Coprocultivos, priorizacin de colonias, interpretacin y

Qu informar?

Edgar Gonzales

Infeccin Gastrointestinal

Las manifestaciones clnicas ms destacadas de las gastroenteritis son fiebre, vmitos, dolor abdominal y diarrea moderada a intensa.

Causada por microorganismos que adems de diarrea inducen inflamacin.

Aparecen leucocitos PMN en heces.

No producen toxinas.

Qu buscamos?

Salmonella

Shigella

Campylobacter

Yersinia

Aeromonas

Plesiomonas

Vibrio

E. coli diarrogenicas..???

Primero lo primero

Recepcin de la muestra: si no se procesa

inmediatamente

colocar en CB

Datos completos: Nombre, edad, sexo, procedencia, tto previo, tiempo de enfermedad.

Caractersticas de la muestra

Reaccin inflamatoria

Coloracin VAGO (opcional)

1 da: Siembra primaria

Mc Conkey (sorbitol)

SS

XLD

TCBS

Campylobacter (selectivo - filtrado)

Selenito F

2 da: Lectura de placas

MEDIO VIRARON SOSPECHOSAS CRECIMIENTO

MC 100 % 0 % 3 +++

XLD 90 % 10 % 3 +++

SS 95 % 5 % 2 ++

F - SS

TCBS No hubo Crecimiento -

Campy 24h NEG

Colonias

rojas

Colonias

transparentes

Colonias

amarillas Rojas transparente c/s pto negro (H2S)

Colonias

rojas

Col. transparentes

c/s pto negro (H2S)

Cualquiera:

amarillo - verde

Salmonella-Shigella

Lactosa negativo Lactosa positivo Con H2S

XLD: xilosa-lisina-desoxicolato

Sospechosas: Shigella Sospechosas: Salmonella

Colonias amarillas: Positivas a CH

TCBS: tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa

Medio para Campylobacter

Medios selectivos con ATB: Skirrow, Butzler, Karmali

Filtrado (0.45um)

Temperatura 42 C

Tiempo 24 48 Horas

Microaerofilia: 5-10% O2

10-15% CO2

80-85% N2

2 da: Resiembra

Una serie de cada tipo de colonia sospechosa: TSI LIA

Siembra en SS a partir del Selenito F

TSI-LIA-TSA

Selenito F

Pruebas bioqumicas TSI y LIA Dr. Grados - 1982

TSI GAS H2S LIA INDOLENTEROBACTERIAS

K/A - - K/A - o + Shigella

A/A o K/A - - K/K o K/N + Escherichia

A/A o K/A - - K/A - o + Enterobacter

A/A - - K/K - Serratia

K/A - - R/A - Proteus

K/A - - R/A + Providencia

A/A - - A/A o K/A - o + Yersinia

TSI GAS H2S LIA INDOLENTEROBACTERIAS

A/A o K/A 2+ - K/K o K/N + Escherichia

A/A 4+ - K/K - o + Klebsiella

A/A o K/A 3+ - K/K o K/A - Enterobacter

K/A o A/A 2+ - K/K - Serratia

K/A (+) - K/A o R/A + Proteus

K/A + - K/A o A/A - S. paratyphi A

GRUPO II HIDROGENO SULFURADO (H2S) NEGATIVO

ANAEROGENICOS (GAS NEGATIVO)

AEROGENICOS (GAS POSITIVO)

TSI GAS H2S LIA INDOL ENTEROBACTERIAS

K/A - o + K/K - Salmonella typhi

TSI GAS H2S LIA INDOL ENTEROBACTERIAS

K/A 2+ - o 4+ K/K - Salmonella

K/A o A/A 2+ - o 4+ K/K - Arizona

K/A o A/A 2+ - o 4+ K/K - o + Citrobacter

K/A o A/A 2+ 4+ R/A - o + Proteus

K/A 2+ 4+ K/K - o + Edwarsiella

TSI GAS H2S LIA INDOL BACTERIAS

K/A o A/A - o 2+ - K/K o K/A + Aeromonas

K/A - - K/K + Plesiomonas

K/A o A/A* - - K/K + Vibrio cholerae

K/A - - K/K** + V. parahaemolyticus

K/K o K/N - - K/K o K/N - BNF

K/K o K/N - 4+ K/K o K/N - Ps. putrefaciens

GRUPO I HIDROGENO SULFURADO (H2S) POSITIVO

ANAEROGENICOS (GAS NEGATIVO)

AEROGENICOS (GAS POSITIVO)

GRUPO III OXIDASA POSITIVO

Proced TSI LIA

Oxi Bacteria Sero S P G H2S S P Ind

MC1 A A - - K A + - E coli

MC2 K A + - K K + - E coli

MC3 K A + - K K + + Aeromonas

XLD K A - - K A - - Shigella

XLD K A - - R A - - Proteus

SS K A - - K K + + Plesiomonas

SS A A - - A A - - Yersinia

TCBS K A - - K K + + Vibrio

3 da: lectura de diferenciales

Salmonella

S. typhi Salmonella sp.

Con que lo puedo confundir

Citrobacter Proteus

Aislamientos

Hospital (%)

Lab. Privado (%)

Shigella flexneri B 53.2 20.0

Shigella sonnei D 32.5 58.0

Shigella boydii C 8.4 6.0

Shigella dysenteriae A 0.8 0.0

Shigella sp. 5.1 16.0

Shigella

Shigella

Medio Selectivo: Karmali

Mtodo de Filtracin

Campylobacter

Yersinia enterocolitica

TSI LIA

Los oxidasa positivos

Fermentadores de glucosa

Indol positivo

Prueba de oxidasa

Aeromonas

Plesiomonas

Vibrio

Tambin puede ser Aeromonas

E. coli diarrognicas

E. coli son organismos de la flora intestinal normal.

La definicin de E. coli diarrognicas est basada en la demostracin de ciertas caractersticas de virulencia.

Esto hace difcil el diagnstico y tratamiento oportuno.

E. coli

Ochoa TJ; 2006. Diarrea Producida por Escherichia coli

Mtodos diagnsticos

Cultivos Mc Conkey

Cultivo en Mc Conkey-Sorbitol para O157:H7

Serologa para E. Coli

Aglutinacin en latex para O157:H7

ELISA o Cromatografia para shiga toxina

PCR convencional

PCR a tiempo real

Debemos utilizar ANTISUEROS para la deteccin de EPEC?

Identificacin con Vitek 2

inoculo Lectura cod. barras Tarjetas en el Rack

Llenado de tarjetas Lectura de tarjetas Eliminacin de tarjetas

Serologa

Shigella: B, D, C y A

Salmonella: antisuero somtico polivalente luego por grupos D, B, C...

Yersinia

Vibrio

Positivo

Negativo

Reporte de resultados

Cultivo positivo:

Shigella flexneri grupo B

Salmonella grupo D

Campylobacter spp.

Aeromanas hydrophila

Cultivo negativo a:

Salmonella, Shigella, Campylobacter y Vibrio

Aislamientos INSN 2011 - 2012

Microorganismo Nmero % Campylobacter sp. 261 45.9 Shigella flexneri 135 23.7 Shigella sonnei 74 13.0 Aeromonas sp. 35 6.2 Salmonella sp. 33 5.8 Plesiomonas shigelloides 10 1.8 Shigella boydii 10 1.8 Shigella sp. 7 1.2 Yersinia enterocolitica 2 0.4 Escherichia coli, enteroinvasive (EIEC) 1 0.2 Vibrio cholerae 1 0.2 TOTAL 569 100.0

Gracias por la atencin

"Lo que tenemos que aprender,

lo aprendemos hacindolo"

egones_5@hotmail.com