CULTURA "in vitro" DA ORQUDEA Oncidium ceboleta Swartz
CULTURA "in vitro" DA ORQUDEA Oncidium ceboleta Swartz.
Kelly Cristina L. Arajo1,Maria Solange D.
Cruz2(co-orientadora),Magdy Ahmed I.
Alloufra3(orientador)Laboratrio de Cultura de Tecidos Vegetais -
DBEZ / UFRNAv. Senador Salgado Filho, Campos Universitrio -
Natal/RNEndereo1: Rua Tiradentes, 79, Nazar , 59060.370.1-
INTRODUOA famlia Orquidaceae corresponde a maior dentre as
angiospermas. Estima-se que at a atualidade mais de 25.000 espcies,
derivadas de 750 gneros foram descritas, e mais de 30.000 hbridos
produzidos (WILLIAMS et al, 1980).Economicamente so plantas de
grande importncia para as empresas de jardinagem, devido ao longo
perodo de durao de suas flores, permitindo que as mesmas sejam
utilizadas como ornamentais. As orqudeas mais exploradas
comercialmente so os hbridos artificias, devido a possibilidade de
se produzir plantas que floresam na poca em que, haja escassez de
flores (WILLIAMS et al, 1980). A Vanilla planifolia a nica espcie
com frutos comestveis, sendo fonte natural da baunilha, usada como
aromatizante (JOLY, 1987). A comercializao das orqudeas tornou-se
economicamente rentvel, com a introduo da cultura assimbitica, onde
as tcnicas convencionais foram substitudas por mtodos de germinao
"in vitro" das sementes e por micropropagao do tecido meristemtico
(SILVA, 1986).O objetivo deste trabalho estalecer protocolos
adequando de cultura "in vitro" de sementes da orqudea Oncidium
cebolleta Swartz. utilizando o 6-Benzilaminopurina (BAP), visando
aumentar o ndice germinativo das referidas sementes, podendo servir
como tcnica para cultivar outras espcies de orqudeas.2 -
METODOLOGIAO material vegetal utilizado na pesquisa foi sementes da
espcie Oncidium cebolleta Swartz. proveniente de cpsula. Em
laboratrio, a cpsula foi transferida para a capela de fluxo laminar
e submetida a esterilizao em soluo de hipoclorito de sdio na
concentrao de 10% durante 15 minutos . Logo em seguida, o excesso
do hipoclorito de sdio foi retirado, fazendo-se 3 imerses em
recipientes contendo gua destilada e autoclavada . Realizada
assepsia, as sementes foram inoculadas em meio de cultura Murashige
& Skoog (1962), suplementado com 0,01mg/l do hormnio
6-Benzilaminopurina (BAP), 30 g/l de sacarose e 7g/l de Agar. No
meio, teve o pH foi ajustado em 4,0 - 5,8 e esterilizado no
autoclave a 1 atm por 15 minutos. Na fase de crescimento,
utilizou-se o mesmo meio com metade dos macronutrientes, sem a
presena do hormnio 6-Benzilaminopurina (BAP). As culturas contendo
as sementes foram transferidas para a sala de incubao sob condies
artificiais de luz (1000 a 2000 lux) e temperatura (26 C a 27 C).3-
RESULTADOS 3.1- ESTERILIZAONos 27 dias de germinao das sementes no
houve contaminao por fungos e bactrias. Este fato foi atribudo ao
uso de sementes ainda no interior do fruto devidamente fechado,
associado as boas condies da planta de origem, a esterilizao dos
equipamentos e principalmente a utilizao do hipoclorito de sdio.A
partir da primeira subcultura, ocorreram contaminaes por fungos e
bactrias em alguns frascos, as mesmas persistiram nas demais
subculturas. A causa de tais contaminaes foram relacionadas a fase
de manipulao dos instrumentos e vidraria.3.2- GERMINAO DAS
SEMENTES3.2.1- IntumescimentoAs sementes ficaram intumescidas 22
dias aps a inoculao, adquirindo a colorao verde. 3.2.2- Formao de
protocormosA maioria das sementes intumescidas atingiram a fase de
protocormo aps 27 dias, onde esta caracterizava-se pela forma
pontiaguda em uma das extremidades. 3.2.3- Desenvolvimento das
plntulas Em quatro meses de cultura surgiram os primrdios foliares,
sendo estes opostos entre si e em nmero de dois. Em dez meses a
folhagem da Oncidium cebolleta Swartz. tornou-se cilndrica, sendo
que algumas apresentaram manchas marrons distribudas ao longo de
sua estrutura.3.2.4- Formao das razesNa fase de protocormo no
observamos a presena de razes, estas s foram visualizadas aps
quatro meses de cultura, onde verificamos a formao de razes
esbranquiadas e outras verdes, sendo estas razes espessas e
fasciculadas.4 - CONCLUSESBaseado nos resultados obtidos podemos
concluir que:1- O hipoclorito de sdio (NaO2Cl), na concentrao de
10% durante 15 minutos proporcionou a esterilizao de 100% das
sementes na fase inicial da cultura;2- A utilizao do hormnio
6-Benzilaminopurina (BAP) na concentrao de 0,01mg/l foi suficiente
para estimular o aumento da taxa germinativa;3- O uso do meio
Murashige & Skoog (1962) na fase inicial do trabalho foi ideal
para promover uma cultura rica em protocormos;4- A reduo dos
macronutrientes a metade, favoreceu o rpido desenvolvimento das
folhas e das razes das plantas.5 - REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS1- JOLY,
B.A. Botnica: Introduo Taxonomia Vegetal. 8 ed. So Paulo: Nacional,
1987. v.4.2- MURASHIGE, T.; Skoog, F. A resied medium for rapid
growth and bioassays with tabaccotissue cultures. Physiol. Plant.
1962.3- SILVA, W. Cultivo de Orqudeas no Brasil. 6 ed . So Paulo:
Nobel, 1986.4- SUTTLEWORTH, F. S. et al. Orqudeas. Guia dos
orquidfilos. Rio de Janeiro: Expresso e Cultura, 1987.5- WILLIAMS,
B. et al. Orchids For Eveyone. London: Salamander Books, 1980.
