PROTEÍNAS

I. Introducción:

Las proteínas son filamentos largos de aminoácidos unidos en una secuencia específica. Son creadas por los ribosomas que "leen" codones de los genes y ensamblan la combinación requerida de aminoácidos por la instrucción genética. Las proteínas recién creadas experimentan una modificación en la que se agregan átomos o moléculas adicionales, como el cobre, zinc y hierro. Una vez que finaliza este proceso, la proteína comienza a plegarse sin alterar su secuencia (espontáneamente, y a veces con asistencia de enzimas) de forma tal que los residuos hidrófobos de la proteína quedan encerrados dentro de su estructura y los elementos hidrófilos quedan expuestos al exterior. La forma final de la proteína determina su manera de interaccionar con el entorno. Si en una disolución de proteínas se producen cambios de pH, alteraciones en la concentración, agitación molecular o variaciones bruscas de temperatura, la solubilidad de las proteínas puede verse reducida hasta el punto de producirse su precipitación. Esto se debe a que los enlaces que mantienen la conformación globular se rompen y la proteína adopta la conformación filamentosa. De este modo, la capa de moléculas de agua no recubre completamente a las moléculas proteicas, las cuales tienden a unirse entre sí dando lugar a grandes partículas que precipitan. Las proteínas que se hallan en ese estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que fueron diseñadas, en resumen, no son funcionales.

Esta variación de la conformación de las proteínas se denomina desnaturalización. La desnaturalización no afecta a los enlaces peptídicos: al volver a las condiciones normales, puede darse el caso de que la proteína recupere la conformación primitiva, lo que se denomina renaturalización. Son ejemplos de desnaturalización, la leche cortada como consecuencia de la desnaturalización de la caseína, la precipitación de la clara de huevo al desnaturalizarse la ovoalbúmina por efecto del calor o la fijación de un peinado del cabello por efecto de calor sobre las queratinas del pelo. En este experimento vamos a provocar la desnaturalización de las proteínas del huevo y de la leche.

II. Objetivos:

Experimentar la acción que poseen algunos agentes físicos y químicos sobre las proteínas.

III. Materiales:

Albumina. Hidróxido de Sodio. Ácido acético. Alcohol. Ácido Nítrico. Ácido tricloracetico. Ácido pícrico. Tubos de Ensayo. Pipetas.

IV. Procedimiento:

A. Precipitación por el calor:

Albumina + Hidróxido de sodio Al fuego y se le agrego ácido acético

B. Precipitación por alcohol:

Pierde agua y se deshidrata la proteína se observa un precipitado.

Albumina + Alcohol

C. Precipitación en frio por los ácidos:

1. Ácidos Minerales

Se observa un anillo de nitrato de proteína. Esta reacción se denomina Héller.

Ácido nítrico + Albumina

2. Ácidos Orgánicos

Ácido tricloracetico + Albumina Sometido al fuego

Resultado

D. Precipitación por los Reactivos de los Alcaloides

Tubo 01

Se observa una precipitación densa, blanca amarillenta.

Albumina + Acido acético

Tubo 02

Se observa un precipitado Amarillo

Albumina + Acido Pícrico

Tubo 03

Se observa un precipitado amarillo

Albumina + Acido picrico

Tubo 01-02-03

V. Conclusiones:

Los agentes físicos y químicos actúan sobre las proteínas originando una desnaturalización.

VI. Referencias:

http://pendientedemigracion.ucm.es/info/analitic/Asociencia/DesnatProteinas.pdf

Proteínas: Reacciones de Coloración

I. Introducción:

Las proteínas son sustancias químicas muy complejos que se encuentran en todas las células vivas: en la sangre, en la leche, en los huevos y en toda clase de semillas y pólenes. Hay ciertos elementos químicos que todas ellas poseen, pero los diversos tipos de proteínas lo contienen en diferentes cantidades. En todas se encuentran un alto porcentaje de nitrógeno, así como de oxígeno, hidrogeno y carbono. En la mayor parte de ellas existe azufre, y en algunas fosforo y hierro.

Sus moléculas son de proporciones coloidales, todas son muy complejas molecularmente y tiene alto peso molecular. La molécula proteica está compuesta de una combinación de aminoácidos por condensación. Las proteosas, peptonas, péptidos y aminoácidos son derivados de las proteínas formados en la síntesis e hidrolisis.

La caracterización de las proteínas puede ser realizada por reacciones de coloración o de precipitación.

Debido a la presencia de diferentes aminoácidos en las uniones peptídicas las proteínas reaccionan con una variedad de compuestos formando productos coloreados.

Existen reacciones de coloración que son específicas para aminoácidos de esas proteínas y son importantes tanto para la detección como para el dopaje de aminoácidos y proteínas.

Existen también reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas las proteínas como grupos amino o uniones peptídicas (ninhidrina y biuret).

II. Objetivos:

Preparación y titulación de soluciones normales o valoradas. Determinar la presencia de proteínas en diferentes

sustancias orgánicas a través de la reacción de BIURET. Determinar la presencia de proteínas en diferentes

sustancias orgánicas a través de la reacción de XANTOPROTEINA.

Determinar la presencia de proteínas en diferentes sustancias orgánicas a través de la reacción de NINHIDRINA.

Determinar la presencia de proteínas en diferentes sustancias orgánicas a través de la reacción de ROSENHEIM O DEL FORMALDEHIDO.

Determinar la presencia de proteínas en diferentes sustancias orgánicas a través de la reacción de SULFUROS O SULFOREACCION.

Determinar la presencia de proteínas en diferentes sustancias orgánicas a través de la reacción de PAULY.

III. Materiales

Tubos de ensayo. Pipeta. Vaso de Precipitación. Albumina. Hidróxido de Sodio. Sulfato de cobre. Acetato de plomo. Ácido clorhídrico nitroso.

IV. Procedimiento

Reacción de Biuret:

Se observa una coloración púrpura

Al ser agitado, toma una coloración púrpura. Manchas púrpuras.

Reacción xantoproteica

Albumina + Ácido Nítrico Sometido al fuego

Resultados después de haber sido Se le agrega Hidróxido de Sodio 40 sometido al fuego.

Se Observa un precipitado anaranjado.

Reacción de Rosenheim o del Formaldehido

Baño maria a 37º

Se observa un anillo blanco

Reacción de los Sulfuros

NaOH + Albumina Sometido al Fuego

Después de haber sido sometido al fuego Se le agrega acetato de plomo al 10%

Se observa un color pardo y en la parte superior un precipitado color blanco.

V. Conclusiones:

Las proteínas constituyen una de las moléculas más importantes en el organismo ya que cumplen muchas funciones.

En las reacciones donde se obtuvo precipitación se debió a un cambio en el estado físico de la proteína.