Diagnóstico microbiológico

Ana Gabriela Fuentes Nava

¿Tos productiva?... inducirla Tres muestras de expectoración matutina Tres días separados NOM

Leonard y cols… En 3 especímenes:Sensibilidad de baciloscopía 67% 71% 72%

Baciloscopía Alta especificidad Baja sensibilidad (5000, 10000 bacilos por

ml.) No detecta viabilidad ni especie.

Hallazgo de bacilos ácido-alcohol-resistentes (BAAR) en extensiones teñidas y examinadas al microscopio.

Primera evidencia de la presencia de micobacterias en una muestra clínica

Técnicas de tinción Carbolfucsina o de Ziehl-Neelsen.

Observado con el objetivo de inmersión 100x

Bacterias-Batones-Rosa-rojo -Fondo azul (azul de metileno)

Procedimientos fluorescentes Auramina rodamina Alta sensibilidad, más rápida.

Bacteria-Bastón delgado-Fluorescente (amarillo-verde, naranja-negro)

Resultado Escala cuantitativa…valorar severidad al

tiempo del diagnóstico y monitorizar respuesta.

(-) Ausencia de BAAR en 100 campos microscópicos observados

(+)10-99 BAAR en 100 campos observados

(++) 1-10 BAAR en 50 campos observados

(+++) >10 BAAR en 20 campos observados

Cultivo Sensibilidad 83-93%-(10 a 100 microorganismos necesarios)

Especificidad 98%

Permite identificar la especie Realizar pruebas de sensibilidad Pruebas de sensibilidad Tipificación genética

Medios de cultivo…

Sólido, basado en huevo. ESTÁNDAR… Más lento…

Lowen-Stein-Jensen

Colonias de Mycobaterium Tuberculosis en medio Lowen-stein-Jensen después de 8 semanas de incubación

AgarMiddlebrook 7H10 y 7H11

Líquidos Middlebrook 7H12

Medios Lowen-Stein-Jensen 7H10 Y 7H11-Detecta micobacterias en menos de 4 semanas-Incubación 6-8 semanas antes de poder ser

negativos

Sistemas automatizados… Detección no radiométrica… más seguros Miden cambios en presión de gas, producción

de CO2, consumo de O2.

BACTEC 9000

Tubo Indicador de Crecimiento Micobacteriano (MGIT)

Identificación definitiva Producción de niacina y reducción de nitrato. Análisis cromatográfico Sondas moleculares Amplificación de regiones hipervariables del

ARN ribosómico 16S (1-2 Días)

Micobaterias detectables en 14 días, aisladas en 21 días.

Necesario para monitoreo epidemiológico y evaluar Programa Nacional de Control de Tuberculosis

Pacientes con VIH, menor sensibilidad del cultivo.

Gracias