Laporan Sel Darah 1 (Eritrosit)

8/10/2019 Laporan Sel Darah 1 (Eritrosit)

1/6

Laporan Praktikum Hari/Tgl : Selasa/25 Februari 2014

Kimia Klinis Dosen : dr. Irma H Suparto

Dosen asisten : drh. Septina AryaniAsisten : drh. Fajar Sakti H SKH

Lusiana Kresnawati H, S. Si

SEL DARAH I (ERITROSIT)Kelompok 6

Disusun Oleh:

1.

Agus Kurnelius (J3L112158) 1.

2. Ekawisudawati (J3L112185) 2.

3.

Liani Aprilya (J3L212199) 3.

4. Siti Rahma Agustriyani (J3L112123) 4.

5.

Monica C Sitanggang (J3L112008) 5.

PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA

PROGRAM DIPLOMA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2013


2/6


3/6

hingga larutan masuk. Kemudian dicari eritrosit dengan perbesaran 40 x 10 maka

dihitung jumlah eritrosit pada 5 kotak hitung dengan menggunakan penghitung,

kemudian dihitung eritrosit dengan perhitungan yang ditetapkan.Penentuan kadar hemoglobin dengan metode Sahli. Metode Sahli

menggunakan seperangkat alat Hemometer. Tabung Sahli diisi dengan HCl 0,1 N

hingga angka 10, kemudian darah dihisap dengan pipet Sahli dan pipa

penyedotnya sampai batas 20 mm3, kemudian darah dimasukkan ke dalam tabung

Sahli berisi larutan HCl 0,1 N. Tabung Sahli diisi dengan akuades hingga

warnanya sama dengan standar, kondisikan agar larutan tidak melebihi batas dan

kemudian dibaca G % pada tabung ketika warnanya sama dengan standar.

Penetapan kadar hemoglobin dengan metode Falling Drop.Reagensia

disiapkan dahulu dengan menimbang 15,96 g CuSO4.5H2O pa dan dilarutkan

dengan akuades 100 ml. Suhu larutan diukur dengan thermometer, kemudian berat

jenisnya diukur dengan menggunakan urinometer. Larutan kerja kemudian dibuatdengan larutan stok diambil 52 ml dan ditambahkan dengan akuades 48 ml. Suhu

larutan diukur dengan thermometer dan diukur berat jenisnya menggunakan

urinometer. Darah diambil langsung dari tangan praktikan dengan membilasnya

dahulu dengan alkohol agar steril dan dilakukan tusukan perifer, kemudian darah

diteteskan ke dalam larutan dan dilihat posisi darah tenggelam atau melayang.

Uji oksihemoglobin dan deoksihemoglobin. Sampel darah sebanyak 1

ml dimasukkan ke dalam 6 ml air suling, kemudian dihomogenkan dengan baik

dan diperhatikan warna merah terang yang terbentuk dari oksihemoglobin.

Tabung ketiga diisi dengan 2 ml pereaksi Stoke dan ditambahkan NH4OH

secukupnya untuk melarutkan endapan. beberapa tetes larutan Stoke dimasukkan

ke dalam tabung 2 dan terlihat perubahan warna merah kecoklatan karena

pembentukan deoksihemoglobin dan bandingkan dengan tabung nomor 1.

Pembentukan kembali oksihemoglobin dilakukan dengan mengocok kuat-kuat

tabung reaksi dengan vortex sehingga warna yang terbentuk sama dengan yang

awal atau terjadi proses oksigenasi dari udara.

Pemeriksaan hematokrit. Darah dimasukkan ke dalam tabung

EDTA/Oxalat dan dihomogenkan. Pipa kapiler diisi dengan darah dan

disumbatkan. Pipa kapiler lalu disentrifuse dengan kecepatan 2000-3000 rpm

selama 30 menit. Setelah selesai ukur bagian hematokrit pada bagian bawah, buffy

coat pada bagian tengah, dan indeks ikterus pada bagian atas tabung. Bila nilai

hematokrit diatas 50 % maka pipa kapiler disentrifuse kembali 30 menit.

HasilLembar Kerja Mahasiswa

NoMateri

PraktikumHasil (satuan) Prinsip

1 Perhitungan

Eritrosit

Hasil pada kamar

hitung = 74

J.eritrosit/mm3

= B x 50 x 200

= 74 x 50 x 200

= 740000 sel/mm3

eritrosit sebelum dihitung,

diencerkan dengan larutan

hayem. Sel yang dihitung di

haemacytometer adalah sel

menyentuh garis atas dan kiri

kotak.


4/6

2 Kadar

Hemoglobin- -

a.Metode Sahli 9,4 G % sampel darah dihomogenkandengan HCl dalam tabung

sahli dan tambah air.

Sesuaikan dengan standar.

b.Falling drops Darah melayang

berarti kadar Hb =

12,5gr/dl

Berdasarkan posisi darah

dalam larutan kerja

3 Presentase

Hematokrit

- Menggunakan pipa kapiler

antikoagulan kemudian

disentrifuse

4. OksiHb dan DeoksiHb

Hasil Tabung 1 OksiHb Tabung 2 DeoksiHb Tabung 3

reoksigenasi

deoksiHb

Warna

terbentuk

Merah cerah Merah kecoklatan Merah cerah

Penjelasan Hemoglobin

dapat mengikat

oksigen

membentuk

senyawaoksihemoglobin

Deoksihemoglobin

yaitu proses melepas

oksigen terjadi saat

penambahan

NH4OH.

hemoglobin mengikat

kembali oksigen yang

ada diudara. Hal ini

terjadi jika dilakukan

pengocokan kuat

PembahasanPrinsip pemeriksaan perhitungan eritrosit dengan kamar hitung adalah

adalah darah diencerkan dalam larutan isotonis untuk memudahkan menghitung

eritrosit dan mencegah hemolisis. Menghitung eritrosit dengan kamar hitung

(Haemacytometer), pipet tomha yang terdapat bola merah didalamnya dipipet

darah kemudian memipet larutan hayem yang berfungsi sebagai larutan

pengencer. Larutan hayem terdiri dari natrium sulfat 2.5 gram, natrium klorida 0,5

gram, merkuri 0,25 gram, dan akuades 0,25 gram. Larutan lain yang dapat

digunakan sebagai pengencer adalah larutan gower dan larutan garam fisiologis0,9% NaCl. Larutan gower terdiri dari larutan Natrium sulfat 12.5 g, Asam asetat

glasial 33.3 ml, aquadest 200 ml. Larutan ini mencegah aglutinasi dan rouleaux.

Darah yang digunakan adalah darah dengan antikoagulan EDTA. Saat darah

dipepet, pipet thoma harus bebas dari gelembung udara, karena gelembung udara

dapat menyebabkan volume darah menjadi berkurang. Berdasarkan percobaan

Eritrosit yang didapatkan dari penghitungan dengan kamar hitung yaitu 740000

sel darah merah / mm3. Jumlah eritrosit normal pada pria adalah 5-6 juta / mm3

sedangkan untuk wanita adalah 4-5 juta/ mm3 (Ganong 2001).

Penentuan kadar hemoglobin dengan metode sahli, prinsipnya

mengandalkan pembentukan asam hematin yang kemudian diukur kadarnya

dengan cara membandingkan warna hasil pengenceran dengan warna standar.


5/6

Pada langkah-langkah cara kerja menggunakan metode sahli, dengan penambahan

HCl, kemudian tambahkan lagi aquades pertetes hingga berwarna sesuai standar.

Penambahan HCl untuk meliliskan eritrosit sehingga Hb yang terdapat dalameritrosit dapat keluar dan bereaksi dnegan HCl membentuk asam hematin. Metode

sahli membutuhkan ketelitian visualisasi praktikan dalam mebandingkan warna

yang diperoleh dari pengenceran dengan warna standar. Kadar hemoglobin

normal untuk pria adalah 1418 G %, sedangkan kadar hemoglobin normal untuk

wanita adalah 1215 G %.

Berdasarkan percobaan diperoleh kadar hemoglobin dari sampel darah

anjing adalah 9.4 G%, lihat Gambar 1. Kadar hemoglobin yang tinggi disebabkan

karena keadaan hemokonsentrasi akibat dari dehidrasi, sedangkan kadar

hemoglobin rendah berkaitan dengan masalah klinis. Jumlah sel darah merah dan

kadar hemoglobin tidak selamanya meningkat atau menurun secara bersamaan

(Ganong 2001).

Gambar 1 Hasil percobaan penentuan kadar hemoglobin metode sahli

Selain metode sahli penentuan kadar hemoglobin juga dapat dilakukan

dengan metode Falling Drop (berat jenis). Prinsipnya adalah larutan stok

dimasukkan kedalam gelas ukur/wadah kemudian ditambahkan aquades kemudian

teteskan darah pada larutan kemudian amati. Apabila darah tenggelam maka kadar

Hb lebih dari 12,5 gr/dl, apabila darah melayang maka kadar Hb sama dengan

12,5 gr/dl, dan apabila darah mengapung maka kadar Hb kurang dari 12,5gr/dl.Berdasarkan percobaan diperoleh kadar Hb dari salah satu mahasiswa yang

sampel darahnya digunakan yaitu TB Rival adalah 12,5 gr/dl sebab posisi dari

darah dalam larutan melayang. Hal ini sesuai dengan literatur yaitu berdasarkan

Lehninger (1988) bahwa kadar hemoglobin lelaki dewasa sekitar 14-18 gr/dl. Hal

ini membuktikan bahwa kadar hemoglobin dari TB Rival normal tidak kurang

atau melebihi kadar hemoglobin yang telah ditetapkan.

Berdasarkan percobaan uji oksihemoglobin dan deoksihemoglobin

dihasilkan warna merah terang untuk uji oksihemoglobin dan warna merah gelap

untuk uji deoksihemoglobin, lihat Gambar 2. Secara teori hemoglobin (Hb)

mengangkut CO2 dan kemudian kembali ke paru- paru untuk megambil lebih

banyak O2. Ketika hemoglobin membawa O2 itu disebut deoxyhemoglobin dan

bila tidak membawa O2 ini dikenal sebagai deoxyhemoglobin.

Gambar 2 Hasil percobaan uji (a) oksishemoglobin, (b) deoksihemoglobin

Deoxyhemoglobin dan oxyhemoglobin memiliki warna yang berbeda.

Sehingga hal tersebut dapat menjelaskan mengapa darah diarteri kita

(oksihemoglobin) berwarna merah terang dari pada darah dalam pembuluh darah.

Oksigen berikatan dengan Fe kelompok heme karena memilki pasangan eletkron

a b


6/6

bebas yang dapat berkoordinasi dengan Fe. Ketika darah dilarutkan dengan

akuades maka akan terbentuk warna merah terang, yang menandakan

terbentuknya oksihemoglobin. Ketika tereduksi Fe yang berada dalam Hbmengikat oksigen menjadi oksihemoglobin (Lany 2005).

Hb (Fe2) + O2 Hb(Fe2)O2

Gambar 1 Reaksi pengikatan O2oleh Hb (Lany 2005)

Ketika ditambahkan pereaksi stokes dan dikocok dengan kuat. Maka oksigen pada

Hb terlepas kembali dan membentuk deoksihemoglobin. Pelepasan O2 ini

menyebabkan berubahnya warna merah menjadi merah gelap.

Hb(Fe2+)O2 + larutan stokes Hb (Fe2+) + O2

Gambar 2 Reaksi deoksihemoglobin (Lany 2005)

Reoksigenasi deoksihemoglobin terjadi saat Hb kembali mengikat O2 ketika

dilakukan pengocokan kuat. Oksigen diudara terikat kembali pada Hb. Proses ini

dapat dilakukan secara berulang-ulang.Berdasarkan percobaan pemerikasaan hematokrit tidak dapat dilakukan

karena dua hal yaitu alatnya sudah tidak berfungsi dengan baik dan pipa kepiler

biru yang digunakan sudah kadaluarsa. Namun, prinsip pemeriksaan hematokrit

adalah eritrosit akan dipisahkan dari plasma dengan cara memutarnya didalam

tabung khusus dengan waktu dan kecepatan tertentu dimana nilainya dinyatakan

dalam persen (%). Untuk pemeriksaan hematokrit darah tidak boleh dibiarkan

menggumpal sehingga harus diberi antikoagulan. Setelah tabung tersebut diputar

dengan kecepatan dan waktu tertentu, maka eritrosit akan mengendap. Hematokrit

adalah nilai yang menunjukan persentase zat padat dalam darah terhadap cairan

darah. Dengan demikian, bila terjadi perembesan cairan darah keluar dan

pembuluh darah, sementara bagian padatnya tetap dalam pembuluh darah, akan

membuat persentase zat padat darah terhadap cairannya naik sehingga kadar

hematokritnya juga meningkat (Hardjoeno, H. 2007).

SimpulanBerdasarkan percobaan jumlah eritrosit dengan kamar hitung diperoleh

740000 sel/mm3. Kadar hemoglobin dengan metode sahli dari sampel darah anjing

adalah 9,4 G% sedangkan metode Falling Drop kadar hemoglobin dari TB Rival

adalah 12,5 gr/dl. Dan dari percobaan terbukti bahwa Hemoglobin dapat mengikat

oksigen dan melepaskannya dengan mudah.

Daftar PustakaGanong WF. 2001.Fisiologi Kedokteran. Jakarta. Buku Kedokteran EGC.

Gandasoebrata, R. 2009.Penuntun Laboratorium Klinik. Jakarta : Dia Rakyat

Harjdjoeno, H. 2007.Interpretasi Hasil Tes Laboratorium Diagnostik Edisi III.

Makassar. LPI UNHAS

Lany, G. 2005. Hipertensi. Yogyakarta: Penerbit Kanisius.

Lehninger, A. 1988.Dasar-dasar Biokimia. Erlangga. Jakarta

Munawaroh S. 2009. Pengaruh Ekstrak Kelopak Rosela (Hibiscus Sabdariffa)

Terhadap Peningkatan Jumlah Eritrosit Dan Kadar Hemoglobin (Hb) Dalam

Darah Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Anemia [Skripsi]. Fakultas Sains dan

Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim. Malang

Documents

Laporan Sel Darah 1 (Eritrosit)