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Determinación de Ácido Úrico 2015 instrucciones para la practica de laboratorio
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Q.F Luz Kathia Hernández Calderón
DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
MÉTODOS
DE DONDE PROVIENE EL ÁCIDO ÚRICO
• Degradación de ADN y ARN.
• Se convierte en nucleótidos genera un proceso
metabólico (catabolismo).
• Un adulto normal puede producir alrededor de 500 mg por día.
• 80 % es excretado por orina y el resto se degrada en nuestro
organismo.
CARACTERÍSTICAS
• Compuesto nitrogenado cuya fórmula es C5H4N4O3 .
• Producto final del metabolismo del nitrógeno en el cuerpo humano
cuando este descompone sustancias llamadas purinas.
• La mayor parte del ácido úrico se disuelve en la sangre donde viaja a
los riñones y es excretada en la orina.
• Si el cuerpo produce demasiado ácido úrico o no lo elimina lo
suficiente, la persona se puede enfermar con afecciones renales o
artríticas.
• Los nucleótidos puricos son degradados 1ero.
a xantinas e hipoxantinas como productos
intermedios, oxidándose finalmente ác. úrico
por la acción de la enzima xantinaoxidasa.
• La formación del ác. úrico tiene lugar
mayormente en el hígado.
• La vía renal es el principal mecanismo de
regularización de la uricemia.
Contenido de purinas de los alimentos:
Grupo 1: alto en purinas:
Anchoas, arenque sardinas, caballa, mejillones, sardinas,
vísceras, embutidos, caldos de carne.
Grupo 2: moderado contenido de purinas: Carnes en
general, pescados, aves.
Hortalizas: espárragos, porotos secos, lentejas, espinaca,
hongos
Grupo 3: bajo contenido de purinas:
Frutas y verduras, cereales y subproductos, lácteos y
subproductos, nueces, aceites, azúcar, condimentos, chocolate.
MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓN
1.- Método químico :
Ác. Úrico + H3PW12O40
Alantoína +
CO2 + Azul de Tungsteno
MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓNMétodo Químico
Fundamento:
El ácido úrico de la muestra, previa desproteinización con ácido
fosfotúngstico preformado, reacciona en medio alcalino de
carbonato de sodio con el reactivo fosfo – litio – túngstico,
produciéndose un color azul (Azul de Tungsteno) que es
proporcional a la concentración de ácido úrico de la muestra, y se
mide colorimétricamente a 660 nm.
2.- Métodos enzimáticos:
Acido Úrico UOD Alantoína + H2O2
H2O2 + DCBS + 4-AAP POD H2O + Comp.
ColoreadoLeyenda:Ac. 3,5- Dicloro-2-HidroxiBencensulfónico (DCBS)
MÉTODO ENZIMÁTICO• Fundamento:
• El ácido úrico es oxidado por la enzima específica uricasa generándose Alantoína
y H2O2, el cual en una reacción mediada por la enzima POD
• (Peroxidasa), reacciona con el Ac. 3,5- Dicloro-2-HidroxiBencensulfónico y 4 AAP
(4-aminoantipirina) produciéndose un compuesto coloreado con un máximo de
absorción a 520 nm, en cantidad proporcional a la cantidad de ácido úrico
presente en la muestra.
PROCEDIMIENTO DEL MÉTODO COLORIMÉTRICO
Técnica para suero
1.- Desproteinización: en un tubo de centrífuga colocar 2 mL de
agua destilada, 250 µL de Ácido Túngstico y 250 µL de suero. Agitar
vigorosamente, esperar 5 minutos y centrifugar.
PROCEDIMIENTO DEL MÉTODO COLORIMÉTRICO
2.- Colorimetría:B S D
Desproteinizado 1.250 mL
Agua destilada 1.250 mL 2.5 mL
Standard 25 µL
Reactivo 1 250 µL 500 µL 250 µL
Reactivo 2 250 µL 500 µL 250 µL
Mezclar por inversión y colocar en B.M entre 22 a 28 °C. Entre 30 y 45 minutos después, leer al Espectro a 660 nm, llevando el aparato a cero con el Blanco.
CÁLCULOS:
Factor = 100 mg/ L Absorbancia St
Ácido Úrico (mg/L) = Factor x Abs. Muestra
VALORES NORMALES
Suero o plasma
Mujeres Hombres
Adultos 2,5 - 6,8 mg/dL 3,6 - 7,7 mg/dL
1-4 años 1,7-5,1 mg/dL 2,2-5,7 mg/dL
5-11 años 2,0-6,4 mg/dL 3,0-6,4 mg/dL
12-14 años 2,2-6,1 mg/dL 3,2-6,9 mg/dL
15-17 años 2,2-6,4 mg/dL 3,5-7,1 mg/dL
Orina: 250-750 mg/24 h
LOS NIVELES POR ENCIMA DE LO NORMAL (HIPERURICEMIA) PUEDEN DEBERSE A:
- Acidosis
- Alcoholismo
- Diabetes
- Gota
- Hipoparatiroidismo
- Intoxicación por plomo
- Leucemia
- Nefrolitiasis
- Policitemia vera
- Insuficiencia renal
- Toxemia de embarazo
- Dieta rica en purinas
- Ejercicio excesivo
IMPORTANCIA CLÍNICA• Es un análisis de laboratorio que se realiza por separado o en una
orden general bioquímica sanguínea.
• Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden
en el metabolismo de las sustancias que lo originan o de defectos
de eliminación.
• La cantidad total de ácido úrico en el plasma circulante depende
de la síntesis, catabolismo endógeno, así como también de la
ingesta y del aclaramiento renal de las purinas.
Artritis gotosa > 90 mg/L
• El ácido úrico aumentado en plasma se asocia
epidemiológicamente a enfermedades cardiovasculares
como el infarto de miocardio, accidente
cerebrovascular, hipertensión e insuficiencia cardiaca.
• Se ha propuesto tomar la concentración en plasma de
ácido úrico >4 mg/dL como un signo de alerta.
GRACIAS