Upload
resresfir
View
216
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
1/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
IV. HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN
Praktikum kali ini membahas tentang Pengujian Aktivitas Enim dalam
bebera!a sa"uran dan buah#buahan$ Enim adalah satu atau bebera!a gugus
!oli!e!tida % !rotein& "ang ber'ungsi sebagai katalis %sen"a(a "ang mem!er)e!at
!roses reaksi tan!a habis bereaksi& dalam suatu reaksi kimia$ Enim bekerja
dengan )ara menem!el !ada !ermukaan molekul at*at "ang bereaksi dan
dengan demikian mem!er)e!at !roses reaksi %+e,ann- .$,-1//&$
Per)e!atan terjadi karena enim menurunkan energi !engakti'an "ang
dengan sendirin"a akan mem!ermudah terjadin"a reaksi$ ebagian besar enim
bekerja se)ara khas- "ang artin"a setia! jenis enim han"a da!at bekerja !ada satu
ma)am sen"a(a atau reaksi kimia$ al ini disebabkan !erbedaan struktur kimiatia! enim "ang bersi'at teta!$
a"uran dan buah*buahan masih melakukan kegiatan metabolisme
(alau!un sudah ter!isah dari tanaman indukn"a$ +alam sa"ur dan buah !un
masih berlangsung reaksi*reaksi biokimia "ang melibatkan enim$ Aktivitas
enim da!at men"ebabkan !erubahan !ada bahan !angan$ Ada "ang berdam!ak
baik- ada !ula "ang berdam!ak buruk terhada! bahan !angan$
alah satu )ara untuk inaktivasi enim "aitu blansing$ lansing adalah
!erlakuan !anas ti!e !asteurisasi "ang tujuan utaman"a menonakti'kan enim-
(alau!un sebagian mikroorganisme ada "ang ikut mati$ %Tjahjadi- $ dan $
,arta$ 2011&$ ama !emanasan menentukan e'ekti'itas inaktivasi enim$ 6arena
katalase dan !eroksidase bersi'at heat*resistan)e- maka kedua enim ini digunakan
sebagai indikator$
Praktikum kali ini "ang akan dilakukan adalah !engujian aktivitas enim
dalam bebera!a sa"uran dan buah*buahan$ am!el "ang digunakan dalam
!raktikum ini adalah a!el- bun)is- kentang- (ortel- dan nenas$
Pengujian "ang dilakukan dalam !raktikum ini meli!uti tes !eroksidasae-
uji katalase- !erlakuan terhada! jaringan dan !engaruh !erlakuan terhada!
!en)oklatan enimatis$
4.1 Uji Peroksidase
http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Polipeptida&action=edithttp://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Katalishttp://id.wikipedia.org/wiki/Katalishttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Energi_pengaktifanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Energi_pengaktifanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Struktur_kimia&action=edithttp://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Katalishttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Energi_pengaktifanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Struktur_kimia&action=edithttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Polipeptida&action=edit
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
2/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
Peroksidase diduga besar !eranann"a !ada kerusakan oksidati' selama
!en"im!anan sa"uran dan buah*buahan$ 7eaksi "ang dikatalisis oleh !eroksidase
melibatkan hidrogen !eroksida sebagai !enerima- dan sen"a(a A2 sebagai donor
atom hidrogen$ 7eaksin"a adalah sebagai berikut 8
292 : A2 !eroksidase 2292 : A
Peroksidase meru!akan enim "ang stabil terhada! !emanasan- oleh sebab
itu sering digunakan sebagai indek e'ektivitas blansing$ ;ji !eroksidase ini
dilakukan terhada! masing*masing sam!el untuk mengetahui a!akah setelah
dilakukann"a !emanasan enim !eroksidase tidak akti' lagi$ ebelum melakukan
uji !eroksidase ini- terlebih dahulu dilakukan !roses !engirisan- !engirisan
bertujuan agar sam!el mudah untuk dihan)urkan$ 6emudian blansing terhada!
sam!el selama 0$ ?at ini digunakan untuk
merekasikan 292$ elanjutn"a ditambahkan 1 ml 292$ @ungsi !enambahan
292 adalah sebagai stimulan "ang akan menentukan ada atau tidakn"a enim
!eroksidase dalam sam!el "ang diamati$ alu tabung didiamkan selama 4 menit$
etelah itu diamati !erubahan "ang terjadi$ A!abila (arna larutan berubah
menjadi )oklat kemerahan- maka !ositi' terda!at !eroksidase$
E'ektivitas blansing ditandai dengan tidak adan"a aktivitas !eroksidase-
karena !eroksidase meru!akan enim "ang lebih tahan terhada! !anas- dengan
demikian reaksi "ang si'atn"a negati' da!at di!akai sebagai !ertanda hilangn"a
aktivitas enim$
+an berikut ini adalah hasil !engamatann"a8
Tabel 1. Hasil Pena!a"an Tes Peroksidase
Sa!#el $% 1% &% '%
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
3/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
6entang + + + +
enas
Coklat
kemerahan
++++
Coklat
kemerahan
++
Coklat
kemerahan
+
ening
un)isCoklat
kemerahan
+
Coklat kemerahan
++
Coklat ++ Coklat +
A!eloklat
kemerahan
Kuning ++
+ Kuning ++
6uning
!u)at
Borteloklat
kekuningan
Coklat
kekuningan
+
Coklat
kekuningan
++
Coklat
kekuningn +
++
%umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&
erdasarkan hasil !engamatan di atas- semua sam!el ke)uali kentang
menunjukan hasil "ang sama "aitu dida!at !en)oklatan "ang semakin berkurangsaat (aktu blansing "ang semakin lama- "aitu 5 menit$ Ini sesuai dengan literatur
dimana dengan !roses blansing mekanisme !en)oklatan ini da!at semakin
di!erlambat dibandingkan tan!a blansing$
Enim !eroksidase ini didenaturasikan dengan !anas- melebihi atau sekitar
titik isoelektris dari kom!onen !rotein "ang terda!at di dalamn"a$ emakin lama
blansing- maka !rotein "ang meru!akan kom!onen dalam enim akan semakin
terdenaturasi sehingga enim tidak bisa bekerja akti'$ 9leh karena itu !ada
!raktikum ini !en)oklatan semakin berkurang seiring dengan semakin laman"a
!roses blansing "ang dilakukan$
am!el kentang- hasil "ang dida!atkan !ada !erlakuan blansing adalah
negati' karena tidak adan"a !erubahan (arna menjadi )oklat$ al ini menandakan
bah(a tidak adan"a aktivitas !eroksida !ada kentang "ang telah diblansing$
4.( Uji )a"alase
6atalase memiliki !eranan dalam kerusakan oksidati' selama
!en"im!anan sa"uran$ Enim katalase digunakan bersama*sama dengan glukosa
dan oksidase untuk menghilangkan kelebihan hidrogen !eroksida "ang digunakan
sebagai bahan !enga(et bahan makanan$ ama haln"a dengan !eroksidase-
katalase meru!akan enim "ang termasuk dalam golongan oksidoreduktase$
Enim ini mengkatalisis !engubahan 2 molekul idrogen Peroksida menjadi air
dan oksigen dengan reaksi sebagai berikut 8
katalase
2292 229 : 92
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
4/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
Enim katalse juga mem!un"ai kemam!uan untuk menggunakan 29
dalam oksidasi 'enol- alkohol dan donor hidrogen lainn"a$ Pada uji katalase ini-
indikator dikatakan !ositi' jika sam!el "ang digunakan menghasilkan gelembung
92$ Gelembung 92 ini menunjukkan bah(a sam!el tersebut mengandung enim
katalase$
Enim katalase bersi'at heat*resistant %tahan !emanasan C2 D& dalam
sa"uran dan buah*buahan dan da!at menimbulkan !erubahan "ang tidak
dikehendaki selama masa !en"im!anan$ Agar !erubahan tersebut tidak terjadi-
maka harus dilakukann"a !enekanan aktivitas enim katalase tersebut$ al "ang
da!at dilakukan dengan blansing$ +ari !roses blansing ini kita da!at mengetahui
e'ektivitas blansing "ang baik agar enim katalase hilang$ 9leh karena itu- dalam !raktikum kali ini dilakukann"a uji katalase !ada sam!el*sam!el "ang telah
disebutkan di atas$
ebelum melakukan uji katalase ini- terlebih dahulu dilakukan !roses
!engirisan- !engirisan bertujuan agar sam!el mudah untuk dihan)urkan$
6emudian blansing terhada! sam!el selama 0
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
5/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
asil uji katalase ini- semua sam!el menunjukkkan hasil !ositi' "ang
ditandai dengan adan"a gelembung oksigen$ al ini menandakan bah(a
terda!atn"a enim katalase !ada sa"uran dan buah*buahan tersebut$
Perlakuan blansing mengakibatkan terda!atn"a gelembung*gelembung
udara$ amun ban"akn"a gelembung tidak sama untuk setia! sam!el$
Gelembung "ang dihasilkan !ada setia! sam!el berbeda ada "ang bertambah dan
bahkan ada "ang mengalami !engurangan gelembung oksigen "ang disebabkan
karena enim katalase "ang terkandung !ada sam!el telah diinaktivasi akibat
!erlakuan blansing$ amun !erbedaan jumlah gelembung tidak terlalu signi'ikan
antara antara blansing 1
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
6/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
digunakan untuk memotong sam!el adalah !isau besi dan !isau stainless steel $
al "ang !ertama dilakukan dalam !raktikum ini adalah sam!el dibersihkan
dengan air bersih- lalu diku!as kulitn"a$ am!el diiris dengan !isau besi dan !isau
stainless steel $ elanjutn"a ditunggu sam!ai (aktu terjadi !en)oklatan$ Perubahan
(arna "ang terjadi diamati dan dibandingkan (arna "ang dihasilkan oleh sam!el
"ang di!otong dengan !isau besi dengan sam!el "ang di!otong dengan !isau
stainless steel $ erikut ini adalah hasil !engamatann"a8
Tabel &. Hasil Pena!a"an ,arinan "er+ada# Ba+an -A
)elo!#ok Sa!#el/ak"* -!eni"
P. S"ainless s"eel P. Besi
1 6entang 12 24
2 enas 5 3
3 un)is 30 30
4 A!el 5 2-5
5 Bortel 30 30
%umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&
am!el "ang diiris dengan !isau stainless steel lebih lama !en)oklatann"a
bila dibandingkan dengan !isau besi$ al ini disebabkan karena stainless steel
sendiri tidak bereaksi dengan oksigen diudara bebas sehingga tidak terjadi !roses
oksidasi$ edangkan !ada sam!el "ang di!otong dengan !isau biasa atau !isau
besi "ang mengalami !erubahan "aitu terjadin"a !en)oklatan !ada sam!el- hal ini
terjadi karena terjadin"a !roses oksidasi !ada saat !emotongan- "aitu bereaksin"a
besi dengan oksigen "ang ada di udara bebas$
.adi- usaha "ang da!at dilakukan untuk men)egah atau mengurangi kontak
dengan logam berat agar tidak terjadin"a !en)oklatan enimatis adalah dengan
menggunakan alat*alat !engolahan email atau stainless steel $
4.&.( Perlak*an denan Berbaai )ondisi
Pada !raktikum kali ini- kondisi bahan "ang dilakukan !ada sam!el ini
antara lain sam!el dibiarkan- sam!el diiris*iris- dimemarkan- dan dihaluskan$
akukan !engamatan sam!ai terjadi !en)oklatan !ada sam!el$ asil
!engamatann"a adalah sebagai berikut8
Tabel 4. Hasil Pena!a"an ,arinan "er+ada# Ba+an -B
)elo!#ok Sa!#el /arna
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
7/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
Di+al*skan Di!e!arkan Di#o"on
1 6entang Coklat ++++ Coklat + Coklat ++
2 enas 6uning Coklat + Coklat ++
3 un)is ijau ijau ijau
4 A!el Putih kecoklatan+
Putih kecoklatan++
Putih kecoklatan+++
5 Bortel 9range 9range 9range
%umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&
erdasarkan hasil !engamatan- !roses !en)oklatan terjadi sangat )e!at
!ada !ermukaan bahan !angan "ang dihaluskan$ al ini terjadi karena jaringan
sam!el "ang digunakan mengalami kerusakan- dan jaringan "ang han)ur tersebut
akan )e!at menjadi gela! a!abila kontak dengan udara- karena terjadin"a !roses
oksidasi "ang )e!at terjadi !ada sam!el$
Pada sam!el "ang di!otong*!otong- dimemarkan- dan diiris*iris- kerusakan
jaringann"a tidak begitu !arah dibanding sam!el "ang dihaluskan- sehingga
men"ebabkan laman"a !roses !en)oklatan "ang terjadi$ Pada sam!el "ang utuh-
!roses !en)oklatan memerlukan (aktu "ang lama karena tidak terjadi kontak
antara jaringan bahan !angan dengan oksigen "ang ada di udara bebas$
uas !ermukaan "ang berekasi dengan oksigen juga ber!engaruh dalam
ke)e!atan reaksi !en)oklatan dan intensitas (arna )oklat "ag dihasilkan$ emakin
besar luas !ermukaan "ang bersentuhan dengan udara %oksigen& semakin )e!at
rekasi !en)oklatan "ang terjadi dan semakin !ekat (arna )oklat "ang dihasilkan$
al tersebut da!at dilihat dari hasil !engamatan terhada! sam!el "ang dihaluskan-
dimana rata # rata (arna )oklat "ang dihasilkan !ada sam!el lebih !ekat dari!ada
(arna )oklat "ang dihasilkan !ada sam!el "ang di!otong # !otong$ elain itu-
jumlah sen"a(a 'enol "ang terda!at !ada masing # masing sam!el juga da!at
mem!engaruhi ke)e!atan reaksi !en)oklatan$ emakin ban"ak sen"a(a 'enol
!ada suatu bahan !angan- semakin )e!at reaksi !en)oklatan "ang terjadi$
4.4 Penar*+ Perlak*an Ter+ada# Pen0okla"an Eni!a"is
Pengaruh !erlakuan terhada! !roses !en)oklatan enimatis "ang terjadi
karena adan"a enim !oli'enolase adalah untuk men)egah terjadin"a !en)oklatan
se)ara )e!at %Binarno- @$ G-1//&$
arutan "ang di!akai !ada !raktikum ini ada 3 - "aitu asam askorbat atau
vitamin 5 >- asam sitrat 1 >- dan larutan a=uades$ Penambahan asam askorbat
!ada bahan akan mengahambat kerja enim karena si'atn"a "ang meru!akan
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
8/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
antiosidan$ @ungsi dari antioksidan ini akan mengikat radikal bebas dan tidak
menghasilkan sen"a(a !eroksidase "ang da!at menimbulkan (arna )oklat$
Antioksidan juga akan menigkat logam "ang ber'ungsi dalam enim$
Penambahan asam sitrat akan berguna untuk men)egah !roses !en)oklatan
!ula karena si'atn"a "ang akan menurunkan ! menjadi asam dan membuat
radikal bebas "ang terda!at !ada bahan terikat dan membentuk garam$ Akan teta!i
'ungsi dari asam sitrat tidak sebaik !enambahan asam askorbat$
Pada !enggunaan larutan a=uades- enim "ang bekerja menjadi tidak
terlalu terganggu$ Proses !en)oklatan tidak terlalu dihambat$ Pada semuan"a
!roses !en)oklatan menjadi lebih lamabat karena !roses blansing "ang dilakukan-
!roses !emanasan meru!akan )ara "ang baik untuk menghambat !roses
!en)oklatan- karena dengan !emansan maka enim menjadi terlarut sebagian !ada
larutan dan !igmen # !igmen !ada bahan akan terlarut$
angkah !ertama "ang dilakukan dalam !raktikum ini adalah melakukan
blansing terhada! sam!el selama 1 6uning 6uning Kuning + Kuning ++
Asam sitrat
1>Putih Putih Putih Putih
A=uades Putih + Putih + Putih Putih
enas %2&
Fit 5> Putih PutihPutih
kekuningan
Putih
kuning +
Asam sitrat
1>Putih Putih
Putih
kekuningan
+
Putih ++
A=uades Putih Putih6uning
)erah
Putih
kekuningan
un)is %3&Fit 5> ijau
ijau
kekuningan6uning Kuning ++
Asam sitrat
1>ijau
ijau
kekuningan
6uning
!utih
Kuning
putih ++
A=uades ijau ijau )erah Hijau cerah Hijau cerah
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
9/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
+ ++
A!el %4&
Fit 5> Putih Putih Putih Putih
Asam sitrat
1>Putih Putih
Putih
kekuningan
Putih
ke)oklatan
A=uades Putih Putih Putihke)oklatan
6e)oklatan
Bortel %5&
Fit 5> Orange + 9rangeOrange
pucat +
Orange
pucat +++
Asam sitrat
1>Orange + 9range
Orange
pucat +
Orange
pucat ++
A=uades Orange + 9rangeOrange
pucat +
Orange
pucat ++
%umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&
+ari hasil !engamatan "ang dilakukan terlihat bah(a "ang lebih e'ekti'
digunakan untuk men)egah terjadin"a !en)oklatan umumn"a adalah dengan
!enambahan asam sitrat dibandingkan dengan vitamin $ al ini sesuai dengan
litelatur "ang di da!at bah(a "ang lebih baik digunakan untuk men)egah
!en)oklatan adalah dengan !enambahan asam sitrat$ edangkan !ada sam!el
dengan !enambahan akuades sebagian sam!el teta! mengalami !erubahan (arna
)oklat )uku! !ekat$ al ini disebabkan karena akuades bukan meru!akan at
antioksidan$
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
10/11
8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA
11/11
Ghea Amitri Ardianto
240210130005
TIP A1
DA2TA3 PUSTA)A
+e,ann- .$,$1//$ 6imia ,akanan$ Edisi kedua$ Penerbit IT- andung$
Tjahjadi- $ dan $ ,arta$ 2011$ Pengantar Teknologi Pangan Folume II$ Edisi6edua$ ;niversitas Padjadjaran @akultas Teknologi Industri Pertanian
.urusan Teknologi Industri Pangan- .atinangor$
Binarno- @$ G$ 1//$ 6imia Pangan dan Gii$ Penerbit PT Gramedia Pustaka
;tama- .akarta$