Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay

25 71121 Genscreen™ HIV-1 ANTIGEEN Testi REAKTIIVSETE PROOVIDE KINNITAVAKS NEUTRALISEERIMISEKS

883670 - 2014/01

2 [EE]

SISUKORD

1. SIHTOTSTARVE 2. Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay TÖÖPÕHIMÕTE 3. Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay KOOSTIS 4. VAJALIKUD MATERJALID, MIS EI SISALDU KOMPLEKTIS 5. TÖÖTERVISHOID JA TÖÖOHUTUS 6. ETTEVAATUSABINÕUD 7. UURITAV MATERJAL 8. REAKTIIVIDE ETTEVALMISTAMINE - SÄILITUSTINGIMUSED -

SÄILIVUSAEG 9. ANALÜÜSI PROTSEDUUR 10. TULEMUSTE ARVUTAMINE JA TÕLGENDAMINE 11. PROOVI JA REAGENDI PIPETEERIMISE SPEKTROFOTOMEETRILINE

KONTROLLIMINE 12. OMADUSED 13. ANALÜÜSI PIIRANGUD 14. VIITED

3 [EE]

1 - SIHTOTSTARVE Proove, mis on Genscreen™ HIV-1 Ag Assay korduvalt reaktiivsed, tuleb testida HIV-1 p24 antigeeni olemasolu kinnitamiseks. Viirusliku antigeeni neutraliseerimine anti-HIV antikeha poolt on arvestatav kinnitamise meetod (1-4). p24 olemasolule proovis viitab HIV-1 antikeha reaktiivsuse kadumine võrreldes neutraliseerimata prooviga samast uuritavast materjalist. Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay on mõeldud HIV-1 p24 antigeeni olemasolu kinnitamiseks seerumis, plasmas või rakukultuuri supernatant proovides, mis on olnud korduvalt reaktiivsed Genscreen™ HIV-1 Ag Assay Testi kontekstis. 2 - Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay TÖÖPÕHIMÕTE Korduvalt reaktiivseid proove inkubeeritakse HIV-1 Antigeen Kinnitava Reagendiga [Antikeha HIV Antigeeni vastu (Inimese)]. Kui proovis on HIV-1 Antigeen, neutraliseeritakse see HIV-1 Antigeen Kinnitava Reagendiga. Töödeldud proovi testitakse uuesti, kasutades Genscreen™ HIV-1 Ag Assay. Neutraliseeritud HIV-1 seondumine HIV-1 antikehaga kaetud mikrokannudesse on takistatud, mille tulemuseks on optilise tiheduse vähenemine. Neutraliseerimata proovi kontrolli [HIV-1 Antigeen Kinnitava Reagendi asemel töödeldud HIV-1 Antigeen negatiivse kontrolliga (Inimese)] testitakse optilise tiheduse võrdlemiseks paralleelselt neutraliseeritud prooviga. Genscreen™ HIV-1 Ag Assay kontekstis korduvalt reaktiivsed proovid loetakse Genscreen™ HIV-1 Confirmatory Assay kontekstis positiivseteks, kui neutraliseeritud proovi optiline tihedus on suurem või võrdne 50%-ga neutraliseerimata proovist ning neutraliseerimata proovi signaal on tugevam kui analüüsi piirväärtus. 3 - Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay KOOSTIS

Märgis Reaktiivide olemus Väljastusvorm 71121

RA HIV-1 Ag confirmatory reagent

HIV-1 Ag Kinnitav Reagent Inimese seerum, mis sisaldab antikeha HIV-1 vastu (Inimese) 0.005% Gentamütsiinsulfaat Säilitusaine: ProClin™ 300 (0.5%)

1 viaal 1.3 ml

CO Negative control

Negatiivne Kontroll Inimese seerum, mis on mittereaktiivne HIV-1 Ag, HbsAg, HIV-1, HIV-2, HCV ja HTLV-I antikehade suhtes 0.005% Gentamütsiinsulfaat Säilitusaine: ProClin™ 300 (0.5%)

1 viaal 12 ml

4 - VAJALIKUD MATERJALID, MIS EI SISALDU KOMPLEKTIS Vaadake selle kohta käivat lõiku Genscreen™ HIV-1 Ag Assay (kood 71120) testi juhenditest. 5 - TÖÖTERVISHOID JA TÖÖOHUTUS Kõik komplektis sisalduvad reaktiivid on mõeldud kasutamiseks „in vitro“ diagnostikas. • HIV-1 Antigeen Kinnitavat Reagenti on testitud ning see ei ole reaktiivne hepatiit

B pinnaantigeeni (HBsAg), hepatiit C viiruse (HCV Ab) antikehade ja inimese T-raku antikehade lümfotroopiliste viiruste (HTLV-I Ab) suhtes. Kinnitavat Reagenti on viiruste inaktiveerimiseks termiliselt töödeldud.

4 [EE]

• Negatiivse Kontrolli ettevalmistamiseks kasutatud inimpäritoluga materjali on testitud ja see ei ole reaktiivne HIV-1 antigeeni, anti-HIV1 ja anti-HIV2 antikehade, hepatiit B (HBs Ag), anti-HCV antikehade, anti HTLV 1/HTLV 2 antikehade ja anti HIV1/HIV2 suhtes.

• Kuna ükski tuntud testimismeetod ei anna täielikku kindlust et HIV, hepatiit B või C viirus või teised nakkusetekitajad puuduvad, pidage reaktiive ja patsientide proove potentsiaalselt nakatunuks ning käsitsege neid ettevaatlikkusega.

• Ohutusandmeid sisaldav tabel on soovi korral kättesaadav. • Palun vaadake selle testikomplekti mõnede keemiliste komponentidega seotud

ohutussoovitusi ja ettevaatusabinõusid etikettidel viidatud piktogrammi(de)lt ning kasutusjuhendi lõpus toodud teavet. Ohutuskaart on saadaval veebilehel www.bio-rad.com.

• Inimpäritoluga reaktiivid, proovid, samuti ka saastunud materjalid ja tooted tuleb enne ära viskamist dekontamineerida: - kas asetades need 30 minutiks 5% lõppkontsentratsiooniga

naatriumhüpokloriti (1 mahuosa pleegitit 10 mahuosa saastunud vedeliku või vee kohta) lahusesse.

- või autoklaavides temperatuuril 121ºC vähemalt 2 tundi. Autoklaavimine on parim meetod HIV ja HBV viiruste inaktiveerimiseks.

- ÄRGE ASETAGE NAATRIUMHÜPOKLORITIT SISALDAVAID VEDELIKKE AUTOKLAAVI

• Vaadake selle kohta käivat lõiku Genscreen™ HIV-1 Ag Assat (kood 71120) juhenditest.

6 - ETTEVAATUSABINÕUD Tulemuste usaldusväärsus sõltub hea laboritava nõuete järgimisest: • Ärge kasutage aegunud reaktiive. • Ärge muutke analüüsi protseduuri. • Enne kasutamist laske reaktiividel toatemperatuuril (18-30ºC) 30 minutit

stabiliseeruda. • Teiste juhiste saamiseks vaadake vastavat lõiku Genscreen™ HIV-1 Ag Assay

(kood 71120) juhenditest. 7 - UURITAV MATERJAL Võtke vereproov vastavalt kehtivatele tavadele. Võib kasutada seerumi, plasma või rakukultuuri proove. Järgnevaid antikoagulante on hinnatud ning need on vastuvõetavad: EDTA, hepariin, naatriumtsitraat. Vaadake vastavat lõiku Genscreen™ HIV-1 Ag Assay (kood 71120) juhenditest. 8 - REAKTIIVIDE ETTEVALMISTAMINE - SÄILITUSTINGIMUSED - SÄILIVUSAEG Kõik Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay komplektis sisalduvad reaktiivid on kasutamiseks valmis. Säilitage komplekti +2-8ºC juures. Enne kasutamist laske reaktiividel toatemperatuuril (18-30ºC) 30 minutit stabiliseeruda. Iga Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay komplektis sisalduvat reaktiivi võib peale esmast avamist kasutada kuni karbile märgitud aegumistähtajani.

5 [EE]

9 - ANALÜÜSI PROTSEDUUR Analüüsi orienteeruv kestvus on ligikaudu 4 tundi. Analüüsi iga protseduur tuleb teha järjest otsast lõpuni, ilma katkestamiseta. HOIATUS ! Proovid, mis on Genscreen™ HIV-1 Ag Assay kontekstis 37ºC protseduuri kasutades olnud korduvalt reaktiivsed, tuleb kinnitada Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay, kasutades 37ºC protseduuri. Proovid, mis on Genscreen™ HIV-1 Ag Assay kontekstis 40ºC protseduuri kasutades olnud korduvalt reaktiivsed, tuleb kinnitada Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay, kasutades 40ºC protseduuri. Järgige rangelt ettekirjutatud protseduuri. Tulemuste hindamiseks kasutage iga seeria jaoks nii negatiivset kui positiivset kontrolli. Järgige järgnevaid hea laboritava reegleid: 1. Pange hoolikalt paika proovide jaotamise ja identifitseerimise plaan. 2. Valmistage ette pesemislahjendi 3. Võtke kandev alus ja ribad (R1) kaitsvast kotist välja 4. Neutraliseerimise protseduur:

a. Iga proovi jaoks tähistage 1 plastiktuub tähega „A“ (neutraliseeritud) ja 1 plastiktuub tähega „B“ (neutraliseerimata kontroll). Pipeteerige igasse tuubi 150 µl korduvalt reaktiivset proovi.

b. HIV-1 Antigeen positiivse kontrolli jaoks tähistage 2 tuubi tähega „A“ (neutraliseeritud) ja 2 tuubi tähega „B“ (neutraliseerimata). Pipeteerige igasse tuubi 150 µl HIV-1 Antigeen positiivset kontrolli (C1).

c. HIV-1 Antigeen negatiivse kontrolli jaoks tähistage 3 tuubi tähega „B“ (neutraliseerimata). Pipeteerige igasse tuubi 150 µl HIV-1 Antigeen negatiivset kontrolli (C0).

d. Igasse „A“ tähega tähistatud tuubi (neutraliseeritud) lisage 25 µl HIV-1 Antigeen Kinnitavat Reagenti.

e. Igasse „B“ tähega tähistatud tuubi (neutraliseerimata) lisage 25 µl HIV-1 Antigeen negatiivset kontrolli (C0).

f. Segage iga tuubi sisu õrnalt vortexil või koputades. Vältige liigse vahu tekkimist.

g. Inkubeerige tuube toatemperatuuril (18-30ºC) 15-30 minutit, et neutralisatsiooni reaktsioon saaks toimuda.

5. Lisage kohe, plaati eelnevalt pesemata, järjest (soovituslik plaadile jaotamise järjekord): 50 µl proovi lahjendit igasse kannu. 150 µl negatiivset kontrolli (C0) kannudesse A1, B1, C1 150 µl neutraliseeritud positiivset kontrolli (C1) kannudesse D1, E1 150 µl neutraliseerimata positiivset kontrolli (C1) kannudesse F1, G1 150 µl töödeldud proovi kannu H1, jne…

Neli positiivset, kaks neutraliseeritud ja kaks neutraliseerimata ning kolm negatiivset kontrolli tuleb analüüsida igal plaadil või osalisel uuritava materjali plaadil.

Jälgige, et proovi lahjendi oleks prooviga korralikult segunenud (või kontrolliga). Korraliku segunemise korral on iga kannu sisu ühtlase värvusega.

NB: Protseduuri selles etapis on proovi jaotamist võimalik visuaalselt kontrollida: peale proovi lisamist muutub lahuse värvus rohelisest siniseks, kinnitamaks kas proov või kontroll on kannu lisatud. (automaatseks kinnitamiseks vaata lõiku 11 – PROOVI PIPETEERIMISE SPEKTROFOTOMEETRILINE KONTROLLIMINE).

6 [EE]

6. Kui võimalik katke mikroplaat kleepkilega. Suruge kile kogu plaadi ulatuses tihedalt kinni.

7. Inkubeerige plaati 60 ± 5 minutit 37 ± 1ºC juures või 40 ± 1ºC juures kasutades kuiv-õhu inkubaatorit.

8. Eemaldage kleepkile. Aspireerige kõigi kannude sisu bioloogiliste jäätmete mahutisse (sisaldab naatriumhüpokloritit). Lisage igasse kannu vähemalt 370 µl pesemislahust. Hoidke lahust kannudes 20 kuni 60 sekundit. Aspireerige taas. Korrake protseduuri 4 korda (st. kokku vähemalt 5 pesukorda). Jäätme maht peab olema väiksem, kui 10 µl (vajadusel kuivatage plaati asetades see ümberpööratuna kuivatuspaberile).

Kui kasutate automaatpesurit järgige sama protseduuri. 9. Jaotage igasse kannu kiiresti 100 µl konjugaadi töölahust 1. Konjugaati tuleks enne kasutamist õrnalt loksutada. NB: Kollase värvusega konjugaadi töölahuse 1 jaotumist on protseduuri selles

etapis võimalik visuaalselt kontrollida. 10. Kui võimalik katke mikroplaat kleepkilega. Suruge kile kogu plaadi ulatuses

tihedalt kinni. Inkubeerige plaati 30 ± 5 minutit 37 ± 1ºC juures või 40 ± 1ºC juures kasutades kuiv-õhu inkubaatorit.

11. Eemaldage kleepkile. Tühjendage kõik kannud aspireerides ja peske vähemalt 5 korda nagu eelpool kirjeldatud. Kui kasutate automaatpesurit järgige sama protseduuri.

12. Jaotage igasse kannu kiiresti 100 µl konjugaadi töölahust 2. Konjugaati tuleks enne kasutamist õrnalt loksutada. NB: Rohelise värvusega konjugaadi töölahuse 2 jaotumist on protseduuri selles

etapis võimalik visuaalselt kontrollida. 13. Kui võimalik katke mikroplaat kleepkilega. Inkubeerige plaati 30 ± 5 minutit 37 ±

1ºC juures või 40 ± 1ºC juures kasutades kuiv-õhu inkubaatorit. 14. Eemaldage kleepkile, tühjendage kõik kannud aspireerides ja peske vähemalt 5

korda nagu eelpool kirjeldatud. Jäätme maht peab olema väiksem, kui 10 µl (vajadusel kuivatage plaati asetades see ümberpööratuna kuivatuspaberile).

15. Jaotage igasse kannu 100 µl värskelt valmistatud ilmutuslahust (R8 + R9). Laske reaktsioonil kulgeda 30 ± 5 minutit pimedas ning ruumitemperatuuril (18-30ºC). Ärge kasutage inkubatsiooni käigus kleepkilet.

NB: Roosa värvusega ilmutuslahuse jaotamist on protseduuri selles etapis võimalik visuaalselt kontrollida: Tühja kannu ja roosat substraadi lahust sisaldavate kannude värvuste vahe on selgesti eristatav. (automaatseks kinnitamiseks vaata lõiku 11 – PROOVI PIPETEERIMISE SPEKTROFOTOMEETRILINE KONTROLLIMINE).

16. Lisage igasse kannu 100 µl stopplahust (R10) ning jaotage samas järjekorras ja samas ajavahemikus kui substraadi lahust. Homogeniseerige reaktsioonisegu.

NB: Värvusetu stopplahuse jaotamist on analüüsi selles etapis võimalik visuaalselt kontrollida. Peale stopplahuse lisamist substraadi roosa värvus kaob (negatiivsete proovide puhul) või värvub sinisest kollaseks (positiivsete proovide puhul).

17. Pühkige plaadi põhi ettevaatlikult. Mitte varem kui 4 minutit peale stopplahuse lisamist ja 30 minuti jooksul reaktsiooni peatumisest mõõtke plaadilugeja abil optiline tihedus 450/620-700 nm juures.

18. Kontrollige, kas lugem on kooskõlas plaadi ja proovide jaotus-ja identifitseerimisplaaniga.

7 [EE]

10 - TULEMUSTE ARVUTAMINE JA TÕLGENDAMINE HIV-1 antigeeni olemasolu tehakse kindlaks võrreldes neutraliseeritud proovide neeldumisnäitajaid (abs) neutraliseerimata proovide neeldumisnäitajatega (abs). Nimetatud võrdlus väljendatakse vähenemise %-na. 1) Negatiivsete ja positiivsete kontrollide hindamine Vaadake selle kohta käivat lõiku Genscreen™ HIV-1 Ag Assay (kood 71120) juhenditest. Ühe negatiivse kontrolli väärtuse võib jätta kõrvale, kui see jääb välja Genscreen™ HIV-1 Ag Assay komplekti lisas toodud hindamise piiridest. Ühtegi positiivse kontrolli väärtust ei tohi arvestamata jätta. 2) Keskmise neeldumisnäitaja (Xabs) arvutamine Määrake kindlaks negatiivsete ja positiivsete kontrollide keskmine neeldumine (nii neutraliseeritud kui ka neutraliseerimata) jagades saadud neeldumisnäitajate summa arvestatavate kontrollide arvuga. Keskmise neeldumisnäitaja arvutamisel järgige Genscreen™ HIV-1 Ag Assay komplekti lisas toodud hindamise kriteeriumeid. 3) Vähenemise % arvutamine Kõigi kontrollide ja proovide vähenemise % väljendatakse rakendades järgmist valemit: abs neutraliseerimata proov - abs neutraliseeritudproov vähenemise % = 100 x ------------------------------------------------------------------------------ abs neutraliseerimata proov - Xabs negatiivne kontroll Näide Proov Keskmine neeldumisnäitaja HIV antigeeni neg. kontroll, neutraliseerimata 0.045 HIV antigeeni pos. kontroll, neutraliseerimata 1.020 HIV antigeeni pos. kontroll, neutraliseeritud 0.040 HIV antigeeni positiivse kontrolli Xabs (PCX) vähenemise % = 1.020 - 0.040 0.980 100 x ------------------- = ------- = 100.05% vähenemine 1.020 - 0.045 0.975 4) Protseduuri hindamine Protseduur on kehtiv, kui see vastab järgnevatele kriteeriumitele: • Iga negatiivse kontrolli (ja rakukultuuri söötme kontrolli, kui tarvitatakse)

neeldumisnäitaja on suurem kui 0.000 AU-d ja väiksem või võrdne 0.100 AU-ga. Ühe negatiivse kontrolli väärtuse võib kõrvale jätta. Kui kaks või enam negatiivset kontrolli jäävad piiridest välja tuleb test uuesti teha.

• Positiivse kontrolli (PCX) keskmine neeldumisnäitaja on suurem või võrdne 0.500 AU-ga ning individuaalsed neeldumisnäitajad jäävad vahemikku 0.65 kuni 1.35 korda PCX. Ühtegi positiivse kontrolli väärtust ei tohi jätta arvestamata.

• Iga neutraliseeritud HIV Antigeen Positiivse kontrolli vähenemise % on ≥ 50%.

8 [EE]

5) Tulemuste tõlgendamine Proov loetakse HIV-1 antigeeni suhtes positiivseks, kui see vastab järgnevatele kriteeriumitele: • Proov on korduvalt reaktiivne Genscreen™ HIV-1 Ag Assay kontekstis. • Neutraliseerimata proovi neeldumisnäitaja väärtus on suurem või võrdne

arvutatud piirväärtusega. • Proovi abs vähenemise % on ≥ 50%. MÄRKUS: kui patsiendi proovi neeldumisnäitaja on suurem lugeja ülemisest piirist, kasutage järgneva arvutuse neeldumisnäitajana ülemist piirväärtust (2.999 Bio-Rad laborid lugejate puhul). 1. Arvutage piirväärtus lisades negatiivse kontrolli keskmisele konstant faktor

(0.050). 2. Määrake iga proovi abs vähenemise % kasutades valemit, mis on ära toodud

kvaliteedi kontrolli osas. Näide analüüsi väärtuste kohta ja tõlgendamine: Proov Neeldumisnäitajad Keskmine Neg. kontroll, Neutraliseerimata 0.041

0.050 0.045

0.045

Pos. kontroll, Neutraliseerimata 1.032 1.008

1.020

Pos. kontroll, Neutraliseeritud 0.037 0.043

0.040

Proov, Neutraliseerimata 0.858 Proov, Neutraliseeritud 0.041 Piirväärtuse näidis: 0.045 + 0.050 = 0.095 1.020 - 0.040 0.980 HIV-1 Antigeeni PCX vähenemise % = 100 x ------------------- = ---------- = 100.5% vähenemine 1.020 - 0.045 0.975 1.858 - 0.041 0.817 Proovi abs vähenemise % = 100 x ------------------- = ---------- = 100.5% vähenemine 1.858 - 0.045 0.813 MÄRKUS: Mõnedel juhtudel ei näita HIV-1 antigeeni proovid ≥ 50% vähenemist HIV-1 antigeen kinnitava reagendi lisamisel. Seepärast tuleb tugevalt reaktiivsed proovid (neeldumisnäitaja ≥ 2.000) lahjendada, nt., 1:4 või 1:8 HIV-1 antigeen negatiivse kontrolliga ning uuesti analüüsida Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay. Kui vähenemise % lahjendatud proovide puhul ei ole ikka ≥ 50% ja kui lahjendatud proovid on ikka tugevalt reaktiivsed lahjendage esimene lahjendus uuesti 1:6 või rohkem HIV-1 antigeen negatiivse kontrolliga ja analüüsige uuesti Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay. 11 - PROOVI JA REAKTIIVI PIPETEERIMISE SPEKTROFOTOMEETRILINE

KONTROLLIMINE Vaadake selle kohta käivat lõiku Genscreen™ HIV-1 Ag Assay (kood 71120) juhenditest.

9 [EE]

12 - OMADUSED Spetsiifilisus Genscreen™ HIV-1 Ag Assay kokku 2063 värskeid veredoonorite seerumi (941) ja plasma (1122) proove. Tuginedes HIV Ab sõeluuringu ja HIV antigeeni avastamise eelnevatele tulemustele olid kõik proovid negatiivsed. Nimetatud spetsiifilisuse uuring on läbi viidud kahel inkubatsiooni temperatuuril, mis on ära toodud komplekti lisas. Kaks proovi, mis olid korduvalt valepositiivsed ei neutraliseeritud kinnitava testiga. Tundlikkus Tundlikkuse uuringud viidi läbi 78 prooviga (SFTS paneel 96 positiivset ja HIV-1 nakkuse erinevates staadiumites võetud positiivsed patsientide proovid) olid Genscreen™ HIV-1 Ag Assay korduvalt reaktiivsed. 76 Genscreen™ HIV-1 Ag Assay kontekstis korduvalt reaktiivset proovi kinnitati kõik Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay. Kaks patsientide proovi, mis olid mittereaktiivsed teise EIA testi kontekstis ei saanud kinnitust neutralisatsiooni testiga. 55 rakukultuuri supernatanti, mis sisaldavad erinevaid Ag HIV 1 alatüüpe (A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, N kuni O) neutraliseeriti. Uuriti 17 serokonversiooni paneeli. Kõik Genscreen™ HIV-1 Ag Assay analüüsiga reaktiivsed proovid kinnitati Genscreen™ HIV-1 Ag Confirmatory Assay. „Konksu efekti“ (hook effect) uurimine Uuriti HIV-1 Antigeeni tõusvaid kontsentratsioone, et kontrollida Genscreen™ HIV-1 Ag Assay „konksu efekti“ (hook effect) puudumist. HIV-1 viiruslik lüsaat lahjendati positiivse kontrolli lahjendiga, et saada kontsentratsioon 2 µg/ml kuni 0.2 pg/ml. Kõik proovid millede kontsentratsioon on < 20 ng/ml on neutraliseeritud. Kui väärtused on kõrgemad kui see, tuleks efektiivse neutralisatsiooni jaoks proove lahjendada. 13 - ANALÜÜSI PIIRANGUD • HIV-1 antigeeni olemasolu kinnitamiseks, seerumi, plasma või rakukultuuri

proove testides, tuleb järgida Genscreen™ HIV-1 Ag Assay protseduuri ja HIV-1 Antigeen Kinnitava analüüsi protseduuri komplekti lisasid. Komplekti kasutaja peaks enne analüüsi tegemist soovitavalt läbi lugema komplekti lisa. Eriti tuleks protseduuri järgida proovi ja reaktiivi pipeteerimise, plaadi pesemise ja inkubatsiooni astmete paika panekul.

• Negatiivsed tulemused võivad ilmneda, kui proovis oleva markeri hulk on liiga madal avastamise piiride jaoks või ei ole avastatud marker olemas haiguse staadiumis, mil proov on võetud.

• Vead reagendi ja proovi lisamisel nagu juhendis ette nähtud, võivad anda valenegatiivse testi.

Testi kordamises tuleks kahelda kui on kliinilise infektsiooni kahtlus või protseduuri viga.

• Patsiendi proov, mille neeldumisnäitaja on alla 0.000 AU viitab protseduuri või aparaadi veale ning tuleb korduvalt testida.

• Vaadake teiste piirangute kohta käivat lõiku Genscreen™ HIV-1 Ag Assay (kood 71120) juhenditest.

10 [EE]

14 - VIITED 1. Casey JM, Kim Y, Andersen PR, et al: Human T-cell lymphotropic virus type III:

immunologic characterization and primary structure analysis of the major internal protein, p24. J Virology 55:417-423,1985.

2. Ritter J, Escaich S, Trepo C, et al: HIV antigen detection in antibody negative sera. Abstract 1627, IV International Conference on AIDS, 1988.

3. Veronese FD, Sarngadharan MG, Rahman R, et al: Monoclonal antibodies specific for p24, the major core protein of human T-cell Leukemia virus type III. Natl Acad Sci USA, 82:5199-5202,1985.

4. Schaeffler B, Flesher A, Shriver K, Tam MR: Monoclonal antibody detection of p25 HIV antigen in the serum and CSF of patients within the AIDS spectrum. Abstract 7759, IV International Conference on AIDS, 1988.

5. Resnick L, Veren K, Salahuddin SZ, et al: Stability and inactivation of HTLV-III/LAV under clinical laboratory environments. JAMA 255:1887-1891,1986.

6. Sarngadharan MG, Markham PD: The role of human T-Lymphotropic retroviruses in leukemia and AIDS, in Wormser GP (ed.): AIDS and Other Manifestations of HlV Infection. New Jersey, Noyes Publications 1987, pp 218- 220.

7. Bond WW, Favero MS, Petersen NJ, et al: Inactivation of Hepatitis B virus by intermediate-to-high level disinfectant chemicals. J Clin Micro 18:535-538,1983.

11 [EE]

12 [EE]

13 [EE]

14 [EE]