أ.أمل الغامدي 1

: الثاني المعملالجزيئية« األحياء مختبر في القياس »طرق

« الجزيئية األحياء «مقررحدق 251

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 2

: المستخدمة: الوحدات أوال

Prefix- العلمية الصيغة Decimal equivalents Example Units

Kilo- (K) = 103 m =1000 m Kilogram(Kgm) or liter(L)

Milli-(m) =10 -3 m =0.001 m Milligram (mg) or Milliletre (mL)

Micro- (μ) =10-6 m =0.0000001 m Microgram(μg) or Microliter (μL)

Nano- (n) =10-9 m =0.0000000001 m Nanogram(ng) or Nanoliter (nL)

Pico- (p) =10-12 m =0.0000000000001 m Picogram (pg) or Picolitre (pL) or picomole (pm)

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 3

البكتيريه؟؟؟؟؟؟ الخاليا حجم هو ما

ميكرونات 28/02/2011بضعة

أ.أمل الغامدي 4

البيولوجيا: في الهامة المصطلحات 6 ثانياالجزيئية:

28/02/2011

الجزيئي- 1 :Mole(Mol)والمول Molecular weight(MW )الوزن

للجزئء المكونة العناصر لكل الذرية األوزان مجموع هو للمركب الجزيئي الوزن. المركب من الواحد

. الكيميائية للعناصر الدوري الجدول باستخدام حسابه يمكن

وزن :1مثال . 1لحساب له الكيميائية الصيغة إلى ننظر الماء من مولH2O.

أكسجين ذره وزن إليه مضافا8 الهيدروجين من ذرتين وزن يساويذرية 18.01534( = 15.9994* 1( + )1.00797* 2) كتلة Atomic forceوحدة

unit (amu).

بـ كمية الجزيئي على الجرامالوزن تحتوي مركب .1ألي المركب من مول. الجزيئي« للوزن الرقمية القيمة يساوي بالجرام »الوزن أن أي

تسمى ) البنائيه أو الجزيئية (.Formula weightالصيغة

FeSO4

: نحتاج الجزيئي الوزن لحساب - حاسبه آله للعناصرالكيميائية الدوري الجدول

1. الكيميائيه- للعناصر الدوري الجدول على الحصول2. للمركب- المكونه العناصر على التعرف

الكبريتيك حمض البنائيه sulfuric acidمثل H2SO4صيغته

وفيه المركب، في الذرات ونوع عدد وذرة 2توضح هيدروجين ذرةو .4كبريت أكسجين ذرات

3 = للهيدروجين- الذري ذرة،الوزن لكل الذري الوزن وتسجيل تحديد1.0079= الكبريت =32.6ولذرة األكسجين .15.9994ولذرة

ذرات- 4 عدد بضرب الكبريتيك لحمض الجزيئي الوزن يحسب. ذره لكل الذري الوزن في الجزيء

ذريه 49.8(= 15.9994*)4(+32.06*)1(+1.0079*)2 كتلة وحدة

أ.أمل الغامدي 628/02/2011

أ.أمل الغامدي 7

. مركب لكل القيمه تختلفبالجرام )(: molالمول ) المذابة المادة weightوزنin grams ) على الجزيئي )»مقسوم (MWالوزنللمادة.

Mole = الوزن : = × الموالت عدد بالجرام الوزن إذن

الجزيئي

الكيميائية : 2مثال او البنائية Formulaالصيغةweight هي البوتاسيوم KClلكلوريد

لـ الجزيئي KCl = 39. 1 + 35. 45 = 74.55 (amu)الوزن

28/02/2011

في جراما8 كمالمول؟

أ.أمل الغامدي 8

الجسيمات • كل تظهر حيث المركبات من متجانس خليط هو.) + ( مذاب مذيب مفرده أيونات أو كجزيئات

: مثل طرق، بعدة المحلول تركيز عن التعبير يمكن :Molarity( Mالموالرية- )1• :Molality(mالمواللية- )2•:Normality( Nالعيارية- )3•

عللي:•المقطر الماء المحاليل؟ Distilled waterيستخدم تحضير في عادة

المنظمة المحاليل استخدام اختبارات Buffersيجب جميع فيالجزيئية؟ األحياء

28/02/2011

المحلول؟ ماهو

أ.أمل الغامدي 9

هي المذاب الموالرية موالت المحلول في عدد من .لتر. / باللتر= المحلول حجم الموالت عدد الموالر

موالر= ) لتر( = / Mالوحدة مول

Molar(mol/L) =

الموالرية مثال: ذو على 1المحلول يحتوي المادة 1موالر من مول. للمحلول النهائي الحجم في المذابة

محلول البوتاسيوم 1لتحضير كلوريد من يوزن KClموالرفي 74.55 ويذاب المقطر 1جم الماء من .DDWلتر

. 74.55أي أن أي النهائي المحلول من لتر في الملح من جميكمل ثم الماء من صغير حجم في يذاب المحسوب الوزن

إلى للمحلول الكلي .1الحجم لتر إضافة عن يختلف .74.55وهذا الماء من لتر إلى جم

28/02/2011

:Molarity( M- الموالرية )2

أ.أمل الغامدي 10

: الموالرية على أمثلة

موالرية- 1 في 0.75ماهي المذاب من المذيب؟ 2.5مول من لتر

Molarity= 0.75 mol / 2.5=0.3 M

لـ- 2 الموالريه الصوديوم 40ماهي هيدروكسيد من في NaOHجم من 2المذابه لترالمذيب؟

النهائي: المحلول حجم و بالجرام الوزن المعلوم

1 . نحسب- ثم 6 أوال للمركب الجزيئي الوزن يحسب موالت إلى الجرامات نحولالمول .

للماده = الجزيئي مول /40الوزن جم

المول ) الجزيئي(= / = molإذن الوزن الجرامات / = 40جم /40عدد مول مول1جم

2. اللترات- / عدد الموالت عدد نقسم

لتر = / = مول ½ .0.5الموالرية موالر

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 11

:Molality (m)المواللية- 3المذاب هي من الموالت الواحد في عدد الكيلوجرامالمذيب .من

/ = المذيب كتلة المذابة المادة موالت عدد الموالليةبالكيلوجرام.

/ كجم= مول الوحده

الصوديوم( 1mموالل )1مثال: كلوريد محلول NaClمنمن 1يحتوي .NaClمول الماء من الواحد الكيلوجرام في

= × = الجزيئي الوزن المول بالجرام الوزن × 1أي جم 58.44= 58.44

إلى المقطر 1000يضاف الماء من .DDWمل28/02/2011

أ.أمل الغامدي 12

لألحماض عادة وتbستخدم المحلول، تركيز عن للتعبير الطرق والقواعد AcidsأهمBases.

. للمحلول الكلي الحجم إلى المذاب كمية بين للربط

الجرامية = Nالنورمالية المكافآت .nعدد باللتر / المحلول حجمتركيزه يبلغ الذي جرامي 1فالمحلول مكافيء يحوي المحلول من لتر واحد كل fأن يعني عياري

المذاب من واحد

الهيدروجين= = nحيث أيونات عدد .+Hلألحماض للحمض البنائية الصيغة في

للقواعد الهيدروكسيل = nأما أيونات .-OHعدد للقاعدة البنائية الصيغة في

) والموالرية ) والمواللية المعياريه النورمالية بين عالقة هناكالموالرية= × nالنورمالية

من 3مثال: محلول H2SO4موالر نفسه .6هو نفسه الحمض من معياري

محلول: من 1مثال نفسه Ca(OH)2موالر .2هو نفسها القاعدة من معياري

28/02/2011

Normality- العيارية )النظامية( 4(N):

أ.أمل الغامدي 13

المكافيء ) الجرام :nأو( e.qأمثلة

28/02/2011

nقيمة القاعده او الحمض

1 الهيدروكلوريك HClحمض

2 الكالسيوم Ca(OH)2هيدروكسيد

3 الفوسفوريك H3PO4حمض

3 البوريك H3BO3 حمض

1 الثلجي الخليك حمضCH3COOH

Glacial acetic acid

أ.أمل الغامدي 14

: العيارية على مثال

محلول الكالسيوم 1لتحضير هيدروكسيد من .Ca(OH)2عياريالجزيئي: = الوزن العيارية = 74.09المعلوم عياري 1وقيمة

الموالرية : = × المعيارية في nبالتعويض / المعيارية = لتر = /nالموالرية مول ½

× = × = ½ الجزيئي الوزن المول بالجرام 37.05 = 74.09الوزن. لتر / جم

على للحصول المذيب لتر الى مول ½ يضاف من 1هكذا عياريالكالسيوم Ca(OH) 2هيدروكسيد

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 15

المطلوب النهائي التركيز على للحصول تخفيفه ويجب عادة األساسي المحلول يحضرللعمل.

( تعريف: ( أقل تركيزات إلى عادة تخفيفه يتم الذي عالي تركيز له المركز المحلول هو. االختبارات في استخدامه يتم الذي العمل محلول على للحصول

بـ • عادة لها ،...n= 1،2،3و nXيرمزبنقل 5Xمثل: • ويخفف العمل؛ محلول تركيز قوة من مرات خمس من 1يماثل جزء

إلى المخزن .5المحلول النهائي المحلول من أجزاءيخلط: • مخزن 100مثال محلول من التقطير 400و 5Xمل مزدوج ماء من مل

(DDW) Double Distilled Water .محلول .1Xيعطي

محلول ؟10X solutionماهوبتركيز مخزن محلول .10هو العمل محلول من أعلى مرات

محلول مخزن 1Xلعمل محلول مرات 10Xمن لعشر التخفيف يتم ،10-fold dilution.محلول: مخزن 1X (TE) Tris-EDTA (Ethylene-diamine tetra-acetic acid)مثال محلول من

10X TE نهائي 100يساوي حجم في يخفف األخير من .1مل الماء لترمن

28/02/2011

والتخفيفات المحاليل Solutions and Dilutions

:Stock Solutions- المحلول األساس أو المحاليل المخزنة 5

أ.أمل الغامدي 16

األساس المحلول على تتم التي الحسابية العملياتStock Solution

: المختلفة المحددات التالية المعادلة تصفC1*V1 = C2*V2

= : حيث

C1 ) موالر: ) التخفيف قبل األساسي المحلول تركيزV1 :بالملل األساسي المحلول حجمC2 ) موالر: ) التخفيف بعد النهائي المحلول تركيزV2 :بالملل النهائي المحلول حجم

األساسي المحلول حجم يكون إلى ) V1عادة للوصول المطلوبالماء بإضافة محدد نهائي نعوض( DDWتركيز لذلك المجهول هو

: التالية بالمعادلة

V1= [V2 X C2]/C1

أ.أمل الغامدي 18

الوحدة • توحيد من بد ال المحاليل تحضير عندفي : والتركيز والوزن الحجم من لكل المستخدمه

. المعادلة نفس•: التاليه: الصورة في المعادلة كتابة الخطأ من مثال

V1(160 *)مللC1(160 =) لتر/ (*V1ملجم ((3المطلوب) C2المجهول) لتر/ جم

: الصحيحة الصورة V1(160 *)مللC1(160 × ملل/ (= 1000ملجم

V1*) × 1000جم× 3المطلوب) C2المجهول) ((1000لتر/

28/02/2011

المحلول من التخفيفات تحضيراألساس

Making Dilutions from Stock solution:

أ.أمل الغامدي 19

والتركيز والوزن الحجم وحدات توحيدالمحاليل في

28/02/2011

التركيز الوزن الحجم

مل/ جمgm/mL

جم مل

لتر/ جمGm/L

جم لتر

مل/ كجمKg/mL

كجم مل

لتر/ كجمKg/L

كجم لتر

مل/ ملجمMg/mL

ملجم ملل

ميكرولتر/ ميكروجرامUg/uL

ميكروجرام ميكرولتر

ميكرولتر/ نانوجرامNg/ul

نانوجرام ميكرولتر

أ.أمل الغامدي 20

والتخفيفات المحاليل Solutions and Dilutions

منهما • كل المحلولين بين الفرق ( )1ماهو / حجم% ) ( v/vحجم( ) / حجم ) وزن ؟(w/vو

• ) / ( حجم حجم األول : 1المحلول المادة% نسبة ان أيهي السائلة .1الكيميائية الكلي% المحلول حجم من

الجليسرول: • محلول الجليسرول 1سيحتوي% 1مثال من ملنهائي حجم مل.100في

• ) / ( حجم وزن الثاني الكيميائية%: 1المحلول المادة أن أيمحلول يعني حيث صلبة صورة في ا% 1تكون ؛إضافة منها

في المادة من مل.100جم•( محلول: SDS) 1%Sodiumمثال Dodecyl Sulphate

من من 1سيتكون نهائي SDSجم حجم .100في مل

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 21

«أسئـــلة»

الميكرولتر • ؟Microliterماهوله ) أو 1/1000000ويماثل( ulيرمز .1/1000لتر مل

النووي ul 200لديك الحمض عينة محلول 3ومحلول DNAمنالصوديوم أسيتات محلول من تحضير NaOAcموالر في وترغبين

النووي الحمض من من 0.3إلى DNAمحلول لكن NaOAcموالر. للمحلول الكلي الحجم سيتأثر األخير إلى العينة بإضافة

X = إضافتها الالزم الصوديوم أسيتات محلول كمية d[V1 + X]هوd ( =من التحويل مثال التخفيف إلى 3عامل موالر 0.3موالر

هو (.1/10فالتخفيفV. للمحلول= االبتدائي الحجمX. إضافتها= سيتم التي المركز المحلول كمية

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 22

«أســئلـــة»

المحلول • :Percent solutionنسبة ) / نسبة ) أو وزن وزن نسبة من المحلول يتكون قد

.) / حجم) وزن « من يتكون أن إما النسبي عدد xالمحلول »

في المركب من من 100الجرامات جرام» soluteالمذاب أو في x؛ المركب جرامات «عدد

100. التوالي على المذاب، من ملSpecific Gravity = wt/vol

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 23

« الواجب «أســـئلة

: التالي السؤال عن أجيبيالبوتاسيوم • كرومات من مائي محلول

K2Cr2O7 0.25تركيزه. موالر

المحلول • من أخذه الالزم الحجم احسبعلى للحصول من 250المركز ملل

تركيز المحلول ؟؟ 0.01ذو موالر

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 24

« الواجب «اسئلة

كمية • المطلوبة Tris [Tris(Hydroxymethyl)Aminomethane]احسبيمن 500لتحضير . 1مل 6 علما المخزن المحلول من موالر

= الجزيئي الوزن (.amu )121.14بأنكمية • EDTA (Ethylene-diamine tetra-aceticاحسبي

acid) لتحضير مخزن 500المطلوبة محلول من ملالبنائية. 0.5 الصيغة وزن FW= 372.2موالر

الـ: • تضاف عادة مزدوج EDTAمالحظة الماء إلىالـ ويضبط باستخدام 8عند pHالتقطير عادة

الصوديوم ترشح NaOH pellets 10هيدروكسيد ثم جم. باألوتوكالف وتعقم

28/02/2011

أ.أمل الغامدي 25

«أمثلــه»

كمية • في b-mercaptophenolاحسبي من 15المطلوبة ملتركيز على للحصول االستخالص .10mMمحلول

بتركيز صلبة صورة في الماده هذا (.98تتوفر / وزن% ) وزنFW= 78.13.

محلول • إلى للوصول المطلوب للمحلول الكلي الحجم احسبيتركيز 100من% 80بتركيز من اإليثانول% 95مل .ETOHمن

النووي ul 300لديك • الحمض منظم DNAمن محلول TEفيBuffer .عن وينفصل ليترسب إليه ملح إضافة في ترغبين

محلول ولديك . 3الشوائب أن عليك الصوديوم أسيتات من موالرمحلول على .0.3تحصلي النووي الحمض مع األسيتات من موالر

28/02/2011