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Bruker Daltonik GmbH
Caracteriación química de azafrán por técnicas de HPLC
Caracteriación química de azafrán por
técnicas de HPLC
Dr. Fernando Lafont. Univesidad Córdoba
Bruker Daltonik GmbH
Introducción
Preparación muestra
Instrumentación analítica
Resultados
HPLC-UV/DAD
UHPLC-QTOF
Bruker Daltonik GmbH
Preparación de muestra
20000 rpm
Dispersar
0,25 g muestra homogeneizada
Transferir muestra a un tubo de 50 mL
Añadir 25 mL 50% H2O/50% MeOH
CentrifugarInyectar HPLC-UV/DAD
Inyectar UHPLC-TOF
Filtrar Transferir 1 mL a vial
0.2 µm
100 µL PI (2-nitroanilina)
+
Bruker Daltonik GmbH
Instrumentación HPLC-UV/DAD
HPLC
Fase móvil A: H2O
Fase móvil B:ACN
Columna: C18, 10 cm × 4,6 mm 2,7 µm
Flujo de la columna: 1 mL min-1
Temperatura: 35ºC
Inyección de muestra: 5 µl
Detector UV/DAD
ʎ1: 440 nm
ʎ2: 250 nm
ʎ3: 310 nm
Tiempo(min)
A(%)
B(%)
6 20 80
29 50 50
30 100 0
34 100 0
Bruker Daltonik GmbH
Instrumentación UHPLC-TOF
HPLC
Fase móvil A: Metanol
Fase móvil B: H2O/Ac. Fórmico 0,05%
Columna: C18, 10 cm × 2,1 mm 1,8 µm
Flujo de la columna: 0,40 mL min-1
Temperatura columna: 40ºC
Inyección de muestra: 5 µl
Fuente
Ionización: Electrospray positivo, 5500 V
Temperatura: 225 ºC
Detector MS: Bruker
Maxis Impact II,
Resolución: 40000
Adquisición de datos:
bbCID (m/z 60-1000)
Tiempo(min)
A(%)
B(%)
0 95 5
0.35 95 5
10 50 100
14 0 100
Bruker Daltonik GmbH
Resultados HPLC-UV/DAD
ʎ3: 310 nm
ʎ1: 440 nm
ʎ2: 250 nm
Bruker Daltonik GmbH
Resultados HPLC-UV/DAD
ʎ1: 440 nm
ʎ2: 250 nm
ʎ3: 310 nm
Longitud de onda(nm)
Compuestoscuantificados
440 Crocín
250 Picocrocín y kaempherol
310 Safranal
Bruker Daltonik GmbH
Resultados HPLC-UV/DAD
Crocín (suma)
Criterios de linealidad
r2 > 0,995
RSD < 10%
Bruker Daltonik GmbH
Resultados HPLC-UV/DAD
Muestras totales: 139
Compuesto Valor medio(mg/g)
RSD(%)
Safranal 1.87 43.5
Crocín 174 26.7
Kaempherol 0.55 25.5
Bruker Daltonik GmbH
Resultados HPLC/UV-DAD
Toledo
Ciudad Real
Albacete
Cuenca
Bruker Daltonik GmbH
Resultados HPLC/QTof
Detección de 368 compuestos diferentes
Gracias!!!