Klinički značaj određivanja AMH i ovarijskih biljega u serumu i folikularnoj tekućini u

procjeni plodnosti tijekom postupaka MO

D. Tišlarić-Medenjak, K. Kuna, I. Bolanča, I. Zec, D. Ljiljak, R. Rakoš Justament, J. Tomić,, Ž. Bukovec Megla

Klinika za ginekologiju i porodništvoEndokrinološki laboratorij, Klinika za onkologiju i nuklearnu medicinu

KBC “Sestre milosrdnice”

Fiziologija AMH

• Dimerna molekula glikoproteina, član TGF-β obitelji

• Ključna uloga u diferencijaciji muškog spola

• Od 8. tjedna gestacije sintetizira se u Sertolijevim stanicama

indukcija regresije Müllerovih cijevi

AMH i fiziologija jajnika

• Sinteza AMH odvija se u granuloza stanicama preantralnih i

antralnih folikula.

• Postiže biološki učinak putem transmembranskog

serin/treonin kinaza receptora tipa II (AMHRII).

• Glavni fiziološki učinak AMH u jajniku – inhibicija ranih stadija

razvoja folikula (Themmen, 2005; Visser i Themmen, 2005).

Razvoj folikula i sinteza AMH

Čimbenici utjecaja na koncentraciju AMH

A. B.

A. Koncentracija AMH s obzirom na životnu dob.B. Koncentracija AMH u menstruacijskom ciklusu.

Čimbenici utjecaja na koncentraciju AMH

• AMH je nedektabilan 3-5 dana nakon obostrane ooforektomije

AMH isključivo ovarijskog porijekla (La Marca et al, 2005)

• Potvrđena jaka povezanost između koncentracije AMH i

ovarijske rezerve AMH kao prediktor menopauze (Sowers et

al, 2008)

• Minimalna varijabilnost unutar i između menstruacijskih ciklusa

omogućava određivanje AMH neovisno o danu ciklusa (La

Marca et al, 2006)

Čimbenici utjecaja na koncentraciju AMH

• Na koncentraciju AMH ne utječe:– Trudnoća

– Terapija GnRH agonistima

– Kratkotrajna terapija OHK

• AMH i PCO – 2-3 puta veće koncentracije AMH u odnosu na zdravu populaciju

(Fallat et al, 2003)

– Korelacija koncentracije AMH i izraženosti PCO• Viši AMH kod PCO i inzulinske rezistencije

• Viši AMH kod amenoroičnih u odnosu na oligomenoroične bolesnice s PCO

AMH kao prediktor ovarijskog odgovora u MO• Prediktori ovarijskog odgovora tijekom ovarijske stimulacije:

– Broj antralnih folikula– AMH– FSH (3. dan)– estradiol (3. dan)– inhibin B (3. dan)– dob

• Metaanaliza (Broer et al, 2008)– Usporedba serumske koncentracije AMH i broja antralnih

folikula u procjeni ovarijskog odgovora– AMH jednako dobar kao određivanje broja antralnih

folikula u procjeni ovarijskog odgovora• Prednost AMH – mogućnost određivanja neovisno o fazi

ciklusa

AMH u folikularnoj tekućini

• U grupi s visokim folikularnim AMH – viša stopa implantacije i kliničke trudnoće

• AMH u folikularnoj tekućini predstavlja dobar dodatni prediktor u procjeni

kvalitete oocite

• Mogući važan doprinos u izboru oocite u državama s restriktivnim zakonom u

pogledu broja oplođenih oocita

Ciljevi istraživanja:

• Odrediti hormonski status u serumu i folikularnoj tekućini u

svrhu procjene funkcije osovine hipofiza – jajnici

• Usporediti koncentracije AMH s drugim ovarijskim biljezima u

serumu i folikularnoj tekućini

• Ustanoviti povezanost koncentracije AMH u serumu i

folikularnoj tekućini

Ispitanice i metode:

• Studija je uključila 25 žena obrađenih u Odjelu za humanu

reprodukciju, Klinika za ginekologiju i porodništvo, KBCSM

• Normoovulatorni ciklusi s razmacima 30 4 dana

• Uzorci krvi i folikularnih tekućina prikupljeni su na dan

punkcije jajne stanice u prirodnom ciklusu.

Ispitanice i metode:

• Uzorci su čuvani na -20°C do analize

• Serum: anti-Müllerov hormon (AMH), lutropin (LH), folitropin

(FSH), estradiol (E2), progesteron (P), dehidroepiandrosteron-

sulfat (DHEAS), testosteron (T), protein nosač spolnih

hormona (SHBG), prolaktin (PRL), tireotropni hormon (TSH)

• Folikularna tekućina: AMH, E2, P, T. Koncentracije su izražene

prema sadržaju proteina.

Rezultati:Serum* Folikularna tekućina (FF) * Koncentracije / proteini u FF *

AMH 10,8 (0,9 – 42,3) pmol/L 40,8 (3,5 – 171,7) pmol/L 0,9 (0,1 - 4,7) pmol/g

E2 0,5 (0,2 – 1,0) nmol/L 1360 (499 - 6274) nmol/L 27,3 (10,7 – 157,4) nmol/g

P 4,0 (1,6 – 22,7) nmol/L 17020 (2835 – 30736) nmol/L 400 (89 - 650) nmol/g

T 1,4 (0,5 – 2,6) nmol/L 35,0 (20,6 – 83,2) nmol/L 0,8 (0,4 – 2,1) nmol/g

SHBG 61,2 (32,4 – 143,5) nmol/L

Izračunati slob. T 14,9 (4 – 38,1) pmol/L

DHEAS 7,4 (3,0 – 21,7) μmol/L

FSH 12,6 (4,9 – 20,9) IU/L

LH 26,8 (10,8 – 44,9) IU/L

TSH 1,6 (0,5 – 4,3) mIU/L

Prolaktin 9,3 (6,3 – 30,9) μg/L

Proteini 42,0 (32,0 – 54,3) g/L

*Medijan (raspon između 5.-95. percentila)

Uspoređivanje koncentracija hormona u serumu i FF

Rezultati:Koncentracije i povezanost AMH u serumu i FF obzirom na dob ispitanica:

Dob(godine)

AMH (serum)(pmol/L)

AMH (FF)(pmol/g)

P = 0,007

r = 0,63

37 (27 - 42) 10,8 (0,9 – 42,3) 0,9 (0,1 - 4,7) *Medijan (5. – 95. percentil)

A. Usporedba koncentracija AMH u serumu i FFB. Usporedba koncentracija AMH u serumu i FF prema sadržaju proteina

A. B.

Zaključci:• Izmjerene koncentracije gonadotropina i ovarijskih biljega

potvrdile su uredni hormonski status osovine hipofiza-jajnici, a koja je važan preduvjet za ovulaciju.

• Ispitivanjem smo ustanovili postojanje umjerene, ali statistički značajne povezanosti koncentracija AMH u serumu i FF (r = 0.63, P<0.001).

• Koncentracija AMH u folikularnoj tekućini – mogući kriterij u selekciji oocite?

HVALA NA PAŽNJI