LAMPIRAN - eprints.unwahas.ac.ideprints.unwahas.ac.id/885/6/lampiran.pdf · 3. Perhitungan luas patch 1 petri = π x r2 = 3,14 x (4,5)2 = 63,585 cm2 ... 3. Formulasi film transdermal

45

LAMPIRAN

46

Lampiran 1. Surat Keterangan telah Melakukan Penelitian di Laboratorium

Farmasetika Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim

Semarang

47

Lampiran 2. Surat Keterangan telah Melakukan Penelitian di Laboratorium

Farmakologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi Universitas

Wahid Hasyim Semarang

48

Lampiran 3. Surat Keterangan Tikus Jantan Galur Wistar

49

Lampiran 4. Certificate of Analysis Diltiazem Hidroklorida

50

Lampiran 5. Data Panjang Gelombang Maksimum Diltiazem HCl

51

Lampiran 6. Data Kurva Baku Diltiazem HCl

52

Lampiran 7. Perhitungan

1. Perhitungan pembuatan dapar fosfat pH 7,4

Molekul relatif (Mr) KH2PO4 = 136,0855 g/mol

Molekul relatif (Mr) NaOH = 40 g/mol

a. Perhitungan bahan yang ditimbang untuk KH2PO4

M = gram x 1000

Mr P

0,2 = gram x 1000

136,0855 62,5

KH2PO4 = 1,7 gram dilarutkan 62,5 mL aquades

b. Perhitungan bahan yang ditimbang untuk NaOH

M = gram x 1000

Mr P

0,2 = gram x 1000

40 48,875

NaOH = 0,38 gram dilarutkan 48,875 mL aquades

Kemudian 62,5 mL KH2PO4 0,2 M dan 48,875 mL NaOH 0,2 M

dicukupkan hingga 250 mL aquades

2. Perhitungan konversi dosis

Konversi dosis untuk manusia ke tikus = 0,018. Dosis untuk tikus rata-rata

bobot 200 g adalah

Dosis = dosis manusia x faktor konversi

= 25 mg x 0,008

= 0,45 mg/ film tiap tikus bobot 200 g/KgBB

Dibuat 120 film dalam 1 petri, jadi diltiazem HCl = 120 x 0,45 mg

= 54 mg/petri

Dosis diltiazem HCl dalam sedian transdermal untuk manusia adalah 25% dari jumlah polimer yaitu 100 mg (Limpongsa dan Umprayn, 2008).

3. Perhitungan luas patch

1 petri = π x r2

= 3,14 x (4,5)2

= 63,585 cm2

= 64 cm2

Luas film = 64 cm2

: 120 film = 0,53 cm

Luas film = s x s

0,53 = s2

s = 0,73 cm ∞ 0,7 cm

53

Lampiran 8. Formulasi Film Transdermal Diltiazem HCl

1. Formulasi film transdermal diltiazem HCl awal tiap film

Bahan Formula film transdermal diltiazem HCl

I II III

Diltiazem HCl (mg) 25 25 25

Polivinil alkohol (mg) 50 50 50

Etil sesulosa (mg) 50 50 50

PEG 400 (mg) 15 20 25

Propilenglikol (mg) 25 20 15

2. Formulasi awal dalam 1 petri


I II III




PEG 400 (mg) 240 320 400


Contoh perhitungannya (Formulasi I)

Diltiazem HCl = 25 x 16 = 400 mg

Polivinil alkohol = 50 x 16 = 800 mg

Etil selulosa = 50 x 16 = 800 mg

PEG (400) = 15 x 16 = 240 mg

Propilenglikol = 25 x 16 = 400 mg

Ket = 16 (pemotongan jumlah film dalam 1 petri untuk manusia)

3. Formulasi film transdermal diltiazem HCl setelah dikonversi ke tikus tiap

film


I II III

Diltiazem HCl (mg) 0,45 0,45 0,45

Polivinil alkohol (mg) 6,67 6,67 6,67

Etil sesulosa (mg) 6,67 6,67 6,67

PEG 400 (mg) 2,00 2,67 3,33

Propilenglikol (mg) 3,34 2,67 2,00

Jumlah (mg) 19,12 19,12 19,12

Konversi dosis untuk manusia ke tikus = 0,018. Dosis untuk tikus rata-rata bobot

200 g adalah

Dosis = dosis manusia x faktor konversi

= 25 mg x 0,008

= 0,45 mg/ film tiap tikus bobot 200 g/KgBB

Dibuat 120 film dalam 1 petri, jadi diltiazem HCl = 120 x 0,45 mg

= 54 mg/petri

54

Jumlah formula PVA, EC, PEG 400, PG didapatkan dari formula awal 1 petri

dibagi 120 film

Ket = Hanya diltiazem HCl yang dikonversi, agar tidak merubah formulasi dari

penelitian yang sebelumnya (Sholikhah, 2016).

4. Bahan yang harus ditimbang dalam pembuatan 1 petri film transdermal

diltiazem HCl


I II III




PEG 400 (mg) 240 320 400


5. Bahan yang harus ditimbang dalam pembuatan 1 petri film transdermal tanpa

obat diltiazem HCl

Bahan Formula

III

Polivinil alkohol (mg) 800

Etil sesulosa (mg) 800

PEG 400 (mg) 400

Propilenglikol (mg) 240

55

Lampiran 9. Perhitungan Kandungan Zat Aktif Diltiazem HCl

Bobot teoritis tiap 1 petri sediaan

Diltiazem HCl = 0,054 g

PVA = 0,800 g

EC = 0,800 g

PEG 400 = 0,240 g

PG = 0,400 g +

2, 294 g : 120 film = 0,019 g = 19 mg x 5

= 95 mg/5 film

1. Formula 1

Replikasi 1

Kadar diltiazem HCl teoritis

Bobot 5 film = 79 mg

RL Y = 0,05438 x + 0,00769

5 film = 79 mg = 0,831 mg

95 mg

0,831 mg x 2,25 (0,45 mg dosis konversi x 5 film) = 1,871: 5

= 0,374 mg/film

Kadar diltiazem HCl terukur

Absorbansi = 0,398

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 398 = 0,05438 x + 0,00769

X = 7,177 mcg/mL x 250 mL (pelarut yang digunakan)

= 1.795 mcg = 1,795 mg : 5 (jumlah film) = 0,359 mg

Persen kadar diltiazem HCL sebenarnya dari nilai kadar teoritis

0,359 mg/0,374 mg = 0,96 mg x 100% = 96 %

Replikasi 2

Kadar diltiazem HCL teoritis

Bobot 5 film = 76,6 mg

RL Y = 0,05438 x + 0,00769

5 film = 76,6 mg = 0,806 mg

95 mg

0,806 mg x 2,25 (0,45 mg dosis konversi x 5 film)= 1,814: 5

= 0,363 mg /film

56


Absorbansi = 0,372

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 372 = 0,05438 x + 0,00769

X = 6, 699 mcg/mL x 250 mL (pelarut yang digunakan)

= 1.674,8 mcg = 1,675 mg : 5 (jumlah film) = 0,335 mg


0,335 mg/0,363 mg = 0,923 mg x 100% = 92,3 %

Replikasi 3



RL Y = 0,05438 x + 0,00769

5 patch = 70,7 mg = 0,744 mg

95 mg

0,744 mg x 2,25 (0,45 mg dosis konversi x 5 film)= 1,674: 5

= 0,335 mg/film


Absorbansi = 0,414

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 414 = 0,05438 x + 0,00769


= 1.867,9 mcg = 1,867,9 mg : 5 (jumlah film) = 0,376 mg


0,376 mg/0,335 mg = 1,12 mg x 100% = 112 %

Rata-rata (replikasi 1,2 dan 3) = 101,1 %

2. Formula 2

Replikasi 1



RL Y = 0,05438 x + 0,00769

5 film = 63,9 mg = 0,673 mg

95 mg

0,673 mg x 2,25 (0,45 mg dosis konversi x 5 film)= 1,513 : 5

= 0,303 mg/film

57


Absorbansi = 0,347

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 347 = 0,05438 x + 0,00769




0,312 mg/0,303 mg = 1,03 mg x 100% = 103 %

Replikasi 2



RL Y = 0,05438 x + 0,00769

5 film = 61,1 mg = 0,643 mg

95 mg


= 0,290 mg/film


Absorbansi = 0,344

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 344 = 0,05438 x + 0,00769




0,309 mg/0,290 mg = 1,07 mg x 100% = 107 %

Replikasi 3



RL Y = 0,05438 x + 0,00769

5 film = 63,9 mg = 0,673 mg

95 mg


= 0,303 mg/film


Absorbansi = 0,343

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 343 = 0,05438 x + 0,00769



58


0,309 mg/0,303 mg = 1,02 mg x 100% = 102 %

Rata-rata (replikasi 1,2 dan 3) = 104 %

3. Formula 3

Replikasi 1



RL Y= 0,05438 x + 0,00769

5 film = 72,6 mg = 0,764 mg

95 mg


= 0,344 mg/film


Absorbansi = 0,340

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 340 = 0,05438 x + 0,00769




0,306 mg/0,344 mg = 0,89 mg x 100% = 89 %

Replikasi 2



RL Y= 0,05438 x + 0,00769

5 patch = 64,1 mg = 0,675 mg

95 mg

0,675 mg x 2,25 (0,45 mg dosis konversi x 5 patch)= 1,518 : 5

= 0,304 mg/film


Absorbansi = 0,322

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 322 = 0,05438 x + 0,00769

X = 5.780 mcg/mL x 250 mL (pelarut yang digunakan)

= 1.445 mcg = 1,445 mg : 5 (jumlah patch) = 0,289 mg


0,289 mg/0,304 mg = 0,95 mg x 100% = 95 %

59

Replikasi 3


Bobot 5 patch = 60,3 mg

RL Y= 0,05438 x + 0,00769

5 patch = 60,3 mg = 0,635 mg

95 mg

0,635 mg x 2,25 (0,45 mg dosis konversi x 5 patch)= 1,428 : 5

= 0,286 mg/film


Absorbansi = 0,282

Y = 0, 05438 x + 0, 00769

0, 282 = 0,05438 x + 0,00769

X = 5.044 mcg/mL x 250 mL (pelarut yang digunakan)

= 1.261,1 mcg = 1,261 mg : 5 (jumlah patch) = 0,252 mg


0,252 mg/0,286 mg = 0,88 mg x 100% = 88 %

Rata-rata (replikasi 1,2 dan 3) = 90,66 %

60

Lampiran 10. Data Hasil Uji Kandungan Zat Aktif Diltiazem HCl

Formula Replikasi Abs Kadar

(µg/mL)

Konsentrasi

(mg)

Rata-rata persen

kadar dari nilai

teoritis (%)

SEM

I 1 0,398 7,177 0,359

101,170

±4,936 2 0,372 6,699 0,335

3 0,414 7,472 0,376

II 1 0,347 6,240 0,312 103,834

±1,247 2 0,344 6,184 0,309

3 0,343 6,166 0,309

III 1 0,340 6,112 0,306

90,710

±1.767 2 0,322 5,780 0,289

3 0,282 5,044 0,252

61

Lampiran 11. Contoh Bobot Tikus untuk Pemberian Induksi NaCl 3g/KgBB

pada Pembuatan Tikus Hipertensi

Kelompok

perlakuan

Tikus Bobot tikus

Kontrol Hipertensi 1 236 g

2 228 g

3 200 g

4 222 g

5 204 g

Kontrol negatif 1 243 g

2 221 g

3 215 g

4 207 g

5 200 g

Formula 1 1 228 g

2 208 g

3 231 g

4 234 g

5 202 g

Formula 2 1 218 g

2 220 g

3 230 g

4 210 g

5 219 g

Formula 3 1 216 g

2 210 g

3 209 g

4 205 g

5 222 g

62

Lampiran 12. Contoh Perhitungan Volume Pemberian Sediaan NaCl 3g/KgBB

pada Pembuatan Tikus Hipertensi

Larutan stok NaCl 15% = 15 g/100mL

= 15.000 mg/100 mL

= 150 mg/mL

Dosis 3 g/KgBB

1. Kelompok hipertensi

Tikus 1 BB = 204 g

Dosis = 204 g x 3000 mg = 612 mg

1000 g

V. P = 612 mg x 1 mL = 4,08 mL

150 mg

2. Kontrol negatif

Tikus 1 BB = 207 g

Dosis = 207 g x 3000 mg = 621 mg

1000 mg

V. P = 621 mg x 1mL = 4,14 mL

150 mg

3. Kelompok formula 1

Tikus 1 BB = 208 g

Dosis = 208 g x 3000 mg = 624 mg

1000 mg

V. P = 624 mg x 1mL = 4,16 mL

150 mg


Tikus 1 BB = 218 g

Dosis = 218 g x 3000 mg = 654 mg

1000 mg

V. P = 654 mg x 1mL = 4,36 mL

150 mg


Tikus 1 BB = 216 g

Dosis = 216 g x 3000 mg = 648 mg

1000 mg

V. P = 621 mg x 1mL = 4,32 mL

150 mg

63

Lampiran 13. Data Bobot Tikus dan Perhitungan Film Transdermal Diltiazem

HCl

Kelompok

perlakuan

Tikus Bobot tikus

Formula 1 1 207 g

2 179 g

3 203 g

4 215 g

5 191 g

Formula 2 1 200 g

2 198 g

3 218 g

4 192 g

5 199 g

Formula 3 1 197 g

2 193 g

3 187 g

4 185 g

5 200 g

Contoh Perhitungan Film

Bobot tikus (200 g) = Bobot tikus yg ditimbang (gram)

Dosis untuk tikus 200 g (mg) Dosis untuk tikus yg ditimbang / X (mg)

Rata –rata kadar diltiazem teurukur (mg) = X (mg)

Luas film untuk tikus 200 g (cm2) film yang dipotong (cm)


Tikus 2 BB = 208 g

200 g = 208 g

0,45 mg X

X = 0,468 mg

0,36 mg = 0,468 mg

0,49 cm2

Y

Y = 0,64 cm2

Sisi = 0,8 cm


Tikus 1 BB = 218 g

200 g = 218 g

0,45 mg X

X = 0,49 mg

0,3 mg = 0,49 mg

0,49 cm2

X

X = 0,80 cm Sisi = 0,89 cm

64


Tikus 1 BB = 216 g

200 g = 216 g

0,45 mg X

X = 0,486 mg

0,28 mg = 0,486 mg

0,49 cm2

X

X = 0,85 cm2

Sisi = 0,92 cm

65

Lampiran 14. Data Tekanan Darah Sebelum dan Setelah Diinduksi NaCl

Kelompok

perlakuan

Tikus TDS (mmHg) TDD (mmHg)

Minggu 0 Minggu 2 Minggu 0 Minggu 2

Normal (Air

minum biasa)

1 102 106 73 71

2 119 116 80 76

3 112 112 77 75

4 105 109 71 75

5 109 103 74 67

Rata-rata ±SEM 109,4±2,63 109,2±2,02 75±1,41 72,8±1,50

Kontrol

hipertensi

(Induksi NaCl)

1 114 146 70 101

2 117 145 76 107

3 120 145 73 114

4 108 143 74 114

5 123 147 75 108

Rata – rata±SEM 116,4±2,30 145,2±0,60 73,6±0,92 108,8±2,17

Kontrol negatif

(Induksi NaCl)

1 112 149 86 109

2 109 138 76 97

3 120 138 75 100

4 118 172 110 140

5 104 156 100 130

Rata – rata±SEM 112,6±2,61 150.6±5,67 89,4±6,11 115.2±7,56

Formula I

(Induksi NaCl)

1 114 135 74 100

2 103 156 87 123

3 107 151 84 121

4 123 145 80 100

5 119 177 86 119

Rata – rata±SEM 113,2±3,30 152.8±6,24 82,2±2,12 112.6±4,63

Formula II

(Induksi NaCl)

1 117 159 82 120

2 114 153 78 108

3 120 161 79 120

4 123 163 82 121

5 118 158 78 119

Rata – rata±SEM 118,4±1,34 158.8±1,50 79,8±0,82 117.6±2,16

Formula III

(Induksi NaCl)

1 112 144 89 112

2 115 143 79 109

3 115 153 75 103

4 109 147 82 101

5 126 177 87 119

Rata – rata±SEM 115,4±2,57 152.8±2,46 82,4±2,29 108.8±2,88

66

Lampiran 15. Data Tekanan Darah Sistolik Sebelum dan Setelah Perlakuan

Kelompok

Perlakuan

Tikus Tekanan Darah

Sistolik Sebelum

Perlakuan (mmHg)

Tekanan Darah

Sistolik Setelah

Perlakuan (mmHg)

Penurunan

Tekanan

Darah

Keterangan

I 1 149 169

Kontrol

negatif +

film tanpa

obat

2 138 132

3 138 135

4 172 161

5 156 152

Rata-

rata±SEM 150.6±5,67 149.8±6,42

II 1 135 126 9 Uji I

(Formula1) +

film

diltiazem

HCl PEG

400 10,46%

2 156 130 26

3 151 136 15

4 145 138 7

5 177 110 67

Rata-

rata±SEM 152.8±6,24 128±4,50 24.8±9,87

III 1 159 136 23 Uji II

(Formula 2)

+ film

diltiazem

HCl PEG

400 13,97%

2 153 144 9

3 161 131 30

4 163 126 37

5 158 124 34

Rata-

rata±SEM 158.8±1,50 132.2±3,22 26.6±4,45

IV 1 144 132 12 Uji III

(Formula 3)

+ film

diltiazem

HCl PEG

400 17,48%

2 143 130 13

3 153 134 19

4 147 135 12

5 177 118 59

Rata-

rata±SEM 152.8±2,46 129.8±2,75 23±8,12

67

Lampiran 16. Data Tekanan Darah Diastolik Sebelum dan Setelah Perlakuan

Kelompok

Perlakuan

Tikus Tekanan Darah

Diastolik Sebelum

Perlakuan (mmHg)

Tekanan Darah

Diastolik Setelah

Perlakuan (mmHg)

Penurunan

Tekanan

Darah

Keterangan

I 1 109 120

Kontrol

negatif +

film tanpa

obat

2 97 98 3 100 96 4 140 123 5 130 130

Rata-

rata±SEM 115.2±7,56 113.4±6,16 II 1 100 81 19 Uji 1

(Formula 1)

+ film

diltiazem

HCl + PEG

400 10,46%

2 123 84 39 3

121 102 19 4 100 99 1 5 119 77 42

Rata-

rata±SEM 112.6±4,63 88.6±4,50 24±6,70 III 1 120 85 35 Uji II

(Formula 2)

+ film

diltiazem

HCl + PEG

400 13,97%

2 108 106 2 3 120 96 24 4 121 86 35 5 119 82 37

Rata-

rata±SEM 117.6±2,16 91±3,94 26.6±5,86 IV 1 112 93 19 Uji III

(Formula 3)

+ film

diltiazem

HCl + PEG

400 17,48%

2 109 96 13 3 103 91 12 4 101 86 15 5 119 76 43

Rata-

rata±SEM 108.8±2,88 88.4±3,13 20.4±5,16

68

Lampiran 17. Contoh Data Hasil Pengukuran Tekanan Darah pada Alat CODA

70

Lampiran 18. Hasil Uji Statistika Wilcoxon Tekanan Darah Sebelum dan

Setelah Induksi NaCl (Sistolik)

1. Uji Normalitas Data

2. Uji T Berpasangan

a. Kelompok normal

b. Kelompok kontrol hipertensi

71

c. Kelompok kontrol negatif

d. Kelompok formula 1

e. Kelompok formula 2

3. Uji wilcoxon

Kelompok formula 3

72


Setelah Induksi NaCl (Diastolik)


2. Uji T berpasangan

a. Kelompok normal

b. Kelompok hipertensi

c. Kelompok kontrol negatif

73

d. Kelompok formula 3

3. Uji Wilcoxon

a. Kelompok formula 1

b. Kelompok formula 2

74

Lampiran 20. Hasil Uji Statistika Wilcoxon Tekanan Darah Sebelum dan Setelah

Perlakuan (Sistolik)



a. kelompok kontrol negatif

b. kelompok formula 1

c. kelompok formula 2

75

3. Uji Wilcoxon

kelompok formula 3

76


Sesudah Perlakuan (Diastolik)



a. Kelompok kontrol negatif


77

3. Uji Wilcoxon

a. kelompok formula 1


78

Lampiran 22. Hasil Uji Statistika Kruskal Wallis Penurunan Tekanan Darah

Formula I,II dan III ( Sistolik )

1. Normalitas dan Homogenitas

2. Uji Kruskal Wallis

79

Lampiran 23. Hasil Uji Statistika Kruskal Wallis Penurunan Tekanan Darah

Formula I, II, dan III ( Diastolik )

1. Normalitas dan Homogenitas

2. Uji Kruskal Wallis

80

Lampiran 24. Dokumentasi

Film Transdermal Diltiazem HCl

Induksi Tikus Hipertensi

81

Mencukur bulu pada bagian abdomen Membuat tikus pingsan

Penempelan film transdermal diltiazem HCl

Pengukuran tekanan darah dengan alat CODA

Documents

LAMPIRAN - eprints.unwahas.ac.ideprints.unwahas.ac.id/885/6/lampiran.pdf · 3. Perhitungan luas patch 1 petri = π x r2 = 3,14 x (4,5)2 = 63,585 cm2 ... 3. Formulasi film transdermal