Present final histology

Hiroshi Kawachi – Fujio Shimizu

COMPOSICIÓN MOLECULAR Y FUNCIÓN DEL

DIAFRAGMA DE HENDIDURA: NEFRINA, LA

MOLECULA RESPONSABLE DE LA

PROTEINURIA

Alguno estudios, muestran que la hendidura diafragmática

es la estructura responsable de ser barrera de retención

de proteínas en la pared glomérulo capilar; en conjunto de

componentes como la nefrina, ZO-1 p cadherina y FAT

que hacen parte de la misma.

Zo-1: identificado como componente de las zonas de oclusión.

Localizado en la superficie citoplasmática de la hendidura

diafragmática como punto de inserción de la nefrina

Nefrina: fue identificada como un gen producto de la mutación en el

síndrome nefrótico congénito (el bebe presenta proteínas en la orina)

mAb 516: induce una masiva proteinuria.

INTRODUCCIÓN.

• El capilar glomerular es altamente permeable al agua, pequeñas moléculas de

soluto y iones… pero sirve también para excluir la proteínas de la orina.

• Células endoteliales glomerulares

• Células de la membrana basal glomerular

• Células del epitelio glomerular (podocitos).

La unión entre los pies de los podocitos, que es el poro de hendidura, están

unidos por una pequeña membrana llamada hendidura diafragmática.

• El anticuerpo monoclonal anti hendidura diafragmática, producía una gran cantidad de

proteinuria en ratas.

• Síndrome nefrótico congénito de tipo terminal, es causado por la mutación de un gen que

se encarga de la producción de la nefrina que es un componente de la hendidura

diafragmática.

¿DONDE ESTA LA PRINCIPAL BARRERA DE

FILTRACIÓN?... EN LA MEMBRANA BASAL

GLOMERULAR, O EN HENDIDURA DIAGRAMÁTICA.

• Albumina.

• Selectividad por carga y por tamaño.

• Las células del endotelio fenestrado están cargadas negativamente. (podocaxilina)

Membrana basal glomerular es la membrana principal o

critica

Mbg solo es un pre filtrador , y la membrana critica

yace es en la hendidura diagramática.

¿ES LA MEMBRANA BASAL GLOMERULAR LA

BARRERA PRINCIPAL?

• Lamina densa

• Lamina rara: interna y externa

• Colagena tipo 4, laminina, fibronectina, nidogeno, entactina

• Síndrome de Alport ( ausencia de cadenas α3 y α4 de colagena IV)

Está es la principal estructura a cargo de mantener la selectividad del glomérulo, sin

embargo, este no es una barrera perfecta para detener la proteínas del plasma.

¿ES EL DIAFRAGMA DE HENDIDURA IMPORTANTE

COMO BARRERA? 25-60 nm

• Karnovsk y Graham en 1966 con algunos estudios demostraron que

el diafragma de hendidura juega un papel importante: En el mantenimiento de la función de la barrera de la Pared capilar glomerular (PEROXIDAZA y MIELOPEROXIDAZA)

• Concluyen que el diafragma de hendidura es la primera filtración

● Subestructura de cremallera , puentes cruzados, membranas

plasmáticas de los podocitos, al filamento central.

● Los podocitos: dotados en carga negativa, capa de poli aniones

epiteliales. Como acido sillico-rica. Una proteína de 140 kD,

podocalyxin.

BIOGÉNESIS

• Epitelio columna indiferenciado célula epitelial glomerular

Vesícula cumulo de caulas que forma luz en el centro

Etapas Cuerpo en forma de s

Desarrollo bucle capilar vesícula se invade de mesénquima en S

Maduración

Desarrollo del bucle capilar

Aumentan las interdigitaciones del

epitelio Epitelio glomerular Túbulo proximal

El mesénquima

• Inicialmente la membrana celular entre células adjuntas esta

cerrada, solo adosada por interdigitaciones y zona de oclusión

• Espacio intercelular: esta cubierto por un diafragma de hendidura

Podocito inmaduro: Podocito maduro

Tiene zona de oclusión y su estructura desparece

Estructura de escalera y se remplaza por el

diafragma de hendidura

El diafragma de la hendidura es formado en situ a partir de los componentes

basolaterales de la membrana plasmática de podocitos y los complejos de unión.

NEFRINA UN COMPONENTE CLAVE EN EL DIAFRAGMA DE

HENDIDURA

Gen NPHS1 NEFRINASuperficie del Podocito

Diafragma de hendidura

Poro de la hendidura

Ruotsalainen

Usando un anticuerpo especifico

para el sitio extracelular de la

Nefrina humanaProteína muy conservada

Importante rol en el

mantenimientoRegula el diámetro de

Los poros.

ESTRUCTURA DE LA NEFRINA

Proteína transmembranal de 1241 residuos y de la superfamilia de inmunoglobulinas.

Contiene ocho Ig tipo C2 como moduladores, una fibronectina tipo III como modulador ,

diez sitios de N-glicosilación en dominio extracelular.

Dominio citosólico contiene: 9 tirosinas

La Nefrina en ratones es 82% idéntica en la secuencia de aminoácidos (Holthofer)

NEFRINA

Receptor de adhesión y

una proteína de señal.Probablemente sea

DOMINIO EXTRACELULAR

DOMINIO INTRACELULAR Función crucial

Perdida o mutación de 132 de

155 residuos de este dominio Síndrome nefrótico congénito

Afinidad con la

proteína asociada a CD2 (CD2AP)

Interactúa con el dominio citoplasmático

de CD2 (proteína de membrana en células

T o natural Killer) que facilita adhesión con

el antígeno.

ANTI-NEFRINA MAB 5-1-6

1988 Orikasa establece que la mAb 5-1-6 causa proteinuria masiva.

Inmunohistoquimica demuestra que mAb 5-1-6 reconoce antígeno en el diafragma de

hendidura.

mAb 5-1-6 reconoce dominio extracelular de la nefrina.

Bajo mAb 5-1-6 no se observan cambios estructurales mayores.

Proteinuria tras inyección de mAb 5-1-6

• Se localiza en el diafragma de hendidura

• Constituyen una familia de glicoproteínas que

participan en la formación de uniones adherentes

entre 2 pedicelos adyacentes

• Zo-1 esta ubicada en la cara citoplasmática y

participa en la formación de zonas de oclusión.

P- CADHERINA

ASPECTOS CLÍNICOS DE LA DISFUNCIÓN DEL DIAFRAGMA DE

HENDIDURA

• ¿La disfunción del diafragma de hendidura causante de las proteinuria ?

• Enfermedades como la del síndrome de Alport, alteraciones GMB, contribuye a la proteinuria.

• Podocitos en la orina refleja la magnitud de la proteinuria Estos hallazgos sugieren que la disfunción

proteinuria podocitos. está implicado en el desarrollo de la glomerulonefritis proliferativa mesangial

CONCLUSIÓN• Estudios recientes han demostrado claramente que el diafragma de hendidura es la estructura más

importante como la barrera en el encantamiento-glomerular pared capilar.

• Nefrina, ZO-1, P-cadherina y FAT son componentes de la diafragma de ranura.

• ZO-1 se localiza en la superficie citoplásmica sólo en la inserción del diafragma de ranura, mientras

que la nefrina se encuentra en los folletos exteriores de las membranas plasmáticas.

GRACIAS.