实验二实验二 . . 叶绿素含量的测定叶绿素含量的测定

一一 .. 实验原理实验原理 叶绿素 a 、 b 在长波的最大吸收峰分别在 663n

m 、 645nm ，据 Lamber-Beer 定律，可得浓度 C与光密度 D 间的关系式：

D663=82.04Ca +9.27Cb

D645=16.75Ca +45.6Cb ( 浓度单位： g/mL ）

CA= 12.72D663 – 2.59D645

CB= 22.88D645 – 4.68 D663

CT = 20.29D645 +8.02D663 ( 浓度单位： mg/L ）

二二 . . 试剂与材料试剂与材料2.1 试剂： 丙酮、石英砂、碳酸钙

2.2 材料： 水稻、玉米、花生、桑树等植物的新鲜叶片。

2.3 仪器与器皿： 分光光度计、台秤、剪刀、研钵、移液管、

漏斗、大试管

叶片洗净、吸干、去大叶脉↓

称 0.5g 叶用丙酮研磨↓

匀浆过滤（用 80% 丙酮洗研钵及残渣，合并滤液）↓

滤液用 80% 丙酮定容至 10mL↓

适当稀释后测 A645 、 A663

三三 . . 实验步骤实验步骤

四四 . . 结果计算结果计算4.1 结果计算

C(mg/L)× 提取液总量（ L ） × 稀释倍数 Chl = (mg/g 叶 ) 材料鲜重（ g ）

4.2 比较分析不同植物的叶绿素含量差异及同种植物在不同生长环境下 Chla/Chlb 差异。

五五 . . 注意事项注意事项注意叶绿素一定要提干净，避免造成测定误差

叶绿素初提液体积不要太多，以免浪费试剂，如果浓度太高可进行适当稀释

注意分光光度计的规范使用

六六 . . 思考题思考题为什么植物在不同生长环境下其 Chl 含

量有差异？ Chla /Chlb 有何适应意义？