Polfosfazenlerin aşı formulasyonunda kullanımı

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

8Kontrollü etken

madde salınımında kullanılan polimerler

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Ankara Üniversitesi Eczacılık Fakültesi Farmasötik Teknoloji Anabilimdalı

Ecz. Sema Arısoy

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

8

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

7

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

6

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

5

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

4

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

3

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Aşılama• Enfeksiyon hastalıklarından korunmak için

kullanılan en ucuz biyomedikal yöntem aşıdır. Canlı ve cansız aşılar olarak ikiye ayrılır her birinin avantajları ve dezavantajları vardır.

• Adjuvanlar antijenle birlikte inokule edildiğinde immün yanıtı arttıran maddelerdir.Cansız aşıların etkinliğini artırmada kullanılırlar.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

AdjuvanMekanizmaya göre sınıflandırma;

1.Hedefleme sistemleriEtki mekanizmasının depo sistem

oluşturması veya antijen tanıyan hücreler(APC) hederlendirme şeklindedir.

Doku hasarı yapması nedeni ile güvenilirliği düşüktür.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

2.İmmunostimulanlar• Doku hasarı yapmazlar.• İmmun sistem hücreleri üzerinde çeşitli

bakteriyel DNA motiflerini tanıyan hücreler vardır. Bu motiflere benzeyen ve mikrobiyal etkinliği olmayan bileşiklerinde aynı aktiviteyi göstereceği fikri ile ortaya çıkmışlardır.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Polifosfazenler

Omurgasında fosforabağlı organik gruplar ve azot içeren sentetik bir polimerdir. Ucuzdur ve yapısındaki iyonik kısımlar sayesinde oluşturulan tuzları suda çözünebilir. Biyoparçalanırdır.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Sıcakta benzen yada toluende çözünürler. Klor atomları yerine değişik grupların(alkol ve fenollerin tuzları gibi organik nukleofiller, aminler) bağlanması ile çeşitli polifosfazenler üretilmektedir. Değişik yöntemlerle de üretilebilmektedir. (Termal zincir açılmalı katyonik polimerizasyon)

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Poli(dikarboksifenoksi)fosfazen PCPP Poli(dikarboksietilfenoksi)fosfazen PCEP sodyum tuzları

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Immun yanıtı başlatması, etkinliği ve süresi

• İnfluenza antijeni ile fareler üzerinde yapılan subkutan immunizasyon çalışmasında PCPP ve PCEP 2 hafta içerisinde immun yanıtın oluşmasını sağlamışlardır. HBsAg ile yapılan çalışmadada altın standart olan Alum(alimınyun hidroksi)’a göre PCEP 1000 kat daha fazla etkili olmuştur. 6 ay etkinliği sürmüştür.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

İmmun yanıtın tipi• PCEP’nin PCPP ye göre daha belirgin ve

uzatılmış immun yanıt oluşturduğu araştırmalarca kanıtlanmıştır.

• PCPP IgG1(ekstraseluler patojenlere yanıt- Th2 )

• PCEPP IgG1 ve IgG2a( intraseluler patojenlere yanıt- Th2, Th1)

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Antijenin daha az kulanılması• İnfluenza X:31 antijeni ve PCEP’nin

adjuvan olarak verildiği çalışmalarda antijen dozunu 25 kat azaltabildiği görülmüştür.

• Bu da maliyeti azaltacağı için önemlidir.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Mukozal adjuvan olarak PCPP• İnfektiflerin %90’ın vucuda gastrointertinal,

solunum ve genito-ürenal boşuklardan vucuda girmektedir.Bu boşluklardan uygulamanın daha iyi aşılama sağlanacağını düşündürmektedir.

• İnfluenza X:31 antijeni ile PCPP nazal mukozaya uygulanmıştır.İstenen etkinliği 2 haftaya kadar sürecek şekilde göstermiştir.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Büyük hayvanlarda aktiviteleri• Domuz serum albuminine PCPP ilave

edilmiş ve koyunlara uygulanmıştır.• Yalnız DSA uygulamasına göre immun

yanıt 100 kat artmıştır.• 10 hafta boyunca etkinliği devam etmiştir.• Domuzlarda yapılan ancak yayınlanmamış

datalar mevcuttur.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Adjuvan aktivite mekanizmaları• Depo etkisi olduğu düşünülmemekte, farklı

miktarlarda protein içeren karışımlarda farklı siddette immun yanıt oluşmamıştır.

• PCPP ve PCEP’nin farklı tipte immun yanıt oluşturmaları, etkinliklerinin hücresel veya moleküler olduğunu düşündürmektedir.

• Uygulandıklarında farklı proinflamasyon sitkoninlerinin uyarıldığı görülmüştür.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Güvenliği• PCPP 500 µg’ a kadar dozu influenza aşısı

ile birlikte, control grubu olarak da tek başına influenza aşısı verilerek yaşlı ve gençlerde faz 1 çalışması yapılmıştır. Ciddi advers reaksiyon görülmemiştir.

• PCPP HIV aşısının klinik araştırmasında büyük hayvanlarda 1 mg dozlara kadar kullanılmıştır ve advers etki ve enjeksiyon bölgesinde reaksiyon görülmemeiştir.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

CpG DNA dizilimi• Bir çok aşı ile birlikte adjuvan olarak

verilmektedir.• Th1 yanıt oluşturmaktadır.• Büyük hayvanlarda etkinliği uzun

sürmemektedir.• Bu dezavantajı formulasyon ve

hedeflendirme ile giderilmektedir.• Polifosfazenlerle çalışılmıştır.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Doğuştan bağışıklılık• 18 günlük embriyo tavuk yumurtalarına

CpG uygulanmıştır. Kontrol grubuna hiçbir şey yapılmamış, bir gruba subkutan E.coli uygulanmıştır.

CpG, etkiliCpG, polifosfazen(PCPP/PCEP), etkiliLiposom, ölümSu içinde yağ emilsiyonu, ölüm

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Sonradan bağışıklanma• Hepatit B yüzey antijeni(HBsAg) Th1 yanıt

ile aşılanma sağlar.• CpG ile birlikte PCEP veya PCPP

kullanıldığında tek başlarına kullanıldıklarında oluşturduklarından daha güçlü cevap oluşturmuşlardır(Th1 ve Th2 de).

• Bu da formulasyon için fikir vermektedir.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Mikropartiküler sistemlerle aşı• Antijeni pH, proteazlar gibi dış faktörlerden

korunur.• Multifonksiyonel aşılar oluşturulabilir.• Yavaş ve uzun süreli salım yapılabilir.• Mucozal yüzeylerden geçiş sağlanabilir.• Nişasta, PLG, kitozan, aljinat kullanılmıştır.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

• Nazal ve parenteral aşı uygulanmasında mikropartiküler sistemlerin olumlu etkileri olduğu görülmüştür.

• Posfazenler suda çözündükleri için mikropartikül hazırlama sırasında organik solvan kullanımının doğuracağı inaktivasyon durumu ortadan kalkacaktır.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Polifosfazen mikropartikülleri• PCPP NaCl ile basit bir koaservasyon

yöntem ile mikropartikül oluşturmaktadırlar. CaCl2 ile çapraz bağlanır.

• Tetanoz toksoidi böylece enkapsüle edilmiştir. İn vivo aluma oranla daha etkili olmuştur.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

• Spermin gibi organik asitler kullanılarak iyonik compleksiyon yöntemi ile de hazırlanmıştır.

Daha yavaş salım, hızlı üretim. Daha fazla polifosfazen türünde

uygulanabilir. Isı ve organik solvan yok. Kontrol edilebilir partikül büyüklüğü.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

• 10 µm’den küçük partiküllerin daha iyi adjuvan aktivitesi olduğu anlaşılmıştır, ancak sebebi bilinmemektedir.

• Mikropartikül oluşturma ile ilgili yeni bir amaçta annenin bebeğe geçen antikorlarının yeni doğanın aşılarını pasifize etmesini engellemektir. Posfoazenlerin aşı içeriğini koruması gözlenmiştir.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

PTd: pertussis toksini

PspA: Pünomocal yüzey proteini

PR8 influenza virüsi

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Actinobacillus pleuropneumoniae yüzey antijeni; OmLA…Emulsigen su içinde yağ emilsuyonu adjuvan olarak kullanılıyor direk karıştırma yeterli.7 hayvanda subkutan enjeksiyon.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

sonuç• Daha ucuz ve daha

etkin aşılanma polyposfazenlerin hem partiküler sistemleri hem direk uygulama yöntemi ile sağlanabileceği görülmüştür.

• Çalışmaların daha çok fareler üzerinde yapılması ancak insan ve büyük hayvanların daha farklı cevap vereceği bilinmektedir. Bunun için çalımalar yapılmalıdır.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

sonuç• Kimyasal bağları değiştirilerek daha güçlü

etkinlik oluşturacak türevleri geliştirilebilir.• Aşı imalatı ile ilgilenen endüstrinin bu

yenilikleri göz önünde bulundurması ve geliştirme çalışmalarına katkıda bulunması gerekmektedir.

• Adjuvanlar tek başlarına aşılanmada kullanılabilir

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Kaynaklar• The Potential of Polyphosphazenes for Delivery of Vaccine Antigens and

Immunotherapeutic Agents Nelson F. Eng1, Srinivas Garlapati1, Volker Gerdts1, Andrew Potter1, Lorne A. Babiuk2 and George K. Mutwiri1,

• Administration of poly[di(sodium carboxylatoethylphenoxy)]phosphazene (PCEP) as adjuvant activated mixed Th1/Th2 immune responses in pigs Arshud Dara, , ∗Ken Lai a, Donna Denta, Andrew Pottera, Volker Gerdtsa, Lorne A. Babiukb, George K. Mutwiria.

• Efficacy of poly[di(sodium carboxylatophenoxy)phosphazene] (PCPP) as mucosal adjuvant to induce protective immunity against respiratory pathogens Doo-Hee Shima, Hyun-Jeong Koa, Gerdts Volkerb, Andrew A. Potterb, George Mutwirib, Lorne A. Babiukc, Mi-Na Kweona.

• B iodegradable polyphosphazenes for drug delivery applications S. Lakshmia, D.S. Kattia, C.T. Laurencina,b .

• Polyphosphazenes: Multifunctional, Biodegradable Vehicles for Drug and Gene Delivery Ian Teasdale* and Oliver Brüggemann Institute of Polymer Chemistry, Johannes Kepler University, 4060, Leonding, Austria.

>> 0 >> 1 >> 2 >> 3 >> 4 >>

Teşekkür ederim