Diagnóstico Histológico de CIN II y la Utilización de Biomarcadores. Presentación preliminar Autores: Jaen, A.; Saez, M.; Rosas, P.; Wernicke A.; Velazco, A.; Perrotta, M.

Congreso del cincuentenario

De la Sociedad Argentina de Patología del

Tracto Genital Inferior y Colposcopía

1. El cáncer cérvico-uterino (CCU) es el tercer

cáncer más frecuente en mujeres de todo el

mundo y el segundo de países

subdesarrollados.

2. Alrededor del 86 % de los casos se

diagnosticaron en países en vías de

desarrollo.

3. En la Argentina se diagnostican alrededor de

4.000 casos nuevos por año (incidencia de

19.7) y mueren 2.000 mujeres por esta

enfermedad (Tasa de mortalidad de 7.4)

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Epidemiología

MSAL. Estadisticas Vitales. Información básica 2011; 5(54)1-132. Jemal A Global Cancer statistics. Ca Cancer J Clin. 2011;61:69–90

1. Las lesiones intraepiteliales de alto

grado son las verdaderas precursoras

del CCU por lo que es fundamental el

correcto diagnóstico.

2. Los sucesivos cambios en la

nomenclatura de la LIE han traído

confusión en la interpretación y manejo

clínico.

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Lesiones precursoras

ACCP Guidelines. Journal of Lower Genital Tract Disease 2012; 16(3):1-29. Discacciatti M, el all. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2011; 155(2):204-8

Castle P, Obstet Gynecol. 2009; 113(1):18-25.

En caso particular de CIN II nos enfrentamos a

múltiples desafíos como:

• La reproducibilidad del diagnóstico

• La definición de su perfil biológico (remisión

40-58 %).

La importancia de su correcto diagnostico

posibilita el tratamiento conservador,

disminuyendo las posibles complicaciones a largo

plazo sobre la fertilidad y los resultados

obstétricos.

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CIN II

ACCP Guidelines. Journal of Lower Genital Tract Disease 2012; 16(3):1-29. Al-Halal H. Arch Gynecol Obstet 2013; 287(2):245-250

Jin G, Arch Gynecol Obstet 2014; 289(1):85-99 Bruinsma FJ, BJOG 2011; 118(9):1031-41c

1. Re-evaluar todas las muestras de biopsias

dirigidas con diagnóstico de CIN II por 2

patólogos encargados de la sección de

patología ginecológica en el Servicio de

Anatomía Patológica del Hospital Italiano de

Buenos Aires (HIBA), identificando el grado

de concordancia.

2. Confirmar el diagnóstico de CIN II por medio

de la utilización de la inmunohistoquímica

para p16 y ki-67 (30-9).

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores..

Objetivos

Tipo de estudio: Estudio de corte transversal retrospectivo.

Población en estudio: Mujeres con diagnóstico de CIN II por

biopsia dirigida de lesiones colposcópicas de sospecha en el

periodo transcurrido entre Enero de 2010 a Diciembre de 2013

estudiadas en el la sección de PTGI (Patología del Tracto Genital

Inferior) del HIBA.

Criterios de inclusión:

• Pacientes con diagnóstico de CIN II en material histológico de

biopsias dirigidas, en el periodo transcurrido entre Enero 2010 a

Diciembre 2013.

Criterios de exclusión:

• Pacientes con diagnóstico de CIN III o mayor lesión histológica.

• Pacientes con imposibilidad para realización de IHQ por

muestra escasa o casos en consulta en los que no contábamos

con tacos en parafina

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Materiales y Métodos

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Materiales y Métodos

Re evaluación por dos patólogos expertos del material en formol e incluido en

parafina con cortes semiseriados de 5 micrones, que se colorearon con H&E.

Se realizaron técnicas de inmunohistoquímica para ki 67 y p16.

Ac primarios de VENTANA desarrollados para su uso en los módulos de tinción de

portaobjetos automatizados VENTANA BenchMark XT

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Materiales y Métodos: Interpretación de las

tinciones. P16

p16+ p16-

El patrón de tinción celular para CINtec p16

Histology es nuclear y citoplasmático:

a. Positiva: Sobreexpresión mediante una

tinción difusa continua de las células de las

capas celulares basal y parabasal.

b. Negativo: La tinción focal una tinción

aisladas o pequeños grupos de células.

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Materiales y Métodos: Interpretación de las

tinciones/ resultados previstos

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Materiales y Métodos: Interpretación de las

tinciones. Ki 67

ki 67 superficial Ki 67 basal- para basal

A diferencia del p16, el ki 67 puede mostrar positividad difusa en

lesiones no HPV relacionadas.

• El Ki-67 es una proteína nuclear expresada en las células

proliferantes. Durante el ciclo celular, el antígeno Ki-67 está

presente en las fases G1, S, G2 y M, pero está ausente en la

fase G0 (quiescente).

• En el epitelio exocervical con displasia de alto grado, se

observa tinción nuclear positiva hasta en los dos tercios

superiores del epitelio mientras que en el epitelio normal la

tinción positiva se encuentra limitada a la capa basal y para

basal.

• Sin embargo, a diferencia del p16, el ki 67 puede mostrar

positividad difusa en lesiones no HPV relacionadas

(metaplasia pavimentosa, lesiones reactivas o reparativas)

• Aparente valor predictivo de grado y progresión de lesiones

esta en estudio

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Materiales y Métodos: Interpretación de las

tinciones/ resultados previstos

. Robert J. Kurman. Blaustein’s Pathology of the Female genital Tract. sixth edition. Springer; 2011. Pinto AP, Crum CP, Hirsch MS. MOLECULAR MARKERS OF EARLY CERVICAL NEOPLASIA. Diagn Histopathol (Oxf). 2010 Oct

1;16(10):445-454.

N: 65

Periodo: 2010-2013

2 casos excluidos por material escaso en

biopsia.

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Resultados

Patólogo 1 Patólogo 2 N° de casos (%)

CIN2 45 49 42 (66.6)

CIN2 recategorizado como CIN3

18 14 21 (33.3)

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Resultados

CIN 2 CIN 3

• Se recategorizaron como CIN 3 un total de 21

casos.

• No se recategorizó ningún caso como lesión de

bajo grado o como simuladores benignos.

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Resultados: Heterogeneidad morfológica del

CIN 2. Diagnósticos diferenciales CIN2 vs CIN1 CIN 2 en contexto cervicitis

CIN 2 vs metaplasia inmadura Corte tangencial

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores

Resultados de IHQ: p16

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores

Resultados de IHQ: Ki67

Se encontró una buena correlación entre ambas

marcaciones.

• Tres casos mostraron una discordancia:

• 2 casos: p16 + y ki 67 con marcación basal

• 1 caso: p16 – y ki 67 con marcación en

todo el espesor del epitelio.

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Resultados: Correlación entre marcación con ki 67 y

p16

Ki 67 Marcación basal

Ki67 marcación superficial

Total

P 16 positivo 2 (5,13%) 37 39

P16 negativo 2 1 (33.3%) 3

Total 4 38 42

Título

Resultados

HyE p16 ki67

HyE p16 ki67

• El diagnóstico de CIN II es

controvertido ya que hay imágenes

histológicas difíciles de diferenciar con

tinción convencional.

• Con la utilización de la

inmunohistoquímica (IHQ) la

reproducibilidad diagnostica sería más

precisa

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Conclusión

• Nuestra serie muestra una buena correlación

morfológica e inmunohistoquimica.

• La diferenciación de CIN 2 y lesión mayor fue

lograda con cortes de HyE.

• En el diagnostico diferencial de CIN 2 con sus

simuladores benignos (metaplasia inmadura,

epitelio atrófico, cambios epiteliales reactivos)

el uso de biomarcadores fue de ayuda.

• Buena practica utilizar la IHQ de rutina para una

correcta caracterización de este tipo de

lesiones.

Título

Conclusión

Proyecto futuro correlación clínica,

morfológica, inmunohistoquímica y de

biología molecular de pacientes con

diagnóstico de CIN 2

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Presentación Preliminar

• ACCP Guidelines. Journal of Lower Genital Tract Disease 2012; 16(3):1-29.

• Al-Halal H. Arch Gynecol Obstet 2013; 287(2):245-250 • Bruinsma FJ, BJOG 2011; 118(9):1031-41c • Castle P, Obstet Gynecol. 2009; 113(1):18-25. • Darragh, et al, The Lower Anogenital Squamous Terminology

Standardization Project for HPV-Associated Lesions: Background and Consensus Recommendations from the College of American Pathologists and the American Society for Colposcopy and Cervical Pathology. Arch Pathol Lab Med, 136, 1266- 97.

• Discacciatti M, el all. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2011; 155(2):204-8

• Jemal A Global Cancer statistics. Ca Cancer J Clin. 2011;61:69–90 • Jin G, Arch Gynecol Obstet 2014; 289(1):85-99 • MSAL. Estadísticas Vitales. Información básica 2011; 5(54)1-132.

Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.

Bibliografía

Muchas Gracias.

Tte. Gral. J. D. Perón 4190 - Buenos Aires, Argentina Tel.: (5411) 4959-0200 - www.hospitalitaliano.org.ar