BACTERIOLOGIA

SOBRE EL

¿MIO DEL TETMO

TI-EGiGPRESENTADA PARA ~TTAH GRADO DE

DOCTOR F MEDIC. NA

DAVID VI A T T O

LIMAIMPRENTA DE BENITO GIL

Banco del Herrador 113, —Bodegones 4.2.

1891

Ss&qí Decano;SEÑORES PROFESORES:

El ilustre Pasteur, dijo «n una ocasión, al serinterrogado sobre las conquistas hechas en el nuevomundo de los micro-organismo: “ el campo de laBacteriología se asemeja á una inmensa floresta queviéramos á lo lejó§, al pasar en un tren; podemosdistinguir apenas uno que otro árbol y decir éste esun pino, aquella una encina: el resto se nos escapa,pero no sin que hayamos llegado á comprender queese campo es grande, muy grande. ’’

Esta gráfica comparación del sábio francés de-muestracuán pequeños son aun nuestros conocimientosen esta materia y cuanto queda todavía por descubrir.Afortunadamente hombres de genio é investigadoresinfatigables, se han levantado en todas partes, para ex-plorar de diversas maneras y en todos sentidoseste rei-no de los infinitamente pequeños, entrevisto porLeuwenhoek (1683), Schwann, Ehrenberg, Cohn yDavaine y descubierto definitivamente, en este siglo,por Pasteur, Koch, Lóffler. etc.

Cada día se hacen nuevos descubrimientos y nopasa un año si que los conocimientos bacteriológicossean enriquecidos por algo muy importante, desdeel descubrimiento de nuevas especies, hasta el estu-dio químico de las sustancias secretadas por los mi-crobios. Por lo mismo, no es pues dudoso que tras-

currido algún tiempo veamos el terreno de IaJLicte-riología transformado como el mapa de Africa, cono-cida no ha mucho apenas en su litoral y atravesadahoy en diversas direcciones, por enmedio d.e sus spl-;<

vas vírgenes y de sus lagos inexplorados. Quizá noestá lejano el día en que un, investigador de geniopenetre cual otro Stanley én él centro de esta oscu-ra rejión para describrirnos la flora microscópica, co-mo el explorador norte americano nos ha dado á co-nocer la de los bordes del “ Victoria Nianza’* efr el scorazón mismo del Continente Negro.

La Bacteriología es una ciencia de ayer; estápor decirlo así en su infancia, y sin embargo, cuántarevolución ha causado en la medicina, cuántas aplica-ciones se han hecho ya de sus principios á la hijiene,y cuántos misterios de patología se han aclaradomerced á ella! No es esto exajerado. El conocimien-to de la causa de un gran número de enfermedades;el de la acción del aire en las fermentaciones, el me-jor estudio de las aguas potables y de su influenciamás ó menos patógena; el uso de los antisépticos em-pleadoshoy con conocimiento de causa, en la profilaxiay tratamiento de muchas enfermedades; el lugar se-ñalado á algunas entidades morbosas en el cuadronosológico de las enfermedades infecciosas, cuandoantes se consideraban como neurosis ó como enfer-medades localizadas, son otros tantos hechos quevienen en apoyo de esta aserción.

No faltan tampoco ejemplos concretos que prue-ben lo que acabo de afirmar. Hasta hace pocosaños se consideraba la erisipela como una dermatitisfebril de carácter maligno, y contajioso; pero por quéesa fiebre con alteraciones tan pequeñas y localizadas;por qué esa malignidad; por qué en fin el contajio ylos casos de muerte tan frecuentes especialmente du-rante el puerperio.? Era imposible dar una explica-ción satisfactoria. Hoy el conocimiento del strepto-coccus de la erisipela, nos hace ver que dicha enfer-

medacj.es orijinada por ese micro-organismo, que esél quien produce la fiebre desproporcionada con lainsignificancia relativa de la lesión local y que lamuerte viene no por propagación de esta última, sino

í porSa acción delmicrobio y de sus producios tóxicossobre el organismo, por infección, en una palabra.

Durante mucho tiempo permanecieron inexpli-cables las parálisis de la difteria, hasta el día en queLpffler aisló el bacilo que lleva su nombre y en queRtfux reprodujo artificialmente dichas parálisis porla inoculación de las diastases secretadas por los ba-cilos encontrados en las membranas difteríticas.—Noha sido menor la influencia de la Bateriología paradestruir ciertos errores admitidos como verdades porla ciencia médica. Tal ha sucedido con la cuestiónde la dualidad de la tisis tuberculosa y la tisis caseo-sa. Aún después de los notables esperimentos deVillemin, se continuó creyendo en esa dualidad, noobstante las protestas que contra tales ideas hacíanRanvier y otros. Todavía no está lejano el tiempoen que hacíamos en nuestras clínicas ejercicios dediagnóstico para distinguir la tuberculosis pulmonarde la tisis caseosa. El descubrimiento del bacilo deKoch, vino á poner fin á todas las dudas, y las ideasprofesadas á este respecto durante veinte años, entodas las cátedras, cayeron por tierra.

La utilidad de los conocimientos bacteriológi-cos para la exacta comprensión de la anatomía y fi-siolojía patolójicas, descritas en los libros modernosse halla fuera de duda; su importancia para el estudiode las enfermedades infecciosas está reconocida portodos; y es por esto que en los centros científicos másnotables del mundo, en aquellos en que la medicinase encuentra más adelantada, existen institutos adhoc como el de Pasteur en París ó el de Hijiene enBerlín, ó ya cátedras especiales como en Bruselas,Copenhague, Nápoles, New-York, etc, etc, dedicadosal estudio de este ramo Vosotros lo habéis también

comprendido así, puesto que aceptáis la crea&ótítéeuna nueva cátedra en la Facultad, no obstante!deficiencia de nuestros medios de enseñanza, w

Concretándome, ahora al objeto de esta de-bo deciros, ,ante todo, que no hallaréis en <dla nad ori-jinal, pues al escribirla, más que llenar un deber im-puesto por el Reglamento, he tenido en mira reuniren un cuerpo lo qJÉe se encuentra esparcido aquí yallá en libros y eng"folletos, y lo que me ha sido posi-ble aprender de bóca de ios diversos maestros á cuyaslecciones me cupo la suerte de asistir, sobre la impor-tante cuestión de la infecciosidad del tétano. De es-te modo creo llenar mejor mi objeto, cual es el deque el presente trabajo sirva de algo á los alumnosque se dediquen á esta clase de estudios.

Bacilo del tétano ó bacilo de^Ticolaier.No hace todavía muchos años en que se definía

el tétano como una neurosis traumática ó como elmás grave de los espasmos producidos por el trau-matismo (Richelot) —Al estudiar la patogenia de es-ta enfermedad, los autores se perdían en conjeturassin fin, atribuyéndola unos á un simple reflejo ner-vioso, producido por una causa irritante que obraríasobre las extremidadesperiféricas de los nervios; otrosá cierto estado de la sangre, que actuase sobre loscentros reflejos; algunos, en fin, como Roser, la ase-mejaban á la rábia asignándole un veneno especial.

En medio de esta diversidad de opiniones ha-bía, sin embargo, algunos puntos en los que la obser-vación de los hechos dejaba preocupados, y no sinrazón, á los clínicos; estos eran: la existencia de epi-demias de tétano, inexplicables por la hipótesis de lairritación periférica, pues no era dable suponer queindividuos colocados en diversas circunstancias, conheridas en diferentes partes del cuerpo, tuviesen lamisma susceptibilidad nerviosa para las causas irri- ítantes; —algunos casos de contajio en que heridos asis-tidos por un mismo topiquero cayeron uno á unoatacados del mal; —la frecuencia del tétano en los he-ridos abandonados sobre el campo de batalla;—la se-mejanza, en fin, por todos reconocida entre esta en-fermedad y el envenenamiento por la estricnina.Más aún, no hay un solo autor que trate del asuntoque no dé suma importancia á las heridas de los pies

y de las manos, en la etiología del tétano, (i) To-dos estos hechos, repito, no pasaron desapercibidospara observado'res sagaces como Simpson, Roser,Lister, Billroth, etc. que sospechaban lacontajiosa del mal. ,

Cuando la medicina entró de lleno en el terrenoexperimental, que tantos progresos le ha valido, co-menzaron á hacerse ensayos para demostrar esperi-mentalmente la infecciosidad del tétano, pero desgra-ciadamente con un resultado negativo. Estos primerosexperimentos llevados á efecto, por BilJroth, Arloingy Tripier consistieron en inyecciones de sangre detetánico, hechas en animales, y en inoculaciones conla sustancia nerviosa de individuos muertosde esta en-fermedad. A estos esperimentadores siguieronRosenbach, Nocard y otros que tampoco obtu-vieron mejor éxito. Todos ellos creían indudable-mente que la génesis del mal estaba en la sangre.Observadores más capaces ó tal vez más afortunados,Cari y Rattone (de Turín) dirijieron la mirada háciaotro lugar: la herida del tetánico, consiguiendo de-mostrar plenamente la trasmisibilidad del ma!. Asemejanza de Villemin, en sus esperimentos sobre lainoculabilidad de la tuberculosis, dichos observado-res tomaron de un individuo muerto de tétano—y quepresentaba como única lesión externa una pústula deacné,—pequeños fracmentos de tejido de la pústula;hicieron una emulsión en agua destilada con la cualinocularon á 12 conejos en distintas rejiones del cuer-po (músculos del dorso, canal raquidiano, muslos etc.)De estos 12 conejos, 11 presentaron los síntomas ca-racterísticos del tétano. Un éxito tan satisfactorio nofué sin embargo suficientepruebapáralos esperimenta-dores italianos, que inocularon, después, otros cone-

Las manos y los pies están expuestos á ser contaminados contierra y por consiguiente sus heridas mas en peligro de ser infecta-das por el agente íetánice.

jos con fracmentos de tejido de los animales muertos,«obteniendo un cuadro sintomático idéntico al ob-servado en los 12 primeros conejos;- é hicieron, enfin—coma control, inoculaciones con diversas sustan-cias sépticas, sin que se hubiera presentido síntomaalguno que se pudiera referir aftétano.

Desde entonces quedó enteramente probado quela enfermedad en cuestión era trasmisible del hombreá los conejos y de éstos á otros animales de la mis-ma especie.

Puede hacerse fácilmente un paralelo entre lahistoria de la tuberculosis y la del tétano.

Laennec proclámala unidad de la tisis y prescien-te su naturalezainfecciosa; Villemin demuestra experi-mentalmente su trasmisibilidad y Koch termina pordescubrir el bacilo tuberculoso, dando plena razón ásus predecesores. Así mismo, Billroth, Lister, Grie-singer, Panum, Roser y otros invocan más ó menosvagamente la infecciosidad del tétano; Cari y Ratto-ne ponen fuera de duda su trasmisibilidad; Nicolaierdescubre, entre muchos otros, el micro-organismo enforma de alfiler, causa específica dA mal; y Kitasa-to, dos años después, logra aislarlo y prueba—porinoculaciones de cultivos puros, que es el bacilo deNicolaier y nó otro el ájente productor del tétano.

Todo este trabajo se ha realizado en el espaciode pocos años, de 1870 á 1889.—Billroth, Lister,Arloing, Tripier, Nocard. Cari, Rattone, Nicolaier yKitasato, con cuyos esfuerzos se ha levantado el edi -

ficio, viven aún.Nicolaier nose propuso continuar los experimen-

tos de Cari y de Rattone para llegar al descubri-miento del microbio que lleva su nombre; no; talhecho se debió á la casualidad. El bacteriólogo ale-mán se ocupaba solamente de investigaciones sobreJos micro-organismos de la tierra cuando durante susestudios, fué sorprendido, un día, por un fenóme-no que llamó vivamente su atención, á saber: que to-

dos los conejos inoculados días antes con la tierra deljardín cercano á su laboratorio, presentaban violen-tas convulsiones de los músculos del tronco y de lasextremidades, trismus, opistótonos, en una palabra,un cuadro idéntico al del tétano Se entregó enton-ces á hacer exámenes microscópicos, cultivó los microorganismos de la tierra y descubrió, entre éstos,un bacilo delgado, esporulado en su extremidady que tenía en conjunto la forma de un clavo peque-ño ó mejor dicho de un alfiler. Con esa intuiciónque dá el génio, aseguró, desde luego, que ese baciloera el ájente específico de la enfermedad, no obstanteque en la tierra encontró micrococos de diversasespecies y bacilos á los cuales era difícil no hacerlesjugar un papel importante en la etiología de la enfer-medad tetánica. Hé allí el mérito de Nicolaier. Ensu disertación denominada “ Contribución al estudiode las contracciones en las heridas" describió los ca-racteres del microbio que acababa de encontrar.

Después de Nicolaier, varios observadores tra-taron de aislar el bacilo en cuestión y entie ellos,Rosenbach, hizo con este objeto, grandes esfuerzos.—Los trabajos de este último, aunque negativos enun sentido, confirmaron sin embargo loque Nicolaierhabía visto, esto es que en el pus tetánico se hallabael microbio en forma de alfiler mezclado á otros varios.Faltaba, pues, saber si ese bacilo era el verdadero pro-ductor del tétano ó eran los demás que se hallaban jun-to con él. La cuestión quedó sin resolverse durantemucho tiempo no obstante de los trabajos emprendi-dos por Brieger, Nocard, Sormani, la señorita Cattaniy otros.

Para que un micro—organismo sea consideradocomo la causa específica de una enfermedad, es ne-cesario: iV que se le encuentre constantemente en loshumores ó los tejidos de los enfermos que sufren dedicho mal; 2? que las inoculaciones hechas con cul-tivos puros delmicro organismo reproduzcan la enfer-

medad; y 3? que el microbio ó sus productos vuelvaná encontrarse en el organismo del hombre ó animalinoculado.

La primera de estas condiciones hab¿a sido de-mostrada por Cari y Rattone y los observadores queles siguieron; la tercera —aunque no sin algunasexcepciones, fue puesta fuera de duda por el mismoNicolaier; pero la segunda, que era la más importan-te para la resolución del problema, permaneció comouna incógnita hasta el mes de Abril de 1889, en queKitasato hizo su célebre comunicación al XVIII.Congreso de la Sociedad Alemana de Cirujía, reuni-do en Berlín.

En dicha comunicación, el bacteriólogo japonésanunció haber obtenido cultivos puros del bacilo deNicolaier; y haber reproducido el tétano en los anima-les por inoculaciones hechas con dichos cultivos. Esinteresante conocer cómo el labioroso asistente del‘‘Instituto de Hijiene,’’ llegó á feliz término en susexperimentos. Recojió un poco de pus de la herida deun soldado muerto de tétano; lo sometió á la obser-vación microscópica, hallando en dicho pus el baciloesporulado descrito por Nicolaier; y por último, repro-dujo el tétano por inoculaciones hechas con ese pusen animales (ratones blancos) Hasta aquí nada hayde nuevo: Kitasato vió lo que Nicolaeir y los demás.Desde este punto es preferible citar las palabrastextuales de Kitasato en su comunicación ya men-cionada, que se publicó en los Archivos de Hijiene(Zeitschrift für Higiene) Dice así:

“ Tomé un poco de pus tetánico y lo sembré enserum de sangre solidificado, sometiéndolo en segui-da á la temperatura de 36 á 38o en la estufa de in-cubación; de este modo conseguí que desarrollaranantes de 24 horas, todos los micro-organismos con-tenidos en el pus; en ese estado hice una investiga-ción microscópica y encontré entre cinco otros mi-crobios, el bacilo esporulado (Bacillen mit Kopfchen-

sporen). Después de 48 horas, este ultimóse habíamultiplicado en profusión. Entonces llevé el cultivoá un baño maría calentado á 80o y lo mantuve allípor espacicfcde á una hora. Con este cultivo enel que creía que quedaban vivas solamente las espo-ras, inoculé algunos ratones, quienes murieron detétano. Después de haberme convencido por estehecho de que el cultivo en cuestión contenía esporasdel bacilo tetánico (1) mezclé con el hilo de platino,lleno de gelatina, conteniendo las esporas, otra can-tidad de sustancia nutritiva, que cultivé parte enplacas, según el procedimiento vulgar y parte en re-cipientes ad hoc en que hice pasar una corrientede hidrójeno y la mantuve á una temperatura de 18o

á 20 o—Al cabo de una semana se habían desarrolla-do en los recipientes sometidos á la corriente de hi-drójeno magníficas colonias, mientras que las placashechas por el procedimiento común habían quedadoestériles. Después de 10 días, abrí los recipientes áque he hecho referencia, é hice preparaciones sobrelaminillas cubre—objetos, encontrando en el micros-copio, bastoncitos más pequeños que los del edemamaligno, que con frecuencia se hallaban aislados yotras veces reunidos en forma de largos hilos. Indu-dablemente los microbios encontrados eran anaereo-bios. Hice más cultivos con estas colonias, sirviéndomedel método de Liborius,-y también en caldo y bajo laatmósfera de hidrójeno, En los cultivos en caldohallé, por la investigación microscópica, numerososbacilos con uno de los extremos presentando uncuerpo brillante, una espora. Con estos cultivos en-que ya no cabía la menor duda de que fueran puros,inoculé algunos ratones los que después de 20 horas

(.i) Kitasato supone aquí que con la elevación de temperaturahan muerto todas Jas especies estrafias.

cayeron enfermos con tétano típico y murieron alcabo de 2 ó 3 dias.” (i)

De este modo, Kitasato resolvió el problema entodas sus partes.—Obtuvo cultivos separandoel bacilo de Nicolaier de los demás con quienes seencontraba confundido en el pus;—probó que el es-presado micro—organismo es un anacreobio\ —hizo verque la temperatura de 8o°, durante una hora, no des-truye las esporas del bacilo tetánico, mientras queaniquílalas demás especies;—por último, confirmó laopinión de Nicolaier, al reproducir el tétano, artifi-cialmente, por inoculaciones que practicó con elcultivo puro de dicho bacilo.

Después de la comunicación de Kitasato, grannúmero de micrógrafos han repetido en diver-sos laboratorios, los esperimentos del bacteriólogojaponés, llegando á los mismos resultados obtenidospor éste.

Entre los trabajos publicados al respecto, mere-cen especial mención: la Memoria de Sánchez Tole-do y Veillón, asisentes del laborotorio del Dr. Straus,publicada en los “Archivos de Medicina experimen-tal, ”y que se contrae especialmente á la biología ycaracteres del bacilo de Nicolaier; la comunicación deVaillard y Vincent, de la Escuela de Val de Grace,que registran los “Anales del Instituto Pasteur,” y enla que dichos autores se ocupan con particularidadde los productos venenosos secretados por el micro-bio tetánico; y en fin, la notable Memoria de Brie-ger, que trata de la naturaleza química de dichosproductos. Este trabajo se ha publicado en el“Berliner Kíinische Wochenschrift.”

En el estudio de un micro-organismo, debe co-nocerse su morfología; sus condiciones biológicas; loscaractéres físicos del cultivo en los diferentes medios;

(i) Ueber den Tetanusbacillus—Kitasato.Zaitschritf fíir Higiene—Pá0

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la acción que el parásito ejerce sobre el organismoanimal, ya por sí mismo ó por los venenos que se-creta; y los medios que es posible emplear para des-truirlo, á fin de poder llegar á una profilaxia courve-niente de la enfermedad que él orijina. Este es el or-den que me seguir en el presente trabajo

a) Morfología.*- Observada bajo el microscopio,con un aumento de 900 á 1000 diámetros (objetivode inmersión) una partícula de pus tetánico ó un po-co de cultivo puro, hecho en caldo ó gelatina, se véel bacilo del tétano bajo aspectos muy diferentes.—En los cultivos jóvenes (de 4 á 5 días de edad, enla gelatina; de 30 á 40 horas en el agar—agar, á latemperatura de la estufa)—se nota bastoncitos cortos,delgados, sin esporas aparentes; más tarde, esto es álos 6 ú 8 días, estos bastoncitos se han alargado, yalgunos de ellos llevan ya una espora terminal re-donda; á veces se observa dos bacilos unidos por unode sus extremos, ya afectando la forma rectilínea óformando un ángulo más ó menos abierto para cons-tituir una V ó una <. En los cultivos de algunaedad, se distingue casi exclusivamente la forma clá-sica descrita por Nicolaier, esto es la que figura unalfiler y que parece revelar el estado adulto delmicrobio. Las esporas son cuerpos redondos, volu-minosos relativamente al tamaño del bacilo, refrin-jentes y ocupan comunmente uno de los estreñiosdel bastoncito; á veces se observa dos esporas paraun msimo bacilo, cuyas estremidades ocupan, y en-tonces el conjunto se asemeja á un par de anteojos.En los cultivos más viejos, se ve bastoncitos bastan-te largos en forma de hilos y esporas sueltas, comosi los bacilos hubieran sido decapitados: hay cabezasy cuerpos aquí y allá, en todo el campo del micros-copio.

Es preciso, en la práctica, tener muy en cuentaesta polimorfía del bacilo tetánico, por que sucedefrecuentemente que, teniendo representada en la men-

te la forma clásica en alfiler, se desechan cultivos don-de -el micro-organismo reviste las otras formas deinvolución ya descritas. Se debe, pues, aprender á re-conocer al bacilo, no solo en la edad adSlta, si notambién en la infancia y en la veiez.

b) Caracteres biológicos.. — del tétanoson poco movibles, comparativarfrente con otros, pe-ro su movilidad puede aumentarse si las observacio-nes se verifican en una temperatura superior á la nor-mal. Las formas esporuladas son las que presentanmenos movimientos, á diferencia de los bastoncitoscortos de los cultivos jóvenes, que son más vivaces.

Para darse cuenta de los diferentes grados demovilidad del bacilo de Nicolaier, es conveniente ha-cer un cultivo en gelatina y verificar observacionesdiarias desde el 3.0 ó 4.0 día hasta el 20,

Casi todos los colores de anilina en solución h¡-dro-alcobólica, colorean bien el bacilo tetánico; perogeneralmente se dá la preferencia á la fuchsina y alcolor de violeta 6 B.

De los métodos de coloración especiales, los másconvenientes son el de Gram, el de Ehrlich y el deZiehl, que dan tintes duraderos. No debe olvi-darse que los bacilos provenientes de cultivos muyviejos, se coloran con mucha dificultad. Otro tan-to sucede con los que han dejado de existir. Parateñir los bacilos extemporáneamente he aquí el mejorprocedimiento:—Se toma una pequeña cantidad decultivo ó de pus tetánico con Id asa de un hilo de pla-

. tino esterilizado; se la coloca sobre una laminilla por-ta-objeto y se le añade una gotita de una solucióndébil de anilina (violeta ó rojo) cubriéndola en segui-da con el cubre-objeto, y cerrando sus bordes conparafina.

El examen por el procedimiento de la a gotacolgante coloreada es muy bueno y tal vez más con-veniente que el anterior, bajo el punto de vista*de laconservación de las preparaciones.

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Pueden obtenerse dobles ,muy ele-gantes por el empleo de la* solución de Ziehl (á lafuchsina carbólica) y del azul demedíelo Se colo-ran primera las esporas según él. procedimiento deZiehl y luego se tifie el resto del baciloiá&n el colorde metileno: se tiene así p.n-bastóncito con ca-beza roja. •. \i£

La resistencia del bacilo, tetánico contra la ac-ción de los ajenies físicos y químicos, es bastante con-siderable, especialmente de parte de las esporas—Kitasato ha desecado estas últimas en hilos de seda,bajo un desecador de ácido sulfúrico, y al cabo dealgunos meses estaban aún virulentas, SánchezToledo y Veillon han conservado igualmente tierracargada de esporas tetánicas, durante siete meses,sometida á la sequedad y á la luz difíisa, sin que hu-biera perdido su poder patógeno. Los mismos es-perimentadores han visto que un dedo amputado,conteniendo bacilos tetánicos, y sometido á la putre-facción al aire libre, conservaba su virulencia despuésde cinco meses: inoculaciones practicadas en anima-les demostraron que los bacilos tetánicos no habíansido anonadados por los microbios de la putrefacción.

Ya hemos visto que Kitasato, para aislar el ba-cilo de Nicolaier, sometió los cultivos impuros á unatemperatura de 8o° durante una hora, sin que lasesporas pereciesen.

Durante el tiempo que permanecí en el labora-torio del Dr. Shraus, ocupándome una vez del estu-dio de este bacilo, sometí los cultivos á una tempera-tura de 90 o c. por el espacio de media hora sin quehubieran perdido éstos su facultad de reproducirse.Igual resultado obtuvieron los SS. Sánchez Toledoy Veillón.

Esporas pegadas en hilos de seda han resistidodurante diez horas á una solución de ácido carbólicoá 5°/°; tres horas á una de ácido fénico 5/° con o’5 de

addo clorhídrico; tres horas á la solución de subli-L ruado al i por ioo'o; media hora á la mezcla debicloruro de mercurio y de ácido muriático.

, f.Cien centímetros cúbicos de un caldo saturadode esporas, fueron mezclados con io cc. deoclorofor-mo y encerrados en un aparato por dos días; al cabode ese tiemp> 1 cloroformo fpé evaporado y se prac-ticaron inoculaciones'en cuyes y conejos con el caldorestante. Alas 15 horas-murieron los animales conun tétano típico (Kitasato.)

Nadie, que yo sepa ha ensayado hasta la fechael hidrato del doral, medicamento único talvez quetiene buen éxito en la clínica.

La corriente de vapor de agua á 100o , mata encinco minutos las esporas del tétano. Este hechoes muy importantep-bajo el punto de vista de la de-sinfección.

Todos los esperimentadores convienen en que elmedio natural, favorito, del bacilo del tétano es latierra; y creo iuútil recordar que allí fué donde Nico-laier lo descubrió. Fuera de aquella, se le hallatambién en el heno y en el guano del caballo.

Ya que toco este punto, debo hacer mención,aunque sea de paso, de la teoría sostenida por elProfesor Vernueil, que considera el tétano como deorijen equino.

Para apoyar su teoría, el célebre cirujano de laEscuela de París, ha acumulado un gran número deobservaciones propias y agenas, de cuya estadísticaresulta que el tétano se produce con más frecuenciaen los individuos que por su profesión ú otros moti-vos, se hallan en contacto íntimo con los caballos.

El Dr. Vernueil tiene razón á primera vista; loshechos que presenta son innegables, pero su inter-pretación me parece defectuosa. Es que el sábioprofesor habla como clínico y no como bacteriólogo:satisfecho con probar que el tétano es más común enlos cocheros, palafreneros y caballerizos, no ha lie-

18V ; * ’-íp

vado más adelante sus investigaciones. "-Si las ¿m*biera continuado con imparcialidad, habría podidoconvencerse de que el bacilo tetánico se encuentra enlos caballas por dos motivos: i°" por la tierra de quegeneralmente se cubren estos animales al ievolcarseen el suelo, y 2? por el heno de que comunmente sealimentan, al menos en Europa.

A este respecto es curiosa la evolución que su-fre el microbio á través del cuerpo del animal. Lasesporas del bacilo son injeridas por el caballo juntocon el heno y llegan á los intestinos; allí encuen-tran las condiciones más favorables para su desarro-llo, como son temperatura elevada, ausencia de oxi-jeno, y presencia de gases inertes como el ácido car-bónico, el hidrógeno sulfurado, etc. y se transformanen bacilos adultos para ser expulsados nuevamentecon los excrementos.—Sánchez Toledo y Veillón hanencontrado el bacilo tetánico en la tierra sacada dela piel del caballo por medio de la rasqueta; y hanconseguido también dar un tétano esperimental á unconejo por la inoculación sub-cutánea de los excre-mentos de caballos alimentados con heno,

El caballo y los demás animales de esta especieson pues exelentes medios de trasporte y de infec-ción tetánica, sin que se pueda decir por esto que laraza equina es la que orijina el tétano. Para reco-nocerle con justicia esta propiedad sería necesarioque sucediese con ella lo que pasa con la vacuna yla especie bovina.

El bacilo de Nicolaier es un extricto anaereobio;crece y se multiplica solamente al abrigo del aire óen medio de inertes, entre los que el más propicio esel hidrójeno. Sin embargo de esto, sus esporas noson destruidas por el oxíjeno.

c) Cultivos.—Como medios de cultivo, los másfavorables son la gelatina, el agar-agar y el caldopeptonizado. La adición á estas sustancias de uno ádos por ciento de glucosa ó de indigotato de potasa,

19la-jerminación de los cultivos del bacilo en

cuestión! "El serum sanguíneo es poco usado.El cultivo puede hacerse en placa ó en tubo, y

los caracteres de-él varían, naturalmente, según quese emplee uno ú otróMe estos procedimientos.

E)i placa. —Solamente después de qtie Kitasa-to aisló el bacilo perfeccionó la técnica delos cultivos en placa para los anaerobios, es que estaforma de cultivo se lia generalizado. Como conse-cuencia ha progresado también el estndio de las co-lonias del micro-organismo de que 'vengo tratando.La gelatina y la jalea de agar-agar son las dos sus-tancias empleadas con este objeto. Las coloniascomienzan á presentarse, en la primera, hácia el ter-cero ó cuarto día; en la segunda á las 24 ó 36 horas;á la temperatura de la estufa. Se las ve, una vezdesarrolladas, bajo la forma de pequeñas masas blan-quizcas, espesas en el centro, de donde parten radiosfinos hacia todos lados dándole el aspecto del sol;en este estado las colonias del bacilo de Nicolaier separecen mucho á las del bacillus subtilis ó bacilo delheno. Poco á poco fluidifican la gelatina de modoque á los 10 ó 12 días ésta se halla completamenteliquidada.

En las placa? de agar—agar los caracteres delas colonias son menos definidos á causa de la setni-opacidad del medio nutritivo, razón por la quese prefiere el uso de la gelatina que es completa-mente trasparente.

En tubo.—fill aspecto de los cultivos en tubo estan característico que en una estichcultura puede re-conocerse inmediatamente el bacilo tetánico. Laparte superior del medio nutritivo, en una extensióncomo de dos centímetros debajo de la superficie,permanece estéril; más abajo á lo largo de todo eltrayecto recorrido por el hilo de platino, aparece unaraya opoca espesa de donde parten á cada lado irra-diaciones como las barbas de una pluma. Los ale-

manes le asemejan á una hoja de pino (Tannenbaum-cultur) pero la primera comparación me parece maspropia. Conforme avanza el cultivo, si este se hahecho en gelatina, comienza la fluidificación de lasustancia y el cultivo va descendiendo poco á pocohasta que, una vez liquefactada la gelatina, cae al fon-do del tubo, bajo la forma de una nube espesa, turbia,de color gris blanquizco.

La jalea de agar-agar funde á una temperatu-ra de más de 40o

, así es que los cultivos hechos enesta sustancia, pueden colocarse, sin temor, en laestufa de incubación á 36’ó 38o

. A esa temperaturalas colonias nacen y se desarrollan con suma rapidez,de modo que á las 36 ó 40 horas es posible obtenerun cultivo bastante crecido.

Los cultivos en caldo no presentan particulari-dad alguna. Son muy convenientes para el métodode observación microscópica denominada “gota col-gante’’, En cuanto al serum de sangre, la dificultadde su preparación no lo hace emplear con frecuencia.

En otro trabajo complementario de éste he dadoá conocer los diferentes métodos de cultivo de losanaerobios y como el bacilo del tétano pertenece á es-ta clase de bacterias, todos los procedimientos allídescritos son aplicables á él. Sin embargo, tratán-dose de elejir entre éstos los que ofrezcan mayoresventajas, recomiendo especialmente: 1) Páralos culti-vos en placa, el método de Kitasato; 2) para los culti-vos en tubo los métodos de Esmarch, de Liborius yde Roux.

Cuando se trata simplemente de trasplantar unasemilla de un cultivo puro, es preferible recurrir almétodo de Liborius; pero si el germen ha sido recoji-do del pus de una herida, en el qne se encuentra con-fundido con otros, es de necesidad emplear el cultivoen placas ó mantener el pus sospechoso, durante ]/ 2

hora en un caldo calentado á 90 oUna de las particularidades más notables que

posee el bacilo del tétano es. la formación de gasescuyo desprendimiento dá un olor sui generis á los•cultivos. Dicho olor que Kitasato llama empitclimá-tico (Brenzlich) es comparado por Sanche# Toledo yVeillón al que despide el cuerno quemado.

Para la fácil comprensión de la materia, me haparecido conveniente y al mismo tiempo útil, á seme-janza de Eisenberg, (1) reunir en el siguiente cuadrolos principales caracteres del micro-organismo de■que me ocupo.

Bacilo del Tétano—Nicolaier—Kilasaío

Medio habitual La tierra

Forma Bastoncitos cortos, hiloslargos, forma de alfiler.

Movilidad Poco movible.

Germinación En la gelatina á la tempe-ratura de 18 á 20o co-mienza á germinar desdeel tercero ó cuarto día.En el agar á la tempe-ratura de 36 á 38o naceá las 24 ó 36 horas.

Forma del cultivo

E11 placa Colonias redondas y espe-sas en el centro, con irra-diaciones en todo sentido

(1) “Bakteriologische Diagutiok"—Hamburgo—1888.

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E11 tubo En la estichcuttüra, unaraya espesa, con hiloslaterales como las bar-bas de una ploma.

©

Esporulación Forma esporas redondas,vol uminosas, refrinjentes

Relación con el aire. ... Anaerobio.

Producción de gas Despide gases de un olorespecial.

Relación con la tempera- La temperatura de 36 átura. 38o—es la más favora-

ble—Resiste la tempe-ratura de 90 o porhora.

Relación con la gelatina.. Fluidifica la gelatina.

Coloración Se colora muy bien con lafuchsinay el violeta 6 R

Secreción de venenos... Secreta venenos muy acti-vos, toxinas.

Patogénesis Produce el tétano, por ino-culación en la mayorparte de los animales:conejos, cuyes, caballos,perros, ratas, etc. No seha inoculado al hombre.

Experimentos sobre los animales.—Si se inoculabajo la piel de un animal, tal como el conejo ó el ra-tón, cierta cantidad de cultivo puro de bacilos tetá-nicos se observa que á las 20 ó 24 horas se manifies-

tan los primeros .síntomas de la enfermedad. Estossíntomas consisten en contracciones tónicas de losmúsculos de la rejión en que se ha inoculado el ve-neno. Poco á poco se generalizan dichas contrac-ciones, hasta constituir un cuadro completo, comoel que se observa en un individuo atacado detétano, á saber: respiración corta y acelerada; aumen-to de temperatura; contracciones tónicas generalesque se exacerban por toflo exitante: contacto, acciónde la luz, soplo, etc. Este estado se prolonga durantealgún tiempo y el animal sucumbe irremisiblemente,si el cultivo inoculado es de alguna fecha.

A la autopsia, las lesiones anatómicas son insig-nificantes y á veces nulas. Ni aún el sitio de la ino-culación presenta alteraciones dignas de tomarse encuenta; en algunos casos hasta me ha sido difícil, alpracticar la necropsia, encontrar el lugar preciso enque se había hecho la inoculación, tan pequeña es laacción local producida por el veneno tetánico. Es-te hecho concuerda con los fenómenos observados enla clínica: las heridas de los enfermos de tétano ape-nas sí se distinguen de las de los demás.

Efectos semejantes á los que quedan descritos,se obtienen también por U inoculación del pus reco-jido de las heridas de los enfermos de tétano, don-de siempre se encuentra el bacilo específico, ya solo,ya en unión de otros microbios. También se le ha-lla constantemente en los tejidos que circundan laherida.

Al tratar de darse cuenta de los efectos causa-dos por el ájente tetánico sobre el organismo ani-mal, se ha sucitado la cuestión de si los espresadosmicrobios penetran ó no en el torrente circulatoriopara ser trasladados á los demás órganos. Nicolaier,Beumer, Bonnome, y Kitasato, basándose en su expe-riencia personal, creen que el micro-organismo enforma de alfiler, queda localizado en la herida, y lostejidos muy vecinos; Sánchez Toledo y Veillón no

son tan afirmativos, inclinándose á pensar que duran-te la vida pueden pasar á la sangre, aunque en nú-mero bien pequeño, limSi al extremo de unidad"

, se-gún la frase empleada por estos autores.

Por mi parte me inclino hacia la opinión susten-tada por los experimentadores alemanes, y esto fun-dándome en que el bacilo tetánico no puede encon-trar en la sangre condiciones apropiadas para suexistencia, á causa de su carácter anaereobio y de lariqueza en oxígeno del líquido sanguíneo.

No puede presentarse como argumento contraesta opinión, el hecho de que se haya producido eltétano por inoculaciones de sangre, de fracmentos demédula ó de los líquidos secretados por el hombre óel animal tetánico; por que, como veremos más ade-lante, las sustancias solubles, secretadas por los mi-crobios, penetrando en la sangre y los demás órga-nos, son capaces de determinar por sí solas las con -tracciones tónicas, características de la enfermedad.

Creo, pues, que aquí sucede lo mismo que enla difteria. El bacilo de Lófifer y Klebs (i) se loca-liza en las falsas membranas de la laringe, y sin em-bargo actúa á distancia por intermedio de las sus-tancias tóxicas que secreta.

Veneno elaborado por los bacilos del tétano. —

Si se filtra por medio del tubo de porcelana de Pas-tear un cultivo puro de bacilos tetánicos y se inocu-la el líquido resultante de la filtración, á un conejopor ejemplo, el animal es presa de contraccionesmusculares, cuya intensidad está en relación con laedad del cultivo que se ha usado. Esto prueba dela manera más terminante que no es indispensable

(1) Aunque Klebs fué el primero que vió el bacilo de la difteria,se atribuye generalmente el á Loffer, por que él fuéquien hizo los primeros cultivos y las pr.meras inoculaciones con re-sultado positivo.

la presencia de los bacilos para obtener el tétano ex-perimental, y que basta, para llegar á este resultado,inocular los productos solubles que han atravesadoel filtro, libres por consiguiente de todo germen fi-gurado. Hace ver, igualmente, que el bacilo tetánicoen su completo desarrollo, en la plenitud de su vida,elabora un veneno capaz de producir una intoxica-ción semejante á la de la estricnina.

Que la potencia tóxica del veneno tetánico, au-menta con la edad del cultivo, lo prueba la experi-mentación animal. En un cultivo" joven, de 6 á 8días, la sustancia tóxica está tan atenuada, que elanimal inoculado apenas presenta contracciones li-jeras y se restablece. En cambio, el mismo cultivoinoculado 2o días después, mata rápidamente al ani-mal, en medio'de contracciones violentas, con un té-tano fulminante.

La idea de que el bacilo de que me ocupo obraen virtud de un veneno elaborado por él mismo, fuéya sostenida hace mucho tiempo por Nicolaier, Ro-senbach y Fliige, pero necesitaba de la confumaciónexperimental. Este vacío ha sido llenado solamenteen los líltimos años por los trabajos de Brieger, Weily Kitasato en Alemania, de Vaillard, Vincenty Rouxen Francia, y de Faber en Copenhague.

Acabamos de ver que el producio de la filtra-tración de los cultivos contiene una sustancia vene-nosa muy activa (i), que no pueden ser formada si-no por los microbios; que su poder tóxico aumentacon la edad del cultivo; y que, en fin, produce el té-tano en ausencia absoluta de los bacilos de Nicolaier.Pero cnál es la naturaleza de esta sustancia?

Los trabajos de los experimentadores antes ci-

(1) 0’00000025 de CC. dú la muerte á un ratón, según Vaillard.

tados, tratan de determinarla, como vamo,s á verloen seguida.

Al principio de sus estudios, Brieger la compa-ró á las ptomaínas y creyó encontrar en la mezclala tetanina

,tetanotoxina y la espasmo-toxina, pero

más tarde reformó sus opiniones. Kitasato y Weildescribieron después procedimientos para aislar doscompuestos ptomaicos, bajo la forma de clohidratosde tetanina y de tetanotoxina; mas, las inoculacio-nes practicadas con dichos compuestos dieron porresultado un cuadro sintomático muy poco parecidoal del tétano. Por otra parte, las ptomaínas soncuerpos estables, lo que no sucede con los líquidosobtenidos por la filtración de los cultivos. Trabajosposteriores realizados en Alemania por Brieger yFránkel y en Francia por Vincent, han demostradoque el veneno tetánico es un compuesto albuminoi-deo, semejante á las diasteses, y al que los primerosautores lo han bautizado con el nombre de toxalbu-mina.

A igual conclusión han llegado los trabajos deFaber en Copenhague y de Tizzoni y la señoritaCatani en Italia.

Vaillard y Vincent que han estudiadoúltimamen-te esta materia, atribuyen las propiedades siguientes ála toxina en cuestión.

La temperatura de 65 o destruye ó disminuyepor lo menos, la acción del veneno. Un líquido acti-vo que mata á un cuye á la dosis de 1/200 de centíme-tro cúbico, es completamente atenuado si se le man-tiene por 40 minutos á 60 o ó 20 minutos á 62o

.

Calentadoá 65 o durante 30 minutos, se vuelve com-pletamente inactivo.

Mantenido al abrigo del aire en vasos cerrados,conserva su actividad por mucho tiempo (4 meses),Espuesto al aire y á la luz solar, pierde su actividaddespués de un mes.

Por último comparando la toxina tetánica al

veneno la difteria, los mismos autores agregan:“ El véfieúo tetánico no presenta ninguno de

“ los caracteres de las ptomaínas ni de los otros al—-“ caloides. Por el conjunto de sus propiedades se“ aproxima del veneno diftérico, que Ro'ux y Yer-“sin han comparado con las diastases y las ponzo-“ ñas. Como las primeras, destruido por el calor,“ por el aire y la luz solar; es precipitable por el al-“ cohol y adhiere á ciertos precipitados. Como las“ ponzoñas, obra á dosis imponderables, y no pro-“ duce acción alguna si es ingerido por las vías di-“ gestivas.”

No creo que se haya dicho la última palabra encuanto á la determinación de la naturaleza del venenotetánico, pero he juzgado conveniente hacer conoceren el presente trabajo, el estado actual de la cuestióny lo que se ha hecho en este sentido. Espero sí quemuy pronto se aclararán las dudas, tan rápidamenteavanza la ciencia esperimental hoy en día.

Patogenia. — Pasando ahora á ocuparme de lapatogenia probable del tétano, según los datos sumi-nistrados por la biología del bacilo—alfiler, por laspropiedades de la toxina tetánica y por los esperi-mentos llevados á cabo por algunos observadores alestudiar la acción de esta última sobre los centrosmedulares, voi á decir con franqueza, pero sin pre-tensión alguna, lo que pienso al respecto; y para estono haré mas que seguir al bacilo desde que es introdu-cido en la herida junto con la tierra, hasta la explo-sión de los fenómenos que caracterizan el mal.

Un caso ocurrido hace poco tiempo me dá laocasión de poder llenar más fácilmente mi tarea.

El Sr. Rouillón sufrió en el pueblo de Miraflo-res, una caída de caballo, en cuyo accidente tuvo ladesgracia de fracturarse los huesos del antebrazoizquierdo, cerca de la muñeca. Uno de los fracmen-tos perforó la piel produciendo, como es de suponer-se, una herida desigual que fué cubierta de tierra,

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pues la caída se verificó á la entrada del pueblo don-de el terreno es bastante suelto—Curada la heri-da, hecha la coaptación de los huesos, siguió uncurso regular, sin mas complicaciones que una infla-mación local considerable, que se estendió hasta elcodo.

Seis ó siete días después del accidente y cuandose creía que el enfermo estaba fuera de todo peligro,se presentan las primeras contracciones tetánicas enlos músculos del brazo herido; aparece en seguida eltrismus, luego se contraen los músculos del cuello, ydel otro brazo, constituyéndose un tétano generali-zado. Después de alternativas más ó menos conso-ladoras y no obtante un tratamiento activo, consis-tente en inyecciones intravenosas de doral, y en des-bridaciones del flemón, el enfermo sucumbe porasfixia, á causa de que las contracciones espasmódicasganaron el diafragma.

He aquí á mi juicio, lo que probablemente hapasado en este caso. La tierra conteniendo los jér-menes potógenos penetró en la herida, que por suforma y la carencia de medios antisépticos, no pudoser desinfectada convenientemente desde los prime-ros momentos; el bacilo tetánico introducido así bajola piel, junto con los fracmentos de hueso reducidos,encontró las condiciones de anaercobiosis, necesariaspara su desarrollo, el que tuvo lugar al abrigo delaire y con una temperatura de 37 á 38 o

, ni más nimenos que en un tubo de cultivo—Durante los sietedías de incubación, trascurridos desde el accidentehasta el primer espasmo, se hizo la elaboración delas toxinas, las que una vez absorbidas, en potenciavenenosa, obraron sobre los centros medulares, paradeterminar los fenómenos espasmódicos del tétano.

Señores:—Antes de terminar, os debo una pa-labra de agradecimiento por la benevolencia conque me habéis escuchado; y solamentente os supli-co que disimuléis las imperfecciones de este trabajo,no sea más que por la importancia del asunto que meha servido de tema.

Lima, Junio de 1891.

CUESTIONARIOPARA EL GRADO DE DOCTOR DEL BACHILLER

David Matto.

Anatomía Descriptiva Sustancia gelatinosade Rolando.

Fisiología Glicogenia hepática.Patología General Delirio: su definición

patogenia y caracte-res clínicos.

Terapéuticay Materia Médica Tratamiento del Té-tano.

Anatomía General y Patológica Sangre —Tubérculo.Nosografía Quirúrgica Tratamiento de los

tumores blancos.NosografíaMédica Periencefalitis difusaAnatomía Topográfica y Medicina Operatoriv Región Occipito fron-

tal. Trepanación.Oftalmología Astigmatismo.Física Médicaé Higiene Acción del suelo so-

bre los microbiospatógenos.

Química Médica Glucosa úrica: su de-terminación clínicay su significaciónpatológica.

Zoología y Botánica Médicas Principales plantasde la familia de lasAlgas.

Paetos,EnfebmedadesPuebpeealesydeNíñosTextura musculardel útero grávido.

Medicina Legal y Toxicologia Valor del gonococo en

las investigacionesmédico legales.

Faemacia ...Preparación del io-doformo.

Clínica Médica (hombbes) Relaciones delíubór-culo pulmonar cois

e) lupus.Clínica Médica (mujeees) Diversidad de la Tu-

berculosis.Clínica Quieuegica (hombees) Luxación coxo-femo-

ral. Diagnóstico di-ferencial de sus va-riedades y de lafractura del fémur

Clínica Qüiküegica (mujeees) Práctica déla anti-sépsia en las opera-ciones quirúrgicas.

Clínica de Pastos Conducta que debeobservarse en losca

sos en que la cabezaqueda retenida enel estrecho superiorestrechado, despuésde la expulsión deltronco.

Lima, Julio 4 de 1891.

José Casimiro UlloaSecretario

V.° B.°VILLAR