Identifikacija jezgrinih lokalizacijskih signalaAlan E. Smith i suradniciNacionalni institut za medicinska istraživanja, Mill Hill, London

JezgraRazlika između eukariotskih i prokariotskih

stanica: prisutnost jezgreSpremište genetičke informacije i stanični

kontrolni centarRegulacija ekspresije gena

JezgraJezgra

Jezgrina ovojnica i promet između jezgre i citoplazmeJezgrina ovojnica odvaja sadržaj jezgre od

citoplazme:djeluje kao barijera koja sprječava slobodan

prolaz molekula i održava jezgru u obliku drugačijega biokemijskog odjeljka stanice

Prolazak omogućen kroz komplekse jezgrinih pora:regulirana izmjena molekula između jezgre i

citoplazme; selektivan promet

Jezgrina ovojnica i promet između jezgre i citoplazme

Kompleks jezgrine poreKanali kroz koje male polarne molekule,

ioni i makromolekule (proteini i molekule RNA) mogu putovati između jezgre i citoplazme

Male molekule pasivno difundiraju kroz otvorene vodene kanale

Makromolekule se prenose selektivno uz utrošak energije

Kompleks jezgrine pore

Kompleks jezgrine pore

Selektivni transport proteina u jezgru i iz jezgreOdržavanje jezgre kao drugačijeg

biokemijskog odjeljka stanice zahtijeva mehanizam kojim se ostvaruju razlike između proteina jezgre i citoplazme

Proteini su usmjereni u jezgru uz pomoć specifičnoga sljeda aminokiselina nazvanog jezgrin lokalizacijski signal koji prepoznaju transportni receptori

Jezgrin lokalizacijski signalPrvi takav jezgrin lokalizacijski signal

kartirali su i opisali Alan Smith (i suradnici) 1984. godine Proučavanje T antigen majmunskog virusa 40

(SV40) koji pokreće replikaciju virusne DNA u inficiranim stanicama, a kodiran je virusom

Identificiran pronalaskom mutacije jednog jedinog lizina u proteinu

Jezgrin lokalizacijski signalSlijed aminokiselina T antigena SV40 virusa

Jezgrin lokalizacijski signalIstraživanja pokazala da mutacija lizina u

treonin ili asparagin sprječava normalnu akumulaciju T antigena u jezgrama stanica glodavaca i majmuna

Odredili su posljedice različitih delecija na unutarstaničnu lokalizaciju T antigenaMutirani protein s delecijom određenih

aminokiselina zadržava se u citoplazmi

Jezgrin lokalizacijski signalProvjera pokusom je li upravo taj slijed

aminokiselina sposoban usmjeriti proteine u jezgru Konstrukcija kimere u kojima je slijed

aminokiselina T antigena fuzioniran s proteinima koji su normalno citoplazmatski

Rezultat: taj kratak slijed aminokiselina T antigena SV40 virusa nužan i dostatan da usmjeri proteine na ulazak u jezgru

Utjecaj i važnostJezgrin lokalizacijski signal T antigena virusa

SV40 “prototip sličnih sljedova ostalih jezgrinih proteina” Identifikacija jezgrinih lokalizacijskih signala

ključni napredak u razumijevanju ulaska proteina u jezgru

Izvori:Cooper, G. M., Hausman, R. E. (2004).

Stanica, Molekularni pristup. Zagreb: Medicinska naklada

http://video.google.com/videoplay?docid=6374761646657730470