laboratorio 2 micro2 (2)

7/27/2019 laboratorio 2 micro2 (2)

http://slidepdf.com/reader/full/laboratorio-2-micro2-2 1/12

Universidad nacional de ingeniería

facultad de ingeniería ambiental

Microbiología ii

IDENTIFICACION DE PROTOZOARIOS ,

ROTIFEROS,MICROCRUSTACEOS,HONGOS,ARTROPODOS,LARVAS DE

INSECTOS,HELMINTOS,VIRUS,PECES,PLANTASACUATICAS,PECES Y VIRUS

Alumna:

Jara Huamanñahui Litza

Sección:

“F”

26 DE JUNIO DEL 2013



INTRODUCCION………………………………………………………………………………………………..1

OBJETIVOS……………………………………………………………………………………………………….1

FUNDAMENTO TEORICO…………………………………………………………………………………..1-2

MATERIALES Y EQUIPOS…………………………………………………………………………………..2-3

PROCEDIMIENTO……………………………………………………………………………………………..3-5

RESULTADOS…………………………………………………………………………………………………….5-8

CONCLUSIONES ,DISCUSIONES Y RECOMENDACIONES………………..…………………..8-9

CUESTIONARIO………………………………………………………………………………………………….9-11

ANEXOS…………………………………………………………………………………………………………….11-12



1. INTRODUCCIÓN:Las algas son habitantes comunes y normales de aguas poco profundas y se encuentran

en todo suministro de agua expuesto a la luz del sol –aunque algunas algas se encuentranen el suelo y en superficies expuestas al aire .Conocer el numero y clase de algas

presentes en estanques de aguas negras es de gran utilidad para ver el proceso deoxidación.

La metodología empleada es la que utilizan la gran mayoría de los laboratorios ;consiste

en un análisis cualitativo y cuantitativo , en este ultimo se emplea la cámara de Sedwick–Rafter.

2. OBJETIVOS:Determinar la concentración promedio de microorganismos por los métodosde celda Sedgwic - Rafter y la franja, y hallar el número de campos de cada uno de

ellos, con los objetivos 10X y 43X.

Comprender los métodos para determinar la concentración demicroorganismos, observar

y determinar cuál de los dos métodos es el máspreciso.- Hallar la cantidad de campos para ambas celdas por medio del microscopio óptico.- Determinar la concentración de los microorganismos encontrados en la muestra.

3. FUNDAMENTO TEORICO:El recuento de microorganismos , para la avaliacion (valoración) de su concentración en

1ml de agua , se hace por varios procedimientos .Los mas usuales son los que utilizan lacelda contadora de Sedwick – Rafter .Esta celda es un porta objeto que contiene un

recipiente rectangular, con dimensiones de 20x50mm , con una profundidad de 1mm

(volumen total de 1ml).La colocación de la muestra de agua en la celda de Sedwick–

Rafter se hace como se ve en la

figura



En general , se emplea para la observación, un objetivo 10x .Objetivos más potentes no

pueden ser empleados con la celda de recuento , pues esta tiene un espesor muy grande

.El numero de microorganismos enfocados en un campo visual debe ser multiplicado por

el numero de campos existente en toda la celda (osea en un área de 20x50mm , o mejor

dicho en 1ml de muestra).Los procedimientos principales , para conocer el numero decampos existentes en la superficie de la celda.

a)método de whipple (ver anexo1)

b)método de la celda de S-R (del recuento por hileras):En este método se cuentan todoslos mo que se encuentran en una faja del ancho del campo , en toda la longitud de lacelda de S-R .La concentración de mo po ml se obtiene simplemente multiplicando el

numero obtenido de mo por el numero de campos existentes en el ancho de la celda .Elnumero de campos puede ser contado directamente , al microscopio, sin auxilio de

retículos o de micrómetros.

c)método de la franja : para muestras que contienen una gran concentración de mo (porejemplo lagunas de estabilización) se puede emplear el mismo método anterior , pero

utilizando solamente una gota de la muestra , la cual es colocada sobre un porta objeto y

recubierto por un cubre objetos de 22x22mm .En este caso es necesario conocer elvolumen de la gota .Eso se puede medir contando e numero d egotas necesario para

llenar un aprobeta de 10 0 50ml .



4. MATERIALES Y EQUIPOS:

5. PROCEDIMIENTO :

Método de la franja:



Medir las gotas que hay en 5 ml Tomar 1 gota de la muestra

Observar los campos y realizar verter la gota sobre elel conteo de mo. portaobjetos , y colocar

sobre ella el cubreobjetos

Método de la Celda - SEDGEWICK RAFTER



Tomar 1 ml de muestra Verterlo en la celda

Realizar el conteo de Observar los campos a

mo en cada campo través del microscopio

6.RESULTADOS

Objetivo 10x:

T = 27°C

N° CAMPOS N° DEMICROORGANISMOS



1 1 2 0 3 0 4 0 5 0

6 0 7 0 8 1 9 010 0 11 0 12 1 Total de N° decampos: 12

Total de N° demicroorganismos: 3

CALCULAR EL PROMEDIO DE MO POR CAMPO:

X = 3/12 = 0.833 mo/campo

DETERMINACIÓN DE NO DE CAMPOS EN TODO EL CUBREOBJETOS.

Numero de campos a lo ancho (lado) del cubre objeto = 12 campos Numero de campos a lo largo (lado) del cubre objeto = 12campos

Total N°campos = 12*12 =144

DETERMINACIÓN DEL VOLUMEN DE UNA GOTA

85 gotas <> 5 mL 1 gota <> X mL

Volumen de una gota: X = 85

X = 0.0588ml

DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE MICRORGANISMOS

Concentración de mo: 0.833*144*0.0588 = 7.053 N° de mo /ml



Método de la celda sedwwick –rafter

Calcular el promedio de mo po campo:

N° DE CAMPOS N° DEMICROORGANISMOS

1 02 03 14 15 06 07 08 09 210 011 0



12 013 0Total de N° decampos: 13

Total de N° demicroorganismos: 4

X = 4/ 13 = 0.3076 mo/campo

Total de N° campos = 13*33 = 429 campos

Concentración de mo : 0.3076 * 429 /ml = 131.9 N° d emo /ml

5 .DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

6 .RECOMENDACIONES*Hacer el recuento no en una sola franja , sino en 2 franjas perpendiculares

Ejemplo: si en un recuento se encuentran 20 algas en un sentido y 30 en otro , el promedio es 25

organismos.

*Si se encontró en un sentido 110 campos y el otro 90 campos , el factor de multiplicación será

100(promedio de 100 y 90)



7 .CUESTIONARIO

8 .ANEXOS

Anexo1:

a)método de whipple:En este metodo se mide el area del campo visual(el cual es variable para

cada objetivo y ocular utilizado)con auxilio del micrómetro ocular de Whipple.Este es un disco de

vidrio , que contiene un retículo quebrado que divide el campo en cien partes o cuadraditos

iguales .El valor , en micras , del área de cada uno de esos cuadraditos varia según el objetivo

utilizado .Por ese motivo , dicho valor debe ser previamente medido , para cada objetivo del

microscopio , con auxilio de un micrómetro de objetivo .Se coloca ese micrómetro en la platina del

microscopio , del mismo modo como se colocaría un portaobjeto.Se focaliza la línea , colocándose

el micrómetro de whipple en el ocular , se hace la superposición de ambos y , de esa manera se

puede se puede medir el lado de uno de los cuadraditos .Una vez conocida el área del cuadradito ,

se obtiene el área del campo , multiplicando ese valor por 100, y por lo tanto el numeor de

campos comprendido en toda la celda de Sedwick-Rafter.

Por ejemplo , si el cuadradito mide 10 divisiones osea 100u de lado , se tiene que su área es de

100x100=10000u2 y el área del campo será: 100x10000 u2 =1000000u2 .La celda de S-R mide

2x5x108 u2 = 1000000000 u2 , osea , que contiene mil campos .Luego se multiplica el numero de

microorganismos promedio .Luego se multiplica el numero de mo promedio , contado digamos en10campos , por el numero de campos que hay en la celda



9 .BIBLIOGRAFÍA

http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/.pdf

http://www.bvsde.ops-oms.org/ pdf

http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/1020082346/1020082346_050.pdf

http://www.bvsde.ops-oms.org/bvsacd/scan/013761/013761-07.pdf



http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/1020082346/1020082346_050.pdf

Documents

laboratorio 2 micro2 (2)