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1 CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES ESTACIONES DE LAVADEROS DE AUTOS DEL AREA METROPOLITANA DE SANTANDER. DORIS JOHANNA LOPERA MURILLO Código: 13331016 UNIVERSIDAD DE SANTANDER- UDES FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS NATURALES Y AGROPECUARIAS MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL BUCARAMANGA 2018

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CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES ESTACIONES

DE LAVADEROS DE AUTOS DEL AREA METROPOLITANA DE SANTANDER.

DORIS JOHANNA LOPERA MURILLO

Código: 13331016

UNIVERSIDAD DE SANTANDER- UDES

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS NATURALES Y AGROPECUARIAS

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

BUCARAMANGA

2018

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CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES ESTACIONES

DE LAVADEROS DE AUTOS DEL AREA METROPOLITANA DE SANTANDER.

DORIS JOHANNA LOPERA MURILLO

Código: 13331016

Trabajo de grado para optar por el título en Microbióloga industrial

GINA PATRICIA PARRA APARICIO

DIRECTORA TRABAJO DE GRADO

UNIVERSIDAD DE SANTANDER- UDES

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS NATURALES Y AGROPECUARIAS

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

BUCARAMANGA

2018

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AGRADECIMIENTOS Y DEDICATORIA

Esta tesis, ha requerido el esfuerzo y la dedicación mía y de mi directora de tesis; no hubiese

sido posible su posible finalización, sin la cooperación desinteresada de todas y cada una

de las personas que a continuación mencionare; las cuales han sido un soporte muy

importante en esta etapa.

Primeramente le doy gracias a Dios porque ha sido grande y bondadoso conmigo, porque a

pesar de las adversidades él ha sido mi fortaleza y mi mejor compañía en este largo proceso.

Gracias a mi madre de ella he recibido su dedicación y paciencia; porque siempre ha sido

la promotora de mis sueños brindándome su apoyo económico y moral, porque a pesar de

todo siempre confió en mí y nunca desistió en ayudarme.

A mis hijos que han llegado en los momentos más indicados mi bebe grande Diego Fernando

y mi bebe pequeño Samuel Andrés que son mis grandes compañeros de aventuras, mi fuente

de inspiración para superarme cada día más.

Mi más sincero agradecimiento a mi Directora de Tesis Gina por su apoyo y gran ayuda en

este trabajo de investigación; de igual manera al Coordinador de Laboratorio Pedro Patiño

por su confianza y ayuda en esta última etapa, donde no tuve momentos muy fáciles.

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Gracias a todas esas personas que de una u otra manera, han sido claves en mi vida

profesional y personal; a los docentes del Programa de Microbiología Industrial que me

brindaron sus conocimientos durante los momentos de aula y fuera de ellas; a todo el equipo

de los laboratorios de la Universidad de Santander por su gran ayuda en este trabajo de

tesis y en la compañía que nos brindaron para la realización de nuestras clases durante el

transcurso de la carrera.

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TABLA DE CONTENIDO

1. INTRODUCCIÓN ............................................................................................................... 15

2. OBJETIVOS ........................................................................................................................ 16

2.1 Objetivo General ............................................................................................................... 16

2.2 Objetivos específicos ...................................................................................................... 16

3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .......................................................................... 17

4. JUSTIFICACION ................................................................................................................ 18

5. HIPOTESIS .......................................................................................................................... 20

5.1 Hipótesis Nula .................................................................................................................... 20

5.2 Hipótesis Alternativa......................................................................................................... 20

CAPITULO 6 .............................................................................................................................. 21

6. MARCO TEORICO ............................................................................................................ 21

6.1 Industria de lavado de automotores ................................................................................ 21

6.1.1 Servicios húmedos....................................................................................................... 21

6.1.2 Servicios secos ............................................................................................................. 22

6.2 Impacto ambiental de lodos .............................................................................................. 23

6.3 Tratamiento de lodos de la industria de lavado de automotores .................................. 25

6.4 Manejo de Aguas Residuales ....................................................................................... 26

6.4.1 Sistemas de tratamiento por gravedad ..................................................................... 28

6.4.2 Trampa de sedimentos ............................................................................................... 29

6.4.3 Trampa de grasas ....................................................................................................... 29

6.4.4 Caja de aforo ............................................................................................................... 30

6.5 Composición de los lodos .................................................................................................. 31

6.6 Normatividad y Categorización ....................................................................................... 32

6.7 Parámetros fisicoquímicos en biosólidos ......................................................................... 36

6.7.1 Determinación de pH .................................................................................................. 36

6.7.2 Determinación de Alcalinidad ................................................................................... 36

6.7.3 Determinación de Acidez ........................................................................................... 37

6.7.4 Determinación de Humedad ...................................................................................... 37

6.7.5 Determinación de cenizas ........................................................................................... 37

6.7.6 Determinación de la Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) ........................... 37

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6.7.7 Determinación de la Demanda Química de Oxígeno (DQO) .................................. 38

6.8 Microorganismos contaminantes en lodos ...................................................................... 38

6.8.1 Microorganismos indicadores de contaminación fecal ........................................... 38

6.9 Categoría de lodos ............................................................................................................. 40

6.9.1 Lodos categoría A ....................................................................................................... 40

6.9.2 Lodo categoría B ......................................................................................................... 40

6.9.3 Lodo categoría C ......................................................................................................... 41

6.10 Alternativas de uso de lodos ........................................................................................... 42

6.10.1 Incineración ............................................................................................................... 43

6.10.2 Compostaje ................................................................................................................ 43

6.10.3 Producción de Ladrillo ............................................................................................. 44

6.10.4 Fertilizantes orgánicos ............................................................................................. 44

6.10.5 Vermicomposteo ....................................................................................................... 44

CAPITULO 7 .............................................................................................................................. 46

7. METODOLOGIA ................................................................................................................ 46

7.1 Ubicación geográfica ......................................................................................................... 47

7.1.1 Lavadero 1 ................................................................................................................... 48

7.1.2 Lavadero 2 ................................................................................................................... 48

7.1.3 Lavadero 3 ................................................................................................................... 48

7.2 Identificación de los sitios de muestreo, toma y transporte de la muestra .................. 49

7.3 Procesamiento de muestras para posterior análisis ....................................................... 50

7.3.1 Sólidos Totales............................................................................................................. 50

7.3.2 Procesamiento de la muestra para análisis microbiológicos .................................. 51

CAPITULO 8 .............................................................................................................................. 57

8. RESULTADOS .................................................................................................................... 57

8.1 Parámetros Microbiológicos............................................................................................. 57

8.2. Cuantificación de la carga microbiana .......................................................................... 59

8.2.1 Salmonella sp. .............................................................................................................. 59

8.2.2 Coliformes fecales ....................................................................................................... 61

8.2.3 Huevos de Helmintos .................................................................................................. 65

8.2.4 Fagos Somaticos ......................................................................................................... 66

8.3 Cumplimiento y Categorizacion de los lodos según el Decreto 1287 del 2014 ............. 66

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CAPITULO 9 .............................................................................................................................. 71

9. CONCLUSIONES ............................................................................................................... 71

CAPITULO 10 ............................................................................................................................ 73

10. RECOMENDACIONES ................................................................................................. 73

CAPITULO 11 ............................................................................................................................ 74

11. BIBLIOGRAFIA.............................................................................................................. 74

CAPITULO 12 ............................................................................................................................ 79

12 NORMOGRAFIA .................................................................................................................. 79

CAPITULO 13 ............................................................................................................................ 81

13. ANEXOS ................................................................................................................................ 81

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LISTA DE TABLAS

Tabla 1. Normatividad para la caracterización de biosólidos, según niveles máximos permisibles

determinados mediante análisis microbiológicos ......................................................................... 35

Tabla 2.Características relevantes de microorganismos indicadores de contaminación fecales. . 39

Tabla 3. Datos máximos permisibles de categorización de biosólidos para su uso. ..................... 41

Tabla 4. Relación del número de muestras estudiadas y su ubicación. ........................................ 46

Tabla 5. Parámetros de caracterización microbiológica de lodos. ................................................ 51

Tabla 6. Recuento de los parametros microbiologicos y cumplimiento según el Decreto 1287/14.

....................................................................................................................................................... 57

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LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Caseta de secado de lodos. Fuente: (DAMA, 2010). .................................................... 25

Figura 2. Estructura del sumidero en rampa de lavado en estaciones de autos. Fuente: (DAMA,

2009) ............................................................................................................................................. 27

Figura 3. Estructuras para la separación de aguas de escorrentía. Fuente: (DAMA, 2009). ........ 28

Figura 4. Trampa de sedimentos. Fuente: (Rodriguez C. , 2014) ................................................. 29

Figura 5. Trampa de grasas. Fuente: (Bonilla & Buitrago , 2012) ............................................... 30

Figura 6. (a) Caja de Aforo; (b) Caja de aforo con zona seca. Fuente (Bonilla & Buitrago , 2012)

....................................................................................................................................................... 31

Figura 7. Normas establecidas para el funcionamiento de las estaciones de servicio. Fuente:

(Bonilla & Buitrago , 2012). ......................................................................................................... 34

Figura 8. Ubicación geográfica de los tres sitios de muestreo. Tomado: Google Maps ............... 47

Figura 9. Presencia de colonias de Salmonella sp. En dos medios selectivos al lado izquierdo el

medio XLD y al lado derecho SS. Fuente: Autor. ........................................................................ 60

Figura 10. Presencia de Salmonella sp. en lodos de lavaderos de autos. ...................................... 60

Figura 11. Crecimiento microbiano de Coliformes fecales en Agar Chromocult en dilución 10-3.

Fuente: Autora .............................................................................................................................. 62

Figura 12. Coliformes fecales dilución 10-3 en lodos de lavaderos de autos. ............................... 63

Figura 13. Coliformes fecales dilucion 10-6 en lodos de lavaderos de autos. ............................... 64

Figura 14. Porcentaje de determinación del cumplimiento de los parámetros microbiológicos con

respecto al lodo 1 (Piedecuesta) para categoría A y categoría B. ............................................... 67

Figura 15. Porcentaje de determinación del cumplimiento de los parámetros microbiológicos con

respecto al lodo 2 (Floridablanca) para categoría A y categoría B. ............................................ 68

Figura 16. Porcentaje de determinación del cumplimiento de los parámetros microbiológicos con

respecto al lodo 3 (Girón) para categoría A y categoría B. ........................................................ 69

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GLOSARIO

Aguas residuales: agua que contiene material disuelto y en suspensión, luego de ser usada por

una comunidad o industria.

Aprovechamiento: todo proceso industrial cuyo objeto sea la recuperación o transformación de

los recursos contenidos en los residuos.

Biosólidos: producto resultante de la estabilización de la fracción orgánica de los lodos generados

en el tratamiento de aguas residuales municipales, con características físicas, químicas y

microbiológicas que permiten su uso.

Lodos: suspensión de un sólido en un líquido proveniente del tratamiento de aguas residuales

municipales.

Escherichia coli: bacilo aerobio Gram Negativo no esporulado que se caracteriza por tener

enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

microbiológico preciso de contaminación fecal en el agua para consumo humano.

Contaminación: se considera que un tipo de contaminación es la emisión de gases contaminantes

que encontramos en el aire o suelo producto de las actividades generadas en la industria

ocasionando impactos negativos en la salud y en el medio ambiente.

Decreto 1287 de 2014: por el cual se establecen criterios para el uso de los biosólidos generados

en plantas de tratamiento de aguas residuales municipales.

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Colífagos: son bacteriófagos que infectan y se replican en bacterias coliformes y parecen estar

presentes donde se encuentran coliformes totales y fecales. Las relaciones entre colífagos y

bacterias coliformes en agua dulce generalmente muestran que estos se pueden usar para indicar

calidad sanitaria del agua.

Huevos de Helmintos: constituyen la etapa contagiosa de los parásitos de helmintos; estos son

excretados en las heces y se extienden a las aguas residuales, en el suelo o en los alimentos. Los

helmintos o gusanos pertenecen al subreino de los metazoarios, lo que denota que son animales

multicelulares, en los cuales las células se hayan diferenciadas formando órganos con funciones

especiales, y además divididos en dos ramas, los platelmintos (gusanos planos) y los

Nematelmintos (gusanos redondos).

Lavadero de vehículos (SDA 2010): la actividad de servicio automotriz comprende varios

subsectores, de las cuales el servicio de lavado de vehículos se encuentra inmersa dentro de las

actividades de mantenimiento vehicular, perteneciente a actividades de lavado e ilustrado de

vehículos automotores y de establecimientos de servicio, lavado, engrase y cambio de aceite.

Muestra: cantidad determinada de una sustancia o un fragmento de un objeto que se utiliza para

investigar o exponer la naturaleza y las propiedades de la sustancia o el objeto del que esa muestra

proviene.

Sólidos: existen varios tipos de sólidos, entre ellos los sólidos suspendidos, volátiles, fijos totales,

totales, sedimentables, entre otros los cuales determinan la cantidad de materia sólida que contiene

un residuo.

Tóxico: es toda sustancia química que, administrada a un organismo vivo, tiene efectos nocivos.

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RESUMEN

TITULO: Caracterización microbiológica de lodos provenientes de tres estaciones de lavaderos

de autos de los municipios de Piedecuesta, Floridablanca y Girón del departamento de Santander.

AUTOR: Doris Johanna Lopera Murillo

PALABRAS CLAVES: Coliformes fecales, lavaderos de automóviles, lodos, Huevos de

Helmintos, Salmonella sp.

DESCRIPCION:

Los lodos generados en las estaciones de lavados de autos han sido catalogados como residuos

peligrosos debido a su alto contenido de lubricantes e hidrocarburos; sin embargo, se desconoce

la composición y calidad microbiológica de este tipo de residuos. El presente estudio plantea la

caracterización microbiológica de los lodos provenientes tres estaciones de lavaderos de autos de

los municipios de Piedecuesta, Floridablanca y Girón del departamento de Santander. El objetivo

de este proyecto es identificar la carga microbiana: Coliformes fecales, Salmonella sp., huevos de

helmintos y virus entéricos, en lodos generados en los lavaderos de autos de Piedecuesta,

Floridablanca y Girón. Para la realización de esta investigación se aplicaron cuatro metodologías.

Para Salmonella sp.se siguió el Método Horizontal de la NTC 4574, para la detección de

Coliformes se siguió el Método Horizontal de la NTC 4458/07; para la detección de fagos se

siguieron los lineamientos del Standard Methods del 2018 y finalmente para los huevos de

helmintos se siguió la Norma Oficial Mexicana NOM-004- ECOL2000; luego de los análisis se

detectó que el 40,74% de las muestras cumplen con los parámetros establecidos por el Decreto

1287 del 2014 ya que se clasificaron en categoría A lo contrario sucedió con el 59,25% de las

muestras restantes, las cuales se clasificaron en la categoría B.

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ABSTRACT

TITLE: Microbiological characterization of sludge from car wash stations in the municipalities

of Piedecuesta, Floridablanca and Girón, department of Santander.

AUTHOR: Doris Johanna Lopera Murillo

KEY WORDS: Fecal coliforms, car washes, sludge, Helminth eggs, Salmonella sp.

DESCRIPTION:

The sludge generated in car wash stations has been classified as hazardous waste due to its high

content of lubricants and hydrocarbons; However, the composition and microbiological quality of

this type of waste is unknown. The present study proposes the microbiological characterization of

sludge from three car wash stations in the municipalities of Piedecuesta, Floridablanca and Girón

in the department of Santander. The objective of this project is to identify the microbial load: Fecal

coliforms, Salmonella sp., Helminth eggs and enteric viruses, in sludge generated in the car washes

of Piedecuesta, Floridablanca and Girón. Four methodologies were applied to carry out this

research. For Salmonella sp. The Horizontal Method of NTC 4574 was followed, for the detection

of Coliforms the Horizontal Method of NTC 4458/07 was followed; for the detection of phages

the guidelines of the Standard Methods of 2018 were followed and finally for the helminth eggs,

the Official Mexican Norm NOM-004-ECOL2000 was followed; After the analysis, it was

detected that 40.74% of the samples comply with the parameters established by Decree 1287 of

2014, since they were classified in category A. The opposite happened with 59.25% of the

remaining samples, which were classified in category B.

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CAPITULO 1

1. INTRODUCCIÓN

El creciente desarrollo de las estaciones de lavados de autos en el área metropolitana de

Bucaramanga ha llevado a incrementar la producción lodos o biosólidos que son residuos

peligrosos, se caracterizan por ser un material de desecho que incluye gran cantidad de elementos

de tipo orgánico en estado sólido o líquido, así como macronutrientes y micronutrientes. Los lodos

también contienen organismos patógenos como Coliformes fecales, Salmonella sp., huevos de

parásitos y virus causantes de diversas enfermedades en humanos (Flores, 2018). Estos lodos

generados son vertidos en los cuerpos de agua convirtiéndolos en una amenaza para el agua y el

medio ambiente porque no se le está dando un tratamiento adecuado.

Los lodos tienen múltiples usos debido a su potencial biológico, químico y físico. En el sector

agrícola permite mejorar las características físicas del suelo, brindando condiciones favorables

para el crecimiento de cultivos al generar un aumento en la tolerancia de factores intrínsecos y

extrínsecos. Además, se usan como generadores de energía mediante el proceso de incineración,

compostaje y materiales de ferretería como la elaboración de ladrillos.

El presente trabajo de grado busca caracterizar microbiológicamente los lodos provenientes de las

estaciones de lavados de vehículos, para así poder categorizar el tipo de lodo de acuerdo a la

normatividad actual y de esta manera determinar su aprovechamiento viable ya sea ambiental o

económico, teniendo en cuenta que la gran mayoría de estos lodos están siendo vertidos a las

fuentes hídricas sin brindarles un tratamiento adecuado tal como lo exige la Corporación

Autónoma Regional para la defensa de la meseta de Bucaramanga (CDMB).

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CAPITULO 2

2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo General

Caracterizar microbiológicamente los lodos de tres estaciones de lavaderos de autos del área

metropolitana de Santander.

2.2 Objetivos específicos

Cuantificar la carga microbiana de Coliformes fecales, Salmonella sp., huevos de

helmintos y fagos somáticos en las muestras de lodos provenientes de estaciones de

lavaderos de autos en los municipios de Piedecuesta, Floridablanca y Girón del

departamento de Santander.

Determinar el cumplimiento de los criterios microbiológicos establecidos en el Decreto

1287 del 2014 del estudio de los lodos resultantes de los lavaderos de autos de los tres

municipios.

Categorizar microbiológicamente el tipo de lodo de acuerdo al Decreto 1287 de 2014 para

su posterior aprovechamiento.

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CAPITULO 3

3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las estaciones de lavados de autos, en sus actividades cotidianas como son lavado de tapicería,

carrocería, chasis, motor, aspirado y secado usan productos de tipo químico y físicos como

detergentes, desengrasantes, ceras, siliconas; elementos como toallas y agua potable que al ser

utilizados y mezclados para el desarrollo de estas tareas generan residuos llamados lodos los cuales

contienen materiales o sustancias como son envases de plástico o vidrio, hidrocarburos y toallas

sucias; además, de microorganismos patógenos, concentración de metales pesados y sustancias

tóxicas, entre otros; que contaminan las fuentes hídricas al no recibir un adecuado tratamiento.

(Ardila, Cordoba, & Ramos, 2015)

En Colombia existe una normatividad que rige sobre el tratamiento y disposición de los lodos que

se generan en las estaciones de lavados de autos, pero un problema que se evidencia en el país es

la falta de interés por parte de las autoridades y al poco control de las corporaciones ambientales

(Espitia Antonio, 2017) al no exigir a las empresas que cumplan con los requerimientos

establecidos en el Decreto 1076/2015 del Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible donde

se establecen los permisos de vertimientos para quienes desarrollen actividades industriales,

comerciales o de servicios que durante su ejecución generen aguas residuales que puedan ser

vertidas sobre cuerpos de agua superficiales o al alcantarillado público (Decreto 1076 , 2015),

generando una problemática ambiental debido a que se incrementan los vectores de contaminación,

malos olores, muerte de fauna y flora, afectación de las propiedades físicas del suelo, además la

contaminación de agua y problemas de salud pública.

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CAPITULO 4

4. JUSTIFICACION

En la industria de lavados de autos se está generando una inadecuada disposición final de los lodos,

debido a la crisis económica y a los inadecuados tratamientos para el aprovechamiento de estos,

los cuales presentan residuos de aceites y lubricantes que ocasionan contaminación del aire, del

suelo, del agua y enfermedades en la salud humana debido a sus efectos cancerígenos, tóxicos y

venenosos por la acción de microorganismos patógenos como virus entéricos, Salmonella sp., entre

otros.De acuerdo con lo anterior, se consideran sustancias de difícil biodegradación clasificándose

como residuos peligrosos. (Saez & Urdaneta, 2014)

El tratamiento de lodos está destinado a mejorar las características físicas de deshidratación,

eliminar las bacterias que causan enfermedades, reducir el olor y disminuir la cantidad de sólidos

orgánicos. En Colombia el Decreto 1287 de 2014 del Ministerio de Ambiente, se estipula que

cuando los lodos cumplen con los parámetros microbiológicos y fisicoquímicos se pueden emplear

en la agricultura o como insumo para elaboración de abono o acondicionador del suelo, ya que

mejora las características del terreno (textura y capacidad de absorción de agua) y provee nutrientes

esenciales para el crecimiento vegetal, como el nitrógeno y el fósforo, así como algunos

micronutrientes esenciales, tales como el níquel, el zinc y el cobre, además de otros usos

industriales. (Giraldo & Lozano, 2012)

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Por lo anterior surge la necesidad de realizar un estudio que pretende identificar las características

microbiológicas de los lodos generados en esta industria de lavado de automotores y dar a conocer

el estado de las mismas y así encontrar alternativas de aprovechamiento mitigando el impacto

ambiental. De este estudio también se pretende conocer los tipos de microorganismos de interés

industrial que se disponen en este ecosistema y la posibilidad de encontrar microorganismos con

potencial con potencial para ser utilizados en diferentes procesos de biorremediación.

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CAPITULO 5

5. HIPOTESIS

5.1 Hipótesis Nula

Las características microbiológicas de los lodos provenientes de tres estaciones de lavaderos de

autos no cumplirán los parámetros para clasificarlos en las categorías A o B.

5.2 Hipótesis Alternativa

Las características microbiológicas de los lodos provenientes de tres estaciones de lavaderos de

autos cumplirán los parámetros para clasificarlos en las categorías A o B.

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CAPITULO 6

6. MARCO TEORICO

6.1 Industria de lavado de automotores

Las estaciones de lavados de autos tienen como finalidad la prestación de un servicio de limpieza

ya sea en el interior o exterior de los vehículos. Estos establecimientos gastan un aproximado de

agua que fluctúa entre 75 litros a 250 litros en un lavado sencillo y en el método de lavado llamado

túnel se genera un mayor gasto de agua. Cotidianamente, las estaciones de lavado son unos de los

establecimientos en donde se realiza el mayor gasto de este recurso natural dado que no se

considera eficiente la acción de reciclar; este gasto es proporcional al trabajo que se efectué

diariamente (MinAqua, 2016).

Las estaciones de lavado de autos ofrece diferentes procesos para el embellecimiento de los

vehículos, estos servicios se dividen en dos tipos:

6.1.1 Servicios húmedos

Lavado exterior y enjuague: primero se enjuaga el automóvil con el agua proveniente

acueducto, aljibes o pozos en algunos casos mediante un compresor y una manguera. Se

emplean elementos como trapos, toallas y detergentes para la limpieza.

Lavado inferior: se requiere el uso de equipos como elevadores hidráulicos o cárcamos y

el uso como el champú, desengrasantes y cepillos.

Lavado de motor: en esta actividad se genera una mezcla de aceite combustible

(ACPM/diésel), gasolina y jabón o desengrasantes biodegradables.

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Lavado de tapicería: se realiza una limpieza general del vehículo y además se limpian los

tapetes internos y cojineria en este proceso se da el uso de elementos como el agua jabón,

cepillos y la aspiradora. (Carwash, 2018)

6.1.2 Servicios secos

Consisten en retirar la humedad para evitar manchas y daños en la pintura del vehículo. Dentro de

estos servicios encontramos el secado del automotor el cual se realiza de manera manual utilizando

toallas o bayetillas, seguidamente el aspirado donde se emplea una máquina que cumple la función

de extracción de polvo y residuos que se encuentran en el interior del vehículo. El polichado es

una técnica que consiste en la remoción de partículas de polvo que se encuentran adheridas a la

parte exterior del vehículo y donde se emplea un producto llamado cera y por ultimo encontramos

el proceso de grafitado y petrolizado donde se genera la aplicación de una capa de grasa en la parte

inferior del vehículo con el fin de recubrir sus partes internas, así como protegerlas de la corrosión

y de las partículas de polvo que se pueden adherir (Carwash, 2018).

En Colombia este tipo de empresas deben cumplir con reglamentos como: estar inscritos ante la

Cámara de Comercio, tener la Certificación de Vertimientos expedido en la secretaria de Ambiente

y tener una certificación generada por la Empresa de Acueducto y Alcantarillado; para de esta

manera poder elaborar los espacios idóneos donde quedaran suspendidos los residuos generados

por el servicio como son las trampas de grasa, cárcamo con codos invertidos y separación de redes

internas (Moreno & Vesga, 2010).

La estaciones de lavado de autos ofrece diferentes procesos para el embellecimiento de los

vehículos como el lavado de tapiceria que incluye herramientas manuales, el lavado externo

(carrocería, chasis y motor) en donde se da el uso de equipos como motobombas, mangueras y

compresores, el aspirado y secado; por lo cual existe una entrada y salidas de productos utilizados

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para lograr una efectividad en el trabajo y por ende se generan diversos residuos solidos

compuestos (MinAqua, 2016)principalmente de trapos usados, envases de plastico, carton o vidrio,

esponjillas que una vez utilizados y al tener contacto con derivados del petróleo como gasolina,

aceite automotriz, limpiadores, líquidos refrigerantes, líquidos de frenos, anticongelantes,

disolvente de limpieza de piezas, diesel, gasolina, desengrasantes, aceites, grasas lubricantes,

champú, siliconas o ceras entre otros, se convierten en residuos contaminantes que quedan

suspendidos en las aguas residuales. (Tavera Garcia, 2015).

6.2 Impacto ambiental de lodos

Las actividades que se desarrollan en las diferentes industrias afectan los recursos naturales tales

como el aire, el suelo y el agua debido a la contaminación que se genera. Actualmente la creciente

demanda de venta de vehículos ha permitido que la industria automotriz se amplié; en este caso

día a día aumentan las empresas de estaciones de lavados de autos en el país y en donde el recurso

más importante para efectuar las tareas diarias de esta empresa es el agua. (Cabrera & Pinzon ,

2012). Es así como diariamente se generan miles de metros cúbicos de agua contaminadas por

algunos derivados del petróleo. El vertimiento directo de estos lodos residuales los cuales poseen

características microbiológicas y parasitológicas representan un riesgo para la salud pública, pues

estas aguas están compuestas por bacterias, virus, helmintos, protozoarios y metales pesados, entre

otros, que deben ser tratados apropiadamente antes de ser depositados en los cuerpos superficiales

de ríos, lagos o mares ya que ocasionan un gran impacto ambiental porque pueden producir un

proceso llamado eutrofización, el cual existe cuando hay un aporte excesivo de nutrientes a un

ecosistema debido a las sustancias químicas contenidas en estos, teniendo efectos negativos sobre

las especies acuáticas y por ende afectando la calidad del agua al generar olores desagradables que

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atraen vectores causantes de enfermedades que son transmitidas a los seres humanos ( Abella G &

Martínez C, 2012).

El 47% de las aguas residuales generadas en Bucaramanga y el área metropolitana están siendo

depositadas en los ríos Oro y Frio. En el municipio de Girón la totalidad de los fluidos que se

producen son vertidos en las quebradas y ríos sin recibir ningún proceso de descontaminación; por

otra parte en los Municipios de Floridablanca y Piedecuesta el 100% de estas aguas son conducidas

a las plantas de Tratamiento de Rio Frio (Anillo Vial) y el Santuario (Valle de Guatiguará); lo que

indica que se está generando una gran contaminación en los cuerpos de aguas por el vertimiento

de estas sin un previo tratamiento. (Moreno & Patiño, 2012)

En cuanto al suelo, estos lodos que no son tratados causan un daño ambiental ya que dentro de las

sustancias que contienen se encuentran los hidrocarburos los cuales evitan el intercambio gaseoso

con la atmosfera generando una serie de procesos fisicoquímicos como son la evaporación o

penetración que pueden realizarse de manera lenta o rápida variando de acuerdo al tipo de

hidrocarburo, temperatura, humedad y textura del suelo por lo tanto al ser vertidos al suelo

producen sustancias toxicas que tienden a acumularse y forman una capa hidrofóbica que causa la

reducción, inhibición de la cobertura vegetal y la modificación de las poblaciones microbianas

benéficas del suelo (Velasquez Arias, 2017).

La contaminación del agua residual debe ser tratada usando metodologías adecuados o conocidas

como neutralización, filtración, precipitación, evaporación, oxidación, etc., y estas pueden ser

evacuadas a la alcantarilla, una vez que se cumplan con los valores límites establecidos por las

reglamentaciones respectivas, mientras que el lodo generado y que no pueda ser revalorizado tiene

que ser dispuesto finalmente de manera ambientalmente adecuada y segura. (Leon , 2013)

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6.3 Tratamiento de lodos de la industria de lavado de automotores

Las estaciones de lavados de vehículos deben contar con un sistema de tratamiento que permita el

secado y manejo de los lodos producidos por actividades que esos desarrollan. En la Figura 1 Se

observa el esquema de una caseta de secados de lodos, se encuentra diseñada para lograr el drenaje

y el secado de los lodos producidos en las aguas residuales de tipo industrial y así facilitar el

manejo de estos.

Figura 1. Caseta de secado de lodos. Fuente: (DAMA, 2010).

Estas casetas se caracterizan por que la estructura del piso tiene una pendiente de 5% la cual

permite que el agua que está contenida en los lodos sea dirigida hacia los filtros además se

encuentra compuesta por una rejilla que está cubierta por geotextil en ella se depositan los lodos

los cuales son conducidos hacia las trampas de grasa que tienen las estaciones.

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La caseta se encuentra cubierta por una teja transparente que permite el paso de la luz y ayuda a

efectuar el secado de los lodos de una manera más rápida. Estos lodos se deben remover

continuamente para así generar la biodegradación de las trazas de aceite que estos puedan contener.

Para la extracción de los lodos se puede dar uso a las palas convencionales donde se empacaran en

bolsas para que las empresas encargadas efectúen la recolección de estos. Esta extracción debe

realizarse frecuentemente con el fin de evitar la colmatación del sistema.

Existen lugares donde no hay red de alcantarillado público como es el caso de las estaciones

ubicadas en zonas rurales; por esto es necesario que tengan sistemas de tratamiento para obtener

un vertimiento apto a las condiciones del cuerpo receptor y además cumpliendo con los

requerimientos expuestos en la legislación vigente (Decreto 3930/2010), de igual manera se

requiere un frecuente mantenimiento el cual varía de acuerdo al sistema que se efectué; dentro de

los sistemas de mantenimiento más usados encontramos: tanques sépticos, campos de infiltración,

pozos de absorción y filtros en grava. (Uribe Botero, 2010)

6.4 Manejo de Aguas Residuales

Para la recolección de las aguas residuales las rampas de lavado deben estar rodeadas por un

sumidero figura 2, actuando a su vez como desarenadores de solidos gruesos; estas aguas son

conducidas hasta las trampas de sedimento y luego son transportadas a las trampas de grasas. La

estructura física de los sumideros debe ser amplia esto con el fin de que se realice un adecuado

mantenimiento, internamente debe tener un pañete impermeable o en su caso debe estar hecha en

concreto impermeable.

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Figura 2. Estructura del sumidero en rampa de lavado en estaciones de autos. Fuente: (DAMA,

2009)

El agua lluvia que cae en las estaciones de servicio son recolectadas directamente en las cunetas;

estas no tienen contacto con hidrocarburos; no obstante el agua que cae sobre la superficie de la

estación entra en contacto con hidrocarburos y la convierte en un agua residual industrial.

Igualmente ocurre con el agua que cae sobre las áreas de distribución de combustible, llenados de

tanques entre otras las cuales al caer se mezclan con los hidrocarburos; estas aguas deben separarse

del agua de escorrentía que no haya tenido contacto con estas sustancias para luego ser transportada

a los sistemas de tratamiento por medio de estructuras figura 3 como: divisoria de agua, diques,

canales, rejillas o sardineles.

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Figura 3. Estructuras para la separación de aguas de escorrentía. Fuente: (DAMA, 2009).

6.4.1 Sistemas de tratamiento por gravedad

El tratamiento de las aguas industriales generadas en las estaciones de lavados de autos tiene como

finalidad reducir las concentraciones de sólidos, grasas para posteriormente ser vertidas a las

fuentes hídricas. Es importante destacar que el diseño de estos sistemas no contempla la retención,

ni la eliminación de los tensoactivos producidos durante el lavado de vehículos. A continuación se

presentan las diferentes estructuras para efectuar dicho tratamiento:

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6.4.2 Trampa de sedimentos

La trampa de sedimentos (figura 4) tiene como función la retención de los sólidos en suspensión

y los sedimentales presentes en el agua de lavado de automotores; dentro de su interior se construye

una pantalla donde se efectúa este proceso, esta trampa se construye en concreto o mampostería

con doble hilada de tolete con aditivos que garantice su impermeabilidad o también pueden ser

prefabricadas en polipropileno. (Rodriguez C. , 2014)

Figura 4. Trampa de sedimentos. Fuente: (Rodriguez C. , 2014)

6.4.3 Trampa de grasas

La trampa de grasas se caracteriza por tener una estructura rectangular de funcionamiento

mecánico para flotación. Su funcionamiento se cimenta en el método de separación gravitacional,

el cual aprovecha la baja velocidad del agua y la diferencia de densidades entre el agua y los

hidrocarburos para realizar la separación, además efectúa en menor grado retenciones de sólidos.

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Esta trampa está compuesta por tres partes las cuales están divididas por pantallas de concreto o

mampostería (figura 5) las cuales cumple diferentes funciones: la primera pantalla retiene el flujo,

obligándolo a pasar por la parte baja, la segunda permite el transporte del flujo como vertedero y

en la tercera y última pantalla se lleva a cabo la mayor acumulación de los elementos flotantes

como grasas y aceites los cuales llegan al desnatador el cual se encuentra en esta misma sección.

En la primera y segunda sección se realiza la mayor retención de sólidos y en poca cantidad, la

retención de grasas y aceites debido a la turbulencia que se presenta en el agua. Las trampas de

grasas son elaboradas en material de concreto impermeable o polipropileno. (Bonilla & Buitrago

, 2012)

Figura 5. Trampa de grasas. Fuente: (Bonilla & Buitrago , 2012)

6.4.4 Caja de aforo

Es el sitio donde se debe desarrollar la caracterización del vertimiento y la medición de los

caudales, está se deberá construir al final del sistema de tratamiento antes de ser dispuestas al

alcantarillado público de agua lluvia o al alcantarillado combinado o cuerpo de agua. Para eliminar

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la caída y retención del agua, dentro de la caja de aforo (figura 6) se debe ubicar una tubería de

entrada en una posición más alta a la tubería de salida, esta se debe situar en el fondo de la caja.

(Bonilla & Buitrago , 2012)

Figura 6. (a) Caja de Aforo; (b) Caja de aforo con zona seca. Fuente (Bonilla & Buitrago , 2012)

6.5 Composición de los lodos

Los lodos poseen diversas características que pueden cambiar de acuerdo a su origen, edad, el tipo

de proceso de donde son generados, además el volumen de lodos que se produce se debe conocer

o estimar para poder cuantificar los diferentes componentes del sistema de tratamiento y como se

debe disponer los lodos; este volumen puede variar dependiendo del agua residual, del grado de

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tratamiento que se realice, del tiempo de sedimentación, del contenido de humedad entre otros

(Vigueras & Rivera, 2015).

Estos residuos generados en las estaciones de lavados de autos están compuestos principalmente

por solidos de trapos usados, envases de plástico, cartón o vidrio, esponjillas, además contienen

desde un 93% a un 99% de agua; estos son contaminados con sustancias derivadas del petróleo

como gasolina y otras como aceite automotriz, limpiadores, líquidos refrigerantes, anticongelantes,

detergentes o desengrasantes. Así mismo contienen metales vitales para los organismos vivos

como el zinc, cobre, plomo, mercurio, metales pesados y vitaminas como el cobalto; los cuales

comienzan a ser tóxicos a medida de que su concentración aumenta; los nutrientes más relevantes

presentes en los lodos encontramos el nitrógeno (N) en su cuatro formas y el fosforo (P).

(MinAqua, 2016)

Existen tres clases de microorganismos presentes en este tipo de lodos como bacterias, virus,

parásitos y protozoos los cuales son en algunas ocasiones pueden transmitir enfermedades; dentro

de las más relevantes está la fiebre tifoidea, hepatitis, infecciones respiratorias, gastroenteritis y

toxoplasmosis. Existen otros microrganismos que contribuyen a la degradación de la materia

orgánica dispuesta en estos lodos; por esto, estas aguas residuales de origen industrial deben recibir

un tratamiento idóneo con el fin de evitar una contaminación ambiental al ser suspendidos en los

cuerpos de agua (Vigueras & Rivera, 2015).

6.6 Normatividad y Categorización

Desde la ley 99 creada en el año 1993 fueron definidos los principios de la gestión ambiental por

medio de la creación del ministerio del medio ambiente y del sistema nacional ambiental SINA

en todo el territorio nacional, además se creó la licencia ambiental como una herramienta para la

gestión y planificación y para que desde la etapa inicial de una actividad se logre prevenir, mitigar,

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corregir y manejar los efectos ambientales. (Pumarejo & Elias, 1993). En el año 1994 se

reglamentó la licencia ambiental en el decreto 1753; este Decreto fue sustituido por el Decreto

1728 del 2002 en donde se encuentra definiendo el alcance de los estudios y la competencia de las

diversas entidades del estado con respecto a las autorizaciones y permisos a expedir de acuerdo al

proyecto, obra o actividad en operación y abandono de estaciones de servicio es compromiso de

las Corporaciones Autónomas regionales. De igual manera estos decretos ya mencionados también

establecen la necesidad de obtener permisos para el uso, aprovechamiento o afectación de los

recursos naturales que el proyecto, obra o actividad requiera para su ejecución (Ambiente, 1994).

El gobierno nacional mediante el decreto 2150 de 1995 simplifica el tramite ambiental de los

proyectos al establecer que la licencia debe incluir los permisos requeridos para el uso y

aprovechamiento de los recursos por toda la vida útil del proyecto; este decreto fue reglamentado

mediante la resolución 655/96 por medio del Ministerio del Medio Ambiente, el cual establece que

no se podrá usar, aprovechar o afectar un recurso natural que no se encuentre establecido en la

licencia ambiental. (Martinez, 1995)

Como complemento de la normatividad, es importante destacar que los Decretos 283/90, 353/84,

1677/92 y 1521/98 expedidos por el Ministerio de Minas y Energía reglamentan el

almacenamiento, transporte y distribución de combustibles líquidos derivados del petróleo, donde

se clasifican los tipos de distribuidores y los tipos de estaciones de servicio. Igualmente se

establecen las especificaciones técnicas y operativas de las Estaciones de Servicio. (Castro, 1994).

En la figura 7 se resumen las principales normas ambientales aplicables para las estaciones de

servicio a nivel nacional. (Mena, 1990)

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Figura 7. Normas establecidas para el funcionamiento de las estaciones de servicio. Fuente:

(Bonilla & Buitrago , 2012).

De acuerdo al artículo 3 del Decreto 1287 del 10 de julio del 2014 creado por el Ministerio de

Vivienda, ciudad y Territorio los lodos se consideran como el producto resultante de la

estabilización de la fracción orgánica de los lodos generados en el tratamiento de aguas residuales

municipales, con características físicas, químicas y microbiológicas que permiten su uso. No son

lodos las escorias y cenizas producto de la oxidación o reducción térmica de lodos, así como los

residuos que se retiran de los equipos e instalaciones de la fase preliminar del tratamiento de aguas

residuales, ni los provenientes de dragados o de limpieza de sumideros (Colombia, 2014).

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Según Cristancho (2015), diversos países han elaborado e implementado normas donde se

establecen los parámetros microbiológicos y químicos de los biosólidos generados en las plantas

de agua residual, tal como se expresa en la tabla 1:

Tabla 1. Normatividad para la caracterización de biosólidos, según niveles máximos permisibles

determinados mediante análisis microbiológicos

País Normatividad Coliformes

Fecales

Salmonella

sp.

Huevos de

Helmintos

Virus

Jordania Jordanian standard

No. (1145/1996)

+ Clase A: 4

NMP/4g

Clase A: 1

HH/4g

Clase A:

1UFP/4g

Hungría 8/2001. (I. 26).

Decreto del

ministerio de

Agricultura

<10 UFC/g 2x10 g/mL

Negativo

Negativo/g +

Argentina Resolución N°

97/01(22/11/2001)

Clase A: <1x103

UFC/g

Clase B: <2x106

UFC/g

Clase A: <3/4 + +

México NOM-004-2002 Clase A: <1x103

UFC/NMP/4g

Clase B: <1x103

UFC/NMP/4g

Clase C: <1x103

UFC/NMP/4g

Clase A: <3

NMP/4g

Clase B: <3

NMP/4g

Clase C:

<300

NMP/4g

Clase A: <1

HH/4g

Clase B:

<10 HH/4g

Clase C:

<35 HH/4g

+

Estados

Unidos

Norma 40 CFR

Parte 503 (EPA,

2003)

Clase A: <1x103

NMP/g

Clase B: <2x106

NMP/g

Clase A: <3

NMP/g

Clase A:

<1/4 HH/g

Clase A:

<1/4

UFC/g

Brasil Resolución N° 375

de 29 de

agosto/2006

Clase A: <1x103

UFC/g

Clase B: <2x106

UFC/g

Ausencia/10g Clase A:

<1/4 HH/4g

Clase B:

<2x106

HH/4g

Clase A:

<1/4

UFC/g

Chile Decreto supremo

N° 123

(30/08/2006)

Clase A: <1x103

UFC/g

Clase A: <3/4 Clase A:

<10 HH/4g

+

Colombia Decreto 1287 del

10/07/2014

Clase A: <1,00

E(+3) UFC/4g

ST

Clase A:

Ausencia

Clase A:

<1,0 HH/4g

ST

Clase A:

<1,0

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36

Clase B: <2,00

E (+6) UFC/4g

ST

Clase B: 1,00

E(+3)

Clase B:

<10,0

HH/4g ST

UFP/4g

ST

Clase B:

+

Nueva

Zelanda

Regulado por la

Ley de gestión de

recursos (RMA,

1991) y la ley de la

Salud (1956)

Clase A: <100

NMP/4g

Clase A:

<1/25/4g

Clase A: <1

HH/4g

Clase A:

<1

UFP/4g

Sur África Basado en la EPA

parte 503 (US

EPA, 1993)

Clase A: <100

UFC/g

Clase B: <1x106

UFC//g

Clase C: >1x107

UFC/g

+

Clase A: 1

UFC/g

Clase B: 4

UFC/g

Clase C: >4

UFC/g

+

.+: No tiene establecido este parámetro. UFC: Unidades Formadoras de Colonia. NMP: Numero

Más Probable. g: Gramos. HH: Huevos de Helminto. UFP: Unidades Formadoras de Placa. ST:

Solidos Totales. EPA: Environmental Proteccion Agency.Fuente: (Cristancho, 2015).

6.7 Parámetros fisicoquímicos en biosólidos

Al momento de establecer la calidad del agua es indispensable tener en cuenta las variables

fisicoquímicas con el objetivo de determinar si los parámetros evaluados están dentro de los rangos

permisibles.

6.7.1 Determinación de pH

El potencial de Hidrógeno puede explicarse como una medición que expresa el nivel de acidez o

basicidad de una sustancia en una escala que oscila entre 0 y 14. La acidez se ve reflejada cuando

la medición del pH está en un rango ≤ a 7 y cuando los valores van de 7 a 14 se dice que una

sustancia tiene un pH básico (Mapsa, 2007).

6.7.2 Determinación de Alcalinidad

La alcalinidad es la medición de una característica del agua y se puede analizar en términos de

sustancia específica solamente cuando se sabe la estructura química de la muestra. La alcalinidad

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de una sustancia se precisa por medio del volumen de un ácido necesario para la titulación de cierta

cantidad a un pH seleccionado (Mapsa, 2007).

6.7.3 Determinación de Acidez

La acidez de una muestra se puede definir por procedimientos volumétricos. Esta medición se lleva

a cabo por medio de una titulación. La acidez se produce por la disolución de Dióxido de Carbono

atmosférico (CO2) en la oxidación biológica que se presenta en la materia orgánica o en la

eliminación de aguas residuales industriales (Serna Rivera & Lopez Garcia, 2010).

6.7.4 Determinación de Humedad

El agua es casi que uno de los componentes esenciales presentes en todas las materias conocidas

ya sea de tipo orgánico o inorgánico. La determinación de la humedad generada en lodos se analiza

generando la evaporación del agua que está contenida en este tipo de muestras (America, 2010).

6.7.5 Determinación de cenizas

Las cenizas simbolizan el contenido en minerales de las muestras estas representan menos del 5%

de la materia seca de la muestra. Estas están compuestas de carbonatos generados por la materia

orgánica (Rojas, 2005).

6.7.6 Determinación de la Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5)

La oxidación microbiana o mineralización de la materia orgánica es una reacción principal que

acontece en los cuerpos naturales de agua formando la demanda de oxígeno, actuada por los

microorganismos heterotróficos. Esencialmente, la DBO es una medición de la cantidad de

oxigeno utilizado por los microorganismos en la estabilización de la materia orgánica

biodegradable, en condiciones aeróbicas, en un periodo de cinco días a 20 °C (Rojas, 2005).

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6.7.7 Determinación de la Demanda Química de Oxígeno (DQO)

La Demanda Química de Oxígeno (DQO) define la cantidad de oxígeno necesario para oxidar la

materia orgánica en una muestra de agua, por medio de condiciones particulares del agente

oxidante, la temperatura y el tiempo.

6.8 Microorganismos contaminantes en lodos

Los lodos al igual que las aguas residuales contienen microorganismos patógenos o benéficos

como bacterias, virus, protozoarios, parásitos, entre otros; cuando estas aguas residuales son

sometidas a un proceso de tratamiento el efluente final sale libre de patógenos sin embargo durante

el proceso de sedimentación primaria y secundaria los microorganismos se concentrarán en los

lodos.

Además, existen tres microorganismos de gran importancia catalogados como una amenaza para

la salud pública dentro de este grupo encontramos los siguientes:

Bacterias como Salmonella sp., Coliformes fecales y totales.

Virus: polio, hepatitis y rotavirus causantes de infecciones gastrointestinales.

Parásitos: huevos de cisticercos y nematodos.

6.8.1 Microorganismos indicadores de contaminación fecal

Ciertos organismos patógenos que están presentes en los lodos son evacuados por animales y seres

humanos infectados. Cada ser humano elimina diariamente un aproximado de 100 a 400 billones

de Coliformes fecales. (Mendez , Pacheco, & Elba, 2014). En la tabla 3 se describen algunos de

los organismos indicadores de contaminación fecal. Algunas de las características más relevantes

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de este grupo es que son capaces de fermentar lactosa generando dióxido de carbono (CO2) a una

temperatura de 44.5 °C en un tiempo de incubación de un día.

Tabla 2. Características relevantes de microorganismos indicadores de contaminación fecales.

Organismo

Indicador

Características

Coliformes totales Bacilos Gram negativos, fermentadores de lactosa y

producción de gas a 35°C de 24 a 48 h. Incluye los

géneros de Escherichia coli, Klebsiella,

Enterobacter y Citrobacter

Klebsiella sp. Coliformes totales, termotolerantes con crecimiento

a 35°C en 24h.

Coliformes

fecales

Producen gas a 44.5 °C en 24h. Incluye los géneros

de Escherichia coli (aprox 90%), Klebsiella y

Citrobacter.

Escherichia coli Es el coliforme más representativo del grupo fecal.

Bacteroides Organismos anaeróbicos indicadores específicos de

contaminación humana

Estreptococo fecal Utilizado para la determinación de contaminación

fecal reciente.

Clostridium

perfringens

Organismo esporulado presente anaeróbico

persistente.

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P. aeruginosa y

A. hydrophyla

Organismos presentes en aguas residuales

domesticas en concentraciones altas.

Fuente: (Figueroa Hernandez, 2011)

En el artículo 4 del Decreto 1287 del 2014 se establecen los criterios microbiológicos y las

variables que deben tenerse en cuenta para la categorización de los lodos. Del mismo modo en el

artículo 5 se establecen los valores máximos permisibles que se deben tener en cuenta para una

posterior categorización según la categoría a la que corresponda: Categoría A, B o C así como se

describe en la tabla 4. (Ministerio de Vivienda, 2014)

6.9 Categoría de lodos

6.9.1 Lodos categoría A

Lodo sin restricciones sanitarias para la aplicación a suelo. En este punto, la EPA es más específica,

al denominarlos biosólidos de calidad excepcional, que son aquellos que son poco contaminantes

y tienen reducción de patógenos Clase A y que han reducido el nivel de componentes degradables

que atraen vectores (organismos capaces de transportar y transmitir agentes infecciosos tales como

roedores, moscas y mosquitos).

6.9.2 Lodo categoría B

Lodo apto para la aplicación al suelo, con restricciones sanitarias de aplicación según tipo y

localización de los suelos o cultivos. La EPA los denomina como Biosólidos con concentración de

contaminantes y los define como aquellos Biosólidos que también logran los mismos bajos límites

de concentración de contaminantes de los de Clase A, pero solo logran una reducción de patógenos

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41

clase B y/o están sujetos a la administración en el sitio mismo, más que como una alternativa de

tratamiento para reducir vectores.

6.9.3 Lodo categoría C

Lodo que no cumple con algún(os) de los parámetros definidos para las categorías A ó B y que

son considerados como residuos peligrosos de acuerdo con la Normativa Ambiental vigente

(Ministerio de Vivienda, 2014).

Tabla 3. Datos máximos permisibles de categorización de biosólidos para su uso.

Criterio Variable Unidad de Medida Categoría de

Biosólidos (Valores

máximos

permisibles)

Categoría

A B

Microbiológico

Coliformes fecales Unidades

formadoras de

colonias (UFC)/ g de

biosólidos base seca

<1,00 E

(+3)

<2,00 E

(+6)

Huevos de

Helmintos

Huevos de

Helmintos viable 4g/

de biosólidos (base

seca)

<1,0 <10,0

Salmonella sp. Unidades

formadoras de

colonias (UFC)/ 25 g

de biosólidos base

seca

Ausencia <1,00 E

(+3)

Virus entéricos Unidades formador

as de placas UFP / 4

g de biosólido (base

seca)

<1,0 -

Fuente: Ministerio de Vivienda, Ciudad y Territorio Decreto 1287 del 2014 (Ministerio de

Vivienda, 2014).

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42

6.10 Alternativas de uso de lodos

Los lodos generados en las plantas de tratamiento residual se consideran agentes peligrosos debido

a que estos contienen grandes cantidades de contaminantes de origen químico, físico y biológico

generando enfermedades en humanos. Por consiguiente, mediante procesos como la neutralización

se busca lograr el aprovechamiento óptimo de estos. (Gomez Molina & Merchan Bermudez, 2016).

El uso de los biosólidos está regulado en el artículo 8 del decreto 1287 del 2014 en donde se

establece las posibles alternativas para la utilización de estos ya sea en suelos agrícolas forestales

y pastizales entre otros usos teniendo en cuenta la categoría en la que se encuentren posterior al

análisis microbiológico y fisicoquímico ya realizado.

Según el parágrafo 2, del artículo 5 del Decreto 1287 del 2014 señala: los biosólidos que no

cumplan con los valores máximos permisibles dispuestos para la clasificación según la categoría

A y B los cuales podrán emplearse en:

a) En la operación de rellenos sanitarios como cobertura diaria.

b) En la disposición conjunta con residuos sólidos municipales en rellenos sanitarios y de

manera independiente en sitios autorizados.

c) En procesos de valorización energética.

Los biosólidos que no se usen de acuerdo con lo aquí dispuesto, deberán disponerse o ser tratados

hasta cumplir con los valores establecidos en las categorías A y B para viabilizar su uso.

A continuación se describen las ventajas y desventajas de las diversas alternativas para el uso de

los lodos:

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43

6.10.1 Incineración

Ventajas

Los biosólidos son reducidos a cenizas in-situ debido a que la combustión elimina todos

los microorganismos presentes y oxida los compuestos orgánicos tóxicos.

Los metales pesados en las cenizas son menos solubles.

Un diseño adecuado puede hacer la incineración económicamente viable.

Pueden ser utilizados para producir energía, generando electricidad o produciendo vapor

(principio desecho a energía).

Desventajas

Económico: dado que es la alternativa más costosa de eliminación de lodos.

6.10.2 Compostaje

Ventajas

Obtención de un producto de alta calidad comercializable para su uso en agricultura.

Se pueden incluir en otros procesos, presentando inicialmente costos bajos para su proceso.

Desventajas

Requiere contenidos en sólidos entre el 40 y el 60% así como la incorporación de un agente

de textura.

Algunas veces necesita de un sistema de aireado a presión o bien de volteado mecánico y

debido a esto es posible que exista la dispersión de patógenos a través del polvo.

Precisa la incorporación de otro material como fuente de carbono.

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44

6.10.3 Producción de Ladrillo

Ventajas

Eliminación de metales pesados por medio del proceso de cocción.

Sirven para reforzar la estructura mecánica del ladrillo al quedar incorporados en éste.

Desventajas

Se anula la posibilidad de que exista lixiviación y posterior contaminación a causa de estos

metales.

Emisión de olores al secar los ladrillos.

Emisión de gases durante la cocción, ya sean gases inorgánicos u orgánicos volátiles.

6.10.4 Fertilizantes orgánicos

Ventajas

Mejoran las propiedades físicas de los suelos.

Se da la recirculación de los nutrientes del suelo en donde se aplicaron los lodos.

Recuperación de suelos degradados y erosionados.

Desventaja

La dosis a aplicar depende de las condiciones de Nitrógeno y Fósforo de la superficie

involucrada. Si se aplica en exceso, puede afectar el trabajo de los pesticidas y plaguicidas

en los suelos

6.10.5 Vermicomposteo

Ventajas

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45

Esta técnica implica el uso de lombrices para mejorar la calidad microbiológica de los lodos

ya que se logra una reducción cerca de patógenos en un 100%; convirtiéndolo en un

material inodoro y con un alto contenido de nutrientes.

Alimento de calidad para el desarrollo de las lombrices (Daguer, 2003)

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46

CAPITULO 7

7. METODOLOGIA

Se llevó a cabo una identificación microbiana de los lodos con el fin de dar cumplimiento a los

parámetros microbiológicos de categorización establecidos según la legislación colombiana,

aplicando los protocolos estandarizados por el ICONTEC, Norma Oficial Mexicana y el Standard

Methods. Se analizaron los lodos en el laboratorio de Correlación de la Universidad de Santander

y el Laboratorio SIAMA LTDA.

Tipo de investigación: Descriptiva y experimental; se relacionaron dos elementos como

características propias del entorno (Estaciones de servicio de lavaderos de carros), se seleccionaron

los sitios de muestreo para posterior análisis de variables en el laboratorio.

Para el desarrollo de esta investigación se estudiaron lodos provenientes de tres lavaderos de autos

tabla 5; esto con el fin de obtener muestras con diversas características físicas y microbiológicas.

Tabla 4. Relación del número de muestras estudiadas y su ubicación.

Muestra Sitio de muestreo Número de muestras

evaluadas

Lodo 1 Piedecuesta 9

Lodo 2 Floridablanca 9

Lodo 3 Girón 9

Total 27

Fuente: Autor

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47

Unidades experimentales: lodos procedentes de tres lavaderos de autos (1, 2 y 3) los cuales se

muestrearon durante 3 meses (mayo, junio y julio).

Muestras a analizar: el total de muestras analizadas fueron 27 y la unidad experimental consistió

en frascos schott de 500 mL.

7.1 Ubicación geográfica

Figura 8. Ubicación geográfica de los tres sitios de muestreo. Tomado: Google Maps

Los puntos de muestreo fueron seleccionados estratégicamente con el fin de abarcar tres zonas

distantes en el área metropolitana de Bucaramanga figura 8, teniendo en cuenta lo descrito por la

CDMB el municipio de Piedecuesta cuenta con 1 lavadero inscrito, Floridablanca con 2 y Girón

con 2 (CDMB, 2018). Por lo que nuestra muestra por municipio corresponde a 100% de

Piedecuesta, 50% de Floridablanca y 50% de Girón.

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48

Lavadero 1

Empresa que está formada con más de 10 años de experiencia y trayectoria en el mercado se

encuentra ubicada en el municipio de Piedecuesta Santander donde cuenta con aproximadamente

30 empleados especializados en prestar servicios de alta calidad en limpieza, alistamiento y

embellecimiento de autos; su área de trabajo consta de 200 metros. Normalmente, esta estación de

autos lava 70 vehículos al día generando una producción de 0,03 Toneladas de lodos al día,

encontrándose los siguientes tipos de automotores: furgón, furgoneta, carro familiar, con acoples,

entre otros; con una duración del servicio de más o menos 30 a 45 min o más por vehículo de

acuerdo al servicio requerido

Lavadero 2

Empresa conformada por un equipo de 7 profesionales capacitados para desarrollar las tareas

propias de este oficio como son el lavado y limpieza de autos; además ofrecen reparaciones

generales y superficiales de latonería y pintura. Esta estación de autos se encuentra en el municipio

de Floridablanca, Santander. Su área de trabajo está conformada por 80 metros por lo que el tipo

de vehículos que lavan son solo automóviles familiares oscilando entre 40 a 50 autos diarios

produciendo 0.0375 Toneladas de lodo al día.

Lavadero 3

Esta empresa se considera una pionera en brindar servicios de limpieza especializados para sus

clientes. Se encuentra ubicada en Girón, Santander al noreste de Bucaramanga; cuenta con 10

empleados capacitados para desarrollar la limpieza de vehículos grandes como furgones,

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49

autobuses, busetas de transporte público y automóviles. El número de vehículos lavados

diariamente fluctúa entre 30 a 40 este tipo de vehículos genera más lodo por ser vehículos más

grandes la producción de lodos es aproximadamente de 0,04 Toneladas de acuerdo al número de

vehículos que se lavan diariamente.

7.2 Identificación de los sitios de muestreo, toma y transporte de la muestra

Se realizó un monitoreo que consistió en el muestreo de lodos residuales de las tres estaciones

lavado de autos; con el propósito de obtener información sobre las características más relevantes

se realizaron las siguientes mediciones: el pH fue medido con tirillas de la referencia Mcolorphast

y la temperatura fue tomada con un termómetro de mercurio; estas variables se tuvieron en cuenta

para determinar las condiciones de los lodos.

Las muestras fueron recolectadas en frascos Schott estériles de 500 mL. El método de muestreo

de los lodos se efectuó con base a lo establecido en la NTC-ISO 5667-13 “guía para el muestreo

de lodos de aguas residuales y plantas de tratamiento de aguas” (Icontec, 1998), está expone el

tipo de muestra más recomendable según los flujos y puntos de muestreo; las muestras fueron

rotuladas con el fin de identificar la procedencia de cada una de estas, además se diligenció el

formato de la Universidad de Santander Anexo A. LB/MPT/R, UDES “Recepción de muestras

para análisis microbiológico”, el transporte de la muestra se realizó utilizando una cava de icopor

que contenía hielo con el fin de evitar que la actividad metanogénica de la muestra aumente,

pudiendo provocar cambios en la composición, apariencia u otras propiedades de las muestras y

de esta manera permitir el traslado a los diferentes laboratorios (Zagal & Sadzawka, 2007).

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50

7.3 Procesamiento de muestras para posterior análisis

7.3.1 Sólidos Totales

La determinación de los sólidos totales por el método de desecación permite apreciar el contenido

de material disuelto y suspendido en el agua, el producto de esto está fijado por la variable

temperatura y por el tiempo de desecación al que es expuesta la muestra. El análisis se basó en la

medición cuantitativa del aumento de peso que realice una cápsula de porcelana primeramente

tarada tras la evaporación de la muestra y luego su posterior secado en una temperatura que oscila

entre 103-105 °C. (Methods, 1999). Para dar cumplimiento a los parámetros microbiológicos de

fagos somáticos y huevos de helminto, primero se debió calcular los sólidos totales presentes en

cada una de las muestras estudio, así:

Se calentó el crisol limpio a 103 °C – 105 °C, durante una hora

El volumen de muestra fue trasferido previamente mezclado al crisol pesado y evaporado

y secado en un baño de vapor o en horno de secado.

Se secó la muestra evaporada al menos durante una hora en un horno de 103 °C – 105 °C

Se enfrió el crisol en un desecador y se pesó en una balanza.

Se empleó la siguiente ecuación efectuando cálculos necesarios:

Donde; A= Peso del residuo seco más crisol en mg

B= Peso del crisol en mg

Vol (mL)= Volumen de la muestra (mL de la muestra)

Ecuación: (𝑨−𝑩)∗𝟏𝟎𝟎𝟎

𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 (𝒎𝒍)

Ecuación para hallar cantidad de solidos totales en una muestra. Fuente: (Methods, 1999)

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51

7.3.2 Procesamiento de la muestra para análisis microbiológicos

Todas las muestras de lodos fueron sometidas a análisis microbiológicos teniendo en cuenta los

siguientes protocolos:

Tabla 5. Parámetros de caracterización microbiológica de lodos.

ANÁLISIS TÉCNICA REFERENCIAS

Salmonella sp. Método horizontal para la detección de

Salmonella sp.

(NTC 4574, 2007)

Fagos

somáticos

Standard Methods for the examination of

water & wastewater. 22, 2013. St. Mth.

9224 B.

(St. 9224 B., 2004)

Huevos de

helmintos

Método para la cuantificación de huevos

de helmintos en lodos y biosólidos.

Norma Oficial Mexicana NOM-004-

SEMARNAT-2002, Protección

ambiental - Lodos y biosólidos -

Especificaciones y límites máximos

permisibles de contaminantes para su

aprovechamiento y disposición final.

(NOM 004, 2003)

Coliformes

totales y

fecales

NTC 4458 2007-12-12. Método

horizontal para el recuento de coliformes

o Escherichia coli o ambos. Técnica de

recuento de colonias utilizando medios

fluorogénicos o cromogénicos.

(NTC 4458, 2002)

Fuente: Parra ,2017.

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52

7.3.2.1 Determinación de Coliformes Fecales.

Para la determinación de Coliformes fecales se tomaron 10 g de sólidos totales que fueron

suspendidos en 90 mL de agua peptona; posteriormente se tomó 0,1 mL de esta solución y se llevó

a un tubo que contenía 9 mL de agua peptona para obtener la dilución 103; de igual manera se

efectuó el anterior procedimiento hasta obtener la dilución 106.

Se tomaron dos cajas de petri para sembrar en profundidad por duplicado las dos diluciones de

trabajo (103 y 106), se transfirió 1 mL de la suspensión y se depositó en la caja de petri vacía;

posteriormente se vertió de 10 a 15 mL del agar Chromocult a +/- 45°C, mezclando el inóculo con

el medio. Luego de que se completó la solidificación se vertieron 4 mL más de medio sobre la

superficie con el fin de observar mejor el crecimiento de las colonias. Las cajas sembradas se

incubaron a 35°C por 24 horas. Pasadas las 24 horas se realizó el recuento de bacterias redondas,

planas, convexas, de color morado para determinación de E. coli. Los recuentos se informan como

UFC/mL (NTC 4458, 2002).

7.3.2.2 Determinación Salmonella sp.

La determinación de Salmonella sp. se realizó en tres etapas:

1. Pre-enriquecimiento: Se pesaron 25g de la muestra y se transfirieron a un erlenmeyer que

contenía 225mL de caldo lactosado. Se incubó a 37°C/ 18-24hrs

2. Enriquecimiento: Pasado el tiempo de incubación, se tomó 0.1mL de esta mezcla y se llevó

a un tubo de ensayo tapa rosca que contenía 10mL del medio Rappaport; se incubó durante

24 horas a 41.5 °C.

3. Siembra de la muestra en medio selectivo: Pasado el tiempo de enriquecimiento, se sembró

en superficie (0.1mL) en Agar Xilosa Lisina Desoxicolato (XLD) y en Agar Salmonella

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53

Shigella (SS), medios de cultivo selectivos para el crecimiento de Salmonella sp., se incubó

por 24 horas a 37°C. Después de la incubación se revisaron las cajas observando

crecimiento típico colonias negras, tipo ojo de pescado en cualquiera de los dos medios de

cultivo, se realizó confirmación bioquímica en medios TSI (Agar Triple Azúcar Hierro),

LIA (Agar Lisina Hierro), VP (Voges Proskauer), movilidad y urea con un periodo de

incubación de 37°C durante 24 horas. Informar como presencia o ausencia tal como lo

describe la norma NTC 4574/2007.

7.3.2.3 Técnica de detección y cuantificación de huevos de helmintos.

1. Concentración y separación de los huevos de helmintos: La recuperación de los huevos de

helmintos de la muestra se realizó efectuando los siguientes pasos:

Se tomaron 4g de sólidos y se adicionaron en 200 mL de solución Tween 80 al 0,1% se

homogenizaron durante 1 minuto en licuadora; se realizaron enjuagues extrayendo el

mayor contenido de la solución en un recipiente plástico de 2 litros, los lavados se

realizaron con 800 mL de la solución de Tween 80 a la misma concentración.

Se dejó sedimentar la muestra durante 3 horas.

Posteriormente se aspiró el sobrenadante y el sedimento se filtró a través de tamiz de 150

a 170 µm luego se realizaron enjuagues con 1L de agua destilada; el filtrado y los enjuagues

se vertieron en el recipiente plástico de 2 litros y dejó sedimentar durante 3 horas.

Se retiró del sobrenadante y el sedimento se vertió en un tubo de centrífuga de 200 mL

para luego centrifugar a 660 RPM durante 5 minutos.

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54

Se aspiró de nuevo el sobrenadante y el sedimento fue suspendido en 150 mL de sulfato

de zinc y se volvió a centrifugar.

De nuevo se aspiró el sobrenadante y se recuperó el sedimento resultante en un tubo de

centrífuga de 200 mL y se centrifugo a 660 RPM durante 5 minutos.

Al sobrenadante resultante se le agrego 15 mL de la solución de alcohol-ácido,

posteriormente, se adiciono 10 mL de éter y se agito, centrifugar 660 RPM durante 5

minutos; seguidamente, se realizó un enjuague adicionando H2SO4 0,1 N (o formalina

0,5%).

De nuevo se centrifugó a 660 RPM durante 5 minutos, de la misma forma se realizó

segundo enjuague con la misma solución dejando un sobrenadante final de 5mL. Para la

lectura de los huevos de Helmintos se tomaron gotas del sedimento resultante contenido en

el tubo centrifuga y se depositaron en la cámara Neubauer, Informar como HH/4g (Pineda,

2010).

Los resultados se expresan aplicando la siguiente formula:

𝐻𝐿 =𝐻

5

Ecuación para la detección de huevos de helmintos. Fuente: (NOM 004, 2003)

Donde;

HL= Huevos de parásitos leídos en la muestra

H= Cantidad de huevos por Litro

5= Cantidad de muestra trabajada

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55

7.3.2.4 Método de recuento en placa para la detección de colífagos somáticos

Para el aislamiento de fagos, se filtraron 500 mL de lodos previamente centrifugados a 3400 rpm

por 15 minutos con el fin de sedimentar los sólidos presentes; usando filtros de membrana de 0,22

µm de diámetro de poro. A partir del filtrado se llevaron a cabo diluciones seriadas en base 10

hasta 10-2 con el fin de realizar la cuantificación de los fagos.

Cuantificación de fagos por el método de recuento en placa según Standard Methods for the

examination of Water & Wasterwater:

1. A 50 mL de agar Tripticasa de Soya (TSA) licuado, se le adicionó 0,08 g nitrato de amonio,

0,11 g de nitrato de estroncio, 3 mL de cloruro de trifenil tetrazolio (TTC, Sigma) al 1%

(p/v), 3 mL de la suspensión bacteriana (OD=0,5) y 3 mL de la muestra de agua filtrada (o

de sus respectivas diluciones).

2. La mezcla fue vertida en dos cajas de Petri que fueron seguidamente incubadas a 37°C/12-

18 h.

3. Finalmente, se hizo el recuento de las zonas de lisis o aclaramiento en cada una de las cajas

(placas), las cuales fueron informadas como Unidades Formadoras de Placas (UFP)/mL

mediante la expresión, donde, (1/d) y V representan respectivamente al promedio de placas,

el recíproco de la dilución y el Volumen (Villamizar G., 2015).

7.3.3 Categorización de los lodos

De acuerdo a los resultados microbiológicos obtenidos en los recuentos estas muestras se

categorizaron según el decreto 1287 de 2014 donde se establecen las categorías de los lodos tipo

A, B o C analizados según la presencia de microorganismos como Coliformes Fecales, Salmonella

sp. Huevos de helmintos y fagos somáticos.

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Para determinar el mayor índice de la carga microbiológica en cada uno de los lavaderos de autos,

se empleó el programa Microsoft Excel versión 2017.

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57

CAPITULO 8

8. RESULTADOS

8.1 Parámetros Microbiológicos

Los parámetros microbiológicos que se deben tener en cuenta para la determinación de la carga

microbiana en los lodos procedentes de las estaciones de lavados de autos del área metropolitana

de Bucaramanga se encuentran referenciados en el Decreto 1287 del 2014 del Ministerio de

vivienda Ciudad y territorio y son los siguientes: Salmonella sp. Coliformes fecales, Huevos de

Helmintos y Virus entéricos; de acuerdo a esto, los datos obtenidos en este estudio se compararon

con lo requerido por la normatividad.

Tabla 6. Recuento de los parametros microbiologicos y cumplimiento según el Decreto 1287/14.

Sitio de

Muestreo

Nomb

re de

las

muest

ras

Coliformes

fecales

UFC/g

Huevos

de

Helmint

os

HH/4g

Virus

entéri

cos

UFP/

4g

Salmonella sp.

UFC/25g

Cumplimi

ento

Categoría

A

Cumplimie

nto

Categoría

B

Decret

o

1287/14

C

A:103

B:106

A

B

A

B

A

B

RM <1x

103

<2x

10-6

<1,

0

<1

0,0

<1,

0

-

-

Ausen

cia

<1x103

Piedecuesta

(Lodo 1)

M111 4x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M212 3x103

<1x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M313 5x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

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58

M421 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M522 2x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M623 4x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M731 3x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M832 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M933 3x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

Floridablanca

(Lodo 2)

M111 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M212 5x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M313 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M421 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M522 3x103

<1x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M623 3x103

<1x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M731 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M832 4x103

<1x

106

<1,0 <1,0 Prese

ncia

Ausen

cia

x

M933 2x103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

Girón (Lodo

3)

M111 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M212 2x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M313 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M421 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M522 3x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M623 4x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M731 <1

x103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

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59

M832 <1x

103

<1x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

M933 3x103

<2x

106

<1,0 <1,0 Ausen

cia

Ausen

cia

x

RM: Rangos microbiologicos. C: Categorias. UFC: Unidades formadoras de colonias. UFP:

Unidades formadoras de placa. HH: Huevos de helmintos. g: Gramos. Cada muestra se rotulo de

la siguiente manera; M (muestra); primer dato (número de muestra), segundo dato (mes de

muestreo) y tercer dato (día de la toma de muestra). Fuente: Autor.

En la tabla 7 se observa, los promedios de los recuentos microbiologicos obtenidos para cada una

de las muestras. Cada muestra recibio un nombre, donde se denota de la siguiente manera:

M:muestra, Primer dato: Número de la muestra, Segundo dato: Mes de la toma de muestra, Tercer

dato: Día de muestreo. En cuanto a la categorizacion se observa que 11 muestras de lodos cumplen

para categoria A y 16 muestras de lodos cumplen para categoria B.

8.2. Cuantificación de la carga microbiana

8.2.1 Salmonella sp.

En el agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato (XLD), se evidencio crecimiento de colonias con el centro

negro, tipo ojo de pescado, debido a la producción de H2S;en el medio Salmonella-Shigella (SS)

el tiosulfato sódico y el citrato férrico proporciona la producción de ácido sulfhídrico, como lo

demuestran las colonias con centros de color negro; obteniéndose así un crecimiento bacteriano

característico de Salmonella sp; en la figura 9 se observa el crecimiento de este microorganismos

en sus respectivos medios .

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60

Figura 9. Presencia de colonias de Salmonella sp. En dos medios selectivos al lado izquierdo el

medio XLD y al lado derecho SS. Fuente: Autor.

A continuación se describen los resultados obtenidos sobre el análisis de la carga microbiana

presente en cada uno de estas muestras.

Cada muestra se rotulo de la siguiente manera; M (muestra); primer dato (número de muestra),

segundo dato (mes de muestreo) y tercer dato (día de la toma de muestra)

Figura 10. Presencia de Salmonella sp. en lodos de lavaderos de autos.

0

1

M111 M212 M313 M321 M522 M623 M731 M832M933

Au

sen

cia/

Pre

sen

cia

Muestras

Presencia se Salmonella sp.

Lodo 1

Lodo 2

Lodo 3

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61

De las 27 muestras analizadas tal como se observa en la figura 10 las muestras correspondientes a

los lodos 1 y 2, presentaron concentraciones de Salmonella sp. las cuales variaron de acuerdo al

sitio y el mes de muestreo. Cabe resaltar, que en estas dos estaciones se realiza el lavado de

furgones contaminados con heces fecales de aves en donde puede estar contenido este; al mismo

tiempo estas concentraciones variaron de un mes a otro, se observa que el lodo 1 en el mes 1, dos

de las muestras evidenciaron presencia de Salmonella sp., lo contrario sucedió en el mes dos donde

solo 1 de sus muestras obtuvo presencia del microorganismo, una posible causa es que las

actividades que se desarrollan en estas estaciones disminuyeron debido a que las condiciones

climaticas cambiaron de epoca soleada a epoca lluviosa, y normalmente el trabajo disminuye

debido a que las personas dejan de lavar sus vehículos en estas epocas. En el lodo 3 no se evidencio

presencia de Salmonella sp. en ninguna de las 27 muestras analizadas durante el transcurso de los

tres meses lo que nos indica que este lodo cumple con los parametros microbiológicos exigidos en

el decreto 1287 del 2014.

Según lo mencionado por Cota D. & Ponce C. (2008) que Salmonella sp. es un organismo mesofílo

cuyo crecimiento óptimo ocurre entre 35 - 43°C y pH de 7 a 7.5 unidades; esta puede ser una de

las condiciones por las cuales no se evidencio la presencia de Salmonella sp. ya que en el presente

trabajo los lodos analizados mantuvieron una temperatura que osciló entre 21-23°C.

8.2.2 Coliformes fecales

Para la detección de Coliformes fecales se trabajó con el agar Chromocult el cual se considera un

medio de cultivo cromógeno diferencial que permite la detección, diferenciación y enumeración

simultánea de estos microorganismos. En la figura 11 observamos la presencia de Coliformes

fecales (1) mostrando colonias que se tiñen de azul oscuro y violeta.

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Figura 11. Crecimiento microbiano de Coliformes fecales en Agar Chromocult en dilución 103.

Fuente: Autora

Se debe resaltar que de los 27 lodos analizados en la dilución 10-3, el 59,25% de las muestras

evidenció crecimiento de coliformes fecales en los medios selectivos, presentando colonias de

color azul características de los coliformes fecales.

Los coliformes fecales son comúnmente indicadores de contaminación fecal en aguas residuales.

Cuando se le da uso en lodos usualmente indica la eficiencia de los procesos de tratamiento en la

destrucción de bacterias, además regulan la calidad de los lodos que pueden reúsarse

benéficamente.

La cantidad de coliformes fecales presentes en las muestras de lodos analizadas variaron

obteniéndose concentraciones de este microorganismo en la mayoría de muestras analizadas para

las dos diluciones trabajadas (10-3 y 10-6).

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Figura 12. Coliformes fecales dilución 10-3 en lodos de lavaderos de autos.

En la figura 12 se observa que 11 de las 27 muestras no presentaron crecimiento de coliformes

fecales cumpliendo con lo requerido por la normatividad.

0,0

0,5

1,0

1,5

2,0

2,5

3,0

3,5

4,0

M111 M212 M313 M421 M522 M623M731

M832M933

3,63,5 3,7

0,0

3,33,6

3,5

0,0

3,5

3,7 3,7

0,0 0,0

3,5 3,5

0,0

3,6

3,3

0,0

3,3

0,0 0,0

3,5 3,6

0,0 0,0

3,5

Co

nce

ntr

ació

n L

og

10

Muestras

Coliformes fecales dilución 103

Lodo 1

Lodo 2

Lodo 3

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Figura 13. Coliformes fecales dilucion 10-6 en lodos de lavaderos de autos.

En la figura 13 se expresan los resultados de la concentración de coliformes fecales donde

observamos que durante los tres meses de muestreo todas las muestras presentaron un crecimiento

de <2x106 UFC/g; también podemos describir que 16/27 muestras de lodos no demostraron

concentraciones de coliformes fecales obteniéndose resultados <1 x 106 UFC/g.

Relacionando la figura 12 y 13 podemos describir que las muestras (M111, M313, M731) para el

lodo 2 y 3, la muestra (M421) para los tres lodos y la (M832) para el lodo 1 y 2 tuvieron

concentraciones <1UFC/g de coliformes fecales idénticas en las dos diluciones 10-3 y 10-6.

A su vez dos de las muestras analizadas en el primer mes, en el día dos correspondientes a los

lodos 1 y 2 presentaron concentraciones de coliformes fecales de >5x103UFC/g; lo que nos indica

que estos patógenos se encuentran en mayor cantidad con respecto a los otros microorganismos

analizados en el presente trabajo, una característica relevante descrita por Rodríguez (2017) es

que este tipo de lodos presenta compuestos que incluyen metales pesados, hidrocarburos y

0

1

2

3

4

5

6

M111 M212 M313 M421 M522 M623 M731M832

M933

6 6 6

0

6 6 6

0

6

0

6

0 0

6 6

0

6 6

0

6

0 0

6 6

0 0

6C

on

cen

trac

ión

Lo

g 1

0

Muestra

Coliformes fecales en dilución 106

Lodo 1

Lodo 2

Lodo 3

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solventes que a su vez estos organismos tienen la capacidad de desarrollar estrategias para resistir

altas concentraciones de estos ya que algunos de estos metales son esenciales para el metabolismo

de algunas de ellas, mientras que otras son capaces de proliferar en dichos ambientes porque han

adoptado características de tolerancia y resistencia que les permiten captar o expulsar a estos

metales para transformarlos o eliminarlos por medio de procesos redox.

8.2.3 Huevos de Helmintos

Las observaciones microscópicas realizadas, no indicaron la presencia de helmintos en los lodos

analizados Anexo C; Según lo menciona Urrego K. & Acevedo J. (2013) este parámetro se

considera importante ya que la determinación de huevos de helmintos en aguas residuales

determina la inocuidad de los lodos, debido a que, los virus y las bacterias patógenas permanecen

viables durante uno a tres meses en el agua residual, mientras que los helmintos sobreviven hasta

por un año. Además, se ha establecido que la asociación de los microorganismos con la materia

orgánica potencia sus periodos de sobrevida. En estudios realizados en diferentes países de

América Latina, se han encontrado concentraciones altas de huevos de helmintos en muestras de

lodos; se estima que el rango de huevos de helmintos oscila entre 70 y 3000/L en aguas y lodos

residuales de los países en vía de desarrollo.

Cabe mencionar que en Colombia existe poca información sobre la detección de Huevos de

helmintos en lodos, en un estudio realizado por la Universidad Javeriana donde se encontró una

viabilidad <1HH/4g de huevos de helmintos en biosólidos provenientes de una PTAR ubicada en

Bogotá clasificándose este lodo en categoría A. La concentración de huevos de helmintos en

muestras de lodos depende de la prevalencia de la infección en la población. (Urrego, Acevedo, &

Pelaez, 2013)

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8.2.4 Fagos Somáticos

La deteccion de fagos somaticos no fue relevante en este estudio ya que estos virus requieren de

un huesped bacteriano para su desarrollo Arcos & Gomez (2012) los virus se encuentran en menor

proporcion en heces de humanos y animales homeotermicos que no esten afectados, pero se

encuentran en altas concentraciones en aguas residuales que contengan E. coli, por lo tanto esta es

una de las razones por la cual no se evidencio la deteccion de fagos Anexo C, ya que las

concentraciones de coliformes fecales detectadas en estos lodos fueron bajas siendo 5x 103 la

concentracion mas alta reportada en la dilucion de 10-3.

Los virus pueden llegar a transmitir al hombre mas de 140 virus entericos, los mas comunes son

los virus de la hepatitis y los causantes de gastroenteritis.

8.3 Cumplimiento y Categorizacion de los lodos según el Decreto 1287 del 2014

Como se muestra en las figura 13 las concentraciones de microorganismos como Salmonella sp.,

Coliformes fecales, Huevos de Helmintos y fagos somaticos están separadas por el análisis de

cada una de las muestras de lodos esto con el fin de visualizar mejor los resultados de cumplimiento

de los parametros microbiologicos según lo establecido en el decreto 1287 del 2014 y asi mismo

poder reportar la categoria en la que se encuentran estos.

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67

Figura 14. Porcentaje de determinación del cumplimiento de los parámetros microbiológicos con

respecto al lodo 1 (Piedecuesta) para categoría A y categoría B.

De acuerdo con la figura 14 observamos la relación de los resultados obtenidos sobre los

parámetros microbiológicos de las nueve muestras analizadas para el lodo 1, donde determinamos

el cumplimiento de este lodo obteniendo el siguiente análisis: El 22% de las muestras que

corresponde a la muestra (M421 y M832) cumplen con los parámetros establecidos en la norma.

De esta manera estas dos muestras se podrían clasificar como lodos categoría A, ya que son lodos

sin alguna restricción sanitaria que pueden aprovecharse benéficamente en zonas verdes tales

como cementerios, separadores viales o en la agricultura entre otros usos, mitigando así el impacto

ambiental que estos generan. Por otro lado el porcentaje restante que fue del 78% que equivale a

7 muestras presentaron variaciones en las concentraciones de microorganismos; la muestra M212

arrojo la presencia de Salmonella sp. y crecimiento de Coliformes fecales en la dilución 10-3por lo

tanto este lodo deja de cumplir con los rangos microbiológicos y se clasifica en la categoría B; ya

22%

78%

Porcentaje categorización lodo 1

Categoria A

Categoria B

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68

que según la norma para pertenecer a este grupo debe existir la ausencia de Salmonella sp. y un

crecimiento <1 UFC/g en dilución 10-3 de coliformes fecales.

Los lodos categoría B podrán ser utilizados en plantaciones forestales, como insumos en la

fabricación de materiales de construcción y procesos de valorización energética

Figura 15. Porcentaje de determinación del cumplimiento de los parámetros microbiológicos con

respecto al lodo 2 (Floridablanca) para categoría A y categoría B.

De acuerdo con los datos expresados en la figura 15 observamos el porcentaje de cumplimiento

presente en las muestras evaluadas en el lodo dos, donde se obtuvo que el 44.4% cumple con los

parámetros exigidos por el Decreto 1287 del 2014 para clasificar estos lodos en categoría A. Las

muestras restantes (M212, M522, M623, M832 y M933) incumplen con uno de los cuatro

parámetros exigidos por la norma para la categoría A, por lo cual estas muestras se clasifican como

lodos de categoría B.

44%

56%

Porcentaje categorización lodo 2

Categoria A

Categoria B

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Figura 16. Porcentaje de determinación del cumplimiento de los parámetros microbiológicos con

respecto al lodo 3 (Girón) para categoría A y categoría B.

En la figura 16 detallamos las muestras del lodo 3, donde observamos que el 56% de las muestras

de lodos cumplen con los parámetros microbiológicos; cabe resaltar que es el lodo en donde la

mayor parte de sus muestras clasificaron en categoría A, una de las características más relevantes

de esta estación es que diariamente realizan la extracción de los lodos, este puede ser uno de los

factores por el cual no se encuentra vida microbiana en estos lodos; además el 44% de las muestras

clasificaron en lodos categoría B.

De las 27 muestras analizadas 11 de estas muestras cumplen como lodos categoría A, de acuerdo

con la carga de organismos patógenos e indicadores evaluada, por lo que posteriormente estos se

podrán aprovechar sin algún tipo de restricción, incluso estos serán usados en lugares en donde las

personas podrán tener contacto directo con estos. Los lodos clase B de igual manera se consideran

útiles, pero deberán tenerse más cuidado debido a que si en los datos analizados se dio la detección

56%

44%

Porcentaje de categorizacion lodo 3

Categoria A

Categoria B

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de un huevo de helminto viable este puede llegar a causar infección en los seres humanos debido

a que la normatividad presenta rangos microbiológicos más amplios para estos parásitos en donde

se estipula un rango <10HH/4g existiendo la probabilidad de que un alto porcentaje de ellos pueda

ser viable, de igual manera como menciona Jiménez B. & González G. (2000) su uso debe es más

limitado ya que debe ser empleado como fertilizantes o mejoradores de suelos entre otros usos,

con el fin de evitar su contacto con el público. (Hernandez, 2010)

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CAPITULO 9

9. CONCLUSIONES

La investigación sirvió como el primer paso para conocer las características microbiológicas de

los lodos producidos en las estaciones de lavados de autos de los municipios de Piedecuesta Girón

y Piedecuesta del Departamento de Santander y conocer el cumplimiento con lo establecido en el

Decreto 1287 del 2014 del Ministerio de Vivienda Ciudad y territorio para permitir el

aprovechamiento y disposición de los lodos.

Según la cuantificación microbiológica obtenida en las muestras de lodos se evidencio que las

concentraciones de microorganismos patógenos e indicadores fueron relativamente bajas, siendo

en la muestra de Piedecuesta (M212) en donde se evidencio la concentración más alta de

coliformes fecales la cual fue de 5x103 UFC/g en el lodo 1 perteneciente al lavadero de

Piedecuesta.

De acuerdo con los resultados obtenidos en el análisis de los tres lodos, se puede concluir, que

todas las muestras cumplen con los parámetros microbiológicos establecidos en la Decreto 1287

del 2014 del Ministerio de Vivienda Ciudad y territorio, considerándose residuos no peligrosos ya

que se encuentran clasificados el 40,74% de las muestras en categoría A y el 59,25 en categoría B;

así que su aprovechamiento es bastante amplio para usos agrícolas, industriales entre otros. No

obstante, la disposición final de los lodos debe ser confirmado con otros parámetros químicos que

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no hacen parte de este trabajo y que deben realizarse para dar cumplimiento a la norma antes de

su uso o disposición final.

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CAPITULO 10

10. RECOMENDACIONES

Vigilar la disposición actual que se les realiza a los lodos procedentes de estaciones de autos a fin

que los generadores de estos residuos, realicen esta actividad sin ocasionar perjuicios al medio

ambiente.

Exigir por parte de la CDMB que los lavaderos de autos cumplan con trámites de permiso de

vertimientos para que de esta manera se minimicen las descargas clandestinas de estos sin un

adecuado tratamiento a los cuerpos hídricos ya que existe flora y fauna en estos ecosistemas que

están siendo destruida por sustancias que se alojan en estos lodos, que suelen ser de difícil

degradación.

Se recomienda que las entidades encargadas capaciten este tipo de empresas con el fin de que se

les dé un buen uso a estos residuos, aprovechando el potencial benéfico que estos pueden llegar a

brindar en los diferentes campos ya sea agrícola, en la elaboración de materiales de construcción

entre otros usos.

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74

CAPITULO 11

11. BIBLIOGRAFIA

Abella G, J., & Martínez C, M. (2012). CONTRIBUCIÓN DE UN AFLUENTE TRIBUTARIO

A LA EUTROFIZACIÓN DEL LAGO DE TOTA BOYACA (COLOMBIA). Revista

Colombiana de Quimica , 243-262.

Ambiente, M. d. (3 de Agosto de 1994). Decreto 1753 del 1994. Obtenido de

http://www.corpamag.gov.co/archivos/normatividad/Decreto1753_19940803.htm

America, U. (4 de Octubre de 2010). Capitulo 4. Composicion de los lodos. Obtenido de

http://catarina.uudlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/leia/morales_r_pm/capitulo4.pdf

Arcos, M., Avila, S., Estupiñan, S., & Gomez, A. (12 de 12 de 2012). Indicadores microbiológicos

de contaminación de las fuentes de agua. Obtenido de

http://www.unicolmayor.edu.co/invest_novaa/NOVA/ARTREVIS2_4.pdf

Ardila, S., Cordoba, O., & Ramos, M. (2015). Buenas Practicas ambientales en lavaderos de

automotores, talleres mecanicos y lubricentro. Obtenido de

https://www.rosario.gov.ar/web/sites/default/files/buenas_practicas_talleres.pdf

Barrios, J. (21 de Octubre de 2002). TRATAMIENTO ÁCIDO DE LODOS RESIDUALES

FISICOQUÍMICOS PARA REDUCIR EL CONTENIDO DE MICROORGANISMOS. Obtenido de

http://www.bvsde.paho.org/bvsaidis/mexico26/iii-005.pdf

Bonilla, M., & Buitrago , C. (4 de Mayo de 2012). Reglamento ambiental para las estaciones de

servicio. Obtenido de http://extwprlegs1.fao.org/docs/pdf/dom105085anx.pdf

Cabrera , G., & Pinzon , L. (3 de julio de 2012). ESTUDIO DE FACTIBILIDAD MONTAJE

LAVADERO. Obtenido de

https://repository.ean.edu.co/bitstream/handle/10882/2413/Cabrera%20Geovanni2012.pdf?seque

nce=6&isAllowed=y

Carwash, Q. (Noviembre de 2018). Centro de embellecimiento automotriz 13 años.

Castro, G. (11 de Febrero de 1994). Decreto 353 de 1994. Obtenido de

http://legal.legis.com.co/document?obra=legcol&document=legcol_759920424111f034e0430a0

10151f034

CDMB. (2018). Informe de vehiculos inscritos en el area metropolitana de Bucaramanga.

Bucaramanga.

Page 75: CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES …³n... · 6.9.2 Lodo categoría B ... enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

75

Colombia, R. d. (10 de Julio de 2014). DECRETO 1287. MINISTERIO DE VIVIENDA, CIUDAD

Y TERRITORIO. Obtenido de http://www.minvivienda.gov.co/Decretos%20Vivienda/1287%20-

%202014.pdf

Cristancho, P. (2015). Evaluacion de la calidad microbiologica de biosolidos procedentes de

plantas de tratamiento de agua residuales de acuerdo al decreto 1287 del 2014. Bucaramanga:

Universidad de Santander.

DAMA, D. T. (2010). Ministerio del medio ambiente. Bogota.

Decreto 1076 . (26 de Mayo de 2015). Obtenido de Ministerio de Ambiente y desarrollo sostenible:

http://parquearvi.org/wp-content/uploads/2016/11/Decreto-1076-de-2015.pdf

Espitia Antonio, J. E. (Diciembre de 2017). DIAGNÓSTICO, EVALUACIÓN Y

PLANTEAMIENTO DE MEJORA EN LOS COMPONENTES EN LAS PLANTAS DE AGUAS

RESIDUALES EN EL MUNICIPIO DE BUENAVISTA, BOYACA. Obtenido de Universidad

Catolica:

https://repository.ucatolica.edu.co/bitstream/10983/15504/1/INFORME%20TRABAJO%20DE

%20GRADO.pdf

Figueroa Hernandez, C. (2011). Cuantificacion de coliformes fecales en lodos residuales durante

el proceso de secado solar. Mexico: Universidad Autonoma Ciudad Juarez.

Flores, C. E. (2018). Tratamiento de lodos residuales de una industria cervecera a través de

fermentación homoláctica para la producción acelerada de abono orgánico. Ecología aplicada ,

107-118.

Giraldo , O., & Lozano, A. (2012). Effect of drying of biosolids from the wastewater treatment

plant El Salitre (Bogotá) on the content of nutrients, heavy metals, and pathogens. Red de Revistas

Científicas de América Latina, el Caribe, España y Portugal , 348-354.

Gomez Molina, L. L., & Merchan Bermudez, A. M. (2016). Caracterizacion Fisicoquimia de los

lodos provenientes de una Planta de Tratamiento de Agua Residual Industrial de una Empresa de

cafe del Departamento de Caldas . Manizales : Universidad Catolica de Manizales.

Gonzalez, J. &. (2000). Evalucion de la calidad de los lodos. Obtenido de

(https://s3.amazonaws.com/academia.edu.documents/35812826/061.pdf?AWSAccessKeyId=AK

IAIWOWYYGZ2Y53UL3A&Expires=1543328659&Signature=gBB9lo%2FpqsSf6Q7nq76iQR

VUZCY%3D&response-content-

disposition=inline%3B%20filename%3DEVALUACION_DE_LA_CALIDAD_DE_LODOS_R

ESID

Hernandez, J. (2010). USO DB LODOS RESIDUALES PROCEDENTES DE LA CIUDAD DE

DUEANGO Y SU EFECTO EN LA PRODUCTIVIDAD Y CONCENTRACION EN METALES

EN SORJO FORRAJERO. En Universidad Autonoma de Nuevo Leon (pág. 107). Mexico:

Facultad de Agronomia.

Icontec. (1998). NTC-ISO 5667-13 Guia para el muestreo de lodos de aguas residuales y plantas

de tratamiento de aguas . Bogota .

Page 76: CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES …³n... · 6.9.2 Lodo categoría B ... enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

76

Ideam. (2010). Decreto 1594 de 1984. Colombia.

Jaramillo, C., & Bedoya, K. (2013). Caracterización de biosólidos generados en la planta de

tratamiento de agua residual San Fernando, Itagui (Antioquia, Colombia). Salud Publica .

Leon , F. (2013). TRATAMIENTO DE AGUAS. Universidad Nacional Autónoma.

Mapsa, R. (Junio de 2007). Guía para la utilización de las Valijas Viajeras - Determinación del

pH . Obtenido de

http://imasd.fcien.edu.uy/difusion/educamb/propuestas/red/curso_2007/cartillas/tematicas/Deter

minacion%20del%20pH.pdf

Martinez, N. (6 de Diciembre de 1995). DECRETO 2150 DE 1995 . Obtenido de

https://www.wipo.int/edocs/lexdocs/laws/es/co/co036es.pdf

Mena, M. (30 de Enero de 1990). Decreto 0283 de 1990. Obtenido de

http://www.funcionpublica.gov.co/eva/gestornormativo/norma.php?i=8807

Mendez , R., Pacheco, J., & Elba, C. (2014). Calidad microbiológica de pozos de abastecimiento

de agua potable en Yucatán, México. Revista Academica , 51-61.

Methods, S. (1999). Total Solids Dried at 103–105°C. Obtenido de http://edgeanalytical.com/wp-

content/uploads/Inorganic_SM2540.pdf

MinAqua, C. L. (Septiembre de 2016). GUÍA DE BUENAS PRACTICAS PARA INSTALACIONES

DE LAVADOS DE VEHICULOS . Obtenido de http://www.minaqua.org/wp14/wp-

content/uploads/2016/12/Guia-de-buenas-practicas-para-instalaciones-de-lavado-de-vehiculos-

CAST-bxa.pdf

Ministerio de Vivienda, C. y. (10 de Julio de 2014). Decreto 1287. Obtenido de

http://www.minvivienda.gov.co/Decretos%20Vivienda/1287%20-%202014.pdf

Moreno, N., & Patiño, O. (Lunes de Junio de 2012). Corporación Autónoma Regional para la

Defensa de la Meseta de Bucaramanga -CDMB. Obtenido de Municipio de Bucaramanga:

http://documentacion.,ideam.gov.co/openbiblio/bvirtual/005574/home/Buc.pdf

Moreno, S., & Vesga, S. (18 de Diciembre de 2010). Guia para la gestión y manejo Integral de

residuos. Obtenido de Servicio de Lavado de vehículos:

http://www.ambientebogota.gov.co/documents/10157/224727/guia_lavado-vehic.pdf

NOM 004. (15 de Agosto de 2003). Norma Oficial Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002,

Protección ambiental. Obtenido de Método para la cuantificación de huevos de helmintos en lodos

y biosólidos: http://legismex.mty.itesm.mx/normas/ecol/semarnat004.pdf

NTC 4458. (12 de Diciembre de 2002). Metodo Horizontal para la deteccion de Coliformes o

Escherichia coli o ambos. Obtenido de https://tienda.icontec.org/wp-

content/uploads/pdfs/NTC4458.pdf

Page 77: CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES …³n... · 6.9.2 Lodo categoría B ... enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

77

NTC 4574. (28 de Marzo de 2007). Norma Tecnica Colombiana. Obtenido de Metodo horizontal

para la deteccion de Salmonella sp : https://tienda.icontec.org/wp-

content/uploads/pdfs/NTC4574.pdf

Pineda, C. O. (2010). PREVALENCIA DE HUEVOS DE HELMINTOS EN LODOS, AGUA

RESIDUAL CRUTA Y TRATADA. BDIGITAL , 2906-304.

Ponce, C., & Espericueta, A. (2008). Eliminación de bacterias patógenas en lodos residuales

durante el secado solar. Revista internacional de contaminación ambiental , 5622-4070.

Pumarejo, P., & Elias, J. (22 de Diciembre de 1993). Ley ambiental general de Colombia. Obtenido

de http://biblioteca.saludcapital.gov.co/img_upload/03d591f205ab80e521292987c313699c/ley-

99-de-1993_1.pdf

Rodriguez , L. (2017). AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN DE BACTERIAS RESISTENTES

A METALES PESADOS OBTENIDAS DE AMBIENTES CONTAMINADOS CON DERIVADOS

DE HIDROCARBUROS EN LA CIUDAD DE RIOBAMBA. Obtenido de

http://dspace.espoch.edu.ec/bitstream/123456789/6625/3/236T0257.pdf

Rodriguez, C. (2014). Reglamento Ambiental . Bogota .

Rojas, J. A. (2005). Tratamiento de Aguas Residuales. Bogota: Escuela Colombiana de ingenieria.

Saez, A., & Urdaneta, J. (3 de Septiembre de 2014). Manejo de residuos sólidos en América Latina.

Revista Cientifica de America Latina, el Caribe, España y Portugal , 121-135.

Serna Rivera, L. F., & Lopez Garcia, S. D. (2010). ACTUALIZACION DEL MANUAL DEL

LABORATORIO DE ANALISIS DE ALIMENTOS DEL PROGRAMA DE TECNOLOGIA

QUIMICA. PEREIRA: UNIVERSIDAD TECNOLOGICA DE PEREIRA.

St. 9224 B. (2004). Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Edicion

22th.

Tavera Garcia, J. A. (2015). MANEJO, TRATAMIENTO Y REUSO DEL AGUA EN LA ESTACIÓN

DE LAVADO DE VEHICULOS "LOS ANGELES" KENNEDY, BOGOTA D.C. Bogota D.C:

Universidad Distrital Francisco Jose de Caldas.

Uribe Botero, B. (25 de OCtubre de 2010). Decreto 3930. Obtenido de

http://www.corpamag.gov.co/archivos/normatividad/Decreto3930_20101025.pdf

Urrego, K., Acevedo, J., & Pelaez, C. (2013). Caracterización de biosólidos generados en la planta

de tratamiento de agua residual San Fernando, Itagüí (Antioquia, Colombia). Revista Salud

Publica , 778-790.

Velasquez Arias, J. (2017). Contaminación de suelos y aguas por hidrocarburos en Colombia.

Análisis de la fitorremediación como estrategia biotecnológica de recuperación. Revista de

Investigacin Agraria y Ambiental .

Page 78: CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES …³n... · 6.9.2 Lodo categoría B ... enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

78

Vigueras, S., & Rivera, N. (2015). Biodegradacion de hidrocarburos de lodos residuales de centros

de autolavado con BFNA/Biodegradacion de hidrocarburos de lodos residuales de centros de

autolavado con BFNA. Revista CENIC - Ciencias Biologicas .

Villamizar G., R. A. (26 de Mayo de 2015). Metodología rápida y sencilla para la determinación

de colifagos somáticos. Scielo , 57-68.

Zagal, E., & Sadzawka, A. (2007). Protocolo de metodos de analisis para suelos y lodos. Obtenido

de Universidad de Concepcion :

http://www.cofes.org.ar/descargas/relas/4_jornada/Protocolos_suelos%20y_lodos_Sadzawka.pdf

Page 79: CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES …³n... · 6.9.2 Lodo categoría B ... enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

79

CAPITULO 12

12 NORMOGRAFIA

Ambiente, M. d. (3 de Agosto de 1994). Decreto 1753 del 1994. Obtenido de

http://www.corpamag.gov.co/archivos/normatividad/Decreto1753_19940803.htm

Castro, G. (11 de Febrero de 1994). Decreto 353 de 1994. Obtenido de

http://legal.legis.com.co/document?obra=legcol&document=legcol_759920424111f034e0430a0

10151f034

Colombia, R. d. (10 de Julio de 2014). DECRETO 1287. MINISTERIO DE VIVIENDA, CIUDAD

Y TERRITORIO. Obtenido de http://www.minvivienda.gov.co/Decretos%20Vivienda/1287%20-

%202014.pdf

Cristancho, P. (2015). Evaluacion de la calidad microbiologica de biosolidos procedentes de

plantas de tratamiento de agua residuales de acuerdo al decreto 1287 del 2014. Bucaramanga:

Universidad de Santander.

Decreto 1076 . (26 de Mayo de 2015). Obtenido de Ministerio de Ambiente y desarrollo sostenible:

http://parquearvi.org/wp-content/uploads/2016/11/Decreto-1076-de-2015.pdf

Icontec. (1998). NTC-ISO 5667-13 Guia para el muestreo de lodos de aguas residuales y plantas

de tratamiento de aguas . Bogota .

Ideam. (2010). Decreto 1594 de 1984. Colombia.

JMartinez, N. (6 de Diciembre de 1995). DECRETO 2150 DE 1995 . Obtenido de

https://www.wipo.int/edocs/lexdocs/laws/es/co/co036es.pdf

Mena, M. (30 de Enero de 1990). Decreto 0283 de 1990. Obtenido de

http://www.funcionpublica.gov.co/eva/gestornormativo/norma.php?i=8807

Methods, S. (1999). Total Solids Dried at 103–105°C. Obtenido de http://edgeanalytical.com/wp-

content/uploads/Inorganic_SM2540.pdf

Ministerio de Vivienda, C. y. (10 de Julio de 2014). Decreto 1287. Obtenido de

http://www.minvivienda.gov.co/Decretos%20Vivienda/1287%20-%202014.pdf

NOM 004. (15 de Agosto de 2003). Norma Oficial Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002,

Protección ambiental. Obtenido de Método para la cuantificación de huevos de helmintos en lodos

y biosólidos: http://legismex.mty.itesm.mx/normas/ecol/semarnat004.pdf

NTC 4458. (12 de Diciembre de 2002). Metodo Horizontal para la deteccion de Coliformes o

Escherichia coli o ambos. Obtenido de https://tienda.icontec.org/wp-

content/uploads/pdfs/NTC4458.pdf

Page 80: CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES …³n... · 6.9.2 Lodo categoría B ... enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

80

NTC 4574. (28 de Marzo de 2007). Norma Tecnica Colombiana. Obtenido de Metodo horizontal

para la deteccion de Salmonella sp : https://tienda.icontec.org/wp-

content/uploads/pdfs/NTC4574.pdf

Pumarejo, P., & Elias, J. (22 de Diciembre de 1993). Ley ambiental general de Colombia. Obtenido

de http://biblioteca.saludcapital.gov.co/img_upload/03d591f205ab80e521292987c313699c/ley-

99-de-1993_1.pdf

St. 9224 B. (2004). Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Edicion

22th.

Uribe Botero, B. (25 de OCtubre de 2010). Decreto 3930. Obtenido de

http://www.corpamag.gov.co/archivos/normatividad/Decreto3930_20101025.pdf

Page 81: CARACTERIZACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LODOS DE TRES …³n... · 6.9.2 Lodo categoría B ... enzimas específicas como la galactosidasa beta y la beta glucoronidasa. Es el indicador

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CAPITULO 13

13. ANEXOS

Anexo A. Formato toma de Muestra

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Anexo B. Imágenes de muestreo y trabajo en el Laboratorio

Muestra (Lodos de lavaderos de autos)

Medicion de pH

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Procesamiento de las muestras en el Laboratorio

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Anexo C. Resultados de Análisis de Fagos y Huevos de Helmintos por parte del Laboratorio

Siama Ltda.

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