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CONTROLE MICROBIANOCONTROLE MICROBIANOP r o f . F e l i p e P i e d a d e G . N e v e sP r o f . F e l i p e P i e d a d e G . N e v e sEsterilizaEsterilizaçção:ão: DestruiDestruiçção ou remoão ou remoçção de ão de todastodas as formas de vida de um objeto ou habitat.as formas de vida de um objeto ou habitat.

DesinfecDesinfecçção:ão: ReduReduçção do não do núúmero de microrganismos em superfmero de microrganismos em superfíícies inanimadas e cies inanimadas e

consequenteconsequente eliminaeliminaçção de sua potencialidade infecciosa.ão de sua potencialidade infecciosa.

SanitizaSanitizaççãoão:: Semelhante Semelhante àà desinfecdesinfecçção, porão, poréém usado rotineiramente na indm usado rotineiramente na indúústria de stria de

alimentos.alimentos.

AntissepsiaAntissepsia:: Semelhante Semelhante àà desinfecdesinfecçção, porão, poréém relacionada a m relacionada a tecidos vivostecidos vivos;;

InibiInibiçção do crescimento microbianoão do crescimento microbiano XX DestruiDestruiçção do organismoão do organismo(BacterioST(BacterioSTÁÁTICO)TICO) (BacteriCIDA, fungiCIDA)(BacteriCIDA, fungiCIDA)

CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANOCONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO

MÉTODOS DE CONTROLE

Métodos físicos e químicos de controle dos microrganismos

FÍSICOS

� Temperatura

� Radiação

� Filtração

�Dessecação

� Remoção de O2

� Vibração ultra-sônica

QUÍMICOS

� Desinfetantes

� Antissépticos

� Preservativos usados em

alimentos

MÉTODOS FÍSICOS

TEMPERATURA

� CALOR

• Um dos agentes físicos mais práticos e eficientes para a esterilização e/ou

desinfecção. O calor pode ser empregado sob duas formas: seco e úmido, tendo a

vantagem de apresentar, apenas 2 parâmetros a serem controlados: tempo e

temperatura.

• Esporos ���� mais resistentes ���� destruição por temperaturas acima de 100°C

Calor úmido Autoclave

Pasteurização

Água em ebulição

Calor seco Estufas e fornos

Flambagem

Incineração

� BAIXAS TEMPERATURAS

� Causa diminuição na taxa de crescimento e na atividade enzimática;

� Métodos Refrigeração ���� 0 à 7oC;

Congelamento ���� Residências e indústrias alimentícias

CALOR CALOR ÚÚMIDOMIDO

�� Processo mais eficiente devido ao maior poder de penetraProcesso mais eficiente devido ao maior poder de penetraçção do vapor dão do vapor d’á’água.gua.

�� A morte A morte éé decorrente da desnaturadecorrente da desnaturaçção de ão de áácidos nuclcidos nuclééicos e proteicos e proteíínas, podendo tambnas, podendo tambéém m

romper membranas.romper membranas.

�� AutoclaveAutoclave (121(121°°C / 15 min)C / 15 min)

�� Processo mais utilizado em microbiologia;Processo mais utilizado em microbiologia;

�� DestrDestróói ci céélulas vegetativas e esporos, em um pequeno lulas vegetativas e esporos, em um pequeno

volume, em 10 a 12 minutos. volume, em 10 a 12 minutos.

�� ÁÁgua em ebuligua em ebuliççãoão (100(100°°C/30 min.)C/30 min.)

�� A tA tíítulo de comparatulo de comparaçção, a eliminaão, a eliminaçção de esporos de ão de esporos de C. C. botulinumbotulinum pela fervura, requer pela fervura, requer

cerca de 5,5 horas. Por outro lado, a 121cerca de 5,5 horas. Por outro lado, a 121°°C, estes esporos são eliminados apC, estes esporos são eliminados apóós 4 a 5 s 4 a 5

minutos.minutos.

MÉTODOS FÍSICOS

CALOR CALOR ÚÚMIDOMIDO

�� PasteurizaPasteurizaççãoão

�� 6363°°C / 30 min C / 30 min �������� pasteurizapasteurizaçção lentaão lenta

�� 7272°°C /15 seg C /15 seg �������� pasteurizapasteurizaçção rão ráápidapida

�� O tratamento tO tratamento téérmico rmico éé breve para evitar alterabreve para evitar alteraçções significativas no sabor e teor ões significativas no sabor e teor

nutricional de alimentos, pornutricional de alimentos, poréém alguns microrganismos podem persistir e causar m alguns microrganismos podem persistir e causar

deterioradeterioraçção.ão.

�� NãoNão eliminaelimina todostodos osos microrganismosmicrorganismos ((nãonão éé esterilizaesterilizaççãoão););

�� Tem Tem comocomo alvoalvo microrganismosmicrorganismos patogênicospatogênicos tipicamentetipicamente presentespresentes emem alimentosalimentos;;

�� ProcessoProcesso muitomuito utilizadoutilizado parapara conservaconservaççãoão de de leiteleite e e bebidasbebidas;;

�� U.H.T. (Ultra U.H.T. (Ultra HighHigh TemperatureTemperature) ) �������� 141141°°C / 2 seg (C / 2 seg (““esterilizaesterilizaççãoão”” comercial);comercial);

MÉTODOS FÍSICOS

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CALOR SECO

� Morte por oxidação de constituintes celulares e desnaturação de proteínas e ácidos nucleicos.

� Não é a melhor maneira de usar o calor ���� ar é menos condutor da temperatura que a água.

� Incineração: processo drástico de eliminação de microrganismos, que destrói o produto.

� Flambagem: processo onde o material é submetido diretamente ao fogo, seja seco ou embebido

em álcool.

� Estufa Esterilizante : 160°C/2 h ou 180°C/1 h.

Amplamente utilizado para vidrarias e outros materiais.

MÉTODOS FÍSICOS

FILTRAFILTRAÇÇÃOÃO

�� Recomendado para materiais Recomendado para materiais termoltermoláábeisbeis em soluem soluçção (ão (ATBsATBs, vacinas) e na , vacinas) e na

descontaminadescontaminaçção do ar, em fluxos laminares e sistema de ventilaão do ar, em fluxos laminares e sistema de ventilaçção;ão;

�� FiltrosFiltros: celulose, acetato, policarbonato, teflon ou outro material sin: celulose, acetato, policarbonato, teflon ou outro material sinttéético.tico.

�� Embora o diâmetro dos poros possa variar, os mais utilizados sãEmbora o diâmetro dos poros possa variar, os mais utilizados são aqueles de 0,2 o aqueles de 0,2 µµm, que m, que

removem os microrganismos (exceto vremovem os microrganismos (exceto víírus) das solurus) das soluçções e do ar.ões e do ar.

�� Membranas filtrantesMembranas filtrantes

�� Tamanho dos poros em relaTamanho dos poros em relaçção aos microrganismos.ão aos microrganismos.

�� Tipo mais comum de filtro esterilizante em microbiologiaTipo mais comum de filtro esterilizante em microbiologia

�� O ar tambO ar tambéém pode ser filtrado, em fluxos laminares contendo m pode ser filtrado, em fluxos laminares contendo filtros HEPAfiltros HEPA ((HighHigh EfficiencyEfficiency

ParticulateParticulate Air) muito usados em cabines de seguranAir) muito usados em cabines de segurançça biola biolóógica e hospitais, que removem gica e hospitais, que removem

99,97% de part99,97% de partíículas de 0,3 culas de 0,3 µµm.m.

MÉTODOS FÍSICOS

MÉTODOS FÍSICOS

RADIARADIAÇÇÕESÕES

�� RadiaRadiaçção Nãoão Não--IonizanteIonizante::

�� A A radiaradiaçção ultravioletaão ultravioleta (de 4 a 400 (de 4 a 400 nmnm -- sendo 260 sendo 260 nmnm o comprimento mais eficiente) o comprimento mais eficiente) éé

bastante letal, mas exibe bastante letal, mas exibe baixa penetrabilidadebaixa penetrabilidade, não atravessando vidros, filmes sujos e , não atravessando vidros, filmes sujos e

outros materiais.outros materiais.

�� Como sua maior eficiência se dComo sua maior eficiência se dáá a 260 a 260 nmnm, que corresponde ao comprimento de onda , que corresponde ao comprimento de onda

onde se donde se dáá a maior absora maior absorçção pelo DNA, a radiaão pelo DNA, a radiaçção UV afeta primariamente este tipo de ão UV afeta primariamente este tipo de

molmoléécula.cula.

MÉTODOS FÍSICOS

�� RadiaRadiaçção Ionizante:ão Ionizante:

�� RadiaRadiaçções de pequeno comprimento de onda e de altões de pequeno comprimento de onda e de altííssima energia e ssima energia e

penetrabilidade.penetrabilidade.

�� Os 2 principais tipos são aOs 2 principais tipos são a RadiaRadiaçção Gamaão Gama e os e os Raios XRaios X. .

�� São bastante eficientes, pois promovem a São bastante eficientes, pois promovem a ionizaionizaççãoão de de áátomos, fazendotomos, fazendo--os os

perderem elperderem eléétrons trons �������� gerando gerando radicais livresradicais livres extremamente reativos, que podem extremamente reativos, que podem

destruir pontes de hidrogênio, duplas ligadestruir pontes de hidrogênio, duplas ligaçções, estruturas em anel. ões, estruturas em anel.

�� Quando na presenQuando na presençça de oxigênio, geram radicais hidroxila livres, absolutamente a de oxigênio, geram radicais hidroxila livres, absolutamente

ttóóxicos para as cxicos para as céélulas.lulas.

MÉTODOS FÍSICOS

� Dessecação

� Atuam pela remoção de água;

� Desidratação ���� massas alimentícias, leite em pó...

� Liofilização ���� preservação de alimentos e microrganismos;

� Remoção do oxigênio (desaeração)

� Previne o crescimento de aeróbios;

� Muito usado na indústria de alimentos (café, enlatados).

� Vibração ultra-sônica

� Vibrações ultra-sônicas em alta freqüência que levam o rompimento da

célula, despolimerização de compostos e quebras do DNA.

MÉTODOS FÍSICOS

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1)1) FenFenóóis e derivados fenis e derivados fenóólicoslicos

�� Os fenOs fenóóis (cresis (cresóóis (is (metilmetil--fenolfenol), ), xilenxilenóóisis) não são mais usados como desinfetantes ) não são mais usados como desinfetantes

ou ou antissantisséépticospticos devido devido àà sua sua toxicidadetoxicidade para os tecidos.para os tecidos.

�� Os Os derivados fenderivados fenóólicoslicos ((hexaclorofenohexaclorofeno, , hexilresorcinolhexilresorcinol) são empregados ) são empregados

principalmente como principalmente como antissantisséépticospticos ou desinfetantes hospitalaresou desinfetantes hospitalares::

•• Atuam desnaturando proteAtuam desnaturando proteíínas e rompendo membranas.nas e rompendo membranas.

•• Entretanto, tem odor desagradEntretanto, tem odor desagradáável e são irritantes para pele.vel e são irritantes para pele.

MÉTODOS QUÍMICOS

fenolfenol �� primeira cirurgia assprimeira cirurgia asséépticaptica

18671867: : ListerLister

2) 2) ÁÁlcooislcoois::

�� Muito usados, efetivos, confiMuito usados, efetivos, confiááveis e baratos, atuando como bactericidas, fungicidas veis e baratos, atuando como bactericidas, fungicidas

e contra ve contra víírus envelopados. rus envelopados.

�� Etanol e Etanol e isopropanolisopropanol, nas concentra, nas concentraçções entre 70 e 80%.ões entre 70 e 80%.

�� Atuam desnaturando proteAtuam desnaturando proteíínas e dissolvendo lipnas e dissolvendo lipíídeos de membrana.deos de membrana.

MÉTODOS QUÍMICOS

4) Agentes de Superf4) Agentes de Superfííciecie

�� Sabões e detergentes aniônicosSabões e detergentes aniônicos

�� AAçção: Remoão: Remoçção mecânica dos microrganismos e emulsificaão mecânica dos microrganismos e emulsificaçção;ão;

�� Pouco valor Pouco valor antissantisséépticoptico;;

�� Detergentes catiônicos (Compostos QuaternDetergentes catiônicos (Compostos Quaternáários de Amônio):rios de Amônio):

�� Desnaturam proteDesnaturam proteíínas;nas;

�� Ex: cloreto de benzalcônio, que mata a maioria das bactEx: cloreto de benzalcônio, que mata a maioria das bactéérias;rias;

MÉTODOS QUÍMICOS

3) 3) BiguanidasBiguanidas ((clorexidinaclorexidina))

�� AAçção: Ruptura da membrana plasmão: Ruptura da membrana plasmáática.tica.

�� ÉÉ bactericida contra bactericida contra GramGram (+) e (+) e GramGram ((--), at), atóóxico, persistente.xico, persistente.

�� ÉÉ utilizado na desinfecutilizado na desinfecçção da pele, principalmente escovaão da pele, principalmente escovaçção cirão cirúúrgica.rgica.

5) Metais Pesados:5) Metais Pesados:

�� Foram muito usados como germicidas, sendo atualmente substituForam muito usados como germicidas, sendo atualmente substituíídos por compostos dos por compostos

menos tmenos tóóxicos.xicos.

�� Os mais usados são compostos orgânicos de mercOs mais usados são compostos orgânicos de mercúúrio, prata, cobre e zinco.rio, prata, cobre e zinco.

�� DesnaturaDesnaturaçção de proteão de proteíínas;nas;

MÉTODOS QUÍMICOS

4) Halogênios (Iodo, Cloro, Fl4) Halogênios (Iodo, Cloro, Flúúor, Bromo):or, Bromo):

��IodoIodo:: antissantisséépticoptico para a pele a 2%, ou em solupara a pele a 2%, ou em soluçção com iodeto de potão com iodeto de potáássio.ssio.

•• Eficaz contra bactEficaz contra bactéérias, fungos, vrias, fungos, víírus e protozorus e protozoáários parasitas.rios parasitas.

•• Oxida componentes celulares e proteOxida componentes celulares e proteíínas;nas;

•• Em concentraEm concentraçções elevadas elimina esporos.ões elevadas elimina esporos.

•• Desvantagens: danos Desvantagens: danos àà pele, manchas e alergias;pele, manchas e alergias;

��CloroCloro:: Muito utilizado no tratamento de Muito utilizado no tratamento de ááguas e nas indguas e nas indúústrias de laticstrias de laticíínios e alimentos.nios e alimentos.

•• Pode ser aplicado na forma de gPode ser aplicado na forma de gáás, hipoclorito de Nas, hipoclorito de Na++ ou de Caou de Ca++++, que gera , que gera áácido cido

hipoclorosohipocloroso �� oxidaoxidaçção de materiais celulares;ão de materiais celulares;

•• Eficaz contra fungos, bactEficaz contra fungos, bactéérias e vrias e víírus;rus;

•• ÉÉ eficiente, barato, de feficiente, barato, de fáácil uso, mas altamente reativo com a matcil uso, mas altamente reativo com a matééria orgânica.ria orgânica.

6) Agentes Químicos Esterilizantes:

�Aldeídos: Formaldeído e Glutaraldeído (menos irritante)

• Ação: Desnaturação das proteínas.

• É usado para a desinfecção de equipamentos médicos.

�Gases esterilizantes: Ex.: Óxido de etileno

• Ação: Desnaturação de proteínas;

• É um excelente agente esterilizante, especialmente para objetos que seriam

danificados pelo calor.

MÉTODOS QUÍMICOS

5) Peroxigênios

�Ex.: H2O2 e Ozônio:

�Ação oxidante � atuam sobre anaeróbios;

MÉTODOS QUÍMICOS

7) Preservativos em alimentos

� Ácidos orgânicos ���� Ácidos acético, cítrico, lático, propiônico, benzóico,

sórbico;

�Adição de sal e açúcar ���� ↑↑↑↑ pressão osmótica;

� Salga a seco ou em salmoura ���� bacalhau, sardinha e outros pescados;

� Açúcar ���� geléias, doces em massas, frutas cristalizadas, frutas

glaceadas, leite condensado, melaço e mel.

SALGASALGA

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CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA CÃO DA CÁÁRIERIE

�� Fluoretos:Fluoretos:

�� Efeitos Efeitos anticariogênicosanticariogênicos ((≠≠≠≠≠≠≠≠ proposiproposiçções)ões)::

•• 11°°:: incorporaincorporaçção de ão de ííons fluoreto ao esmalte em desenvolvimento, tornandoons fluoreto ao esmalte em desenvolvimento, tornando--o o

mais resistente mais resistente àà desmineralizadesmineralizaççãoão bacteriana;bacteriana;

•• 22°°:: agem como agente antiagem como agente anti--bacteriano eficaz bacteriano eficaz �������� podem inibir enzimas da via podem inibir enzimas da via

glicolglicolííticatica;;

�� Agentes Antibacterianos:Agentes Antibacterianos:

1. 1. ClorexidinaClorexidina a 2% (a 2% (BiguanidaBiguanida):):

�� Excelente contra Excelente contra estreptococosestreptococos;;

�� SubstantividadeSubstantividade;;

�� Desvantagens: Desvantagens:

•• Cora os dentes com o tempo, altera a percepCora os dentes com o tempo, altera a percepçção gustativa e gosto amargo;ão gustativa e gosto amargo;

CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA CÃO DA CÁÁRIERIE

2.2. Compostos fenCompostos fenóólicoslicos

3.3. IodoIodo--povidonapovidona + H+ H22OO22

4.4. SanguinarinaSanguinarina

5. 5. TriclosanTriclosan �������� eficaz na redueficaz na reduçção do não do n°° de bactde bactéérias formadoras da placa e na rias formadoras da placa e na

redureduçção da gravidade da gengiviteão da gravidade da gengivite

�� Melhor tratamento:Melhor tratamento:

Uso diUso diáário de agentes antibacterianos rio de agentes antibacterianos ++ DebridamentoDebridamento mecânico mecânico ++ FlFlúúoror

Pouco eficazes como agentes antibacterianos oraisPouco eficazes como agentes antibacterianos orais

CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA DOENÃO DA DOENÇÇA PERIODONTALA PERIODONTAL

�� Agentes de combate Agentes de combate ààs Doens Doençças as PeriodontaisPeriodontais::

�� ClorexidinaClorexidina;;

�� Fluoretos:Fluoretos: principalmente antiprincipalmente anti--ccáárie, porrie, poréém pode ser eficaz no combate m pode ser eficaz no combate àà

placa e gengivite;placa e gengivite;

�� ÓÓleos Essenciais (leos Essenciais (Compostos fenCompostos fenóólicoslicos): Ex.: ): Ex.: ListerineListerine

•• Atividade antiAtividade anti--placa moderada e sem efeitos colaterais;placa moderada e sem efeitos colaterais;

•• Controle da candidControle da candidííase oral;ase oral;

CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA DOENÃO DA DOENÇÇA PERIODONTALA PERIODONTAL

�� Compostos QuaternCompostos Quaternáários de Amôniorios de Amônio

•• Ex.: Cloreto de Ex.: Cloreto de cetilpiridcetilpiridíínionio �������� CepacolCepacol, Oral, Oral--BB

•• Atividade antiAtividade anti--placa moderada;placa moderada;

•• Efeitos colaterais: ardência na lEfeitos colaterais: ardência na lííngua, irritangua, irritaçção na mucosa e pigmentaão na mucosa e pigmentaçção reversão reversíível vel

no dente;no dente;

�� Agentes Agentes OxigenantesOxigenantes (Ex.: H(Ex.: H22OO22):):

•• ReduReduçção dos ão dos periodontopatperiodontopatóógenosgenos anaeranaeróóbios;bios;

•• Efeitos colaterais: queimaduras e irritaEfeitos colaterais: queimaduras e irritaçções teciduais com o uso crônico a 3%;ões teciduais com o uso crônico a 3%;

�� SanguinarinaSanguinarina (Extrato de Planta) (Extrato de Planta) �������� Parece reduzir a placa e a inflamaParece reduzir a placa e a inflamaçção gengival;ão gengival;

�� TriclosanTriclosan::

•• Pode ser considerado um composto fenPode ser considerado um composto fenóólico;lico;

•• Menos efetivo que a Menos efetivo que a clorexidinaclorexidina;;

•• Presente em dentifrPresente em dentifríícios (cios (colgatecolgate) e sabonetes;) e sabonetes;

CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DO CÃO DO CÁÁLCULO DENTALLCULO DENTAL

�� Uso de dentifrUso de dentifríícios e cios e enxaguatenxaguatóóriosrios bucais:bucais:

�� PirofosfafatoPirofosfafato tetrasstetrassóódicodico (Ex.: (Ex.: ColgateColgate TartarTartar ControlControl))

�� Cloreto de ZnCloreto de Zn (Ex.: (Ex.: PreventPrevent))

�� Mecanismo de AMecanismo de Açção:ão:

•• Bloqueiam os sBloqueiam os síítios receptores no esmalte para o fosfato de tios receptores no esmalte para o fosfato de

ccáálcio (encontrado na saliva) e inibem a formalcio (encontrado na saliva) e inibem a formaçção de cristais do ão de cristais do

ccáálculo.lculo.