If you can't read please download the document
Upload
igor-joksimovic
View
214
Download
1
Embed Size (px)
DESCRIPTION
genetika
Citation preview
%LRKHPLMDQXNOHLQVNLKNLVHOLQD%LRKHPLMDQXNOHLQVNLKNLVHOLQD%LRKHPLMDQXNOHLQVNLKNLVHOLQD%LRKHPLMDQXNOHLQVNLKNLVHOLQD
*HQHWVNDLQIRUPDFLMD*HQHWVNDLQIRUPDFLMD*HQHWVNDLQIRUPDFLMD*HQHWVNDLQIRUPDFLMD
DNK je nosilac naslednih informacija u eliji, dok RNK u estvuju u prenoenju tih informacija i njihovom prevo enju u proteine.
RNK je nolisac naslednih informacija kod nekih virusa.
GHRNVLULERQXNOHLQVNHNLVHOLQH1.ULERQXNOHLQVNHGHRNVLULERQXNOHLQVNHNLVHOLQH1.ULERQXNOHLQVNHGHRNVLULERQXNOHLQVNHNLVHOLQH1.ULERQXNOHLQVNHGHRNVLULERQXNOHLQVNHNLVHOLQH1.ULERQXNOHLQVNHNLVHOLQH51.NLVHOLQH51.NLVHOLQH51.NLVHOLQH51.
Gra a nukleozida i nukleoidaGra a nukleozida i nukleoida
nukleotidnukleotid
nukleozidnukleozid
Azotne bazeAzotne baze
PentozePentoze Fosfatna grupaFosfatna grupa
Sastav DNK nukleotida:
dezoksiriboza
azotna baza (A, G, C ili T)
ostatak fosforne kiselina
Sastav DNK nukleotida:
dezoksiriboza
azotna baza (A, G, C ili T)
ostatak fosforne kiselinaSastav RNK nukleotida:
riboza
azotna baza (A, G, C ili U)
ostatak fosforne kiselina
Sastav RNK nukleotida:
riboza
azotna baza (A, G, C ili U)
ostatak fosforne kiselina
Hemijske veze u nukleotiduHemijske veze u nukleotidu
Nazivi nukleozida i nukleotidaNazivi nukleozida i nukleotida
Nukleotide moemo smatrati, s jedne strane kaoestre nukleozida (fosfate), a sa druge strane kaokiseline zbog prisustva ostataka fosforne kiselinepa im u skladu sa tim dajemo i nazive.
DezoksiribonukleotidiDezoksiribonukleotidi
dezoksiadenozin-5-monofosfatdezoksiadenozinmonofosfat5-dezoksiadenilna kiselinadezoksiadenilat
A, dA, dAMP
dezoksiadenozin
dezoksiadenozin-5-monofosfatdezoksiadenozinmonofosfat5-dezoksiadenilna kiselinadezoksiadenilat
A, dA, dAMP
dezoksiadenozin
NUKLEOTID:
SKRA ENICE:
NUKLEOZID:
dezoksiguanozin-5-monofosfatdezoksiguanozinmonofosfat5-dezoksiguanilna kiselinadezoksiguanilat
G, dG, dGMP
dezoksiguanozin
dezoksiguanozin-5-monofosfatdezoksiguanozinmonofosfat5-dezoksiguanilna kiselinadezoksiguanilat
G, dG, dGMP
dezoksiguanozin
DezoksiribonukleotidiDezoksiribonukleotidi
NUKLEOTID:
SKRA ENICE:
NUKLEOZID:
(dezoksi)timidin-5-monofosfat (dezoksi)timidinmonofosfat5-(dezoksi)timidilna kiselina(dezoksi)timidilat
T, dT, dTMP
(dezoksi)timidin
(dezoksi)timidin-5-monofosfat (dezoksi)timidinmonofosfat5-(dezoksi)timidilna kiselina(dezoksi)timidilat
T, dT, dTMP
(dezoksi)timidin
dezoksicitidin-5-monofosfat dezoksicitidinmonofosfat5-dezoksicitidilna kiselinadezoksicitidilat
C, dC, dCMP
dezoksicitidin
dezoksicitidin-5-monofosfat dezoksicitidinmonofosfat5-dezoksicitidilna kiselinadezoksicitidilat
C, dC, dCMP
dezoksicitidin
RibonukleotidiRibonukleotidi
adenozin-5-monofosfat adenozinmonofosfat5-adenilna kiselinaadenilat
A, AMP
adenozin
adenozin-5-monofosfat adenozinmonofosfat5-adenilna kiselinaadenilat
A, AMP
adenozin
guanozin-5-monofosfat guanozinmonofosfat5-guanilna kiselinaguanilat
G, GMP
guanozin
guanozin-5-monofosfat guanozinmonofosfat5-guanilna kiselinaguanilat
G, GMP
guanozin
NUKLEOTID:
SKRA ENICE:
NUKLEOZID:
RibonukleotidiRibonukleotidi
NUKLEOTID:
SKRA ENICE:
NUKLEOZID:
uridin-5-monofosfaturidinmonofosfat5-uridilna kiselinauridilat
U, UMP
uridin
uridin-5-monofosfaturidinmonofosfat5-uridilna kiselinauridilat
U, UMP
uridin
citidin-5-monofosfatcitidinmonofosfat5-citidilna kiselinacitidilat
C, CMP
citidin
citidin-5-monofosfatcitidinmonofosfat5-citidilna kiselinacitidilat
C, CMP
citidin
Povezivanje nukleotida u polinukleotidni nizPovezivanje nukleotida u polinukleotidni niz
Redosled nukleotida primarna struktura DNK i RNKRedosled nukleotida primarna struktura DNK i RNK
Po etak polinukleotidnog niza je 5 krajPo etak polinukleotidnog niza je 5 kraj
Genetska informacija je uskladitena u primarnoj strukturi nukleinske kiseline
-2 antiparalelna lanca formiraju dvostruki heliksformiranjem vodoni nih veza izme u komplementarnih baza i hidrofobnim interakcijama
jedna zavojnica je 3.4 nm (34A) i cini je oko 10.4 baznih parova (bp)
-precnik duplog heliksa je 2nm (20A)
-- rastojanje izmedju susednih baznih parova je 0.34 nm (3.4A)
Sekundarna struktura DNK dupli heliks
G-C: 3 vodoni ne vezeA-T: 2 vodoni ne veze
%%%%1.:DWVRQ1.:DWVRQ1.:DWVRQ1.:DWVRQ&ULFN&ULFN&ULFN&ULFNVWUXNWXUDVWUXNWXUDVWUXNWXUDVWUXNWXUDGHVQD]DYRMQLFDGHVQD]DYRMQLFDGHVQD]DYRMQLFDGHVQD]DYRMQLFDSUHFQLNKHOLNVDQPESSUHFQLNKHOLNVDQPESSUHFQLNKHOLNVDQPESSUHFQLNKHOLNVDQPESSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDQPQPQPQP
$$$$1.1.1.1. GHVQD]DYRMQLFDGHVQD]DYRMQLFDGHVQD]DYRMQLFDGHVQD]DYRMQLFDSUHFQLNKHOLNVDQPESSUHFQLNKHOLNVDQPESSUHFQLNKHOLNVDQPESSUHFQLNKHOLNVDQPESSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDQPQPQPQP
====1.1.1.1. OHYD]DYRMQLFDSUHFQLNOHYD]DYRMQLFDSUHFQLNOHYD]DYRMQLFDSUHFQLNOHYD]DYRMQLFDSUHFQLNKHOLNVDQPESSRKHOLNVDQPESSRKHOLNVDQPESSRKHOLNVDQPESSR]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFD]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFD]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFD]DYRMQLFLMHGQD]DYRMQLFDQPQPQPQP
1.MHIOHNVL1.MHIOHNVL1.MHIOHNVL1.MHIOHNVLEEEELODQPROHNXOPR]HLPDWLUD]OLFLWHNRQIRUPDFLRQHIRUPHXLODQPROHNXOPR]HLPDWLUD]OLFLWHNRQIRUPDFLRQHIRUPHXLODQPROHNXOPR]HLPDWLUD]OLFLWHNRQIRUPDFLRQHIRUPHXLODQPROHNXOPR]HLPDWLUD]OLFLWHNRQIRUPDFLRQHIRUPHX]DYLVQRVWLRGVHNYHQFHED]DLLOLXVORYDL]RORYDQMD]DYLVQRVWLRGVHNYHQFHED]DLLOLXVORYDL]RORYDQMD]DYLVQRVWLRGVHNYHQFHED]DLLOLXVORYDL]RORYDQMD]DYLVQRVWLRGVHNYHQFHED]DLLOLXVORYDL]RORYDQMD
Struktura RNK
Opte karatkteristike:
Riboza, uracil
Obi no jednolan ana, ipak esto prisutna sekundarna i tercijerna struktura
Nosilac naslednih informacija nekih virusa
Vrste:
iRNK, tRNK, rRNK u estvuju u sintezi proteina
druge RNK u estvuju u sintezi i obradi RNK
Neke RNK imaju enzimsko dejstvo
Pakovanje DNK u eliji
Eukarioti DNK spakovana u hromozome, interakcija sa histonskim i nehistonskim proteinima
Prokarioti superspiralizovana cirkularna DNK, interakcija sa RNK i proteinima
Nukleozomi prvi nivo pakovanja
30 nm vlakno slede i nivo pakovanja
u estvuje histon H1
30 nm vlaknonukleozomi
Dvolan ana zavojnica DNK
Nukleozomi
Nukleozomski paketi
Petlje
Trake na hromozomima
Metafazni hromozom
1.VHSUHSLVXMH1.VHSUHSLVXMH1.VHSUHSLVXMH1.VHSUHSLVXMHX51.D51.X51.D51.X51.D51.X51.D51.QRVLQRVLQRVLQRVLLQIRUPDFLMX]DLQIRUPDFLMX]DLQIRUPDFLMX]DLQIRUPDFLMX]DVLQWH]XSURWHLQDVLQWH]XSURWHLQDVLQWH]XSURWHLQDVLQWH]XSURWHLQD
&HQWUDOQDGRJPDPROHNXODUQHELRORJLMH&HQWUDOQDGRJPDPROHNXODUQHELRORJLMH&HQWUDOQDGRJPDPROHNXODUQHELRORJLMH&HQWUDOQDGRJPDPROHNXODUQHELRORJLMH
Replikacija (replika=kopija)
Proces dupliranje molekula DNK pri kome od jednog nastaju dva potpuno identi na molekula DNK.
Semikonzervativan proces
Semidiskontinuiran proces
roditeljskimolekul
DNK
razdvajanje lanaca pri emu
e svaki posluiti kao
matrica za sintezu novog
lanca
komplementarno sparivanje baza
dva novonastala
molekula DNK
SEMIKONZERVATIVNI MODEL REPLIKACIJE
DNA-polimeraza uvek sintetiu novi lanac u smeru 5-3
(matrica se ita u 3-5 smeru)
DNK-polimeraza ne moe zapo eti (inicirati) sintezu novog lancaDNK
zapo inje je primaza (RNK polimeraza)
DNK-polimeraza se vezuje za
dezoksribonukleozidtrifosfate
DNK-polimeraza kopira DNK sa
vrlo visokom ta no u
-greka prilikom replikacije 10 -9
DNK-polimerazama glavni enzim replikacije
formira se estarska veza izmedju 5fosfata novog nukleotida i 3 hidroksilne grupe na kraju lanca koji se sintetie
sinteza novog lanca u 5 3 smeru, na osnovu komplementarnosti
DNK polimeraza se vezuje za deoksiribonukleozid trifosfate (dATP, dGTP, dCTP, dTTP)
pirofosfat se osloba a (dalje u 2Pi), obezbe uje energiju za vezivanjedezoksiribonukleozid monofosfata (dAMP, dGMP, dCMP, dTMP)
enzim ostaje stalno vezan za replikacionu viljusku
Opti pregled replikacije - Bakterijska DNK
Replikacija cirkularne DNK:
- zapo inje u replikativnom po etku (origin replikacije) gde se vezuju proteini inicijatori replikacije
- odvija se u oba pravca istovremeno
- mesto replikacije (aktivne DNK sinteze) se ozna ava kao replikativna viljuka (uvek ih ima dve)
- replikacija se zavrava u terminacionom regionu
Replikacija kod bakterija
dve replikativne viljuke
Replikativna viljuka je asimetri na, oba lanca se sintetiu u 5-3 smeru, ali jedan lanac se sintetie kontinuirano (vode i lanac) a drugi diskontinuirano, u vidu Okazaki fragmenata koji se kasnije povezuju (lanac koji zaostaje).
=> Replikacija je semidiskontinuiran proces
Replikativna viljuka
Enzimi replikacije
1. DNK polimeraza
2. RNK polimeraza ili primaza enzim koji vri sintezu RNK po etnice (prajmera) na iji e 3
(RNK po etnica je neophodna kako za vode i lanac, tako i za svaki Okazaki fragment)
3. Ligaza- enzim koji povezuje Okazaki fragmente
(jako je vano da pre povezivanja Okazaki fragmenata, RNK po etnice budu ise ene i da se ta praznina popuni, a to vri enzim DNK polimeraza)
DNK polimerazu I
polimerazna aktivnost u smeru 5-3
egzonukleazna aktivnost u smeru 3-5
egzonukleazna aktivnost u smeru 5-3 .
DNK polimeraza II
polimerazna aktivnost u smeru 5-3
egzonukleazna aktivnost u smeru 3-5
DNK polimeraza III (DNK replikaza)
polimerazna aktivnost u smeru 5-3
egzonukleazna aktivnost u smeru 3-5
uklju ena u proces replikacije
uklju ena u procese reparacije
glavni enzim replikacije
Bakterijske DNK polimeraze
1. DNK helikaze (maine na ATP pogon)-omogu avaju raskidanje H-veza i otvaranje dvolan ane zavojnice
2. SSB proteini (single strand binding)- proteini koji se vezuju za jednolan anu DNK i odravaju replikativnu viljuku otvorenu
3. DNK TOPOIZOMERAZE-smanjenje tenzije uvrtanja u dvolan anom delu DNK usled otvaranja replikativne viljuke (kod prokariota se nazivaju DNK iraze)
Razdvajanje lanaca DNK i formiranje replikativne viljuke
Tenzija uvrtanja
Replikacija DNK
Replikacija DNK kod eukariota
Replikacija po inje na vie mesta du hromozoma -replikoni, to obezbe uje br e udvajanje velikog molekula DNK
Smatra se da se ne naruava struktura nukleozoma
DNK polimeraze , , , , .
replikacija mitohondrijske DNK
reparacija ote enja DNK
i i replikacija hromozomske DNK
DNK polimeraze kod eukariota
Transkripcija iRNK, tRNK, rRNK, mala nuklearna (snRNA), mala nukleolarna (snoRNA)....
Sve osim iRNK su krajnji produkti ekspresije gena
RNK polimeraza glavni enzim transkripcijesinteza novog molekula RNK u pravcu 5 3
Transkripciona jedinica segment DNK koji se prepisuje
Segment DNK koji prepoznaje i za koji se vezuje RNK polimeraza se naziva promotor
Transkripcija je va no mesto regulacije genske ekspresije
RNK polimeraza
ne zahteva prisustvo prajmera ili po etnice
RNK polimeraza se vezuje za ribonukleozidtrifosfate ATP, GTP, CTP i UTP
po principu komplementarnosti sa bazama u DNK ugra uje komplementarne ribonukleozidmonofosfate
energija dobijena odvajanjem PPi, a zatim 2Pi
U
Tri faze transkripcije:
1. inicijacija (vezivanje RNK polimeraze za promotor,otvaranje dvolancane zavojnice
2. elongacija(ugradnja nukleotida, formiranje fosfodiestarske veze)
3. terminacija
Orijentacija promotora iizbor lanca-matrice
Novosintetisani lanac RNK je i po smeru i po redosl edu nukleotida identi an lancu DNK koji nije prepisan osim to umesto T u gradjuje U. Lanac kom je identi an se naziva sense ili kodiraju i, a lanac koji se prepisuje je lanac matrice
Transkripcija kod prokariota
Kod prokariota transkripcija se odvija u nukleoidu.
Sve tri vrste RNK prepisuje jedna RNK polimeraza
Molekul iRNK, koji nastaje na ovaj na in se ne obra uje, odmah po sintezi je funkcionalan, nosi informaciju za sintezu obi no vie proteina, koji su potrebni za obavljanje jednog metaboli kog procesa.
Poto se set susednih gena prepisuje na jednu RNK koja onda kodira vie proteina, ova RNK je ozna ena kao POLICISTRONSKA
&LVWURQ&LVWURQ&LVWURQ&LVWURQ GHR1.NRGLUD]DMHGDQSROLSHSWLGQLGHR1.NRGLUD]DMHGDQSROLSHSWLGQLGHR1.NRGLUD]DMHGDQSROLSHSWLGQLGHR1.NRGLUD]DMHGDQSROLSHSWLGQLODQDFODQDFODQDFODQDFKod eukariota-1gen-1RNK-1 protein-MONOCISTRONSKA RNK
TRANSKRIPCIJA KOD PROKARIOTA
Istovremeno sa translacijom
iRNK - kratkoive e
RNK polimeraza E.coli
Holoenzim: jezgro ( aaaa, ( ), bbbb, bbbb) i ssss
Sigma subjedinica ima ulogu u prepoznavanju promotor skog regiona, a da bi otpo ela transkripcija sigma subjedinica mora da disosuje
signal za terminaciju:
- specificno uvrtanje transkripta (formiranje intramolekulske zavojnice)zbog uzastopnih U ostataka ili
- vezivanje faktora
TERMINACIJA TRANSKRIPCIJE
Razlike izmedju inicijacija transkripcije kod prokariota i eukariota
bakterije sadr e jedan tip RNK polimeraze dok eukarioti sadr e 3 tipa RNK polimetaze
transkripcija i translacija su vremenski i prostorno odvojeni kod eukariota
bakterijska RNK polimeraza mo e sama inicirati transkripciju dok eukarioteske zahtevaju pomo odredjenih proteina koji se nazivaju transkripcioni faktori
inicijacija transkripcije kod eukariota je kompleksnija i zbog pakovanja DNK u nukleozome
RNK polimeraze u eukariotskoj eliji
lokalizacija produkti
Nastala pre-mRNK (hnRNA) sadrzi egzone (kodirajuca sekvenca za polipeptidni lanac) i introne (umetnute sekvence) i podle e itavom nizu transformacija:
Vezivanje modifikovanog guanozina na 5 kraj (5kapa)
Vezivanje poli A na 3 kraj (3 rep)
Isecanje introna i povezivanje egzona - splajsovanje
(vri se u splajsozomima)
Posttranskripciona obradaiRNK kod eukariota
3URFHVSUHYRGMHQMDVHNYHQFHQXNOHRWLGD3URFHVSUHYRGMHQMDVHNYHQFHQXNOHRWLGD3URFHVSUHYRGMHQMDVHNYHQFHQXNOHRWLGD3URFHVSUHYRGMHQMDVHNYHQFHQXNOHRWLGD P51.XP51.XP51.XP51.XVHNYHQFXDPLQRNLVHOLQDXSURWHLQXVHNYHQFXDPLQRNLVHOLQDXSURWHLQXVHNYHQFXDPLQRNLVHOLQDXSURWHLQXVHNYHQFXDPLQRNLVHOLQDXSURWHLQX.
7UDQVODFLMD7UDQVODFLMD7UDQVODFLMD7UDQVODFLMD VLQWH]DSURWHLQDVLQWH]DSURWHLQDVLQWH]DSURWHLQDVLQWH]DSURWHLQD
Translacija se odvija na ribozomima
Triplet baza na iRNK KODON
Triplet baza na tRNK ANTIKODON(antikodon je komplementaran kodonu)
=> ifra za jednu aminokiselinu
JHQHWLFNLNRGJHQHWLFNLNRGJHQHWLFNLNRGJHQHWLFNLNRG
Standardni geneti ki kod
iRNK klizi du ribozoma i nosi informaciju o redusledu aminokielina
tRNK dovodi jednu po jednu aminokiselinu do ribozoma (antikodoni na tRNK su komplementarni kodonima na iRNK)
Faze translacije: inicijacija, elongacija i terminacija
mnogi proteinski faktori potrebni za svaki korak
start kodon (AUG za metionin kod eukariota, formilmetionin kod prokariota)
stop kodoni, signal za prestanak prevodjenja
Vezivanje kodon - antikodon
sinteza proteina: od N ka C kraju itanje kodona na iRNK: od 5 ka 3 kraju
Sinteza proteina u tri koraka
Peptidil transferaza kataliti ka aktivnost velike subjedinice ribozoma
Utroak energije (GTP)
Da bi postao funkcionalan novosintetisani protein podlee posttranslacionim modifikacijama
.RQWURODHNVSUHVLMHJHQDNRGSURNDULRWD.RQWURODHNVSUHVLMHJHQDNRGSURNDULRWD.RQWURODHNVSUHVLMHJHQDNRGSURNDULRWD.RQWURODHNVSUHVLMHJHQDNRGSURNDULRWD
najvie na nivou transkripcije
Elementi koji kontroliu njihovu ekspresiju
Geni koji kodiraju funkcionalno povezane enzime se nalaze jedan do drugog, imaju zajedni ki promotor i ine jednu ekspresionu jedinicu (od njih nastaje policistronska iRNK)
OPERON
U okviru promotora nalazi se operator, mesto za koje se vezuju regulatorni proteini koji mogu biti aktivatori ili represorii koji aktiviraju ili inhibiraju transkripciju datog operona
3ULPHUQHJDWLYQDNRQWUROD/DFRSHURQD3ULPHUQHJDWLYQDNRQWUROD/DFRSHURQD3ULPHUQHJDWLYQDNRQWUROD/DFRSHURQD3ULPHUQHJDWLYQDNRQWUROD/DFRSHURQD
Laktozni operon: tri gena iji produkti u estvuju u razgradnji laktoze
Nema laktoze, represor vezan za operator =>nema transkripcije
Ima laktoze, represor se vezuje za laktozu => te e transkripcija
Transkripcija
Kontrola regulacijom transkripcije
Kontrolaregulacijom translacije
Translacija
Kontrola proteazama !"!"
Bez modifikacije
#$#$ %%!&!&
Kovalentna modifikacija
Degradacija
Kontrolaposttranslacionommodifikacijom
!"!"
Inhibiijai aktivacija
Kontrolafunkcionalnosti enzima
GEN
deo DNK koji koji nosi informaciju za sintezu RNK molekula (rRNK, tRNK) ili polipeptidnog lanca (preko iRNK)
GENOM
kompletan geneti ki materijal organizma (obuhvata gene ali i nekodiraju e sekvence)
GENOTIP itav set gena jednog organizma