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0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 min0.0
0.5
1.0
( x100,000 )
MastroTM C18S/N : 685
Typical C18S/N : 492Typical C18S/N : 492
Typical C18S/N : 2 .8Typical C18S/N : 2 .8
MastroTM C18S/N : 24
1 µg/mL
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 min
2.5
3.0
3.5 ( x1,000 )
Analytical Conditions
Instrument : Shimadzu NexeraXR+ LCMS2020Column : MastroTM C18(100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm) Typical C18(100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm)Flow Rate : 0.2 mL/minDetection : MS (SIM mode)Mobile Phase : A: 0.1% Formic Acid in Water B: 0.1% Formic Acid in MeCN
0.01 min ポンプ B.Conc 10%5.00 min ポンプ B.Conc 80%5.01 min ポンプ B.Conc 10%6.50 min ポンプ B.Conc 10%
Column Temp. : 40 ℃ Injection Vol. : 2 µL
Peak
Fig.1 Chromatograms of Hydrocortisone Sodium Phosphate
Hydrocor t i sone Sod ium Phosphate
Hydrocor tisone Sodium Phosphate
25 ng/mL
Mas t r o™ C18カラムのご紹介ー Mas t r o™ ボデーの有用性について ー
リン酸基含有化合物を用いて、ステンレススチールボデーカラムとMastro™ボデーカラムの比較を行った結果、
Mastro™ボデーカラムではピーク形状や S/N が大幅に改善されその有用性が確認できました。
Peak
0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 min
1
2MastroTMC18カラム Typical C18カラム
0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 min
2
1
Fig.2 Chromatograms of Nucleotides
Adenosine Triphosphate Adenosine Monophosphate
Instrument : Shimadzu NexeraColumn : MastroTM C18(100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm) Typical C18 (100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm)Mobile Phase : 10 mM Ammonium Formate in Water : MeCN=99:1Flow Rate : 0.2 mL/minColumn Temp. : 40 ℃ Detection : SPD-M20A at (254 nm)Injection Vol. : 1 µL
Analytical ConditionsPeak Asymmetry
Peak 1 Peak 2
1.39 1.14
5.10 1.49
MastroTM C18
Typical C18
1 . Adenos ine Tr iphosphate 2 . Adenos ine Monophosphate
セグメント#1
min
21,873
79,876
210,366
151,006
164,146
170,327
40,854
97,411
69,439
26,920
151,905
26,289
67,224
82,196
57,987
129,243
63,354
193,379
373,078
23,121
24,843
58,584
86,086
47,954
61,741
63,139
173,838
18,372
11,988
28,845
24,690
51,203
31,425
15,237
36,660
6,604
780
10,059
2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0
343.90>150.10(-)@18 (1)
180.10>79.15(-)@1 (1)
194.10>80.15(-)@2 (1)
259.00>97.10(-)@3 (1)
229.00>97.10(-)@4 (1)
289.00>97.10(-)@5 (1)
259.00>97.10(-)@6 (1)
170.90>79.10(-)@7 (1)
258.90>79.10(-)@8 (1)
169.00>97.10(-)@9 (1)
198.90>97.10(-)@10 (1 )
229.00>97.10(-)@11 (1 )
322.00>79.10(-)@12 (1 )
169.00>97.10(-)@13 (1 )
322.90>79.10(-)@14 (1 )
361.90>79.10(-)@15 (1 )
320.90>195.05(-)@16 (1)
346.00>79.10(-)@17 (1 )
327.90>134.20(-)@19 (1)
402.00>158.90(-)@20 (1)
441.90>159.05(-)@21 (1)
403.00>159.05(-)@22 (1)
185.10>97.10(-)@23 (1 )
339.10>97.10(-)@24 (1 )
425.90>159.00(-)@25 (1)
401.00>159.00(-)@26 (1)
167.10>79.10(-)@27 (1 )
481.90>159.00(-)@28 (1)
521.90>159.00(-)@29 (1)
482.90>159.00(-)@30 (1)
505.90>159.05(-)@31 (1)
481.10>159.00(-)@32 (1)
662.00>539.95(-)@33 (1)
742.20>619.90(-)@34 (1)
664.00>408.00(-)@35 (1)
744.20>408.15(-)@36 (1)
866.00>408.00(-)@37 (1)
808.00>408.00(-)@38 (1)
Methionine sulfone2-Morpholinoethansulfonic acid
Glucose 6-phosphateRibose 5phosphate
Sedoheptulose 7-phosphateFructose 6-phosphateGlycerol 3-phosphateGlucose 1-phosphate
Glyceroaldehyde 3-phosphateErythrose 4-phosphateRibulose 5-phosphate
CMPDihydroxyacetonephosphate
UMPGMPTMPAMPcGMPcAMPCDPGDPUDP
3-Phosphoglycerate/2-PhosphoglycerateFructose 1,6-bisphosphate
ADPTDP
PhosphoenolpyruvateCTPGTPUTPATPTTPNAD
NADPNADHNADPH
Succinyl coenzyme AAcetyl coenzyme A
Analytical Conditions
Instruments : Shimadzu Nexera/LCMS-8050Column : Mastro™ SP (2.1 mmI.D X 100 mmL.,5 μm)Mobile phase A : 10 mM Ammonium acetate/MeCN=90/10 B : 50 mM Ammonium acetate/MeCN=80/20Gradient B conc. : 0% B (0-4.0 min)⇒60% B (9.0 min) ⇒100%B (11.0-20.0 min) ⇒0%B (20.1-25.0 min)Oven Temp. : 40 ℃Injection vol. : 3 µLSample : 2.5 µM STD MixT.Flow : 0.5 mL/minNebulizing gas : 3.0 L/minDrying gas : 12 L/minDL Temp. : 250 ℃BH Temp. : 400 ℃Injection vol. : 3 µLFig.4 Chromatograms of Sugar Phospahates and Nucleotides
Fig.5 Chromatograms of Sugar Phospahates and Nucleotides
Chromatogram
Ma s t r o™SPカラムによるイオンペア剤を用いない糖リン酸及びヌクレオチド等のLC /MS /MS分析例
Instruments : Shimadzu Nexera/LCMS-8050Column : Mastro™ SP (2.1 mmI.D.X 100 mmL. ,5 µm)Mobile phase A : 10 mM NH4HCO3/ MeCN=90/10 B : 20 mM NH4HCO3/ MeCN=70/30 Gradient B conc. : 0% (0-3 min) ⇒ 100% (13.0-20.0 min) ⇒ 0% (20.1-25.0 min) Oven Temp. : 40 ℃ Injection vol. : 2 µLSample : 2.5 µM STD MixNebulizer Gas : 2.0 L/minDrying Gas : 10 L/minHeating Gas : 10 L/minInterface Temp. : 300 ℃ DL Temp. : 250 ℃ HB Temp. : 400 ℃ Dwell Time : 10 msPause Time : 1 msIonization mode : ESI/negative
Analytical Conditions
注)アルカリ条件下での参考アプリケーションです。同条件での使⽤は、カラムの許容pH範囲を超える為寿命が短くなりますので、予めご留意ください。
Mastro™ボデーカラムに比較的保持の強いPFP充填剤を充填したカラムです。
一般的にPFPカラムはC18カラムでは保持・分離が困難な化合物群、例えば位置異性体やハロゲン系化合物などの保持・分
離に対して有効と言われています。
ここでは、カビ毒の分析例によりMastro™PFPカラムのご紹介を致します。
3-ADON、15-ADONのような位置異性体化合物は、C18充填カラムによる分離は困難でPFP(ペンタフルオロフェニル)充填カラム
が有効です1)。また、フモニシンB類のような金属キレート性化合物は、カラムを含めた分析システムに吸着しテーリングやキャリーオ
ーバーの原因となります2)。Mastro™シリーズカラムは、カラムボデー接液部がイナート素材であるため(Fig .6 )、一般的なステンレス
スチール製ボデーカラムに比べ金属キレート性化合物吸着の影響を大幅に削減できます2)。
【参考文献】
[1]Masayoshi Tamura, Naoki Mochizuki , Yasushi Nagatomi, Koichi Harayama,Akira Tor iba and Kazuichi Hayakawa,
Toxins 2015, 7 , 1664-1682; doi :10.3390/toxins7051664
[2]Mochizuki , N.CHROMATOGRAPHY, Vol .33 No.3 (2012)
Mas t r o™PFP (Pen t a F l uo ro Pheny l )カラムについて
Mastro™ C18Mastro™ C18A社PFPカラムA社PFPカラム
Mastro™ PFPMastro™ PFP
Fig.6 Chromatograms of 3-ADON/15-ADON,FB1 and FB2/FB3 using Mastro™ PFP,C18 and Typical PFP columns
3-ADON 15-ADON
Mas t r o™PFPカラムによるマイコトキシン17成分のLC/MS /MS分析例
NIV
DON
FUX
NEO
DAS
HT-2
FB1
-ZAL α-ZALβ
T-2
FB3 FB2
β-ZEL α-ZEL
ZEN
15-ADON 3-ADON
Analytical Conditions
Instruments : Nexera/LCMS-8060Column : Mastro™ PFP (2.1 mmI.D.X 100 mmL., 3 µm)
Mobile phase A: 10 mM Ammonium acetate in Water B: 2% Acetic acid in MeOH
Time program: B20%(0min)-40%(1-1.5min)-50%(1.51-5.5min) -65%(5.51min)-70%(9.5min)-95%(9.51-12min) Flow : 0.3 mL/min
Sample : 50 ng/mL STD Mix
Fig.7 Chromatograms of 17 Mycotoxins
MastroTM Body Image
ステンレススチール製ボデー
ポリマーフリット
ポリマーコーティング
充填剤
配管影響について
Mas t ro™ ボデーについてステンレススチールのカラムボデー内面をポリマーでコーティングし、フリットは高耐圧性のポリマー素材を採用することで不活性と高耐圧を両立しました。
配管のピーク形状に及ぼす影響は、カラムボデーに比べ小さい事が分かりました。
本誌のアプリケーションデータは全て SUS 配管(島津純正装置)※を用いて分析したものです。
※SUS 配管の種類により内面の研磨度合い等が異なるため、同じ SUS 配管でもピーク形状が異なる場合があります。
Shimadzu Nexera 用 SIL OUT 配管(SUS,P/N:228-53184-91, サイズ :600 mmL.×0.1 mmI .D.)は吸着が少なく有用です。