CHITIN & CHITOSAN
LAPORAN RESMI PRAKTIKUMTEKNOLOGI HASIL LAUT
Disusun oleh:Thervina Yenni Tri Kusuma12.70.0121Kelompok D4
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI PANGANFAKULTAS TEKNOLOGI
PERTANIANUNIVERSITAS KATOLIK SOEGIJAPRANATASEMARANG
2014Acara II2
1. HASIL PENGAMATAN
Hasil pengamatan kitin dan kitosan dapat dilihat pada Tabel
1.
Tabel 1. Kitin dan KitosanKel.PerlakuanRendemen chitin I
(%)Rendemen chitin II (%)Rendemen chitosan (%)
D1Kulit udang + HCl 0,75 N + NaOH 3,5 % + NaOH
40%31,75014,73022,273
D2Kulit udang + HCl 0,75 N + NaOH 3,5 % + NaOH
40%34,75012,35321,100
D3Kulit udang + HCl 1 N + NaOH 3,5 % + NaOH
50%30,25021,00010,090
D4Kulit udang + HCl 1 N + NaOH 3,5 % + NaOH
50%32,62512,1718,528
D5Kulit udang + HCl 1,25 N + NaOH 3,5 % + NaOH
60%29,00032,13829,125
D6Kulit udang + HCl 1,25 N + NaOH 3,5 % + NaOH
60%5,62542,63413,547
Dapat dilihat pada tabel 1, diketahui bahwa pada pembuatan kitin
dan kitosin diberi perlakuan yang berbeda pada beberapa kelompok,
dimana pada proses pembuatan kitin dan kitosan ini meliputi proses
demineralisasi, deproteinasi, dan deasetilasi. Pada proses
demineralisasi, digunakan HCl 0,75 N (kelompok D1 dan D2), HCl 1 N
(kelompok D3 dan D4), dan HCl 1,25 N (kelompok D5 dan D6). Pada
proses deproteinasi digunakan NaOH 3,5% untuk seluruh kelompok.
Sedangkan pada proses deasetilasi digunakan NaOH 40% (kelompok D1
dan D2), NaOH 50% (kelompok D3 dan D4), serta NaOH 60% (kelompok D5
dan D6). Pada kelompok D2 dihasilkan rendemen kitin I terbesar,
yaitu 34,750% sedangkan pada kelompok D6 dihasilkan rendemen kitin
I terendah, yaitu 5,625%. Di sisi lain, rendemen kitin II terbesar
dihasilkan oleh kelompok D6, yaitu 42,634% dan rendemen terendah
dihasilkan oleh kelompok D4, yaitu 12,171%. Pada rendemen kitosan
terbesar, dihasilkan pada kelompok D5 yaitu 29,125%, dan rendemen
kitosan terendah dihasilkan pada kelompok D3, yaitu 10,090%.Dengan
perlakuan yang berbeda-beda pada beberapa kelompok menghasilkan
rendemen kitin I, rendemen kitin II, dan rendemen kitosan yang
berbeda-beda pula.
19
2. 20
3. PEMBAHASAN
Pada praktikum teknologi hasil laut akan dibahas tentang
percobaan kitin kitosan pada kulit udang sebagai sampel. Kitin
adalah hasil pengolahan kulit udang yang bernilai ekonomis tinggi
sehingga penting untuk mengolah kulit udang menjadi kitin, karena
kulit udang merupakan sumber potensial untuk pembuatan kitin
(Shahidi et al., 1999). Beberapa manfaat yang dapat diambil dari
kitin, yaitu di bidang pertanian antara lain dengan memanfaatkan
sifat antifunginya untuk melindungi tanaman dari serangan fungi dan
sifat antibakterinya terhadap beberapa patogen. Kelarutan kitosan
dalam larutan asam serta viskositas larutannya tergantung dari
derajat deasetilasi dan derajat degradasi polimer. Kitosan kering
tidak mempunyai titik lebur. Bila kitosan disimpan dalam jangka
waktu yang relatif lama pada suhu sekitar 100oF maka sifat
kelarutannya dan viskositasnya akan berubah. Bila kitosan disimpan
lama dalam keadaan terbuka dan terjadi kontak dengan udara maka
akan terjadi dekomposisi, warnanya menjadi kekuningan dan
viskositas larutan menjadi berkurang (Krissetiana, 2004).
Dalam praktikum ini, penggunaan kulit udang sebagai bahan dasar
pembuatan kitin dan kitosan ini, menurut Hargono, et all (2008)
dikarenakan kulit udang mengandung 20-30% senyawa kitin, 21%
protein, dan 40-50% mineral. Disamping itu, Mudasir et al (2008)
menambahkan bahwa kitin dan kitosan merupakan produk yang
menggunakan limbah crustasea sebagai bahan dasarnya. Kitin dapat
ditemukan dalam komponen struktural eksoskeleton dari serangga dan
crustacea. Selain itu dapat pula ditemukan dalam dinding sel ragi
dan jamur yang jumlahnya berkisar antara 30-60%. Kitin dapat
dimanfaatkan sebagai bahan pendukung enzim dimana penggunaan
terbesar digunakan pada industri makanan dan kosmetik. Kitin dapat
digunakan sebagai bahan pendukung untuk beberapa enzim seperti
papain, kimotripsin, laktase, asam pospatase dan glukosa isomerase.
Sifat kitin yaitu lebih fleksibel dan lebih mudah larut dalam asam
encer, larut dalam asam pekat seperti asam nitrit, asam sulfat
tetapi tidak larut dalam air, asam organik, asam anorganik encer,
pelarut organik dan alkali pekat. Dalam asam pekat, kitin dapat
larut serta terdegradasi menjadi monomernya dan memutuskan gugus
asetil. Pada limbah udang, struktur kitinnya memiliki persamaan
dengan selulosa yakni pada ikatan antara monomernya terangkai
dengan glukosida pada posisi (1-4).Limbah udang mengandung protein
dan mineral yang cukup tinggi, serta astaxantin yang merupakan
pro-vitamin A untuk pembentukan warna (Dutta et al, 2004).
Muzzarelli (1985) di dalam Rochima (2007) menambahkan bahwa
cangkang hewan invertebrata laut, terutama Crustacea mengandung
kitin dalam kadar tinggi, berkisar antara 20-60% tergantung
spesies. Cumi-cumi mempunyai kandungan kitin paling sedikit,
sekitar 20%, sedangkan cangkang kepiting dapat mengandung kitin
sampai 70%. Menurut Patil (2000) di dalam Rochima (2007), lebih
dari 80.000 metrik ton kitin diperoleh dari limbah laut dunia per
tahun. Di Indonesia sendiri limbah kitin yang belum dimanfaatkan
sebesar 56.200 metrik ton per tahun. Hal tersebut diungkapkan oleh
Departemen Kelautan dan Perikanan (2000) di dalam Rochima
(2007).
Dalam industri pengolahan crustaceae ada dua jenis limbah yang
dihasilkan. Pertama adalah limbah cair yang berupa suspensi air dan
kotoran serta yang kedua limbah padat yang berupa kulit, kepala,
dan juga kaki. Kedua limbah ini tentunya menimbulkan pencemaran
lingkungan, sehingga diperlukan penanganan limbah cair yang
terbaik, yaitu dengan menggunakan waste water treatment. Lain
halnya dengan limbah padat, limbah ini masih dapat dimanfaatkan
menjadi produk lanjut yang mempunyai nilai ekonomis tinggi,
misalnya kitin. Menurut Dutta et al (2004), kitin memiliki warna
yang putih, keras, inelastis, dan merupakan polisakarida yang
mengandung nitrogen dan dapat ditemukan dalam eksoskleton sama
seperti pada struktur internal invertebrata. Salah satunya yaitu
pada limbah udang yang merupakan sumber yang kaya akan kitin, yaitu
kurang lebih 30% dari berat kering (Purwaningsih, 1994). Rismana
(2001) menambahkan bahwa kitosan merupakan bahan kimia multiguna
yang disiapkan secara komersial dengan diasetilasi basa kitin yang
didapatkan dari eksoskeleton crustaceae laut. Limbah udang yang
terdiri atas kulit dan kepala merupakan limbah industri dari pabrik
pembekuan udang, limbah ini dapat mencapai 60 -70 % dari berat
utuh. Kulit dan kepala udang mengandung kitin yang cukup besar
dibandingkan dengan cangkang atau kulit crustaceae lainnya.
Praktikum kitin kitosan yang dilakukan menggunakan sampel berupa
limbah kulit udang. Tujuan penggunaan limbah kulit udang menurut
Sandford & Hutchins (1978) adalah karena kulit udang merupakan
limbah padat dalam pengolahan crustaceae. Jika dibandingkan dengan
pengolahan limbah cair, pengolahan limbah padat ini selain dapat
mengurangi pencemaran lingkungan, juga dapat diolah hingga
menghasilkan produk olahan yang memiliki nilai fungsional yang
lebih tinggi, yaitu dengan pengolahan menjadi kitin maupun kitosan.
Pada praktikum pembuatan kitin kitosan ini dilakukan dengan 3
tahapan, yaitu demineralisasi, deproteinasi dan deasetilasi. Pada
tahap demineralisasi pertama-tama limbah kulit udang dicuci dengan
air mengalir, kemudian dikeringkan dengan alat dehumidifier.
Kemudian dilakukan pencucian dengan air panas sebanyak 2 kali dan
dikeringkan kembali. Hasil kulit udang yang telah dikeringkan
kemudian dihaluskan atau dihancurkan. Pada praktikum ini digunakan
larutan HCl, NaOH yang berbeda-beda konsentrasinya. Pada tahap yang
pertama, yaitu tahap dalam proses demineralisasi penggunaan HCl
menurut teori Peter (1995) adalah untuk melarutkan ion Ca2+ dalam
cangkang udang, hingga berikatan dan menghasilkan CaCl2 yang
memiliki sifat larut dalam air, sedangkan produk sampingan yang
lainnya adalah gas CO2 dan air, serta asam pospat yang larut air.
Selain itu, hampir seluruh ion-ion logam dapat membentuk
garam-garam klorida yang sifatnya larut dalam air. Kemudian, diaduk
selama 1 jam sambil dipanaskan dengan suhu 900C. Menurut Johnson
dan Peterson (1974), pemanasan pada proses demineralisasi bertujuan
untuk mempercepat proses perusakan mineral dimana tujuan dari
proses demineralisasi adalah untuk menghilangkan mineral, kalsium
karbonat, dan kalsium fosfat. Disamping itu, pengadukan juga
bertujuan untuk menghindari meluapnya gelembung-gelembung udara
yang dihasilkan karena pemisahan mineral selama proses
demineralisasi. Kemudian sampel dicuci dengan air hingga pH-nya
netral dan dikeringkan selama 24 jam dengan suhu 800C. Mekawati et
all (2000) mengemukakan teorinya bahwa pencucian yang dilakukan
selain untuk menetralkan pH juga untuk menghindari resiko degradasi
selama proses pengeringan, juga berfungsi untuk melarutkan CaCl2
dan asam pospat yang bersifat larut dalam air. Hal ini juga sesuai
dengan teori yang dikemukakan Prasetiyo (2006) yang menyatakan
bahwa setiap tahapan yang dilakukan dalam percobaan mulai dari
penggunaan campuran antara HCl dengan sampel kulit udang yang
digunakan yaitu 10:1 dan dengan pemanasan yang digunakan adalah
juga 800C selama 24 jam.
Menurut Wang et al (2010), kitin merupakan polisakarida yang
sangat melimpah di alam. Kitin dapat ditemukan dalam komponen
struktural eksoskeleton dari insecta dan crustacean, dalam dinding
sel fungi (30-60%), kulit kerang, paruh burung, serta tulang rawan
(bagian tengah) dari cumi-cumi. Kitin dapat digunakan sebagai bahan
pendukung beberapa enzim seperti papain, lactase, kimotripsin, asam
fosfatase, dan glukosa isomerase. Pemanfaatan kitin umumnya paling
besar digunakan pada industri pangan dan industri kosmetik. Hal
tersebut sesuai dengan teori dari Peter (1995). Akan tetapi, karena
kitin sangat sulit larut dengan air, hal ini membuat pemanfaatan
kitin menjadi sangat terbatas. Untuk mengatasi sifat kitin
tersebut, salah satu jalannya adalah dengan cara memodifikasi
struktur kimiawi sehingga akan didapatkan turunan kitin yang
mempunyai sifat kimia yang lebih baik dibandingkan dengan kitin.
Salah satu dari turunan kitin tersebut adalah kitosan yang
mempunyai sifat larut dalam asam dan viskositas larutannya
tergantung dari derajat diasetilasi dan derajat degradasi dari
polimer kitin. Kitosan kering tidak mempunyai titik lebur dan
apabila disimpan dalam jangka waktu yang lama dengan suhu sekitar
100oF, sifat kelarutan dan viskositas dari kitosan ini akan
berubah. Apabila kitosan disimpan lama dengan keadaan terbuka
(mengalami kontak dengan udara), hal tersebut akan mengakibatkan
terjadinya dekomposisi, perubahan warna menjadi kekuningan, dan
menurunnya viskositas dari kitosan tersebut. Sifat dari kitosan
lainnya adalah kitosan hanya dapat larut dalam asam encer seperti
misalnya asam asetat, asam format, asam sitrat. Akan tetapi bila
kitosan telah disubstitusikan, hal ini akan membuat kitosan dapat
larut dengan air. Kitosan dapat mudah larut dengan asam asetat
karena asam asetat memiliki gugus karboksil yang akan mempermudah
pelarutan kitosan yang disebabkan karena terjadinya interaksi
hidrogen antara gugus karboksil dan gugus amina dari kitosan (Dunn
et al., 1997).
Berdasarkan teori dari Muzzarelli (1985), kitin yang memiliki
struktur kimia (C8H13NO5)n ini merupakan biopolimer dari unit
N-asetil-D-glukosamin yang berikatan dengan ikatan glikosidik
(1,4). Sedangkan kitosan merupakan produk turunan dari kitin, dan
merupakan senyawa dengan rumus kimia polimer
(2-amino-2-dioksi--D-Glukosa) yang dapat dihasilkan dengan cara
menghidrolisis kitin dengan menggunakan basa kuat. Kitosan memiliki
bentuk padatan amorf berwarna putih dengan struktur kristal yang
tetap dari bentuk awal kitin murni. Rantai dari kitosan tersebut
akan lebih pendek dibandingkan dengan rantai kitin yang digunakan
untuk menghasilkan kitosan tersebut. Bentuk dari kitosan mirip
dengan selulosa, yang membedakannya hanya pada gugus hidroksi
C-2nya, dimana gugus tersebut disubtitusi dengan gugus amino (NH2).
Kitosan juga dapat dimanfaatkan sebagai pengawet karena kitosan ini
mengandung gugus amino yang memiliki muatan positif yang dapat
mengikat muatan negatif dari senyawa lain. Hal tersebut menjadikan
ciri khas bagi kitosan dimana polisakarida lainnya biasanya
memiliki muatan yang netral (Robert, 1992). Kitosan dihasilkan dari
kitin yang telah di-deasetilasi dengan larutan basa 40-50% pada
suhu sekitar 120o hingga 160oC. Beberapa kelebihan kitosan sebagai
biomaterial adalah mudah terdegradasi, kompatibel, tidak beracun,
dan antithromboganic (Radhakumary et al.,2005). Berikut merupakan
struktur kitin dan kitosan:
Gambar 1. Struktur Kitin dan Kitosan (Pillai et al.,
2009)Menurut Abun et al. (2007), kitin dapat diperoleh dari
berbagai macam organisme yang ada di alam. Kitin pada tubuh
organisme didapati dalam tiga bentuk kristal dan dibedakan atas
susunan rantai molekul yang menyusun kristalnya. Ketiga jenis kitin
tersebut antara lain -kitin yang berupa rantai antipararel, -kitin
berupa rantai pararel, dan -kitin yang berupa rantai campuran.
Struktur kimia dari kitin tersebut dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar 2. Struktur Kimia Kitin (Abun et al., 2007).Kitosan yang
dihasilkan dari deasetilasi kitin tersebut mempunyai sifat
polikationik yang menyebabkan kitosan dapat berfungsi sebagai agen
penggumpal dalam penanganan limbah, terutama pada limbah yang
mengandung protein. Hal tersebut diungkapkan oleh Hartati et al.
(2002). Menurut Cahyaningrum et al. (2007), kitosan mampu berikatan
secara crosslink apabila ditambahkan dengan crosslinked agent
seperti misalnya glutaraldehid, glioksial, atau kation Cu2+ pada
kitosan tersebut. Balley et al (1977) menambahkan bahwa hingga saat
ini terdapat lebih dari 200 pemanfaatan dari kitin dan kitosan
serta turunannya terutama di industri pangan, pemrosesan makanan,
bioteknologi, pertanian, farmasi, kesehatan, serta lingkungan.
Berikut merupakan struktur kimia dari kitosan :
Gambar 3. Struktur Kimia Kitosan (Muzzarelli, 1985).Pada
praktikum ini, proses ekstraksi kitin menggunakan bahan baku limbah
kulit udang yang telah dipisahkan dari kepalanya. Untuk
mengekstraksi kitin, limbah kulit udang harus mengalami tahap
demineralisasi dan deproteinasi. Sedangkan untuk mendapatkan
kitosan, kitin yang telah didapat sebelumnya harus diproses lebih
lanjut, yaitu proses desasetilasi.
3.1. Pembuatan Kitin3.1.1. DemineralisasiPada tahap ini,
mula-mula limbah kulit udang dicuci dengan air mengalir, dan
kemudian dikeringkan. Pencucian tersebut bertujuan untuk
menghilangkan kotoran yang ada pada kulit udang yang akan digunakan
dimana kotoran tersebut dapat mencemari ekstrak kitin yang
dihasilkan. Sedangkan proses pengeringan bertujuan untuk membuat
air panas yang masih berada pada kulit udang dapat dihilangkan,
sehingga kadar air yang terletak pada kulit udang tersebut dapat
dikurangi sehingga menghasilkan produk kulit udang yang kering.
Setelah itu, dihancurkan hingga menjadi serbuk dimana serbuk
tersebut akan diambil sebanyak 10 gram pada masing-masing kelompok.
Menurut Prasetyo (2006), proses penghancuran bertujuan untuk
memperbesar luas permukaan bahan sehingga pelarut yang nantinya
digunakan dapat dengan maksimal melarutkan komponen-komponen dengan
maksimal.
Kemudian, ditambahkan dengan HCl dimana perbandingan serbuk
kitin dan HCl yaitu 10:1 dengan menggunakan HCl 0,75 N (kelompok D1
dan D2), HCl 1 N (kelompok D3 dan D4), serta HCl 1,25 N (kelompok
D5 dan D6). Proses penambahan HCl tersebut bertujuan untuk
melarutkan komponen mineral yang dikandung oleh kulit udang.
Menurut Bastaman (1989), kulit udang mengandung mineral sebanyak 30
hingga 50% dari berat keringnya dimana mineral utama yang ada pada
kulit udang adalah kalsium karbonat dan kalsium fosfat. Mineral
yang ada pada kulit udang harus dipisahkan terlebih dahulu sebelum
dilakukannya proses ekstraksi kitin dimana komponen mineral
tersebut dapat dilarutkan dengan penambahan asam encer seperti
misalnya HCl, H2SO4, atau asam laktat. Ca3(PO4)2 dan CaCO3
merupakan mineral yang paling banyak ditemukan dalam kitin yang
masih kasar (impurities chitin) dimana dengan penambahan HCl akan
mengakibatkan kerusakan pada permukaan biopolimer kitin. Reaksi
kerusakan kitin akibat penambahan HCl adalah sebagai berikut:HCl
(aq) H+(aq) + Cl-(aq)H+(aq) + H2O H3O+(aq)Ca3(PO4)2(s) + 2 H3O+(aq)
3 Ca2+(aq) + 2 H3PO4(aq) + O2(g)CaCO3(s) + 2 H3O+(aq) Ca2+(aq) +
CO2(g) + 3 H2O(l)(Robert, 1992).
Setelah itu, dipanaskan selama 1 jam hingga suhunya mencapai
90oC sambil diaduk. Proses pemanasan selama 1 jam ini berfungsi
untuk mempercepat proses perusakan mineral. Sedangkan proses
pengadukan yang dilakukan bersamaan dengan proses pemanasan ini
bertujuan untuk menghindari timbulnya gelembung-gelembung udara
yang akibat proses pemisahan mineral selama terjadinya proses
demineralisasi (Puspawati et al., 2010). Gelembung-gelembung udara
merupakan dampak dari terbentuknya gas CO2 pada saat larutan HCl
ditambahkan ke dalam sampel pada proses perusakan mineral
(demineralisasi). Reaksi yang terjadi pada proses terbentuknya
gelembung dari gas CO2 ini adalah sebagai berikut:CaCO3(s) +
2HCl(l) CaCl2(s) + H2O(l) + CO2(g). (Robert, 1992).Tahap
selanjutnya, dicuci dengan air hingga pHnya mencapai netral.
Kemudian, dikeringkan selama 24 jam pada suhu 80oC. Dengan adanya
proses demineralisasi ini akan menghilangkan garam-garam anorganik
serta kandungan mineral yang dikandung oleh kitin, terutama
kandungan kalsium karbonat (CaCO3). Hal tersebut sesuai dengan
teori dari Hargono & Haryani (2004). Proses demineralisasi ini
akan mengakibatkan kalsium karbonat bereaksi dengan asam klorida
sehingga membentuk kalsium klorida, asam karbonat, dan asam fosfat
yang merupakan senyawa yang larut dengan pelarut polar seperti air
sedangkan residu yang tidak larut dengan pelarut polar (air)
merupakan senyawa kitin yang telah terekstrak. Karena mineral yang
ada pada kitin terlarut dengan air, maka diperlukannya proses
penyaringan dalam proses penetralan pH ini sehingga hanya residu
kitin saja yang tersisa. Hal tersebut sesuai dengan yang
diungkapkan oleh Bastaman (1989).
Pada percobaan ini, kelompok D2 menghasilkan rendemen kitin I
terbesar, yaitu 34,750% sedangkan pada kelompok D6 dihasilkan
rendemen kitin I terendah, yaitu 5,625%. Dengan penambahan
konsentrasi HCl dari 0,75N, 1 N, dan 1,25 N secara berturut-turut
dihasilkan rata-rata rendemen kitin I sebesar 33,250%, 31,438%, dan
17,313%. Hal tersebut tidak sesuai dengan teori dari Johnson dan
Peterson (1974) yang mengatakan bahwa apabila semakin tinggi
konsentrasi HCl yang digunakan maka rendemen kitin yang dihasilkan
juga akan semakin banyak pula. Hal tersebut dikarenakan adanya
senyawa-senyawa mineral pada serbuk udang akan semakin mudah untuk
dilepaskan. Penambahan asam atau basa dengan konsentrasi yang lebih
tinggi dengan disertai proses atau waktu yang lebih panjang akan
mengakibatkan lepasnya ikatan protein dan mineral dengan kitin
serta bahan organik lainnya yang ada pada kulit udang.
3.1.2. DeproteinasiPada proses deproteinasi, masing-masing
kelompok serbuk yang telah diperoleh dari pengolahan demineralisasi
ditambahkan dengan NaOH dengan konsentrasi yang berbeda sesuai
dengan kelompok. Tujuan dari tahapan proses deproteinasi yaitu
untuk menghilangkan atau melarutkan protein dengan semaksimal
mungkin dari substrat menggunakan larutan kimia yang bersifat basa
(Lehninger, 1975). Dalam tahap ini juga ditambahkan NaOH 3,5% yang
bertujuan untuk memperbesar volume partikel bahan / substrat. Maka
dari itu, ikatan antar komponen akan menjadi renggang sehingga
mampu menghidrolisis gugus asetil pada kitin dan kitin mengalami
deasetilasi akan berubah menjadi kitosan. Hal ini yang menyebabkan
kadar kitin menjadi berkurang sehingga ikatan antar komponen
menjadi renggang, juga mampu menghidrolisis gugus asetil pada
kitin, sehingga kitin akan mengalami deasetilasi dan berubah
menjadi kitosan yang menyebabkan kadar kitin berkurang. Setelah
ditambahkan NaOH kemudian larutan diaduk dan dipanaskan diatas
pemanas selama 1 jam pada suhu 90C. Tujuan pemanasan larutan ini
adalah supaya protein dapat terdenaturasi sehingga protein lebih
mudah dipisahkan. Pengadukan juga berfungsi untuk meratakan proses
denaturasi protein oleh larutan NaOH. Dengan pemanasan dan
pengadukan dapat mengkonsentrasikan NaOH, sehingga hasil kitin yang
diperoleh lebih optimal (Patil et al, 2000). Kemudian setelah
proses pengadukan, larutan didinginkan selama 30 menit ini
bertujuan untuk mengendapkan kitin pada bagian dasar larutan
sehingga ketika dilakukan pencucian kitin tidak terbuang. Setelah
itu, kitin dicuci dengan air mengalir secara berulang-ulang hingga
tercapai pH netral dan pencucian ini bertujuan untuk menurunkan
kondisi basa larutan menjadi pH normal. Setelah dicuci kitin
dikeringkan kembali dalam dehumidifier pada suhu 80C selama 24 jam
yang bertujuan dari pengeringan ini untuk menguapkan air yang masih
tersisa selama proses pencucian sehingga diperoleh produk kitin
akhir yang kering (Rogers, 1986).
Pada percobaan yang dilakukan, rendemen kitin II terbesar
dihasilkan oleh kelompok D6, yaitu 42,634% dan rendemen terendah
dihasilkan oleh kelompok D4, yaitu 12,171%. Hal tersebut ada yang
sesuai, namun ada juga yang tidak sesuai dengan teori dari
Puspawati et al. (2010) yang mengatakan bahwa pada umumnya rendemen
kitin yang berasal dari limbah kulit udang akan menghasilkan
rendemen kitin lebih dari 20%, karena pada kelompok D2 dan D4 tidak
menghasilkan rendemen kitin lebih dari 20%. Berdasarkan hasil
percobaan, umumnya terdapat beberapa kelompok yang mengalami
peningkatan rendemen kitin dibandingkan dengan sebelumnya, hal
tersebut dapat saja terjadi karena proses deproteinasi yang kurang
sempurna. Proses deproteinasi yang kurang sempurna tersebut umumnya
diakibatkan oleh adanya kitin yang terikut dengan air pada saat
proses penetralan dan penyaringan, pengeringan kitin yang kurang
sempurna, atau proses demineralisasi yang kurang optimal sehingga
masih ada pelindung mineral yang terletak pada kulit udang sehingga
menghambat proses deproteinasi. Kelarutan protein dan mineral pada
suasana basa akan lebih besar jika dibandingkan kelarutannya pada
suasana asam. Hal ini dikarenakan larutan basa seperti NaOH
memiliki aktivitas hidrolisis yang lebih tinggi jika dibandingkan
dengan larutan asam seperti HCl. Hal tersebut sesuai dengan teori
dari Fennema (1985). Maka dari itu, proses deproteinasi dengan NaOH
yang bersifat basa akan mengoptimalkan proses penghilangan mineral
dan khususnya komponen protein yang berada pada kitin tersebut,
sehingga rendemen kitin yang dihasilkan dapat mengalami penurunan
dari rendemen kitin sebelumnya.
Faktor-faktor yang menyebabkan berhasil atau tidaknya pembuatan
kitin antara lain jenis bahan baku yang digunakan, serta proses
ekstraksi kitin yang dibagi menjadi dua metode yaitu proses
demineralisasi dan proses deproteinasi. Kitin dapat diekstrak baik
dengan secara kimiawi maupun secara enzimatis. Faktor lain yang
mempengaruhi kualitas kitin dipengaruhi oleh tahapan dan kondisi
proses yang di dalamnya termasuk lamanya proses pengolahan, suhu
pengeringan yang digunakan, konsentrasi zat kimia yang ditambahkan,
dan pH saat proses pengekstrakan kitin. Hal tersebut sesuai dengan
yang diungkapkan oleh Laila & Hendri (2008). Dengan semakin
lama proses pemanasan (pengeringan), akan menyebabkan denaturasi
protein, sehingga protein yang terlarut berkurang banyak. Namun,
apabila pemanasan dilakukan dalam waktu yang lebih singkat, hal ini
mengakibatkan kandungan protein yang terlarut menjadi lebih rendah
karena protein yang ada di dalam kitin tersebut belum larut
sepenuhnya. Hal tersebut sesuai dengan teori dari Winarno (1997).
Menurut Mukku dan Willem (2005), kitin juga dapat dibuat dari kulit
udang dengan menggunakan mikroorganisme. Salah satu mikroorganisme
yang dapat digunakan untuk proses pembuatan kitin tersebut adalah
Lactobacillus plantarum.
3.2. Deasetilasi (Pembuatan Kitosan)Setelah kulit udang melalui
proses pembuatan kitin (demineralisasi dan deproteinasi), maka
kitin yang telah dihasilkan tersebut diberikan perlakuan lanjutan
sehingga terbentuk senyawa turunannya, yaitu kitosan. Proses
ekstraksi kitosan dari kulit udang sendiri terbagi menjadi tiga
tahap, yaitu tahap demineralisasi dan deproteinasi yang merupakan
tahap pembuatan kitin, serta deasetilasi yang akan mengubah senyawa
kitin yang telah terbentuk sebelumnya menjadi senyawa kitosan. Hal
tersebut diungkapkan oleh Robert (1992). Menurut Ramadhan et al.
(2010), transformasi senyawa kitin menjadi senyawa kitosan pada
tahap deastilasi ini sendiri dilakukan dengan langkah penghilangan
gugus asetil yang ada pada kitin menjadi gugus amina yang ada pada
kitosan. Mutu kitosan yang dihasilkan digambarkan dengan persentase
gugus asetil yang bisa dihilangkan dari rendemen kitin sebelumnya
maupun kitosan tersebut. Standar mutu kitosan yang menilai
berdasarkan persentase gugus asetil yang dapat dihilangkan tersebut
dinamakan dengan derajat deasetilasi. Dengan semakin tingginya
derajat deasetilasi dari kitosan yang dihasilkan, hal tersebut
menandakan bahwa gugus asetil yang dimiliki kitosan tersebut
semakin rendah sehingga mengakibatkan interaksi antar ion-ion dan
ikatan hidrogennya bertambah kuat. Hal tersebut sesuai dengan teori
dari Knoor (1984).
Morteza et al (2009) mengungkapkan derajat deasetilasi dari
kitosan dapat diwakilkan dengan banyaknya glukosamin dan asetil
glukosamin yang terkandung pada kitosan yang dihasilkan. Azhar et
al. (2010) menambahkan bahwa, kitin dapat diubah menjadi kitosan
dengan cara mengubah gugus asetamida (NHCOCH3) yang dimiliki oleh
kitin menjadi gugus amina (NH2) yang nantinya dimiliki oleh
kitosan. Tujuan dari proses deasetilasi ini adalah untuk memutuskan
ikatan kovalen antara gugus asetil dengan gugus nitrogen yang
terletak pada gugus asetamida kitin untuk diubah menjadi gugus
amina (NH2) yang merupakan bagian dari senyawa kitosan yang akan
dihasilkan. Berikut ini merupakan gambar dari proses pelepasan
gugus asetil pada asetamida kitin menghasilkan gugus amina
terdeasetilasi yang dimiliki oleh kitosan.
Gambar 4. Pengubahan gugus asetil pada gugus asetamida kitin
(Azhar et al., 2010).
Berdasarkan teori dari Cahyaningrum (2007), kitosan merupakan
senyawa yang memiliki banyak kegunaan pada bidang pangan, yang
salah satunya dapat digunakan sebagai bahan antimikroba. Kemampuan
antimikroba yang dimiliki oleh kitosan ini dikarenakan kitosan
mengandung enzim lysosim dan gugus aminopolisakarida yang mampu
menghambat pertumbuhan mikroba tertentu. Kemampuan antimikroba
kitosan dipengaruhi oleh konsentrasi pelarut kitosan dimana
antimikroba yang menggunakan kitosan ini efektif untuk menghambat
pertumbuhan dari berbagai macam bakteri dan kapang. Hal tersebut
sesuai dengan teori dari Limam et al (2011) yang mengatakan bahwa
kitosan memiliki karakteristik sebagai penghambat aktivitas bakteri
dan fungi yang baik.
Pada proses deasetilasi ini, mula-mula kitin ditambahkan dengan
NaOH dimana perbandingan antara kitin dengan NaOH yang ditambahkan
adalah 1 : 20. Pada proses deasetilasi digunakan NaOH 40% (kelompok
D1 dan D2), NaOH 50% (kelompok D3 dan D4), serta NaOH 60% (kelompok
D5 dan D6). Setelah itu, dipanaskan selama 1 jam hingga suhunya
mencapai 90oC sambil diaduk, kemudian didinginkan. Suhu yang
digunakan pada proses pemanasan dan pengadukan ini akan berpengaruh
terhadap derajat deasetilasi kitosan yang terbentuk, dimana semakin
tinggi suhu yang diaplikasikan maka derajat deasetilasi dari
kitosan yang terbentuk akan meningkat. Tujuan dari pemanasan ini
sendiri adalah untuk meningkatkan derajat deasetilasi dari kitosan
yang terbentuk. Sedangkan proses pengadukan yang dilakukan
bersamaan dengan proses pemanasan ini bertujuan untuk meratakan
kitin yang digunakan sebagai bahan dengan larutan NaOH yang
ditambahkan sehingga proses deasetilasi berjalan lebih optimal. Hal
tersebut diungkapkan oleh Puspawati et al. (2010). Selain itu,
proses pendinginan pada tahap ini bertujuan untuk membuat bubuk
kitosan pada larutan dapat mengendap dengan sempurna di bagian
bawah dan tidak ikut terbuang selama proses pencucian. Tahapan
selanjutnya, dicuci dengan air hingga pHnya mencapai netral, dimana
proses ini dilakukan bersamaan dengan penyaringan yang bertujuan
untuk memisahkan rendemen kitosan yang terbentuk dengan
komponen-komponen lainnya. Kemudian, dikeringkan selama 24 jam pada
suhu 70oC dan dihasilkan kitosan dari percobaan ini. Hal tersebut
sesuai dengan teori dari Ramadhan et al. (2010) yang mengungkapkan
bahwa setelah proses pengeringan tersebut, maka kitosan yang
dihasilkan akan berbentuk serbuk dengan warna putih kekuningan.
Berdasarkan hasil percobaan yang dilakukan, rendemen kitosan
terbesar, dihasilkan pada kelompok D5 yaitu 29,125%, dan rendemen
kitosan terendah dihasilkan pada kelompok D3, yaitu 10,090% dengan
penambahan NaOH sebesar 50%. Penambahan NaOH dengan konsentrasi
sekitar 50% ini sudah sesuai dengan teori dari Hirano (1989) yang
mengatakan bahwa struktur kristal kitin panjang memiliki ikatan
yang kuat antara ion nitrogen dan gugus karboksil, sehingga di
proses deasetilasi ini digunakan larutan natrium hidroksida (NaOH)
dengan konsentrasi 40-50% dan suhu yang tinggi untuk mengubah
struktur kitin menjadi struktur kitosan. Penggunaan NaOH sendiri
bertujuan untuk merubah konformasi kitin yang sangat rapat menjadi
renggang, sehingga enzim yang akan menguraikan lebih mudah masuk
untuk mendeasetilasi polimer dari kitin. Alkali (NaOH) dengan
konsetrasi yang tinggi ini akan memutuskan ikatan antara gugus
karboksil dengan gugus nitrogen pada kitin. Hal tersebut sesuai
dengan yang diungkapkan oleh Martinou (1995). Semakin tinggi
konsentrasi NaOH yang digunakan pada proses deasetilasi, hal ini
akan menghasilkan kitosan dengan derajat deasetilasi yang tinggi
pula. Hal tersebut dikarenakan gugus fungsional amino yang
mensubstitusi gugus asetil pada kitin dalam larutan tersebut
menjadi semakin aktif, sehingga proses deasetilasi yang dilakukan
akan lebih optimal. Sedangkan penggunaan suhu tinggi pada poses
deasetilasi ini akan mengakibatkan gugus asetil terlepas dari
struktur kitin dan gugus amina pada struktur kitin akan berikatan
dengan gugus hidrogen yang memiliki muatan positif sehingga
membentuk gugus amina bebas. Hal tersebut sesuai dengan teori dari
Mekawati et al. (2000).
Rata-rata rendemen kitosan dengan penggunaan NaOH sebesar 40%,
50%, dan 60% secara berturut-turut adalah 21,687%, 9,309%, dan
21,336%. Hal tersebut kurang sesuai dengan teori dari Hong et al.
(1989) dan Naznin (2005) yang mengatakan bahwa penggunaan NaOH
dengan konsentrasi yang lebih tinggi akan menghasilkan kitosan
dengan rendemen yang lebih rendah. Hal tersebut dikarenakan
penambahan NaOH akan mengakibatkan proses depolimerisasi rantai
molekul kitosan sehingga berat molekul dari kitosan akan menurun.
Kualitas dari produk kitosan yang dihasilkan sangat ditentukan oleh
derajat deasetilasinya dimana derajat deasetilasi pada proses
pembuatan kitosan ini dipengaruhi oleh jenis dan kualitas bahan
dasar yang digunakan dan kondisi proses yang dilakukan (konsentrasi
larutan alkali, suhu, dan waktu). Hal tersebut sesuai dengan teori
dari Suhardi (1992).
Pada jurnal Extraction of chitin from chitosan from exoskeleton
of shrimp for application in the pharmaceutical industry mengatakan
bahwa kitosan merupakan polisakarida amino yang disiapkan dalam
pengoolahan limbah udang yang melibatkan d-acytyl dari kitin.
Kitosan tidak beracun yang dapat digunakan dalam dunia farmasi
sebagai formulasi eksipien potensial. Hasil kitosan ditemukan
35,49% dan dianalisis untuk parameter physiochemical (Puvvada et
al., 2012).
Pada jurnal The Use of Crude Shrimp Shell Powder for Chitinase
Production bySerratia marcescens WF mengatakan bahwa limbah udang
mentah dapat memproduksi kitinase. Produksi kitinase diperoleh
dengan bubuk kulit udang kering sebesar 6%, pH 6,5 dengan
temperatur 28oC selama fermentasi hingga 72 jam (Sauls et al.,
2006).
Pada jurnal Chitin Extraction from Crustacean Shells Using
Biological Methods mengatakan bahwa kitin merupakan biopolimer yang
paling luas dialam. Dapat diekstraksi dari tiga sumber, yaitu
krustasea, serangga, dan mikroorganisme, tetapi sumber utama pada
kitin terdapat pada cangkang dan produksi terbesar terdapat pada
pengolahan kerang. Ekstraksi kitin melibatkan dua langkah, yaitu
demineralisasi dan deproteinisasi. Asam laktat dihasilkan dari
proses demineralisasi dan asam laktat bereaksi dengan kalsium
karbonat, mineral, dan membentuk asam laktat (Arbia et al.,
2013)
Pada jurnal Determination of Degree of Deacetylation of Chitosan
and Their effect on the Release Behavior of Essential Oil from
Chitosan and Chitosan-Gelatin Complex Microcapsules mengatakan
bahwa kitosan merupakan polisakarida alami yang disusun oleh
N-deacetylation dari kitin. Sudah banyak digunakan dalam industri
makanan dan bioteknologi. Kitosan digunakan untuk melapisi zat
bioaktif dan menghentikan enzim akhir (Zhao et al., 2011).
Pada jurnal Preparation and Application of Chitosan
Nanoparticles and Nanofibers mengatakan bahwa deasetilasi kitosan
dilakukan dengan perlakuan alkali, derajat deasetilasi ditentukan
dengan menggunakan spektrofotometer, titrasi potensiometri dan CHN
analyzer. Semakin tinggi perlakuan alkali maka semakin tinggi juga
derajat deasetilasi dan berat molekul lebih rendah lagi (Hussain,
2013).
4. 5. KESIMPULAN
Kitin merupakan makromolekul yang mempunyai bentuk berupa
padatan amorf atau kristal yang berwarna putih. Kitin dapat
ditemukan dalam komponen struktural eksoskeleton dari serangga dan
crustacea. Kitin memiliki sifat lebih fleksibel, lebih mudah larut
dalam asam encer, larut dalam asam pekat, tidak larut dalam air,
asam organik, asam anorganik encer, pelarut organik dan alkali
pekat. Pembuatan kitin dan kitosan menggunakan limbah udang (kulit)
yang sudah dipisahkan dari dagingnya yang melalui proses
demineralisasi, deproteinasi dan deasetilasi. Ekstraksi kitin
secara kimiawi dilakukan melalui proses deproteinasi dengan
menggunakan basa kuat, dan proses demineralisasi dengan menggunakan
senyawa asam, baik asam kuat atau asam lemah. Pencucian bertujuan
untuk menghilangkan kotoran yang masih menempel yang dapat
mencemari ektraksi kitin. Keuntungan kitosan yaitu mudah didapat,
prosedur isolasinya mudah, tidak beracun, dan tidak membahayakan.
Penggunaan NaOH sebagai pelarut dikarenakan NaOH merupakan alkali
yang digunakan untuk menghidrolisa kitin sehingga terjadi proses
deasetilasi dari gugus asetamida menjadi gugus amina. Proses
transformasi kitin menjadi kitosan dilakukan dengan proses
penghilangan gugus asetil dari kitin menjadi amina pada kitosan
yang dikenal dengan proses deasetilasi. Proses pemanasan bertujuan
untuk mengoptimalkan proses pendeasetilan N dari kitin. Proses
pencucian hingga pH-nya netral mempengaruhi sifat penggembungan
kitin dengan alkali oleh karena itu efektivitas proses hidrolisis
basa terhadap gugus asetamida pada rantai kitin semakin baik.
Proses pengeringan dimaksudkan untuk menghilangkan kadar air yang
masih tersisa saat pencucian sehingga ketika dihitung rendemennya
hanya ada kitosan saja. Faktor yang mempengaruhi proses pembuatan
kitin adalah jenis bahan baku dan proses ekstraksi kitin. Faktor
yang mempengaruhi pembuatan kitosan adalah konsentrasi enzim, pH
dan suhu proses.
Semarang, 20 Oktober 2014Asisten Dosen: Stella Gunawan
Thervina Yenni Tri Kusuma 12.70.0121
6. 7. DAFTAR PUSTAKA
Abun, Tjitjah Aisjah, dan Deny Saefulhadjar. (2007). Pemanfaatan
Limbah Cair Ekstraksi Kitin dari Kulit Udang Produk Proses Kimiawi
dan Biologis Sebagai Imbuhan Pakan dan Implikasinya terhadap
Pertumbuhan Ayam Broiler.
http://pustaka.unpad.ac.id/wpcontent/uploads/2009/10/pemanfaatan_limbah_cair_ekstraksi_kitin1.pdf.
Arbia, Wassila., Leila Arbia, Lydia Adour, Abdeltif Amrane.
(2013). Chitin Extraction from Crustacean Shells Using Biological
Methods. W. A R B I A et al.: Chitin Recovery Using Biological
Methods, Food Technol. Biotechnol. 51 (1) 1225 (2013). ISSN
1330-9862
Azhar, M., Jon Efendi, Erda S., Rahma M. L, dan Sri
Novalina.(2010). Pengaruh Konsentrasu NaOH dan KOH Terhadap Derajat
Deasetilasi Kitin dari Limbah Kulit Udang.EKSAKTA Vol. 1 Tahun
XI.
Balley, J.E., & Ollis, D.F. (1977). Biochemical Engineering
Fundamental. Mc. Graw Hill Kogakusha. Tokyo.
Bastaman, S. (1989). Studies on Degradation and Extraction of
Chitin and Chitosan from Prawn Shells. Thesis. The Depatment of
Mechanical. Manufacturing Aeronautical and Chemical Engineering.
The Queen's University. Belfast.
Cahyaningrum, S. E., Agustini, Herdyastuti. (2007). Pemakaian
Kitosan Limbah Udang Windu sebagai Matriks Pendukung pada
Imobilisasi Papain. Jurusan Kimia, FMIPA, Universitas Negeri
Surabaya. Jurnal Akta Kimindo Vol. 2 No. 2 Oktober 2007: 93-98.
Dunn, E.T., E.W. Grandmaison & M.F.A. Goosen. (1997).
Applications and Properties of Chitosan. Technomic Pub, Basel, p
3-30.
Dutta, Pradip Kumar., Joydeep Dutta.,& V.S.Tripathi. (2004).
Chitin and Chitosan : Chemistry, Properties and Applications.
Journal of Scientific and Industrial Research.
Fennema, O.R. (1985). Food Chemistry.Second Edition.Marcel
Dekker, Inc., New York.
Hargono, S dan Haryani D (2004). Pengaruh Konsentrasi Zat
Pelarut dalam Proses Demineralisasi, Deproteinasi, dan Deasetilasi
terhadap Kualitas Khitosan. Universitas Indonesia, Jakarta.
Hargono; Abdullah & Indro Sumantri. (2008). Pembuatan
Kitosan Dari Limbah Cangkang Udang Serta Aplikasinya Dalam
Mereduksi Kolesterol Lemak Kambing. Reaktor, Vol. 12 No. 1, Juni
2008, Hal. 53-57. Fakultas Teknik UNDIP. Semarang.
Hartarti, F.K., Susanto, T., Rakhmadiono, S., dan Lukito, A.S.
(2002). Faktor-Faktor yang Berpengaruh terhadap Tahap
Deproteinisasi Menggunakan Enzim Protease dalam Pembuatan Khitin
dari Cangkang Rajungan (Portunus pelagicus). BIOSAIN, VOL. 2, NO. 1
: 68-77.
Hirano. (1989). Production and Aplication on Chitin and Chitosan
in Japan.Jepang.
Hong H, No K, Meyers SP, Lee KS. (1989). Isolation and
Characterization of Chitin from crawfish shell waste. J Agric Food.
Chem 33:375-579.
Hussain, Md Rabiul., Murshid Iman, Tarun K. Maji. (2013).
Determination of Degree of Deacetylation of Chitosan and Their
effect on the Release Behavior of Essential Oil from Chitosan and
Chitosan-Gelatin Complex Microcapsules. International Journal of
Advanced Engineering Applications, Vol.6, Iss.4, pp.4-12 (2013)
Johnson, A.H. dan M.S. Peterson.(1974). Encyclopedia of Food
Technology Vol. II. The AVI Publishing Co., Inc., Connecticut.
Knoor. (1984). Faktor- Faktor yang Berpengaruh terhadap Tahap
Deproteinisasi Menggunakan Enzim Protease dalam Pembuatan Khitin
dari Cangkang Rajungan (Portunus pelagicus). BIOSAIN, VOL. 2, NO. 1
: 68-77.
Krissetiana, Henny, Mei. (2004). Khitin dan Khitosan dari Limbah
Udang.
Laila, A & Hendri, J. (2008).Study Pemanfaatan Polimer Kitin
Sebagai Media Pendukung Amobilisasi Enzim -Amilase.
http://lemlit.unila.ac.id
/file/arsip%202009/SATEK%202008/VERSI%20PDF/bidang%203/41.pdf
Lehninger, A.L. (1975). Biochemistry. 2nd Ed. Worth Publisher
Inc., New York.
Limam, Zouhour., Salah Selmi., Saloua Sadok., & Amor El
Abed. (2011). Extraction and Characterization of Chitin and
Chitosan from Crustacean by-Products : Biological and
Physicochemical Properties. African Journal of Biotechnology Vol.
10 (4), pp. 640-647.
Martinou, A.D., D. Kafetzopoulos dan V. Bouriotis. (1995).Chitin
deacetylation by enzymatic means.
Mekawati, Fachriyah, E. dan Sumardjo, D. (2000).Aplikasi Kitosan
Hasil tranformasi Kitin Limbah Udang (Penaeus merguiensis) untuk
Adsorpsi Ion Logam Timbal.Jurnal Sains and Matematika, FMIPA Undip,
Semarang, Vol. 8 (2), hal. 51-54.
Morteza Shahabi Viarsagh, Mohsen Janmaleki1, Hamid Reza
Falahatpisheh, Jafar Masoumi1. (2009).Chitosan Preparation from
Persian Gulf Shrimp Shells and Investigating the Effect of Time on
the Degree of Deacetylation.
Mudasir, G. Raharjo, I. Tahir, and E.T. Wahyuni. (2008).
Immobilization of Dithizone onto Chitin Isolated from Prawn
Seawater Shells (P. merguensis) and its Preliminary Study for the
Adsorption of Cd(II) Ion. Journal of Physical Science, Vol. 19 (1),
36-78, 2008.
Mukku Shrinivas Rao and Willem F Stevens.(2005).Chitin
production by Lactobacillus fermentation of shrimp biowaste in a
drum reactorand its chemical conversion to chitosan.
Muzzarelli, R.A.A. (1985). Chitin in the Polysaccharides Vol. 3.
Academic Press Inc. Orlando. San Diego.
Naznin, Rokshana. (2005). Extraction of Chitin and Chitosan from
Shrimp (Metapenaeus monoceros) Shell by Chemical Method. Pakistan
Journal of Biological Sciences 8 (7) : 1051-1054, 2005.
Patil, R. S., V. Chormade, and M. V. Desphande. 2000.
Chitinolytic enzymes an exploration. Enz Microb Technol
26:473-483.
Peter, Martin G. (1995). Application and Environmental Aspects
of Chitin and Chitosan.Journal of Pure and Appl. Chem. Marcel
Dekker, Inc., Germany. Hlm. 629-639.
Pillai, Willi Paul, Chandra P. S. (2009). Chitin and Chitosan
Polymers: Chemistry, Solubility and Fiber Formation. Progress in
Polymer Scince.
Prasetyo, Kurnia Wiji. (2006). UPT Balai Litbang Biomaterial,
Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia. terbit di KOMPAS pada tanggal
15 Mei 2006.
Purwaningsih. (1994). Teknologi Pembekuan Udang. PT Penebar
Swadaya. Bogor.
Puspawati, N. M dan I. N. Simpen. (2010). Optimasi Deasetilasi
Khitin dari Kulit Udang dan Cangkang Kepiting Limbah Restoran
Seafood Menjadi Khitosan Melalui Variasi Konsentrasi NaOH. Jurnal
Kimia Vol 4 hal 79 90.
Puvvada, Yateendra Shanmukha., Saikishore Vankayalapati.,
Sudheshnababu Sukhavasi. (2012). Extraction of chitin from chitosan
from exoskeleton of shrimp for application in the pharmaceutical
industry. Puvvada et al., International Current Pharmaceutical
Journal 2012, 1(9): 258-263
Radhakumary, C., P.D. Nair, S. Mathew, C.P.R. Nair. (2005).
Biopolymer Composite of Chitosan and Methyl Methacrylate for
Medical Applications. Trends Biomater. Artif. Organs. Vol 18(2) :
117-124.
Ramadhan, L.O.A.N., C.L. Radiman, D. Wahyuningrum, V. Suendo,
L.O. Ahmad, S. Valiyaveetiil. (2010). Deasetilasi Kitin secara
Bertahap dan Pengaruhnya terhadap Derajat Deasetilasi serta Massa
molekul Kitosan. Jurnal Kimia Indonesia. Vol 5 : 17-21.
Rismana, E. (2001). Langsing dan Sehat Lewat Limbah Perikanan.
Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi. Jakarta.
Robert, G.A.F. (1992). Chitin Chemistry. The Macmillan Press
Ltd., London.
Rochima, Emma; Maggy T.Suhartono; Dahrul Syah; dan Sugiyono.
(2007). Viskositas dan Berat Molekul Kitosan Hasil Reaksi Enzimatis
Kitin Deasetilase Isolat Bacillus Papandayan K29-14.
http://resources.unpad.ac.id/unpad-content/uploads/publikasi_dosen/Makalah-6.Viskositas......pdf.
Rogers, E.P. (1986). Fundamental of Chemistry. Books/Cole
Publishing Company. California.
Sandford, T.A., and Hutchins, H.S., (1978), Reporting Degree of
Deacetylation values of Chitosan, J. Pharm Pharmaceut Sci. Vol.
5(3), pp 205-212.
Sauls, Jess E. Meja., Krzysztof N. Waliszewski., Miguel A.
Garcia., Ramon Cruz-Camarillo. (2006). The Use of Crude Shrimp
Shell Powder for Chitinase Production bySerratia marcescens WF.
J.E. MEJA-SAULS et al.: Crude Shrimp Shells for Chitinase
Production, Food Technol. Biotechnol. 44 (1) 95100 (2006)
Shahidi F, Arachchi JKV, and Jeon Y-J. (1999). Food Applications
of Chitin and Chitosans. Trends in Food Science and Technology 10 :
37- Slepecky, R. A. and H. E. Hemphill. 1991. The genus
Bacillius-nonmedical the prokaryotes. In Balows, A. (ed). The
Procaryotes, 2nd. Edn., Chapter 76, pp. 1663-1696. Springer Verlag.
NY.
Suhardi, U. Santoso dan Sudarmanto. (1992). Limbah Pengolahan
Udang untuk Produksi Kitin, Laporan penelitian, BAPPINDO-FTP UGM.
Yogyakarta.
Wang, Zhengke., Qiaoling Hu., & Lei Cai. (2010). Chitin
Fiber and Chitosan 3D Composite Rods. International Journal of
Polymer Science.
Winarno,F.G. (1997). Kimia Pangan dan Gizi. PT. Gramedia Pustaka
Utama. Jakarta.
Zhao, Li-Ming., Lu-E Shi, Zhi-Liang Zhang, Jian-Min Chen,
Dong-Dong Shi, Jie Yang, Zhen-Xing Tang. (2011). Preparation and
Application of Chitosan Nanoparticles and Nanofibers. Brazilian
Journal of Chemical Engineering. Vol. 28, No. 03, pp. 353 - 362,
July - September, 2011. ISSN 0104-6632
8. LAMPIRAN8.1. Perhitungan
Rumus = Rendemen Kitin I = x 100%Rendemen Kitin II = x
100%Rendemen Kitosan = x 100%
Kelompok D1Rendemen Kitin I =Rendemen kitin II = Rendemen
kitosan =
Kelompok D2Rendemen Kitin I =Rendemen kitin II = Rendemen
kitosan =
Kelompok D3
Kelompok D4Rendemen Chitin I= = 32,625 %Rendemen Chitin II= =
12,1 %Rendemen Chitosan = = 8,528 %
Kelompok D5
Kelompok D6Rendemen Chitin I x 100% 5,625 %Rendemen Chitin II x
100% 42,635%Rendemen Chitosan x 100%13,547%
8.2. Laporan Sementara8.3. Diagram Alir
