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机能实验学

辽宁医学院基础医学实验教学中心

JI NENG SHI YAN XUE

目录

一

二

四

三

基本操作

基础性实验

综合性实验

创新性实验

基本操作

1蟾蜍基本操作

2小鼠基本操作

3豚鼠基本操作

4家兔基本操作

蟾蜍基本操作

⑴ 破坏蟾蜍的脑和脊髓

蟾蜍基本操作

⑵ 剪除蟾蜍躯干上部和内脏

蟾蜍基本操作

⑶ 坐骨神经干标本制备

蟾蜍基本操作

⑷ 坐骨神经-腓肠肌标本制备

蟾蜍基本操作

⑸ 暴露蟾蜍心脏

蟾蜍基本操作

⑹ 蛙心插管

小鼠基本操作

⑴ 小鼠捉拿

⑵ 小鼠灌胃

⑶ 小鼠腹腔注射

⑷ 小鼠皮下注射

小鼠基本操作

⑸ 小鼠的处死

豚鼠基本操作

⑴ 豚鼠捉拿

⑵ 豚鼠灌胃

⑶ 豚鼠腹腔注射

⑷ 豚鼠皮下注射

家兔基本操作

⑴ 家兔的捉拿与称重

家兔基本操作

⑵ 家兔耳缘静脉注射

家兔基本操作

⑶ 家兔固定

家兔基本操作

⑷ 家兔颈静脉插管

家兔基本操作

⑸ 家兔颈总动脉插管

家兔基本操作

⑹ 家兔气管插管

家兔基本操作

⑺ 家兔膀胱插管

家兔基本操作

⑻ 家兔尿道插管

基础性实验

1刺激强度与频率对肌肉收缩的影响

实验一

【实验目的】

观察刺激强度与频率对肌肉收缩的影响

【实验对象】

实验一

【实验器材和药品】BL-420E+生物机能实验系统

蛙类手术器械、肌张力换能器

刺激输出线、刺激电极、肌夹

万能支台、双凹夹、任氏液

实验一

【实验步骤】一、制备标本

去除坐骨神经、带有一段股骨的腓肠肌标本，放入任氏液中浸泡10～15分钟。

二、连接实验装置

三、实验观察 启动

实验一

刺激

实验一

【实验步骤】1. 观察刺激强度对肌肉收缩的影响⑴ 选择实验标记项

⑵ 启动实验，观察肌肉收缩曲线，并做相应的实验标记

⑶ 保存实验结果

实验一

【实验步骤】2. 观察刺激频率对肌肉收缩的影响⑴ 选择实验标记项

⑵ 启动实验，观察肌肉收缩曲线，并做相应的实验标记

⑶ 保存实验结果

实验一

【注意事项】1. 勿损伤腓肠肌2. 标本与张力换能器之间的连线应垂直,

且要松紧适度3. 刺激电极应与标本接触良好4. 保持标本湿润5. 实验过程中要及时做好实验标记

实验一

【实验结果】1. 汇报刺激强度对肌肉收缩的影响

2. 汇报刺激频率对肌肉收缩的影响

【实验讨论】为什么在一定范围内，增加刺激强度，

肌肉收缩幅度也增加？

基础性实验

2坐骨神经干动作电位的观察

实验二

【实验目的】

1. 观察坐骨神经干动作电位的基本波形

( 双相或单相波 )

2. 测定动作电位的传导速度

3. 测定绝对不应期

实验二

【实验对象】

【实验器材和药品】BL-420E生物机能实验系统蛙类手术器械, 神经屏蔽盒导线、任氏液, 棉球等

实验二

【实验步骤】一、制备坐骨神经标本

坐骨神经干应尽可能长，剪去分支，放入任氏液中浸泡10～15分钟。

二、连接实验装置

三、实验观察 启动

实验二

刺激

刺激+ 刺激- C1 C3C2 C4

注意: 1. 用棉球蘸任氏液擦拭电极。2. 神经平搭在电极上,要有方向性

← 距离→

实验二

【实验步骤】1. 观察N干双相AP ⑴ 启动实验，观察动作电位曲线，并做

相应的实验标记

⑵ 找出阈刺激和最大刺激值

⑶ 保存实验结果

实验二

【实验步骤】2. 测定神经干兴奋的传导速度

3. 测定绝对不应期

4. 观察单相动作电位

实验二

【实验结果】1. 报告双相AP波形，测出阈刺激和最大刺激2. 报告神经兴奋的传导速度和不应期

【实验讨论】N干AP为什么不是“全或无”的，而是

在一定范围内随刺激强度增加而增大？

基础性实验

3人体循环系统实验

实验三

【实验目的】

1. 学习测定动脉血压的原理和方法

2. 测定人体肱动脉的收缩压与舒张压

3. 观察运动对人体血压的影响

实验三

【实验对象】 人

【实验器材和药品】水银式检压计听诊器计算机

实验三

【实验步骤】

一、熟悉血压计构造

二、测定动脉血压

三、观察运动对血压的影响四、整理与分析结果

实验三

【注意事项】1. 室内要保持安静，以利于听诊。2. 袖带不要绕得过紧或过松。3. 上臂应与右房同高；听诊器胸件放在肱动脉

的位置上不能接触过紧或过松。4. 如血压超过正常范围，让受试者休息10分

钟后再作测量。5. 使用结束后应关上血压计开关。

实验三

【实验结果】运动对动脉血压的影响 班级____；性别____

运动前 运动后即刻 运动后5分钟

收缩压(mmHg)

舒张压(mmHg)

心率(次/分)

收缩压(mmHg)

舒张压(mmHg)

心率(次/分)

收缩压(mmHg)

舒张压(mmHg)

心率(次/分)

均值

标准差

P值

实验三

【实验讨论】

运动前后血压有何变化？其机制如何？

基础性实验

4镇痛药物的筛选

实验四

【实验目的】

掌握筛选镇痛药常规的实验方法，学会基本的实验设计、科研统计和科研论文的书写方法。

实验四

【实验对象】 小鼠

【实验器材和药品】恒温水浴箱、PE溶液、0.1%吗啡溶液、0.6%醋酸溶液、0.1%杜冷丁溶液

实验四

【实验步骤】一、扭体法观察PE的镇痛作用

空白对照组2只 生理盐水阳性对照组2只 0.1% 吗啡实验组 2只 0.1% PE

1. 取6只小鼠随机分3组，称重后腹腔注射相应溶液

实验四

【实验步骤】一、扭体法观察PE的镇痛作用

2. 注射药物20分钟后，腹腔注射0.6% 醋酸溶液0.2ml/只，记录15分钟内各组小鼠扭体次数

实验四

【实验步骤】二、热板法观察PE的镇痛作用1. 使恒温水浴保持在55度，

水面触及热板2. 取小鼠数只，分别放在

热板上，以烧杯扣住并记录时间。凡30秒内不舔后爪者弃之不用

实验四

【实验步骤】二、热板法观察PE的镇痛作用3. 将筛选后的6只小鼠称重，标记空白组、

对照组、和实验组（每组2只），并重复测定每只小鼠的痛阈值，作为该鼠给药前的痛阈值。

实验四

【实验步骤】二、热板法观察PE的镇痛作用4. 腹腔注射药品

空白组 生理盐水 0.1ml/10g 对照组 0.1%吗啡溶液 0.1ml/10g实验组 0.1%PE溶液 0.1ml/10g

实验四

【实验步骤】二、热板法观察PE的镇痛作用5. 给药后15分，30 分，60分各测小白鼠

痛阈一次。

(若放入热板60秒仍无反应，应将小白鼠取出，以免把爪烫伤，痛阈按60秒计算 )

实验四

【注意事项】1. 醋酸需现用现配2. 腹腔注射的位置靠近上腹部3. 小鼠体重轻，扭体出现率低4. 小鼠选用雌性5. 以舔后爪动作为考察结果，舔前爪和其

它部位不记录

实验四

【实验结果】1. 将全班实验结果列表，用t检验判定实验组

与对照组镇痛作用是否有显著性差异

2. 根据全班各组实验结果,将不同时间的痛阈提高百分率做图.横坐标代表时间，纵坐标代表痛阈提高百分率,画出曲线,借以比较各药的镇痛程度、作用开始时间及维持时间

实验四

【实验讨论】

1. PE是否有镇痛作用？ 其机制如何？2. 比较PE与吗啡的镇痛作用

综合性实验

1家兔动脉血压的调节与失血性休克

实验一

【实验目的】1. 学习直接测量家兔动脉血压的方法，观察神经

与体液因素对动脉血压的调节作用

2. 通过动脉放血复制家兔失血性休克模型，观察休克动物发生发展过程中Bp、CVP、R、尿量、血气、微循环变化，并分析其发生机制

3. 根据休克理论，独立设计抢救治疗方案，理解休克防治原则及药物的药理作用

实验一

【实验对象】

实验一

【实验器材】BL-420E+生物机能实验系统哺乳类手术器械、血压换能器动脉插管、动脉夹、三通管注射器( lml、5ml、20ml )静脉插管、导尿管、 输液装置CVP测量装置，量筒

实验一

【实验药品】20 % 氨基甲酸乙酯（乌拉坦）0.5% 肝素、0.01% NE、0.01% Ach、0.01% E家兔原血、5% NaHCO3山莨菪碱（654-2）生理盐水

实验一

【实验步骤】一、家兔麻醉与固定

耳缘静脉缓慢注入20%乌拉坦（5ml/kg）

二、家兔颈部手术1. 颈部正中切口，分离气管并行气管插管术2. 分离左侧颈总动脉，穿双线备用

实验一

【实验步骤】二、家兔颈部手术3. 分离右侧颈总动脉、颈外静脉、迷走神经、

和减压神经，分别穿线备用

4. 全身肝素化：耳缘静脉注射0.5%肝素抗凝

5. 左颈总动脉插管，并与仪器相连

6. 颈外静脉插管（抢救输液，观测CVP）

实验一

【实验步骤】三、家兔腹部手术1. 下腹部耻骨联合上作正中切口2. 暴露膀胱并行膀胱插管3. 导尿, 量筒记录尿量（滴/分）

四、观察项目

实验一

【实验步骤】1. 观察家兔动脉血压的调节

顺序 观察项目 血压变化1 正常血压曲线

2 夹闭右侧颈总动脉15秒

3 牵拉左侧颈总动脉残端(头侧端)4 刺激右侧完整减压神经

实验一

【实验步骤】1. 观察家兔动脉血压的调节

顺序 观察项目 血压变化

5 耳缘静脉注射 E ( Ad ) 0.3ml

6 耳缘静脉注射 NE 0.3ml

7 耳缘静脉注射 Ach 0.3ml

实验一

【实验步骤】2. 家兔急性失血性休克⑴ 观察正常情况CVP、Bp、R、尿量、

血气指标 、MC⑵ 颈总动脉放血复制休克模型，观察 BP、

CVP、R、尿量、血气指标及MC变化。等待期间设计合理有效的抢救方案

实验一

【实验步骤】3. 家兔急性失血性休克的抢救⑴ 抢救备选药品及用量

扩 容： 原血，NS (15ml/kg) 或与失血量等量缩血管： NE 0.5mg/kg 溶于25 ml NS，5 min静滴扩血管： 654-2 1mg/kg 溶于25 ml NS，20 min静滴NaHCO3=∣ BE∣×体重(kg) / 2

⑵ 抢救后20 min，重复测量以上指标

实验一

【注意事项】1. 静脉插管一经插入，立刻缓慢滴注NS，防凝血2. 输液量不能过多，以免导致肺水肿。3. 保持插管与血管平行，以免刺破血管。4. 减少手术出血，如手术过程失血过多可先V输液5. 膀胱插管勿扭曲 ，如导管通畅但无尿，少量快

速输液6. 先停止输液，再进行失血性实验

实验一

【实验结果】

实验一

【实验结果】

实验一

【实验讨论】1. 动脉血压调节的神经体液机制

2. 失血性休克中各项指标变化机理

3. 根据自己的方案，分析失血性休克的治疗及机理

综合性实验

2家兔呼吸运动的调节与急性呼吸衰竭

实验二

【实验目的】1. 学习呼吸运动的实验记录方法，观察多种因素

对呼吸运动的调节，并探讨其机制。

2. 学习家兔急性呼吸衰竭模型的复制方法，观察家兔呼吸衰竭时呼吸运动及血气指标的变化，并分析其机制

实验二

【实验对象】

实验二

【实验器材】BL-420E+生物信号采集处理系统、兔手术台、气管插管、呼吸换能器、万能支架台、哺乳类手术器械、输液装置、静脉插管、注射器、50cm长胶管一条

实验二

【实验药品】

20%氨基甲酸乙酯(乌拉坦)3%乳酸溶液、CO2、N2

生理盐水、0.1%肾上腺素

实验二

【实验步骤】一、家兔麻醉与固定

耳缘静脉缓慢注入20%乌拉坦（5ml/kg）

二、家兔颈部手术1. 颈部正中切口2. 分离一侧颈外静脉，穿双线备用

实验二

【实验步骤】二、家兔颈部手术3. 分离气管并进行气管插管，与通道１-呼吸

换能器相连，描记呼吸曲线。

4. 颈外静脉插管，缓慢输液（5~10 滴/分）

三、观察项目

实验二

【实验步骤】1. 观察家兔呼吸运动的调节

顺序 观察项目 呼吸变化1 正常呼吸运动

2 吸入CO2

3 吸入N2

4 增大无效腔

5 静脉注射3%乳酸 2ml

实验二

【实验步骤】1. 观察家兔呼吸运动的调节

顺序 观察项目 呼吸变化

6 剪断一侧迷走神经

7 剪断另一侧迷走神经

8 电刺激迷走神经中枢端

实验二

【实验步骤】2. 家兔急性呼吸衰竭⑴ 复制肺水肿模型

快速输注大量生理盐水（100ml/kg，180~200滴/ min）。待滴注接近完毕，向灌流杯加入肾上腺素（0.5mg/kg）继续滴注，然后仍以生理盐水（10~15滴/分）维持通路，以便必要时重复给药。

实验二

【实验步骤】2. 家兔急性呼吸衰竭⑵ 连续观察家兔一般表现及肺的形态变化

• 呼吸变化（加药后，呼吸曲线的频率和幅度）• 听诊湿啰音（肺底，肩胛角）• 观察紫绀（耳朵，口唇）• 气管插口侧口是否有液体流出

实验二

【实验步骤】2. 家兔急性呼吸衰竭⑵ 连续观察家兔一般表现及肺的形态变化

肺水肿出现，止血钳夹闭气管，结扎，处死，粗剪刀剪开胸腔，取肺称重。计算肺系数＝肺重量(g) / 体重 (kg)， 正常值4～5

肉眼观察肺改变

实验二

【注意事项】1. 气管插管时，一定要将气管内的血液与分泌物

清理干净以后方能插管。2. 观察过程中，气管插管的侧管口径应保持一致3. 每项观察，都应在上项实验结果恢复正常以后

进行。4. 取肺时，防止肺组织破裂和水肿液流出，否则

影响肺系数的准确性。

实验二

【实验结果】

呼吸变化 湿啰 紫绀 肺系数 肺病理变化

实验前

快输生理盐水

慢输肾上腺素

补输生理盐水

实验二

【实验讨论】1. 实验过程中家兔呼吸分别有何变化？原因？

2. 什么是紫绀及湿罗音？

3. 本实验肺水肿致急性呼吸衰竭的发生机制有哪些？

创新性实验

1丹参酮对心肌缺血及再灌注损伤的保护作用

实验一

【实验目的】1. 掌握研究心肌缺血及再灌注损伤最基本的实验

方法。

2. 学会抗心肌缺血及再灌注损伤药物研究基本实验设计

3. 确定丹参对心肌缺血及再灌注损伤的保护作用

实验一

【实验对象】

健康成年雄性 Sprage-Dawley 大鼠，体重200～300 g

实验一

【实验器材】BL-420E+生物信号采集处理系统、小动物呼吸机、大鼠手术台、手术器械、自制大鼠气管插管、18号缝合圆针、4-0无损伤缝合针、1号医用缝合线、乳胶管、注射器

实验一

【实验药品】

0.5% 戊巴比妥钠溶液、氯化三苯基四氮唑（TTC）、心肌酶谱试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）测试盒、丙二醛（MDA）测试盒

实验一

【实验步骤】一、实验分组及给药1. 将SD大鼠随机分为5组：

① 假手术组② 缺血再灌注模型对照组③ 缺血再灌注+丹参酮（5 mg/kg）组④ 缺血再灌注+丹参酮（10 mg/kg) 组⑤ 缺血再灌注+丹参酮（20 mg/kg) 组

实验一

【实验步骤】

2. 假手术组和模型组给予等容量生理盐水，丹参酮各剂量组给予相应药物，均为灌胃给药，喂养3d，末次给药2 h 后进行手术。

一、实验分组及给药

实验一

【实验步骤】二、心肌缺血再灌注模型制备三、检测指标1. 记录Ⅱ导联心电图，观察S-T段改变，

并对大鼠心律失常进行评分。2. 丹参酮对大鼠缺血再灌注心肌梗死范围

的影响

实验一

【实验步骤】三、检测指标

3. 丹参酮对大鼠缺血再灌注血清 LDH、AST 和 CK-MB 的影响

4. 丹参酮对大鼠缺血再灌注血清 SOD 活性和 MDA 含量的影响

实验一

【注意事项】1. 本实验为创新性实验，可根据预实验结果

摸索丹参酮的有效剂量及量效关系。2. 可根据具体实验条件确定实验观察指标。3. 心肌缺血及再灌注时间可根据实验结果确定。

The End

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