– Rx tórax � neumonía– 10-30% GI– Enfermedad multiorgánica (SNC, hígado y riñones).– transaminasas, hiponatremia, creatininquinasa– Necesita tratamiento antimicrobiano.

Género Legionella

Género Legionella

Diagnóstico de laboratorio

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

• Detección rápida de cualquier serogrupo L.pneumophila.

• Sensibilidad 25-75%.

• Especificidad 95%.• Especificidad 95%.

Género Legionella

Diagnóstico de laboratorio

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

CULTIVO

• Método referencia.

• Diagnóstico confirmación.• Diagnóstico confirmación.

• Cualquier especie y serogrupo.

• Sensibilidad 20- 80%. Especificidad 100%.

• Medio específico (BCYE).

• 35-37ºC, atm aerobia y húmeda.

• Tiempo crecimiento.

Género Legionella

Diagnóstico de laboratorio

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

CULTIVO

SEROLOGÍA

• EIA con IFI.

Seroconversión (incremento de cuatro veces, 1:256). Dx retrospectivo

Falsos positivos y tiempo (1 semana a 2 meses).

Género Legionella

Diagnóstico de laboratorio

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

CULTIVO

SEROLOGÍA

Ag L. pneumophila en orina

• Gran avance (EIA o ICT)

• Antígenos LPS L. pneumophila serogrupo 1.

• S 60-90%

• Rápido.

• Neumonía reciente o pasada (1 día-6 meses).

Género Legionella

Diagnóstico de laboratorio

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

CULTIVO

SEROLOGÍA

Ag L. pneumophila en orina

Detección de ADN en muestras clínicas

Inconvenientes del cultivo � técnicas moleculares (ADN de Legionella)

Género Legionella

Diagnóstico de laboratorio

Género Legionella

Tratamiento

Bacteria intracelular.

• Macrólidos (acitromicina y claritromicina)

• Fluorquinolonas (ciprofloxacino y levofloxacino)

• Rifampicina• Rifampicina

• Cotrimoxazol

• Tetraciclinas

Duración del tto 10-15 días

Género Legionella

Epidemiología y control

Género Legionella

Epidemiología y control

2,5

3

3,5

4Epidemiología

Legionelosis. Tasas de incidencia por 100.000 habitantes. 2001-2008

0

0,5

1

1,5

2

Europa 0,76 1,01 0,98 0,83 01-ene 1,11 1,13 1,18

España 3,49 3,54 3,05 2,67 3 3,07 2,66 2,99

2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008

1,01

Fuentes: Legionnaire´s disease in Europe 2007-2008. Joseph et al., 2010.Enfermedades de Declaración Obligatoria. RENAVE. Centro Nacional de Epidemiología. 2010.

Género Legionella

Epidemiología

Casos esporádicos o brotes.

Casos comunitarios o nosocomiales.

Distribución mundial (países desarrollados).

Principalmente en verano y otoño.Principalmente en verano y otoño.

EDO-CNE.

Mortalidad de la enfermedad de los legionarios

~20%

Francisella

Francisella tularensis TULAREMIAFiebre glandular

Fiebre de los conejos

Fiebre de la garrapata

Fiebre de la mosca del ciervo

Francisella philomiragia

Afecta a animales y humano

Agua salada

Pacientes inmunológicos

Francisella tularensis- F. tularensis subespecie tularensis (tipo A ) propia de Canadá y EEUU- F. tularensis subespecie holarctica (tipo B ) hemisferio Norte

-F. tularensis subespecie mediasiatica-F. tularensis subespecie novicida

No enfermedad en humano

Menos virulenta

• Cocobacilos pleomórficos• Pequeños (0.2 X 0.5 µm)• Gram –• Capsulados

Francisella tularensisCARACTERÍSTICAS

• Capsulados• Inmóviles, no esporulados• Aerobios estrictos (capnófilos)• Medios ricos (con cisteína)• Crecimiento lento (2-3 días)

Francisella tularensis- F. tularensis subespecie tularensis (tipo A )

- F. tularensis subespecie holarctica (tipo B ) Zonas con ríos y lluvias.

Occidental

Oriental

Características epidemiológicas y evolución de la enfermedad

� Reservorio � Zoonosis � Animales salvajes :- Conejos, liebres, ratones, topillos y otros roedeores... Aunque puede afectar a animales domésticos, aves, reptiles y crustáceos.

- Garrapatas duras ( Ixodes, Dermacentor,...) - Es muy resistente a las condiciones ambientales.

Francisella tularensisEPIDEMIOLOGÍA

- Es muy resistente a las condiciones ambientales.

� Mecanismos de transmisión :• Contacto con tejidos o líquidos de animales infectados• Ingestión de aguas contaminadas• Aerosoles (animal o laboratorio)• Picadura de artrópodo hematófago

• Garrapata• Mosca del ciervo � Chrysops• Otros artrópodos hematófagos : ácaros, jejenes, mosquitos ( y piojos)

• Forma úlcero-gladular : más frecuente Úlcera cutánea y adenopatía satélite

• Forma óculo-glandular:Conjuntivitis unilateral purulenta con adenopatías preauriculares o

P.I. � 1-21 días

Francisella tularensisCLÍNICA

Conjuntivitis unilateral purulenta con adenopatías preauriculares o cervicales

• Forma tifoidea: Fiebre, postración y signos sistémicos.

• Forma orofaríngea y gastrointestinal:Faringo-amigdalitis membranosa y adenopatías cervicales.

• Forma neumónica: Mortalidad muy elevada

• Muestras: Riesgo (guantes)• D. Directo :

– Cultivo necesidad de grupo sulfhidrilo (cisteína)• Crecimiento lento >3 días

– Identificación: con Ac específicos

Francisella tularensisDIAGNÓSTICO

– Identificación: con Ac específicos– PCR: en desarrollo

� D. serológico :– Aglutinaciones � “seroconversión” (1/160)

Porque los Ac pueden persistir muchos años– Reacciones cruzadas con Brucella

Estreptomicina (toxicidad)

Gentamicina

Francisella tularensisTRATAMIENTO

Fluorquinolona (ciprofloxacino)

• Cocobacilos gramnegativos pequeños.

• No encapsulados e inmóviles.

• Crecimiento lento.

• Exigente desde el punto de vista

Género Brucella

Fisiología y estructura

nutricional. Medios ricos.

• Aerobio estricto (CO2).

• Crecimiento lento (3-5 días � 21)

• No fermenta H. de C.

B. melitensis

B. abortus

ZOONO

Género Brucella

Especies

B. suis

B. canis

OSIS

Eritritol

Género Brucella

PatogeniaDosis infectiva 10-100 m.o.

Género Brucella

Patogenia

Patógeno intracelular del sist. reticuloendotelial

Brucelosis (Sir David Bruce)Enfermedad de Bang (Bernhard Bang)

Fiebre ondulante

Género Brucella

Manifestaciones clínicas

Fiebre de MaltaFiebre mediterránea remitenteFiebre de GibraltarFiebre de CretaFiebre de Constantinopla

Género Brucella

Manifestaciones clínicas

1-3 semanas (6 m).

Depende de la especie

B. mellitensis

B. suis

B. abortus

B. canis

Fase agudaFase aguda

- Sudoración : 90-95%, muy profusa (olor a paja húmeda)- Fiebre : 70-90% - Escalofríos : 75%- Derrames articulares : 20-60% - Digestivos : 70%

Otros síntomas generales: astenia, anorexia, malestar…Otras manifestaciones: cutáneas, SNC, CV.

Género Brucella

Manifestaciones clínicas

Fase crónica

3-6 meses

Focos persistentes de infección

No desarrollo de resistencias atb.

• Cultivo: (tiempo)– Hemocultivo.– Medulocultivo.

• Identificación:

Género Brucella

Diagnóstico directo

• Identificación:– Morfologia colonia.– Oxidasa.– Aglutinación.

• Métodos moleculares:– PCR.

• Rosa de Bengala.

• Aglutinación.

Género Brucella

Diagnóstico indirecto

• Aglutinación.

• Test de Coombs.

• ELISA: IgG, IgA, IgM.

Género Brucella

Tratamiento

• Doxiciclina (bacteriostático)• Doxiciclina + Rifampicina (OMS)

niños < 8 años / embarazadasniños < 8 años / embarazadas• Trimetoprim-sulfametoxazol + rifampicina

• Medidas de prevención en animales– Detección y sacrificio infectados– Vacunación en sanos

• Higienización de leche y derivados

Género Brucella

Prevención

• Educación sanitaria y Med. Prev. Ganadería

Laboratorios