Enzim Kimpang GHEA

Embed Size (px)

Citation preview

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    1/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    IV. HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN

    Praktikum kali ini membahas tentang Pengujian Aktivitas Enim dalam

     bebera!a sa"uran dan buah#buahan$ Enim adalah satu atau bebera!a gugus

     !oli!e!tida % !rotein& "ang ber'ungsi sebagai katalis %sen"a(a "ang mem!er)e!at

     !roses reaksi tan!a habis bereaksi& dalam suatu reaksi kimia$  Enim bekerja

    dengan )ara menem!el !ada !ermukaan molekul at*at "ang bereaksi dan

    dengan demikian mem!er)e!at !roses reaksi %+e,ann- .$,-1//&$

    Per)e!atan terjadi karena enim menurunkan energi !engakti'an  "ang

    dengan sendirin"a akan mem!ermudah terjadin"a reaksi$ ebagian besar enim

     bekerja se)ara khas- "ang artin"a setia! jenis enim han"a da!at bekerja !ada satu

    ma)am sen"a(a atau  reaksi kimia$ al ini disebabkan !erbedaan struktur kimiatia! enim "ang bersi'at teta!$

    a"uran dan buah*buahan masih melakukan kegiatan metabolisme

    (alau!un sudah ter!isah dari tanaman indukn"a$ +alam sa"ur dan buah !un

    masih berlangsung reaksi*reaksi biokimia "ang melibatkan enim$ Aktivitas

    enim da!at men"ebabkan !erubahan !ada bahan !angan$ Ada "ang berdam!ak 

     baik- ada !ula "ang berdam!ak buruk terhada! bahan !angan$

    alah satu )ara untuk inaktivasi enim "aitu blansing$ lansing adalah

     !erlakuan !anas ti!e !asteurisasi "ang tujuan utaman"a menonakti'kan enim-

    (alau!un sebagian mikroorganisme ada "ang ikut mati$ %Tjahjadi- $ dan $

    ,arta$ 2011&$ ama !emanasan menentukan e'ekti'itas inaktivasi enim$ 6arena

    katalase dan !eroksidase bersi'at heat*resistan)e- maka kedua enim ini digunakan

    sebagai indikator$

    Praktikum kali ini "ang akan dilakukan adalah !engujian aktivitas enim

    dalam bebera!a sa"uran dan buah*buahan$ am!el "ang digunakan dalam

     !raktikum ini adalah a!el- bun)is- kentang- (ortel- dan nenas$

    Pengujian "ang dilakukan dalam !raktikum ini meli!uti tes !eroksidasae-

    uji katalase- !erlakuan terhada! jaringan dan !engaruh !erlakuan terhada!

     !en)oklatan enimatis$

    4.1 Uji Peroksidase

    http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Polipeptida&action=edithttp://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Katalishttp://id.wikipedia.org/wiki/Katalishttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Energi_pengaktifanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Energi_pengaktifanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Struktur_kimia&action=edithttp://id.wikipedia.org/wiki/Proteinhttp://id.wikipedia.org/wiki/Katalishttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Energi_pengaktifanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_kimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Reaksi_kimiahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Struktur_kimia&action=edithttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Polipeptida&action=edit

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    2/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    Peroksidase diduga besar !eranann"a !ada kerusakan oksidati' selama

     !en"im!anan sa"uran dan buah*buahan$ 7eaksi "ang dikatalisis oleh !eroksidase

    melibatkan hidrogen !eroksida sebagai !enerima- dan sen"a(a A2 sebagai donor 

    atom hidrogen$ 7eaksin"a adalah sebagai berikut 8

    292 : A2 !eroksidase 2292 : A

    Peroksidase meru!akan enim "ang stabil terhada! !emanasan- oleh sebab

    itu sering digunakan sebagai indek e'ektivitas blansing$ ;ji !eroksidase ini

    dilakukan terhada! masing*masing sam!el untuk mengetahui a!akah setelah

    dilakukann"a !emanasan enim !eroksidase tidak akti' lagi$ ebelum melakukan

    uji !eroksidase ini- terlebih dahulu dilakukan !roses !engirisan- !engirisan

     bertujuan agar sam!el mudah untuk dihan)urkan$ 6emudian blansing terhada!

    sam!el selama 0$ ?at ini digunakan untuk 

    merekasikan 292$ elanjutn"a ditambahkan 1 ml 292$ @ungsi !enambahan

    292 adalah sebagai stimulan "ang akan menentukan ada atau tidakn"a enim

     !eroksidase dalam sam!el "ang diamati$ alu tabung didiamkan selama 4 menit$

    etelah itu diamati !erubahan "ang terjadi$ A!abila (arna larutan berubah

    menjadi )oklat kemerahan- maka !ositi' terda!at !eroksidase$

    E'ektivitas blansing ditandai dengan tidak adan"a aktivitas !eroksidase-

    karena !eroksidase meru!akan enim "ang lebih tahan terhada! !anas- dengan

    demikian reaksi "ang si'atn"a negati' da!at di!akai sebagai !ertanda hilangn"a

    aktivitas enim$

    +an berikut ini adalah hasil !engamatann"a8

    Tabel 1. Hasil Pena!a"an Tes Peroksidase

    Sa!#el $% 1% &% '%

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    3/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    6entang + + + +

     enas

    Coklat 

    kemerahan

    ++++

    Coklat 

    kemerahan

    ++

    Coklat 

    kemerahan

    +

    ening

    un)isCoklat 

    kemerahan

    +

    Coklat kemerahan

    ++

    Coklat ++ Coklat +

    A!eloklat

    kemerahan

     Kuning ++

    + Kuning ++

    6uning

     !u)at

    Borteloklat

    kekuningan

    Coklat 

    kekuningan

    +

    Coklat 

    kekuningan

    ++

    Coklat 

    kekuningn +

    ++

    %umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&

    erdasarkan hasil !engamatan di atas- semua sam!el ke)uali kentang

    menunjukan hasil "ang sama "aitu dida!at !en)oklatan "ang semakin berkurangsaat (aktu blansing "ang semakin lama- "aitu 5 menit$ Ini sesuai dengan literatur 

    dimana dengan !roses blansing mekanisme !en)oklatan ini da!at semakin

    di!erlambat dibandingkan tan!a blansing$

    Enim !eroksidase ini didenaturasikan dengan !anas- melebihi atau sekitar 

    titik isoelektris dari kom!onen !rotein "ang terda!at di dalamn"a$ emakin lama

     blansing- maka !rotein "ang meru!akan kom!onen dalam enim akan semakin

    terdenaturasi sehingga enim tidak bisa bekerja akti'$ 9leh karena itu !ada

     !raktikum ini !en)oklatan semakin berkurang seiring dengan semakin laman"a

     !roses blansing "ang dilakukan$

    am!el kentang- hasil "ang dida!atkan !ada !erlakuan blansing adalah

    negati' karena tidak adan"a !erubahan (arna menjadi )oklat$ al ini menandakan

     bah(a tidak adan"a aktivitas !eroksida !ada kentang "ang telah diblansing$

    4.( Uji )a"alase

    6atalase memiliki !eranan dalam kerusakan oksidati' selama

     !en"im!anan sa"uran$ Enim katalase digunakan bersama*sama dengan glukosa

    dan oksidase untuk menghilangkan kelebihan hidrogen !eroksida "ang digunakan

    sebagai bahan !enga(et bahan makanan$ ama haln"a dengan !eroksidase-

    katalase meru!akan enim "ang termasuk dalam golongan oksidoreduktase$

    Enim ini mengkatalisis !engubahan 2 molekul idrogen Peroksida menjadi air 

    dan oksigen dengan reaksi sebagai berikut 8

    katalase

    2292  229 : 92

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    4/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    Enim katalse juga mem!un"ai kemam!uan untuk menggunakan 29

    dalam oksidasi 'enol- alkohol dan donor hidrogen lainn"a$ Pada uji katalase ini-

    indikator dikatakan !ositi' jika sam!el "ang digunakan menghasilkan gelembung

    92$ Gelembung 92  ini menunjukkan bah(a sam!el tersebut mengandung enim

    katalase$

    Enim katalase bersi'at heat*resistant %tahan !emanasan C2 D& dalam

    sa"uran dan buah*buahan dan da!at menimbulkan !erubahan "ang tidak 

    dikehendaki selama masa !en"im!anan$ Agar !erubahan tersebut tidak terjadi-

    maka harus dilakukann"a !enekanan aktivitas enim katalase tersebut$ al "ang

    da!at dilakukan dengan blansing$ +ari !roses blansing ini kita da!at mengetahui

    e'ektivitas blansing "ang baik agar enim katalase hilang$ 9leh karena itu- dalam !raktikum kali ini dilakukann"a uji katalase !ada sam!el*sam!el "ang telah

    disebutkan di atas$

    ebelum melakukan uji katalase ini- terlebih dahulu dilakukan !roses

     !engirisan- !engirisan bertujuan agar sam!el mudah untuk dihan)urkan$

    6emudian blansing terhada! sam!el selama 0

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    5/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    asil uji katalase ini- semua sam!el menunjukkkan hasil !ositi' "ang

    ditandai dengan adan"a gelembung oksigen$ al ini menandakan bah(a

    terda!atn"a enim katalase !ada sa"uran dan buah*buahan tersebut$

    Perlakuan blansing mengakibatkan terda!atn"a gelembung*gelembung

    udara$ amun ban"akn"a gelembung tidak sama untuk setia! sam!el$

    Gelembung "ang dihasilkan !ada setia! sam!el berbeda ada "ang bertambah dan

     bahkan ada "ang mengalami !engurangan gelembung oksigen "ang disebabkan

    karena enim katalase "ang terkandung !ada sam!el telah diinaktivasi akibat

     !erlakuan blansing$ amun !erbedaan jumlah gelembung tidak terlalu signi'ikan

    antara antara blansing 1

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    6/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    digunakan untuk memotong sam!el adalah !isau besi dan !isau  stainless steel $

    al "ang !ertama dilakukan dalam !raktikum ini adalah sam!el dibersihkan

    dengan air bersih- lalu diku!as kulitn"a$ am!el diiris dengan !isau besi dan !isau

     stainless steel $ elanjutn"a ditunggu sam!ai (aktu terjadi !en)oklatan$ Perubahan

    (arna "ang terjadi diamati dan dibandingkan (arna "ang dihasilkan oleh sam!el

    "ang di!otong dengan !isau besi dengan sam!el "ang di!otong dengan !isau

     stainless steel $ erikut ini adalah hasil !engamatann"a8

    Tabel &. Hasil Pena!a"an ,arinan "er+ada# Ba+an -A

    )elo!#ok Sa!#el/ak"* -!eni"

    P. S"ainless s"eel P. Besi

    1 6entang 12 24

    2 enas 5 3

    3 un)is 30 30

    4 A!el 5 2-5

    5 Bortel 30 30

    %umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&

    am!el "ang diiris dengan !isau stainless steel  lebih lama !en)oklatann"a

     bila dibandingkan dengan !isau besi$ al ini disebabkan karena stainless steel

    sendiri tidak bereaksi dengan oksigen diudara bebas sehingga tidak terjadi !roses

    oksidasi$ edangkan !ada sam!el "ang di!otong dengan !isau biasa atau !isau

     besi "ang mengalami !erubahan "aitu terjadin"a !en)oklatan !ada sam!el- hal ini

    terjadi karena terjadin"a !roses oksidasi !ada saat !emotongan- "aitu bereaksin"a

     besi dengan oksigen "ang ada di udara bebas$

    .adi- usaha "ang da!at dilakukan untuk men)egah atau mengurangi kontak 

    dengan logam berat agar tidak terjadin"a !en)oklatan enimatis adalah dengan

    menggunakan alat*alat !engolahan email atau stainless steel $

    4.&.( Perlak*an denan Berbaai )ondisi

    Pada !raktikum kali ini- kondisi bahan "ang dilakukan !ada sam!el ini

    antara lain sam!el dibiarkan- sam!el diiris*iris- dimemarkan- dan dihaluskan$

    akukan !engamatan sam!ai terjadi !en)oklatan !ada sam!el$ asil

     !engamatann"a adalah sebagai berikut8

    Tabel 4. Hasil Pena!a"an ,arinan "er+ada# Ba+an -B

    )elo!#ok Sa!#el /arna

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    7/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    Di+al*skan Di!e!arkan Di#o"on

    1 6entang Coklat ++++ Coklat + Coklat ++

    2 enas 6uning Coklat + Coklat ++

    3 un)is ijau ijau ijau

    4 A!el  Putih kecoklatan+

     Putih kecoklatan++

     Putih kecoklatan+++

    5 Bortel 9range 9range 9range

    %umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&

    erdasarkan hasil !engamatan- !roses !en)oklatan terjadi sangat )e!at

     !ada !ermukaan bahan !angan "ang dihaluskan$ al ini terjadi karena jaringan

    sam!el "ang digunakan mengalami kerusakan- dan jaringan "ang han)ur tersebut

    akan )e!at menjadi gela! a!abila kontak dengan udara- karena terjadin"a !roses

    oksidasi "ang )e!at terjadi !ada sam!el$

    Pada sam!el "ang di!otong*!otong- dimemarkan- dan diiris*iris- kerusakan

     jaringann"a tidak begitu !arah dibanding sam!el "ang dihaluskan- sehingga

    men"ebabkan laman"a !roses !en)oklatan "ang terjadi$ Pada sam!el "ang utuh-

     !roses !en)oklatan memerlukan (aktu "ang lama karena tidak terjadi kontak 

    antara jaringan bahan !angan dengan oksigen "ang ada di udara bebas$

    uas !ermukaan "ang berekasi dengan oksigen juga ber!engaruh dalam

    ke)e!atan reaksi !en)oklatan dan intensitas (arna )oklat "ag dihasilkan$ emakin

     besar luas !ermukaan "ang bersentuhan dengan udara %oksigen& semakin )e!at

    rekasi !en)oklatan "ang terjadi dan semakin !ekat (arna )oklat "ang dihasilkan$

    al tersebut da!at dilihat dari hasil !engamatan terhada! sam!el "ang dihaluskan-

    dimana rata # rata (arna )oklat "ang dihasilkan !ada sam!el lebih !ekat dari!ada

    (arna )oklat "ang dihasilkan !ada sam!el "ang di!otong # !otong$ elain itu-

     jumlah sen"a(a 'enol "ang terda!at !ada masing # masing sam!el juga da!at

    mem!engaruhi ke)e!atan reaksi !en)oklatan$ emakin ban"ak sen"a(a 'enol

     !ada suatu bahan !angan- semakin )e!at reaksi !en)oklatan "ang terjadi$

    4.4 Penar*+ Perlak*an Ter+ada# Pen0okla"an Eni!a"is

    Pengaruh !erlakuan terhada! !roses !en)oklatan enimatis "ang terjadi

    karena adan"a enim !oli'enolase adalah untuk men)egah terjadin"a !en)oklatan

    se)ara )e!at %Binarno- @$ G-1//&$

    arutan "ang di!akai !ada !raktikum ini ada 3 - "aitu asam askorbat atau

    vitamin 5 >- asam sitrat 1 >- dan larutan a=uades$ Penambahan asam askorbat

     !ada bahan akan mengahambat kerja enim karena si'atn"a "ang meru!akan

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    8/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    antiosidan$ @ungsi dari antioksidan ini akan mengikat radikal bebas dan tidak 

    menghasilkan sen"a(a !eroksidase "ang da!at menimbulkan (arna )oklat$

    Antioksidan juga akan menigkat logam "ang ber'ungsi dalam enim$

    Penambahan asam sitrat akan berguna untuk men)egah !roses !en)oklatan

     !ula karena si'atn"a "ang akan menurunkan ! menjadi asam dan membuat

    radikal bebas "ang terda!at !ada bahan terikat dan membentuk garam$ Akan teta!i

    'ungsi dari asam sitrat tidak sebaik !enambahan asam askorbat$

    Pada !enggunaan larutan a=uades- enim "ang bekerja menjadi tidak 

    terlalu terganggu$ Proses !en)oklatan tidak terlalu dihambat$ Pada semuan"a

     !roses !en)oklatan menjadi lebih lamabat karena !roses blansing "ang dilakukan-

     !roses !emanasan meru!akan )ara "ang baik untuk menghambat !roses

     !en)oklatan- karena dengan !emansan maka enim menjadi terlarut sebagian !ada

    larutan dan !igmen # !igmen !ada bahan akan terlarut$

    angkah !ertama "ang dilakukan dalam !raktikum ini adalah melakukan

     blansing terhada! sam!el selama 1 6uning 6uning  Kuning + Kuning ++

    Asam sitrat

    1>Putih Putih Putih Putih

    A=uades  Putih + Putih + Putih Putih

     enas %2&

    Fit 5> Putih PutihPutih

    kekuningan

     Putih

    kuning +

    Asam sitrat

    1>Putih Putih

     Putih

    kekuningan

    +

     Putih ++

    A=uades Putih Putih6uning

    )erah

    Putih

    kekuningan

    un)is %3&Fit 5> ijau

    ijau

    kekuningan6uning  Kuning ++

    Asam sitrat

    1>ijau

    ijau

    kekuningan

    6uning

     !utih

     Kuning 

     putih ++

    A=uades ijau ijau )erah  Hijau cerah Hijau cerah

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    9/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    + ++

    A!el %4&

    Fit 5> Putih Putih Putih Putih

    Asam sitrat

    1>Putih Putih

    Putih

    kekuningan

    Putih

    ke)oklatan

    A=uades Putih Putih Putihke)oklatan

    6e)oklatan

    Bortel %5&

    Fit 5> Orange + 9rangeOrange

     pucat +

    Orange

     pucat +++

    Asam sitrat

    1>Orange + 9range

    Orange

     pucat +

    Orange

     pucat ++

    A=uades Orange + 9rangeOrange

     pucat +

    Orange

     pucat ++

    %umber 8 +ata Pengamatan TIP A1- 2014&

    +ari hasil !engamatan "ang dilakukan terlihat bah(a "ang lebih e'ekti' 

    digunakan untuk men)egah terjadin"a !en)oklatan umumn"a adalah dengan

     !enambahan asam sitrat dibandingkan dengan vitamin $ al ini sesuai dengan

    litelatur "ang di da!at bah(a "ang lebih baik digunakan untuk men)egah

     !en)oklatan adalah dengan !enambahan asam sitrat$ edangkan !ada sam!el

    dengan !enambahan akuades sebagian sam!el teta! mengalami !erubahan (arna

    )oklat )uku! !ekat$ al ini disebabkan karena akuades bukan meru!akan at

    antioksidan$

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    10/11

  • 8/19/2019 Enzim Kimpang GHEA

    11/11

    Ghea Amitri Ardianto

    240210130005

    TIP A1

    DA2TA3 PUSTA)A

    +e,ann- .$,$1//$ 6imia ,akanan$ Edisi kedua$ Penerbit IT- andung$

    Tjahjadi- $ dan $ ,arta$ 2011$ Pengantar Teknologi Pangan Folume II$ Edisi6edua$ ;niversitas Padjadjaran @akultas Teknologi Industri Pertanian

    .urusan Teknologi Industri Pangan- .atinangor$

    Binarno- @$ G$ 1//$ 6imia Pangan dan Gii$ Penerbit PT Gramedia Pustaka

    ;tama- .akarta$