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1 CURSO DE CITOLOGIA HEMATOLOGICA QCBEH. ROSARIO SALAZAR RIOJAS CENTRO UNIVERSITARIO CONTRA EL CANCER

1.1 Introducción

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CURSO DE CITOLOGIA HEMATOLOGICA

QCBEH. ROSARIO SALAZAR RIOJAS

CENTRO UNIVERSITARIO CONTRA EL CANCER

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ESTE CURSO ESTA DIRIGIDO A:

DIPLOMADOS EN QUIMICA CLINICA CON ACENTUACION EN HEMATOLOGIA

TECNICOS ESPECIALISTAS DE LABORATORIO

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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OBJETIVOS DEL CURSO

Conocer la ontogenia y diferenciación normal de los distintos tipos celulares de la

hematopoyesis

Comprender su fisiología, como actúan y cual es su utilidad

Reconocer la morfología de los distintos tipos celulares, y distinguir lo normal de lo

patológico

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PLANTEAMIENTO GENERAL

Conocimiento de las tinciones pancromáticas

Revisión de la fisiología de las células de la sangre

Interpretación de la morfología normal y patológica

NEUTROFILO

EOSINOFILO

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La observación al microscopio exige llevar a cabo:

LINFOCITO PATOLOGICO

LINFOCITO NORMAL

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

una interpretación cualitativa

una valoración cuantitativa

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Por tanto la identificación correcta de las células de la sangre pasa a ser un dato de gran interés clínico.

MONONUCLEOSIS INFECCIOSA

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

Los AUTOANALIZADORES no tienen una fiabilidad absoluta

Los contadores celulares fallan en especial cuando las células están alteradas en el contexto de una enfermedad

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Formación en citomorfología

NEUTROFILOS SEGMENTADOS

La preparación técnica adecuada para la revisión de extensiones de sangre es

Laboriosa

Lenta

De alto costo económico

Necesaria

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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FORMACION BASICA

INFORMACION ACTUALIZADA

EXPERIENCIA

INTERPRETACION DE LOS DATOS

OBJETIVO: EL SUJETO ENFERMO

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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Conocimientos básicos

EOSINOFILIA

Técnicos

Microscopio: óptica, uso y mantenimiento

Métodos tintoriales

Teóricos y prácticos

Fisiología sanguínea

Morfología celular

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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Información actualizada

PALUDISMO

Permite actitudes orientadas hacia el diagnóstico, como:

Realización de pruebas adicionales basadas en los hallazgos: reticulocitos, examen de punteado basófilo, Coomb’s Directo,...

Remisión de una muestra a microbiología

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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Permite establecer los criterios de:

Valores críticos

Valores de alarma

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

Información actualizada

ERITROCITOS ANORMALES

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Para entender que existen valores críticos y de alarma que pueden repercutir sobre el enfermo, es conveniente poseer:

Conceptos de fisiología

Conceptos de fisiopatología

Conceptos de clínica

ANEMIA HEMOLITICA MICROANGIOPATICA

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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Una idea que repetiremos constantemente a lo largo de este curso es la necesidad de CORRELACIONAR

los datos de la BIOMETRIA HEMATICA

con lo observado al MICROSCOPIO

SEGMENTADOS

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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FLUJO DE DATOS CITOMORFOLOGICOS DEL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA

Hematólogo Químico

ENFERMO

Médico Clínico Enfermería

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ORGANIZACION DEL CURSO

16 HORAS LECTIVAS (8 x 2)

15% Fisiología

ACANTOCITOS

70% Morfología 15% Casos

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1. COLORANTES EN HEMATOLOGIA

3. LA SERIE ROJA

4. LOS GRANULOCITOS GENERAL

5. NEUTROFILOS, EOSINOFILOS Y BASOFILOS

6. SISTEMA MONONUCLEAR FAGOCITICO

7. EL SISTEMA LINFOIDE

8. HEMOPATIAS MALIGNAS

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

2. EL MICROSCOPIO OPTICO

9. TINCIONES ESPECILAES “CITOQUIMICA”

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17 EL MICROSCOPIO OPTICO

CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA

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EL MICROSCOPIO OPTICO

Un color es la LUZ que emana de un objeto tras recibir una radiación

LUZ BLANCA LUZ BLANCA

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EL MICROSCOPIO OPTICO

El ojo es un receptor fundamental de radiaciones, que visualiza todas las longitudes de onda comprendidas entre:

380 nm (violeta)

y 800 nm (rojo)

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EL MICROSCOPIO OPTICO

Para AUMENTAR el tamaño de una IMAGEN el procedimiento más simple es una sola lente biconvexa (convergente): una LUPA, que se interpone entre el ojo y el objeto a observar, para aumentar el tamaño de la imagen formada en la retina

F

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EL MICROSCOPIO OPTICO

A la lupa se la ha denominado “MICROSCOPIO SIMPLE”, y funciona de la siguiente manera:

F

OBJETO

IMAGEN VIRTUAL

EL OBJETO SE SITUA ENTRE LA LENTE CONVERGENTE

Y EL FOCO PRINCIPAL (F) DE ESTA

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EL MICROSCOPIO OPTICO

El MICROSCOPIO COMPUESTO consta de 2 lentes (o mejor dicho de 2 sistemas de lentes) convergentes: el OBJETIVO y el OCULAR

Fo’

Fo F

F’

OCULAR

OBJETIVO

OBJETO

IMAGEN VIRTUAL FINAL

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EL MICROSCOPIO OPTICO

La imagen final es mayor, invertida y virtual

Para que la observación sea cómoda es necesario que la imagen final se encuentre ubicada en el foco del ocular (Fo’)

El AUMENTO logrado se obtiene multiplicando el del objetivo por el del ocular

OCULAR

OBJETIVO

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EL MICROSCOPIO OPTICO

OBJETIVOS

REVOLVER PORTADOR DE LOS OBJETIVOS

PLATINA

CONDENSADOR

OCULAR

TUBO

HAZ DE LUZ

TORNILLO MACROMETRICO

TORNILLO MICROMETRICO

ESTRUCTURA

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EL MICROSCOPIO OPTICO

OCULAR

Magnifica la imagen dada por el objetivo; a mayor aumento, disminuyen la definición y no se incrementa la resolución de la imagen

Consta de un tubo corto con un sistema convergente formado por 2 lentes plano-convexas (parte plana hacia el ojo) y un diafragma intermedio. La mas baja (lente de campo) dilata el perímetro de la imagen, mientras que la superior (ocular) aumenta su luminosidad

LENTE OCULAR

LENTE DE CAMPO

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EL MICROSCOPIO OPTICO

TUBO

Es la estructura en cuyos extremos se ubican ocular y objetivo

Normalmente es binocular

Su longitud habitual es 160 mm

30º

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EL MICROSCOPIO OPTICO

CONDENSADOR

Se trata de un sistema óptico convergente que se utiliza para regular la luminosidad

Posee un diafragma que nos permite ajustar el diámetro del haz de luz con el diámetro que ofrece el objetivo en uso

Dos tornillos laterales regulan el centrado del haz de luz (iluminación de Köhler)

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EL MICROSCOPIO OPTICO

OBJETIVO

Parte esencial del sistema óptico que se encuentra directamente sobre el objeto visionado

Es un sistema de lentes de distancia focal muy pequeña, que facilita la mayor magnificación.

Usualmente se emplean con aumentos 100x (ideal para citomorfología), 40x, 20x y 10x

El enfoque inicial se debe efectuar con un objetivo 10x, antes de pasar a mayores aumentos

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EL MICROSCOPIO OPTICO

160 mm: DISTANCIA DEL OCULAR HASTA EL

OBJETIVO

AUMENTO 40x

ABERTURA NUMERICA: EXPRESION DEL CONO DE LUZ QUE INCIDE EN

LA MUESTRA. ES MAXIMA EN LOS OBJETIVOS DE

INMERSION

0.170.01 mm: GROSOR DEL CUBREOBJETO

PLAN: LA IMAGEN OBTENIDA ES PLANA

OIL: LOS OBJETIVOS CON ESTA INDICACION SON DE INMERSION EN

ACEITE

BANDA DE COLOR

BLANCO: 100x

AZUL OSCURO: 63x

AZUL CLARO: 40x

VERDE OSCURO: 25x

AMARILLO: 10x

ROJO: 4x

MARRÓN: 2.5x

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EL MICROSCOPIO OPTICO

OBJETIVOS DE INMERSION

Reducen las reflexiones luminosas parásitas sobre el porta y sobre la cara de entrada del propio objetivo

Y sobre todo mejoran la abertura numérica (hasta 1.40)

Usualmente se emplean aceites sintéticos con un índice de refracción en torno a 1,515 que ofrece la máxima nitidez

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EL MICROSCOPIO OPTICO

LIMPIEZA DE LAS LENTES

Para quitar el polvo de los oculares, de la lente superior del condensador, o de la que cubre el diafragma de la fuente de luz, basta un paño de hilo seco y limpio, a lo sumo humedecido con una solución de limpia-cristales

En cambio para los objetivos, especialmente cuando se manchan con aceite de inmersión, se aconseja una solución de:

ETER ETILICO 15%

ALCOHOL METILICO 15%

AGUA DESTILADA 70%

Nota: Nunca usar alcohol puro

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EL MICROSCOPIO OPTICO

TRANSPORTE

Un microscopio debe ser cogido por la estructura rígida del cuerpo (A) o por el pié (B). NUNCA por la platina, el tubo o por los tornillos de enfoque

A

B

Después de su uso diario (o de cada turno) debe quedar limpio y cubierto con su funda protectora