UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIALESCUELA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS

ALIMENTARIAS

INFORME DE LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA

LABORATORIO: 02

USO DEL BIORREACTOR AERÓBICO

CURSO: BIOTECNOLOGIA

ALUMNO:

SAAVEDRA CRUZ FRANZ REYNER

DOCENTE: MCRBLG: JORGE BERMEJO BENITES

PIURA, AGOSTO DEL 2010

TITULO

USO DEL BIORREACTOR AEROBICO

OBJETIVOS

DETERMINAR EL NÚMERO DE LEVADURAS VIABLES EN EL MOSTO CON UN SISTEMA DE AIREACIÓN PRODUCIDO POR UN BIOREACTOR

1.- FUNDAMENTO TEÓRICO

Para determinar el crecimiento celular se utilizan diferentes métodos como el peso húmedo, peso seco, o también determinando el número de células viables extendidas en una película delgada de una cámara de contaje (Cámara Neubauer).

Para determinar el número o la masa de microorganismos se emplea suspensiones homogéneas de microorganismos en medio líquidos y se determina la concentración de células por unidad de volumen de cultivo o densidad microbiana (cel. / ml., mg / ml.).

El inóculo viene hacer la masa microbiana de los cultivos en mejores condiciones para ver el aumento del crecimiento y los sustratos que se utilizarán en el proceso. Para la utilización de cepas puras, seleccionadas y probadas, capaces de rendir un alto porcentaje de producto final.

2.- MATERIAL Y PROCEDIMIENTO

Materiales:

Mosto fresco de uva. Cámara de Neubauer. Microscopio. Pipeta para dilución de glóbulos blancos. Pipetas de 10 ml. Reactor provisto de aireador. Solución de Azul de Metileno diluida al 0.2%.

Procedimiento:

Agregamos 2 litros de mosto pausterizado, al bioreactor que está en contacto con su respectivo aireador. Luego se inspecciona el ingreso y la salida del mosto con la válvula de la manguera.

Hacer un seguimiento de tres días para ver la evolución de las células viables que hay en la muestra. Tomamos 2 muestras por día para ver así una mejor realidad del crecimiento.

Determinar las células viables por el microscopio:

Tomamos una muestra de aproximadamente 20ml, de la muestra del bioreactor.

Con una micro pipeta tomamos de la muestra hasta marcar 0.5, luego llenamos la misma micro pipeta hasta la marca de 11.Mezclamos las

dos distintas soluciones, siempre tapando el extremos para evitar fuga de los líquidos.

Luego descartamos las 2 primeras gotas del micro pipeta y luego Poner en contacto una gota, en el borde del cubreobjetos que se ha colocado sobre la cámara de manera que el líquido difunda por debajo, llenando la cámara.

Colocar la cámara bajo el microscopio y localizar el campo con pequeño aumento, pasando después a un aumento mayor (40X). Contar las células en los 4 cuadrados de 1 mm 2 de las esquinas y luego sumarlos.

Luego repetimos el mismo procedimiento para cada muestra.

Calcular el número promedio de levaduras:

Las levaduras se han contado en 4 mm2, la altura de la cámara es de 0.1 mm.; el grado de dilución es de 1/20; para el cálculo del número de levaduras/mm3 se efectuará la siguiente operación: N/4 x 20 x 10.

Donde: N: número de levaduras contadas en los 4 mm2.

3.- RESULTADOS:

VIERNES 9:00 AmConteo: 507 387

589 523

Aplicando formula obtenemos: Total= 2006/4 *20*10= 100300 lev/mm3

VIERNES 01:00 PmConteo:

727 661

Total=2276 /4*20*10= 113800 lev/mm3

LUNES 10:00 Am

Conteo: 2083 2071 2065 2060

Aplicando formula obtenemos: Total= 8279/4*20*10= 413950 lev/mm3

MARTES 09:10 Am

31 45 63 55

33 39 58 38

44 34 54 57

49 47 48 32

35 52 47 31

43 49 45 38

38 36 27 49

31 34 52 54

35 52 47 31

43 49 45 38

38 36 27 49

31 34 52 54

31 45 63 55

33 39 58 38

44 34 54 57

49 47 48 32

Conteo: 2524 2465 2492 2510

Aplicando formula obtenemos: Total=9991/4*20*10= 499550 lev/mm3

MARTES 12:00 Pm

Conteo: 2575 2532 2553 2570

Aplicando formula obtenemos: Total=10230/4*20*10=511500 lev/mm3

4.- CONCLUSIONES: Se concluye que la cantidad de levaduras a incrementado su

cantidad, por la presencia de sustratos (mosto de uva) en el bioreactor.

Este crecimiento, tiene su fin, ósea cuando el sustrato se acaba en el bioreactor, las levaduras descienden en su cantidad.

La aireación en el bioreactor es muy importante porque mantiene una homogenización de levaduras constante y al mismo número aproximadamente, sin depender si están abajo o arriba de dicho equipo.

5.- BIBLIOGRAFIA:

Biotecnología, Norma Angélica Chávez Vela http://www.qb.fcen.uba.ar/microinmuno/SeminarioRecuento.htm http://mail.fq.edu.uy/~microbio/MGral/practico/segundociclo.doc