2.6.4 薬物動態試験の概要文...Novartis Confidential Page 4 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 略号一覧略号省略していない表現（英）

2.6.4 薬物動態試験の概要文

Novartis Confidential Page 2 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab

目次目次 .................................................................................................................................................. 2

表一覧 .................................................................................................................................................. 3

図一覧 .................................................................................................................................................. 3

略号一覧 ................................................................................................................................................ 4

1 まとめ .................................................................................................................................................... 5

2 分析法 .................................................................................................................................................... 5

2.1 セクキヌマブ定量法 ............................................................................................................... 5

2.1.1 標的分子をベースとした ELISA 法 ................................................................... 5

2.1.2 抗イディオタイプ抗体をベースとした ELISA 法 ........................................... 6

2.2 BZN035 定量法 ........................................................................................................................ 6

2.3 総 IL-17A定量法 ..................................................................................................................... 7

2.4 抗セクキヌマブ抗体定量法 ................................................................................................... 7

2.5 抗 BZN035 抗体定量法 ........................................................................................................... 7

3 吸収 ........................................................................................................................................................ 8

4 分布 ........................................................................................................................................................ 8

4.1 雄性カニクイザルを用いた単回静脈内投与 PK試験......................................................... 8

4.2 胚・胎児発生に関する試験及び胎盤通過試験 ................................................................... 9

5 代謝 ...................................................................................................................................................... 10

6 排泄 ...................................................................................................................................................... 10

7 薬物動態学的薬物相互作用............................................................................................................... 10

8 その他の薬物動態試験....................................................................................................................... 10

8.1 カニクイザルにおけるセクキヌマブのトキシコキネティクス...................................... 10

8.1.1 単回皮下投与毒性試験 ...................................................................................... 10

8.1.2 13 週間反復皮下投与毒性試験 .......................................................................... 10

8.1.3 4 週間反復静脈内投与毒性試験 ........................................................................ 11

8.1.4 26 週間反復静脈内投与毒性試験 ...................................................................... 12

8.2 マウス生殖発生毒性試験における BZN035 のトキシコキネティクス .......................... 13

8.3 総 IL-17Aの体内動態 ........................................................................................................... 13

8.4 セクキヌマブの免疫原性 ..................................................................................................... 14

8.5 BZN035 の免疫原性 .............................................................................................................. 14

8.6 製造方法の異なるセクキヌマブの薬物動態 ..................................................................... 15

8.7 カニクイザル及びヒトの薬物動態の比較 ......................................................................... 15

8.7.1 PK パラメータの比較 ........................................................................................ 15

8.7.2 シミュレーションに基づいた曝露の比較....................................................... 16

8.8 カニクイザルにおける遊離型 IL-17A のシミュレーション ............................................ 18

Novartis Confidential Page 3 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 9 考察及び結論 ...................................................................................................................................... 20

10 参考文献 .............................................................................................................................................. 21

11 図表 ...................................................................................................................................................... 21

表一覧 Table 4-1 妊娠カニクイザルの器官形成期中にセクキヌマブを週 1 回皮下投与し

たときの母体の TK パラメータ（妊娠 90日） ................................................ 9

Table 4-2 妊娠 100 日目における胎児血清中及び羊水中のセクキヌマブ濃度 ............. 9

Table 8-1 13 週間反復皮下投与毒性試験における TK パラメータ（1，36，85 日

目） ...................................................................................................................... 11

Table 8-2 カニクイザルに 4 週間反復静脈内投与したときの TK パラメータ（22日目） .................................................................................................................. 12

Table 8-3 26 週間反復静脈内投与毒性試験における TK パラメータ（1，176 日

目） ...................................................................................................................... 13

Table 8-4 異なる細胞株由来のセクキヌマブの PK パラメータ .................................... 15

Table 8-5 カニクイザル及びヒトにおける PK パラメータ ............................................ 15

Table 8-6 カニクイザル及びヒトにおける全身曝露量の比較 ....................................... 18

Table 11-1 種々の動物での PK 及び TK 試験一覧 ............................................................ 21

図一覧 Figure 8-1 カニクイザル TK（実測値）及びヒト PK（推定値）の比較 ...................... 17

Figure 8-2 末梢コンパートメントにおける遊離型 IL-17Aの割合のシミュレーシ

ョン ...................................................................................................................... 20


略号一覧略号省略していない表現（英）省略していない表現（日）

AU Arbitrary Unit 任意単位 AUC Area under the serum concentration-time curve 血清中濃度-時間曲線下面積 Cmax Maximum serum concentration after a single

dose 単回投与後の最高血清中濃度

CHO Chinese hamster ovary チャイニーズハムスター卵巣 CL Clearance クリアランス ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay 酵素結合免疫測定 FcRn Neonatal Fc receptor 新生児 Fc受容体 HRP Horseradish peroxidase セイヨウワサビペルオキシダーゼ IgG Immunoglobulin G 免疫グロブリン G IL Interleukin インターロイキン LLOQ Lowest limit of quantification 定量下限 NOAEL No Observed Adverse Effect Level 無毒性量 OPD o-Phenylenediamine dihydrochloride o-フェニレンジアミン二塩酸塩 PK Pharmacokinetics 薬物動態 QC Quality control 精度管理 T1/2 Half life 半減期 TK Toxicokinetics トキシコキネティクス Tmax Time to the maximum observed serum

concentration 最高血清中濃度到達時間

UDP Uridine diphosphate ウリジン二リン酸 ULOQ Upper limit of quantification 定量上限 Vss Steady state volume of distribution 定常状態における分布容積 Vz Volume of distribution 分布容積


1 まとめセクキヌマブ（AIN457）はインターロイキン（IL）-17A に対するヒト免疫グロブリン G

（IgG）1/κ モノクローナル抗体であり，IL-17A に結合し IL-17A が受容体に結合することを阻害

することにより，その活性を中和する。セクキヌマブ及びマウス IL-17A を標的とするマウスサ

ロゲート抗体（BZN035）を用いて，セクキヌマブの薬物動態（PK）及び毒性の評価を行った。

ヒト IL-17A を標的とする完全ヒトモノクローナル抗体であるセクキヌマブはカニクイザル，ア

カゲザル及びマーモセットの IL-17A と交差反応すること，セクキヌマブの新生児 Fc 受容体

（FcRn）に対する親和性はヒト及びカニクイザルにおいて似ていることから，PK，トキシコキ

ネティクス（TK）及び毒性評価の動物種としてカニクイザルを選択した。

セクキヌマブは検討した動物種において IgG 抗体の一般的な PK プロファイルを示し，分布容

積は小さく，クリアランスは低値であり，消失半減期は長かった。カニクイザルを用いた毒性試

験において，セクキヌマブの曝露は検討した用量範囲（静脈内投与；10～150 mg/kg，皮下投

与；15～150 mg/kg）で用量に比例して増加した。セクキヌマブは開発中に原薬の製造方法を

細胞株を用いた方法からチャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞株を用いた方法に変更

した。製造方法の変更がセクキヌマブの PK に与える影響を検討するため，カニクイザルを用い

た PK 試験を実施した。その結果，製造方法の変更は PK に影響しないことが示された。

CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザルの 13 週間反復皮下投与毒性試験におい

て，TK パラメータを算出した結果，血清中濃度-時間曲線下面積（AUC）0-168h 及び単回投与後

の最高血清中濃度（Cmax）は，用量に比例して増加し，性差は認められなかった。また，セク

キヌマブの蓄積性が確認された。細胞株及び CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニ

クイザル 4 週間反復静脈内投与毒性試験において，TK パラメータを算出した結果，AUC0.083-

168h 及び Cmax は用量依存的に増加し，明確な性差は認められなかった。また，用量補正した

Cmax 及び AUC0.083-168h を比較した結果，及び CHO 細胞株由来セクキヌマブ間で曝露量

において差は認められなかった。CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザルの 26 週

間反復静脈内投与毒性試験において，TK パラメータを算出した結果，Cmax 及び AUC0-168h は，

雌雄いずれにおいても，15～150 mg/kgの用量範囲で用量依存的に増加した。

2 分析法

2.1 セクキヌマブ定量法

2.1.1 標的分子をベースとした ELISA 法カニクイザルにおける細胞株由来のセクキヌマブの血清中濃度を測定する酵素結合免疫

測定（ELISA）法を開発した [Table 2.6.5.2A-BMD R0450253，BMD R0450253-01]。


精製した組換え IL-17A 蛋白をマイクロタイタープレートに固相化した。血清試料（検量線試

料，精度管理（QC）試料又は未知試料）とビオチン化したセクキヌマブを同時に添加してイン

キュベートすることにより，精製した組換え IL-17A 蛋白に対して競合的に結合させた。セイヨ

ウワサビペルオキシダーゼ（HRP）標識ストレプトアビジン及び基質である o-フェニレンジアミ

ン二塩酸塩（OPD）を添加してインキュベートすることにより，結合したビオチン化セクキヌマ

ブを検出した。

カニクイザル血清を用いてバリデーションを行った結果，定量下限（LLOQ）は 1.2 µg/mL，定

量上限（ULOQ）は 222 µg/mL であった。日間変動の真度及び精度はそれぞれ 96.1～107.8%，6.6

～18.8%であった。カニクイザル血清中セクキヌマブの安定性を検討した結果，−80°C 以下で少

なくとも 4週間，及び 3 回の凍結融解サイクルで安定であった。

2.1.2 抗イディオタイプ抗体をベースとした ELISA 法カニクイザルにおける CHO 細胞株由来のセクキヌマブの血清中濃度を測定する ELISA 法を開

発した [Table 2.6.5.2B-BMD R0550671-01]。

精製した抗イディオタイプ抗セクキヌマブ抗体をマイクロタイタープレートに固相化した。血

清試料（検量線試料，QC 試料又は未知試料）とビオチン化したセクキヌマブを同時に添加して

インキュベートすることにより，抗イディオタイプ抗セクキヌマブ抗体に対して競合的に結合さ

せた。非結合物質は洗浄により除去した。HRP 標識ストレプトアビジン及び基質である OPD を

添加してインキュベートすることにより，結合したビオチン化セクキヌマブを検出した。

カニクイザル血清を用いてバリデーションを行った結果，LLOQ は 80 ng/mL，ULOQ は

2500 ng/mL であった。日内変動の真度及び精度はそれぞれ 81.5～122.2%，1.2～18.1%，日間変動

の真度及び精度はそれぞれ 96.4～106.1%，11.6～16.1%であった。カニクイザル血清にセクキヌ

マブを添加して調製した試料を用いてカニクイザル血清中セクキヌマブの安定性について検討し

た結果，−18°C 以下で 4週間，及び 3 回の凍結融解サイクルで安定であった。

2.2 BZN035 定量法マウスにおける抗マウス IL-17A サロゲート抗体 BZN035 の血清中濃度を測定する ELISA 法を

開発した [Table 2.6.5.2C-NBx RS599323]。

組換えマウス IL-17A をマイクロタイタープレートに固相化した後，ビオチン化 BZN035 と試

料（検量線試料，QC 試料又は未知試料）の混合物を添加してインキュベートすることにより，

IL-17A に対して競合的に結合させた。非結合物質は洗浄により除去した。HRP 標識ストレプト

アビジン及び基質である OPD を添加してインキュベートすることにより，固相化した IL-17A に

結合したビオチン化 BZN035 を検出した。

マウス血清を用いてバリデーションを行った結果，LLOQ は 7.00 µg/mL，ULOQ は 75.2 µg/mL

であった。日内変動の真度及び精度はそれぞれ 91.2～113.0%，1.4～14.3%，日間変動の真度及び

精度はそれぞれ 97.4～109.0%，6.7～9.8%であった。マウス血清に BZN035 を添加して調製した


試料を用いてマウス血清中 BZN035 の安定性について検討した結果，室温では 24 時間，2～8°C

では 12 日間，−15～−30°C では 3 ヵ月間及び−65～−90°C では 8 ヵ月間安定であった。また，3 回

の凍結融解サイクルで安定であった。

2.3 総 IL-17A 定量法カニクイザルにおける IL-17A の血清中濃度を測定するサンドイッチ ELISA 法を開発した

[Table 2.6.5.2D-BMD R0450379，BMD R0450379-01，BMD R0450379-02，BMD R0450379-03]。

抗ヒト IL-17 モノクローナル抗体をマイクロタイタープレートに固相化した。血清試料（検量

線試料，QC 試料又は未知試料）を添加してインキュベートした後，結合しなかった物質を洗浄

により除去した。結合した IL-17 は，ビオチン化ヤギ抗ヒト IL-IgG 抗体を用いて検出した。プレ

ートを洗浄して結合しなかったビオチン化抗体を除去した後，HRP 標識ストレプトアビジンを添

加してインキュベートした。結合しなかった酵素を洗浄により除去し，発色基質として OPD を

添加してインキュベートした。酸を添加して反応を停止させ，吸光度を測定した。

カニクイザル血清を用いてバリデーションを行った結果，LLOQ は 81.9 pg/mL，ULOQ は

20000 pg/mLであった。日内変動の真度及び精度はそれぞれ 60.0～115.5%，0.7～7.5%，日間変動

の真度及び精度はそれぞれ 88.8～95.5%，15.6～20.3%であった。カニクイザル血清に IL-17A を

添加して調製した試料を用いてカニクイザル血清中 IL-17A の安定性について検討した結果，−15

～−35°C または−65～−90°C で少なくとも 12 ヵ月間，及び 3 回の凍結融解サイクルで安定であっ

た。

2.4 抗セクキヌマブ抗体定量法カニクイザルにおける抗セクキヌマブ抗体の血清中濃度を測定する表面プラズモン共鳴法

（BIAcoreTMアッセイ）を開発した [Table 2.6.5.2E-NBx RS562201，NBx RS562201-01]。

プロテイン G を用いてセンサーチップにセクキヌマブを固定し，チップ表面に血清試料を添加

する。固定したセクキヌマブに抗セクキヌマブ抗体が結合すると，チップ表面近傍の屈折率（質

量）が変化することを利用し，この質量変化を BIAcoreTMで測定した。

カニクイザル血清を用いてバリデーションを行った結果，LLOQ は 3.40 任意単位（AU）（874

倍希釈），ULOQ は 6.96 AU（27 倍希釈）であった。QC サンプルの日内変動の真度及び精度は

それぞれ 95.1～101.8%，0.1～1.3%，日間変動の真度及び精度はそれぞれ 95.8～101.4%，0.0～

0.7%であった。

2.5 抗 BZN035 抗体定量法マウスにおける抗 BZN035 抗体の血清中濃度を測定するブリッジング ELISA 法を開発した

[Table 2.6.5.2F-NBx RS586091]。

BZN035 をマイクロタイタープレートに直接固相化した。未知試料を添加してインキュベート

することにより，固相化した BZN035 に抗 BZN035 抗体を捕捉させ，ビオチン化 BZN035 を添加


することにより，これを検出した。HRP 標識ストレプトアビジン及び発色基質である BM Blue

POD を添加してインキュベートした後，吸光度を測定した。

マウス血清を用いてバリデーションを行った結果，LLOQ は 1 µg/mL，ULOQ は 15 µg/mL であ

った。QC の日内変動の真度及び精度はそれぞれ 95.2～100.7%，11.4～14.5%，日間変動の真度及

び精度はそれぞれ 85.2～98.1%，5.3～8.7%であった。

3 吸収雄性カニクイザルを用いて細胞株及び CHO 細胞株由来セクキヌマブの単回静脈内投与

及び単回皮下投与後の薬物動態を評価した [Table 2.6.5.3A-DMPK R0400373，DMPK R0600743-1]。

カニクイザルの PK 試験においては，それぞれの細胞株由来セクキヌマブ 10 mg/kg を単回静脈内

投与及び 15 mg/kgを単回皮下投与した。

カニクイザルに細胞株由来のセクキヌマブを静脈内投与したときの個体間のばらつきは

小さく，AUCinf 及び C0（0 時間に外挿した濃度）は，それぞれ 3450～4800 µg·day/mL 及び 239

～262 µg/mL であった。最高血清中濃度到達時間（Tmax）は投与後 2～3 日の範囲であり，皮下

投与した際のバイオアベイラビリティの平均値は 94%であった。

カニクイザルに CHO 細胞株由来のセクキヌマブを静脈内投与したときの個体間のばらつきは

小さかった。Tmax は投与後約 2 日であった。皮下投与した際のバイオアベイラビリティの平均

値は 62%と推定され，由来のセクキヌマブで得られた値よりも低かったものの，皮下投与

後の AUC 平均値は両試験でほぼ同程度であった。

4 分布セクキヌマブはヒト型 IgG モノクローナル抗体であることから，抗原非特異的な分布は内因性

IgG と同様であると考えられる。また，他の IgG 型の抗体医薬品の放射性標識体を用いた組織分

布試験においても，正常組織中の放射能濃度推移はコントロールのヒト IgG と同様であり，組織

特異的な分布は認められないことが報告されている（Fox et al. 1996，Kamath et al. 2012）。さら

にセクキヌマブの分布容積は，日本人健康被験者にセクキヌマブ 1～10 mg/kg を静脈内投与した

ときは 4.23～5.34 L，外国人健康被験者にセクキヌマブ 10 mg/kg を静脈内投与したときは 5.05 L

と小さく，血管外への移行は限られていることが示唆された（2.7.2-3.1.2 項）。以上のことから，

セクキヌマブの組織分布試験は実施しなかった。

4.1 雄性カニクイザルを用いた単回静脈内投与 PK 試験雄性カニクイザルを用いて細胞株及び CHO 細胞株由来のセクキヌマブ単回静脈内投与

後の薬物動態を評価した [Table 2.6.5.3A-DMPK R0400373，DMPK R0600743-1]。細胞株及び

CHO 細胞株由来のセクキヌマブの定常状態における分布容積（Vss）は各々74.5 mL/kg 及び

59.0 mL/kgであった。一般的にカニクイザルの血液の容積は約 73 mL/kgであると報告されており


（Davies and Morris 1993），セクキヌマブの Vss と近いことから，セクキヌマブは主に血液中に

分布するものと推察される。

4.2 胚・胎児発生に関する試験及び胎盤通過試験妊娠したカニクイザル 5 例に，妊娠 100 日にセクキヌマブを 100 mg/kg の用量で単回静脈内投

与し，母体及び胎児血清中のセクキヌマブ濃度を測定した [Table 2.6.5.3C-0-NBx R0580148]。カ

ニクイザルの帝王切開日における胎児血清中濃度（平均値）は，母体血清中濃度（平均値）の

2.2%であった。

カニクイザルの胚・胎児発生に関する試験 [Table 2.6.7.13-0770202] における母体の TK データ

及び胎児の血清及び羊水中のセクキヌマブ濃度をTable 4-1及びTable 4-2に示す。妊娠カニクイザ

ルの器官形成期及び胎児発育期（妊娠 20 日から 90 日）中にセクキヌマブを週 1 回皮下投与した。

TK データから，投与群のすべての動物がセクキヌマブの曝露を受けたことが示された（Table 4-

1）。妊娠 90 日における母動物の Cmax 及び AUC0-168h は，検討した用量範囲（15，50，

150 mg/kg）で用量に比例して増加した。検討した 3 用量群（15，50，150 mg/kg）において，妊

娠 100 日の計画殺前に採取した母体及び胎児血清中のセクキヌマブ濃度平均値はそれぞれ 312～

2890 µg/mL 及び 91.4～562 µg/mL であり，胎児血清中濃度は母体血清中濃度の 19.4～29.3%であ

った。15～150 mg/kg における羊水中のセクキヌマブ濃度は 10.7～85.8 µg/mL であり，母体血清

中濃度の 3.0～3.4%であった（Table 4-2）。投与群の胎児血清中にセクキヌマブが検出されたこ

とから，セクキヌマブは胎盤を通過することが確認された

Table 4-1 妊娠カニクイザルの器官形成期中にセクキヌマブを週 1 回皮下投与したと

きの母体の TK パラメータ（妊娠 90 日）投与量 (mg/kg) 15 a 50 a 150 b

TK パラメータ平均 CV% 平均 CV% 平均 CV%

Tmax (h) 58.3 - 68.6 - 36.9 - Cmax (µg/mL) 493 21.8 1680 15.7 5070 23.2 Cmax/投与量 (µg/mL)/(mg/kg) 32.8 21.8 33.5 15.7 33.8 23.2 AUC0-168h (µg·h/mL) 70000 20.0 245000 14.8 710000 21.7

AUC0-168h/投与量 (µg·h/mL)/(mg/kg)

4670 20.0 4900 14.8 4740 21.7

Source: Table 2.6.7.13-0770202 a n=14；b n=13。

Table 4-2 妊娠 100 日目における胎児血清中及び羊水中のセクキヌマブ濃度投与量 (mg/kg) 15 a 50 a 150 b

セクキヌマブ濃度平均 CV (%) 平均 CV (%) 平均 CV (%)

胎児血清 (µg/mL) 91.4 33.6 201 32.0 562 42.7

羊水 (µg/mL) 10.7 55.5 27.9 35.6 85.8 39.2

Source: Table 2.6.7.13-0770202 a n=14；b n=13。

Novartis Confidential Page 10 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 5 代謝

IgG はエンドサイトーシスを伴う細胞内の異化作用により体内から消失することが知られてい

るため，セクキヌマブの代謝については検討していない。

6 排泄雄性カニクイザルを用いて細胞株及び CHO 細胞株由来のセクキヌマブ単回静脈内投与

後の薬物動態を評価した [Table 2.6.5.3A-DMPK R0400373，DMPK R0600743-1]。カニクイザルに

細胞株及び CHO 細胞株由来のセクキヌマブを 10 mg/kg の用量で単回静脈内投与したとき，

全身血清クリアランス（CL）は，それぞれ 2.76 及び 1.80 mL/kg/day であり，肝血流量（約

63 L/kg/day）に比べて極めて低く，肝からの消失はわずかであることが示唆された。また，α 相

の半減期（T1/2）はそれぞれ 0.6 日及び 0.95 日であり，β相の T1/2 はそれぞれ 20.1 及び 24.0日で

あった。

7 薬物動態学的薬物相互作用チトクローム P450 や UDP-グルクロン酸転移酵素のような一般的代謝酵素は免疫グロブリンの

蛋白分解に関与しないことから，セクキヌマブ及び対応するマウスサロゲート抗体 BZN035 の in

vitro 及び in vivo 非臨床薬物相互作用試験は実施していない。

8 その他の薬物動態試験

8.1 カニクイザルにおけるセクキヌマブのトキシコキネティクス

8.1.1 単回皮下投与毒性試験カニクイザルに CHO 細胞株由来のセクキヌマブを 15 及び 150 mg/kg の用量で単回皮下投与し

た毒性試験において，TK パラメータを算出した [Table 2.6.7.5-0870084]。Tmax は 48～96時間（2

～4 日）の範囲であった。Cmax 及び AUC0-168hは，15～150 mg/kgの用量範囲で用量比例性を示

し，曝露量に性差は認められなかった。150 mg/kg 群の 29 日目までの期間で算出した見かけの終

末相 T1/2 は，雄で 386 時間（16.1日），雌で 282時間（11.8 日）であり，治療用ヒトモノクロー

ナル IgG1 抗体製剤で認められる一般的な値の範囲内であった。抗セクキヌマブ抗体検出用血清

試料の分析は行わなかった。

8.1.2 13 週間反復皮下投与毒性試験 CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザルの 13 週間反復皮下投与毒性試験におい

て，TK パラメータを算出した [Table 2.6.7.7A-0770712]。1，36 及び 85 日目の TK データをTable

8-1に示す。カニクイザルにはセクキヌマブを 0，15，50 及び 150 mg/kg の用量で週 1 回投与した。

初回投与日を 1 日目として，1，36 及び 85 日目の投与前及び投与後 1，2，3，4 及び 7 日目に血


清試料を採取した。1，36 及び 85 日目における用量補正した AUC0-168h 及び Cmax 値は，15，

50 及び 150 mg/kg の用量間で用量に比例して増加し，性差は認められなかった（Table 8-1）。用

量補正した AUC0-168h及び Cmax は 1 日目と 36 日目の間で 2.5～3.8 倍，36 日目と 85日目の間で

1.0～1.4 倍に増加した（Table 8-1）。したがって，セクキヌマブが蓄積すること及び週 1 回の 6

回投与によりほぼ定常状態に達することが明らかになった。休薬期間中の 150 mg/kg 群の動物か

ら見かけの終末相 T1/2 を算出したところ，平均終末相 T1/2 は雄で 16.0日，雌で 11.1 日であった。

Table 8-1 13 週間反復皮下投与毒性試験における TK パラメータ（1，36，85 日目） CHO 由来セクキヌマブを用いた 13週間反復皮下投与毒性試験

性別動物数投与量 (mg/kg)

試料採取日 AUC0-168h (µg·h/mL)

AUC0-168h/投与量 (µg·h/mL)/ (mg/kg)

Cmax (µg/mL)

Tmax(day)

雄 n=5 150 1 日目 234000 1560 1820 2.8

雌 n=5 150 1 日目 217000 1440 1700 2.8

雄 n=5 150 36 日目 623000 4150 4630 1.8

雌 n=5 150 36 日目 743000 4950 5360 2.8

雄 n=5 150 85 日目 787000 5250 5310 3.0

雌 n=5 150 85 日目 834000 5560 5600 2.6

Source: Table 2.6.7.7A-0770712

8.1.3 4 週間反復静脈内投与毒性試験細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザル 4 週間反復静脈内投与毒性試験におい

て，TK パラメータを算出した [Table 2.6.7.7B-0480179]。4週間反復投与における 22日目の TK デ

ータをTable 8-2に示す。カニクイザルにセクキヌマブを 0，10，30 及び 100 mg/kg の用量で週 1

回 4 週間投与した。血清試料を 1 及び 22 日目の投与前及び投与後 0.083，1，8，24 及び 168 時間

に採取した。さらに 100 mg/kg 投与群では，8 週間の休薬期間を設けて，休薬期間中にも血清試

料を採取した。1 及び 22 日目の用量補正した AUC0.083-168h 及び Cmax に基づき，10～

100 mg/kg の用量範囲で AUC 及び Cmax は用量に比例して増加し，明らかな性差は認められなか

った（Table 8-2）。また，用量補正した AUC0.083-168h は，初回投与時から 4 回投与後の 22 日

目には 2～3 倍増加し，Cmax も 1.5～2 倍上昇し，セクキヌマブが蓄積することが確認された。

CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザル 4 週間反復静脈内投与毒性試験におい

て，TK パラメータを算出した [Table 2.6.7.7C-0770204]。4週間反復投与における 22日目の TK デ

ータをTable 8-2に示す。カニクイザルにセクキヌマブを 0，15，50 及び 150 mg/kg の用量で週 1

回 4 週間投与した。血清試料を 1 及び 22 日目の投与前及び投与後 0.083，1，8，24 及び 168 時間

に採取した。さらに 150 mg/kg 投与群では，10 週間の休薬期間を設けて，この期間中にも血清試

料を採取した。細胞株由来のセクキヌマブを用いた上述の試験同様，1 及び 22 日目の

AUC0.083-168h は，性別に関係なく，15～150 mg/kg の用量範囲で用量にほぼ比例して増加した

（Table 8-2）。また，用量補正した AUC0.083-168h は 1 日目と 22 日目の間で約 2 倍増加し，セ


クキヌマブが蓄積することが確認された。両試験の用量補正した Cmax 及び AUC0.083-168h を比

較した結果，及び CHO 細胞株由来セクキヌマブ間で曝露量において差は認められなかった。

Table 8-2 カニクイザルに 4 週間反復静脈内投与したときの TK パラメータ（22 日

目）由来セクキヌマブ(0480179)

投与量 (mg/kg) 10 30 100

TK パラメータ雄雌雄雌雄雌

Tmax (h) 0.083 0.083 0.083 0.083 0.083 0.083 Cmax (µg/mL) 443 509 1395 1309 4760 4810 Cmax/投与量 (µg/mL)/(mg/kg) 44.3 50.9 46.5 43.6 47.6 48.1 AUC0.083-168h (µg·h/mL) 49200 50500 139000 130000 463600 517800 AUC0.083-168h/投与量 (µg·h/mL)/(mg/kg)

4920 5050 4630 4330 4640 5180

T1/2 (day) - - - - 13.7 20.0

CHO 由来セクキヌマブ (0770204)

投与量 (mg/kg) 15 50 150

TK パラメータ雄雌雄雌雄雌

Tmax (h) 0.083 8.96 0.083 0.083 0.266 0.083 Cmax (µg/mL) 711 573 2110 2960 7660 6260 Cmax/投与量 (µg/mL)/(mg/kg) 47.4 38.2 42.2 59.2 51.0 41.7 AUC0.083-168h (µg·h/mL) 70100 75000 223000 302000 786000 661000 AUC0.083-168h/投与量 (µg·h/mL)/(mg/kg)

4670 5000 4460 6040 5240 4407

T1/2 (day) - - - - 11.6 14.6 Source: Table 2.6.7.7B-0480179, Table 2.6.7.7C-0770204

8.1.4 26 週間反復静脈内投与毒性試験 CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザルの 26 週間反復静脈内投与毒性試験にお

いて，TK パラメータを算出した [Table 2.6.7.7D-0770203]。1 及び 176 日目の TK データをTable 8-

3に示す。カニクイザルにセクキヌマブを 0，15，50 及び 150 mg/kgの用量で週 1 回投与した。血

清試料を 1，85 及び 176 日目の投与前及び投与後 0.083，1，8，24 及び 168 時間に採取した。セ

クキヌマブの Cmax 及び AUC0-168h は，雌雄いずれにおいても，15～150 mg/kg の用量範囲で用

量に比例して増加した。150 mg/kg 群の動物における見かけの T1/2 は雄で 576 時間（24.0 日），

雌で 708 時間（29.5日）であった。算出された T1/2は，この動物種においてヒト IgG 投与で認め

られる一般的な値の範囲内であった。

Novartis Confidential Page 13 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab Table 8-3 26 週間反復静脈内投与毒性試験における TK パラメータ（1，176 日目） CHO 由来セクキヌマブを用いた 26週間反復静脈内投与毒性試験

性別動物数投与量 (mg/kg)

試料採取日 AUC0-168h (µg·h/mL)

AUC0-168h/投与量 (µg·h/mL)/ (mg/kg)

Cmax (µg/mL)

T1/2 (day)

雌雄 n=12 150 1 日目 297000 1980 3940 -

雌雄 n=12 150 176日目 876000 5840 8620 27.7 1)

Source: Table 2.6.7.7D-0770203 1) n=3，動物 4 例中 1例の T1/2 は R2が 0.75 未満であるため，解析から除外

8.2 マウス生殖発生毒性試験における BZN035 のトキシコキネティクス BZN035 のマウスを用いた受胎能試験において血清中 BZN035 濃度を測定した [Table 2.6.7.12-

S497027]。雄マウスに少なくとも交配前 4 週間，交配期間中及び剖検時まで，BZN035 を週 1 回

投与した後，64 又は 65 日目に血清中 BZN035 濃度を測定した。また，雌については，週 1 回の

頻度で交配前 2 週間，交配期間中及び妊娠 6 日に BZN035 を投与した後，妊娠 13 日に血清中

BZN035 濃度を測定した。マウスに BZN035 を 15，50 及び 150 mg/kg の用量で週 1 回皮下投与し

たときの 64/65 日目における雄の平均血清中 BZN035 濃度及び妊娠 13 日における雌の血清中

BZN035 濃度は用量依存的に増加した。

マウスを用いた出生前及び出生後の発生に関する試験において血清中 BZN035 濃度を測定した

[Table 2.6.7.14-S497028]。妊娠 6，11，17日及び分娩後 4，10，16 日のマウスに BZN035を皮下投

与し，妊娠 6，11，17 日及び分娩後 4，10，16，21，22 日の母動物，妊娠 17 日の胎児，並びに

分娩後 4，10，16，21，22 日の出生児の血清中 BZN035 濃度を測定した。分娩後 49 日に，回復

群の母動物及び出生児雌雄の血清中 BZN035 濃度を測定した。投与群のすべての母体血清中から

BZN035 が検出され，胎児血清中にも母体と同様に BZN035 が検出されたことから，マウスにお

いて BZN035 は胎盤を通過するものと考えられた。母動物の妊娠 6 日及び分娩後 16 日における

AUC0-72h 及び Cmax は，15～150 mg/kg の用量範囲で用量に比例して増加した。分娩後 16 日の

曝露量は妊娠 6 日の約半分であった。分娩後 16 日の雌雄の出生児の AUC0-72h 値は，母動物と

比較して 1.3～1.8倍であった。最高用量である 150 mg/kg群の回復群の母動物の分娩後 49 日にお

ける血清中 BZN035濃度は，雌雄の出生児に比べて約 2 倍高かった。

8.3 総 IL-17A の体内動態セクキヌマブを用いたカニクイザルの単回投与 PK 試験及び単回投与毒性試験において，総

IL-17A の血清中濃度を測定した（4.2.2.2-1-DMPK R0400373），[Table 2.6.7.5-0870084]。総 IL-

17A 濃度は投与後速やかに上昇し始め，投与後 72～168 時間に最高値に達した。その後，総 IL-

17A濃度は徐々に低下した。

セクキヌマブをカニクイザルに 15，50 及び 150 mg/kg の用量で静脈内又は皮下投与した 4，13

及び 26 週間反復投与毒性試験において，総 IL-17A 濃度を測定した [Table 2.6.7.7C-0770204]，

[Table 2.6.7.7A-0770712]，[Table 2.6.7.7D-0770203]。


カニクイザルを用いた 13 週間反復皮下投与毒性試験において，プラセボ対照群のいずれの試

料中にも IL-17A は検出されなかった。セクキヌマブ投与群の IL-17A 濃度に個体間で大きなばら

つきが認められた。セクキヌマブ投与群において，IL-17A 濃度は 29 日目まで上昇した。

50 mg/kg 群において，総 IL-17A 濃度は 29 日目から 92 日目まで一定であり，中央値は 1000～

1330 pg/mLの間で変動した。150 mg/kg群における IL-17A濃度は 29 日目から 92 日目まで一定で

あり，50 mg/kg 群でみられた濃度と同程度であった。休薬期間中，IL-17A 濃度は徐々に低下した。

個体間変動が大きかったため，IL-17A の分泌及び捕捉についての性差は評価できなかった。

カニクイザルを用いた 26 週間反復静脈内投与毒性試験においても，IL-17A 濃度に個体間で大

きなばらつきが認められた。初回投与後 8 時間，24 時間又はそれ以降に定量可能な IL-17A が血

清中に認められるようになり，すべての用量の大部分の動物において，LLOQ を超える IL-17A

が検出された。その後の週 1 回反復投与によって血清中 IL-17A 濃度は上昇した。個体間変動を

考慮すると，IL-17A の分泌及び捕捉に関する性差はほとんどないと考えられる。

以上のことから，カニクイザルにおいてセクキヌマブ投与によって総 IL-17A は上昇し，休薬

期間では減少することから，セクキヌマブはカニクイザル IL-17A を標的としていることが示唆

された。

8.4 セクキヌマブの免疫原性セクキヌマブを用いたカニクイザルの単回投与及び反復投与によるすべての非臨床 PK 試験及

び毒性試験において，免疫原性について検討した。細胞株由来セクキヌマブを用いた単回

皮下投与 PK 試験（4.2.2.2-1-DMPK R0400373）において，3 例中 1 例で投与後 36 日目以降，免疫

原性が認められた（4.2.2.2-5-BMD R0550037）。また，及び CHO 細胞株由来セクキヌマブ

を用いた単回静脈内投与 PK 試験（4.2.2.2-3-DMPK R0800115）において，細胞株由来セク

キヌマブを静脈内投与した個体 3 例中 1 例において投与後 14 日目以降で免疫原性が認められた

（4.2.2.2-6-NBx R0800115-01）。カニクイザルの 13 週間反復皮下投与毒性試験 [Table 2.6.7.7A-

0770712] において，150 mg/kg 群の 1 例で免疫原性が認められた。しかしながら，免疫原性が確

認された個体におけるセクキヌマブの曝露には影響はなかった。カニクイザルの 26 週間反復静

脈内投与毒性試験 [Table 2.6.7.7D-0770203] 及び 4 週間反復静脈内投与毒性試験 [Table 2.6.7.7B-

0480179]，[Table 2.6.7.7C-0770204]において，免疫原性は認められなかった。カニクイザルの

胚・胎児発生に関する試験 [Table 2.6.7.13-0770202] において，抗セクキヌマブ抗体の有無につい

て検討したところ，母体及び胎児血清のいずれにおいても，陽性反応は認められなかった。

8.5 BZN035 の免疫原性マウスの受胎能試験 [Table 2.6.7.12-S497027] 並びに出生前及び出生後の発生に関する試験

[Table 2.6.7.14-S497028] の両試験で，抗体反応の確認を行ったすべての血清試料で免疫原性は認

められなかった。

Novartis Confidential Page 15 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 8.6 製造方法の異なるセクキヌマブの薬物動態

製造方法の変更が，PK に与える影響を検討するため，細胞株並びに CHO 細胞株を用い

て製造したセクキヌマブを用いたカニクイザル PK 試験を実施した [Table 2.6.5.3B-DMPK

R0800115]。異なる細胞株由来のセクキヌマブの PK パラメータをTable 8-4に示す。細胞株

並びに CHO 細胞株由来のセクキヌマブを 10 mg/kg の用量でカニクイザルに単回静脈内投与した。

細胞由来セクキヌマブでは，CHO 細胞由来セクキヌマブに比べて，Cmax 及び AUCinf は若

干，高く，CL及び Vss は若干，低かったものの，大きく変わらなかった（Table 8-4）。

Table 8-4 異なる細胞株由来のセクキヌマブの PK パラメータ細胞株細胞 CHO 細胞

PK パラメータ個体番号 3 個体番号 4 個体番号 1 個体番号 2

Cmax (µg/mL) 393 453 258 290 AUCinf (µg·day/mL) 3200 4980 2460 2900 終末相 T1/2 (day) 11 19 12 19 CL (mL/kg/day) 3.1 2.0 4.1 3.5 Vss (mL/kg) 46 50 64 82

Source: 4.2.2.2-3-DMPK R080u0115-Table 6-3， Table 6-4

8.7 カニクイザル及びヒトの薬物動態の比較

8.7.1 PK パラメータの比較カニクイザル（ 4.2.2.2-1-DMPK R0400373 ， 4.2.2.2-2-DMPK R0600743-1 ）及び乾癬患者

（5.3.5.1-3-A2212 試験）に静脈内投与したときの PK パラメータを比較した。PK パラメータの比

較をTable 8-5に示す。カニクイザル及びヒトの PK パラメータはほぼ同程度であった。カニクイ

ザル及びヒトの FcRn に対するセクキヌマブの結合活性が同程度であることから（4.2.1.1-16-RD-

2013-00072），カニクイザルとヒトにおけるセクキヌマブの PK プロファイルは類似しているも

のと推察される。

Table 8-5 カニクイザル及びヒトにおける PK パラメータカニクイザル乾癬患者 c) PK パラメータ a) CHO b) CHO

投与量 10 mg/kg 静脈内 10 mg/kg静脈内 10 mg/kg静脈内 Cmax (µg/mL) 253 d) 319 d) 258 CL (mL/kg/day) 2.76 1.8 2.2 Vz (mL/kg) n.a. n.a. 92 Vss (mL/kg) 74.5 59.0 n.a. T1/2 (day) 20.1 24.0 30.7

a) 4.2.2.2-1-DMPK R0400373で得られたパラメータ b) 4.2.2.2-2-DMPK DMPK R0600743-1 で得られたパラメータ c) CHO 由来原薬を用いた 5.3.5.1-3-A2212試験の結果（クリアランス及び分布容積は平均体重 90 kgで補正） d) 静脈内投与直後の薬物濃度を外挿した値 C0

n.a.：該当せず

Novartis Confidential Page 16 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 8.7.2 シミュレーションに基づいた曝露の比較

乾癬患者を対象とした静脈内及び皮下投与による複数の第 III 相試験で得られた薬物動態デー

タに基づいて，母集団 PK モデルを用いて各用法・用量での平均濃度推移のシミュレーションを

行い（5.3.3.5-1-PPK），カニクイザル皮下投与試験の無毒性量（NOAEL）である 150 mg/kg にお

ける TK データと比較した。ヒトの血清中シミュレーション濃度推移とカニクイザル皮下投与試

験の NOAEL（150 mg/kg）における血清中濃度推移の比較をFigure 8-1に，導入期及び維持期の曝

露量の比較をTable 8-6に示す。

0，1，2，3 及び 4 週目に導入投与として 300 又は 150 mg を皮下投与した後，8 週目から 48 週

目まで 4 週間隔で維持投与を行ったときの血清中濃度推移を母集団 PK モデルにより推定した。

ヒトの曝露量比を算出するためのカニクイザルにおける曝露量として，週 1 回 13 週間反復皮下

投与毒性試験の NOAEL である 150 mg/kg での定常状態における最高血清中濃度 Cmax,ss である

5455 µg/mL，及び定常状態における AUC0-τ を投与間隔 τ で割って算出した定常状態の平均血清

中濃度 Cav,ss である 4824 µg/mLを用いた。乾癬患者に 150 及び 300 mgを月 1 回皮下に維持投与

したときに予想される平均血清中濃度と，カニクイザルを用いた週 1 回 13 週間反復皮下投与試

験の定常状態における平均血清中濃度を比較して算出した曝露量の比は，各々，217 及び 108 倍

であった。また，導入期終了時のヒト曝露量は，維持期の約 2 倍であり，導入期の曝露量比は

各々，97 及び 48 倍であった。したがって，カニクイザル 13 週間反復皮下投与毒性試験の

NOAEL である 150 mg/kg における曝露量は，乾癬患者におけるセクキヌマブの曝露量よりも高

いことが示された。

Novartis Confidential Page 17 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab Figure 8-1 カニクイザル TK（実測値）及びヒト PK（推定値）の比較

Source: 5.3.3.5-1-PPK-Post-text Figure 9-3

Novartis Confidential Page 18 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab Table 8-6 カニクイザル及びヒトにおける全身曝露量の比較乾癬患者における曝露量カニクイザルとの曝露量比導入期維持期

投与量

Cav,ind/ Cav,main (µg/mL) a)

Cmax,ind/ Cmax,main (µg/mL) b)

皮下投与時の

NOAELにおけ

る Cav,ss (4824 µg/mL) c)

皮下投与時の

NOAELにおけ

る Cmax,ss (5455 µg/mL) c)

皮下投与時の

NOAELにお

ける Cav,ss (4824 µg/mL)

d)

皮下投与時の

NOAELにお

ける Cmax,ss (5455 µg/mL)

d) 150 mg e 49.9 / 22.2 51.7 / 27.4 97 106 217 199

300 mg f 99.8 / 44.5 103 / 54.8 48 53 108 100

a) Cav,ind；導入期における 5回目投与後の推定平均セクキヌマブ濃度（AUC28-35d/7日） Cav,main；維持期の定常状態における推定平均セクキヌマブ濃度（AUC0-τ/τ，τ = 28 日） b) Cmax,ind；導入期における 5 回目投与後の推定最高セクキヌマブ濃度 Cmax,main；維持期の定常状態における推定最高セクキヌマブ濃度 c) 乾癬患における Cav,ind及び Cmax,ind 推定値とカニクイザルを用いた 13週間反復皮下投与毒性試験の NOAELである 150 mg/kgにおける Cav,ss 及び Cmax,ss との導入期における比較（カニクイザル毒性試験及び乾癬患者を

対象とした臨床試験における τ（投与間隔）は 7日） d) 乾癬患者における Cav,main 及び Cmax,main 推定値とカニクイザルを用いた 13 週間反復皮下投与毒性試験の

NOAELである 150 mg/kgにおける Cav,ss 及び Cmax,ss との維持期における比較（τ（投与間隔）は，カニクイザ

ル毒性試験では 7 日であり，乾癬患者の維持期では 28日） e) 0，1，2，3 及び 4 週目に 150 mg皮下投与し，8 週目以降 4 週間間隔で 150 mg皮下投与 f) 0，1，2，3 及び 4週目に 300 mg皮下投与し，8 週目以降 4週間間隔で 300 mg皮下投与

8.8 カニクイザルにおける遊離型 IL-17A のシミュレーション毒性試験で用いた用量の妥当性を評価するため，セクキヌマブの IL-17A 阻害作用を測る指標

として，遊離型 IL-17A 濃度を推定した。遊離型 IL-17A 濃度は，カニクイザルを用いた毒性試験

のセクキヌマブ濃度及び総 IL-17A 濃度推移にフィットするセクキヌマブ-IL-17A 結合モデル式か

ら算出した（4.2.2.7-1-MS S605346A）。末梢コンパートメントにおける遊離型 IL-17A の割合の

シミュレーション結果をFigure 8-2に示す。

セクキヌマブと IL-17A の間の結合は，その消失及び分布に要する時間と比べて非常に速いた

め，セクキヌマブ，IL-17A 及び複合体の間での平衡状態に関して，以下の式で表される準定常状

態を仮定した。

Kd = [IL-17A][セクキヌマブ] / [IL-17A – セクキヌマブ]

[IL-17A]は IL-17A 二量体濃度，[セクキヌマブ]はセクキヌマブ濃度，[IL-17A – セクキヌマブ]

は薬物-標的分子複合体濃度，Kd は解離定数を示す。セクキヌマブ及び IL-17A の動態は，血清

コンパートメントの容積を V2，末梢コンパートメントの容積を V3 とした 2-コンパートメントモ

デルによって表した。このモデルでの主な仮定は，末梢コンパートメント（V3）において IL-

17A が経時的に一定速度で生成し，IL-17A – セクキヌマブ複合体は遊離型セクキヌマブと同じ

PK パラメータを共有し（インターコンパートメントクリアランス，クリアランス），セクキヌ

マブと IL-17A が同じコンパートメント V2 及び V3 に分布し，セクキヌマブ及び IL-17A は V2 か


ら消失するという仮定に基づいている。モデルには，すべての PK パラメータ，IL-17A 産生及び

セクキヌマブと IL-17A の間での結合親和性に関する個体間変動を組み，非線形混合効果を用い

てパラメータを推定した。IL-17A の阻害の程度を評価するため，25～500 mg/kg の用量を週 1 回

13 週間投与したときの遊離 IL-17A の割合についてシミュレーションを実施した。単回皮下投与

毒性試験（4.2.3-1-0870084），4 週間反復静脈内投与毒性試験（4.2.3.2-3-0770204），13 週間反復

皮下投与毒性試験（4.2.3.2-1-0770712）及び 26 週間反復静脈内投与毒性試験（4.2.3.2-4-

0770203）のデータを用いてモデルを構築した。データセット中には，動物全 87 例 2369 点のデ

ータが含まれ，その内訳は総血清中セクキヌマブ濃度（µg/mL）データ 1446 点及び総 IL-17 濃度

（pg/mL）データ 923 点であった。これらの試験で検討した用量は 15，50 及び 150 mg/kg であっ

た。このモデルは，カニクイザルにおけるセクキヌマブ濃度及び総 IL-17A 濃度推移に良好に適

合した。

このモデルから算出された PK パラメータについて，カニクイザルにおけるセクキヌマブの終

末相 T1/2 は 15.2 日であった。血漿及び末梢コンパートメントの分布容積は 0.11 及び 0.14 L であ

った。IL-17A のベースライン血清中濃度は 1.67 pg/mL，IL-17A の産生速度は 21.3 ng/day であっ

た。25～500 mg/kg の用量を週 1 回 13 週間投与したときのシミュレーションの結果，末梢コンパ

ートメントで用量依存的に遊離 IL-17A の割合が減少し，高用量になるに従って，遊離 IL-17A の

割合が変化しなくなることが明らかとなった（Figure 8-2）。25 mg/kg の用量における遊離型 IL-

17A 阻害率は 99.82%であり，用量が 25 から 50，150，300，400 及び 500 mg/kg まで増加したと

きの IL-17A阻害率の増加分は各々，0.12，0.04，0.02，0.01 及び 0.01%未満であった。

このモデルを用いたセクキヌマブ及び総 IL-17A 濃度推定値の解析から，毒性試験で使用した

150 mg/kg の用量を週 1 回投与したとき，13 週目の時点で，末梢の全 IL-17A の 99.96%にセクキ

ヌマブは結合可能であることが示された。用量を 500 mg/kg としたときのシミュレーションの結

果，150 及び 500 mg/kg の用量を比較したときの IL-17A 阻害率の増加分は 0.03%であり，遊離型

IL-17A 阻害率はわずかに上昇するに過ぎないと推定された。このことから，このモデル解析に基

づくと，カニクイザルを用いた毒性試験で使用した最高用量である 150 mg/kg は，IL-17A 阻害に

関連する標的作用を検討するのに適切であったことが示唆された。

Novartis Confidential Page 20 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab Figure 8-2 末梢コンパートメントにおける遊離型 IL-17Aの割合のシミュレーション

Source: 4.2.2.7-1-MS S605346A-Figure 7-1

9 考察及び結論セクキヌマブ及びそのマウスサロゲート抗体 BZN035 の PK 及び TK を評価するため，カニク

イザル及びマウスを用いて検討を行った。

セクキヌマブは IgG に典型的な薬物動態を示し，分布容積は小さく，クリアランスは低く，消

失半減期は 11～29 日であり，皮下投与後のバイオアベイラビリティは 60%を超えていた。カニ

クイザルにおけるセクキヌマブの曝露量は，検討した用量範囲内で用量比例性を示した。セクキ

ヌマブは開発中に原薬の製造方法を細胞株を用いた方法から CHO 細胞株を用いた方法に

変更した。製造方法の変更がセクキヌマブの PK に与える影響を検討するため，カニクイザルを

用いた PK 試験を実施した。その結果，製造方法の変更は PK に影響しないことが示された。

CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザルの 13 週間反復皮下投与毒性試験におい

て，TK パラメータを算出した結果，AUC0-168h 及び Cmax は，用量に比例して増加し，性差は

認められなかった。また，セクキヌマブは蓄積することが確認された。細胞株由来のセク

キヌマブを用いたカニクイザル 4 週間反復静脈内投与毒性試験において，TK パラメータを算出

した結果，AUC0.083-168h 及び Cmax は用量依存的に増加し，明確な性差は認められなかった。

また，セクキヌマブは蓄積することが確認された。CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカ

ニクイザル 4 週間反復静脈内投与毒性試験において，TK パラメータを算出した結果，由来

のセクキヌマブを用いた試験同様，AUC0.083-168h は，性別に関係なく，用量にほぼ比例して増

加した。また，セクキヌマブが蓄積することが確認された。両試験の用量補正した Cmax 及び

AUC0.083-168h を比較した結果，及び CHO 細胞株由来セクキヌマブ間で曝露量に差は認め

られなかった。CHO 細胞株由来のセクキヌマブを用いたカニクイザルの 26 週間反復静脈内投与


毒性試験において，TK パラメータを算出した結果，Cmax 及び AUC0-168h は，雌雄いずれにお

いても，15～150 mg/kgの用量範囲で用量依存的に増加した。

10 参考文献 [Davies B and Morris T (1993)] Physiological parameters in laboratory animals and humans. Pharmaceutical Research; 10 (7): 1093-5

[Fox JA, Hotaling TE, Struble C, et al. (1996)] Tissue distribution and complex formation with IgE of an anti-IgE antibody after intravenous administration in Cynomolgus monkeys. J Pharmacol Exp Ther; 279: 1000-8.

[Kamath AV, Williams SP, Bullens S, et al. (2012)] Pharmacokinetics and biodistribution of a human monoclonal antibody to oxidized LDL in cynomolgus monkey using PET imaging. PLoS One; 7: e45116.

11 図表

Table 11-1 種々の動物での PK 及び TK 試験一覧動物種／系統性別試験の種類

測定時点投与量（mg/kg/日）

投与経路

投与期間試験番号／報告書番号

カニクイザル雄 PK 10, 15 mg/kg AIN457 ( )

静脈内皮下

単回投与 DMPK R0400373

カニクイザル雄 PK 10, 15 mg/kg AIN457 (CHO)

静脈内皮下

単回投与 DMPK R0600743-1

カニクイザル雄 PK 10 mg/kg AIN457 ( , CHO)

静脈内単回投与 DMPK R0800115

カニクイザルマーモセット

雌帝王切開時の母動

物及び胎児血清に

おける TK

100 mg/kg AIN457

静脈内単回投与 NBx R0580148

カニクイザル雌雄 1 日目の TK 15, 150 mg/kg AIN457 (CHO)

皮下単回投与 0870084

カニクイザル雌雄 1 日目，36日目，85日目，13 週間の休

薬期間中の TK

15, 50, 150 mg/kg AIN457 (CHO)

皮下 1 日目から 85日目まで週 1回投与

0770712

カニクイザル雌雄 1 日目，22日目，8週間の休薬期間中

の TK

10, 30, 100 mg/kg AIN457 ( )

静脈内 1 日目から 22日目まで週 1回投与

0480179

カニクイザル雌雄 1 日目，22日目，10週間の休薬期間中

の TK

15, 50, 150 mg/kg AIN457 (CHO)


0770204

カニクイザル雌雄 1 日目，85日目，

176日目，13 週間の

休薬期間中の TK

15, 50, 150 mg/kg AIN457 (CHO)


0770203

Novartis Confidential Page 22 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 動物種／系統性別試験の種類

測定時点投与量（mg/kg/日）

投与経路

投与期間試験番号／報告書番号

カニクイザル雌最終投与日（妊娠

48 日又は 90日）及

び妊娠 100日におけ

る TK，妊娠 100 日

における胎児及び

羊水中 TK

15, 50, 150 mg/kg AIN457

皮下妊娠 20 日から

48 日又は 90日まで週 1回投与

0770202

マウス CrL:CD-1 (ICR)

雌雄雄：64/65日目にお

ける TK 雌：妊娠 13 日にお

ける TK

15, 50, 150 mg/kg BZN035

皮下週 1 回投与雄：交配前 4週間，交配期

間中及び剖検

時まで雌：交配前 2週間，交配期

間中及び妊娠

6 日

S497027

マウス CrL:CD-1 (ICR)

雌 (F0) 雌雄(F1)

F0：妊娠 6, 11, 17日及び分娩後 4, 10, 16, 21, 22, 49日にお

ける TK F1：妊娠 17 日及び

分娩後 4, 10, 16, 21, 22, 49 日におけるTK

15, 50, 150 mg/kg BZN035

皮下妊娠 6, 11, 17日及び分娩後

4, 10, 16日

S497028

2.6.5 薬物動態試験概要表

Novartis Confidential Page 2 2.6.5 薬物動態試験概要表 AIN457/Secukinumab

目次目次 .................................................................................................................................................. 2

略号一覧 ................................................................................................................................................ 3

2.6.5.1 薬物動態試験：一覧.............................................................................................................. 4

2.6.5.2A 薬物動態試験：分析方法 (BMD R04500253) (BMD R0450253-01) ............................... 5

2.6.5.2B 薬物動態試験：分析方法 (BMD R0550671-01) ............................................................... 6

2.6.5.2C 薬物動態試験：分析方法 (NBx RS599323) ...................................................................... 7

2.6.5.2D 薬物動態試験：分析方法 (BMD R0450379), (BMD R0450379-01), (BMD R0450379-02), (BMD R0450379-03) ............................................................................ 8

2.6.5.2E 薬物動態試験：分析方法 (NBx RS562201), (NBx RS562201-01) ................................... 9

2.6.5.2F 薬物動態試験：分析方法 (NBx RS586091) .................................................................... 11

2.6.5.3A 薬物動態試験：単回投与後の吸収 (DMPK R0400373) (DMPK R0600743-1) ............ 13

2.6.5.3B 薬物動態試験：単回投与後の吸収 (DMPK R0800115) ................................................ 14

2.6.5.3C 薬物動態試験：単回投与後の吸収 (NBx R0580148) .................................................... 15

2.6.5.4 薬物動態試験：反復投与後の吸収 .................................................................................... 16

2.6.5.5 薬物動態試験：分布............................................................................................................ 16

2.6.5.6 薬物動態試験：たん白結合 ................................................................................................ 16

2.6.5.7 薬物動態試験：妊娠動物における試験 ............................................................................ 16

2.6.5.8 薬物動態試験：その他の分布試験 .................................................................................... 16

2.6.5.9 薬物動態試験：in vivo における代謝 ................................................................................ 16

2.6.5.10 薬物動態試験：in vitro における代謝 ............................................................................. 16

2.6.5.11 薬物動態試験：推定代謝経路 .......................................................................................... 16

2.6.5.12 薬物動態試験：薬物代謝酵素の誘導／阻害 .................................................................. 17

2.6.5.13 薬物動態試験：累積排泄 .................................................................................................. 17

2.6.5.14 薬物動態試験：胆汁中排泄 .............................................................................................. 17

2.6.5.15 薬物動態試験：薬物相互作用 .......................................................................................... 17

2.6.5.16 薬物動態試験：その他 ...................................................................................................... 17


略号一覧略号省略していない表現（英）省略していない表現（日）

AU Absobance Unit 吸光度 AUC Area under the serum concentration-time curve 血清中薬物濃度-時間曲線下面積 BIA Biomolecular Interaction Analysis 生体分子間相互作用解析 C sample(s) (or CSs)

Calibration sample(s) 検量線試料

CHO Chinese hamster ovary チャイニーズハムスター卵巣 CL Clearance クリアランス Cmax Maximum serum concentration after a single

dose 最高血清中薬物濃度

CP Cut point カットポイント CPF Cut point factor カットポイントファクター CV Coefficient of variation 変動係数 ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay 酵素結合免疫吸着測定法 F or f female 雌 F Bioavailability in% バイオアベイラビリティー GLP Good Laboratory Practice 優良試験所基準 HRP Horseradish peroxidase セイヨウワサビペルオキシダーゼ IgG Immunoglubuline G 免疫グロブリン G ID Identification 個体識別番号 IL Interleukin インターロイキン i.v. Intravenous 静脈内 LLOQ Lower limit of quantification 定量下限 LOD Limit of detection 検出限界 M or m male 雄 QC sample(s) (or QCs)

Quality control sample(s) 精度管理試料

OD Optical density 吸光度 OPD O-phenylenediamine dihydrochloride — PK Pharmacokinetics 薬物動態 PL Parameter Logistic パラメータロジスティック RT Room temperature 室温 s.c. Subcutaneous 皮下投与 T1/2 Half life 半減期 ULOQ Upper limit of quantification 定量上限 Vss Steady state volume of distribution 定常状態における分布容積


2.6.5.1 薬物動態試験：一覧 Type of Study Test system or Species Admini-

stration Duration dosing Doses (mg/kg or

concentration) GLP compliance

Testing facility

Report number Location in Module 4

Analytical Method Target-based competitive ELISA for cynomolgus monkey serum

- - LLOQ: 1.2 µg/mL ULOQ: 222 µg/mL

Not required Novartis BS [BMD R0450253], [BMD R0450253-01]

4.2.2.1-1, 4.2.2.1-2

Analytical Method Anti-idiotype competitive ELISA for cynomolgus monkey serum

- - LLOQ: 80 ng/mL ULOQ: 2500 ng/mL

Not required Novartis BS [BMD R0550671-01] 4.2.2.1-3

Analytical Method Target-based competitive ELISA for BZN035 in mouse serum

- - LLOQ: 7 µg/mL ULOQ: 75.2 µg/mL

Not required Novartis BS [NBx RS599323] 4.2.2.1-4

Analytical Method Analysis of total IL-17A in cynomolgus serum

- - LLOQ: 81.9 pg/mL ULOQ: 20 ng/mL

Not required Novartis BS [BMD R0450379], [BMD R0450379-01], [BMD R0450379-02],[BMD R0450379-03]

4.2.2.1-9, 4.2.2.1-10, 4.2.2.1-11, 4.2.2.1-12

Immunogenicity method

Analysis of anti-secukinumab antibodies in cynomolgus serum

- - Not required Novartis BS [NBx RS562201], [NBx RS562201-01]

4.2.2.1-13, 4.2.2.1-14

Immunogenicity method

Analysis of anti-BZN035 antibodies in mouse serum

- - Not required Novartis BS [NBx RS586091] 4.2.2.1-15

Pharmacokinetics of AIN457

Cynomolgus monkey i.v., s.c. Single 10, 15 Not required Novartis EH [DMPK R0400373] 4.2.2.2-1

Pharmacokinetics of AIN457 (CHO)

Cynomolgus monkey i.v., s.c. Single 10, 15 Not required Novartis EH [DMPK R600743-1] 4.2.2.2-2

Pharmacokinetics of AIN457 ( , CHO)

Cynomolgus monkey i.v. Single 10 Not required Novartis EH [DMPK R0800115] 4.2.2.2-3

Placental transfer Cynomolgus monkey, marmoset

i.v. Single 100 Yes Covance Lab. Germany

[R0580148] 4.2.2.2-4

Novartis BS = Novartis Basel; Novartis EH = Novartis East Hanover


2.6.5.2A 薬物動態試験：分析方法 (BMD R04500253) (BMD R0450253-01) Report title Quantitative determination of AIN457 in cynomolgus monkey serum by a competitive ELISA (optimized assay procedure)

Method description and validation Report No. [BMD R0450253], [BMD R0450253-01] CTD location 4.2.2.1-1, 4.2.2.1-2 GLP compliance Not required Method Summary A purified recombinant IL-17A protein is coated on the microtiter plate. Serum samples (calibration samples, quality controls or unknown samples)

and biotin-labeled secukinumab are simultaneously incubated and compete for binding to the purified recombinant IL-17 protein. Non-bound material is removed by washing. Bound biotinylated- secukinumab is detected by incubating HRP-conjugated streptavidin with OPD as substrate.

Reference compound(s) Secukinumab Matrix analyzed Cynomolgus monkey serum Detection OD at 490 nm (reference filter: 650 nm) Validation Deviation within ±15% (±20% at LLOQ and ULOQ) from nominal concentration and precision CV between back-calculated concentrations of

duplicates ≤ 15% (20% at LLOQ and ULOQ) for CSs and QCs. At least two-third of the non-zero CSs within the working range of the assay need to pass.

Calibration curves 4PL fit: y= ((A-D)/(1 + ((x/C)^B)) + D, with x and y denoting drug concentration in a CS and the corresponding OD, respectively. LLOQ 1.2 µg/mL ULOQ 222 µg/mL Inter-matrix accuracy and Precision

Inter-matrix accuracy within the range 96.1% to 107.8% Inter-matrix precision within the range 6.6% to 18.8%

Stability Stable in spiked serum of cynomolgus monkey after 3 freeze/thaw cycles Stable in spiked serum of cynomolgus monkey for at least 4 weeks storage at or below -80°C


2.6.5.2B 薬物動態試験：分析方法 (BMD R0550671-01) Report title Quantitative determination of AIN457 in cynomolgus monkey serum by a competitive ELISA

Method description and validation Report No. [BMD R0550671-01] CTD location 4.2.2.1-3 GLP compliance Not required Method Summary A purified anti-idiotypic anti- secukinumab antibody is coated on the microtiter plate. Serum samples (calibration samples, quality controls or

unknown samples) and biotin-labeled secukinumab are simultaneously incubated and compete for binding on the anti-idiotypic anti- secukinumab antibody. Unbound material is removed by washing. Bound biotinylated secukinumab is detected by incubating HRP-conjugated to streptavidin with OPD as enzymatic substrate.

Reference compound(s) Secukinumab Matrix analyzed Cynomolgus monkey serum Detection OD at 490 nm (reference filter: 650 nm) Validation Bias of CS within ± 15% of the expected values within the working range (± 20% at LLOQ and ULOQ). 1 out of 6 CS within the working range

can be excluded. Bias of the QCs within ± 20% of the expected values and precision CV ≤ 20% for at least 2/3 of the QCs. At least 50% of the values at each QC level are fulfilling the acceptance criteria.

Calibration curves 4PL fit: y= ((A-D)/(1 + ((x/C)^B)) + D, with x and y denoting drug concentration in a CS and the corresponding OD, respectively. LLOQ 80 ng/mL ULOQ 2500 ng/mL Intra-day accuracy and Precision

Intra-day accuracy within the range 81.5% to 122.2% Intra-day precision within the range 1.2% to 18.1%

Inter-day accuracy and Precision

Inter-day accuracy within the range 96.4% to 106.1% Inter-day precision within the range 11.6% to 16.1%

Stability Stable in spiked monkey serum after 3 freeze-thaw cycles Stable in spiked monkey serum for at least 4 weeks storage at or below -80°C


2.6.5.2C 薬物動態試験：分析方法 (NBx RS599323) Report title Quantitative determination of AIN457 surrogate (BZN035) in mouse serum by a competitive ELISA

Method description and validation Report No. [NBx RS599323] CTD location 4.2.2.1-4 GLP compliance Not required Method Summary In this competitive assay format, purified recombinant mouse IL-17 is coated on a microtiter plate. Mouse serum samples (calibration samples,

quality control samples or unknown samples) are first mixed with a constant amount of biotinylated BZN035 followed by incubation of the solutions on the plate where BZN035 and biotinylated BZN035 compete for binding to IL-17. Finally, bound biotinylated BZN035 is detected via HRP-conjugated streptavidin and OPD as colorimetric substrate.

Reference compound(s) Murine anti-murine IL-17 antibody = surrogate antibody (BZN035) Matrix analyzed Mouse serum Detection OD at 490 nm Validation Acceptance criteria for back-calculated concentrations of QCs and CSs within the working range of the assay: Bias within ± 20% from the nominal

concentration (±25% at LLOQ and ULOQ). Precision CV between duplicates ≤ 20%. No acceptance criteria apply for anchor points. Calibration curves 5PL fit: y = (A-D)/(1+(x/C)^B)^G+D, with x and y denoting drug concentration in a CS and the corresponding OD, respectively. LLOQ 7.00 µg/mL ULOQ 75.2 µg/mL Intra-day accuracy and Precision

Intra-run bias within the range -8.8% to 13.0% Intra-run precision within the range 1.4% to 14.3%


Inter-run bias within the range -2.6% to 9.0% Inter-run precision within the range 6.7% to 9.8%

Stability Stable in spiked mouse serum if stored at RT for 24 hours, if stored at 2-8°C for 12 days, if stored at -15°C to -35°C for at least 3 months or if stored at -65°C to -90°C for at least 8 months. Stable in spiked mouse serum after 3 freeze-thaw cycles.


2.6.5.2D 薬物動態試験：分析方法 (BMD R0450379), (BMD R0450379-01), (BMD R0450379-02), (BMD R0450379-03) Report title Quantitative determination of IL-17A in cynomolgus monkey serum by a sandwich ELISA

Method description and validation Report No. [BMD R0450379], [BMD R0450379-01], [BMD R0450379-02], [BMD R0450379-03] CTD location 4.2.2.1-9, 4.2.2.1-10, 4.2.2.1-11, 4.2.2.1-12 GLP compliance Not required Method Summary A monoclonal anti-human IL-17 antibody is coated on the microtiter plate. Serum samples (calibration, quality control or unknown samples) are

then incubated. Non-bound material is removed by washing. Bound IL-17 is detected with a biotinylated goat anti-human IL-17 IgG antibody. The plate is washed to remove unbound biotinylated antibodies. Streptavidin-HRP is added. After incubation, the unbound enzyme is removed by washing and OPD is added as colorimetric substrate.

Reference compound(s) IL-17A Matrix analyzed Cynomolgus monkey serum Detection OD at 490 nm (reference filter: 650 nm) Validation Accuracy 85% to 115% and precision (CV%) on the concentration on duplicate determination (two wells per CS) ≤20% For QCs: precision (CV%)

on the concentration on duplicate determination (two wells per QC) ≤ 20%. In addition, QC samples must be within ±30% of their nominal values. At least 4/6 QCs must meet both criteria, with ≥ 50% of the values at each QC level passing.

Calibration curves 4PL fit: y= ((A-D)/(1 + ((x/C)^B)) + D, with x and y denoting IL-17A concentration and OD. LLOQ 81.9 pg/mL ULOQ 20000 pg/mL Intra-day accuracy and Precision

Intra-day accuracy within the range 60.0% to 115.5%. Intra-day precision within the range 0.7% to 7.5%.


Inter-day Accuracy within the range 88.8% to 95.5%. Inter-day Precision within the range 15.6% to 20.3%.

Stability Stable in spiked cynomolgus monkey serum after 3 freeze/thaw cycles. Stable in spiked cynomolgus monkey serum for at least 12 months when stored at -15°C to -35° or at -65°C to -90°.


2.6.5.2E 薬物動態試験：分析方法 (NBx RS562201), (NBx RS562201-01) Report title Quantification of anti-AIN457 antibodies in cynomolgus monkey serum by a BIAcore Binding Assay

Method description and qualification Report No. [NBx RS562201], [NBx RS562201-01] CTD location 4.2.2.1-13, 4.2.2.1-14 GLP compliance Not required Method Summary Real-time BIA on BIAcore, using the optical phenomenon surface plasmon resonance to monitor biomolecular interactions. Secukinumab is

immobilized on the chip sensor surface in a reversible manner via protein G, which is covalently bound to the chip sensor surface matrix. The samples are injected and potential anti-secukinumab antibodies bind to secukinumab.

Method Parameters Sensitivity: at 3.18 AU (1:1383 final dilution); Sensitivity is defined by the intercept of the calibration curve with the cut point. Drug tolerance: The secukinumab inhibitory concentration was determined at 72.0 µg/mL for a 1:24 (7.25 AU) final dilution of positive anti-idiotypic anti- secukinumab rabbit hIgG depleted serum. The secukinumab inhibitory concentration was determined at 38.5 µg/mL for a 1:38 (6.35 AU) final dilution of positive anti-idiotypic anti- secukinumab rabbit hIgG depleted serum. The secukinumab inhibitory concentration was determined at 23.4 µg/mL for a 1:72 (5.39 AU) final dilution of positive anti-idiotypic anti- secukinumab rabbit hIgG depleted serum.

Reference compounds Secukinumab, a human monoclonal anti-human IL-17A antibody of the IgG1/kappa isotype. Purified (anti-human IgG adsorbed) anti-idiotypic anti- secukinumab (SZ2356) rabbit serum

Matrix analyzed Cynomolgus monkey serum Detection Surface plasmon resonance Validation The assay was validated based on Mire-Sluis et al. (2004), presentations of the IBC conference “Immunogenicity for Biologics” in Munich, January

2006, and internal experience. The following parameters were qualified for one chip using three active flow cells according to specific acceptance criteria with the following results. Level of protein G coupling to three sensor surfaces: 351.8 RU on FC2, 364.1 RU on FC3 and 321.2 RU on FC4 (acceptance criteria: 200 RU-600 RU). Reproducibility of drug injection: ≤ 1.1 RU on FC 2-1, ≤ 2.2 RU on FC 3-1 and ≤ 1.7 RU on FC 4-1 difference between 2 consecutive cycles (acceptance criteria: ≤ 10 RU). Loss of secukinumab signal in all qualification runs: 2.3% over 82 cycles, 1.0% over 66 cycles, 1.9% over 196 cycles, 1.5% over 196 cycles, 1.0% over 84 cycles. Chip sensor surface stability over time represented by the loss of positive control signal (mean of FC2-1, FC3-1 and FC4-1): 3.8% over 82 cycles, 2.2% over 66 cycles, 2.6% over 196 cycles, 2.9% over 196 cycles and 1.1% over 84 cycles (acceptance criteria: ≤ 7.5% loss of positive control signal over 50 cycles). Ratio of positive control signal to cut point (CP): 9.5 to 13.7 (acceptance criteria: ≤ 5). CPF: 12.8 RU. Mean accuracy of all qualification runs of back calculated Cs ranged from 92.9-101.1% (FC2-1), 93.0-101.9% (FC3-1), 93.6-101.8% (FC4-1) and


the precision of mean accuracy 0.2-7.9% (FC2-1), 0.2-8.1% (FC3-1), 0.2-6.2% (FC4-1). Mean square of the coefficient of correlation (R) was 1.0. Mean intra-surface accuracy and precision of QCs: 95.1%-101.8%; precision: 0.1%-1.3%. The mean inter-surface accuracy and precision of QCs: 95.8%-101.4%; precision: 0.0%-0.7%.

Calibration curves The calibration curve consists of 12 calibrators prepared by serial dilutions of an affinity purified anti-idiotypic anti- secukinumab antibody in a cynomolgus monkey serum pool. Calibrators are given as (1/log10 of their final dilution)*10 and are expressed as titers in arbitrary units (AU). The curve ranges from 2.54 AU (1:8758 final dilution) to 7.69 AU (1:20 final dilution). The curve was calculated using 4PL fit.

LLOQ 3.40 AU (1:874 final dilution) ULOQ 6.96 AU (1:27 final dilution) QCs intra-surface accuracy and precision of accuracy (mean)

Accuracy: 95.1% to 101.8% Precision: 0.1% to 1.3%

QCs inter-surface accuracy and precision of accuracy (mean)

Accuracy: 95.8% to 101.4% Precision: 0.0% to 0.7%

Stability Since IgG in serum is known to be stable at ≤ -20°C, stability was not assessed Special Issues Since no positive anti- secukinumab cynomolgus monkey samples were available a purified rabbit anti-idiotypic anti- secukinumab antibody was

used as a positive control Reference Mire-Sluis AR, Barrett YC, Devanarayan V, et al (2004)] Recommendations for the design and optimization of immunoassays used in the detection

of host antibodies against biotechnology products. Journal of immunological methods 289:1-16


2.6.5.2F 薬物動態試験：分析方法 (NBx RS586091) Report title Determination of anti-BZN035 antibodies in mouse serum by ELISA

Method description and qualification Report No. [NBx RS586091] CTD location 4.2.2.1-15 GLP compliance Not required Method Summary Bridging ELISA: BZN035 is directly immobilized on a microtiter plate. Anti-BZN035 antibodies are captured by immobilized BZN035 and are

detected by biotinylated BZN035 followed by binding of a streptavidin-HRP conjugate. BM Blue POD Substrate is used as HRP substrate. Method Parameters Sensitivity: 0.3 µg/mL of positive control

Drug tolerance: 15 µg/mL of positive control antibody to BZN035 rat pool serum. The BZN035 inhibitory concentration was determined ≥ 2.78 µg/mL 5 µg/ mL of positive control antibody to BZN035 rat pool serum. The BZN035 inhibitory concentration was determined ≥ 1.49 µg/mL 1 µg/ mL of positive control antibody to BZN035 rat pool serum. The BZN035 inhibitory concentration was determined ≥ 0.58 µg/mL The interference of an isotype control antibody in the sample was evaluated. No interference in the assay could be detected.

Reference compounds BZN035 (secukinumab surrogate), anti-IL-17 antibody Positive control: Donkey anti-mouse IgG (H+L), Jackson Immuno research #715-005-151, Lot#85054

Matrix analyzed Mouse Serum Detection OD at 450 nm (reference filter: 690 nm) Validation The assay was validated based on Mire-Sluis et al. (2004), presentations of the IBC conference “Immunogenicity for Biologics” in Munich, January

2006, and internal experience. The following parameters were qualified according to specific acceptance criteria with the following results. The intra-run accuracy of Cs ranged from 98.3% to 101.7% and precision of mean accuracy from 1.4% to 8.5%. The inter-run accuracy of Cs ranged from 98.5% to 102.0% and precision of mean accuracy from 1.6% to 8.0%. The precision of Cs duplicate measurement ranged from 0.2% to 18%. The mean square of the coefficient of correlation (R) was 1.0. The intra-run accuracy of QCs in rat serum pool for the analysis of assay performance ranged from 81.9% to 113.8% and precision of mean accuracy from 2.3% to 13.5%. The inter-run accuracy of QCs ranged from 95.2% to 100.7% and precision of mean accuracy from 11.4% to 14.5%. The intra-run accuracy of QCs prepared in rat serum pool for analysis of run variability ranged from 85.2% to 98.1% and precision of accuracy from 5.3% to 8.7%. The inter-run accuracy of QCs ranged from 86.9% to 97.9% and precision of accuracy from 7.0% to 7.8%. The CPF was determined as 1.074 for rat sera and 1.201 for mouse sera. The LLOQ was 1 µg/mL. All LLOQ-spiked sera from untreated rats were above the corresponding plate cut point determined for mouse serum and fulfilled acceptance criteria for accuracy of back-calculated concentrations. The experimentally determined LOD was 0.3 µg/mL. All LOD-spiked sera from untreated rats were above the corresponding plate cut point.

Calibration curves The calibration curve consists of 10 calibrators prepared by several dilutions of the positive control in a rat serum pool. The curve ranges from 100 µg/mL to 0.2 µg/mL. The curve was calculated using a 5PL fit. 100 µg/mL and 50 µg/ml are anchor points.

Novartis Confidential Page 12 2.6.5 薬物動態試験概要表 AIN457/Secukinumab Intra-run accuracy of Cs and precision of accuracy

Accuracy: 98.3% to 101.7%; Precision: 1.4% to 8.5%

Inter-run accuracy of Cs and precision of accuracy

Accuracy: 98.5% to 102.0% ; Precision: 1.6% to 8.0%

LLOQ 1 µg/mL of positive control ULOQ 15 µg/mL of positive control Inter-run accuracy of QCs and precision of accuracy


Intra-run accuracy of QCs and precision of accuracy


Stability Since antibodies in serum is known to be stable at ≤ -20°C, stability was not assessed Special Issues Since no immunogenicity-positive anti-BZN035 mouse serum was available, an anti-mouse IgG antibody without cross-reactivity to rat IgG was

used to prepare calibrators and quality control samples in rat serum. Rat serum was used as surrogate matrix because of the cross-reactivity of the positive control antibody to the mouse serum.

Reference Mire-Sluis AR, Barrett YC, Devanarayan V, et al. (2004)] Recommendations for the design and optimization of immunoassays used in the detection of host antibodies against biotechnology products. Journal of immunological methods 289:1-16


2.6.5.3A 薬物動態試験：単回投与後の吸収 (DMPK R0400373) (DMPK R0600743-1) Cynomolgus monkey Cynomolgus monkey Cynomolgus monkey Cynomolgus monkey Report number: [DMPK R0400373] [DMPK R0400373] [DMPK R0600743-1] [DMPK R0600743-1] CTD location 4.2.2.2-1 4.2.2.2-1 4.2.2.2-2 4.2.2.2-2 Drug: Secukinumab ( ) Secukinumab ( ) Secukinumab (CHO) Secukinumab (CHO) Gender (M/F)/Number of animals: M / 3 per time point M / 3 per time point M / 2 per time point M / 2 per time point Feeding condition: Fed Fed Fed Fed Vehicle / formulation: 10 mg/mLsecukinumab solution in

water diluted with 5% dextrose. 150 mg/mLsecukinumab solution in water

50 mg/mL secukinumab in 10 mM histidine HCl,9% sucrose at pH 5.8 further diluted with 5% dextrose to 10 mg/mL

50 mg/mL secukinumab solution in buffer of 9% (w/v) sucrose and 10 mM histidine HCl

Method of Administration: i.v. s.c. i.v. s.c. Dose (mg/kg): 10 15 10 15 Biological Matrix: Serum Serum Serum Serum Analyte: Secukinumab Secukinumab Secukinumab Secukinumab Assay: ELISA [BMD R0450253], [BMD

R0450253-01] ELISA [BMD R0450253], [BMD R0450253-01]

ELISA [BMD R0550671-01] ELISA [BMD R0550671-01]

PK parameters: Tmax (day) b - 3 (2-3) - 2 Cmax or C(0) (µg/mL) c 253 ± 12.2 196 ± 10.6 319 243 AUCinf (µg·day/mL) 4020 ± 703 5640 a 5730 5370 AUCinf/Dose (µg·day/mL)/(mg/kg) 401 ± 70.3 376 a 573 358 CL (mL/day/kg) 2.76 ± 0.55 - 1.80 - Vss (mL/kg) 74.5 ± 7.6 - 59.0 - T1/2α (day) 0.60 ± 0.2 - 0.95 - T1/2β (day) 20.1 ± 6.1 - 24 18 (apparent) F (%) - 94 a - 62 a n=2; b median (range); c Cmax for s.c. and C(0) for i.v./ C(0) = the extrapolated initial concentration after iv dose


2.6.5.3B 薬物動態試験：単回投与後の吸収 (DMPK R0800115) Species: Cynomolgus monkey Report number : [DMPK R0800115] CTD location 4.2.2.2-3 Gender (M/F)/Number of animals: M / 2 per treatment group Feeding condition: Fed Vehicle / formulation: CHO: reconstitution of 150 mg lyophilisate with water, further diluted with 5% dextrose to final conc. of 10 mg/mL

: reconstitution of 50 mg lyophilisate with water, further diluted with 5% dextrose to final conc. of 10 mg/mL Method of Administration: i.v. Dose (mg/kg): 10 Sample: Serial blood samples were collected at specified time points for 42 days for determination of secukinumab concentrations Analyte / Assay: Secukinumab / in serum by validated competitive ELISA’s [BMD R0450253], [BMD R0450253-01], [BMD R0550671-01] PK parameters: arithmetic mean: (noncompartmental analysis)

CHO-derived secukinumab -derived secukinumab

Target-based assay Anti ID assay Target-based assay Anti ID assay AUCinf (µg·day/mL) 2170 2680 3780 4090 AUCinf/Dose (µg·day/mL)/(mg/kg) 217 268 378 409 CL (mL/day/kg) 4.8 3.8 2.7 2.6 Vss (mL/kg) 76 73 59 48 T1/2 (day) 12 16 16 15


2.6.5.3C 薬物動態試験：単回投与後の吸収 (NBx R0580148) Species: Cynomolgus monkey Report number : [NBx R0580148] CTD location 4.2.2.2-4 Gender (M/F)/Number of animals: Pregnant F/ 5 cynomolgus monkeys Feeding condition: Fed Vehicle / formulation: Liquid solution in vials Method of Administration: i.v. Dose (mg/kg): 100 Sample: Maternal and fetal serum on the day of caesarean section Analyte / Assay: Secukinumab / in serum by a validated competitive ELISA in cynomolgus monkey [BMD

R0550671-01] Secukinumab distribution Maternal serum Fetal serum in cynomolgus monkey: concentration range (µg/mL) 2000 − 2600 31.4 – 73.8


2.6.5.4 薬物動態試験：反復投与後の吸収 No additional studies under this section

2.6.5.5 薬物動態試験：分布 No additional studies under this section

2.6.5.6 薬物動態試験：たん白結合 No additional studies under this section

2.6.5.7 薬物動態試験：妊娠動物における試験 No additional studies under this section

2.6.5.8 薬物動態試験：その他の分布試験 No additional studies under this section

2.6.5.9 薬物動態試験：in vivo における代謝 No additional studies under this section

2.6.5.10 薬物動態試験：in vitro における代謝 No additional studies under this section

2.6.5.11 薬物動態試験：推定代謝経路 No additional studies under this section

Novartis Confidential Page 17 2.6.5 薬物動態試験概要表 AIN457/Secukinumab 2.6.5.12 薬物動態試験：薬物代謝酵素の誘導／阻害

No additional studies under this section

2.6.5.13 薬物動態試験：累積排泄 No additional studies under this section

2.6.5.14 薬物動態試験：胆汁中排泄 No additional studies under this section

2.6.5.15 薬物動態試験：薬物相互作用 No additional studies under this section

2.6.5.16 薬物動態試験：その他 No additional studies under this section

Documents

2.6.4 薬物動態試験の概要文...Novartis Confidential Page 4 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 略号一覧 略号 省略していない表現（英）

2.6.4 薬物動態試験の概要文...Novartis Confidential Page 4 CTD 2.6.4 薬物動態試験の概要文 AIN457/Secukinumab 略号一覧略号省略していない表現（英）