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創薬開発のためのセルベースアッセイおよびバイオケミカルアッセイ
Enzyme Fragment Complementation Technology
Enzyme Fragment Complementationの原理DiscoveRx独自のEnzyme Fragment Complementation (EFC) 技術は、二種のリコンビナントβ-ガラクトシターゼ (β-gal)フラグメントを利用した検出技術です。片方のタンパク質フラグメントをEnzyme Acceptor, EA、もう一方のペプチドフラグメントをEnzyme Donor, EDと呼びます。それぞれのフラグメントが結合すると活性型β-ガラクトシターゼを再構成します。この再構成されたβ-ガラクトシダーゼの酵素活性により化学発光基質を加水分解し、生じた化学発光シグナルを検出します。
EFC技術の特長• Robust – 高感度かつ精密なホモジニアスアッセイ• Qualified – 何百種類ものターゲットで検証済み（GPCRs, kinases, NHRs など）• Reliable – 世界中の主要な創薬研究グループによるアッセイ導入実績• Flexible – 低分子化合物およびバイオ医薬品（抗体やペプチドなど）両方に対応
Enzyme Donor (ED)
Enzyme Acceptor (EA)
Active EFC EnzymeSubstrate
Light
タンパク質間相互作用
EDEA
ターゲット探索
ED
ED
Cell-based
Biochemical
EAED
EA
EAED
EA
内在化
EA
EA
EA
EA
EAEA
ED
受容体二量体化
EA ED
産生物質の検出
EAadd
ED
ED
トラフィッキング
ED
EAEA
定量および分解
EA
ED
add
分泌および転移
EA
EA
ED
ED
add
EFC技術を応用した複数のアプリケーションDiscoveRxでは、独自のEFC技術を応用した複数のセルベースアッセイおよびバイオケミカルアッセイを提供しています。これらの創薬開発研究に役立つアプリケーションから、お客様のニーズに合わせて研究ツールをご選択いただけます。
PathHunter ®
InCELLHunter™
HitHunter®
分解されたタンパク質を含む細胞内タンパク質レベルの測定
タンパク質の細胞外への分泌や細胞間転移の研究
受容体の内在化を測定 細胞内産生物質（cAMP、cGMP、コルチゾールなど）の定量
セルベースアッセイ（細胞内ターゲット）およびバイオケミカルアッセイにより、ターゲットタンパク質に結合する化合物を同定
関与するタンパク質の同定（GPCR/アレスチン、NHR/コファクター、RTK/SH2など）
リガンド結合による受容体の二量体化を定量（RTK、ILなど)
タンパク質の細胞内移行(核、細胞膜、エンドソーム、細胞質）、薬理学的シャペロンの同定
© 2015 DiscoveRx Corporation. All Rights Reserved. DiscoveRx logo, PathHunter, HitHunter and DiscoveRx are registered trademarks of DiscoveRx Corporation. 20447 060415
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Enzyme Fragment Complementation Technology
複数のターゲットクラスにおいて1,000種類以上の機能アッセイを提供していますEFC技術を応用したセルベースアッセイおよびバイオケミカルアッセイは、複数のターゲットクラスの研究ツールとして活用されています
バイオ医薬品および低分子化合物両方に適したアプリケーション
PathwaysKinases EpigeneticsNHRsGPCRs
β-Arrestin
Interleukins
機能アッセイの特長 • 簡便なワンステップのプロトコル• 高い再現性
• 数千件もの査読された文献による実績• 標準的なルミノメーターによるシグナル検出 • 関連の生物学を直接的に評価
• Ready-to-useの凍結細胞と安定細胞株• HTSスクリーニングにも対応• 通常の生理活性を妨害しない最小のタグ• 高い血清耐性
10-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-60
100000
200000
300000
400000
500000
600000
Insulin Bioassay
Insulin [g/mL]
RL
U
Plate 2Plate 3
Plate 1
CHRM2 β-Arrestin Assay
10-10 10-8 10-6 10-4 10-20
25000
50000
75000
100000
125000 AcetylcholineCarbacholOxo-M
Compound [M]
RL
U
Bioassay for Insulin demonstrates high reproducibility with 3 separate plates tested.
Analysis of 3 ligands using the cholinergic receptor, muscarinic 2 (CHRM2) β-arrestin cell-based assay.
Obtain Excellent Reproducibility Analyze Various Pharmacologies
EFC技術に関する詳しい情報は、DiscoveRxウェブページをご参照ください。 www.discoverx.com/EFC
本社所在地: 42501 Albrae Street, Fremont CA 94538 USAURL: http://www.discoverx.com/電話: +1-510-979-1415 (内線123 日本語可) FAX: +1-510-979-1650Eメール: [email protected]
所在地: 〒135-0016 東京都江東区東陽2-2-20東陽駅前ビルURL: http://www.cosmobio.co.jp/技術サービス部電話: 03-5632-9616 FAX: 03-5632-9614Eメール: [email protected]
DiscoveRx EFC
