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Las técnicas IN SITU constituyen un procedimiento
al ternativo a las 1 N VI TRO , en cuan t o proveen r e s ultado s
comparables respecto a la estimación de la degrad a b ilidad de
los f or raj es. En és tas e 1 proceso f ermen ta ti vo o c u rre e n
muestras de forraje contenidas en bo l s a s de d a crón o
polyester, las que son i n t roduc i das en e l r u men de animales
fi s t u lados (O rsk ov et ~., 198 0 ). Es t a técn i c a también se ha
u tilizado p a ra la eva lua c ión de pasturas, y por ejemplo
sirvió de base para l a s e lecci ó n y el desarrollo del Bermuda
d e Cos ta. Cru za 1 (Low r e y , 1 969 ).
Las técnicas IN SITU son valiosas para estaciones
experimentales o laborat o r i os en las que no se c uenta con
equipo requerido pa ra l a s té c n i cas IN VI TRO ( p .e. estufas
incubadoras, fuentes de C0 2, e t c ), pe r o qu i zas s u uti l idad
sea aún mayor cuando se desea es t udia r el efecto de l a
suplementación sobre la d e g r adabilidad de l a f i bra en
forraj e s (inter:acciones e nt re n u t r i en tes o alimen tos ) •
Igualmente, cuando se evalúan materi a l es que poseen
sustancias anti-cualitativas (tó x icas) o que afectan la
degradabilidad de forr aj es, l as t é c n i cas IN S ITU tien en
ventaja en cuanto en las IN VITRO se t ra. baj a c o n un "s i stema
cerrado", sin f 1uj o o rec a mb i o d e l o s resid u os 1 i berados,
entre los que podrían en c on tr a r s e esas sus t a n c i as anti
cualitativas, lo que eventualmente pod rí a l l eva r a sub
estimaciones de la digestibilidad.
2.1.4 Métodos Enzimáticos.
Los métodos enzimáticos basados en el uso del complej o
celulasa-hemicelulasa han sido desarroll a d os c omo u n a
alternativa a los métodos de bio-ensayo q ue e mp l e an
microorganismos ruminales, con miras a obviar l o s p r ob lemas
de repetibilidad y de disponibilidad de animales f istulados
al rumen como fuente de inóculo. Eásicamente, con estos
métodos se han empleado celula s as y he micelulasas extraídas 136
de hongos de los géneros Trichoderma y Basidiomyces (Jones,
1986) .
En términos generales, se ha observado que el tratamiento
previo de los forrajes con pepsina (Jones y Hayward~ 1975) o
con detergente neutro (Hartley et ~, 1974) mejora la
correlación entre los estimados de degradabilidad obtenidos
usando enzimas, con respecto a los obtenidos mediante
técnicas de digestibilidad IN VITRO e IN VIVO. También se ha
observado que las técnicas enzimáticas trabajan bien en
gramineas tropicales (Adegbola y Paladines, 1977), pero no
asi con leguminosas n~ con asociaciones gramínea-leguminosa
(Terry et ª-.L~ 1978). Un problema adicional de la técnica es
que existe alta variabilidad en términos de la fuente o el
tipo de celulasas y hemicelulasas que se empleen (Jones,
1986)
2.2 Medición del Consumo Bajo Condiciones de Pastoreo.
La e x t ra p lación de resultados obtenidos en jaulas a las
condici on es de pastoreo tiene limitaciones no sólo debidas a
las dif e rencias en oportunidad de selección del forraje
ofrecido, s~no también por que en las mediciones en jaulas
se ~gnora el efecto que tienen los atributos de estructura
de la pastura sobre el consumo de forrajes, los cuales
influyen marcadamente en e 1 caso de f orraj es utilizados
directamente en pastoreo (Hodgson, 1982)
Varios autores (Corbett, 1978; Córdova U al, 1978; Minson
~~, 1985) han revisado los métodos indirectos, en los que
se usan indicadores para estimar consumo y digestibilidad de
forrajes bajo condiciones de pastoreo. Estos indicadores son
utilizados para estimar la producción fecal y la
digestibilidad, para luego con base en ellos estimar el
consumo, de acuerdo a la siguiente ecuación:
137
Produ c ci6n f ecal diaria Co n sumo diario = - - - ------- ----------------- * 100
100 - Digest i bil id ad
2 . 2. 1 Estimac J 6n de la producc i ón fecal diaria.
La producci6n fecal puede med i rse directamente colectándose
tod as las heces producidas, para lo cual se utilizan bolsas
c olecto ras sujetas mediante arneses a los animales
ex per imen ta 1es. S in embargo 1 baj o cond i c iones de pastoreo
existen problemas con el uso de esta técnica debido a
cambios en el comportamiento en pastoreo de b ido al peso de
l a s bolsas e in c omod i dad de los ar n eses, pérdida de heces
colectadas en l as bolsas por presión cuando los animales se
a c uestan, i n t erferencia en e l rec i c l aje de nutrientes,
r ed u cc i6n en e l consumo y mayor gasto e n ergético debido al
pes o de l a s bolsas c o lectoras l l enas, e t c (M i nson et ~,
1 9 8 5). E l problema de cole c ción se complica cuando se
tra b a j a con hembras, pues se tiene que utilizar algún
mecanismo para evitar mezcla de heces y or i na.
Una a l te r nativa a la colecc ión total es e l uso de
i ndicado r es ex t ernos ( s ustancias que no son constituyentes
na tura 1es de 1 forraj e) para es t i mar 1a producci6n feca l.
Estos i n dicad ores deben reun ir c iertas c a racterísticas ,
t ales c omo: que no sea n absor b ibl e s, que no afecten o no
s ean af ec t ados por l a pob l aci6n mi crob iana o por las
cond i c i on e s d e l tracto - intes t ina l (TGI ), que estén
ín t imamen t e aso c iad o s a l as partículas de l for r aje que se
pretende evalu a r, y q u e por tanto pase n po r e l TGI a la
mi s ma v el ocidad qu e el f o rraje, y que el método ) pa r a su
determina c i ó n química sea suf i cientemente s e ns i b l e y n o
interf iera c o n otros aná l is i s. Cabe ano t ar que ninguno de
1 38
los indicadores externos disponibles satisfacen todas estas
propiedades.
Algunos de los indicadores más estudiados han sido el óxido
crómico (Cr203) en polvo, o impregnado al papel o a las
partículas de f~bra (Udenet ~, 1980), el polietilenglicol,
y los elementos de tierras raras, tales como: disprosio,
lantano, cesio, samar~o, etc (Ellis et ª-.l, 1980). De todos
ellos, probablemente resulte mejor el utilizar la fibra
impregnada con cromio. antes que cua l quiera de 1as tierras
raras, pues presenta menores problemas de migración a otras
partículas no marcadas (Kass, comunicación personal)
Cuando se u ti l izan i nd i cadores ex ternos se requ iere de un
periodo de adapta c i ó n de por lo menos c~nco días, para
garantizar que el indicador llegue a un estado de equilibrio
en el TGI, seguido de una fase de medición con una duración
de cuatro a siete días. En las muestras colectadas durante
la fase de medición se determina la concentración del
indicador en las heces, para con base en ella estimar la
producción fecal, de acuerdo a la siguiente ecuación:
Cantidad del Indicador Dosificada/día Producc~ón fecal
Concentración de Indicador en Heces
2.2.2 Estimación de la digestibilidad.
Las técnicas disponibles para la estimación de la
digestibilidad se pueden clasificar en: método de las
proporciones y método del índice fecal El primero requiere
de un indicador ~nterno (componente natural del forraje),
139
cuya concentración e s de te rmi n ada tan to en el al imento como
en las he c es, mientra s q ue e l método del ín d ic e feca l su pone
el desarrol lo de ecuaciones de regres ión, que permitan
p redeci r la d igestibilidad a partir d e la concen tr a c ión del
~nQicado r ~nterno en las heces.
Entre l os ind~cadores in ternos u t~l~ zados en técnicas d e
r elación están l os cromógenos, la sílice y la l ignina, pero
problemas en la recuperación de éstos en las heces han
llmitado su uti l ización (Pezo et ~. 1 977) . Otros
ind i cadores in ternos como son 1 a fib r a de te rgen te neu tro y
la f ~bra detergente ácido indiger~b1es han dado mej ores
r-esu 1 tados en términos de su r-ecuperaci ó n (Cochrane U il,
1986 ) • Detalles metodológi cos para mej ora r su determinación,
y por tanto la pre c isión d e l os e~timados , han sido
desarrol lados recien t emente en el CIAT (Lascano,
comun i ca c i ón pe r-sona l ).
La ecuación empl e ada c uando se est i ma l a d igest ib illdad por
e l método de propor c iones, e s la si gu iente:
1. I ndicador en Forraj e Digestibil i dad = 1 - ---------------------------) * 100
1. In d i c ador en He ces
En e l método d el í ndi ce f ec a l, el i ndicador que se ha
ut11izado más fr ecue n temen te es e l ni tró geno o la proteina
c r uda i ndigeribl e ( La ng1ands, 1967; Pezo d al.. 1977 ); sin
embargo , e l mé t o d o tiene l im itacion e s de bid o a q ue se
ut il i z an ecuaciones empíri cas c uya apl i cabilidad es t á
limitada a c a sos d onde exist e n d ife ren cias importantes en la
digesti bilidad de los for- raj es es tudi a dos, además de que la
140
predictibilidad de las ecuaciones está restringida a
condiciones locales de sitio, tipo de pastura y de animal,
entre otros.
Un método alternativo para medir directamente la
dlgestibilidad en pastoreo consiste en utilizar muestras de
forraje colectadas mediante el uso de animales fistulados al
esófago, y someterlas a una determinación de digestibilidad
IN VITRO (Pezo ct al. .. 1977); Sln embargo, dado qLle estas
muestras de extrusa contienen nlveles altos de humedad, es
necesario secarlas a temperaturas menores a los 60ºC para
prevenir la formació n de seudo-lignina (producto Maillard),
la cual afecta negativamente la determinación de la
digestibilidad.
La determinación de los atributos de calidad nutritiva en
pasturas y forrajes, contribuye a la predicción del
potencial que tienen los forrajes para la producción animal
o ayuda a interpretar la respuesta animal obtenida en
pasturas baj o util i zación por los animales; La importanci a
de dichas mediciones es reconocida por investigadores; sin
embargo, no hay un i f ormi dad de cr i ter io en cuen to a los
atributo s de calldad nutritiva que se deben de evaluar,
especialmente en los forrajes en los que están involucrados
los anima~es en pastoreo.
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