Laboratorio nº9

Determinación de carbohidratos

Objetivo 1. Diferenciar carbohidratos simples y complejos por sus propiedades químicas.2.      Realizar los cálculos característicos y referirlos a la cantidad de muestra utilizada.

INTRODUCCIÓN

El término carbohidrato se debe a que la mayoría de los azúcares tienen fórmulas moleculares del tipo Cn(H2O)m, lo que sugiere la combinación de átomos de carbono con moléculas de agua. Desde el punto de vista químico, los carbohidratos pueden definirse como polihidroxialdehidos y polihidroxicetonas y sus derivados.

Las propiedades químicas y físicas de los carbohidratos varían de acuerdo a su composición, por lo que se han diseñado pruebas especificas para su detección y cuantificación. Los monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, poseen grupos funcionales hidroxi o ceto, los cuales son reactivos químicamente. Una de sus propiedades es reducir el cobre de Cu+2 a Cu+1, observándose un cambio característico de color, de azul a naranja o rojo ladrillo. Si se mide el volumen de solución de un carbohidrato necesaria para precipitar una cantidad medida de solución de cobre, se puede determinar la concentración del carbohidrato; lo que permite evidenciar el poder reductor de estos azucares.

Materiales Balanza analítica

plancha de calentamiento

Beakers

balones aforados

pipetas

Fiolas

Bureta

piseta.

Reactivos reactivos de fehling (A y B), soluciones de yodo, glucosa, almidón, sacarosa, agua destilada, muestra problema (alimentos).

AlmidónFormula molecular: (C6H10O5)xAspecto Físico:           Polvo finoColor:                            BlancoOlor:                              Olor variableSabor:                           Sabor característicoDensidad:                    1,5 g/m

SacarosaFormula Química:          C12H22O11

Peso molecular:              342,30 g/molEstado físico:                   SólidoApariencia:                      Polvos o cristales blancos.Olor : sin olor a ligero olor característico a caramelo.Punto de ebullición:      192°C (se descompone).Punto de fusión:             160 - 186ºCDensidad (Agua):          1,587 kg/L a 25°CSolubilidad: muy soluble en agua (cerca de 200 g/100 m de agua). Moderadamente soluble en alcohol etílico, alcohol metílico, glicerol y piridina. Insoluble en éter y cloroformo.

GlucosaFormula Química:          C6H12O6

Peso molecular:              180,16 g/molEstado físico:                   líquido viscoso,  blanco o amarillento, inodoro.Olor : sin olor a ligero olor característico a caramelo.Punto de ebullición:      100°C (se descompone).Punto de fusión:             0ºCSolubilidad: muy soluble en agua.

Soluciones de YodoFórmula Química:      I2Peso molecular:         253,8 g/molAspecto Físico:           Gránulos, de olor picante, color gris con lustre metálicoPunto de Ebullición: 180ºCPunto de Fusión:        114ºCSolubilidad en agua: 0,03g/100 mL(20°C)

PROCEDIMIENTOPrueba de molisch

Agregue 2 gotas de la solución alfa-naftalina a cada una de las sustancias a ensayar.

Observar cuidadosamente cualquier cambio de color en la interfase de los líquidos.

Añada cuidadosamente por las paredes del tubo aproximadamente 1ml de H2SO4 concentrado

Prueba de Seliwanoff para pentosas

En un tubo de ensayo agregar 2 ml de reactivo de Seliwanoff

Ensaye esta prueba con glucosa y fructosa

Observe la aparición de un rojo intenso

Adicionar 2 gotas de carbohidratos y caliente durante 1 minuto en un baño maría con agua hirviendo.

Prueba de Benedict

Agregue cinco gotas de al solución de carbohidratos a 2ml del reactivo de Benedict

Ensaye la prueba con glucosa, fructosa, sacarosa y almidón

Coloque en un baño de agua hirviendo por 5 minutos

Prueba de Barfoed

A 2ml del reactivo de Barfoed añada 1 ml del carbohidratos, hierva por 1 minutos y deje reposar.

Ensaye en pruebas con glucosa y sacarosa

Anote tus observaciones

Prueba de Bial para pentosa

En un tubo de ensayo agregue aproximadamente 1ml de la sustancia a 2.5 ml de reactivo y caliente hasta que empiece a hervir

La aparición de una coloración azul verdosa , indica resultados positivos

Enfrié el tubo, luego agregue 2-3 ml de alcohol arnífico y agite. Ensaye esta prueba con glucosa y xilosa