BULLETIN VÚRH VODŇ ANY 1 - jcu.cz(1 mM). The osmolality of seminal plasma was in range of 230–350 mOsmol.kg-1. After triggering of sperm motility in very low osmolality (distilled

Ročniacutek 45(1) ledenndashbřezen 2009

Volume 45(1) JanuaryndashMarch ___________________________________________________________________________

B U L L E T I N

V Uacute R H V O D Ň A N Y

Tato publikace byla vydaacutena z prostředků EU a Evropskeacuteho rybaacuteřskeacuteho fondu v raacutemci projektu bdquoPřiacuteprava a vydaacuteniacute 45 ročniacuteku odborneacuteho čtvrtleniacuteku Bulletin VUacuteRH

Vodňanyldquo (CZ12531000800290)

Vydaacutevaacute Jihočeskaacute univerzita v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumnyacute uacutestav rybaacuteřskyacute a hydrobiologickyacute ve Vodňanech

Published by University of South Bohemia Českeacute Budějovice Research Institute of Fish Culture and Hydrobiology Vodňany Czech Republic

ISSN 0007-389X

Bulletin VUacuteRH Vodňany 45(1) ndash 2009

O B S A H CONTENTS

Původniacute člaacutenky ndash Original papers SMH ALAVI M RODINA D GELA O LINHART Morfologie spermiiacute složeniacute seminaacutelniacute plazmy motilita a parametry zvlněniacute bičiacuteku spermie u štiky obecneacute (Esox lucius) Sperm morphology seminal plasma composition motility and flagellar wave parameters in pike (Esox lucius)

P PODHOREC J KOUŘIL Hypothalamickeacute faktory (GnRH a DA) a jejich využitiacute k odstraněniacute reprodukčniacute dysfunkce u kaprovityacutech ryb (přehled) Hypothalamic factor (GnRH and DA) and their utilization to elimination of reproductive dysfunction in cyprinidae fish (A review)

J TUREK T RANDAacuteK J VELIacuteŠEK R HANAacuteK E SUDOVAacute Porovnaacuteniacute abundance a biomasy rybiacute obsaacutedky v morfologicky a průtokově odlišnyacutech uacuteseciacutech maleacuteho toku Comparison of fish abundance and biomass in parts of small brook with different morphological and discharge conditions

Kraacutetkaacute sděleniacute ndash Short communications O VALENTOVAacute J MAacuteCHOVAacute Zavedeniacute novyacutech metod stanoveniacute vybranyacutech parametrů kvality vody v centraacutelniacute laboratoři VUacuteRH JU Vodňany New analytical methods for selected parameters of water quality introduced in the hydrochemical laboratory of RIFCH USB Vodňany

Zpraacutevy a Informace ndash News and Information Poradenskeacute informačniacute a školiacuteciacute rybaacuteřskeacute centrum při VUacuteRH JU Vodňany ndash seminaacuteře plaacutenovaneacute na rok 2009

Informace o seminaacuteři ndash Současnost a perspektivy v oblasti hospodařeniacute na pstruhovyacutech vodaacutech XIX Vodňanskeacute rybaacuteřskeacute dny

Pokyny pro autory 33

MORFOLOGIE SPERMIIacute SLOŽENIacute SEMINAacuteLNIacute PLAZMY MOTILITA A PARAMETRY ZVLNĚNIacute BIČIacuteKU SPERMIE U ŠTIKY

OBECNEacute (ESOX LUCIUS) SPERM MORPHOLOGY SEMINAL PLASMA COMPOSITION MOTILITY AND

FLAGELLAR WAVE PARAMETERS IN PIKE (ESOX LUCIUS)

SMH ALAVI M RODINA D GELA O LINHART Jihočeskaacute univerzita v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumnyacute uacutestav rybaacuteřskyacute a hydrobiologickyacute Zaacutetišiacute 728II 389 25 Vodňany e-mail alavivurhjcucz Abstract

Pike (Esox lucius L) spermatozoa are uniflagellated and are differentiated into a head without acrosome a midpiece and a tail region with fin(s) Total flagellar nucleus and midpiece lengths of spermatozoa were measured to be 345 320 132 117 microm respectively Anterior and posterior widths of midpiece were 08 and 06 microm respectively Ionic composition of seminal fluid were Na+ (116 mM) Cl- (116 mM) and K+ (25 mM) Ca 2+ (1 mM) The osmolality of seminal plasma was in range of 230ndash350 mOsmolkg-1 After triggering of sperm motility in very low osmolality (distilled water) blebs appeared along the flagellum At later periods in the motility phase the tip of flagellum became curled into a loop which shortened the flagellum and restricted waves to the proximal part of flagellum The highest percentage of motile sperm and sperm velocity were observed in range of 125 to 235 mOsmolkg-1 Osmolality more than 350 mOsmolkg-1 inhibited the motility of spermatozoa After triggering of sperm motility in activation media beating waves propagated along the full length of flagella while waves appeared dampened later during the motility phase then completely absent at the end of the motility phase By increasing of osmolality when the velocity of spermatozoa reaches the highest value wave length and amplitude showed the highest significant values as well number of waves and curvatures

Kliacutečovaacute slova štika obecnaacute Esox lucius spermie rastrovaciacute elektronovaacute mikroskopie bičiacutek osmolalita Key words Pike Esox lucius Sperm SEM Flagella Osmolality UacuteVOD

Na rybiacutech spermiiacutech lze rozlišit hlavičku redukovanou centraacutelniacute čaacutest s distaacutelniacutem a proximaacutelniacutem centriolem a bičiacutek s typickyacutemi 9 + 2 paacutery mikrotubulů (Lahnsteiner a Patzner 2008) Spermie jsou v testes imobilniacute u sladkovodniacutech druhů ryb je motilita spermiiacute indukovaacutena změnou ndash sniacuteženiacutem osmolality prostřediacute (např kapr Cyprinus carpio L) nebo poměrem obsahu některyacutech iontů předevšiacutem K+ a Ca2+ (jeseterovitiacute Acipenseridae) (Cosson a kol 1999 Alavi a Cosson 2006) U některyacutech druhů ryb (liacuten obecnyacute Tinca tinca sumec velkyacute Silurus glanis štika obecnaacute Esox lucius bolen dravyacute Aspius aspius) mohou byacutet potencionaacutelně aktivovaacuteny již během jejich transportu z testes k močopohlavniacutemu otvoru močiacute (Morisawa 1985)

V přiacutepadě řiacutezeneacute reprodukce štiky obecneacute je hlavniacutem probleacutemem ziacuteskat dostatek kvalitniacuteho spermatu Sperma ziacuteskaneacute masaacutežiacute břišniacute partie ryby je kontaminovaacuteno močiacute z močoveacuteho měchyacuteře a tiacutem okamžitě aktivovaacuteno (Alavi a kol nepublikovanaacute data) Proto je pro optimalizaci řiacutezeneacute reprodukce štiky důležiteacute porozumět vlivu osmolality aktivačniacuteho meacutedia na motilitu spermiiacute (Alavi a kol 2007 2008a Linhart a kol 2008)

Předmětem teacuteto studie je (a) morfologie spermie štiky obecneacute studovanaacute za použitiacute elektronoveacuteho mikroskopu (b) efekt osmolality na procento motilniacutech spermiiacute a jejich rychlost (c) efekt velmi niacutezkeacute osmolality na morfologii spermiiacute na konci pohyblivosti studovanyacute s využitiacutem světelneacute a elektronickeacute mikroskopie a (d) dokumentace a pochopeniacute parametrů zvlněniacute bičiacuteku spermie při aktivaci roztoky o různeacute osmolalitě

MATERIAacuteL A METODIKA Ziacuteskaacuteniacute vzorků

V březnu roku 2007 a 2008 při přirozeneacutem reprodukčniacutem obdobiacute štiky obecneacute bylo v odchovneacutem rybniacutece VUacuteRH JU odloveno 16 kusů spermiujiacuteciacutech mliacutečaacuteků štiky (o deacutelce těla 500ndash670 mm) a převezeno do rybiacute liacutehně VUacuteRH JU Pro vyššiacute spermiaci nebyla použita žaacutednaacute hormonaacutelniacute stimulace ryb Sperma bylo od mliacutečaacuteků ziacuteskaacuteno masaacutežiacute břišniacute partie těla ryby Sperma od každeacuteho jedince bylo u močopohlavniacuteho otvoru nasaacuteto do sterilniacutech injekčniacutech střiacutekaček o objemu 10 ml tak aby bylo zabraacuteněno kontaminaci spermatu močiacute rybiacutem slizem nebo vodou Vzorky byly uloženy v chladiacuteciacutem boxu na drceneacutem ledu tzn při teplotě 0ndash4 degC

Morfologie spermiiacute štiky obecneacute

Pro studium morfologie spermiiacute štiky obecneacute byly vzorky spermatu fixovaacuteny 25 glutaraldehydu v 01 M fosfaacutetoveacutem pufru fixovaneacute vzorky byly opakovaně promyacutevaacuteny 2 hodiny při 4 degC ve 4 roztoku OsO4 a naacutesledně dehydrovaacuteny acetonovou řadou Vzorky byly daacutele pozlaceny v pokovovaciacute jednotce E5100 (Polaron Equipment Ltd England) a pozorovaacuteny rastrovaciacutem elektronovyacutem mikroskopem (SEM) JSM 6300 (JEOL Ltd Akishima Tokyo Japan) (Alavi a kol 2008b) Morfologickeacute parametry byly měřeny z digitaacutelniacutech sniacutemků pomociacute software Olympus MicroImage (verze 401 pro Windows)

Složeniacute seminaacutelniacute plazmy

Iontoveacute složeniacute (Na+ K+ Ca2+ a Cl-) a osmolalita seminaacutelniacute plazmy byly měřeny plamenovyacutem spektrometrem SpectrAA 640 (Varian Techtron Australia) a osmometrem (Vapour Pressure osmometer Wescor USA) Pro odděleniacute seminaacutelniacute plazmy a spermiiacute ve vzorciacutech bylo použito odstředěniacute 2 200 g po dobu 5 minut

Motilita spermiiacute a parametry zvlněniacute bičiacuteku

Efekt osmolality na procento motilniacutech spermiiacute a jejich vlastniacute pohyb byl studovaacuten za použitiacute různyacutech koncentraciacute NaCl a sacharoacutezy rozpuštěnyacutech v destilovaneacute vodě s přidaacuteniacutem 20 mM Tris pH meacutedia bylo upraveno na uacuterovni 85 Osmolalita aktivačniacuteho meacutedia a seminaacutelniacute plazmy ze vzorku spermiiacute byla měřena za pomoci osmometru Jako kontrolniacute aktivačniacute meacutedium byl použit 01 roztok BSA Pro vlastniacute sledovaacuteniacute motility byl 10 microl spermatu naředěn a aktivovaacuten 49 microl aktivačniacuteho roztoku a motilita spermiiacute byla pozorovaacutena mikroskopiiacute v tmaveacutem poli se stroboskopickyacutem osvětleniacutem a zaznamenaacutena pomociacute CCD videokamery na S-VHS videorekordeacuter Parametry motility spermiiacute (pohyblivost a procento motilniacutech buněk) a parametry zvlněniacute bičiacuteku (počet zvlněniacute deacutelka vln a jejich amplitudy) byly naacutesledně analyzovaacuteny pomociacute programu Micro Image 40 (Alavi a kol 2007 2008b)

Vyhodnoceniacute dat

Statistickaacute průkaznost byla hodnocena pomociacute analyacutezy variance (ANOVA SPSS 100) Pravděpodobnost na hladině lt 005 byla akceptovaacutena za průkaznou

VYacuteSLEDKY A DISKUZE

Tak jako u většiny kostnatyacutech ryb maacute spermie štiky obecneacute hlavičku bez akrozomu centraacutelniacute čaacutest a jeden bičiacutek kteryacute však po jedneacute straně vybiacutehaacute v bdquoploutvičkuldquondash lem připomiacutenajiacuteciacute ploutevniacute lem uacutehoře (Lahnsteiner and Patzner 2008) (Obr 1) Celkovaacute deacutelka deacutelka bičiacuteku hlavičky a centraacutelniacute čaacutesti byly průměrně 345 320 132 117 microm Šiacuteřka

centraacutelniacute čaacutesti byla 08 (kraniaacutelně) a 06 microm (kaudaacutelně) bdquoPloutvičkaldquo podeacutel bičiacuteku byla zaznamenaacutena podobnaacute jako již byla popsaacutena u spermiiacute jeseterů (Pšenička a kol 2008)

Iontoveacute složeniacute seminaacutelniacute plazmy bylo naacutesledujiacuteciacute Na+ (116 plusmn 9 mM) Cl-

(116 plusmn 7 mM) a K+ (25 plusmn 4 mM) Ca 2+ (1 plusmn 02 mM) Uacuteroveň osmolality se pohybovala v rozmeziacute 230ndash350 mOsmolkg-1 Srovnaacuteniacute těchto hodnot s hodnotami zjištěnyacutemi u ostatniacutech kostnatyacutech ryb ukazuje na charakteristickou druhovou specifičnost (Alavi a kol 2007 2008 Hulaacutek a kol 2008) Při porovnaacuteniacute s hodnotami u chrupavčityacutech ryb reprezentovanyacutech jeseterovityacutemi jsou hodnoty obsahu iontů a tiacutem i osmolalita spermatu vyššiacute což odpoviacutedaacute zaacutekladniacutem rozdiacutelům mezi spermatem kostnatyacutech a chrupavčityacutech ryb

45 sekund po aktivaci spermiiacute v prostřediacute o velice niacutezkeacute osmolalitě (destilovanaacute voda) se uprostřed bičiacuteku vytvořil ohyb (Obr 2) jenž zabraňuje spraacutevneacute a efektivniacute funkci bičiacuteku Po několika dalšiacutech sekundaacutech motility konec bičiacuteku vytvořil spiraacutelu kteraacute bičiacutek zkraacutetila a vlastniacute zvlněniacute pro pohyb spermie zůstalo zachovaacuteno pouze v proximaacutelniacute čaacutesti Poškozeniacute středniacute čaacutesti bičiacuteku bylo pozorovaacuteno po 60 sekundaacutech od počaacutetku aktivace spermiiacute destilovanou vodou Tato poškozeniacute bičiacuteků spermiiacute nebyla pozorovaacutena pokud byl použityacute aktivačniacute roztok o vyššiacute osmolalitě (gt 125 mOsmolkg-1) (Linhart a kol 2008)

Obr 1 Morfologie spermie štiky obecneacute (Esox lucius) N Nucleus ndash hlavička M Midpiece

ndash středniacute čaacutest F Flagellum ndash bičiacutek Šipka ukazuje bdquoploutvičkuldquo podeacutel bičiacuteku spermie Fig 1 Sperm morphology in Esox lucius N Nucleus M Midpiece F Flagellum Arrow shows

fin(s) along flagellum of spermatozoa Obr 2 Efekt hypoosmotickeacuteho šoku na morfologii spermie 45 a 60 sekund po jejiacute aktivaci

destilovanou vodou Fig 2 Effects of hypo-osmotic shock on sperm morphology at 45 and 60 sec post activation

of spermatozoa in distilled water

45 s po aktivaci

60 s po aktivaci Obr 1 Obr 2

Nejvyššiacute procento pohyblivyacutech spermiiacute bylo pozorovaacuteno 15 sekund po aktivaci při osmolalitě v rozmeziacute 125ndash235 mOsmolkg-1 při použitiacute roztoku NaCl (Obr 3A) nebo sacharoacutezy (Obr 3B) Po 60 sekundaacutech od počaacutetku aktivace bylo zjištěno průkazně nejvyššiacute procento pohyblivyacutech spermiiacute při osmolalitě 200ndash230 mOsmolkg-1 Osmolalita vyššiacute než

350 mOsmolkg-1 již motilitu spermiiacute inhibovala Stejně tomu bylo i v přiacutepadě rychlosti pohybu spermiiacute nejvyššiacute hodnoty v čase 15 s od aktivace byly zaznamenaacuteny v roztoku osmolality 125ndash235 mOsmolkg-1 v čase 60 s po aktivaci byly nejvyššiacute hodnoty zaznamenaacuteny v roztoku osmolality 200ndash235 mOsmolkg-1 (P lt 005)

Společně s vlivem osmolality na rychlost spermiiacute se projevil i jejiacute vliv na trajektorii hlaviček pohybujiacuteciacutech se spermiiacute Se zvyšujiacuteciacute se osmolalitou aktivačniacuteho meacutedia se ve stejneacutem čase trajektorie prodlužovala (Obr 4)

Po aktivaci spermiiacute meacutediem se vlněniacute bičiacuteku šiacuteřilo po jeho celeacute deacutelce s přibyacutevajiacuteciacutem časem se tlumilo a kompletně ustalo na konci faacuteze motility Parametry vln bičiacuteku se měnily v zaacutevislosti na užiteacute osmolalitě aktivačniacuteho meacutedia Obr 5 zobrazuje parametry zvlněniacute bičiacuteku spermiiacute aktivovanyacutech roztoky různeacute osmolality S osmolalitou zvyšujiacuteciacute se k hodnotaacutem kdy pohyblivost spermiiacute dosahovala maxima vykaacutezala nejvyššiacute hodnoty deacutelka vlny a jejiacute amplituda stejně tak jako počet vln a ohybů bičiacuteku Při stejneacute osmolalitě aktivačniacuteho meacutedia se s přibyacutevajiacuteciacutem časem deacutelka vlny a jejiacute amplituda postupně snižovala Toto snižovaacuteniacute amplitudy bičiacuteku po jeho celeacute deacutelce nazyacutevaacuteme ldquowave dampening ndash tlumeniacute vlnyrdquo (Cosson a kol 2000) Počet zakřiveniacute a vln v raacutemci stejneacute uacuterovně osmolality se v čase od aktivace zvyšuje

Obr 3 Efekt osmolality na procento mobilniacutech spermiiacute a jejich rychlosti po aktivaci meacutediem

s obsabem NaCl (A) a sacharoacutezy (B) + 20mM Tris pH 85 Hodnoty se stejnyacutemi piacutesmeny se statisticky průkazě nelišiacute (P gt 005) Osmolalita spermatu použityacutech mliacutečaacuteků byla v rozmeziacute 230ndash350 mOsmolkg-1

Fig 3 Effects of osmolality on percentage of motile spermatozoa and sperm velocity after activation in media containing NaCl (A) and Sucrose (B) + 20mM Tris pH 85 Values with different letters are not significantly different (P gt 005) The osmolality of males studied in this part of study was in range of 230ndash350 mOsmolkg-1

0 80 125 200 300 350

Osmolalita (mOsmolkg-1)

yacutech

miiacute

10 s po aktivaci60 s po aktivaci

10 s po aktivaci

0 125 235Osmolalita (mOsmolkg-1)

yacutech

miiacute

60 s po aktivaci

0 125 235 350

miiacute

0 80 125 200 300 350

miiacute

Obr 5 Parametry vlny bičiacuteku motilniacute spermie štiky obecneacute (Esox lucius) při odlišnyacutech osmolalitaacutech 10 (a) 20 (b) 30 (c) a 45 (d) sekund po aktivaci

Fig 5 Flagellar wave parameters during sperm motility in Esox lucius at different osmolalities at 10 (a) 20 (b) 30 (c) and 45 (d) sec post activation

a b bc

0 25 50 100 150

Osmolalita aktivačniacuteho meacutedia (mOsmolkg-1)

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlny

Amplituda vyacutekyvu

0 25 50 100 150

Počet ohybůPočet vln

bbababa

0 25 50 100 150

dcdbc ba

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlnyAmplituda vyacutekyvu

bcababa

0 25 50 100 150

aababc bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

25 50 100

25 50 100Osmolalita aktivačniacuteho meacutedia (mOsmolkg-1)

Deacutel

dy (μ

d d Deacutelka vlny

Obr 4 Trajektorie hlavičky spermie štiky obecneacute (Esox lucius) po jejiacute aktivaci (a) destilovanou vodou (00 mOsmolkg-1) a aktivačniacutem meacutediem s obsahem NaCl + 20 mM Tris pH 85 o osmolalitě (b) 50 (c) 200 a (d) 300 mOsmolkg-1

Fig 4 Sperm head trajectories in Esox lucius during motility after activation in (a) distilled water (00 mOsmol kg-1) and activation media containing NaCl + 20 mM Tris pH 85 at osmolalities (b) 50 (c) 200 and (d) 300 mOsmol kg-1)

ZAacuteVĚR

Spermie štiky obecneacute majiacute morfologii obvyklou pro kostnateacute ryby s vnějšiacutem oplozeniacutem Meacuteně obvyklyacute je pozorovanyacute jednostrannyacute lem bičiacuteku jemuž můžeme přičiacutetat typickeacute zalomeniacute bičiacuteku po aktivaci v aktivačniacutem meacutediu niacutezkeacute osmolality Tento jev lze daacutele pozorovat např u spermiiacute candaacuteta obecneacuteho (Stizostedion lucioperca) Aktivace spermiiacute štiky je zaacutevislaacute na osmolalitě aktivačniacuteho meacutedia a nikoliv iontoveacuteho složeniacute což potvrzuje aktivace roztoky na baacutezi cukrů (sacharoacuteza) Mechanickaacute destrukce bičiacuteku pohyboveacuteho aparaacutetu spermie vyvolanaacute aktivaciacute meacutediem velmi niacutezkeacute osmotickeacute uacuterovně (např destilovanou vodou) a dokumentovanaacute elektronovou mikroskopiiacute může vysvětlovat negativniacute vliv kontaminace spermatu močiacute kteraacute je u sladkovodniacutech ryb hypotonickaacute Na druheacute straně inhibice pohybu spermiiacute v meacutediu osmotickeacute uacuterovně nad 350 mOsmolkg-1 ukazuje na možnost využitiacute vhodnyacutech imobilizačniacutech roztoků pro uchovaacuteniacute pohyblivosti spermatu štiky po odběru

Praktickeacute využitiacute vyacuteše zmiňovanyacutech informaciacute lze využiacutet při naacutevrhu imobilizačniacuteho roztoku pro odběr spermiiacute štiky a tiacutem se v praxi při uměleacutem vyacutetěru vyhnout obvykleacutemu použitiacute testikulaacuterniacuteho spermatu ze zabityacutech mliacutečaacuteků SOUHRN

Tak jako u většiny kostnatyacutech ryb maacute spermie štiky obecneacute (Esox lucius L) hlavičku bez akrozomu centraacutelniacute čaacutest a jeden bičiacutek s jednostrannyacutem lemem Celkovaacute deacutelka deacutelka bičiacuteku hlavičky a centraacutelniacute čaacutesti jsou průměrně 345 320 132 117 microm Šiacuteřka centraacutelniacute čaacutesti byla 08 (kraniaacutelně) a 06 microm (kaudaacutelně) Iontoveacute složeniacute seminaacutelniacute plazmy bylo naacutesledujiacuteciacute Na+ (116 plusmn 9 mM) Cl- (116 plusmn 7 mM) a K+ (25 plusmn 4 mM) Ca 2+ (1 plusmn 02 mM) Uacuteroveň osmolality se pohybovala v rozmeziacute 230ndash350 mOsmolkg-1 15 sekund po aktivaci bylo nejvyššiacute procento pohyblivyacutech spermiiacute pozorovaacuteno při osmolalitě v rozmeziacute 125ndash235 mOsmolkg-1 při použitiacute roztoku NaCl nebo sacharoacutezy Po 60 sekundaacutech od počaacutetku aktivace průkazně nejvyššiacute procento pohyblivyacutech spermiiacute bylo zjištěno při osmolalitě 200ndash230

mOsmolkg-1 Osmolalita vyššiacute než 350 mOsmolkg-1 již motilitu spermiiacute inhibovala Stejně tomu bylo i v přiacutepadě rychlosti pohybu spermiiacute nejvyššiacute hodnoty v čase 15 sekund od aktivace byly zaznamenaacuteny v roztoku osmolality 125ndash235 mOsmolkg-1 v čase 60 sekund po aktivaci byly nejvyššiacute hodnoty zaznamenaacuteny v roztoku osmolality 200ndash235 mOsmolkg-1 Společně s vlivem osmolality na rychlost spermiiacute se projevil i jejiacute vliv na trajektorii hlaviček pohybujiacuteciacutech se spermiiacute Se zvyšujiacuteciacute se osmolalitou aktivačniacuteho meacutedia se ve stejneacutem čase trajektorie prodlužovala Po aktivaci spermiiacute meacutediem se vlněniacute bičiacuteku šiacuteřilo po jeho celeacute deacutelce s přibyacutevajiacuteciacutem časem se tlumilo a kompletně ustalo na konci faacuteze motility Parametry vln bičiacuteku se měnily v zaacutevislosti na užiteacute osmolalitě aktivačniacuteho meacutedia S osmolalitou zvyšujiacuteciacute se k hodnotaacutem kdy pohyblivost spermiiacute dosahovala maxima vykaacutezala nejvyššiacute hodnoty deacutelka vlny a jejiacute amplituda stejně tak jako počet vln a ohybů bičiacuteku Při stejneacute osmolalitě aktivačniacuteho meacutedia se s přibyacutevajiacuteciacutem časem deacutelka vlny a jejiacute amplituda postupně snižovala Počet zakřiveniacute a vln v raacutemci stejneacute uacuterovně osmolality se v čase od aktivace zvyšuje Poděkovaacuteniacute

Tato praacutece byla vypracovaacutena v raacutemci vyacutezkumneacuteho zaacuteměru VUacuteRH JU Vodňany MSM6007665809 a GA ČR č 524060817 LITERATURA Alavi SMH Cosson J 2006 Sperm motility in fishes (II) Effects of ions and osmotic pressure Cell

Biology International 30 1-14 Alavi SMH Rodina M Policar T Kozaacutek P Pšenička M Linhart O 2007 Semen of Perca fluviatilis

L Sperm volume and density seminal plasma indices and effects of dilution ratio ions and osmolality on sperm motility Theriogenology 68 276-283

Alavi SMH Cosson J Coward K Rafiee R 2008a Fish Spermatology Alpha Science Ltd Oxford UK 460 pp

Alavi SMH Pšenička M Rodina M Policar T Linhart O 2008b Changes of sperm morphology volume density and motility and seminal plasma composition in Barbus barbus (Teleostei Cyprinidae) during the reproductive season Aquatic Living Resources 21 75-80

Cosson J Billard R Gibert C Dreanno C Suquet M 1999 Ionic factors regulating the motility of fish sperm In C Gagnon (Editor) The male gamete From basic to clinical applications Cache Rive Press Vienna II pp 161-186

Cosson J Linhart O Mims SD Shelton WL Rodina M 2000 Analysis of motility parameters from paddlefish and shovelnose sturgeon spermatozoa Journal Fish Biology 56 1-20

Hulaacutek M Rodina M Alavi SMH Linhart O 2008 Evaluation of semen and urine of pike (Esox lucius L) Ionic compositions and osmolality of the seminal plasma and sperm volume density and motility Cybium 32 189-190

Lahnsteiner F Patzner RA 2008 Sperm morphology and ultrastructure in fish In Alavi SMH Cosson J Coward K Rafiee R (Eds) Fish Spermatology Alpha Science Ltd Oxford UK pp 1-61

Linhart O Alavi SMH Rodina M Gela D Cosson J 2008 Comparison of sperm velocity motility and fertilizing ability between firstly and secondly activated spermatozoa of common carp (Cyprinus carpio) Journal of Applied Ichthyology 24 386-392

Morisawa M 1985 Initiation mechanism of sperm motility at spawning in teleosts Zoological Science 2 605-615

Pšenička M Alavi SMH Rodina M Cicova Z Gela D Cosson J Nebesaacuteřovaacute J Linhart O 2008 Morphology chemical contents and physiology of chondrostean fish sperm A comparative study between Siberian sturgeon (Acipenser baerii) and sterlet (Acipenser ruthenus) Journal of Applied Ichthyology 24 371-377

HYPOTHALAMICKEacute FAKTORY (GnRH a DA) A JEJICH VYUŽITIacute K ODSTRANĚNIacute REPRODUKČNIacute DYSFUNKCE U KAPROVITYacuteCH

RYB (PŘEHLED) HYPOTHALAMIC FACTORS (GnRH AND DA) AND THEIR UTILIZATION TO ELIMINATION OF REPRODUCTIVE DYSFUNCTION IN CYPRINIDAE FISH

(A REVIEW)

P PODHOREC J KOUŘIL

Jihočeskaacute univerzita v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumnyacute uacutestav rybaacuteřskyacute a hydrobiologickyacute Zaacutetišiacute 728II 389 25 Vodňany e-mail podhop01vurhjcucz Abstract

Most of the cyprinids reared under controlled conditions show signs of reproductive dysfunction that resembles the inability of undergoing final oocyte maturation (FOM) and ovulation Reproductive dysfunction is invoked by insufficient sensory-organs stimulation of the fish beeing reared in the environs of fish farms which do lack natural FOM inductors (spawning substrate stream hydraulics nutriment etc) The consequence of previous is the blockade of endogenous gonadotropin-releasing hormone (GnRH) secretion and sequentially also blockade of luteinizig hormone (LH) that is inevitable for final phases of gametogenesis In addition to the methodics using the application of exogenous gonadotropins the usage of method functioning on the base of hypothalamic factors of FOM and ovulation control is beeing preffered recently This was made possible mainly because of detailed knowledge of the gonadotropin-releasing hormone system and gonadotropin-releasing hormone forms of fish with the identification of a Dopamine inhibitory factor The replacement of natural gonadotropin-releasing hormones forms with chemically synthetisized gonadotropin-releasing hormones analogues characterized by amino acid substitutions on the positions sensitive to enzymatic degradation has resulted in a centuple increase in effectiveness of luteinizing hormone secretion induction Combining gonadotropin-releasing hormone analogues with Dopamine inhibitory factors made it possible to develop an extremely effective agent inevitable for the successful artificial reproduction of the cyprinids

Kliacutečovaacute slova finaacutelniacute zraacuteniacute oocytů ovulace luteinizačniacute hormon GnRH gonadotropin dopamin Cyprinidae Keywords final oocyte maturation ovulation luteinizing hormone GnRH gonadotropin dopamine Cyprinidae UacuteVOD

Čeleď Cyprinidae jež zahrnuje viacutece než 2 010 druhů seskupenyacutech ve 210 rodech patřiacute z hospodaacuteřskeacuteho ale i z ekologickeacuteho uacutehlu pohledu mezi jednu z nejvyacuteznamnějšiacutech skupin sladkovodniacutech ryb pokryacutevajiacuteciacutech svyacutem rozšiacuteřeniacutem Severniacute Ameriku Afriku a Euroasii (Nelson 2006) Ať z hlediska zaacutechranaacuteřsko-introdukčniacutech programů či hospodaacuteřskeacute činnosti je zaacutekladniacute podmiacutenkou chovu uacutespěšneacute zvlaacutednutiacute všech faacuteziacute uměleacute reprodukce zajišťujiacuteciacute dostatečneacute množstviacute kvalitniacuteho naacutesadoveacuteho materiaacutelu U většiny kaprovityacutech druhů chovanyacutech v kontrolovanyacutech podmiacutenkaacutech se vyskytuje některaacute z forem reprodukčniacute dysfunkce zapřiacutečiněnaacute podmiacutenkami chovu v zajetiacute diametraacutelně se lišiacuteciacutech od podmiacutenek ve kteryacutech se generačniacute ryby vyskytujiacute v přirozeneacutem prostřediacute řek a jezer Změněneacute faktory vnějšiacuteho prostřediacute (vyacutetěrovyacute substraacutet hydraulika toku potrava kvalita vody antropogeniacute stres aj) působiacute na senzorickeacute orgaacuteny ryby jejichž prostřednictviacutem ovlivňujiacute negativniacutem směrem endogenniacute prostřediacute těla ryby majiacuteciacute za naacutesledek reprodukčniacute dysfunkci (Zohar a Mylonas 2001) U kaprovityacutech ryb se nejčastěji setkaacutevaacuteme s dysfunkciacute na uacuterovni neschopnosti podstoupit finaacutelniacute dozraacuteniacute pohlavniacutech produktů zejmeacutena oocytů Ryba po uacutespěšneacutem ukončeniacute vitelogeneze neniacute schopna dalšiacutech kroků gametogeneze a naacutesledneacute ovulace (Mylonas a Zohar 2007) Objeveniacute primaacuterniacute struktury savčiacuteho neurodekapeptidu GnRH (Burgus a kol 1971) začaacutetkem 70 let znamenalo vyacuteznamnyacute posun v možnostech hormonaacutelniacute terapie reprodukčniacutech dysfunkciacute nejen u kaprovityacutech ryb K doposud využiacutevaneacutemu typu hormonaacutelniacute terapie nahrazujiacuteciacute nedostatečnou produkci endogenniacuteho

luteinizačniacuteho hormonu (LH) exogenniacutem luteinizačniacutem hormonem (rybiacute hypofyacuteza choriogonadotropin) se přidala možnost přiacutemeacute stimulace gonadotropniacutech buněk sekretujiacuteciacutech rybiacutemu organismu vlastniacute luteinizačniacute hormon Současně s identifikaciacute inhibičniacuteho faktoru LH ndash dopaminu (Peter a kol 1986) a využitiacute jeho antagonistů se podařilo vyvinout mimořaacutedně uacutečinnou stimulačniacute metodiku sekrece LH aplikovatelnou u celeacute plejaacutedy rybiacutech druhů tzv hypothalamickyacute přiacutestup (Peter a kol 1988) Charakteristika hypothalamickyacutech faktorů využiacutevanyacutech při odstraňovaacuteniacute reprodukčniacutech dysfunkciacute Stimulačniacute faktor LH sekrece ndash GnRH

V čeledi Cyprinidae jako i u jinyacutech kostnatyacutech ryb je spouštěciacute hormon gonadotropinu (GnRH) považovaacuten za uacutestředniacuteho regulaacutetora reprodukčniacute kaskaacutedy s vyacutesadniacutem postaveniacutem při stimulaci sekrece gonadotropinů folikulostimulačniacuteho hormonu a luteinizačniacuteho hormonu (Millar a kol 2004) Samotnaacute synteacuteza GnRH probiacutehaacute v neurosekrečniacutech neuroacutenech hypothalamu (hypothalamickaacute jaacutedra) konkreacutetně v somatě endoplazmatickeacuteho retikula odkud je naacutesledně předaacutevanyacute Golgiho aparaacutetu kde se baliacute do granuliacute s membraacutenou o průměru 100ndash300 nm (Fink 1988) Z nervovyacutech zakončeniacutech jsou granule putujiacuteciacute v axonech uvolňovaneacute změnou akčniacuteho potenciaacutelu trvajiacuteciacuteho 10x deacutele než je tomu u jinyacutech vlaacuteken z důvodu zajištěniacute dostatečneacute sekrece hormonu (Yaron a kol 2003) U ryb v porovnaacuteniacute se savci nedochaacuteziacute k vytvaacuteřeniacute portaacutelniacuteho systeacutemu a hypothalamickaacute nervovaacute vlaacutekna probiacutehajiacute z hypothalamu přes hypofyzaacuterniacute stopku do distaacutelniacute čaacutesti hypofyacutezy K uvolňovaacuteniacute neurohormonů dochaacuteziacute v těsneacute bliacutezkosti sekrečniacutech buněk (Nagahama 1983 Okubo a Nagahama 2008)

GnRH o složeniacute aminokyselinoveacuteho spektra pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNH2 (mGnRH) se poprveacute podařilo izolovat ze savčiacuteho hypothalamu (Burgus a kol 1971) Jako prvniacute formu GnRH u kostnatyacutech ryb se podařilo identifikovat lososiacute GnRH (sGnRH) u lososa keta (Oncorhynchus keta) s velmi podobnou strukturou jakou maacute mGnRH rozdiacutely jsou pouze u aminokyselin na pozici 7 (Trp) a 8 (Leu) (Sherwood a kol 1983) Kostnateacute ryby se mezi obratlovci celkově vyznačujiacute nejvyššiacutem počtem doposud identifikovanyacutech forem GnRH (Kah a kol 2007 Okubo a Nagahama 2008) když byl nalezen souběžnyacute vyacuteskyt nejmeacuteně dvou variant GnRH (Penligton a kol 1997) s vyacuteskytem až třech forem u některyacutech druhů např mořan zlatyacute (Sparus aurata) (Powell a kol 1994) Fernald a White (1999) navrhli rozdělit objeveneacute fomy GnRH do třech liniiacute Do linie GnRH1 řadiacuteme formy plniacuteciacute hypofyziotropickou funkci s hlavniacutem miacutestem vyacuteskytu v preoptickeacute oblasti jednaacute se např o mGnRH mořaniacute GnRH (Powell a kol 1994) sumčiacute GnRH (Bogerd a kol 1992) Do linie GnRH2 je řazena pouze forma kuřeciacute GnRH-II (cGnRH-II) o aminokyselinoveacutem složeniacute (pGlu-His-Trp-Ser-His-Gly-Trp-Tyr-Pro-GlyNH) vyskytujiacuteciacute se u všech doposud studovanyacutech kostnatyacutech druhů ryb s miacutestem exprese ve středniacutem mozku (Peter a Yu 1997) Experimentaacutelně byl prokaacutezaacuten jejiacute vliv na stimulaci sexuaacutelniacuteho chovaacuteniacute (Volkoff a Peter 1999) jako i inhibici přiacutejmu potravy (Matsuda a kol 2008) Linie GnRH3 je představovanaacute formou sGnRH (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Trp-Leu-Pro-GlyNH2) vyskytujiacuteciacute se pouze u kostnatyacutech ryb s hlavniacutem miacutestem vyacuteskytu v čichovyacutech lalociacutech a předniacutem mozku (Penlington a kol 1997) U druhů vykazujiacuteciacutech jen 2 formy GnRH si cGnRH-II zachovaacutevaacute svoji expresi ve středniacutem mozku přičemž druhaacute souběžně se vyskytujiacuteciacute forma zabiacuteraacute miacutesta exprese linie GnRH1 i GnRH3 (Peter a Yu 1997)

Na zaacutekladě dosavadniacutech vyacutezkumů se podařilo u přiacuteslušniacuteků čeledě Cyprinidae konkreacutetně u karasa obecneacuteho (Carassius carassius) (Peter a kol 1991) plotice obecneacute (Rutilus rutilus) (Penlington a kol 1997) a dania pruhovaneacuteho (Brachydanio rerio) (Steven a kol 2003) potvrdit vyacuteskyt jen 2 liniiacute GnRH GnRH vyskytujiacuteciacute se u doposud

prozkoumanyacutech přiacuteslušniacuteků čeledě Cyprinidae řadiacuteme do liniiacute GnRH2 a GnRH3 bez GnRH naacuteležejiacuteciacute do linie GnRH1 Zdaacute se že v přiacutepadě nepřiacutetomnosti linie GnRH1 u ryb čeledi Cyprinidae přebiacuteraacute na sebe jejiacute aktivitu v uvolňovaacuteniacute gonadotropinu sGnRH s jistou vyacutepomociacute ze strany cGnRH-II (Okubo a Nagahama 2008) Důkazem toho je jednak projekce sGnRH neuronů z preoptickeacute oblasti do hypofyacutezy jako i to že sGnRH je forma s nejvyššiacute hladinou vyacuteskytu v hypofyacuteze (Steven a kol 2003) GnRH receptory

GnRH vykonaacutevaacute svou regulačniacute uacutelohu prostřednictviacutem rozpoznaacuteniacute a navaacutezaacuteniacute se na receptory lokalizovaneacute na membraacuteně řadiacuteciacute se mezi receptory spřaženeacute s G proteinem Typickaacute struktura těchto receptorů sestaacutevaacute ze třiacute funkčniacutech domeacuten z extracelulaacuterniacuteho N-konce intraceluaacuterniacuteho cytoplazmatickeacuteho C-konce a transmembraacutenoveacute čaacutesti Ta sedmkraacutet prochaacuteziacute membraacutenou a spojuje extra- a intracelulaacuterniacute čaacutest (Millar a kol 2004) Extracelulaacuterniacute a intracelulaacuterniacute čaacutesti jsou zapojeneacute do rozpoznaacuteniacute a navaacutezaacuteniacute ligandu zatiacutemco cytoplazmatickaacute domeacutena interaguje s G proteinem (Blomenroumlhr a kol 1997 Sealfon a kol 1997) Rybiacute typ GnRH receptoru se lišiacute od dobře znaacutemeacuteho savčiacuteho GnRH receptoru stavbou intracelulaacuterniacute C čaacutesti To maacute značnyacute vliv na vazbu liganda fosforylaci znecitlivěniacute a miacuteru exprese receptoru na povrchu buňky (vyššiacute miacutera exprese proti savčiacutemu typu) (Parhar 2003)

Zatiacutemco při delšiacutem působeniacute analogu GnRH na savčiacute typ GnRH receptoru bylo zaznamenaacuteno vyacuterazneacute sniacuteženiacute jeho citlivosti (Blomenroumlhr a kol 1997) u rybiacutech GnRH receptorů k němu nedochaacuteziacute ani po kontinuaacutelniacute aplikaci GnRH analogů (Trudeau 1997) což naleacutezaacute značneacute uplatněniacute v akvakulturniacutech postupech využiacutevajiacuteciacutech dlouhodobeacute stimulace GnRH receptoru za uacutečelem vyvolaacuteniacute sekrece LH

U některyacutech přiacuteslušniacuteků čeledě Cyprinidae bylo identifikovaacuteno viacutece typů GnRH receptoru (Illing a kol 1999) Z hlediska hormonaacutelniacute indukce ovulace je vyacuteznamnyacutem faktem i rozdiacutelnaacute miacutera exprese GnRH receptorů v průběhu roku s maximaacutelniacute miacuterou vyacuteskytu v předvyacutetěroveacutem obdobiacute (Parhar 2003)

Inhibičniacute faktor LH sekrece ndash Dopamin (DA)

Doposud jedinyacutem znaacutemyacutem faktorem inhibičně ovlivňujiacuteciacutem sekreci LH u čeledě Cyprinidae je dopamin (Peter a kol 1991 Trudeau 1997 Popesku a kol 2008) Je zařazovaacuten mezi katecholaminniacute neurotransmitery s miacutestem vyacuteskytu DA produkujiacuteciacutech buněk v preoptickeacute oblasti (Dufour a kol 2005)

DA vykonaacutevaacute svůj inhibičniacute uacutečinek prostřednitviacutem receptorů patřiacuteciacutech mezi receptory spřaženeacute s G proteinem jež se v přiacutepadě DA receptorů rozdělujiacute do skupin D1 a D2 (Missale a kol 1998) Po vyloučeniacute DA z nervovyacutech zakončeniacute v hypofyacuteze a naacutesledneacute aktivaci D2 receptorů dochaacuteziacute k inhibičniacutemu efektu jehož je možno z časoveacuteho hlediska rozdělit na efekt s okamžityacutem uacutečinkem a na efekt s dlouhotrvajiacuteciacutem uacutečinkem (Van der Kraak a kol 1998 Yaron a kol 2003) Efekt s okamžityacutem inhibičniacutem uacutečinkem DA je představovaacuten narušeniacutem vnitrobuněčneacute signaacutelniacute kaskaacutedy GnRH (Chang a kol 1993 Chang a Jobin 1994) přičemž efekt s dlouhotrvajiacuteciacutem uacutečinkem je představovaacuten redukciacute počtu GnRH receptorů na povrchu LH tropniacutech buněk (de Leeuw a kol 1984) a zablokovaacuteniacutem uvolňovaacuteniacute GnRH peptidu z nervovyacutech zakončeniacute v hypofyacuteze (Popesku a kol 2008) Inhibičniacute uacutečinek DA se projevuje i v preoptickeacute oblasti kde prostřednictviacutem D1 receptoru lokalizovaneacuteho na GnRH neuronech dochaacuteziacute k přiacutemeacutemu narušovaacuteniacute synteacutezy GnRH peptidu (Peter a kol 1991 Yu a Peter 1992) Působeniacute DA způsobuje i celkoveacute snižovaacuteniacute počtu LH tropniacutech buněk což bylo potvrzeno působeniacutem DA antagonistů majiacuteciacutech opačnyacute uacutečinek přiacutemo uacuteměrnyacute času a vyacutešce daacutevky (Osornio a kol 2004)

Podstata endokrinniacute dysfunkce finaacutelniacuteho zraacuteniacute oocytů Podstata endokrinniacute dysfunkce při finaacutelniacutem dozraacutevaacuteniacute oocytů spočiacutevaacute v nedostatečneacutem

uvolňovaacuteniacute luteinizačniacuteho hormonu (LH) z hypofyacutezy nutneacuteho pro naacuteslednou aktivaci steroidogeneze a ovulace (Zohar a Mylonas 2001) Jedniacutem z prvniacutech důkazů potvrzujiacuteciacutech tento fakt byla schopnost rybiacute hypofyacutezy (obsahuje gonadotropniacute hormony) vyvolat ovulaci u různyacutech druhů pohlavně zralyacutech ryb (Kouřil a Chaacutebera 1976) Jednoznačně se to podařilo potvrdit porovnaacuteniacutem hladiny pohlavniacutech hormonů v obdobiacute vyacutetěroveacute periody mezi jedinci z kontrolovanyacutech podmiacutenek a jedinci z volnyacutech vod u anadromniacuteho druhu morčaacutek pruhovanyacute (Morone saxatilis) (Mylonas a kol 1997) Jestliže u jedinců odlovenyacutech z přiacuterody byl v krevniacutem oběhu zaznamenaacuten vzrůst hladiny LH od časnyacutech staacutediiacute vitelogeneze přes finaacutelniacute zraacuteniacute oocytů až po ovulaci u jedinců z kontrolovanyacutech podmiacutenek nebyl po ukončeniacute vitelogeneze zaznamenaacuten žaacutednyacute růst LH a oocyty začaly podstupovat atreacutezii (Mylonas a Zohar 2001) Měřeniacutem uacuterovně LH mRNA LH mRNA receptorů LH v hypofyacuteze u volně žijiacuteciacutech jedinců i jedinců z farmoveacuteho chovu nebyly zjištěny žaacutedneacute rozdiacutely což potvrzuje předpoklad dysfunkce na uacuterovni sekrece a nikoliv synteacutezy LH (Steven 2000) Vyacuteznamneacute rozdiacutely byly ale zaznamenaneacute na uacuterovni množstviacute spouštěciacuteho hormonu gonadotropinu obsaženeacuteho v hypofyacuteze na rozdiacutel od stejnyacutech hodnot GnRH mRNA v mozku volně žijiacuteciacutech a na farmě chovanyacutech jedinců (Steven a kol 2000) Tyto uacutedaje nasvědčujiacute tomu že synteacuteza GnRH v hypothalamu neniacute narušenaacute ale probleacutem se vyskytuje v sekreci GnRH z nervovyacutech zakončeniacute v adenohypofyacuteze

Hypothalamickaacute hormonaacutelniacute terapie v akvakultuře GnRH neuropeptid

Prvniacute praacutece uplatňujiacuteciacute využitiacute GnRH peptidu v akvakultuře se objevujiacute v sedmdesaacutetyacutech letech 20 stoletiacute (Breton a Weil 1973) Využiacutevaacuteniacute syntetickyacutech preparaacutetů na baacutezi GnRH maacute proti přiacutepravkům na baacutezi gonadotropinu (rybiacute hypofyacuteza choriogonadotropiny) viacutece přednostiacute Nejvyacuteznamějšiacute je vlastniacute oprava endokrinniacute dysfunkce představovanaacute stimulaciacute gonadotropniacutech buněk adenohypofyacutezy sekretujiacuteciacutech endogenniacute LH Postaveniacute hypothalamickeacuteho faktoru GnRH na vyššiacutech přiacutečkaacutech hormonaacutelniacute kaskaacutedy umožňuje při hormonaacutelniacute terapii zapojeniacute spolupůsobiacuteciacutech endokrinniacutech faktorů gametogeneze přiacutemou nebo nepřiacutemou stimulaciacute jejich sekrece např růstovyacute hormon (Le Gac a kol 1993) inzuliacuten jako růstovyacute hormon (Negatu a kol 1998) prolaktin (Weber a kol 1995) thyroidniacute hrmony (Cyr a Eales 1996) Chemickaacute synteacuteza GnRH odstraňuje potenciaacutelniacute možnost přenosu infekčniacutech onemocněniacute a zaacuteroveň umožňuje aplikaci přesnyacutech daacutevek GnRH Vyacuteznamnyacutem faktorem je i vysokyacute stupěň mezidruhoveacute podobnosti GnRH peptidů (Okubo a Nagahama 2008) a tiacutem danaacute možnost použitiacute jednoho přiacutepravku pro viacutece druhů ryb

Počaacutetečniacute pokusy s indukciacute ovulace pomociacute přirozenyacutech GnRH peptidů se vyznačovaly potřebou použitiacute vysokyacutech daacutevek GnRH s reativně niacutezkou uacutečinnostiacute stimulace ovulace (Kouřil a Barth 1981) Probleacutemem se ukaacutezala byacutet niacutezkaacute odolnost přirozeneacuteho GnRH peptidu vůči štěpeniacute endopeptidaacutezami lokalizovanyacutemi v ledvinaacutech jaacutetrech a hypofyacuteze (Zohar a kol 1990) Řešeniacute se podařilo najiacutet synteacutezou GnRH analogů vyznačujiacuteciacutech se substitucemi aminokyselin na lehce štěpitelnyacutech miacutestech původniacuteho GnRH řetězce Jako nejmeacuteně rezistentniacute miacutesta mGnRH vůči enzymatickeacute degradaci se identifikovaly vazby mezi aminokyselinami Tyr5 ndash Gly6 a Pro9 ndash Gly10NH2 (Peter a Yu 1997) Substituciacute aminokyseliny na pozici 6 za pravotočivou aminokyselinu a stabilizaciacute C konce peptidoveacuteho řetězce formou zaacuteměny aminokyseliny na pozici 10 za ethylamidovou skupinu bylo dosaženo rapidniacuteho zvyacutešeniacute uacutečinosti GnRHa (Karten a Rivier 1986) Předevšiacutem zaacuteměna aminokyselin na pozici 6 maacute za naacutesledek vyacuterazně vyššiacute odolnost neuropeptidu k enzymatickeacute

degradaci (Zohar 1988) Substituce aminokyselin způsobujiacute i modifikaci polarity a změnu terciaacuterniacute sruktury GnRHa což vede ke zvyacutešeniacute afinity analogu k receptoru GnRH (Zohar a Mylonas 2001) Neuspokojivou potenci přirozenyacutech GnRH peptidů se podařilo odstranit syntetizovaacuteniacutem superaktivniacutech GnRHa schopnyacutech vyvolat vyacuterazneacute zvyacutešeniacute LH hladiny již při 100kraacutet nižšiacutech daacutevkaacutech než při použitiacute přirozenyacutech forem GnRH (Kouřil a kol 1986 2003 2007)

V českeacute akvakulturniacute praxi byl u několika druhů ryb uacutespěšně vyzkoušen necertifikovanyacute přiacutepravek Kobarelin (mGnRHa) kteryacute byl později nahrazen uacutečinnějšiacutemi veterinaacuterniacutemi přiacutepravky jako Supergestran s uacutečinnou laacutetkou Lecirelin (Kouřil a kol 2006) a Gonazon s uacutečinnou laacutetkou azagly-nafarelin (Mikolajczyk a kol 2003) Supergestran je primaacuterně určen pro synchronizaci estraacutelniacuteho cyklu teplokrevnyacutech hospodaacuteřskyacutech zviacuteřat zatiacutem co Gonazon je jedinyacutem evropskyacutem registrovanyacutem přiacutepravkem na baacutezi GnRHa určenyacutem k indukcii ovulace ryb

Inhibitory dopaminu

Určeniacute DA jako hlavniacuteho inhibičniacuteho faktoru sekrece LH u ryb čeledě Cyprinidae (Peter a kol 1991 Popesku a kol 2008) a některyacutech dalšiacutech hospodaacuteřsky vyacuteznamnyacutech druhů ryb (Pavlick a Moberg 1997) vedlo k vytvořeniacute efektivniacute stimulačniacute techniky založeneacute na současneacutem podaacuteniacute GnRHa a inhibitoru DA např domperidon pimozide reserpin metoclopramide haloperidol isofloxythepin (Peter a kol 1988 Peter a Yu 1997 Kouřil a kol 2006 2007) Podaacuteniacute inhibitoru DA maacute za naacutesledek odtlumeniacute inhibičniacuteho uacutečinku DA což v kombinaci s uacutečinnyacutem GnRHa vyvolaacute žaacutedanyacute předovulačniacute vzrůst hladiny LH a naacuteslednou ovulaci jikernačky

Specifickyacutem a podle našich informaciacute doposud jedinyacutemi znaacutemyacutemi přiacuteslušniacuteky čeledě Cyprinidae u nichž absentuje dopaminniacute kontrola sekrece LH v obdobiacute finaacutelniacuteho dozraacutevaacuteniacute pohlavniacutech produktů jsou liacuten obecnyacute (Tinca tinca) a perliacuten ostrobřichyacute (Scardinius erythrophthalmus) Již daacutevka 1 μgkg mGnRHa byla schopnaacute u maleacuteho počtu jikernaček uvedenyacutech druhů stimulovat ovulaci (Kouřil a kol 1986 Hamaacutečkovaacute a kol 2001) což u jinyacutech druhů kaprovityacutech ryb nepřichaacuteziacute v uacutevahu (Peter a kol 1988 Kouřil a kol 2003)

Využitiacute DA antagonistů je v posledniacutech letech ztiacuteženeacute veterinaacuterniacute legislativou Evropskeacute unie kteraacute vyžaduje pro každyacute leacutečivyacute přiacutep pomocnyacute přiacutepravek aplikovanyacute u potravinovyacutech zviacuteřat stanoveniacute MRL ndash minimaacutelniacuteho reziduaacutelniacuteho limitu (Directive 200182EC of the European Parliament and of the Council on the Community code) Vzhledem k tomu že u DA inhibitorů neniacute MRL stanoven neniacute jejich použiacutevaniacute u potravinovyacutech zviacuteřat povoleneacute

SOUHRN

Hormonaacutelniacute stimulace finaacutelniacutech staacutediiacute dozraacutevaacuteniacute oocytů a ovulace ryb se již dřiacuteve stala důležityacutem pomocniacutekem při efektivniacute reprodukci většiny hospodaacuteřsky vyacuteznamnyacutech druhů ryb Avšak až v posledniacute době se na zaacutekladě bližšiacuteho poznaacuteniacute mechanismů neuroendokrinniacute regulace LH podařilo vyvinout vysoce efektivniacute metodiku splňujiacuteciacute i naacuteročnaacute kriteacuteria welfare kladeneacute na současneacuteho chovatele Efektivita metodiky využiacutevajiacuteciacute GnRH analogy s anebo bez DA inhibitoru spočiacutevaacute nejen v přiacutemeacutem odstraněniacute hormonaacutelniacute dysfunkce ale i přidruženeacute stimulaci spektra podpůrnyacutech hormonaacutelniacutech faktorů obsaženyacutech v adenohypofyacuteze Vyacuteznamnyacutem přiacutenosem je i vysokaacute miacutera univerzaacutelnosti GnRH přiacutepravků v raacutemci velkeacuteho spektra rybiacutech druhů což spolu s lehkou dostupnostiacute a relativně niacutezkou cenou vytvaacuteřiacute velkeacute předpoklady pro využiacutevaacuteniacute v akvakultuře

Poděkovaacuteniacute Vyacutesledků bylo dosaženo v raacutemci řešeniacute vyacutezkumneacuteho zaacuteměru MSM6007665809 a

projektu KONTAKT ME853 financovanyacutech z prostředků MŠMT a projektu NAZV QH91310 financovaneacuteho z prostředků MZe

LITERATURA Blomenroumlhr M Bogerd J Leurs R Schulz R W Tensen C P Zandbergen M A Goos H J Th

1997 Differences in structure-function relations between nonmammalian and mammalian gonadotropin-releasing hormone receptors Biochem Biophys Res Commun 238 517-522

Bogerd J Li KW Janssen-Dommerholt C Goos H 1992 Two gonadotropin-releasing hormones from African catfish (Clarias gariepinus) Biochemical and Biophysical Research Communications 187 127-34

Breton B Weil C 1973 Effets du LHFSH-RU synthetique et d extraits hypothalamiques de carpe sur la secretion d hormone gonadotrpe in vivo Cheb la carp (Cyprinus carpio L) CR Academia Scie Paris 27 2061-2064

Burgus R Butcher M Ling N Monahan M Rivier J Fellows R Amoss M Blackwell R Vale W Guillemin R 1971 Molecular structure of the hypothalamic factor (LRF) of ovine origin monitoring the secretion of pituitary gonadotropic hormone of luteinization (LH) Comptes rendus hebdomadaires des seacuteances de lAcadeacutemie des sciences Seacuterie D Sciences naturelles 273 1611-1613

Guillemin R 1971 Molecular structure of the hypothalamic factor (LRF) of ovine origin monitoring the secretion of pituitary gonadotropic hormone of luteinization (LH) C R Acad Sci Hebd Seances Acad Sci D 273 1611-1613

Cyr DG Eales JG 1996 Interrelationships between thyroidal and reproductive endocrine systems in fish Rev Fish Biol Fish 6 165-200

De Leeuw R Habibi HR Nahorniak CS Peter RE 1989 Dopaminergic regulation of pituitary gonadotrophin-releasing hormone receptor activity in the goldfish (Carassius auratus) J Endocrinol 121 239-247

Directive of the European parliament and of the Council (2004) Directive 200428EC of the European Parliament and of the Council of 31 March 2004 amending Directive 200182EC on the Community code relating to veterinary medicinal products Official J European Union L136 58-84

Dufour S Weltzien F A Sebert M E Le Belle N Vidal B Vernier P Pasqualini C 2005 Dopaminergic inhibition of reproduction in teleost fishes ecophysiological and evolutionary implications Ann NY Acad Sci 1040 9-21

Fernald D F White B R 1999 Gonadotropin-releasing hormone genes phylogeny structure and functions Front Neuroendocrinol 20 224-240

Fink G 1988 Gonadotropin secretion and its control In Knobil E Neill J (Editors) The physiology of reproduction Raven Press New York pp 1349-1377

Hamaacutečkovaacute J Kouřil J Barth T Lepičovaacute A Kozaacutek P Lepič P 2001 Induction of ovulation in rudd (Scardinius erythrophthalmus) using hormone preparations Collections Symposium Series UacuteOChB AV ČR Praha 4 87-89

Chang JP Jobin RM 1994 Regulation of Gonadotropin Release in Vertebrates a Comparison of GnRH Mechanisms of Action In Davey K G (Editor) Perspectives in Comparative Endocrinology National Research Council of Canada Ottawa pp 41-51

Chang JP Jobin RM Wong AO 1993 Intracellular mechanisms mediating gonadotropin and growth hormone release in the goldfish Carassius auratus Fish Physiol Biochem 11 25-33

Illing N Troskie BE Nahorniak CS Hapgood JP Peter RE Millar RP 1999 Two gonadotropin-releasing hormone receptor subtypes with distinct ligand selectivity and differential distribution in brain and pituitary in the goldfish (Carassius auratus) Proc Natl Acad Sci USA 96 2526-2531

Kah O Lethimonier Ch Somoza G Guilguir L Vaillant C Lareyre JJ 2007 GnRH and GnRH receptors in Metazoa A historical comparative and evolutive perspective Gen Comp Endocrinol 153 346-364

Karten MJ Rivier JE 1986 Gonadotropin-releasing hormone analog design Structure-function studies toward the development of agonists and antagonists rationale and perspective Endocr Rev 7 44-66

Kouřil J Chaacutebera S 1976 Umělyacute vyacutetěr liacutena obecneacuteho (Tinca tinca L) Bul VUacuteRH Vodňany 12 7-13 Kouřil J Barth T 1981 Dociacuteleniacute ovulace jiker pomociacute LH-RH při uměleacutem vyacutetěru liacutena obecneacuteho (Tinca tinca

L) Bul VUacuteRH Vodňany 17 13-18 Kouřil J Barth T Hamaacutečkovaacute J Flegel M 1986 Induced ovulation in tench (Tinca tinca L) by various

LH-RH synthetic analogues effect of site of administrative and temperature Aquaculture 54 37-44

Kouřil J Hamaacutečkovaacute J Kozaacutek P Barth T 2003 Použitiacute kombinovanyacutech přiacutepravků obsahujiacuteciacutech analog GnRH a dopamionergniacute inhibitor k hormonaacutelně indukovaneacutemu uměleacutemu uměleacutemu vyacutetěru jikernaček kapra obecneacuteho (Cyprinus carpio) a amura biacuteleacuteho (Ctenopharyngodon idella) Sb ref VI Českaacute ichtyologickaacute konference Praha UK 35-40

Kouřil J Hamaacutečkovaacute J Barth T 2006 Hormonaacutelně indukovanaacute umělaacute reprodukce ryb Biotechnology 2006 Scientific Pedagogical Publishing Českeacute Budějovice Czech republic 251-253

Kouřil J Mraacutez J Hamaacutečkovaacute J Barth T 2008 Hormonal induction of tench (Tinca tinca L) with the same treatments at two sequential reproductive seasons Cybium 32 61

Le Gac F Blaise O Fostier A Le Bail P Y Loir M Mourot B Weil C 1993 Growth hormone (GH) and reproduction A review Fish Physiol Biochem 11 219-232

Matsuda K Nakamura K Shimakura SI Miura T Kageyama H Uchiyama M Shioda S Ando H 2008 Inhibitory effect of chicken gonadotropin-releasing hormone II on food intake in the goldfish Carassius auratus Horm Behav 54 83-89

Mikolajczyk T Chyb J Sokolowska-Mikolajczyk M Enright WJ Epler P Filipiak M Breton B 2003 Attempts to induce an LH surge and ovulation in common carp (Cyprinus carpio L) by differential application of a potent GnRH analogue azagly-nafarelin under laboratory commercial hatchery and natural conditions Aquaculture 223 141-157

Millar RP Lu ZL Pawson AJ Flanagan CA Morgan K Maudsley SR 2004 Gonadotropin- releasing hormone receptors Endocr Rev 25 235-275

Missale C Nash SR Robinson SW Jaber M Caron MG 1998 Dopamine receptors from structure to function Physiol Rev 78 189-225

Mylonas CC Scott AP Zohar Y 1997 Plasma gonadotropin II sex steroids and thyroid hormones in wild striped bass (Morone saxatilis) during spermiation and final oocyte maturation Gen Comp Endocrinol 108 223-236

Mylonas CC Zohar Y 2001 Endocrine regulation and artificial induction of oocyte maturation and spermiation in basses of the genus Morone Aquaculture 202 205-220

Mylonas CC Zohar Y 2007 Promoting oocyte maturation ovulation and spawning in farmed fish In Babin J P Cerda J Lubzens E (Editors) The Fish Oocyte Springer The Netherlands pp 437-474

Nagahama Y 1983 The functional morphology of teleost gonads In Hoar WS Randall DJ Donaldson EM (Editors) Fish Physiology Vol IXA Academic Press New York pp 223-275

Negatu Z Hsiao SM Wallace RA 1998 Effects of insulin-like growth factor-I on final oocyte maturation and steroid production in Fundulus heteroclitus Fish Physiol Biochem 19 13-21

Nelson JS 2006 Fishes of the world (4th edition) John Wiley and Sons New York 601 pp Okubo K Nagahama Y 2008 Structural and functional evolution of gonadotropin-releasing hormone in

vertebrates Acta Physiol 193 3-15 Osornio AG Chavez M Peter ER Cardenas R 2004 Quantification of the effects of resperine on

gonadotroph expression in the pituitary of goldfish (Carassius auratus) J Mol Histol 35 417-420 Parhar SI 2003 Gonadotropin-releasing hormone receptors neuroendocrine regulators and neuromodulators

Fish Physiol Biochem 28 13-18 Pavlick RJ Jr Moberg GP 1997 Dopaminergic influence on gonadotropin secretion in white sturgeon

(Acipenser transmontanus) Fish Physiol Biochem 16 35-43 Penlington MC Williams MA Sumpter JP Rand-Weaver M Hoole D Arme C 1997 Isolation and

characterisation of mRNA encoding the salmon- and chicken-II type gonadotrophin-releasing hormones in the teleost fish Rutilus rutilus (Cyprinidae) J Mol Endocrinol 19 337-346

Peter RE Yu KL 1997 Neuroendocrine regulation of ovulation in fishes basic and applied aspects Rev Fish Biol Fish 7 173-197

Peter RE Chang JP Nahorniak CS Omeljaniuk RJ Sokolowska M Shih SH Billard R 1986 Interactions of catecholamines and GnRH in regulation of gonadotropin secretion in teleost fish Recent Prog Hormone Res 13 229-239

Peter RE Lin HR Van Der Kraak G 1988 Induced ovulation and spawning of cultured freshwater fish in China advances in application of GnRH analogues and Dopamine antagonists Aquaculture 74 1-10

Peter RE Trudeau VL Sloley BD 1991 Brain regulation of reproduction in teleosts Bull Inst Zool 16 89-118

Popesku TJ Martyniuk JC Mennigen J Xiong H Zhang D Xia X Cossins RA Trudeau LV 2008 The goldfish (Carassius auratus) as a model for neuroendocrine signaling Mol Cell Endocrinol 293 43-56

Powell JF Zohar Y Elizur A Park M Fischer WH Craig AG Rivier JE Lovejoy DA Sherwood NM 1994 Three forms of gonadotropin-releasing hormone characterized from brains of one species Proc Natl Acad Sci USA 91 12081-12085

Sealfon SCWeinstein H Millar RP 1997 Molecular mechanisms of ligand interaction with the gonadotropin-releasing hormone receptor Endocr Rev 18 180-205

Sherwood N Eiden L Brownstein M Spiess J Rivier J Vale W 1983 Characterization of a teleost gonadotropin-releasing hormone Proc Natl Acad Sci USA 80 2794-2798

Steven C 2000 Studies on the GnRH-GtH system of female striped bass (Morone saxatilis) effects of GnRH agonist therapy and comaprison of reproductive endocrine parameters between wild and captive fish MSc Dissertation University of Maryland College Park

Steven C Gothilf Y Holland MCH Stubblefield J Mylonas CC Zohar Y 2000 Differential expression of the three GnRH genes in wild and captive striped bass Morone saxatilis in response to natural nad hormonally induced maturation In Norberg B Kjesbu O S Taranger G L Andersson E Stefansson S O (Editors) Reproductive Physiology of Fish University of Bergen Bergen pp 66

Steven C Lehnen N Kight K Ijiri S Klenke U Harris WA Zohar Y 2003 Molecular characterization of the GnRH system in zebrafish (Danio rerio) cloning of chicken GnRH-II adult brain expression patterns and pituitary content of salmon GnRH and chicken GnRH-II Gen Comp Endocrinol 133 27-37

Trudeau VL 1997 Neuroendocrine regulation of gonadotrophin II release and gonadal growth in the goldfish Carassius auratus Rev Reprod 2 55-68

Van der Kraak G Chang JP Janz DM 1998 Reproduction In Evans DH (Editor) The Physiology of Fishes CRC Press LLC Boca Raton pp 465-488

Volkoff H Peter RE 1999 Actions of two forms of gonadotropin releasing hormone and a GnRH antagonist on spawning behavior of the goldfish Carassius auratus Gen Comp Endocrinol 116 347-355

Weber GM Borski RJ Powell JFF Sherwood NM Grau EG 1995 In vivo and in vitro effects of gonadotropin-releasing hormone on prolactin in the tilapia Oreochromis mossambicus Amer Zool (Abstract) 34 121

Yaron Z Gal G Melamed P Rosenfeld H Elizur A Levavi-Sivan B 2003 Regulation of fish gonadotropins Int Rev Cytol 255 131-185

Yu KL Peter RE 1990 Dopaminergic regulation of brain gonadotropinreleasing hormone in male goldfish during spawning behaviour Neuroendocrinol 52 276-283

Yu KL Peter RE 1992 Adrenergic and dopaminergic regulation of gonadotropin-releasing hormone release from goldfish preoptic-anterior hypothalamus and pituitary in vitro Gen Comp Endocrinol 85 138-146

Zohar Y 1988 Gonadotropin releasing hormone in spawning induction in teleosts Basic and applied considerations In Zohar Y Breton B Reproduction in Fish Basic and Applied Aspects in Endocrinology and Genetics INRA Press Paris pp 47-62

Zohar Y Mylonas CC 2001 Endocrine manipulations of spawning in cultured fish from hormones to genes Aquaculture 197 99-136

Zohar Y Goren A Fridkin M Elhanati E Koch Y 1990 Degradation of gonadotropin-releasing hormones in the gilthead seabream Sparus aurata II Cleavage of native salmon GnRH mammalian LHRH and their analogs in the pituitary kidney and liver Gen Comp Endocrinol 79 306-319

POROVNAacuteNIacute ABUNDANCE A BIOMASY RYBIacute OBSAacuteDKY V MORFOLOGICKY A PRŮTOKOVĚ ODLIŠNYacuteCH UacuteSECIacuteCH

MALEacuteHO TOKU COMPARISON OF FISH ABUNDANCE AND BIOMASS IN PARTS OF SMALL

BROOK WITH DIFFERENT MORPHOLOGICAL AND DISCHARGE CONDITIONS

J TUREK T RANDAacuteK J VELIacuteŠEK R HANAacuteK E SUDOVAacute

Jihočeskaacute univerzita v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumnyacute uacutestav rybaacuteřskyacute a hydrobiologickyacute Zaacutetišiacute 728II 389 25 Vodňany e-mail turekvurhjcucz randakvurhjcucz velisekvurhjcucz hanakr00vurhjcucz sudovavurhjcucz Abstrakt

Electrofishing equipment was used for ichthyological research in Lobezskyacute brook There was found lower abundance and biomass of fish in part A with artificial concrete bunding of brook compared to natural part of this brook B In part A bigger fishes were found only in part behind small stone weir and several parts with perforated concrete bunding Decreasing of fish abundance and biomass was also found in natural part of brook C caused by low water level because the most of water was taken off as water supply for small hydro-electric power plants Kliacutečovaacute slova ichtyofauna uacutepravy koryta pstruh obecnyacute Salmo trutta m fario Keywords ichthyofauna river regulation brown trout Salmo trutta m fario UacuteVOD

V minulosti byly a dosud staacutele jsou na mnoha tociacutech provaacuteděny nešetrneacute zaacutesahy do morfologie koryta a průtokovyacutech poměrů Tyto zaacutesahy spočiacutevajiacute např ve vyacutestavbě malyacutech vodniacutech elektraacuteren (MVE) narovnaacutevaacuteniacute koryt a dalšiacutech nešetrnyacutech uacutepravaacutech vodniacutech toků Pro rybiacute populace a ostatniacute vodniacute živočichy představujiacute největšiacute nebezpečiacute MVE na menšiacutech tociacutech s průtoky v rozmeziacute několika desiacutetek litrů za sekundu (Hartvich 1995) Ekologickyacute stav řeky je čaacutestečně charakterizovaacuten i jejiacutem průtokem (Norris a Thoms 1999)

Členitost prostřediacute je totiž rozhodujiacuteciacutem činitelem kteryacute určuje početnost obsaacutedky pstruha obecneacuteho (Salmo trutta m fario L) v našich tociacutech (tzv uacutekrytovaacute kapacita toku) (Baruš a kol 1995) Čiacutem je tok členitějšiacute tiacutem obsahuje většiacute počet možnyacutech teritoriiacute a početnost obsaacutedky se zvyšuje (Libosvaacuterovskyacute a Lusk 1974) Sniacuteženeacute průtoky na menšiacutech tociacutech znamenajiacute vždy vyacuterazneacute sniacuteženiacute počtu mikrostanovišť a meacuteně přiacutezniveacute hydrologickeacute podmiacutenky pro ryby Snižuje se početnost i biomasa ryb ndash zůstanou jen mladšiacute jedinci zatiacutemco staršiacute ryby migrujiacute jinam a vyhledaacutevajiacute hlubšiacute staviště (Hartvich 1995) Koliacutesaveacute a minimaacutelniacute průtoky vytvaacuteřiacute nevhodneacute podmiacutenky (migračniacute možnosti koloběh živin a potravniacute dostupnost) pro rybiacute společenstva vedouciacute často ke sniacuteženeacutemu přežiacutevaacuteniacute nejmladšiacutech vyacutevojovyacutech staacutediiacute a fyziologickeacutemu stresu adultniacutech ryb (Rogers a kol 2005)

Ciacutelem studie bylo zhodnotit a porovnat stav ichtyofauny Lobezskeacuteho potoka v různyacutech uacuteseciacutech toku kteryacutemi byly (1) uacutesek toku ovlivněnyacute činnostiacute MVE (2) uacutesek s nešetrně provedenou uacutepravou koryta (3) přiacuterodniacute uacutesek bez uvedenyacutech negativniacutech vlivů MATERIAacuteL A METODIKA

Lobezskyacute potok se nachaacuteziacute u města Sokolov a je pravostrannyacutem přiacutetokem Ohře Odvodňuje povodiacute o ploše 426 km2 a jeho průtoky v uacutestiacute do Ohře jsou uvedeny v Tab 1

Tab 1 M-denniacute průtoky (lsmacrsup1) Lobezskeacuteho potoka Tab 1 M-day flow volumes (lsmacrsup1) of Lobezskyacute brook M 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 355 364 853 601 470 384 320 269 227 190 157 126 93 60 35

Sledovanaacute čaacutest Lobezskeacuteho potoka pobliacutež obce Viacutetkov byla 6 8 2008 zaměřena

pomociacute GPS navigace (Obr 1) Jejiacute celkovaacute deacutelka byla 850 m Z hlediska morfologie koryta byla lokalita kategorizovaacutena na tři od sebe odlišneacute habitaty Jejich deacutelka byla zjištěna rovněž pomociacute GPS Obr 1 Lokalizace zkoumaneacute čaacutesti toku 1 ndash spodniacute hranice 2 ndash horniacute hranice A B C ndash

sledovaneacute uacuteseky Fig 1 Map of lokality 1 ndash lower border 2 ndash upper border A B C ndash each studied stretches

Spodniacute uacutesek toku (A) o deacutelce 285 m byl tvořen dlaacutežděnyacutem korytem bez přirozenyacutech uacutekrytů pro ryby i bezobratleacute (Obr 2) Spodniacute konec tohoto uacuteseku byl tvořen tůniacute nad jiacutezkem zbudovaneacuteho z kamene a spojeneacuteho betonovou maltou V horniacute čaacutesti tohoto uacuteseku byl proveden pokus o revitalizaci v podobě do dna zapuštěnyacutech jednotlivyacutech kamenů Horniacute konec tohoto uacuteseku tvořil rozhraniacute regulovaneacuteho a přirozeneacuteho koryta

Prostředniacute uacutesek toku (B) o deacutelce 95 m měl charakter přirozeneacuteho členiteacuteho toku (Obr 3) Řečiště bylo členěno mnoha kameny různyacutech velikostiacute Daacutele se zde vyskytovaly i poměrně rozsaacutehleacute tůňky Dolniacute čaacutest tohoto uacuteseku byla ohraničena koncem opevněneacuteho koryta a naopak horniacute konec uacuteseku byl tvořen vyuacutestěniacutem naacutehonu z maleacute vodniacute elektraacuterny (MVE)

Deacutelka horniacuteho uacuteseku toku (C) byla 470 m Dolniacute hranice tohoto uacuteseku se nachaacutezela u vyacutetoku naacutehonu z MVE horniacute hranice uacuteseku byla u konce kamenolomu kde čaacutest toku byla svedena trubniacutem vedeniacutem do objektu MVE Maximaacutelniacute povolenyacute odběr MVE byl stanoven na 180 ls-1 Z tohoto důvodu proteacutekalo korytem jehož charakter je shodnyacute s prostředniacutem uacutesekem toku (přirozenyacute stav toku) meacuteně vody a miacutesty dochaacutezelo až k fragmentaci toku (Obr 4) V provozniacutem řaacutedu MVE je pro provoz v obdobiacute s nedostatkem vody stanovena podmiacutenka zachovaacuteniacute minimaacutelniacuteho biologickeacuteho průtoku v toku Qmin = 100 ls

Obr 2 Uacutesek A Obr 3 Uacutesek B Obr 4 Uacutesek C Fig 2 Stretch A Fig 3 Stretch B Fig 4 Stretch C

Každyacute uacutesek toku byl důkladně proloven nesenyacutem elektrickyacutem agregaacutetem (FEG 1500 EFKO-Germany) Ryby odloveneacute v jednotlivyacutech uacuteseciacutech byly rozděleny do věkovyacutech (velikostniacutech) kategoriiacute spočiacutetaacuteny zvaacuteženy a poteacute vypuštěny zpět do uacuteseku odloveniacute U pstruha obecneacuteho (Salmo trutta m fario) byli za tohoročniacute ryby (0 +) považovaacuteni pstruzi o celkoveacute deacutelce (TL) menšiacute než 100 mm pstruzi s TL mezi 100 a 250 mm byli považovaacuteni za juvenilniacute Většiacute jedinci byli řazeni do kategorie adultniacutech

Vranky obecneacute (Cottus gobio) byly rozděleny na juvenilniacute (TL lt 30 mm) a adultniacute (TL gt 30 mm) Ulovenyacute lipan podhorniacute (Thymallus thymallus) byl vzhledem k celkoveacute deacutelce (TL gt 250 mm) považovaacuten za adultniacuteho Vzhledem ke členitosti horniacutech uacuteseků toku a nevyrovnaneacute šiacuteřce toku při různyacutech průtociacutech ve spodniacutem uacuteseku byl pro vyacutepočet abundace a biomasy zvolen přepočet na 1 metr deacutelky toku Daacutele byly změřeny zaacutekladniacute fyzikaacutelniacute a chemickeacute ukazatele kvality vody Teplota vody v toku byla v době odlovu 165 degC a pH 73 Nasyceniacute vody kysliacutekem se pohybovalo kolem 100 VYacuteSLEDKY

V uacuteseku A byly zjištěny tři druhy ryb pstruh obecnyacute (Salmo trutta m fario) vranka obecnaacute (Cottus gobio) a lipan podhorniacute (Thymallus thymallus) V přiacutepadě lipana se jednalo pouze o jednoho adultniacuteho jedince Naprostaacute většina zjištěnyacutech jedinců byla odlovena ve spodniacute tůni nad jiacutezkem nebo v naacutetržiacutech opevněniacute dna Abundace ryb na 1 metr deacutelky toku zde představovala 497 a biomasa ryb 260 hodnot v přiacuterodniacutem uacuteseku toku B V dlaacutežděneacutem korytě tohoto uacuteseku toku byly zachyceny pouze ojediněleacute juvenilniacute exemplaacuteře pstruha obecneacuteho a vranky obecneacute

Charakteristika společenstva ryb žijiacuteciacuteho v uacuteseku A je uvedena v Tab 2

Tab 2 Ichtyofauna spodniacuteho uacuteseku A Tab 2 Ichtyofauna of bottom stretch A

Regulovanyacute dlaacutežděnyacute uacutesek ndash deacutelka 285 m Druh Věkovaacute

kategorie Počet (ks)

Celkovaacute hmotnost

Průměrnaacute kusovaacute

hmotnost (g)

Abundance (ksm toku)

Biomasa (gm toku)

Pstruh obecnyacute 0 + 95 458 48 0333 1607 Pstruh obecnyacute juvenilniacute 77 3 587 466 0270 12586 Pstruh obecnyacute adultniacute 2 478 239 0007 1677 Vranka obecnaacute 0 + 9 93 1 0031 0033 Vranka obecnaacute adultniacute 13 218 168 0046 0765 Lipan podhorniacute adultniacute 1 205 205 0003 0719

Celkem 197 4 9553 252 0691 17387 V prostředniacutem uacuteseku toku B byl zjištěn dostatek uacutekrytů pro ryby po celeacute jeho deacutelce

Jemnyacute štěrk a piacutesek zjištěnyacute v tomto uacuteseku byl vhodnyacutem substraacutetem pro přiacutepadneacute přirozeneacute rozmnožovaacuteniacute lososovityacutech ryb Jednalo se o ekologicky nejhodnotnějšiacute čaacutest toku čemuž odpoviacutedala i hustota a složeniacute obsaacutedky ryb Z ryb zde byl zastoupen pstruh obecnyacute (Salmo trutta m fario) vranka obecnaacute (Cottus gobio) (Tab 3) Tab 3 Ichtyofauna prostředniacuteho uacuteseku B Tab 3 Ichtyofauna of middle stretch B

Uacutesek přiacuterodniacuteho charakteru a plnyacutem průtokem pod vyuacutestěniacutem naacutehonu z MVE ndash deacutelka 95 m Druh Věkovaacute

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Pstruh obecnyacute 0 + 11 315 286 0116 0332 Pstruh obecnyacute juvenilniacute 92 4 233 4601 0968 44558 Pstruh obecnyacute adultniacute 10 1 957 1957 0105 20600 Vranka obecnaacute 0 + 11 13 118 0116 0137 Vranka obecnaacute adultniacute 8 116 145 0084 1221

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

Horniacute uacutesek toku (C) byl svojiacute morfologiiacute shodnyacute s prostředniacutem uacutesekem Avšak z

důvodu nižšiacuteho průtoku vody kteryacute byl způsoben odběrem vody z toku pro činnost MVE byl uacutesek tohoto toku často segmentovaacuten na prakticky odděleneacute tůňky Vyacuteška vodniacuteho sloupce byla obecně menšiacute v porovnaacuteniacute s uacutesekem B Obsaacutedka ryb v tomto uacuteseku reprezentovanaacute pstruhem obecnyacutem a vrankou obecnou je uvedena v Tab 4 Abundace ryb na 1 metr deacutelky tohoto uacuteseku toku představovala 371 a biomasa ryb 266 hodnot přiacuterodniacuteho uacuteseku toku B

Tab 4 Ichtyofauna horniacuteho uacuteseku C Tab 4 Ichtyofauna of upper stretch C

Uacutesek přiacuterodniacuteho charakteru s nižšiacutem průtokem nad vyuacutestěniacutem naacutehonu MVE ndash deacutelka 470 m Druh Věkovaacute

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

Zkoumanyacute tok Lobezskeacuteho potoka byl velice vhodnou lokalitou pro existenci a uacutespěšnou reprodukci pstruha obecneacuteho a vranky obecneacute Zjištěneacute parametry kvality vody odpoviacutedaly požadavkům pstruha obecneacuteho jak jsou uvaacuteděny Svobodovou a kol (1987) a Čiacutetkem a kol 1997 Velikosti populaciacute těchto ryb však byly zřejmě negativně ovlivněny antropogenniacutemi vlivy ndash tj nevhodnaacute a přiacuterodě vzdaacutelenaacute uacuteprava koryta toku v uacuteseku A niacutezkeacute průtoky způsobeneacute činnostiacute MVE v uacuteseku toku C a segmentace toku v tomto uacuteseku způsobenaacute rozdělovaciacutem objektem regulujiacuteciacutem naacutetok vody do MVE Značneacute sniacuteženiacute biomasy ryb v pstruhoveacutem toku způsobeneacute sniacuteženyacutem průtokem konstatuje na zaacutekladě několikaleteacuteho pozorovaacuteniacute Ovidio a kol (2008) či na zaacutekladě porovnaacuteniacute stavu před a po sniacuteženiacute průtoku způsobeneacuteho provozem MVE uvaacutediacute Mužiacutek (1995) Sniacuteženiacute abundace a biomasy v uacuteseciacutech pod přehradami se sniacuteženyacutem průtokem oproti přiacuterodniacutem uacutesekům nad přehradami zmiňuje i Baran a kol (1995) Naopak Capra a kol (2003) nepozoroval negativniacute vliv sniacuteženiacute průtoku na populaci pstruha obecneacuteho v horskeacutem potoce Roizonne kde hlavniacutemi limitujiacuteciacutemi faktory byly vysokeacute průtoky v době bezprostředně po vyliacutehnutiacute plůdku Vzhledem ke skutečnosti že sledovanaacute čaacutest toku nemaacute žaacutednyacute přiacutetok a jednotliveacute uacuteseky na sebe bezprostředně navazujiacute lze konstatovat že zaacutesahy do morfologie toku (uacutesek A) a jeho průtokovyacutech poměrů (uacutesek C) jsou hlavniacute přiacutečinou poklesu abundace a biomasy společenstva ryb (viz Obr 5 a 6)

I přes skutečnost že byl průzkum provaacuteděn v letniacutem obdobiacute kdy by dle provozniacutech podmiacutenek měla byacutet MVE mimo provoz naacutehon odvaacuteděl značneacute množstviacute vody Zjištěnaacute abundace a biomasa v uacuteseku C byla bliacutezkaacute hodnotaacutem zjištěnyacutem v uacuteseku A s vydlaacutežděnyacutem korytem Na zaacutekladě tohoto zjištěniacute je možneacute usuzovat že sniacuteženyacute průtok maacute na ichtyofaunu v tomto toku podobně negativniacute dopad jako tvrdeacute opevněniacute koryta s občasnyacutemi jiacutezky Poměr abundace i biomasy v uacuteseku C k hodnotaacutem v nezasaženeacutem uacuteseku B odpoviacutedaacute zjištěniacute Mužiacuteka (1995) kteryacute v potoce Ľubochianka po spuštěniacute MVE a sniacuteženiacute průtoku zjistil hodnoty abundace a biomasy pstruha obecneacuteho na uacuterovni 37 respektive 40 stavu stejneacuteho uacuteseku v předchoziacutem roce před zahaacutejeniacutem činnosti MVE Za důsledek obou antropogenniacutech zaacutesahů je zde možno považovat vyacuteznamnou degradaci ekologickeacute hodnoty toku Dochaacuteziacute k vyacuterazneacutemu poklesu bdquoodchovneacute kapacity tokuldquo ztiacuteženiacute migraciacute ryb a pravděpodobně i k narušeniacute přirozeneacute reprodukce Staršiacute jedinci pstruha obecneacuteho schopniacute reprodukce byli odloveni převaacutežně v uacuteseku B Jejich abundace i biomasa na 1 metr byla v tomto uacuteseku několikanaacutesobně vyššiacute než ve zbyacutevajiacuteciacutech dvou uacuteseciacutech což rovněž vypoviacutedaacute o negativniacutem vlivu zaacutesahů do morfologie a průtokovyacutech poměrů Největšiacute dopad sniacuteženyacutech průtoků praacutevě na většiacute jedince pstruha obecneacuteho konstatuje i Mužiacutek (1995) Vyacuterazneacute až několikanaacutesobneacute

sniacuteženiacute celkoveacute abundance a biomasy ryb v postiženyacutech uacuteseciacutech A a C plně odpoviacutedaacute publikovanyacutem zaacutevěrům mnoha autorů (Čermaacutek 2002 Harsaacutenyi a Aschenbrenner 2002 Lusk a kol 2005 Slaviacutek 2005) že nešetrneacute uacutepravy toků způsobujiacute ztraacutetu jejich členitosti a sniacuteženiacute uacutekrytoveacute kapacity To je možno považovat za velice vyacuteznamnyacute negativniacute faktor ve vztahu k populaciacutem ryb Abundace a biomasa na metr toku spočtenaacute pro spodniacute uacutesek (A) je ovlivněna skutečnostiacute že absolutniacute většina ryb zjištěnyacutech v tomto uacuteseku byla odlovena v tůni nad jiacutezkem a naacutetržiacutech v opevněniacute koryta I když průtok neniacute v tomto uacuteseku sniacutežen uacutekrytovaacute kapacita pro většiacute ryby je zde omezena stejně jako v uacuteseku C Vyššiacute abundanci tohoročniacutech pstruhů v tomto lze zřejmě přičiacutetat menšiacutemu predačniacutemu tlaku staršiacutech jedinců Jejich abundance je zde vyacuteznamně nižšiacute V důsledku nižšiacuteho průtoku konstatuje i Kubečka a kol (1997) posun struktury populace od adultniacutech jedinců většiacutech druhů (pstruh obecnyacute jelec tloušť lipan apod) směrem k většiacutemu vyacuteskytu menšiacutech druhů přiacutepadně potěru pstruha

Pro zlepšeniacute podmiacutenek pro život a přiacutepadnou reprodukci ryb v uacuteseciacutech toku ktereacute jsou negativně ovlivněny antropogenniacutemi zaacutesahy lze doporučit vyacutestavbu jiacutezků v dolniacute čaacutesti toku (A) v ideaacutelniacutem přiacutepadě pak odstraněniacute kamenneacuteho opevněniacute (dlaacutežděniacute) dna a břehů v kombinaci s vyacutestavbou jiacutezků ktereacute vytvořiacute tůně s dostatečnou hloubkou Zapuštěniacute jednotlivyacutech kamenů provedeneacute v horniacute čaacutesti sice způsobilo rozvlněniacute proudnice avšak bez odstraněniacute zděneacuteho opevněniacute dna nepřinaacutešiacute vyacuteraznějšiacute zlepšeniacute podmiacutenek pro oživeniacute toku Jako revitalizačniacute opatřeniacute je tedy zcela nedostatečneacute

Pro zlepšeniacute podmiacutenek pro život a rozmnožovaacuteniacute ryb v čaacutesti toku C je vhodneacute zvyacutešeniacute a stabilizace zůstatkoveacuteho průtoku (např instalace betonoveacuteho prahu v naacutetoku na MVE) nebo alespoň důslednaacute kontrola dodržovaacuteniacute v současnosti stanoveneacuteho Qmin Obr 5 a 6 Abundace (ksm-1) a biomasa (gm-1) v jednotlivyacutech uacuteseciacutech Fig 5 and 6 Abundace (indm-1) and biomass (gm-1) in each stretches

Uacutesek A Uacutesek B Uacutesek C

OstatniacutePstruh ob

SOUHRN

Na zaacutekladě ichtyologickeacuteho průzkumu byla zjištěna vyacuterazně nižšiacute abundance a biomasa ryb v těch uacuteseciacutech Lobezskeacuteho potoka ktereacute byly negativně ovlivněny opevněniacutem koryta respektive sniacuteženiacutem průtoku způsobenyacutem činnostiacute MVE oproti uacuteseku s přiacuterodniacutem korytem a plnyacutem průtokem Uvedeneacute antropogenniacute vlivy lze považovat za hlavniacute přiacutečinu sniacuteženeacuteho vyacuteskytu ryb v takto postiženyacutech uacuteseciacutech vodniacutech toků

Poděla zpracovaacutena za podpory vyacutezkumneacuteho zaacuteměru MSM6007665809 a

projektu QH71305

BaranSalmo trutta ivers 10

Capraver

Čiacutetek dovaacute Z Tesarčiacutek J 1997 Nemoci sladkovodniacutech a akvarijniacutech ryb Informatorium Praha

Harsaacuten nožovaacuteniacute lipana (Thymallus thymallus) v dolniacutem

Lusk ) Pstruh obecnyacute (Sborniacutek přiacutespěvků z odborneacuteho seminaacuteře)

Mužiacutek ydroelectric power-plant on ichthyofauna of the Lubochinanka brook

Slaviacutekuh obecnyacute (Sborniacutek přiacutespěvků z odborneacuteho seminaacuteře) Pastviny Rada ČRS a

Svobo lentovaacute O Vykusovaacute B Wohlgemuth E 1987 Toxikologie vodniacutech živočichů SZN Praha 231 pp

kovaacuteniacute Tato studie by

LITERATURA

P Delacoste M Dauba F Lascaux J M Belaud A Lek S 1995 Effects of reduced flows on brown trout ( L) populations downstream dams in French Pyreneacutees Regulated R347-361

Baruš V Oliva O 1995 Mihulovci Petromyzontes a ryby Osteichthyes Academia Praha 623 pp H Sabaton C Gouraud V Souchot Y Lim P 2003 A population dynamic model and habitat simulation as a tool to predict brown trout demography in natural and bypassed stream reaches RiResearch and Applications 19 551-568

Čermaacutek J 2002 Uacutepravy a regulace vodniacutech toků aneb proč ubyacutevaacute pstruh obecnyacute Rybaacuteřstviacute 4 180 J Svobo218 pp yi A Aschenbrenner P 2002 Vyacutevoj obsaacutedky a rozmBavorsku Bulletin VUacuteRH Vodňany 3 99-127

Hartvich P 1995 Ochrana ichtyofauny u malyacutech vodniacutech elektraacuteren Bulletin VUacuteRH Vodňany 3 63-65 ka J Matěna J Hartvich P 1997 Adverse ecological effects of small hydropower stationsKubeč in the Czech Republic 1 Bypass plants Regulated Rivers Research and Management 13 101-113 aacuterskyacute J Lusk S 1974 SoLibosv me effects of stocking on the performance of a brown trout population Acta Sci Nat Brno 8(5) 1-42

S Luskovaacute V Halačka K 2005 Zamyšleniacute nad přiacutečinami trvaleacuteho poklesu uacutelovků pstruha obecneacuteho a lipana podhorniacuteho In Vykusovaacute B (EditorPastviny Rada ČRS a VUacuteRH JU Vodňany V 1995 The effect of small hŽivočišnaacute vyacuteroba 40 221-226

Norris RH Thoms MC 1999 What is the river health Freshwater Biology 41 197-209 MOvidio emographic changes on four typical fish species of a small salmonid stream Hydrobiologia 609 59-70

s MH Allen MS Jones D 2005 Relationship between river surface le

Capra H Philippart JC 2008 Regulated discharge produces substantial d

Roger vel and fish assemblage in the Ocklawaha River Florida River Research and Applications 21 501-511

O 2005 Zlepšeniacute podmiacutenek pro přirozenyacute vyacutevoj populaciacute pstruha obecneacuteho v tekouciacutech vodaacutech In Vykusovaacute B (Editor) PstrVUacuteRH JU Vodňany dovaacute Z Justyacuten J Krupauer V Maacutechovaacute J Simonov L Va

ZAVEDENIacute NOVYacuteCH METOD STANOVENIacute VYBRANYacuteCH PARAMETRŮ KVALITY VODY V CENTRAacuteLNIacute LABORATOŘI

VUacuteRH JU VODŇANY NEW ANALYTICAL METHODS FOR SELECTED PARAMETERS OF WATER

QUALITY INTRODUCED IN THE HYDROCHEMICAL LABORATORY OF RIFCH USB VODŇANY

O VALENTOVAacute J MAacuteCHOVAacute

Jihočeskaacute univerzita v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumnyacute uacutestav rybaacuteřskyacute a hydrobiologickyacute Zaacutetišiacute 728II 389 25 Vodňany e-mail valentovvurhjcucz

Centraacutelniacute laboratoř zabezpečuje stanoveniacute zaacutekladniacutech hydrochemickyacutech ukazatelů ve vodaacutech povrchovyacutech odpadniacutech a pitnyacutech pro potřeby vyacutezkumnyacutech pracovniacuteků a zakaacutezkovyacutech uacutekolů Laboratoř je zapojena do systeacutemu vnějšiacute kontroly formou každoročniacute uacutečasti v mezilaboratorniacutem porovnaacutevaacuteniacute zkoušek pořaacutedaneacute Střediskem pro posuzovaacuteniacute způsobilosti laboratořiacute při VUacuteV v Praze Ve sledovanyacutech ukazateliacutech laboratoř opakovaně prošla se stoprocentniacute uacutespěšnostiacute a veškeraacute osvědčeniacute a ostatniacute dokumenty jsou na vyžaacutedaacuteniacute k dispozici v laboratoři

V loňskeacutem roce (2008) bylo v laboratoři inovovaacuteno přiacutestrojoveacute vybaveniacute ktereacute zvyšuje kapacitu provaacuteděnyacutech rozborů vede k vyacuteznamneacute uacutespoře elektrickeacute energie a vody a současně představuje sniacuteženiacute zaacutetěže vypouštěnyacutech odpadniacutech vod chemickyacutemi laacutetkami s nebezpečnyacutemi vlastnostmi Přehled zakoupenyacutech přiacutestrojů a jejich využitiacute 1) Termostatovaacute skřiacuteň třiacutepolicovaacute včetně 12miacutestneacute sestavy OxiTop Control k manometrickeacutemu stanoveniacute BSK5

Sestava zdvojnaacutesobuje možnost současně probiacutehajiacuteciacuteho stanoveniacute BSK z dosavadniacutech 12 na 24 vzorků a kapacita termostatu umožňuje vyacutehledově doplnit sestavu o dalšiacutech 12 pozic (Obr 1)

2) Termoreaktor TR 620 se dvěma odděleně vyhřiacutevanyacutemi bloky včetně fotometrickyacutech testů Spectroquant (firmy MERCK) pro stanoveniacute celkoveacuteho dusiacuteku celkoveacuteho fosforu a CHSKCr

Vyacutehřevneacute teplotniacute bloky termoreaktoru poskytujiacute možnosti pro rozklady vzorků při stanoveniacute CHSKCr TOC (celkovyacute organickyacute uhliacutek) a celkovyacutech obsahů fosforu dusiacuteku a kovů V reaktoru je zabudovaacuteno 7 snadno nastavitelnyacutech časovyacutech a teplotniacutech režimů a po uplynutiacute doby ohřevu dochaacuteziacute k automatickeacutemu vypnutiacute (Obr 2)

Obr 1 Termostatovaacute skřiacuteň Obr 2 Termoreaktor Fig 1 Thermostatic box Obr 2 Thermoreactor

V současneacute době je termoreaktor využiacutevaacuten pro stanoveniacute naacutesledujiacuteciacutech parametrů

kvality vody a) stanoveniacute celkoveacuteho dusiacuteku kyvetovyacutem testem (laboratoř toto stanoveniacute dosud neprovaacuteděla)

Podstatou metody je oxidace dusiacutekatyacutech laacutetek peroxodisiacuteranem v alkalickeacutem prostřediacute na dusičnany ktereacute se stanoviacute fotometricky přiacutemo v kruhoveacute kyvetě Použiteacute uzavřeneacute kyvety včetně chemikaacuteliiacute jsou předaacutevaacuteny specializovaneacute firmě k odborneacute likvidaci

K ověřeniacute analytickeacute kvality tohoto stanoveniacute byl použit referenčniacute standard CombiCheck 50 s certifikovanou hodnotou 50 plusmn 012 mgl-1 Analyacutezou tohoto standardu byly naměřeny hodnoty 51 51 a 50 mgl-1 N b) stanoveniacute organickyacutech laacutetek metodou CHSKCr

Laboratoř toto stanoveniacute dosud provaacuteděla obecně použiacutevanou titračniacute makrometodou (ČSN 83 0540) Při tomto postupu je vzorek (20 ml) společně se standardniacutem roztokem dichromanu draselneacuteho (10 ml) katalyzaacutetorů a kyseliny siacuteroveacute (30 ml) umiacutestěn na varnou plotyacutenku pod zpětnyacutem chladičem kde probiacutehaacute dvouhodinovyacute var (Obr 3) V laboratoři vzhledem k staacutevajiacuteciacutemu vybaveniacute bylo možno takto jednoraacutezově stanovit vždy pouze 3 vzorky (ke každeacute seacuterii bylo vždy nutno připravit i slepyacute vzorek) Potřeba chladiacuteciacute vody tak při analyacuteze 12 vzorků ktereacute lze nyniacute jednoraacutezově připravit v noveacutem termoreaktoru činila přibližně 650 litrů Při praacuteci s kyvetovyacutem testem se pracuje s celkovyacutem objemem 6 ml vzorku (včetně přiacutedavku chemikaacuteliiacute) To představuje vyacuteznamnou vyacutehodu oproti standardniacute metodě ve spotřebě elektrickeacute energie vody (při využitiacute teacuteto metody nejsou vzorky chlazeny) i v množstviacute škodlivin vypuštěnyacutech do kanalizace Při použitiacute tak minimaacutelniacutech objemů činidel jsou však kladeny vysokeacute naacuteroky na přesnost jejich daacutevkovaacuteniacute a proto bylo třeba laboratoř ještě vybavit odpoviacutedajiacuteciacutemi automatickyacutemi mikropipetami

Obr 3 Sestava na stanoveniacute CHSKCr standardniacute makrometodou se zpětnyacutemi chladiči Fig 3 Unit for COD determination by clasical macromethod with reverse cooling

Kontrola kvality analytickeacute praacutece při stanoveniacute CHSKCr před zavedeniacutem noveacute metody

byla provedena opakovanou analyacutezou referenčniacuteho standardu CombiCheck 50 s certifikovanou hodnotou 200 mgl-1 CHSK Byly stanoveny hodnoty 200 220 210 200 a 200 mgl-1 Maximaacutelniacute odchylka od standardu při stanoveniacute 220 mgl-1 představuje + 10 přičemž tolerančniacute meze uacutespěšnosti nutneacute k ziacuteskaacuteniacute Osvědčeniacute od ASLAB se v přiacutepadě CHSK udaacutevajiacute plusmn 25

Daacutele byly porovnaacuteny tři reaacutelneacute vzorky rybničniacute vody současnou analyacutezou standardniacute metodou dichromanem draselnyacutem oproti kyvetoveacutemu testu Merck Přehled vyacutesledků je uveden v tabulce č 1 Tab 1 Porovnaacuteniacute hodnot CHSK stanovenyacutech dvěma metodami Tab 1 Comparison of COD values analysed by two different methods

CHSKCr v mgl-1 Vzorek

rybničniacute vody MERCK kyvetovyacute test (pro CHSKCr 10ndash150) Standardniacute metoda

1 54 543 2 92 925 3 29 292

Z tabulky vyplyacutevaacute velmi dobraacute shoda vyacutesledků ziacuteskanyacutech oběma metodami (rozdiacutely vyacutesledků zde nepřekračujiacute vyacuteši 1 ) Dalšiacute vyacutehodou nově použiteacute metody je širokeacute koncentračniacute rozpětiacute CHSKCr (10ndash150 mgl-1) ktereacute je vyhovujiacuteciacute pro většinu povrchovyacutech vod a minimalizuje se tak nutnost opakovaacuteniacute analyacutez vzorku jehož ředěniacute neodpoviacutedalo stupni zatiacuteženiacute c) stanoveniacute celkoveacuteho fosforu

Stanoveniacute bylo dosud provaacuteděno oxidačniacutem rozkladem na rozpuštěneacute anorganickeacute orthofosforečnany a jejich naacuteslednyacutem stanoveniacutem absorpčniacute spektrofotometriiacute po reakci s molybdenanem amonnyacutem a po redukci kyselinou askorbovou (ČSN 83 0530) Nově použiacutevanyacute postup testu Spectroquant využiacutevaacute stejneacuteho reakčniacuteho principu ale podobně jako

v přiacutepadě CHSKCr se pracuje s nižšiacutemi objemy vzorku a činidel Naviacutec rozklad vzorku v termoreaktoru je jednoznačně definovaacuten teplotou a časem a neniacute tak ovlivněn subjektivniacutem přiacutestupem analytika V přiacutepadě dřiacuteve použiacutevaneacute metody bylo nutno pečlivě sledovat zaacutevěrečnou faacutezi mineralizace neboť v přiacutepadě že bylo spalovaacuteniacute vzorku ukončeno v nespraacutevnyacute okamžik došlo ke znehodnoceniacute vzorku (tzn že konečnyacute vyacutesledek stanoveniacute byl značně ovlivněn zkušenostiacute a preciznostiacute praacutece analytika) Dalšiacute nespornou vyacutehodou nově využiacutevaneacute metody je širokyacute rozsah měřeniacute kteryacute umožňuje analyzovat vzorek až do koncentrace 500 mgl-1 P bez ředěniacute zatiacutemco u dřiacutevějšiacuteho postupu již u koncentraciacute vyššiacutech než 035 mgl-1 PO4

3-P bylo nutno vzorek ředit Před zavedeniacutem noveacute metody byly i v tomto přiacutepadě provaacuteděny souběžneacute analyacutezy

oběma postupy a vyacutesledky jsou uvedeny v tab č 2 Tab 2 Porovnaacuteniacute hodnot Pcelk stanovenyacutech dvěma metodami Tab 2 Comparison of total phosphorus values analysed by two different methods

P celk v mgl-1 Vzorek rybničniacute vody Test Spectroquant ČSN 83 0530

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

) průměrnaacute hodnota ze třiacute stanoveniacute

I v tomto přiacutepadě je zřejmeacute že vyacutesledky ziacuteskaneacute při použitiacute obou metod se velmi dobře shodujiacute a rozdiacutely ve stanoveniacute mezi oběma metodami nepřesahujiacute 15 přičemž tolerančniacute meze uacutespěšnosti nutneacute k ziacuteskaacuteniacute Osvědčeniacute od ASLAB se v přiacutepadě celkoveacuteho fosforu udaacutevajiacute plusmn 20

3) Spectroquant Pharo 100 ndash spektrofotometr s plynule měnitelnou vlnovou deacutelkou v rozsahu 320ndash1100 nm umožňujiacuteciacute běžnaacute spektrofotometrickaacute měřeniacute absorbance a transmitance (Obr 4) Přiacutestroj lze vyžiacutevat pro všechny metody kyvetovyacutech a reagenčniacutech testů Spectroquant k analytickeacute koncovce všech vyacuteše popsanyacutech metod Jeho vyacutehoda spočiacutevaacute v určiteacute komfortniacute obslužnosti neboť byl vyvinut jako systeacutemovyacute fotometr praacutevě pro tyto testy

Obr 4 Spektrofotometr Fig 4 Spectrophotometer ZAacuteVĚR

Z předloženeacuteho přehledu vyplyacutevaacute že inovace přiacutestrojoveacuteho vybaveniacute centraacutelniacute laboratoře VUacuteRH JU je přiacutenosem jak v oblasti uacutespor energetickyacutech vstupů tak spotřeby (a tiacutem i vypouštěniacute) množstviacute chemickyacutech laacutetek vykazujiacuteciacutech nebezpečneacute vlastnosti a umožňuje rozšiacuteřeniacute kapacity poskytovanyacutech služeb v daneacute laboratoři Vyacutesledky dokladujiacute že nově použiacutevaneacute metody nenarušiacute kontinuitu ani naacutevaznost dosud provaacuteděnyacutech měřeniacute

Poděkovaacuteniacute

Přiacutestrojoveacute vybaveniacute laboratoře a zpracovaacuteniacute přiacutespěvku bylo provedeno za finančniacute podpory vyacutezkumneacuteho zaacuteměru VUacuteRH JU Vodňany MSM6007665809 a NAZV QH82117

Poradenskeacute informačniacute a školiacuteciacute rybaacuteřskeacute centrum při VUacuteRH JU Vodňany

POZVAacuteNKA

Vaacuteženiacute přaacuteteleacute jako v předchaacutezejiacuteciacutem obdobiacute tak i na rok 2009 pro Vaacutes chystaacuteme řadu odbornyacutech akciacute

vychaacutezejiacuteciacutech z vašich dotazů a požadavků

Současně Vaacutes tiacutemto zveme na již druhyacute letošniacute seminaacuteř

BIOLOGIE A CHOV DRAVYacuteCH DRUHŮ RYB A DOTAČNIacute POLITIKA V RYBAacuteŘSTVIacute

kteryacute se uskutečniacute ve dnech 14ndash15 května 2009 v zasedaciacute miacutestnosti MěUacute Vodňany

Přednaacutešet budou odborniacuteci z VUacuteRH JU Vodňany i dalšiacutech organizaciacute z celeacute ČR Uacutečast na seminaacuteři je bezplatnaacute nutnaacute je přihlaacuteška Uacutečastniacuteci seminaacuteře obdržiacute veškereacute materiaacutely v tištěneacute formě i na CD ROM Uacutespěšniacute uacutečastniacuteci obdržiacute potvrzeniacute (certifikaacutet) v souladu s Řaacutedem celoživotniacuteho vzdělaacutevaacuteniacute Jihočeskeacute univerzity v Českyacutech Budějoviciacutech Pro vaši informaci a možnost plaacutenovaacuteniacute uacutečasti uvaacutediacuteme i termiacuteny a teacutemata dalšiacutech seminaacuteřů

1 seminaacuteř (18ndash19 3 2009 ndash Současnost a perspektivy v oblasti hospodařeniacute na pstruhovyacutech vodaacutech ndash seminaacuteře se zuacutečastnilo 80 osob přiacutepadniacute dalšiacute zaacutejemci mohou ziacuteskat materiaacutely ze seminaacuteře na CD ROM za manipulačniacute poplatek 100 Kč ndash zahrnuje i poštovneacute

2 seminaacuteř (14ndash15 5 2009) ndash Biologie a chov dravyacutech druhů ryb + dotačniacute politika (seminaacuteř je pořaacutedaacuten v raacutemci konaacuteniacute tradičniacutech Vodňanskyacutech rybaacuteřskyacutech dnů)

3 seminaacuteř (10ndash11 11 2009) ndash Noveacute technologie v chovu ryb I

4 seminaacuteř (8ndash9 12 2009) ndash Noveacute technologie v chovu ryb II (na seminaacuteři 3 a 4 budou představeny noveacute technologie využitelneacute v chovu ryb např chov jeseterů parem a dalšiacutech meacuteně rozšiacuteřenyacutech druhů ryb)

Přihlaacutešky zašlete do 7 května 2009 na kontaktniacute adresu V přiacutepadě jakyacutechkoliv dotazů naacutes nevaacutehejte kontaktovat Těšiacuteme se na Vaši uacutečast a věřiacuteme že

budete s organizaciacute i naacuteplniacute seminaacuteřů spokojeni Informace (včetně přihlaacutešky) naleznete takeacute na našich webovyacutech straacutenkaacutech (wwwvurhjcucz) Kontaktniacute adresa Jihočeskaacute univerzita v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumnyacute uacutestav rybaacuteřskyacute a hydrobiologickyacute ve Vodňanech Ing Blanka Vykusovaacute CSc Zaacutetišiacute 728II 389 25 Vodňany Tel 387 774 627 724 504 922 fax 383 382 396 e-mail vykusovavurhjcucz

Akce je pořaacutedaacutena v raacutemci řešeniacute projektu Organizace a provedeniacute odbornyacutech rybaacuteřskyacutech seminaacuteřů (OP Rybaacuteřstviacute CZ12531000800288) Tento projekt je spolufinancovaacuten z prostředků EU Evropskeacuteho rybaacuteřskeacuteho fondu

a staacutetniacuteho rozpočtu Českeacute republiky

Informace o seminaacuteři Současnost a perspektivy v oblasti hospodařeniacute na pstruhovyacutech vodaacutech

Ve dnech 18ndash19 března 2009 byl uspořaacutedaacuten prvniacute z letošniacutech čtyř plaacutenovanyacutech odbornyacutech

seminaacuteřů Vzhledem k velkeacutemu zaacutejmu uacutečastniacuteků museli pořadateleacute konaacuteniacute seminaacuteře přesunout do velkeacute zasedaciacute miacutestnosti Městskeacuteho uacuteřadu ve Vodňanech Z přihlaacutešenyacutech viacutece jak 90 osob se nakonec skutečně prezentovalo 80 uacutečastniacuteků a to z řad produkčniacutech a svazovyacutech rybaacuteřů i odborneacute rybaacuteřskeacute veřejnosti

V programu seminaacuteře bylo připraveno 12 přednaacutešek Ing Jiřiacute Vostradovskyacute CSc z ČRS seznaacutemil

přiacutetomneacute s vyacutevojem uacutelovků lososovityacutech ryb a lipana v reviacuterech Českeacuteho rybaacuteřskeacuteho svazu Ing Tomaacuteš Randaacutek PhD (odbornyacute garant seminaacuteře VUacuteRH JU Vodňany) přednaacutešel o faktorech negativně ovlivňujiacuteciacutech rybiacute společenstva v pstruhovyacutech vodaacutech a o potenciaacutelniacutech možnostech stabilizace a naacutesledneacuteho rozvoje

populaciacute pstruha obecneacuteho a lipana

podhorniacuteho v našich vodaacutech O naacutehradaacutech škod způsobenyacutech vydrou a kormoraacutenem na rybiacutech obsaacutedkaacutech a o revitalizačniacutech opatřeniacutech referovali pracovniacuteci Krajskeacuteho uacuteřadu Jihočeskeacuteho kraje (Ing Marie Beňovaacute a Ing Zdeněk Klimeš) Ing Jana Maacutechovaacute (VUacuteRH JU) seznaacutemila přiacutetomneacute s hlavniacutemi přiacutečinami havarijniacutech uacutehynů ryb a Ing Jan Turek (VUacuteRH JU) se zahraničniacutemi zkušenostmi z chovu

pstruha obecneacuteho a lipana podhorniacuteho a takeacute referoval o adaptabilitě odchovanyacutech naacutesad lipana podhorniacuteho v podmiacutenkaacutech volnyacutech vod Pracovniacuteci z VUacuteV TGM Praha přednaacutešeli o vyacuteznamu migraciacute pstruhů obecnyacutech z pohledu rybaacuteřskeacuteho hospodaacuteře (Ing Ondřej Slaviacutek PhD) vlivu domestikace na chovaacuteniacute ryb v přirozeneacutem prostřediacute (Ing Pavel Horkyacute) a o využitiacute potravniacute nabiacutedky v tociacutech se společnyacutem a oddělenyacutem vyacuteskytem pstruha obecneacuteho a sivena americkeacuteho (Ing Petra Kuliacuteškovaacute) Ing Jan Kohout (UacuteŽFG AV ČR vvi Liběchov) seznaacutemil uacutečastniacuteky seminaacuteře s naacutestinem genetickeacute struktury pstruha obecneacuteho a lipana podhorniacuteho v ČR a SR ve vztahu k rybaacuteřskeacutemu obhospodařovaacuteniacute toku Po jednotlivyacutech přednaacuteškaacutech i po skončeniacute denniacuteho programu byl vždy vyhrazen i dostatečnyacute prostor pro diskusi Ta pokračovala i o přestaacutevkaacutech a dokonce i do pozdniacutech večerniacutech hodin

Akce byla pořaacutedaacutena v raacutemci řešeniacute projektu Organizace a provedeniacute odbornyacutech rybaacuteřskyacutech seminaacuteřů (OP Rybaacuteřstviacute CZ12531000800288) Tento projekt je spolufinancovaacuten z prostředků EU Evropskeacuteho rybaacuteřskeacuteho fondu

Pokyny pro autory

Odborneacute zaměřeniacute časopisu Bulletin VUacuteRH přijiacutemaacute k publikovaacuteniacute a naacutesledně po lektorovaacuteniacute uveřejňuje původniacute vědeckeacute

praacutece kraacutetkaacute sděleniacute přehledoveacute referaacutety a recenze tyacutekajiacuteciacute se všech aspektů sladkovodniacuteho rybaacuteřstviacute ichtyologie a akvakultury Tato odbornaacute oblast zahrnuje předevšiacutem vědeckeacute praacutece tyacutekajiacuteciacute se biologie fyziologie reprodukce genetiky šlechtěniacute chovu vyacuteživy a nemociacute sladkovodniacutech ryb a daacutele takeacute sladkovodniacute ekologie toxikologie hydrobiologie rybaacuteřskeacute statistiky a ekonomiky chovu ryb Přiacuteležitostně jsou v něm publikovaacuteny i přiacutespěvky předneseneacute na vědeckyacutech a odbornyacutech konferenciacutech či seminaacuteřiacutech

Autorskaacute praacuteva předklaacutedaneacute praacutece Autor předklaacutedaneacute praacutece je plně odpovědnyacute za původnost praacutece a za jejiacute věcnou i formaacutelniacute

spraacutevnost Autor se při předklaacutedaacuteniacute praacutece do redakce časopisu zaručuje že tato praacutece je jeho autorskeacute diacutelo ktereacute nebylo nikde publikovaacuteno a neporušuje (či nebude porušovat) autorskaacute diacutela třetiacutech osob Prvniacute autor předklaacutedaneacute praacutece přebiacuteraacute veškerou zodpovědnost za všechny spoluautory praacutece Autoři praacutece se zaručujiacute že žaacutednaacute čaacutest jejich praacutece nebude daacutele publikovaacutena či nijak rozšiřovaacutena bez souhlasu vydavatele Bulletinu VUacuteRH Vodňany

V přiacutepadě využitiacute čaacutestiacute děl jinyacutech autorů se autor zavazuje dodržovat citačniacute pravidla dle sect 31 autorskeacuteho zaacutekona 1212000 Sb

Proces předloženiacute posouzeniacute lektorovaacuteniacute a naacutesledneacute uveřejněniacute předklaacutedaneacute praacutece Autoři předklaacutedajiacute praacutece (předevšiacutem odborneacute a přehledoveacute člaacutenky) vyacutehradně elektronicky bez

tištěneacuteho originaacutelu na emailovou adresu dvorakzvurhjcucz Předloženaacute praacutece je posouzena redakciacute časopisu Poteacute je praacutece zaslaacutena ke korektuře Dva nezaacutevisliacute odborniacute oponenti z jinyacutech českyacutech vědecko-vyacutezkumnyacutech instituciacute posoudiacute předloženou praacuteci z hlediska odborneacuteho a věcneacuteho Po korektuře a přiacutepadnyacutech vyžaacutedanyacutech uacutepravaacutech ktereacute jsou realizovaacuteny a odsouhlaseny samotnyacutemi autory je předloženaacute praacutece doporučena k uveřejněniacute O konečneacutem uveřejněniacute praciacute rozhoduje redakčniacute rada časopisu a to se zřetelem k vědeckeacutemu vyacuteznamu přiacutenosu a kvalitě předloženeacute praacutece Před konečnyacutem uveřejněniacutem prvniacute autor praacutece odsouhlasiacute publikovaacuteniacute praacutece v konečneacute podobě vlastniacutem podpisem na speciaacutelniacutem formulaacuteři bdquoSouhlas s vytištěniacutem daneacute publikaceldquo Po tomto odsouhlaseniacute se praacutece staacutevaacute majetkem vydavatele Všechny naacuteslednaacute autorskaacute praacuteva jsou poteacute chraacuteněny copyrightem vydavatele

Technickaacute uacuteprava rukopisu Text přiacutespěvku bude zpracovanyacute v českeacutem jazyce v programu Microsoft Word (pokud možno

v co nejaktuaacutelnějšiacute verzi) s přiacuteponou rtf Vyžadovanyacute formaacutet přiacutespěvku je formaacutet straacutenky A4 řaacutedkovaacuteniacute 2 zarovnaacuteniacute textu do bloku font Times New Roman CE zaacutekladniacute piacutesmo textu velikosti 12 okraje 25 cm po všech stranaacutech straacutenky i řaacutedky textu budou průběžně čiacuteslovaacuteny u každeacuteho odstavce bude odsazeniacute prvniacuteho řaacutedku 1 cm žaacutednyacute text ani informace nesmiacute byacutet v zaacutehlaviacute ani v zaacutepatiacute straacutenky Text je doporučeno graficky upravit tak jak si jej autor přeje otisknout tedy s vloženiacutem tabulek grafů i obraacutezků přiacutemo do textu Vyžaduje se tabulky přiacutemo vytvaacuteřet v programu Microsoft Word Obraacutezky a grafy se vyžaduje vklaacutedat do textu jako grafickyacute formaacutet bdquoobraacutezekldquo a to v černobiacuteleacutem provedeniacute (stupniacutech šedi) Všechny grafy a obraacutezky musiacute byacutet dělaacuteny s dostatečnyacutem rozlišeniacutem velikostiacute piacutesma atd aby byly přehledneacute a čitelneacute i po zmenšeniacute na jednu straacutenku formaacutetu velikosti A5 Nepřehledneacute barevneacute či jinak neodpoviacutedajiacuteciacute grafy a tabulky nebudou do textu zařazeny Pro kvalitnějšiacute otištěniacute se vyžaduje grafy a obraacutezky zaslat ještě elektronicky ve formaacutetu tif bmp jpg Na každou tabulku graf či obraacutezek musiacute byacutet odkaz v textu (jako např Tab 1 nebo Obr 1) U tabulek nejsou povoleny žaacutedneacute barevneacute prvky ani stiacutenovaacuteniacute buněk tabulky Nadpis a legenda tabulky grafu a obraacutezku jsou vždy umiacutestěny nad tabulkou grafem či obraacutezkem velikostiacute piacutesma 12 s řezem piacutesma obyčejneacute Pod českyacutem naacutezvem je vyžadovaacuten anglickyacute překlad nadpisu a legendy kteryacute je psaacuten kurziacutevou s velikostiacute piacutesma 12

V praacuteci je nutneacute použiacutevat jednotky odpoviacutedajiacuteciacute soustavě SI Pokud autor použiacutevaacute v praacuteci zkratek jakeacutehokoliv druhu je nutneacute aby byla zkratka při prvniacutem použitiacute vysvětlena V naacutezvu praacutece a v souhrnu se použitiacute zkratek nedoporučuje Jakeacutekoliv ciziacute naacutezvosloviacute je nutneacute při prvniacutem použitiacute

v textu vysvětlit v českeacutem jazyce Při prvniacute zmiacutence v textu o živočišneacutem či rostlinneacutem taxonomickeacutem subjektu je nutneacute uveřejnit jejich vědeckyacute českyacute (pokud je znaacutem) i latinskyacute naacutezev

Vlastniacute uacuteprava praacutece Naacutezev Naacutezev se piacuteše velkyacutemi piacutesmeny tučně se zarovnaacuteniacutem na střed velikost piacutesma 14 Anglickyacute

naacutezev se uvede hned pod českyacute naacutezev velkyacutemi piacutesmeny kurziacutevou (ne tučně) velikost piacutesma 13 se zarovnaacuteniacutem na střed Mezi českyacutem a anglickyacutem naacutezvem neniacute žaacutedneacute odsazeniacute řaacutedků

Autoři Autorskyacute kolektiv se uvede pod naacutezev praacutece s odsazeniacutem jednoho řaacutedku velikost piacutesma 12

tučně zarovnaacuteniacute na střed všechna piacutesmena velkaacute Uvaacutediacute se nejprve počaacutetečniacute piacutesmeno křestniacuteho jmeacutena autora naacutesledovaneacute celyacutem přiacutejmeniacutem daneacuteho autora Jednotliviacute autoři se od sebe oddělujiacute čaacuterkou za počaacutetečniacutem piacutesmenem křestniacuteho jmeacutena daneacuteho autora se daacutevaacute tečka (bez čaacuterky)

Afilace Pod jmeacutena autorů se s odsazeniacutem jednoho řaacutedku uvaacutediacute adresy pracoviště autorů včetně e-

mailovyacutech adres Velikost piacutesma 10 kurziacuteva zarovnaacuteniacute do bloku Jsou-li autoři z viacutece pracovišť uvede se na každyacute řaacutedek jedno pracoviště a u jednotlivyacutech autorů se jejich přiacuteslušnost k adrese vyznačiacute čiacutesliciacute s horniacutem indexem za jejich přiacutejmeniacutem

Abstrakt Po afilaci autorů s odsazeniacutem 2 řaacutedků naacutesleduje anglickyacute abstrakt Abstrakt se piacuteše kurziacutevou

velikost piacutesma 10 zarovnaacuteniacute do bloku Vypracovaacuteniacute abstraktu je nutneacute věnovat zvlaacuteštniacute peacuteči Autor do něj maacute shrnout vše co je na jeho praacuteci pozoruhodneacute a noveacute a co maacute byacutet zdokumentovaacuteno Abstrakt maacute byacutet nekritickyacutem informačniacutem vyacuteběrem vyacuteznamneacuteho obsahu a zaacutevěru člaacutenku nikoli však jeho pouhyacutem popisem V abstraktu se nepoužiacutevajiacute žaacutedneacute zkratky Abstrakt musiacute obsahovat zaacutekladniacute čiacuteselneacute uacutedaje včetně statistickyacutech hodnot Abstrakt se uvaacutediacute jen v jednom odstavci a jeho rozsah je maximaacutelně 250 slov

Kliacutečovaacute slova Kliacutečovaacute slova naacutesledujiacute s odsazeniacutem 1 řaacutedku po anglickeacutem abstraktu v českeacutem a naacutesledně

anglickeacutem jazyce Velikost piacutesma 10 zarovnaacuteniacute do bloku kliacutečovaacute slova v českeacutem jazyce ndash obyčejnyacute řez piacutesma kliacutečovaacute slova v anglickeacutem jazyce ndash kurziacuteva

Uacutevod Maacute obsahovat současnyacute stav studovaneacuteho probleacutemu a hlavniacute důvody proč byla praacutece

uskutečněna Je nutno se v něm vyhnout rozsaacutehlyacutem historickyacutem přehledům Materiaacutel a metodika Metody se popisujiacute pouze tehdy jsou-li původniacute jinak postačuje citovat autora metod a uvaacutedět

jen přiacutepadneacute odchylky Je popsaacuten pokusnyacute materiaacutel Popis metod by měl umožnit aby kdokoliv z odborniacuteků mohl podle něho a při použitiacute uvedenyacutech citaciacute praacuteci opakovat Členěniacute textu na podsekce je možneacute grafickeacute řešeniacute ale musiacute byacutet řešeno přehledně a srozumitelně

Vyacutesledky Tato čaacutest by neměla obsahovat teoretickeacute zaacutevěry ani dedukce ale pouze faktickeacute naacutelezy a

hodnoty Doporučuje se daacutet přednost grafickeacutemu vyjaacutedřeniacute a minimalizovat počet tabulek Tabulky grafy a obraacutezky v textu nesmiacute obsahovat zdvojeneacute informace Tzn co se vyjaacutedřiacute v textu se již nesmiacute uvaacutedět v tabulce či jineacutem grafickeacutem vyjaacutedřeniacute

Diskuse Obsahuje zhodnoceniacute praacutece a vlastniacute postřehy autorů Vyacutesledky praacutece se konfrontujiacute s dřiacuteve

publikovanyacutemi vyacutesledky pokud majiacute souvislost nebo jsou s předloženou praciacute srovnatelneacute Souhrn (v českeacutem jazyce) U původniacutech praciacute (včetně přehledovyacutech praciacute) naacutesleduje po diskusi souhrn v českeacutem jazyce

kteryacute je obdobou anglickeacuteho abstraktu na začaacutetku předloženeacute praacutece Poděkovaacuteniacute Zde se uvaacutediacute předevšiacutem titul čiacuteslo a zdroj finančniacutech prostředků poskytnutyacutech k provaacuteděniacute

publikovaneacute praacutece a daacutele poděkovaacuteniacute těm spolupracovniacutekům kteřiacute svyacutem uacutesiliacutem jakkoliv vyacuteznamně přispěli k realizaci publikovaneacute praacutece

Literatura Všechny publikace citovaneacute v textu přiacutespěvku musiacute byacutet zahrnuty do seznamu použiteacute

literatury Velikost piacutesma u seznamu literatury je 10 Prvniacute řaacutedek každeacuteho literaacuterniacuteho odkazu je předsazen o 1 cm

Literaacuterniacute odkazy v textu musiacute obsahovat jmeacuteno autora a rok vydaacuteniacute podle vzoru (Al-Sabti 1986) hellip jak uvaacutediacute Linhart (1991) hellip Praacutece kolektivu třiacute a viacutece autorů budou v textu citovaacuteny podle vzoru (Kouřil a kol 1988) hellip podle Streisingera a kol (1984)hellip V těchto přiacutepadech však budou u přiacuteslušneacuteho přiacutespěvku v seznamu literatury uvedeni všichni spoluautoři

Seznam literatury bude sestaven abecedně podle jmen autorů a chronologicky u jednotlivyacutech autorů podle pořadiacute 1) chronologickyacute seznam publikaciacute autora 2) chronologickyacute seznam publikaciacute teacutehož autora s jedniacutem spoluautorem 3) chronologickyacute seznam publikaciacute teacutehož autora s viacutece než jedniacutem spoluautorem Viacutece praciacute jednoho autora v teacutemž roce bude odlišeno piacutesmenem (např 1989a 1989b atd)

Publikace budou v seznamu literatury uvedeny podle vzoru Publikace v periodikaacutech

Svobodovaacute Z Vykusovaacute B Maacutechovaacute J Bastl J Hrbkovaacute M Svobodniacutek J 1993 Monitoring cizorodyacutech laacutetek v rybaacutech z řeky Jizery v lokalitě Otradovice Bull VUacuteRH Vodňany 29(1) 28-42 Publikace z konferenciacute ve sborniacuteciacutech a zvlaacuteštniacutech vydaacuteniacutech periodik

Flajšhans M Raacuteb P Kaacutelal L 1993 Genetics of salmonids in Czechoslovakia Current status of knowledge In JG Cloud and GH Thorgaard (Editors) Genetic Conservation of Salmonid Fishes Proceedings of NATOASI June 24 ndash July 5 1991 at Moskow ID and Pullman WA USA Plenum Press New York pp 231-242 Knižniacute publikace

Bartiacutek M and Piskač A (Editors) 1981 Veterinary toxicology Developments in Animal and Veterinary Sciences 7 Elsevier Amsterdam 346 pp Dalšiacute zdroje publikaciacute Citace nepublikovanyacutech přiacutespěvků se neuvaacutedějiacute Informace v dopise se uvaacutediacute zkratkou (in litt)

osobniacute sděleniacute zkratkou a časovyacutem uacutedajem tj rokem (Fuka os sděl 1993) podle Fuky (os sděl 1993) Při nedostupnosti původniacuteho zdroje se citace uvaacutedějiacute formou Meske 1983 (ex Hamaacutečkovaacute a kol 1993)

Přiacutespěvky ktereacute nesplňujiacute požadavky dle pokynů pro autory budou před posouzeniacutem a

vlastniacutem lektorovaacuteniacutem vraacuteceny zpět k přepracovaacuteniacute

BULLETIN VUacuteRH VODŇANY č 12009 ndash Vychaacuteziacute čtvrtletně jako uacutečelovyacute tisk Jihočeskeacute univerzity v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumneacuteho uacutestavu rybaacuteřskeacuteho a hydrobiologickeacuteho ve Vodňanech - copy - JU VUacuteRH Vodňany 389 25 Vodňany ndash Registr č MK ČR E 12997 IČO 600 76 658 Šeacutefredaktor Ing T Policar PhD ndash Redakčniacute rada Bulletinu VUacuteRH Vodňany Ing T Policar PhD doc Ing M Flajšhans Drreragr prof Ing O Linhart DrSc Ing P Kozaacutek PhD Ing T Randaacutek PhD Z Dvořaacutekovaacute prof MVDr Z Svobodovaacute DrSc doc Dr Ing J Mareš prof A Ciereszko PhD Mgr R Grabic PhD A Viveiros PhD Dr V P Fedotov Dr G J Martiacuten Tisk PTS Vodňany sro Toto čiacuteslo bylo předaacuteno do tisku 6 4 2009

Přehled zakoupenyacutech přiacutestrojů a jejich využitiacute

Technickaacute uacuteprava rukopisu

Vlastniacute uacuteprava praacutece

Naacutezev

Autoři

Materiaacutel a metodika

Vyacutesledky

Diskuse

Souhrn (v českeacutem jazyce)

U původniacutech praciacute (včetně přehledovyacutech praciacute) naacutesleduje po diskusi souhrn v českeacutem jazyce kteryacute je obdobou anglickeacuteho abstraktu na začaacutetku předloženeacute praacutece


Literatura

BULLETIN VUacuteRH VODŇANY č 12009 ndash Vychaacuteziacute čtvrtletně jako uacutečelovyacute tisk Jihočeskeacute univerzity v Českyacutech Budějoviciacutech Vyacutezkumneacuteho uacutestavu rybaacuteřskeacuteho a hydrobiologickeacuteho ve Vodňanech - copy - JU VUacuteRH Vodňany 389 25 Vodňany ndash Registr č MK ČR E 12997 IČO 600 76 658 Šeacutefredaktor Ing T Policar PhD ndash Redakčniacute rada Bulletinu VUacuteRH Vodňany Ing T Policar PhD doc Ing M Flajšhans Drreragr prof Ing O Linhart DrSc Ing P Kozaacutek PhD Ing T Randaacutek PhD Z Dvořaacutekovaacute prof MVDr Z Svobodovaacute DrSc doc Dr Ing J Mareš prof A Ciereszko PhD Mgr R Grabic PhD A Viveiros PhD Dr V P Fedotov Dr G J Martiacuten

O B S A H CONTENTS

Původniacute člaacutenky ndash Original papers SMH ALAVI M RODINA D GELA O LINHART Morfologie spermiiacute složeniacute seminaacutelniacute plazmy motilita a parametry zvlněniacute bičiacuteku spermie u štiky obecneacute (Esox lucius) Sperm morphology seminal plasma composition motility and flagellar wave parameters in pike (Esox lucius)

P PODHOREC J KOUŘIL Hypothalamickeacute faktory (GnRH a DA) a jejich využitiacute k odstraněniacute reprodukčniacute dysfunkce u kaprovityacutech ryb (přehled) Hypothalamic factor (GnRH and DA) and their utilization to elimination of reproductive dysfunction in cyprinidae fish (A review)

J TUREK T RANDAacuteK J VELIacuteŠEK R HANAacuteK E SUDOVAacute Porovnaacuteniacute abundance a biomasy rybiacute obsaacutedky v morfologicky a průtokově odlišnyacutech uacuteseciacutech maleacuteho toku Comparison of fish abundance and biomass in parts of small brook with different morphological and discharge conditions

Kraacutetkaacute sděleniacute ndash Short communications O VALENTOVAacute J MAacuteCHOVAacute Zavedeniacute novyacutech metod stanoveniacute vybranyacutech parametrů kvality vody v centraacutelniacute laboratoři VUacuteRH JU Vodňany New analytical methods for selected parameters of water quality introduced in the hydrochemical laboratory of RIFCH USB Vodňany

Zpraacutevy a Informace ndash News and Information Poradenskeacute informačniacute a školiacuteciacute rybaacuteřskeacute centrum při VUacuteRH JU Vodňany ndash seminaacuteře plaacutenovaneacute na rok 2009

Informace o seminaacuteři ndash Současnost a perspektivy v oblasti hospodařeniacute na pstruhovyacutech vodaacutech XIX Vodňanskeacute rybaacuteřskeacute dny

Pokyny pro autory 33

45 s po aktivaci

0 80 125 200 300 350

yacutech

miiacute

10 s po aktivaci

yacutech

miiacute

60 s po aktivaci

0 125 235 350

miiacute

0 80 125 200 300 350

miiacute

a b bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlny

0 25 50 100 150

bbababa

0 25 50 100 150

dcdbc ba

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

bcababa

0 25 50 100 150

aababc bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

25 50 100

Deacutel

dy (μ

d d Deacutelka vlny

ZAacuteVĚR

(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


45 s po aktivaci

0 80 125 200 300 350

yacutech

miiacute

10 s po aktivaci

yacutech

miiacute

60 s po aktivaci

0 125 235 350

miiacute

0 80 125 200 300 350

miiacute

a b bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlny

0 25 50 100 150

bbababa

0 25 50 100 150

dcdbc ba

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

bcababa

0 25 50 100 150

aababc bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

25 50 100

Deacutel

dy (μ

d d Deacutelka vlny

ZAacuteVĚR

(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


45 s po aktivaci

0 80 125 200 300 350

yacutech

miiacute

10 s po aktivaci

yacutech

miiacute

60 s po aktivaci

0 125 235 350

miiacute

0 80 125 200 300 350

miiacute

a b bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlny

0 25 50 100 150

bbababa

0 25 50 100 150

dcdbc ba

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

bcababa

0 25 50 100 150

aababc bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

25 50 100

Deacutel

dy (μ

d d Deacutelka vlny

ZAacuteVĚR

(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


45 s po aktivaci

0 80 125 200 300 350

yacutech

miiacute

10 s po aktivaci

yacutech

miiacute

60 s po aktivaci

0 125 235 350

miiacute

0 80 125 200 300 350

miiacute

a b bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlny

0 25 50 100 150

bbababa

0 25 50 100 150

dcdbc ba

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

bcababa

0 25 50 100 150

aababc bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

25 50 100

Deacutel

dy (μ

d d Deacutelka vlny

ZAacuteVĚR

(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


0 80 125 200 300 350

yacutech

miiacute

10 s po aktivaci

yacutech

miiacute

60 s po aktivaci

0 125 235 350

miiacute

0 80 125 200 300 350

miiacute

a b bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlny

0 25 50 100 150

bbababa

0 25 50 100 150

dcdbc ba

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

bcababa

0 25 50 100 150

aababc bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

25 50 100

Deacutel

dy (μ

d d Deacutelka vlny

ZAacuteVĚR

(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


a b bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

Deacutelka vlny

0 25 50 100 150

bbababa

0 25 50 100 150

dcdbc ba

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

bcababa

0 25 50 100 150

aababc bc

0 25 50 100 150

Deacutel

dy (μ

25 50 100

Deacutel

dy (μ

d d Deacutelka vlny

ZAacuteVĚR

(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


ZAacuteVĚR

(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


(A REVIEW)

Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Inhibitory dopaminu

SOUHRN

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 132 6 3505 4811 1389 66847

hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


hmotnost (g)

Biomasa (gm toku)

Celkem 242 8 366 3457 0515 178 DISKUSE

SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


SOUHRN

projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


projektu QH71305

Capraver

LITERATURA

1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


1 54 543 2 92 925 3 29 292

012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


012) 1 013 110) 2 099 066) 3 065 042) 4 041 190) 5 180 118) 6 120

POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


POZVAacuteNKA

Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Pokyny pro autory


Naacutezev

Autoři


Vyacutesledky

Diskuse




Literatura


Documents

BULLETIN VÚRH VODŇ ANY 1 - jcu.cz(1 mM). The osmolality of seminal plasma was in range of 230–350 mOsmol.kg-1. After triggering of sperm motility in very low osmolality (distilled