1

Desarrollamos métodos para el aislamiento, identificación y cuantificación de sustancias basados en:

LABORATORIO DE FITOQUÍMICA BIODIRIGIDA QyP 342

Cromatografía Líquida y de Gases Espestrofotometría UV-visible FTIR Espectrometría de masas Espectroscopís de RMN de Pulso. Quimiometría

2

Áreas de Aplicación

Identificación de sustancias con propiedades biológicas

Química de los aromas en alimentos Determinación del riesgo de la enfermedad

cardiovascular con RMN (Proyecto Misión Ciencias del FONACIT)

Tesistas de Postgrado

Lic. Sandra De Sousa-- Investigará en el aroma del vino

Personal en el laboratorio

Ing(a). Patricia Muñoz--Ing. Pedro Moncada--Prof. Julio Herrera

3

Actividad trypanocida de diterpenos aislados de la raíz de Craniolaria annua.

Julio C. Herreraa,*, Graciela Tronconea, Diana Henríquezb, and Neudo Urdanetaa

a Departamento de Química, Universidad Simón Bolívar, b Departamento de Biología Celular, Universidad Simón Bolívar

Z. Naturforsch. 63C 821-829 (2008)

4

O

O H

HO

1

O H

O H

HO

1A

Ejemplo de diterpenos aislados de la raíz de Craniolaria annua

5

6

Importancia de compuestos a-dicarbonilos durante el envejecimiento de la cerveza

Adriana Bravo, Julio C. Herrera, Erika Scherer, Yon Ju-Nam, Heinrich Rübsam, Jorge Madrid, Carsten Zufall, y Rafael Rangel-Aldao

Journal of agricultural and food chemistry, 56 4134-4144, (2008)

7

O

O

HOO H

HO

HO

NH 2

NH 2

N

N

O H

HO

O HHO

+

Derivatización de los a-dicarbonilos

8

Concentración de a-dicarbonilos durante el envejecimiento de la cerveza mediante cromatografía de gases con detector de masas.

9

Proyecto: Desarrollo De Metodologia Rapida Por RMN Para Deteminar Factores Bioquímicos De Riesgo Cardiovascular

--Plano del Riesgo cardiovascular--

Aplicación de la quimiometría: Análisis de componentes principales a los espectros de RMN de plasma humano

10

Hay laboratorios dedicados a medir el riesgo cardiovascular mediante análisis clínicos por RMN

11

1. La señal en RMN es proporcional al número de partículas de lipoproteínas a 45°C

0.40.50.60.70.80.911.11.20

0.5

1

1.5

2

2.5

ppm

Áre

a/Á

rea(

ref)

H 2C

HC

H 2C

O

O

O

C

C

C

O

O

OH 2C

H 2C

H 2C

H 2C

H 2C

H 2C

CH 3

CH 3

CH 3

n

n

n

CH 3

H 3C

O H

C H 3

H

HH

C H 3

C H 3

TG

Ester Colesterol

P. L.

12

2. Diferencias en el tamaños de lipoproteínas producen diferentes desplazamientos químicos (d) a 45°C

Tesis Doctoral de Elias Joseph Jeyarajah (2004)

ppm0.80 0.760.84 0.72 0.84

13

I. Espectrómetro RMN de 400 MHz. Fueron 64 barridos por plasma

II. Los espectros tienen 620 puntos con resolución de 0.0006 ppm

III. Tiempo promedio por muestra: 25 min

IV.121 muestras de plasmas

A

B

A: TSP en agua deuterada

B: 1,6 mL de plasma

Condiciones Generales de analisis de Plasmas por RMN

La técnica empleada permite análisis rápidos de plasmas y con suficiente sensibilidad

14

Espectros de RMN de las lipoproteínas en diferentes plasmas

0.740.75

0.760.77

0.780.79

0.80.81

0.820.83

0.840.85

0.860.87

0.880.89

0.9

ppm

A /

A TS

P

Posición LDL pequeñas

15

Análisis de Componentes Principales genera Plano del Riesgo cardiovascular

-6 -4 -2 0 2 4 6 8-6

-4

-2

0

2

4

6

PC1

PC2

PC1: explica variación en número de lipoproteínas PC2: explia variación en el tamaño de lipoproteínas

16

-6 -4 -2 0 2 4 6 8-6

-4

-2

0

2

4

6

PC1

PC2

Plasmas en el Plano del Riesgo Cardiovascular con los niveles de colesterol superpuestos

colesterol< 200201 a 239>239

17

Plasmas en el Plano del Riesgo Cardiovascular con los niveles de TG superpuestos

-6 -4 -2 0 2 4 6 8-6

-4

-2

0

2

4

6

PC1:explica variación en número de lipoproteínas

PC

2: v

aria

ción

en

el ta

mañ

o de

lipo

prot

eína

s

TG< 150150 a 200>200

18

Plasmas con PC2 @ -3

PC1 PC2 PC3

Posición LDL pequeñas

*Tendencia al predominio de las VLDL grandes

0.750.76

0.770.78

0.790.8

0.810.82

0.830.84

0.850.86

0.870.88

0.890.90

3

6

7.5 -3.5 -0.8 6.6 -3.2 -0.3 4.6 -2.9 -1.5 2.2 -4.4 -1.1 0.9 -2.9 -1.0 0.3 -3.7 -0.2 0.0 -3.0 -0.2 -1.2 -2.7 -0.1

ppm

A /

A TS

P

19

Plasmas con PC2 = 0

PC1 PC2 PC3

* Tendencia al predominio de las VLDL pequeñas

0.750.76

0.770.78

0.790.8

0.810.82

0.830.84

0.850.86

0.870.88

0.890.90

3.5

-1.9 0.1 -0.5-4.5 0.0 0.0-1.7 -0.1 0.5 2.4 0.0 -0.5 0.0 0.0 -0.1-4.6 0.1 -0.4

ppm

A /

A TS

P

Posición LDL pequeñas

20

Plasmas con PC2 3: les predominan las LDL

Patron B

Posición LDL pequeñas

PC1 PC2 PC3

0.750.76

0.770.78

0.790.8

0.810.82

0.830.84

0.850.86

0.870.88

0.890.90

2

4

4.7 4.0 0.13.3 3.4 0.72.0 3.8 0.4-0.1 3.0 0.7-1.7 3.1 -1.0-0.6 4.1 -1.6-1.2 3.0 -0.5

ppm

A /

A TS

P