Manual e Procedimientos Para Obtencion de Muestras

e _1IT1!IIIII1lI! ........a.L_INSTITUTO NACIONAL DI! SALUD--_.. .._-

MANUAL E PROCEDIMIENTo, DEOBTENCION D UESTRAS PARA EL~DIAGNOS-';Ic:4~lCTE OLOGICO

NFECCIONES TRAH SPITALAJKJ

I

Instituto Nacional de SaludMPR-CNSP-007

MINISTERIO DE SALUDMinistro

Dr. Fernando Carbone Campoverde

Vice-MinistroDr. Oscar Ugarte Ubillz

INSTITUTO NACIONALDE SALUDJefe

Dr. Luis Fernando Llanos Zavalaga

Sub-JefeDra. Ada Cecilia Palacios Ramrez

Centro Nacional de Salud PblicaDra. Susana Zurita Macalup

Directora General

Centro Nacional de Alimentaciny Nutricin

Dra. Doris Jhusey SchreiberDirectora General

Centro Nacional de Control de CalidadDra. Rosa Guevara Ormeo

Directora General

Centro Nacional de Productos de BiolgicosQ.F. Ricardo Valera Snchez

Director General

Sub-Comit Editor

PresidenteDra. Ada Palacios Ramrez

Secretario TcnicoDr. Csar Cabezas Snchez

MiembrosDr. Jorge Alarcn VillaverdeQ.F. Zulema Arvalo Chong

Dr. Jorge Barnaby RodrguezDr. Zuo Burstein Alva

Dr. Javier Cieza ZevallosDr. Jos Espinoza Babiln

Lic. Ivn Gmez-Snchez PrietoDr. Eduardo Gotuzzo Herencia

Dr. Alfredo Guilln OneeglioDr. Csar Nquira Velarde

Lic. Margarita Rodrguez GutarraDr. Vctor Surez Moreno

EdicinDr. Leonid Lecca Garca

Portada: Frontis del local central del Instituto Nacional de Salud

MPR-CNSP-007

Manual de Procedimientos de Obtencin de Muestras para el Diagnstico Bacteriolgico en Infecciones Intrahospitalarias

I Instituto Nacional de Salud

Elaboracin:

Gladis Ventura EgsquizaMicrobiloga

Laboratorio de Bacteriologa EspecialCentro Nacional de Salud Pblica

Instituto Nacional de Salud

Rosa Sacsaquispe ContrerasMicrobiloga

Laboratorio de Bacteriologa EspecialCentro Nacional de Salud Pblica


MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE OBTENCIN DEMUESTRAS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO

EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

MAN. TOMA DE MUESTRAS 3/7/02 11:27 am Page 1

MPR-CNSP-007

Catalogacin hecha por el Centro de Documentacin e Informacin del INS

ISBN 9972 - 857 - 17 - 4Hecho el Depsito Legal N 1501012001-4539

Ministerio de Salud, 2002Av. Salaverry cuadra 8 s/n, Jess Mara, Lima, PerTelf. : 431-0410

Instituto Nacional de Salud, 2002 Cpac Yupanqui 1400, Jess Mara, Lima, Per Te1f.: 471-9920 Fax: 471-0179 e-mail: [email protected] Web: www.ins.sld.pe

Publicacin aprobada con R.J. N 119-2002.

Se autoriza su reproduccin total o parcial siempre y cuando se cite la fuente.



II

Ventura Egsquiza, GladisManual de procedimientos de obtencin de muestras para el diagnstico

bacteriolgico en infecciones intrahospitalarias / Elaborado por: Gladis Ventura Egsquiza y Rosa Sacsaquispe Contreras. -- Lima : Ministerio de Salud, INS, 2002.

27p.--il. : 15 cm.

Contiene: Seccin 1 - 4

1. INFECCION HOSPITALARIA/normas 2. INFECCION HOSPITALARIA/diagnstico3. INFECCION HOSPITALARIA/microbiologa 4. INFECCIONES BACTERIANAS I. Gladis Ventura Egsquiza II. Rosa Sacsaquispe ContrerasIII. Instituto Nacional de Salud (Per)IV. Per. Ministerio de Salud

Colaboracin:

Hospital Nacional Docente Madre-Nio San BartolomDr. Augusto Valencia Ramrez

Hospital Nacional del Callao Daniel A. CarrinDr. Jos mara Guevara Granados

Instituto Nacional de SaludDr. Vctor Surez MorenoDr. Csar Cabezas Snchez

Instituto Nacional de SaludDr. Rito Zerpa Larraurri

Instituto Nacional de Enfermedades NeoplsicasDra. Mara Elena Silva Daz

Proyecto VIGIA-MINSADr. Martn Yagui Moscoso

Universidad Peruana Cayeta HerediaDr. Humberto Guerra Allison


MPR-CNSP-007



CONTENIDO

INTRODUCCIN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .IV

SECCIN 1: GENERALIDADES . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1

SECCIN 2: MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2

SECCIN 3: PROCEDIMIENTOS DE OBTENCION DE MUESTRA . . . .3

3.1 Obtencin de muestra de sangre para cultivo . . . . . . . . . . .33.2 Obtencin de muestra de dispositivos intravasculares . . . . .93.3 Obtencin de muestra de orina para cultivo . . . . . . . . . . .103.4 Obtencin de muestra de herida operatoria . . . . . . . . . . .163.5 Obtencin de muestra de secreciones de tracto

respiratorio inferior . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .193.6 Obtencin de muestra de secrecin endometrial

para cultivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20

SECCIN 4: ENVIO Y TRANSPORTE DE MUESTRA . . . . . . . . . . . . . .23

4.1 Objetivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .234.2 Condiciones especficas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .234.3 Procedimientos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .234.4 Criterios para rechazar una muestra . . . . . . . . . . . . . . . . .25

BIBLIOGRAFA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27

III


MPR-CNSP-007



INTRODUCCION

Las infecciones intrahospitalarias cada vez ms constituyen un serioproblema de salud pblica, ya sea por su efecto sobre la salud de lospacientes, como por los costos que este problema implica. Esto hace que, enel pas, se estn aunando esfuerzos por implementar sistemas de vigilancia,prevencin y control, orientados a enfrentar este problema y mejorar as lacalidad de atencin de los servicios hospitalarios.

Los pacientes con procesos infecciosos intrahospitalarios, pueden presentaruna gran variedad de signos y sntomas, algunos de ellos pueden serevidentes y fciles de reconocer, mientras otros pueden pasar inadvertidospor lo que el clnico debe basar su diagnstico en otras evidenciasdisponibles, como son los aspectos epidemiolgicos y la importantecontribucin del laboratorio, que adems de permitir el diagnstico etiolgico,orienta el manejo clnico teraputico del paciente.

En este contexto, el Instituto Nacional de Salud, en su rol de Centro deReferencia Nacional, que norma los procedimientos de laboratorio que serealizan en los diferentes establecimientos y niveles de la Red deLaboratorios, ha aprobado, previa discusin con los expertos de microbiologade los principales hospitales nacionales del Ministerio de Salud, elMANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE OBTENCION DE MUESTRAS PARAEL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO EN INFECCIONES INTRA-HOSPITALARIAS

El objetivo de este manual en formato de bolsillo es difundir estosprocedimientos entre todo el personal clnico. Es necesario enfatizar que elfactor ms importante para un buen diagnstico microbiolgico es unaadecuada obtencin de muestra.

Esperamos que este Manual sea objeto de frecuente consulta y colabore enla mejor atencin de los pacientes hospitalizados.

IV


SECCIN 1

GENERALIDADES

1.1 Obtener la muestra en forma asptica, eligiendo la zona apropiadade acuerdo al tipo de infeccin identificada, asegurndose de nocontaminar la muestra con flora normal.

1.2 Obtener una suficiente cantidad de muestra para asegurar elaislamiento del germen relacionado con el proceso infeccioso enestudio y evitar los resultados falsos negativos.

1.3 Obtener la muestra antes del inicio de la terapia antimicrobiana. Siel paciente ya hubiera recibido alguna dosis del antimicrobiano almomento de obtener la muestra, el laboratorio debe ser informadoal respecto.

1.4 Obtener suficiente cantidad de muestra para realizar un examencompleto y exacto.

1.5 Enviar las muestras al laboratorio inmediatamente despus dehaber sido obtenidas para su procesamiento, con el objeto deincrementar la probabilidad de recuperacin de losmicroorganismos involucrados en el proceso infeccioso.

1.6 Colocar las muestras en un recipiente secundario apropiado parasu transporte al laboratorio para evitar cualquier derrame y por lotanto prevenir los riesgos que de ello se deriven.

1.7 El paciente debe ser informado en forma clara y sencilla de acuerdoa su grado de instruccin sobre los procedimientos a realizar.


1 Instituto Nacional de SaludMPR-CNSP-007



SECCIN 2

MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD

2.1 El personal involucrado en los diferentes procesos para eldiagnstico de infecciones intrahospitalarias debe aplicar lasmedidas de bioseguridad establecidas en las Normas deBioseguridad publicada por el INS. Serie Normas Tcnicas N 18.

2.2 Se deben controlar las medidas necesarias aplicables a:

2.2.1 El personal

2.2.2 La vestimenta

2.2.3 Los ambientes

2.2.4 La obtencin de muestras

2.2.5 El envo de muestras al laboratorio

2.2.6 Los casos de accidentes

2.2.7 El laboratorio



SECCIN 3

PROCEDIMIENTOS DE OBTENCIN DE MUESTRA

La efectividad de un laboratorio microbiolgico y el xito de losprocedimientos dependen en gran medida del modo de obtencin,transporte, rapidez y la oportunidad con que las muestras llegan allaboratorio. Estos procedimientos son prioritarios para que el laboratoriocontribuya eficientemente en el diagnstico, es por ello que todos losmiembros del equipo de salud involucrados deben entender la naturalezacrtica de mantener la calidad de la muestra durante todo el proceso.

3.1 OBTENCION DE MUESTRA DE SANGRE PARA CULTIVO

3.1.1 Condiciones especficas

3.1.1.1. El momento ptimo de obtencin de la muestra para hemocultivoes justo antes del pico ms alto de fiebre, sin embargo estasituacin ideal no es frecuente. Alternativamente, las muestraspueden obtenerse de acuerdo con el caso. Por ejm.

Bacteremias continuas: En cualquier momento, ejm.Endocarditis.

Bacteremias intermitentes: Una hora antes del pico febril, ejm.Brucelosis.

3.1.1.2. Gua para la cronologa y el nmero de cultivos de sangre enadultos:

En sepsis: Se debe tomar dos a tres muestras de lugaresdiferentes en un lapso de diez minutos.

En endocarditis aguda: Obtener tres muestras de tres lugaresdiferentes en un lapso de 1 a 2 horas.

En endocarditis subaguda: Obtener tres muestras de treslugares diferentes a intervalos de al menos quince minutos. Siel cultivo es negativo a las 24 horas, obtener tres muestrasms.





En fiebre de origen desconocido: Obtener dos o tres muestrasde lugares diferentes con diferencia de 1 hora o ms entreuna y otra muestra. Si el cultivo es negativo a las 24 h, obtenerdos a tres muestras ms.

3.1.2 Obtencin de muestra de sangre mediante uso de jeringa

3.1.2.1 Procedimiento.

a. El paciente se presentar portando la orden correspondiente,indicando el anlisis clnico a realizarse dado por el mdicotratante.

b. Llenar la ficha del paciente con los datos que se solicitan.

c. Colocar sobre la mesa de trabajo el material necesario paraejecutar la obtencin de la muestra. (Figura 1).


Figura 1. Material para la toma de muestra sangunea.

d. Lavarse las manos y colocarse los guantes.

e. Haga que el paciente se sienta lo ms cmodo posible, de manera

que el brazo quede colocado paralelamente a la mesa de trabajo

donde se har la extraccin de sangre.


f. Colocar el brazo del paciente sobre la mesa de trabajo apoyndoloen un pequeo cojn bajo el codo, con la palma de la mano vueltahacia arriba. (Figura 2).



Figura 2. Localizacin de la zona de venopuncin.

g. Colocar la ligadura aproximadamente a 2 dedos por encima de laflexin del codo, ajustando lo suficiente para aminorar la corrientesangunea y dilatar las venas, sin apretarlo tanto que reduzca elpaso de sangre por las arterias. (Figura 3).

Figura 3. Colocacin de la ligadura.



h. al paciente que abra y cierre la mano varias veces, para favorecerla dilatacin de las venas.

i. Con el dedo ndice de la mano izquierda, palpar la vena en queintroducir la aguja.

j. Desinfectar la zona de la piel donde se realizar la puncin con unpedazo de algodn embebido en alcohol yodado. (Figura 4).


Figura 4. Desinfeccin de la zona de venopuncin.

k. Tomar la jeringa con la mano derecha, colocando la yema del dedondice sobre la base de la aguja.

l. Colocar la aguja sobre la vena con el bisel hacia arriba e introduzcala aguja en el centro de la vena sin titubeos de 1-1,5 cm,aproximadamente.(Figura 5)

m. Luego de extrada la sangre por puncin venosa, retirar la jeringa yla ligadura.(Figura 6)

n. Finalmente, introduzca la aguja en el protector, utilizando la tcnicade una zona mano.(Figura 7)


Figura 5. Extraccin de la muestra.



Figura 6. Extraccin de la jeringa y la ligadura.



3.1.2.2 La proporcin entre el volumen de sangre obtenida y el volumen delcaldo de cultivo debe estar en una relacin de 1:5 1:10.

3.1.2.3 El volumen de sangre depender de la edad del paciente, por cadavenopuncin se recomienda:Adultos: 10 30 mLNios: 1 5 mLLactantes: 1 2 mLNeonatos: 0,5 1 mL

3.1.3 Inoculacin de la muestra de sangre al medio de cultivo

3.1.3.1 Utilizar un medio bifsico o monofsico para este procedimiento.

3.1.3.2 Desinfectar el diafragma del frasco de hemocultivo con alcohol70% o alcohol yodado.

3.1.3.3 Inocular la muestra de sangre al frasco con medio de cultivo atravs del diafragma. Debe realizarse inmediatamente despus deobtenida la muestra para evitar que se coagule.


Figura 7. Tcnica de una sola mano.


3.1.3.4 Mezclar el contenido del frasco inclinndolo suavemente dos o tresveces. En caso que se use el medio bifsico, baar la fase slidacon la sangre.

3.1.3.5 Descartar la aguja y la jeringa en un contenedor resistente a laspunturas. No volver a introducir la aguja en su funda.

3.1.3.6 Limpiar la tapa del frasco. Etiquetar el frasco apropiadamenteindicando adems el nmero de hemocultivo.

3.1.3.7 Transportar el hemocultivo inmediatamente al laboratorio deacuerdo a la norma establecida.

NOTA: Si por alguna razn se obtiene menor volumen de sangre que eldeseado, no debe descartarse.

3.2 OBTENCIN DE MUESTRA DE DISPOSITIVOSINTRAVASCULARES

3.2.1 Objetivo

Describir el procedimiento de obtencin de muestra de dispositivosintravasculares.

3.2.2 Campo de Aplicacin

3.2.2.1 Se aplica en la obtencin de muestras para el diagnstico deinfecciones asociadas a dispositivos intravasculares del torrentesanguneo.

3.2.2.2 Los dispositivos intravasculares en los que puede realizarsecultivos semicuantitativos son: central, Hickman, Brovac,perifrico, arterial, umbilical, de nutricin parenteral total,Swan- Ganz.

3.2.3 Materiales

3.2.3.1 Alcohol 70% .

3.2.2.2 Gasa estril.





3.2.2.3 Tijera estril.

3.2.2.4 Tubo o frasco con tapa rosca estril.

3.2.2.5 Guantes de ltex estriles.

3.2.2.6 Refrigeradora.

3.2.4 Procedimiento

3.2.4.1 Limpiar la piel con alcohol 70% alrededor de la insercin del catter.

3.2.4.2 Retirar el catter en forma asptica, cortar a 5 cm de la punta distaldel catter dejando caer directamente en un tubo o frasco vacoestril con tapa rosca.

3.2.4.3 Rotular y transportar la muestra inmediatamente al laboratorio demicrobiologa en un perodo NO MAYOR DE 15 MINUTOS ATEMPERATURA AMBIENTE para prevenir que se seque.

3.2.4.4 Registrar el procedimiento.

3.2.4.5 En caso de no poder enviarse inmediatamente la muestra allaboratorio, sta puede mantenerse refrigerada a 4C hasta por 24horas.

3.3 OBTENCION DE MUESTRA DE ORINA PARA CULTIVO

3.3.1 Objetivo

Describir el procedimiento de obtencin de muestras de orina paracultivo, obtenida del chorro medio, por aspiracin de catter vesicalpermanente y por aspiracin suprapbica.

3.3.2 Campo de Aplicacin

El presente procedimiento se aplica en la obtencin de muestras deorina de pacientes para el diagnstico de infeccin del tractourinario.



3.3.3 Condiciones Generales

3.3.3.1 La orina es un excelente medio de cultivo para la proliferacinbacteriana, por esta razn, la muestra debe ser procesada dentrode las 2 h despus de haber sido obtenida o debe refrigerarse a4 C (mximo 24 horas) hasta su procesamiento.

3.3.3.2 Generalmente, el desarrollo de dos o ms tipos de colonias (enpacientes sin sonda vesical) indican que la muestra se hacontaminado por recoleccin incorrecta o demora en la siembra.

3.3.4 Obtencin de muestra de orina del chorro medio

3.3.4.1 Obtencin de muestra de orina en pacientes mujereshospitalizadas:

a. Materiales

- Guantes de ltex estriles.

- Cinco o ms piezas de gasa estril de tamao adecuadopudiendo ser de 4 x 4.

- Jabn.

- Agua tibia estril.

- Frasco estril de boca ancha para la muestra de orina.

b. Procedimiento

- Mantener la privacidad de la paciente.

- Rotular el frasco con el nombre de la paciente, fecha deobtencin de la muestra, hora y el procedimiento a utilizarpara la obtencin de la muestra.

- Lavarse las manos con jabn y abundante agua.





- Preparar una pieza de gasa para la limpieza de los genitalesexternos humedecindola con agua y una pequea cantidadde jabn.

- Preparar dos piezas ms de gasa para el enjuague con aguatibia.

- Separar los labios mayores con dos dedos de una mano ylimpiar el rea expuesta pasando de adelante hacia atrs.

- Descartar la gasa.

- Con otra gasa humedecida enjuagar el rea de adelante haciaatrs. Repetir el procedimiento con otra gasa.

- Secar el rea de adelante hacia atrs con un trozo de gasaseca.

- Mantener separados los labios mayores mientras la pacienteempieza a orinar.

- Luego del chorro inicial, colocar el frasco estril para colectarel chorro medio.

- Al terminar de orinar, inmediatamente tapar el frasco y limpiarla superficie del mismo.

- Transportar el frasco con la muestra de orinainmediatamente al laboratorio.

3.3.4.2 Obtencin de muestra de orina en pacientes varones:

a. Materiales

- Guantes de ltex.

- Cinco o ms piezas de gasa estril.



- Jabn.

- Agua tibia estril.

- Frasco estril de boca ancha para la obtencin de la muestra.

b. Procedimiento

- Mantener la privacidad del paciente

- Rotular el frasco con el nombre del paciente, fecha deobtencin de la muestra, hora y el procedimiento a utilizarpara la obtencin de la muestra.

- Lavarse las manos con jabn y abundante agua.

- Preparar una pieza de gasa con agua y una pequea cantidadde jabn. Preparar dos piezas ms de gasa para el enjuaguecon agua tibia.

- Realizar la higiene de los genitales: retraer el prepucio antesde lavar el glande con la gasa humedecida con jabn.Descartar la gasa.

- Enjuagar el glande, usando una gasa hmeda. Repetir elprocedimiento con otra gasa.

- Secar la zona, usando uno o ms piezas de gasa seca.

- Indicar al paciente que mantenga el prepucio retirado e iniciela miccin directamente en un recipiente (orina paradescartar).

- Despus del chorro inicial, colocar el frasco estril paracolectar la muestra del chorro medio.





- Obtenida la muestra, inmediatamente tapar el frasco ylimpiar la superficie del mismo.

- Transportar el frasco con la muestra de orina inmediatamenteal laboratorio.

3.3.5 Obtencin de muestra de orina por aspiracin de cattervesical permanente

3.3.5.1 Materiales

a. Guantes de ltex estriles.

b. Jeringa descartable estril .

c. Aguja descartable estril N 21.

d. Tubo o frasco estril para la muestra.

e. Alcohol 70%.

3.3.5.2 Procedimiento

a. Rotular el frasco con el nombre del paciente, fecha de obtencin dela muestra, hora y el procedimiento a utilizar para la obtencin dela muestra.

b. Desinfectar con alcohol 70%, el extremo proximal del catter (loms cerca al punto de insercin) donde se realizar la puncin.

c. Realizar una puncin en el rea desinfectada y con la jeringaobtener la muestra: 5mL a 10 mL de orina idealmente (Figura 8).

d. Vaciar la orina en un tubo o recipiente estril evitando que el cuellode la jeringa toque superficies no estriles, por ejemplo, lasparedes externas del tubo o frasco.



e. Tapar o cerrar hermticamente el tubo o frasco.

f. Transportar el frasco con la muestra de orina inmediatamente allaboratorio.

3.3.6 Obtencin de muestra de orina por aspiracin suprapbica

3.3.6.1 Condiciones Generales

a. Ocasionalmente, puede ser necesaria la aspiracin suprapbica dela vejiga, por lo general cuando se trata de nios pequeos.

b. El procedimiento es efectuado asegurando que el paciente est conla vejiga llena y realizando una puncin directa de la vejiga a travsde la pared abdominal con aguja y jeringa.

c. La obtencin de la muestra la debe realizar el mdico especialistasiguiendo los procedimientos normativos de su institucin.


a. Rotular el frasco con el nombre del paciente, fecha de obtencin dela muestra, hora y el procedimiento a utilizar para la obtencin dela muestra.



readesinfectada

Figura 8. Mtodo para obtener orina del catter mediante puncin



b. Colocar en el recipiente estril la orina obtenida.

c. Tapar el recipiente.

d. Llevar la muestra inmediatamente al laboratorio para suprocesamiento.

NOTA: En nios, para obtener la muestra del chorro medio es mejor estarpendiente del momento en que el nio tenga deseos de miccionar.

3.4 OBTENCIN DE MUESTRA DE HERIDA OPERATORIA

3.4.1 Objetivo

Describir el procedimiento de obtencin de muestra de heridaoperatoria para el diagnstico en laboratorio de bacteriasaerbicas.

3.4.2 Obtencin de muestra de herida operatoria con hisopo

En el caso de una herida operatoria con sospecha de infeccin, lamuestra se obtiene con hisopo.

3.4.2.1 Materiales

a. Guantes de ltex estril.

b. Solucin salina estril.

c. Jabn.

d. Gasa estril.

e. Hisopos estriles de algodn.

f. Medio de transporte de Stuart o Amies con carbn.



g. Lmina portaobjeto.

h. Tubo estril (opcional).

3.4.2.2 Procedimientos

a. Colocarse los guantes de ltex

b. Realizar una buena asepsia de los bordes de la herida con agua yjabn. La limpieza debe realizarse de adentro hacia fuera en formaconcntrica.

c. Retirar el exudado de la superficie enjuagando y limpiando consolucin salina estril (tambin se puede usar agua estril).

d. Separar suavemente los bordes de la herida con el pulgar e ndicede una mano.

e. Con la otra mano, cuidando de no tocar los bordes cutneosadyacentes, introducir la punta del hisopo en la profundidad de laherida. Obtener la muestra rotando el hisopo y avanzando haciafuera sin tocar el borde de la herida.

f. Obtener dos muestras: - Una muestra para el cultivo la cual se introduce en un medio de

transporte (Stuart o Amies con carbn). - La segunda muestra se obtiene para realizar una coloracin Gram.

Realizar el frotis inmediatamente despus de haber obtenido lamuestra cuidando que ste no sea muy grueso.

g. En el medio de transporte se puede mantener la muestra atemperatura ambiente hasta por 24 horas.





3.4.3 Obtencin de muestra de absceso por aspiracin con aguja

El mtodo indicado para obtener muestras de abscesos es poraspiracin con aguja.

3.4.3.1 Materiales

a. Guantes de ltex estriles.

b. Jeringa estril.

c. Aguja adecuada (recomendable aguja N 18 a 20).

d. Solucin salina estril.

e. Jabn.

f. Gasa estril.

g. Tubo estril (opcional).

h. Medio de transporte de Stuart o Amies con carbn.


a. Colocarse los guantes de ltex.

b. Realizar una buena limpieza de la superficie con agua y jabn. Lalimpieza debe realizarse de adentro hacia afuera en formaconcntrica.

c. Desinfectar la superficie con alcohol 70% o yodo-povidona.

d. Introducir la aguja a travs de la piel y/o la pared del absceso yaspirar aproximadamente 1 mL del material purulento con lajeringa.



e. Colocar la muestra en un tubo estril y enviar al laboratorio deinmediato.

f. Si el transporte de la muestra al laboratorio demora ms de 20 - 30minutos, se debe mantener en medios de transporte como Stuarto Amies con carbn.

g. En el medio de transporte, la muestra puede permanecer atemperatura ambiente hasta por 24 horas.

NOTA: En quemaduras:

Limpiar y retirar el tejido muerto o quemado antes de laobtencin de la muestra (puede ser un hisopado del exudadoo una biopsia).

Las muestras de tejido deben llevarse al laboratorio en gasaestril o en un envase con tapa rosca.

Los cultivos cuantitativos an no estn validados.

3.5 OBTENCION DE MUESTRA DE SECRECIONES DEL TRACTORESPIRATORIO INFERIOR

3.5.1 Objetivo

Describir el procedimiento de obtencin de muestras desecreciones del tracto respiratorio inferior para realizar eldiagnstico microbiolgico mediante cultivos.

3.5.2 Condiciones Especficas

Las muestras de lavado broncoalveolar, cepillado bronquial oaspirado transtraqueal deben ser obtenidas por profesionalespecializado siguiendo los procedimientos normativos de suinstitucin.




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3.5.3 Materiales

3.5.3.1 Recipiente estril, o tubo estril.

3.5.3.2 Tubo estril con 1 mL de suero fisiolgico estril o caldo tripticasasoya.

3.5.4. Procedimiento

3.5.4.1 Colocar el aspirado transtraqueal o lavado broncoalveolar en unrecipiente estril.

3.5.4.2 Para el anlisis cuantitativo de lavado broncoalveolar se debetransportar un volumen mnimo de 1 mL (en el procesogeneralmente se obtiene de 40 mL a 80 mL de fludo).

3.5.4.3 En el caso de las muestras obtenidas por cepillo, stas se debencolocar en 1 mL de caldo tripticasa soya o suero fisiolgico para elanlisis cuantitativo.

3.5.4.4 Las muestras deben ser enviadas al laboratorio inmediatamentepara su procesamiento.

3.5.4.5 De no ser as, las muestras se conservarn por 2 horas atemperatura ambiente. En caso de volmenes pequeos seconservarn a temperatura ambiente de 15 a 30 minutos, o por 24horas en refrigeracin a 4C.

3.6 OBTENCIN DE MUESTRA DE SECRECION ENDOMETRIALPARA CULTIVO

3.6.1 Objetivo

Describir el procedimiento de obtencin de muestras en casos deendometritis para el diagnstico bacteriolgico mediante cultivo.

20 Instituto Nacional de Salud




3.6.2 Campo de aplicacin

Se aplica en la obtencin de muestras para el diagnstico delaboratorio de bacterias aerobias en casos de endometritis. Este manual no comprende los procedimientos para el aislamientode bacterias anaerobias.

3.6.3 Condiciones Especficas

La endometritis pertenece al grupo de infecciones definidas comoinfecciones del tracto reproductivo. Las muestras deben sertomadas por profesional especializado siguiendo losprocedimientos normativos de su institucin.

3.6.4 Materiales

3.6.4.1 Medio de transporte de Stuart o Amies con carbn

3.6.4.2 Hisopo con punta de algodn

3.6.4.3 Tubo estril con tapa rosca

3.6.5 Procedimiento

3.6.5.1 Muestra obtenida mediante hisopo

a. Obtener dos muestras de secrecin endometrial, una para cultivo yla otra para un frotis directo y coloracin Gram. Realizar esteprocedimiento inmediatamente despus de obtener la muestra.

b. El hisopo con la muestra obtenida para cultivo debe colocarse enel medio de transporte.

c. Mantener a temperatura ambiente.

d. Enviar la muestra al laboratorio antes de las 24 horas.



3.6.5.2 Muestra obtenida por aspiracin

a. Colocar el aspirado de la secrecin endometrial en un tubo estrily llevar inmediatamente al laboratorio para su procesamiento porcultivo y coloracin gram.

b. Mantener a temperatura ambiente.

c. Enviar la muestra al laboratorio antes de las 2 horas.





SECCIN 4

ENVO Y TRANSPORTE DE MUESTRA

4.1 OBJETIVO

Describir el procedimiento y condiciones para el transporte demuestras al laboratorio.

4.2 CONDICIONES ESPECIFICAS

4.2.1 La muestra debe ser mantenida lo ms cerca posible de su estadooriginal, debiendo evitarse temperaturas extremas odesecamientos excesivos.

4.2.2 Por lo general, volmenes de 1 5 mL de muestra deben enviarseal laboratorio dentro de 15 a 30 minutos.

4.3 PROCEDIMIENTO

4.3.1 Para su transporte al laboratorio se colocan las muestras en unenvase secundario, el cual puede ser de material plstico u otroresistente a roturas o filtraciones.

4.3.2 Todas las muestras son enviadas al laboratorio lo ms prontoposible dentro de las dos horas de haber sido obtenidas, aexcepcin de los dispositivos intravasculares que no se debeexceder de los 15 minutos. Si el proceso va a demorar, puedenmantenerse bajo las condiciones mencionadas por tipo de muestraen los medios de transporte que se recomiendan.

4.3.3 Por lo general, no se almacenan las muestras por ms de 24 horas.

4.3.4 En caso sea necesario, transferir las muestras a otros laboratorios;los responsables de su envo eligen el sistema de embalajeapropiado para la conservacin de las muestras durante el tiempoque demanda el transporte hasta llegar al laboratorio.


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TIPO

DE

INFE

CC

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4.4 CRITERIOS PARA RECHAZAR UNA MUESTRA

4.4.1 Debe controlarse cada hoja de pedido y etiqueta de la muestra paraver si se ha incluido toda la informacin esencial.

4.4.2 Antes de rechazar una muestra debido a una informacininapropiada o incompleta, debe establecerse contacto con lapersona responsable para efectuar las correcciones necesariaspara as poder completar la informacin.

4.4.3 Es necesario seguir estrictamente los procedimientos descritos, yaque la muestra obtenida puede ser rechazada por el personal delaboratorio de acuerdo a los siguientes criterios:

4.4.3.1 No indicar tipo de muestra o procedencia.

4.4.3.2 No indicar tipo de examen en la orden.

4.4.3.3 Inadecuada temperatura de transporte.

4.4.3.4 Demora en el envo al laboratorio.

4.4.3.5 Medio de transporte inadecuado.

4.4.3.6 Muestra sin rotular o mal rotulada.

4.4.3.7 Muestra que tenga evidencias de haberse derramado.

4.4.3.8 Recipiente inadecuado (con rajaduras por ejemplo).

4.4.3.9 Muestra con contaminacin obvia.

4.4.3.10 Muestra seca en el hisopo.

4.4.3.11 Una sola muestra de hisopado con varias rdenes.

4.4.3.12 Volumen inadecuado.





4.4.4 En casos de muestras rechazadas el personal de laboratorio debeexplicar al mdico solicitante las razones y observaciones en laficha de solicitud de diagnstico correspondiente. En el caso demuestras que no puedan ser obtenidas nuevamente, lainterpretacin de la coloracin Gram debe ser revisadacuidadosamente.

4.4.5 Es importante el examen microscpico del material clnico, ya quepermite conocer no slo la calidad de la muestra, sino tambin lapresencia de microorganismos, lo que proporciona suficienteinformacin para un diagnstico presuntivo inmediato.



BIBLIOGRAFA

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Manual e Procedimientos Para Obtencion de Muestras