54 Reunio Anual da SBPC Goinia, GO Julho/2002
BIOQUMICA CARACTERIZAO E PURIFICAO PARCIAL DE GALACTANAS
SULFATADAS DA ALGA MARINHA GRACILARIA CERVICORNIS Fernando Roberto
Ferreira Silva1* [email protected], Celina Maria Pinto
Guerra1, Ivan Rui Lopes de Albuquerque1, Luciana Guimares Alves2,
Valquria Pereira de Medeiros1, Karla Cristiana Souza de Queiroz1,
Hugo Alexandre de Oliveira Rocha1, Edda Lisboa Leite1 1 UFRN,
Natal/RN, 2 UNIFESP, So Paulo/SP (INTRODUO) As algas marinhas so
consideradas os representantes mais simples do reino vegetal,
entretanto elas apresentam uma grande importncia nos dias atuais,
principalmente para alguns segmentos da indstria como a cosmtica, a
alimentcia e a farmacutica. Essa importncia se deve, quase que
exclusivamente, a presena de polissacardeos caractersticos desses
organismos e a presena de grupamentos sulfato nesses
polissacardeos, o que possivelmente atribui uma srie de atividades
biolgicas a esses polissacardeos. Nosso trabalho se detm ao estudo
dos polissacardeos encontrados em algas marinhas vermelhas, onde
destacam-se as galactanas, que so constitudas por galactose. Desta
forma, os objetivos do nosso trabalho so extrair polissacardeos
sulfatados da alga marinha vermelha Gracilaria cervicornis,
promover a purificao e a caracterizao qumica parcial dos mesmos e
avaliar as possveis atividades biolgicas desses polissacardeos.
(METODOLOGIA) A alga foi doada pela professora Eliane Marinho
Sobrinho do Depto. de Oceanografia e Limnologia, em seguida foi
seca na estufa 45C. A alga seca foi triturada e o p resultante foi
submetido a despigmentao e delipidao com dois volumes de acetona,
durante 12 horas. O p cetnico foi submetido a uma protelise com a
enzima maxatase (15mg/g de p cetnico) 60C overnight, em pH 8.0. O
material resultante desta etapa (cru de polissacardeos) filtrado e,
em seguida, adicionado a ele dois volumes de metanol para
precipitar. O precipitado seco e chamado de Frao Inicial (FI).
100ml de uma soluo de FI (20mg/ml) foi submetida a um tratamento
com CTV originando a Frao Parcial (FP). Em seguida, a frao FP foi
fracionada em cromatografia de troca inica com a resina lewatite e
a eluio foi feita com concentraes crescentes de sal (0,15 3M),
originado as fraes de 1 a 8. Todas as fraes foram submetidas a
eletroforese em gel de agarose tampo PDA 0.05M pH 9.0, a fim de se
observar a metacromasia destes compostos, a dosagens qumicas para
se quantificar os teores de polissacardeos, cidos urnicos, protenas
e sulfato desses polissacardeos, e a cromatografia descendente em
papel em tampo isobutrico-amnia. O teste para avaliar a atividade
antiinflamatria foi realizado em ratos da linhagem Wistar,
induzindo a inflamao na orelha do rato e depois injetando uma soluo
da frao 1 para verificar se ela possui atividade antiinflamatria.
(RESULTADOS) O rendimento dessas fraes variou de 1.2 a 31.5%. Os
acares constituintes das fraes foram caracterizados atravs de
cromatografia descendente em papel. O perfil eletrofortico das
fraes mostrou-se metacromtico, indicando a possvel presena de
sulfato. Os mtodos colorimtricos mostraram um teor de protenas de
0.11 a 0.86%, um teor de acares totais de 0.85 a 80.75%, um teor de
sulfato de 0.013 a 30.52% e um teor de cidos urnicos de 0.19 a 4.18
mg/ml. A frao 1 (NaCl 0.15M) apresentou uma boa resposta no teste
de atividade anti-inflamatria em ratos Wistar, reduzindo a
espessura da inflamao. (CONCLUSES) A metodologia para extrao e
fracionamento dos polissacardeos se mostrou bastante eficiente, uma
vez que as fraes apresentaram metacromasia nas eletroforeses, o que
demonstra uma possvel presena de grupamentos sulfato. As fraes
apresentaram um baixo teor de protenas e um elevado teor de
polissacardeos totais e de sulfato. A cromatografia descendente
demonstrou que a galactose o acar constituinte de todas as fraes. E
a frao 1 possivelmente pode atuar como agente antiinflamatrio
sendo, entretanto, necessrios novos testes. Agncia Financiadora:
PPPg/UFRN, CNPq/PIBIC, CAPES TRABALHO DE INICIAO CIENTFICA.
