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CURSO DE CITOLOGIA HEMATOLOGICA
QCBEH. ROSARIO SALAZAR RIOJAS
CENTRO UNIVERSITARIO CONTRA EL CANCER
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ESTE CURSO ESTA DIRIGIDO A:
DIPLOMADOS EN QUIMICA CLINICA CON ACENTUACION EN HEMATOLOGIA
TECNICOS ESPECIALISTAS DE LABORATORIO
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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OBJETIVOS DEL CURSO
Conocer la ontogenia y diferenciación normal de los distintos tipos celulares de la
hematopoyesis
Comprender su fisiología, como actúan y cual es su utilidad
Reconocer la morfología de los distintos tipos celulares, y distinguir lo normal de lo
patológico
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PLANTEAMIENTO GENERAL
Conocimiento de las tinciones pancromáticas
Revisión de la fisiología de las células de la sangre
Interpretación de la morfología normal y patológica
NEUTROFILO
EOSINOFILO
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La observación al microscopio exige llevar a cabo:
LINFOCITO PATOLOGICO
LINFOCITO NORMAL
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
una interpretación cualitativa
una valoración cuantitativa
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Por tanto la identificación correcta de las células de la sangre pasa a ser un dato de gran interés clínico.
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
Los AUTOANALIZADORES no tienen una fiabilidad absoluta
Los contadores celulares fallan en especial cuando las células están alteradas en el contexto de una enfermedad
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Formación en citomorfología
NEUTROFILOS SEGMENTADOS
La preparación técnica adecuada para la revisión de extensiones de sangre es
Laboriosa
Lenta
De alto costo económico
Necesaria
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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FORMACION BASICA
INFORMACION ACTUALIZADA
EXPERIENCIA
INTERPRETACION DE LOS DATOS
OBJETIVO: EL SUJETO ENFERMO
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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Conocimientos básicos
EOSINOFILIA
Técnicos
Microscopio: óptica, uso y mantenimiento
Métodos tintoriales
Teóricos y prácticos
Fisiología sanguínea
Morfología celular
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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Información actualizada
PALUDISMO
Permite actitudes orientadas hacia el diagnóstico, como:
Realización de pruebas adicionales basadas en los hallazgos: reticulocitos, examen de punteado basófilo, Coomb’s Directo,...
Remisión de una muestra a microbiología
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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Permite establecer los criterios de:
Valores críticos
Valores de alarma
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
Información actualizada
ERITROCITOS ANORMALES
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Para entender que existen valores críticos y de alarma que pueden repercutir sobre el enfermo, es conveniente poseer:
Conceptos de fisiología
Conceptos de fisiopatología
Conceptos de clínica
ANEMIA HEMOLITICA MICROANGIOPATICA
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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Una idea que repetiremos constantemente a lo largo de este curso es la necesidad de CORRELACIONAR
los datos de la BIOMETRIA HEMATICA
con lo observado al MICROSCOPIO
SEGMENTADOS
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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FLUJO DE DATOS CITOMORFOLOGICOS DEL LABORATORIO DE HEMATOLOGIA
Hematólogo Químico
ENFERMO
Médico Clínico Enfermería
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ORGANIZACION DEL CURSO
16 HORAS LECTIVAS (8 x 2)
15% Fisiología
ACANTOCITOS
70% Morfología 15% Casos
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1. COLORANTES EN HEMATOLOGIA
3. LA SERIE ROJA
4. LOS GRANULOCITOS GENERAL
5. NEUTROFILOS, EOSINOFILOS Y BASOFILOS
6. SISTEMA MONONUCLEAR FAGOCITICO
7. EL SISTEMA LINFOIDE
8. HEMOPATIAS MALIGNAS
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
2. EL MICROSCOPIO OPTICO
9. TINCIONES ESPECILAES “CITOQUIMICA”
17 EL MICROSCOPIO OPTICO
CITOMORFOLOGIA HEMATOLOGICA
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EL MICROSCOPIO OPTICO
Un color es la LUZ que emana de un objeto tras recibir una radiación
LUZ BLANCA LUZ BLANCA
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EL MICROSCOPIO OPTICO
El ojo es un receptor fundamental de radiaciones, que visualiza todas las longitudes de onda comprendidas entre:
380 nm (violeta)
y 800 nm (rojo)
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EL MICROSCOPIO OPTICO
Para AUMENTAR el tamaño de una IMAGEN el procedimiento más simple es una sola lente biconvexa (convergente): una LUPA, que se interpone entre el ojo y el objeto a observar, para aumentar el tamaño de la imagen formada en la retina
F
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EL MICROSCOPIO OPTICO
A la lupa se la ha denominado “MICROSCOPIO SIMPLE”, y funciona de la siguiente manera:
F
OBJETO
IMAGEN VIRTUAL
EL OBJETO SE SITUA ENTRE LA LENTE CONVERGENTE
Y EL FOCO PRINCIPAL (F) DE ESTA
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EL MICROSCOPIO OPTICO
El MICROSCOPIO COMPUESTO consta de 2 lentes (o mejor dicho de 2 sistemas de lentes) convergentes: el OBJETIVO y el OCULAR
Fo’
Fo F
F’
OCULAR
OBJETIVO
OBJETO
IMAGEN VIRTUAL FINAL
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EL MICROSCOPIO OPTICO
La imagen final es mayor, invertida y virtual
Para que la observación sea cómoda es necesario que la imagen final se encuentre ubicada en el foco del ocular (Fo’)
El AUMENTO logrado se obtiene multiplicando el del objetivo por el del ocular
OCULAR
OBJETIVO
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EL MICROSCOPIO OPTICO
OBJETIVOS
REVOLVER PORTADOR DE LOS OBJETIVOS
PLATINA
CONDENSADOR
OCULAR
TUBO
HAZ DE LUZ
TORNILLO MACROMETRICO
TORNILLO MICROMETRICO
ESTRUCTURA
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EL MICROSCOPIO OPTICO
OCULAR
Magnifica la imagen dada por el objetivo; a mayor aumento, disminuyen la definición y no se incrementa la resolución de la imagen
Consta de un tubo corto con un sistema convergente formado por 2 lentes plano-convexas (parte plana hacia el ojo) y un diafragma intermedio. La mas baja (lente de campo) dilata el perímetro de la imagen, mientras que la superior (ocular) aumenta su luminosidad
LENTE OCULAR
LENTE DE CAMPO
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EL MICROSCOPIO OPTICO
TUBO
Es la estructura en cuyos extremos se ubican ocular y objetivo
Normalmente es binocular
Su longitud habitual es 160 mm
30º
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EL MICROSCOPIO OPTICO
CONDENSADOR
Se trata de un sistema óptico convergente que se utiliza para regular la luminosidad
Posee un diafragma que nos permite ajustar el diámetro del haz de luz con el diámetro que ofrece el objetivo en uso
Dos tornillos laterales regulan el centrado del haz de luz (iluminación de Köhler)
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EL MICROSCOPIO OPTICO
OBJETIVO
Parte esencial del sistema óptico que se encuentra directamente sobre el objeto visionado
Es un sistema de lentes de distancia focal muy pequeña, que facilita la mayor magnificación.
Usualmente se emplean con aumentos 100x (ideal para citomorfología), 40x, 20x y 10x
El enfoque inicial se debe efectuar con un objetivo 10x, antes de pasar a mayores aumentos
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EL MICROSCOPIO OPTICO
160 mm: DISTANCIA DEL OCULAR HASTA EL
OBJETIVO
AUMENTO 40x
ABERTURA NUMERICA: EXPRESION DEL CONO DE LUZ QUE INCIDE EN
LA MUESTRA. ES MAXIMA EN LOS OBJETIVOS DE
INMERSION
0.170.01 mm: GROSOR DEL CUBREOBJETO
PLAN: LA IMAGEN OBTENIDA ES PLANA
OIL: LOS OBJETIVOS CON ESTA INDICACION SON DE INMERSION EN
ACEITE
BANDA DE COLOR
BLANCO: 100x
AZUL OSCURO: 63x
AZUL CLARO: 40x
VERDE OSCURO: 25x
AMARILLO: 10x
ROJO: 4x
MARRÓN: 2.5x
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EL MICROSCOPIO OPTICO
OBJETIVOS DE INMERSION
Reducen las reflexiones luminosas parásitas sobre el porta y sobre la cara de entrada del propio objetivo
Y sobre todo mejoran la abertura numérica (hasta 1.40)
Usualmente se emplean aceites sintéticos con un índice de refracción en torno a 1,515 que ofrece la máxima nitidez
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EL MICROSCOPIO OPTICO
LIMPIEZA DE LAS LENTES
Para quitar el polvo de los oculares, de la lente superior del condensador, o de la que cubre el diafragma de la fuente de luz, basta un paño de hilo seco y limpio, a lo sumo humedecido con una solución de limpia-cristales
En cambio para los objetivos, especialmente cuando se manchan con aceite de inmersión, se aconseja una solución de:
ETER ETILICO 15%
ALCOHOL METILICO 15%
AGUA DESTILADA 70%
Nota: Nunca usar alcohol puro
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EL MICROSCOPIO OPTICO
TRANSPORTE
Un microscopio debe ser cogido por la estructura rígida del cuerpo (A) o por el pié (B). NUNCA por la platina, el tubo o por los tornillos de enfoque
A
B
Después de su uso diario (o de cada turno) debe quedar limpio y cubierto con su funda protectora