Materi Uji 1 : Pengujian Komponen Fitokimia Pada Enhalus
acoroides
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Fitokimia adalah segala
jenis nutrien yang terkandung dalam bahan hayati seperti tumbuhan,
sayur-sayuran dan buah. Dalam penggunaan umum, fitokimia memiliki
definisi yang lebih sempit. Fitokimia biasanya digunakan untuk
merujuk pada senyawa yang ditemukan pada tumbuhan yang tidak
dibutuhkan untuk fungsi normal tubuh, tapi memiliki efek yang
menguntungkan bagi kesehatan atau memiliki peran aktif bagi
pencegahan penyakit. Karenanya, zat-zat ini berbeda dengan apa yang
diistilahkan sebagai nutrien dalam pengertian tradisional, yaitu
bahwa mereka bukanlah suatu kebutuhan bagi metabolisme normal, dan
ketiadaan zat-zat ini tidak akan mengakibatkan penyakit defisiensi,
paling tidak, tidak dalam jangka waktu yang normal untuk defisiensi
tersebut. 1.2 Tujuan Praktikum Praktikum Pengantar Farmakologi Laut
tentang Uji Fitokimia ini bertujuan : 1. Untuk mengidentifikasi
senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam bahan hayati
laut
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Tinjauan Umum Uji Fitokimia
Fitokimia atau kadang disebut fitonutrien, dalam arti luas adalah
segala jenis zat kimia atau nutrien yang diturunkan dari sumber
tumbuhan, termasuk sayuran dan buah-buahan. Dalam penggunaan umum,
fitokimia memiliki definisi yang lebih sempit. Fitokimia biasanya
digunakan untuk merujuk pada senyawa yang ditemukan pada tumbuhan
yang tidak dibutuhkan untuk fungsi normal tubuh, tapi memiliki efek
yang menguntungkan bagi kesehatan atau memiliki peran aktif bagi
pencegahan penyakit. Karenanya, zat-zat ini berbeda dengan apa yang
diistilahkan sebagai nutrien dalam pengertian tradisional, yaitu
bahwa mereka bukanlah suatu kebutuhan bagi metabolisme normal, dan
ketiadaan zat-zat ini tidak akan mengakibatkan penyakit defisiensi,
paling tidak, tidak dalam jangka waktu yang normal untuk defisiensi
tersebut. 2.2. Tinjauan Umum Komponen Fitokimia Bahan Alam
Alkaloid
Alkaloid adalah sebuah golongan senyawa basa bernitrogen yang
kebanyakan heterosiklik dan terdapat di tetumbuhan (tetapi ini
tidak mengecualikan senyawa yang berasal dari hewan). Asam amino,
peptida, protein, nukleotid, asam nukleik, gula amino dan
antibiotik biasanya tidak digolongkan sebagai alkaloid. Dan dengan
prinsip yang sama, senyawa netral yang secara biogenetik
berhubungan dengan alkaloid termasuk digolongan ini. Alkaloid
dihasilkan oleh banyak organisme, mulai dari bakteria, fungi
(jamur), tumbuhan, dan hewan. Ekstraksi secara kasar biasanya
dengan mudah dapat dilakukan melalui teknik ekstraksi asam-basa.
Rasa pahit atau getir yang dirasakan lidah dapat disebabkan oleh
alkaloid. Istilah "alkaloid" (berarti "mirip alkali", karena
dianggap bersifat basa)
pertama kali dipakai oleh Carl Friedrich Wilhelm Meissner
(1819), seorang apoteker dari Halle (Jerman) untuk menyebut
berbagai senyawa yang diperoleh dari ekstraksi tumbuhan yang
bersifat basa (pada waktu itu sudah dikenal, misalnya, morfina,
striknina, serta solanina). Hingga sekarang dikenal sekitar 10.000
senyawa yang tergolong alkaloid dengan struktur sangat beragam,
sehingga hingga sekarang tidak ada batasan yang jelas untuknya.
Alkaloid bersifat basa yang tergantung pada pasangan electron pada
nitrogen. Kebasaan alkaloid menyebabkan sentawa tersebut sangat
mudah mengalami dekomposisi terutama oleh panas dan sinar dengan
adanya oksigen. Dekomposisi alkaloid selama atau setelah isolasi
dapat menimbulkan berbagai persoalan jika penyimpanan dalam waktu
lama. Pembentukan garam dengan senyawa organic atau anorganik
sering mencegah dekomposisi.
Flavonoid
Flavonoid merupakan anti oksidan yang menetralisir radikal bebas
yang menyerang sel-sel tubuh kita. Radikal bebas dapat menyebabkan
kanker, penyakit jantung dan penuaan dini. Flavonoid dapat
ditemukan pada jeruk, kiwi, apel, anggur merah, brokoli dan the
hijau. Flavonoid adalah bagian dari senyawa fenolik yang terdapat
pada pigmen tumbuh-tumbuhan. Kesehatan manusia sangat mengandalkan
flavonoid sebagai antioksidan untuk mencegah kanker. Manfaat utama
flavonoid adalah untuk melindungi struktur sel, membantu
memaksimalkan manfaat vitamin C, mencegah keropos tulang, sebagai
antibiotik dan antiinflamasi. Pada banyak mikro organisme seperti
virus dan bakteri, kehidupan dan fungsi selnya terancam karena
keberadaan flavonoid yang bertindak langsung sebagai antibiotik.
Kasus ini sering terjadi. Bahkan keefektivan flavonoid juga dapat
melemahkan keperkasaan virus HIV penyebab penyakit mematikan AIDS.
Virus herpes pun bisa lumpuh dengan flavonoid. Bahkan lebih jauh,
flavonoid juga dapat berperan dalam pencegahan dan pengobatan
penyakit
umum lainnya seperti periodontitis, wasir (ambeien), migrain,
encok, rematik, diabetes mellitus, katarak dan asma. Istilah
flavanoida diberikan untuk senyawa senyawa fenol yang berasal dari
kata flavon yaitu nama dari salah satu flavonoida yang terbesar
jumlahnya dalam tumbuhan.
Tanin dan Polifenol
Tanin adalah polifenol tanaman yang berfungsi mengikat dan
mengendapkan protein. Tanin juga dipakai untuk menyamak kulit.
Dalam dunia pengobatan, tanin berfungsi untuk mengobati diare,
menghentikan pendarahan, dan mengobati ambeien. Polifenol alami
merupakan metabolit sekunder tanaman tertentu, termasuk dalam atau
menyusun golongan tanin. Tanin adalah senyawa fenolik kompleks yang
memiliki berat molekul 500-3000. Tanin dibagi menjadi duakelompok
atas dasar tipe struktur dan aktivitasnya terhadap senyawa
hidrolitik terutama asam, tanin terkondensasi (condensed tannin)
dan tanin yang dapat dihidrolisis (hyrolyzable tannin).Polifenol
memiliki spektrum luas dengan sifat kelarutan pada suatu pelarut
yang berbeda-beda. Hal ini disebabkan oleh gugus hidroksil pada
senyawa tersebut yang dimiliki berbeda jumlah dan posisinya. Dengan
demikian, ekstraksi menggunakan berbagai pelarut akan menghasilkan
komponen polifenol yang berbeda pula. Sifat antibakteri yang
dimiliki oleh setiap senyawa yang diperoleh dari ekstraksi tersebut
juga berbeda. Fitokimia polifenol banyak terdapat pada buah buahan
dan sayur sayuran hijau, penelitian pada hewan dan manusia
menunjukan bahwa polifenol dapat mengatur kadar gula darah seperti
anti kanker, anti oksidan dan anti mikroba. Saponin
Saponin adalah suatu glikosida yang mungkin ada pada banyak
macam tanaman. Saponin ada pada seluruh tanaman dengan konsentrasi
tinggi pada
bagian-bagian tertentu, dan dipengaruhi oleh varietas tanaman
dan tahap pertumbuhan. Fungsi dalam tumbuh-tumbuhan tidak
diketahui, mungkin sebagai bentuk penyimpanan karbohidrat, atau
merupakan waste product dari metabolisme tumbuh-tumbuhan.
Ke-mungkinan lain adalah sebagai pelindung terhadap serangan
serangga. Sifat-sifat Saponin adalah :
1. Mempunyai rasa pahit 2. Dalam larutan air membentuk busa yang
stabil 3. Menghemolisa eritrosit 4. Merupakan racun kuat untuk ikan
dan amfibi 5. Membentuk persenyawaan dengan kolesterol dan
hidroksisteroid lainnya 6. Sulit untuk dimurnikan dan
diidentifikasi 7. Berat molekul relatif tinggi, dan analisis hanya
menghasilkan formula empiris yang mendekati
Berdasarkan atas sifat kimiawinya, saponin dapat dibagi dalam
dua kelompok :
Steroids dengan 27 C atom. Triterpenoids, dengan 30 C atom.
Macam-macam saponin berbeda sekali komposisi kimiawinya, yaitu
berbeda pada aglikon (sapogenin) dan juga karbohidratnya, sehingga
tumbuh-tumbuhan tertentu dapat mempunyai macam-macam saponin yang
berlainan, seperti:
Quillage saponin : campuran dari 3 atau 4 saponin Alfalfa
saponin : campuran dari paling sedikit 5 saponin Soy bean saponin :
terdiri dari 5 fraksi yang berbeda dalam sapogenin, atau
karbohidratnya, atau dalam kedua-duanya
Steroid dan Triterpenoid
Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari
enam satuan isoprena dan secara biosintesis dirumuskan dari
hidrokarbon C30 asiklin, yaitu skualena. Senyawa ini berstruktur
siklin dan nisbi rumit, kebanyakan berupa alcohol, aldehida atau
asam karbohidrat. Senyawa ini tidak berwarna, berbentuk kristal,
sering bertitik leleh tinggi dan aktif optik pada umumnya sukar
dicirikan karena tak ada kereaktifan kimianya. Uji yang banyak
digunakan adalah reaksi Lieberman-Burchard yang dengan kebanyakan
triterpena dan sterol memberikan warna hijau-biru. Triterpena dapat
dipilih menjadi sekurang-kurangnya empat golongan senyawa:
triterpena sebenarnya, steroid, saiconon dan glikosida jantung.
Kedua golongan terakhir sebenarnya triterpena atau seteroid yang
terdapat sebagai glikosida.
2.3. Tinjauan Umum Enhalus acroides A. Pengertian Lamun Lamun
(Enhalus acoroides) adalah kelompok tumbuhan berbiji tertutup
(Angiospermae) dan berkeping tunggal (Monokotil) yang mampu hidup
secara permanen di bawah permukaan air laut (Sheppard et al.,
1996). Lamun (seagrass) merupakan satu-satunya tumbuhan berbunga
(Angiospermae) yang memiliki dan memiliki rhizoma, daun, dan akar
sejati yang hidup terendam di dalam laut beradaptasi secara penuh
di perairan yang salinitasnya cukup tinggi atau hidup terbenam di
dalam air, beberapa ahli juga mendefinisikan lamun (Seagrass)
sebagai tumbuhan air berbunga, hidup di dalam air laut,
berpembuluh, berdaun, berimpang, berakar, serta berbiak dengan biji
dan tunas.
B. Klasifikasi
Kingdom Filum Kelas Ordo Family Genus Spesies
: Plantae : Tracheophyta : Spermatosida : Alismatales :
Hydrocharitaceae : Enhalus : Enhalus acoroides
C. Habitat Lamun tumbuh subur terutama di daerah terbuka pasang
surut dan perairan pantai atau goba yang dasarnya berupa lumpur,
pasir, kerikil, dan patahan karang mati, dengan kedalaman 4 meter.
Padang lamun terbentuk di dasar laut yang masih ditembusi cahaya
matahari yang cukup untuk pertumbuhannya. Untuk hidupnya, lamun
memerlukan sinar matahari, air yang jernih dan banyak zat makanan.
Itulah sebabnya lamun hidup di perairan dekat pantai yang berpasir
atau berlumpur.
Hampir semua tipe substrat dapat ditumbuhi lamun, mulai dari
substrat berlumpur sampai berbatu. Namun padang lamun yang luas
lebih sering ditemukan di substrat lumpur-berpasir yang tebal
antara hutan rawa mangrove dan terumbu karang. Sedangkan sistem
(organisasi) ekologi padang lamun yang terdiri dari komponen biotik
dan abiotik disebut Ekosistem Lamun (Seagrass ecosystem).Habitat
tempat hidup lamun adalah perairan dangkal agak berpasir dan sering
juga dijumpai di terumbu karang.
D. Morfologi Lamun
Seperti tumbuhan pada umumnya, lamun memiliki morfologi antara
lain daun, batang dan rhizoma, serta akar.
1. Daun Seperti semua tumbuhan monokotil, daun lamun diproduksi
dari meristem basal yang terletak pada potongan rhizoma dan
percabangannya. Meskipun memiliki bentuk umum yang hampir sama,
spesies lamun memiliki morfologi khusus dan bentuk anatomi yang
memiliki nilai taksonomi yang sangat tinggi. Beberapa bentuk
morfologi sangat mudah terlihat yaitu bentuk daun, bentuk puncak
daun, keberadaan atau ketiadaan ligula. Contohnya adalah puncak
daun Cymodocea serrulata berbentuk lingkaran dan berserat,
sedangkan C. Rotundata datar dan halus. Daun lamun terdiri dari dua
bagian yang berbeda yaitu pelepah dan daun. Pelepah daun menutupi
rhizoma yang baru tumbuh dan melindungi daun muda. Tetapi genus
Halophila yang memiliki bentuk daun petiolate tidak memiliki
pelepah.
Anatomi yang khas dari daun lamun adalah ketiadaan stomata dan
keberadaan kutikel yang tipis. Kutikel daun yang tipis tidak dapat
menahan pergerakan ion dan difusi karbon sehingga daun dapat
menyerap nutrien langsung dari air laut. Air laut merupakan sumber
bikarbonat bagi tumbuh-tumbuhan untuk penggunaan karbon inorganik
dalam proses fotosintesis.
2. Batang dan Rhizoma Semua lamun memiliki lebih atau kurang
rhizoma yang utamanya adalah herbaceous, walaupun pada
Thallasodendron ciliatum (percabangan simpodial) yang memiliki
rhizoma berkayu yang memungkinkan spesies ini hidup pada habitat
karang yang bervariasi dimana spesies lain tidak bisa hidup.
Kemampuannya untuk tumbuh pada substrat yang keras menjadikan T.
Ciliatum memiliki energi yang kuat dan dapat hidup berkoloni
disepanjang hamparan terumbu karang di pantai selatan Bali,
yang
merupakan perairan yang terbuka terhadap laut Indian yang
memiliki gelombang yang kuat.
Struktur rhizoma dan batang lamun memiliki variasi yang sangat
tinggi tergantung dari susunan saluran di dalam stele. Rhizoma,
bersama sama dengan akar, menancapkan tumbuhan ke dalam substrat.
Rhizoma seringkali terbenam di dalam substrat yang dapat meluas
secara ekstensif dan memiliki peran yang utama pada reproduksi
secara vegetatif. Dan reproduksi yang dilakukan secara vegetatif
merupakan hal yang lebih penting daripada reproduksi dengan
pembibitan karena lebih menguntungkan untuk penyebaran lamun.
Rhizoma merupakan 60-80% biomas lamun.
3. Akar Terdapat perbedaan morfologi dan anatomi akar yang jelas
antara jenis lamun yang dapat digunakan untuk taksonomi. Akar pada
beberapa spesies seperti Halophila dan Halodule memiliki
karakteristik tipis (fragile), seperti rambut, diameter kecil,
sedangkan spesies Thalassodendron memiliki akar yang kuat dan
berkayu dengan sel epidermal. Jika dibandingkan dengan tumbuhan
darat, akar dan akar rambut lamun tidak berkembang dengan baik.
Namun, beberapa penelitian memperlihatkan bahwa akar dan rhizoma
lamun memiliki fungsi yang sama dengan tumbuhan darat. Akar-akar
halus yang tumbuh di bawah permukaan rhizoma, dan memiliki adaptasi
khusus (contoh : aerenchyma, sel epidermal) terhadap lingkungan
perairan.
E. Padang Lamun Padang lamun merupakan ekosistem pesisir yang
ditumbuhi oleh lamun sebagai vegetasi yang dominan. Lamun atau
rumput-rumputan laut (seagrass) adalah kelompok tumbuhan berbiji
tertutup (Angiospermae) dan berkeping tunggal (monokotil) yang
mampu hidup secara permanen di bawah permukaan air laut. Lamun
tidak sama dengan rumput laut, yang sebagian jenisnya digunakan
sebagai bahan agar-
agar, yang sesungguhnya lebih tepat disebut alga laut.
Jenis-jenis lamun ini termasuk ke dalam empat suku (familia) yakni
Posidoniaceae, Zosteraceae, Hydrocharitaceae, dan Cymodoceaceae.
Lamun biasa tumbuh di atas paparan pasir atau lumpur yang terendam
air laut dangkal. Karena perlu berfotosintesis, komunitas lamun
berada di antara batas terendah daerah pasang surut sampai
kedalaman tertentu di mana cahaya matahari masih dapat mencapai
dasar laut.
BAB III METODOLOGI PRAKTIKUM 3.1 Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum Pengantar Farmakologi LauttTentang Uji Fitokimia ini
dilakukan pada : Waktu : Jam 15.00 WIB. Jum,at 27 April 2012
Tempat : Laboratorium Bioteknologi, FPIK Unpad 3.2 Alat dan
Bahan Alat 1. Bunsen 2. Gelas ukur 3. Kaca arloji 4. Neraca
analitis 5. Penjepit 6. Pipet tetes 7. Saringan 8. Tabung reaksi
3.3 Prosedur Percoban A. Uji alkaloid Sampel ditimbang sebanyak 1
gram ekstrak, dan dilarutkan dalam kloroform Lalu ditambahkan
beberapa tetes amoniak (NH4OH) Ekstrak dilarutkan dan disaring
dalam tabungan reaksi tertutup Ekstak kloroform dalam tabung reaksi
dikocok dengan10 tetes H2SO4 2 M Lapisan asam dipisahkan dalam
tabung reaksi Bahan 1. Pereaksi meyer ( KI + Hg CI2 ) 2. Pereaksi
liberman burchad ( H2SO4 ) 3. Amonia 10 % 4. HCI 1N 5. CHCI3 6. HCL
2% 7. FeCI3
Masing masing diambil 3 tetes lapisan /fraksi asam kedalam
lempeng tetes dan ditambahkan pereaksi 2 tetes pereaksi
dragendroff, hasil positif didapat jika endapan merah jingga 2
tetes pereaksi meyer, hasil didapat positif jika endapan putih
B. Uji Flavonoid Sampel sebanyak 1 gr segar dirajang halus dan
dididihkan dengan 10 mL methnol selama kurang lebih 10 menit Lalu
disaring dalam keadaan panas, kemudian pelarut diuapkan sampai
kering Ditambahkan kloroform dan air suling (1:1) sebanyak 5
mL.dikocok dan biarkan sejenak hingga terbentuk dua lapisan
kloroform an air Sebagian lapisan air diambil dan dipindahkan
dengan pipet kedalam tabung reaksi 0,1 bubuk magnesium dimasukan
dan beberapa tetes asam klorida pekat dan alcohol Adanya flavonoid
ditunjukan dengan terbentuk warna orange merah
C. Uji Triterpenoid dan Steroid Lapisan kloroform dari uji
flavonoid diambil sedikit, kemudian dimasukan kedalam plat tetes
dan dibiarkn sampai kering. Ditambahkan 1 tetes asam asetat
anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat Hasil positif ditandakan
dengan terbentuknya warna merah untuk senyawa triterpenoid dan
terbentuknya warna biru atau ungu merupakan hasil positif untuk
senyawa steroid D. Uji Fenolik
Sebagian lapisan air dari uji flavonoid dimasukan kedalam plat
tetes dan kemudian ditambahkan pereaksi FeCl3 1 %. Adanya kandungan
senyawa fenolik menandai terbentunya warna biru ungu.
E. Uji Saponin Sebanyak 1 gr sampel dimasukan kedalam Erlemeyer,
dan ditambahkan 100 mL air panas. Dididihkan selama 5 menit,
kemudian disaring dalam keadaan panas. Diambil larutan seanyak 10
ml kemudian dikocok kuat secara vertikal selama 10 detik. Adanya
saponin menandai dengan terbentuknya busa yan stabil tidak kuran
dari 10 menit setinggi 1-10 cm dan tidak hilang pada penambahan 1
tetes HCl 2N. F. Uji Tanin Sebanyak 1 gr sampel ditambahkan air,
dan dididikan selama beberapa menit, dan kemudian saring. Diambil 2
ml hasil penyaringan ( filtrate) dan ditambahkan 1-2 tetes pereaksi
FeCl3 1%. Terjadi warna biru tua atau hijau kehitaman menunjukan
adanya tanin.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Berikut ini merupakan
tabel hasil dari 12 kelompok pada shift 3yang menggunakan sampel
Enhalus acoroides:
Tabel 1. Tabel Pengamatan Kandungan Senyawa Fitokimia pada
sample Enhalus acoroides Golongan senyawa kelompok Hasil Keterangan
Terdapat 3 lapisan air sedikit Alkaloid 1 Positif endapan putih dan
endapan hitam pekat ada endapan (Mg), terdapat 2 lapisan, Flavonoid
2 Negatif yang atas bergelembung dan yang bawah bening kehijauan 3
4 5 6 7 Negatif tidak ada perubahan warna (tetap hijau)
Triterpenoid/ Steroid Fenolik Saponin Tanin Alkaloid
Negatif warna tetap kuning kecoklatan Positif Negatif Positif
terdapat busa setinggi 1 cm tidak tertadi perubahan warna (warna
tetap kuning ) adanya warna putih ada endapan (Mg) terdapat
lapisan,
Flavonoid
8
Negatif yang atas putih bergelenbung, bila di pegang panas
Triterpenoid/ Steroid
9
Negatif tidak ada perubahan warna ( hijau )
Fenolik Saponin Tanin
10 11 12
Negatif
warna tetap hijau ( hijau kekuningan )
Negatif bisa kurang dari 1 cm Negatif warna orange gelap
4.2 Pembahasan Hasil dari pengujian senyawa metabolit sekuder
bahan hayati laut dari sample tumbuhan lamun, Enhalus acroides
didapatkan kesimpulan bahwa sample tersebut hanya mengandung
sebagian kecil metabolit sekunder, yaitu hanya alkaloid dan saponin
yang dinyatakan positif, hal ini ditandai perubahan bentuk pada
sample dengan terbentuknya endapan hitam dan putih yang menunjukan
terdapat kandungan alkaloid dalam sample Enhalus acoroides,
sedangkan hasil positif untuk kandungan saponin terlihat dari
terbentuknya busa setinggi dalam tabung reaksi. Sementara metabolit
sekunder yang lain yaitu flavonoid, triterpenoid, steroid, fenolik,
saponin dan tanin dinyatakan negatif atau tidak terkandung didalam
tumbuhan lamun yang tekah diekstrak.
BAB V PENUTUP
5.1. Kesimpulan Dalam praktikum pengujian fitokimia dalam bahan
hayati laut Enhalus acoroides yang telah dilakukan dapat
disimpulkan bahwa dalan sample Enhalus acoroides hanya terkandung
senyawa metabolit sekunder alkaloid dan saponin, sementara senyawa
metabolit sekunder lainnya seperti flavonoid, triterpenoid,
steroid, fenolik, saponin dan tanin dinyatakan negatif.
5.2. Saran Untuk mendapatkan hasil yang akurat diperlukan
keadaan dan pengerjaan yang aseptis, karena kontaminasi dari bahan
asing menyebabkan perubahan dalam pengamatan, dan juga pengamatan
yang teliti agar tidak menyebabkan kesalahan penentuan hasil uji
fitokimia
