Informe 4 Lipasa

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INTRODUCCIN

Los lpidos suelen ingerirse como grandes masas de triacilgliceroles y son digeridos principalmente en el duodeno por la lipasa pancretica. Como muchas otras protenas, la lipasa es hidrosoluble, pero sus sustratos no lo son. Por ello, solo en la superficie de una masa de lpido puede la enzima atacar las molculas de grasa. Las sales biliares son detergentes que reducen la tensin superficial de las grasas, de manera que separan las grandes masas de lpidos en gotas ms pequeas. Esto incrementa en gran medida el rea superficial de grasa expuesta a la accin de la lipasa y, de este modo, eleva la rapidez de digestin de los lpidosOBJETIVOS

Determinar la importancia de la bilis en la degradacin de las grasas Identificar la degradacin de lpidos de origen animal y vegetal Observar la presencia de pigmentos biliaresMATERIALES Y REACTIVOS

Tubos de ensayoLecheAceite de cerdoAceite de polloAceite de olivaSolucin de NaOHAcido ntricoPancreoflat (pancreatina)Rojo de fenolAgua destiladaBilis

MARCO TEORICO

FISIOLOGIA DEL HIGADO

El hgado es un rgano o vscera presente en los vertebrados y en algunos otros animales; y es, a la vez, la glndula ms voluminosa de la anatoma y una de las ms importantes en cuanto a la actividad metablica del organismo. Desempea funciones nicas y vitales como la sntesis de protenas plasmticas, funcin desintoxicante, almacena vitaminas, glucgeno, entre otros para el buen funcionamiento de las defensas, etc. Adems, es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias que pueden resultar nocivas para el organismo, transformndolas en otras inocuas. El hgado desempea mltiples funciones en el organismo como son: Produccin debilis: el hgado excreta la bilis hacia lava biliar, y de all alduodeno. La bilis es necesaria para ladigestin de losalimentos; Metabolismode loscarbohidratos Metabolismo de los lpidos; Sntesis decolesterol; Produccin detriglicridos. Sntesis deprotenas, como laalbminay laslipoprotenas; Sntesis defactores de coagulacin Desintoxicacin de lasangre: neutralizacin detoxinas, la mayor parte de los frmacos y de lahemoglobina; transformacin delamonioenurea Depsito de mltiples sustancias, como: glucosa en forma de glucgeno, vitamina B12,hierro,cobre. En el primer trimestre del embarazo, el hgado es el principal rgano de produccin de glbulos rojos en el feto. A partir de la semana 12 de la gestacin, lamdula sea asume esta funcin.

LA BILIS

Labilises unjugo de color amarillentoque es segregado por elhgadode los vertebrados. Se trata de una sustancia lquida que acta en ladigestin, actuando como emulsionante de los cidos grasos. La bilis est formada en un97%poragua, con el3%restante compuesto por sales biliares (como el taurocolato de sodio y el glicocolato de sodio), protenas, colesterol y hormonas. El hgado se encarga de segregar la bilis de manera continua: dicha bilis se utiliza en el proceso digestivo o se almacena en la vescula biliar. La produccin de bilis en el caso de los seres humanos es de un litro diario aproximadamente.

La bilis consiste en agua, sales biliares, pigmentos biliares, colesterol, sales y lecitina (un fosfolipido); la producida en el higado se almacena en la vescula biliar que tiene forma de pera, la cual concentra la bilis y la libera en el duodeno conforme sea necesario. La bilis digiere mecanicamente las grasas por una accion similiar a la de un detergente: esto es, reduce la tension superficial de las particulas de lipidos. Tal proceso, llamado emulsificacion, dispersa las moleculas de grasa, que pueden entonces ser atacadas por lipasas (enzimas que digieren lipidos). El lquido biliar no contiene enzimas digestivas; de modo que no digiere enzimaticamente los alimentos.

La bilis tiene numerosas funciones importantes para la digestion. En primer lugar, su elevada alcalinidad es importante en las etapas terminales de la digestion ya que tampona la elevada acidez proporcionada por el jugo gastrico secretado anteriormente en el proceso digestivo.En segundo lugar, las sales biliares facilitan la digestion enzimatica de las grasas rompiendolas en gotitas microscopicas que, en conjunto tienen un rea superficial mucho mayor. La capacidad de las sales biliares para dispensar las sutancias grasas insolibres en agua deriva de su naturaleza anfipatica. Es decir, la molecula de sal biliar contiene un cido biliar liposoluble junto con un aminoacido hidrosoluble. As, actua como un detergente para la emulsificacion de las fotas de grasa, dispersandolas en la solucion acuosa para un ataque mas efectivo por parte de las enzimas digestivas. Finalmente las sales son eliminadas del intestino grueso mediante un transporte activo muy eficaz y devueltas al torrente circulatorio. Las sales biliares tambien sirven para dispersar las vitaminas liposolubles para su transporte a la sangre. En tercer lugar, el fluido biliar contiene sustancias de desecho eliminadas de la sangre por el higado como los pigmentos heminicos, colesterol, esteroides y farmacos. Estas sustancias son digeridas o excretadas en las heces.

SISTEMA BILIARLa bilis que excreta el hgado es recolectada por finos por canalculos bilferosque van confluyendo en loscanales bilferosy otros de mayor calibre hasta laporta heptica. Cadaporcin hepticatiene suducto biliar(derecho e izquierdo); ambos se funden en unducto heptico comn, que se une alducto csticoprocedente de lavescula biliar para formar elducto coldocoencargado de llevar la bilis hasta la porcin descendente del duodeno por el contrario.Lavescula biliarest alojada en lafosa de la vescula biliar, en la cara visceral del hgado. Consta de un fondo, cuerpo, infundbulo y cuello que se contina con el ducto cstico. La tnica mucosa es sumamente irregular, en forma de panal de abeja, antes de continuarse con el ducto cstico. En la vescula la secrecin biliar se almacena hasta que un estmulo adecuado causa su liberacin por la contraccin de su pared muscular sin embargoLa bilis, a partir de la unin entre el ducto cstico y el ducto heptico comn, sigue por el ducto coldoco que discurre por el borde libre del omento menor (ligamento hepatoduodenal). Luego se coloca por detrs de la porcin superior del duodeno, atraviesa la cabeza delpncreaspara drenar finalmente en la porcin descendente del duodeno en la papila duodenal unido al ducto pancretico. La arteria heptica derecha emite la arteria cstica destinada a la irrigacin de la vescula biliar. Las relaciones entre la arteria cstica y el ducto cstico son de importancia quirrgica en la extirpacin de la vescula biliar (colecistectoma).

EL PANCREAS

Elpncreases unrganoretroperitoneal mixto, exocrino (segregaenzimas digestivasque pasan alintestino delgado) y endocrino (produce hormonas, como lainsulina,glucagn,polipptido pancreticoysomatostatina, entre otros, que pasan a la sangre).

1. Tripsina y Quimotripsina: digieren polipptidos a dipptidos2. Lipasa Pancreatica: que degrada grasas neutras.3. Amilasa Pancretica: degrada casi todos los tipos de carbohidratos, expecto celulosa, a disacaridos4. Ribonucleasa y desozirribonucleasa: escinden los cidos nucleicos (RNA) y (DNA) en nucletidos libres.

LIPASASLalipasaes unaenzimaque se usa en el organismo para disgregar lasgrasasde los alimentos de manera que se puedan absorber. Su funcin principal es catalizar la hidrlisis de triacilglicerol aglicerolycidosgrasos libres. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos. Esta enzima en humanos se encuentra en laleche maternay, segn estudios bioqumicos, es idntica a la enzimacolesterol esterasa(o lipasa pancretica no especfica), por lo que se supone que el origen espancreticoy llega a lasglndulas mamariasa travs de lacirculacin sangunea. La funcin principal de esta lipasa gstrica es ayudar a la absorcin de grasas.PROCEDIMIENTOA) ACCION LIPASA PANCRETICA SOBRE LA LECHETUBOSUSTRATOROJO FENOLNaOHBILISPANCREATINA

10.5 ml de leche20 gotas10 gotas0.5 ml

20.5 ml de leche20 gotas10 gotas1 ml

30.5 ml de leche20 gotas10 gotas0.5 ml1 ml

TUBO TIEMPO

1 25 Min.

217:37 Min.

316:49 Min.

PREGUNTAS Cul de los tubos de ensayo podra considerarse como tubo control?El tubo nmero uno seria el tubo control, ya que no presentar pancreatina y por lo tanto no podra ocurrir reaccin enzimtica.

La presencia de las sales biliares acelera la reaccin de la lipasa pancretica?La digestin de la lipasa se lleva a cabo en interfaces lpido-agua, las sales biliares, colipasas y fosfolipidos son fundamentales, para el funcionamiento de la lipasa pancretica, y es esto lo que las sales biliares generan. (Cortez, 2010)

Se produce la digestin de la grasa si las sales biliares no estn presentes?

Cuando los triglicridos son convertidos en cidos grasos y 2-monoglicridos las partes grasas de estas molculas se disuelven en la parte central de la micela ( gotas esfricas y cilndricas compuestas de 20 a 40 molculas de sales biliares) siendo esta la funcin principal de las sales biliares, el proceso se la digestin se llevara a cabo ya que no solo las sales biliares hacen parte de este sin embargo seria con un poco ms lento.

Qu clase de cido produce la accin enzimtica sobre la grasa? Qu clase de molculas adems de cido, esperara encontrar en esta etapa? Se puede observar en el experimento?

Al generar una degradacin de cidos grasos y glicerina, se obtienen energa suficiente para el metabolismo de los triacilgicridos, Bsicamente podemos encontrar lpidos siendo llevados a estados menos complejos, donde puedan ser asimilados por el organismo, En teora si se observ ya que hubo degradacin de grasas.

1. DEGRADACION DE ACEITES DE ORIGEN ANIMAL Y POR LA LIPASA PANCREATICA.

TUBOSUSTRATO INDICADORENZIMABILIS

10.5 ml de aceite de cerdo6 gotas de rojo de fenol1 ml de pancreatina0.5 ml

20.5 ml de aceite de pollo6 gotas de rojo de fenol1 ml de pancreatina0.5 ml

30.5 ml de aceite de soya6 gotas de rojo de fenol1 ml de pancreatina0.5 ml

TUBO TIEMPO

125:10 Min.

218:53 Min.

316:39 Min.

Identifique las capas que se forman y diga cul de los productos de la degradacin de lpidos es ms denso.

Monoglicerol Acidos grasos

1. IDENTIFICACION DE PIGMENTOS BILIARES. PRUEBA DE GMELIN.En un tubo de ensayo deposite 0.5 ml de agua destilada, 0.5 ml de bilis (evitar que las soluciones entren en contacto con las paredes del tubo), 1 ml de cido ntrico (este debe resbalar lentamente por las paredes del tubo) y mezcle con un suave movimiento aleatorio.Para la identificacin de pigmentos biliares la Prueba de Gmelin dio resultado positivo ya que la solucin de ensayo se mezcl con cido ntrico que contiene cido nitroso y se observ la reaccin en el cambio de color al unirse el cido con la solucinRESULTADOSA) ACCION LIPASA PANCRETICA SOBRE LA LECHE

B) DEGRADACION DE ACEITES DE ORIGEN ANIMAL Y POR LA LIPASA PANCREATICA.

1. IDENTIFICACION DE PIGMENTOS BILIARES. PRUEBA DE GMELIN.

DISCUSIN DE RESULTADOSA. La sales biliares las cuales en una concentracin suficiente las sales biliares tienen la propiedad de formar las micelas las cuales tiene como funcin disolver los cidos grasos en la parte central de esta.B. En los tres tipos de grasas empleadas en el laboratorio, la emulsificacin tom mayor tiempo en las grasas animales (cerno y pollo). Las grasas vegetales tomaron menor tiempo, esto se deben a las diferencias presentes en los tipos de grasas animales y vegetales o saturadas e insaturadas, respectivamente. Las diferencias entre las grasas saturadas e insaturadas son la estructura de la cadena carbonada. Los lpidos que tienen en su composicin muchos cidos grasos saturados son lpidos slidos (tocinos) pues los cidos grasos se "empaquetan" unindose muy bien entre ellos al ser lineales, por lo que poseen alto punto de fusin. (Iglesias-Garrote, 2013) La saturada cada carbono est unido a un hidrgeno, haciendo que presente contextura slida y estable. Las grasas vegetales, de los peces y las aviares tienen mayor grado de instauracin que las de los mamferos. (Uruea, 2009) Las grasas insaturadas presentan cadenas carbonadas sin uniones a hidrgenos, por lo que se establecen enlaces dobles en los carbonos, haciendo que la textura de dicha molcula sea lquida y menos estable que las saturadas. El tiempo que demore en provocar emulsiones en los compuestos depende de la estructura que presenta estas molculas. Al presentar las grasas insaturadas una estabilidad menor que las saturadas hace que la enzima pueda emulsionarla, por otro lado las grasas saturadas al presentar mayor estabilidad y rigidez presentan dificultades para que sean emulsionadas por la lipasa pancretica. . C. En la prueba Gmelin se identificaron los pigmentos biliares, se observ el cambio en la coloracin que consista en una serie de tonalidades dependiendo de la etapa de oxidacin de la bilirrubina que pasaron de verde, azul, violeta y finalmente a rojizo debido a la presencia de cido ntrico.CONCLUSIONES

Las caractersticas fsico-qumicas influyen ampliamente en la metabolizacin de cidos grasos. Se evidencio la accin de las sales como detergentes en el intestino delgado, al disminuir la tensin superficial de las grasas, que se degradarn posteriormente por la accin de las lipasas. La identificacin de pigmentos biliares depende del hecho de que durante las etapas de oxidacin de la bilirrubina esta sufre una serie de cambios en el color, que siguen la secuencia del espectro solar familiarizado.

Las diferencias estructurales de los cidos grasos saturados e insaturados determinan la eficacia con la que la lipasa pancretica acta sobre estos.BIBLIOGRAFA Tratado de Anatoma Humana L. Testut IV Tomo Ville, Biologa, Capitulo 45, pgina 968. Prez-Barnes, S. (02 de Junio de 2006). Cuidado! que no te suba la bilirrubina. Hoy. Kerchak. (s.f.). Kerchak. Recuperado el 03 de Noviembre de 2013, de Kerchak: Iglesias-Garrote, J. (25 de Febrero de 2013). Curiosidades cinetficas. Recuperado el 04 de Noviembre de 2013, de Curiosidades cinetficas: Uruea, F. (2009). Universidad de Crdoba. Recuperado el 04 de Noviembre de 2013, de Universidad de Crdoba: Becerril, A. C. (2009). fitness. Obtenido de fitness: http://www.fitness.com.mx/medicina185.htmCortez, A. (15 de Junio de 2010). Bioquimicafacil. Obtenido de Bioquimicafacil: Salamanca. (2010). rincon del vago. Obtenido de rincon del vago:

TALLER

1. Qu es la bilis y cules son sus funciones?

Labilises unjugo de color amarillentoque es segregado por elhgadode los vertebrados. Se trata de una sustancia lquida que acta en ladigestin, actuando como emulsionante de los cidos grasos. La bilis est formada en un97%poragua, con el3%restante compuesto por sales biliares (como el taurocolato de sodio y el glicocolato de sodio), protenas, colesterol y hormonas. El hgado se encarga de segregar la bilis de manera continua: dicha bilis se utiliza en el proceso digestivo o se almacena en la vescula biliar. La produccin de bilis en el caso de los seres humanos es de un litro diario aproximadamente.La pared de la vescula biliar tiene tres capas principales de tejido. Capa demucosa(interna). Capa muscularis (media, muscular). CapaSerosa(externa).Entre estas capas se encuentratejido conjuntivode sostn. El cncer de vescula biliarprimariocomienza en la capa interna y se disemina a travs de las capas externas mientras crece.2. Haga un diagrama del sistema biliar e indique la fisiologa del mismo.

Anatoma de la vescula biliar. La vescula biliar est justo debajo del hgado. La vescula biliar est justo debajo del hgado. La bilis de almacene en la vescula biliar y fluye a travs el conducto cstico y el conducto biliar comn hacia el instestino delgado cuando se estn dirigiendo los alimentos

SINGNIFICADO FISIOLOGICO DE LA SECRECION DE SALES BILIARES:

Su sntesis y excrecin fecal representa una va muy relevante de excrecin de colesterol corporal en exceso.

Sales biliares y Lecitina en la bilis solubilizan el colesterol biliar, evitando que precipite el colesterol en la va biliar.

Facilita la digestin de lpidos dietticos (triglicridos) junto al jugo pancretico.

Facilitan la absorcin de vitaminas liposolubles.

3. Cul es la importancia de la vescula biliar?

Un papel significativo en la digestin y absorcin de las grasas. Los cidos biliares ayudan a emulsionar las grandes partculas de grasa de los alimentos y ayudan al transporte y a la absorcin de los productos finales de la digestin de las grasas a travs de la membrana intestinal.

Es un medio de transporte para la excrecin de varios productos de deseche procedentes de la sangre (bilirrubina, colesterol).

4. Puede un animal vivir sin su vescula biliar? Justifique su respuesta. Si, Se puede vivir sin la vescula por que cuando se ha extirpado la vescula biliar, la bilis fluye directamente del hgado al intestino delgado, donde interviene en la digestin de las grasas exactamente igual que lo haca antes, cuando se almacenaba en la vescula. Eso quiere decir que se puede perfectamente vivir sin vescula biliar.

Vale la pena aclarar que sin embargo, algunos individuos pueden tener problemas digestivos, como diarrea, luego de una colecistectoma. Ya que la vescula no est disponible para almacenar bilis extra, la bilis se excreta a veces en elintestinodelgado cuando no es necesaria para la digestin. El exceso de bilis en elintestinodelgado puede causar diarrea

5. Diga cul es la importancia del hgado dentro del sistema biliar?

El hgado es el rgano interno ms grande. Tiene forma de cua y se encuentra dividido en dos lbulos.

Su funcin es la de producir colesterol y bilis a partir de la descomposicin de los productos de la grasa diettica.

Usa aminocidos, produce protenas y almacena glucgeno, hierro y algunas vitaminas.

Adems, es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias que pueden ser txicas para el organismo, transformndolas en elementos ms seguros, por ejemplo alcohol y frmacos.

Una de las funciones del hgado es secretar entre 600 y1200 ml de bilis al da.

6. Que sucede cuando hay altas tasas de bilirrubina en la sangre? A qu se debe eso?

La bilis es un complejo lquido amarillo-verdoso que contiene una mezcla de sales biliares, lpidos, colesterol y pigmentos variados, protenas y sales minerales. El color amarillo se lo da la bilirrubina, formada principalmente por la descomposicin de los glbulos rojos que han llegado al final de sus cuatro meses de vida.

Un aumento de la bilirrubina en la sangre en vez de su excrecin en la bilis, es la causa de la ictericia (pigmentacin amarilla de la piel y mucosas, y de la esclertica de los ojos).

El ser humano produce 1,5 litros de bilis al da. Esta bilis es recogida en los conductos hepticos y llega a la vescula biliar, donde espera a que se presente una comida. Se libera gracias a la accin de una hormona llamada colecistoquinina, que a su vez es liberada por el duodeno cuando hay comida en el estmago.

7. Como se forma el cido litocolico y cul es la importancia?

Los cidos biliares son sintetizados exclusivamente en el hepatocito a partir del colesterol produciendo los dos cidos primarios, el cido clico (tri-hidroxilado) y el quendesoxiclico ( di-hidroxilado).Fundamentalmente dos mecanismos regulan su sntesis:

1.- La sntesis de colesterol.2.- La actividad de la enzima 7a hidroxilasa.Las funciones principales de los cidos biliares son: Absorcin y digestin de grasas. Induccin a la secrecin de lquidos por el intestino delgado.

QuenodesoxiclicoLitoclico

La funcin de este cido biliar es principalmente actuar como detergente para solubilizar grasas para la absorcin y la participacin en la degradacin de grandes molculas lipdicas.

Adems estudios actuales atribuyen a dicho cido poderes cancergenos, puesto que, demostraron que estos podan destruir selectivamente las clulas cancerosas, sin hacer dao a las clulas normales. (Kerchak)

8. Que sustancias componen las sales biliares?

Las sales biliares son anfipticas tienen un grupo polar hidroflico y uno apolar hidrofbico, de una mlcula lipdica insoluble como el colesterol se pasa a una molcula anfiptica hidrosoluble. Al pasar cierta nivel crtico de concentracin las sales biliares se asocian para forman micelas con su polo hidroflico hacia fuera y el hidrofbico hacia adentro. Estas micelas interactna con los lpidos digeridos presentes en la luz intestinal y forman micelas mixtas con los fosfolpidos hacia fuera y llevando en el interior hidrofbico el colesterol insoluble. Las miceles de sales biliares mantiene los lpidos en solucin y los transportan al borde en cepillo de los enterocitos para su absorcin.

Las sales biliares vertidas al duodeno con la bilis se absorben en un 90-85% en el leon por cotransporte con sodio, van va porta al hgado y de all vuelven al intestino con la bilis, recirculando varias veces al da, El 5-10% restante pasa al colon y por accin bacteriana se deconjugan y dehidroxilan y se convierten en cidos biliares secundarios. Los cidos biliares secundarios vuelven al hgado para conjugarse y volver con la bilis al intestino, lo que no se absorbe se pierde por heces.

9. Cules son los cidos biliares y cuales sus funciones?

ACIDOS BILIARES PRIMARIOS Y SECUNDARIOS: Los cidos biliares primarios se sintetizan en el hgado y all se conjugan y se forman las sales biliares.

Las sales biliares se reabsorben el 95% en el leon (circulacin enteroheptica) pero un 5% pasa al colon y all por accin bacteriana se deconjugan y sufren una 7-dehidroxilacin y se forman cidos biliares secundarios que una parte se reabsorbe y vuelve al hgado para conjugarse y regresar con la bilis al intestino. Pero otra parte se pierde en las heces. El hgado sintetiza cidos biliares nuevos solo para reponer las prdidas por las heces. La mayor parte de sales biliares son con cidos biliares primarios.

En el hgado se sintetizan los cidos biliares a partir del colesterol por una 7 alfa hidroxilacin que es el paso limitante de la sntesis. Los cidos biliares primarios son el clico con tres OH y el quenodesoxiclico con dos OH. Los cidos biliares se conjugan en el hgado con glicina o taurina y se forma glicocolato y taurocolato, glicoquenodesoxicolato y tauroquenodesoxicolato. Las sales biliares son sales de sodio y potasio de estos cidos conjugados. Las sales biliares son las que se secretan en la bilis y se vierten al intestino.