26
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHẠM THỊ LÊ NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG BONG (L.FLEXUOSUM VÀ L.JAPONICUM) Ở ĐIỆN BÀN Chuyên ngành: Hóa hữu cơ Mã số: 60 44 01 14 TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Đà Nẵng, năm 2016

NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG

PHẠM THỊ LÊ

NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH

THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG MỘT SỐ

DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG BONG

(L.FLEXUOSUM VÀ L.JAPONICUM) Ở ĐIỆN BÀN

Chuyên ngành: Hóa hữu cơ

Mã số: 60 44 01 14

TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Đà Nẵng, năm 2016

Page 2: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

Công trình được hoàn thành tại

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG

Người hướng dẫn khoa học: GS.TS. ĐÀO HÙNG CƯỜNG

Phản biện 1: TS. Trần Mạnh Lục

Phản biện 2: TS. Nguyễn Trần Nguyên

Luận văn đã được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận văn tốt

nghiệp thạc sĩ khoa học tại Đại học Đà Nẵng vào ngày 20 tháng 8

năm 2016

Có thể tìm hiểu luận văn tại:

-Trung tâm Thông tin-Học liệu, Đại học Đà Nẵng

Page 3: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

1

MỞ ĐẦU

1. Tính cấp thiết của đề tài

Khi nhắc đến thảo dược, chúng ta nghĩ đến một phương thuốc

điều trị an toàn từ thiên nhiên. Lợi ích từ việc bổ sung dinh dưỡng

bằng thảo dược là to lớn nhưng chúng ta vẫn nên biết về hiệu quả

thực sự và tính an toàn khi sử dụng chúng. Mặc dù thảo dược không

chịu sự quản lý chặt chẽ như thuốc điều trị nhưng tác dụng của chúng

tương tự như cách của các loại tân dược. Do vậy, chúng vẫn có thể có

tác dụng phụ nếu không biết rõ và sử dụng đúng cách. Vì vậy, việc

phát hiện và đi sâu vào nghiên cứu các hợp chất có trong các loại

thảo dược luôn được chú trọng.

Là loại cây mọc phổ biến ở những vùng đầm lầy, bụi rậm, bờ

rào hoặc leo trên cây khác, bòng bong dẻo (tên khoa học Lygodium

flexuosum), bòng bong nhật (tên khoa học Lygodium japonicum) có

vai trò quan trọng đối với đời sống con người. Chúng được sử dụng

để chữa các chứng bệnh như sỏi niệu đạo, sỏi bàng quang, sỏi mật,

viêm thận, thủy thủng, vết thương do bỏng hoặc thương tích chảy

máu. Trên thế giới đã có nhiều công trình nghiên cứu về thành phần

hóa học cũng như công dụng điều trị bệnh của bòng bong được tiến

hành và công bố. Ở Trung Quốc, bòng bong từ lâu đã được khai thác

và sử dụng trong điều trị Đông y một cách hiệu quả. Ở Việt Nam,

việc khai thác và nghiên cứu bòng bong còn rất hạn chế. Hầu hết các

đề tài chỉ tập chung vào đánh giá trữ lượng, phân bố, thành phần cơ

bản…mà không đi sâu nghiên cứu, làm những hiểu biết về loại cây

này còn khá rời rạc, thiếu đồng bộ.

Bên cạnh đó, bòng bong sinh sản nhanh, phát triển mạnh mẽ

gây ra hiện tượng xâm lấn rừng, đe dọa tới hệ sinh thái. Nước ta dân

Page 4: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

2

gian có câu “ rối như mớ bòng bong”, điều này chứng tỏ số lượng

bòng bong phân bố ở nước ta cũng rất lớn.

Như vậy, việc sử dụng và khai thác tốt bòng bong không chỉ

đem đến hiệu quả kinh tế cao mà còn giúp cân bằng hệ sinh thái, bảo

vệ môi trường. Những nghiên cứu ứng dụng, tách chiết vào sản xuất

dược liệu cần phải có định hướng, đồng bộ, lâu dài.

Xuất phát từ những vấn đề nêu trên, tác giả đã chọn đề tài :

“Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học trong một số

dịch chiết của cây bòng bong (L. flexuosum và L. japonicum) ở

Điện Bàn” nhằm cung cấp thêm thông tin về loại cây này, góp phần

vào việc khai thác, sử dụng cây một cách hợp lí, hiệu quả.

2. Mục tiêu nghiên cứu

- Xác định một số chỉ tiêu vật lý, hóa học của bòng bong dẻo

và bòng bong nhật.

- Xây dựng quy trình chiết tách bằng các dung môi hữu cơ.

- Định danh thành phần hóa học của các dịch chiết.

- Khảo sát thăm dò một số hoạt tính sinh học của dịch chiết.

3. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu

Cây bòng bong dẻo (L. flexuosum) và bòng bong nhật (L.

japonicum) thu hái ở Điện Bàn, Quảng Nam.

4. Phƣơng pháp nghiên cứu

Để thực hiện đề tài này chúng tôi sử dụng các phương pháp sau:

♦ Thu tập, tổng hợp các tài liệu, tư liệu, sách báo trong nước và

nước ngoài có liên quan đến đề tài.

♦ Lấy mẫu, xử lý, sơ chế mẫu.

♦ Xác định một số chỉ tiêu hóa lý

5. Bố cục đề tài

Ngoài phần mở đầu, danh mục các bảng, hình, đồ thị, sơ đồ,

Page 5: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

3

kết luận và kiến nghị, tài liệu tham khảo, phụ lục. Trong luận văn

được chia làm các chương như sau :

Chương 1 : Tổng quan

Chương 2 :Những nghiên cứu thực nghiệm

Chương 3 : Kết quả và bàn luận

6. Tổng quan tài liệu nghiên cứu

- Cung cấp những thông tin khoa học về qui trình chiết tách

thành phần các chất trong cây bòng bong dẻo (L. flexuosum) và bòng

bong nhật (L. japonicum).

- Cung cấp các số liệu thực nghiệm cho các nghiên cứu sâu

hơn về cây bòng bong dẻo (L. flexuosum) và bòng bong nhật (L.

japonicum) trong các đề tài tiếp theo.

- Cung cấp thông tin khoa học về thành phần hóa học của một

số hợp chất chính trong cây bòng bong dẻo (L. flexuosum) và bòng

bong nhật (L. japonicum).

- Cung cấp các tư liệu về ứng dụng của dịch chiết từ cây bòng

bong dẻo (L. flexuosum) và bòng bong nhật (L. japonicum) từ các dung

môi khác nhau, từ đó có thể đề ra quy trình ứng dụng trong thực tế.

CHƢƠNG 1

TỔNG QUAN VỀ CÂY BÕNG BONG

1.1. MÔ TẢ THỰC VẬT CÂY BÒNG BONG

1.1.1. Vị trí phân loại thực vật

1.1.2. Đặc điểm hình thái thực vật học

a. Cây bòng bong nhật (Lygodium japonicum)

b. Cây bòng bong dẻo (Lygodium flexuosum)

1.1.3. Phân bố, sinh trưởng và phát triển của cây bòng bong

a. Phân bố

Page 6: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

4

b. Sinh trưởng và phát triển

1.2. THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY BÒNG BONG

1.3. MỘT SỐ CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY BÒNG

BONG

1.3.1. Các công trình nghiên cứu tại Việt Nam

1.3.2. Các công trình nghiên cứu trên thế giới

1.4. GIÁ TRỊ SỬ DỤNG VÀ DƢỢC TÍNH CỦA CÂY BÒNG

BONG

1.4.1. Trong đời sống hàng ngày

1.4.2. Công dụng của bòng bong theo đông y

a. Công dụng và các bài thuốc từ thân lá cây bòng bong

b. Công dụng và các bài thuốc từ rễ cây bòng bong

1.4.3. Một số chế phẩm của cây bòng bong

a. Thuốc hỗ trợ điều trị phì đại tiền liệt tuyến Vương Bảo

b. Chiết xuất của bòng bong

CHƢƠNG 2

NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM

2.1. NGUYÊN LIỆU

2.1.1. Nguyên liệu

Nguyên liệu là cả thân lá của cây bòng bòng dẻo (Lygodium

Flexuosum) và cây bòng bong nhật (Lygodium Japonicum), được thu

hái vào tháng 3/2014 đến tháng 5/2014 tại Điện Bàn, Quảng Nam.

2.1.2. Thu hái nguyên liệu

2.1.3. Xử lý nguyên liệu

Cả thân lá của mỗi loại bòng bong bỏ những phần hư hại, rửa

sạch, cắt nhỏ, phơi khô hoặc sấy ở nhiệt độ 400C.

Page 7: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

5

2.2. THIẾT BỊ, DỤNG CỤ VÀ HÓA CHẤT

2.2.1. Thiết bị, dụng cụ

2.2.2. Hóa chất

2.3. NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM

2.2.1. Phƣơng pháp xác định các thông số hóa lý

a. Phương pháp trọng lượng

b. Phương pháp vật lý

2.2.2. Phƣơng pháp chiết mẫu thực vật

a. Chiết bằng dung môi hữu cơ với thân lá cây bòng bòng

dẻo (L. flexuosum)

b. Chiết bằng dung môi hữu cơ với thân lá cây bòng bong

nhật (L.japonicum)

2.2.3. Phƣơng pháp phân tích và định danh thành phần

hóa học của các dịch chiết

Trong luận văn này chúng tôi phân tích và định danh thành

phần hóa học các dịch chiết n–hexane, dichloromethane, ethyl

acetate, methanol của cả thân lá cây bòng bong dẻo (L. flexuosum) và

cây bòng bong nhật (L.japonicum) bằng phương pháp đo sắc kí khí

ghép phổ khối (GC-MS).

Phương pháp GC - MS dựa trên cơ sở “nối ghép” máy sắc kí

khí (GC) với máy khối phổ (MS). Các chất sau khi đi qua cột GC có

thể bị ion hóa và có khả năng đầy đủ để phân tích bởi máy khối phổ

MS. Kĩ thuật sắc kí cho phép tách các cấu tử của hỗn hợp, có được

các chất “nguyên chất” để đưa vào máy khối phổ với khả năng nhận

diện rất ưu việt, đặc biệt là những chất có đặc trưng lưu giữ giống

nhau hoặc tương tự nhau nhưng có phổ khối khác nhau nhờ đó có thể

nhận diện được chúng. Phương pháp này chỉ được giới hạn với chất

Page 8: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

6

có thể bốc hơi mà không bị phân huỷ hay là trong khi phân huỷ cho

sản phẩm phân huỷ xác định dưới thể hơi.

2.2.4. Phƣơng pháp thử hoạt tính kháng khuẩn

2.3. CÁC NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM

2.3.1. Sơ đồ thực nghiệm

a. Chiết bằng dung môi hữu cơ

Hình 2.1. Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm

2.3.2. Xác định các thông số hóa lí của nguyên liệu

a. Xác định độ ẩm

b. Xác định hàm lượng tro

Page 9: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

7

c. Xác định hàm lượng một số kim loại nặng

2.3.4. Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết tách

2.3.5. Chiết tách và xác định thành phần hóa học của các

dịch chiết thân lá cây bòng bong nhật hoặc bòng bong dẻo

CHƢƠNG 3

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1. KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH CÁC THÔNG SỐ HÓA LÝ

3.1.1. Độ ẩm

Qua quá trình kiểm tra ta xác định được độ ẩm trung bình của

cả thân lá cây bòng bong nhật và bòng bong dẻo xác định được lần

lượt là 3,587 và 3,562 .

3.1.2. Tro toàn phần

Qua quá trình thực nghiệm ta xác định được hàm lượng tro

trung bình trong cả thân lá cây bòng bong nhật và bòng bong dẻo là

2,899 và 3,449 . Điều này dự báo hàm lượng kim loại có trong

mỗi loại bòng bong là rất ít.

3.1.3. Hàm lƣợng kim loại nặng

Hàm lượng kim loại nặng Hg, As, Pb, Cd, Cu có trong thân lá

cây bòng bong nhật và bòng bong dẻo là tương đối thấp. Vì vậy ta có

thể nhận thấy là khi sử dụng thân lá bòng bong thì hàm lượng kim

loại nặng không ảnh hưởng đến sức khoẻ con người.

3.2. KẾT QUẢ KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN

QUÁ TRÌNH CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN

HÓA HỌC TRONG CÁC DỊCH CHIẾT BẰNG PHƢƠNG

PHÁP GC-MS

Page 10: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

8

3.2.1. Kết quả khảo sát thời gian trong quá trình chiết tách và

thành phần hóa học trong các dịch chiết bằng dung môi hữu cơ

a. Dung môi n-hexane

Qua quá trình khảo sát thời gian chiết cả thân lá cây bòng bong

nhật và cây bòng bong dẻo bằng dung môi n-hexane ta nhận thấy thời

gian chiết tốt nhất lần lượt là 8 giờ và 10 giờ.

Dịch chiết n-hexane từ cả thân lá cây bòng bong nhật và bòng

bong dẻo được xác định thành phần hóa học bằng phương pháp GC-MS.

Kết quả được kết quả định danh thành phần hóa học được tổng hợp ở

Bảng 3.1 và Bảng 3.2.

Bảng 3.1. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết n-

Hexane từ cây bòng bong nhật

STT Tên gọi

Diện

tích

peak

(%)

Thời

gian

lƣu

Công thức

1 Heptane, 2,2,4,6,6-

pentamethyl- 0.22 6,190

CH3

CH3CH3

CH3

CH3

CH3CH3

2

2(4H) -

Benzofuranone,

5,6,7,7a -tetrahydro -

4,4,7a - trimethyl -, (R)

-

0.48 18,530

O

O

3 Ethyl citrate 0.28 21,787

CH3O

O

O O

O

CH3

OOH

CH3

4

Bicyclo [3.1.1]

heptanes, 2,6,6 –

trimethyl – [1R-

(1.alpha.,2.beta.,5.alph

a.)] -

2.36 26,516

HH

Page 11: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

9

STT Tên gọi

Diện

tích

peak

(%)

Thời

gian

lƣu

Công thức

5 Phytol 8.03 33,657

6 Squalene 17.82 41,064

7 Tridecane 0.75 43,021 CH3

CH3

8

Cholest - 8 - en - 3 – ol,

14 - methyl - ,

(3.beta.,5.alpha.) -

5.86 44,459

OH H

9 Gama . - Sitosterol 14.96 45,480

H

H

H

OH

Bảng 3.2. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết n-

hexane từ thân lá cây bòng bong dẻo

STT Tên gọi Thời gian

lƣu (giây)

Diện tích

peak (%) Công thức

1

3,7,11,15 -

tetramethyl - 2 -

hexadecen - 1 -

ol

26,811 4,24 OH

2

17-

octadecynoic

acid

27,375 1,68

3 Phytol 34,272 2,58

Page 12: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

10

STT Tên gọi Thời gian

lƣu (giây)

Diện tích

peak (%) Công thức

4 Oleic acid 37,877 1,38

5 Squalene 41,239 21,90

6 Vitamin E 43,766 10,72 O

H

R3

R1

OH

R2 3

7 Campesterol 44,960 2,17 CH3

CH3

OH

H H

CH3

CH3

CH3

H

CH3

8 Stigmasterol 45,235 0,96 CH3

CH3

OH

H H

H CH3

CH3

CH3

H

CH3

9 Beta - sitosterol 46,057 8,37

OH

Qua Bảng 3.1 và 3.2 ta thấy trong dịch chiết n-hexane từ cả

thân lá cây bòng bong nhật định danh được 9 cấu tử và 9 cấu tử từ cả

thân lá cây bòng bong dẻo.

b.Dung môi dichloromethane

Qua quá trình khảo sát thời gian chiết cả thân lá cây bòng bong

nhật và cây bòng bong dẻo bằng dung môi dichloromethane ta nhận

thấy thời gian chiết tốt nhất lần lượt là 10 giờ và 10 giờ.

Dịch chiết dichloromethane từ cả thân lá cây bòng bong nhật và

bòng bong dẻo được xác định thành phần hóa học bằng phương pháp

GC-MS. Kết quả được kết quả định danh thành phần hóa học được tổng

Page 13: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

11

hợp ở Bảng 3.3 và Bảng 3.4.

Bảng 3.3. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết

dichloromethane từ thân lá cây bòng bong nhật

STT Tên gọi

Thời

gian

lƣu

(giây)

Diện

tích

peak

(%)

Công thức

1 2-Propenal, 3-(2-furanyl)-

20,431

1,26

O

O

2

Bicyclo [3.1.1] heptanes,

2,6,6-trimethyl -, [1R-

(1.alpha.,2.beta.,5.alpha.,)] -

26,516

3,61 H

H

3

Phytol

33,654

16,14

4 9,12,15-Octadecatrienoic

acid, methyl ester, (Z,Z,Z)-

39,156

5,74 O

O

5 Squalene

41,058

11,07

6 Gamma.- sitosterol

45,458

16,17

H

H

H

OH

Bảng 3.4. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết

dichloromethane từ thân lá cây bòng bong dẻo

STT Tên gọi Thời gian

lƣu (giây)

Diện tích

peak (%) Công thức

1 Furfural 3,632 0,67 O CHO

2

2-

Furancarboxalde

hyde, 5-

(hydroxymethyl )

11,529 4,99

O

OOH

Page 14: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

12

STT Tên gọi Thời gian

lƣu (giây)

Diện tích

peak (%) Công thức

3

3,7,11,15-

tetramethyl - 2 -

hexadecen-1-ol

26,798 6,20 OH

4 Caffeine 27,196 5,84 N

NN

N

O

CH3

O

CH3

CH3

5 17-octadecynoic

acid 27,375 1,55

6 n-hexadecanoic

acid 30,217 0,74

O

CH3

7 Phytol 34,246 2,07

8 Oleic acid 38,300 0,26

9 Squalene 41,226 21,85

10

Trans-13-

octodecenoic

acid

42,432 0,84

11 Vitamin E 43,760 18,07 O

H

R3

R1

OH

R2 3

Page 15: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

13

STT Tên gọi Thời gian

lƣu (giây)

Diện tích

peak (%) Công thức

12 Campesterol 44,940 2,06

CH3

CH3

OH

H H

CH3

CH3

CH3

H

CH3

13 Stigmasterol 45,216 1,20 CH3

CH3

OH

H H

H CH3

CH3

CH3

H

CH3

14 Beta-sitosterol 46,024 7,83

OH

15 Beta-amyrin 46,692 2,27 H

OH H

H

Qua Bảng 3.4 và 3.5 ta thấy trong dịch chiết dichloromethane

từ cả thân lá cây bòng bong nhật định danh được 6 cấu tử và 15 cấu

tử từ cả thân lá cây bòng bong dẻo.

c. Dung môi ethyl acetate

Qua quá trình khảo sát thời gian chiết cả thân lá cây bòng bong

nhật và cây bòng bong dẻo bằng dung môi ethyl acetate ta nhận thấy

thời gian chiết tốt nhất lần lượt là 8 giờ và 8 giờ.

Dịch chiết ethyl acetate từ cả thân lá cây bòng bong nhật và

bòng bong dẻo được xác định thành phần hóa học bằng phương pháp

GC-MS. Kết quả được kết quả định danh thành phần hóa học được tổng

hợp ở Bảng 3.6 và Bảng 3.7

Page 16: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

14

Bảng 3.6. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết

ethyl acetate từ thân lá cây bòng bong nhật

STT Tên gọi Thời gian

lƣu (giây)

Diện tích

peak(%) Công thức

1

4H-pyran- 4- one ,

2,3-dihydro-3,5-

dihydroxy-6-

methyl-

9,292

1,39

O

OH

O

OH

2 Benzofuran, 2,3 -

dihydro - 10,815 4,49

O

3

5-acetoxymethyl -

2-furaldehyde

12,823 1,53 O

OHC

OAc

4

Phytol

33,652

8,33

5

9,12,15 -

octadecatrienoic

acid , methyl ester,

(Z,Z,Z) -

39,156 2,51 O

O

6 Squalene 41,058 5,23

7

Gamma.-sitosterol

45,464

14,43 H

H

H

OH

Page 17: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

15

Bảng 3.7. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết

ethyl acetate từ thân lá cây bòng bong dẻo

STT Tên gọi

Diện

tích pic

(%)

Diện

tích pic

(%)

Công thức

1 Furfural 3,651 0,83 O CHO

2

4H-pyran-4-one, 2,3-

dihydro-3,5-

dihydroxy-6-methyl-

9,675 1,23

O

OH OH

O

3

2-

furancarboxaldehyde,

5-(hydroxymethyl)-

11,593 7,20 OOH H

O

4 5-acetoxymethyl-2-

furaldehyde 13,114 0,53 O

O H

O

CH3

CH2

5 3,7,11,15-tetramethyl

-2- hexadecen-1-ol 26,817 5,84

OH

6 Caffeine 27,253 8,48 N

NN

N

O

CH3

O

CH3

CH3

7 17-octadecynoic acid 27,407 1,54

Page 18: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

16

STT Tên gọi

Diện

tích pic

(%)

Diện

tích pic

(%)

Công thức

8 n-hexadecanoic acid 30,224 0,74

O

OH

9 Phytol 34,284 1,68

10 Oleic acid 38,313 0,68 O

OH

11 Squalene 41,232 10,20

12 Vitamin E 43,773 11,92 O

H

R3

R1

OH

R2 3

13 Campesterol 44,972 3,26

CH3

CH3

OH

H H

CH3

CH3

CH3

H

CH3

14 Stigmasterol 45,248 0,93

CH3

CH3

OH

H H

H CH3

CH3

CH3

H

CH3

Page 19: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

17

STT Tên gọi

Diện

tích pic

(%)

Diện

tích pic

(%)

Công thức

15 Beta-sitosterol 46,057 8,18

OH

16 Beta-amyrin 46,724 1,40 H

OH H

H

Qua Bảng 3.6 và 3.7 ta thấy trong dịch chiết methanol từ cả

thân lá cây bòng bong nhật định danh được 7 cấu tử và 16 cấu tử từ

cả thân lá cây bòng bong dẻo.

d. Dung môi methanol

Qua quá trình khảo sát thời gian chiết cả thân lá cây bòng bong

nhật và cây bòng bong dẻo bằng dung môi methanol ta nhận thấy thời

gian chiết tốt nhất lần lượt là 6 giờ và 10 giờ.

Dịch chiết methanol từ cả thân lá cây bòng bong nhật và bòng

bong dẻo được xác định thành phần hóa học bằng phương pháp GC-

MS. Kết quả được kết quả định danh thành phần hóa học được tổng

hợp ở Bảng 3.8 và Bảng 3.9.

Page 20: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

18

Bảng 3.8. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết

methanol từ thân lá cây bòng bong nhật

STT Tên gọi

Thời

gian

lƣu

(giây)

Diện

tích pic

(%)

Công thức

1 Furfural 3,597 1,88

O CHO

2 2 -Furanmethanol 3,912 0,71

O

OH

3

2- cyclopenten -

1-one, 2-

hydroxyl-

5,059 2,53

OH

O

4

4H-pyran-4 - one,

2,3-dihydro-3,5 -

dihydroxy -6-

methyl

9,593 3,85

O

O

OHOH

5 Benzaldehyde, 3

- methyl 10,888 5,48

O

6

Benzene, 1-

(chloromethyl)- 2

-nitro

16,269 5,60

Cl

N

O

O

7 n-hexadecanoic

acid 29,758 4,60

O

OH

8

11,14,17-

eicosatrienoic

acid, methyl ester

33,298 0,30 O

O

9 Phytol 33,662 0,33

Page 21: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

19

STT Tên gọi

Thời

gian

lƣu

(giây)

Diện

tích pic

(%)

Công thức

10

9,12,15-

octadecatrienoic

acid, (Z, Z, Z )-

34,805 2,37

OH

O

11 Pentadecanoic

acid 35,612 0,56

O

OH

12

9,12,15 -

octadecatrienoic

acid, (Z, Z, Z ),

methyl ester - ,

(Z, Z, Z ) -

40,425 0,65

O

O

Bảng 3.9. Kết quả định danh thành phần hóa học trong dịch chiết

methanol từ thân lá cây bòng bong dẻo

STT Tên gọi

Thời

gian

lƣu

(giây)

Diện

tích

peak

(%)

Công thức

1 Furfural 3,684 0,55

O CHO

2 2-Furanmethanol 4,036 0,52

O

OH

3 2-cyclopenten-1- one , 2

-hydroxy- 5,210 0,56

O

OH

Page 22: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

20

STT Tên gọi

Thời

gian

lƣu

(giây)

Diện

tích

peak

(%)

Công thức

4 Caffeine 27,452 21,99

N

NN

N

O

CH3

O

CH3

CH3

5 n-hexadecanoic acid 30,442 11,02 O

OH

6 Trans-13- octadecenoic

acid (Z,Z) 36,074 0,62

OH

O

7 Octadecanoic acid 36,421 3,39 OH

O

8 9,12-octadecadienoic

acid (Z,Z) 37,268 0,31

O

OH

9 Oleic acid 37,364 0,57 O

OH

10 Squalene 41,232 2,82

Page 23: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

21

STT Tên gọi

Thời

gian

lƣu

(giây)

Diện

tích

peak

(%)

Công thức

11 Vitamin E 43,773 5,48

O

H

R3

R1

OH

R2 3

12 Campesterol 45,017 1,59

CH3

CH3

OH

H H

CH3

CH3

CH3

H

CH3

13 Stigmasterol 45,261 0,60

CH3

CH3

OH

H H

H CH3

CH3

CH3

H

CH3

14 Beta-sitosterol 46,070 5,20

OH

15

Beta-amyrin

46,743 0,83 H

OH H

H

Page 24: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

22

Qua Bảng 3.8 và 3.9 ta thấy trong dịch chiết methanol từ cả

thân lá cây bòng bong nhật định danh được 12 cấu tử và 15 cấu tử từ

cả thân lá cây bòng bong dẻo.

3.3.2. Hoạt tính sinh học của các hợp chất trong các dịch

chiết từ cây bòng bong

Tác giả thấy rằng các chất định danh được trong các dịch chiết

của cả thân lá cây bòng bong nhật và bòng bong dẻo có hoạt tính chủ

yếu là chống ung thư, chống oxi hóa. Đặc biệt là sự có mặt của một

lượng lớn các chất squalene, phytol, β-sitosterol, vitamin E, n-

Hexadecanoic acid …là những chất có khả năng kháng khuẩn, kháng

oxy hóa, chống viêm loét… Điều này giúp lý giải phần nào cách sử

dụng bòng bong để điều trị chứng bệnh như sỏi niệu đạo, sỏi bàng

quang, sỏi mật, viêm thận, thủy thủng, vết thương do bỏng hoặc

thương tích chảy máu … trong Đông . Các chất còn lại thì được sử

dụng nhiều trong việc tạo hương liệu trong thực phẩm và trong mỹ

phẩm.

3.4. KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC

Các nghiên cứu hoạt tính sinh học dựa trên thành phần hóa

học cho thấy trong dịch chiết không có hoạt tính kháng khuẩn và oxy

hóa. Kết quả được nêu trong Bảng 3.10.

Bảng 3.10. Kết quả th ho t t nh th ho t t nh háng vi sinh

vật và n m i m định c a các dịch chiết

Vi sinh vật và nấm

kiểm định

Nồng độ ức chế 50% sự phát triển của vi

sinh vật và nấm kiểm định IC50 (µg/ml)

Dịch chiết

n-

hexane

Dichlo-

romethane

Ethyl

acetate methanol

Gram

(+)

Staphylococcus

aureus >128 >128 >128 >128

Bacillus subtilis >128 >128 >128 >128

Page 25: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

23

Vi sinh vật và nấm

kiểm định

Nồng độ ức chế 50% sự phát triển của vi

sinh vật và nấm kiểm định IC50 (µg/ml)

Dịch chiết

n-

hexane

Dichlo-

romethane

Ethyl

acetate methanol

Lactobaci-

llus fermentum >128 >128 >128 >128

Gram

(-)

Salmonell-

aenterica >128 >128 >128 >128

Escherichia coli >128 >128 >128 >128

Pseudom-

onas aeruginosa >128 >128 >128 >128

Nấm Candida albican >128 >128 >128 >128

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

KẾT LUẬN

Trong quá trình nghiên cứu, đề tài đã đạt được các kết quả

như sau:

1. Đã xác định được các chỉ số hóa lý

- Trong thân lá bòng bong Nhật: độ ẩm là 3,587 , hàm lượng

tro 2,899 và hàm lượng kim loại nặng Cd, s, Hg, Pb, Cu, n đều

nằm trong khoảng cho phép theo tiêu chuẩn ược liệu Việt Nam.

- Trong thân lá bòng bong Dẻo: độ ẩm là 3,449 , hàm lượng

tro 3,449 và hàm lượng kim loại nặng Cd, s, Hg, Pb, Cu, n đều

nằm trong khoảng cho phép theo tiêu chuẩn ược liệu Việt Nam.

2. Đã định danh được thành phần hóa học trong các dịch chiết

n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate và methanol của thân lá

bòng bong Nhật và thân lá bòng bong ẻo được thu hái tại Điện àn

bằng phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ cụ thể như sau:

- Trong thân lá bòng bong Nhật: đã xác định được 27 cấu tử

trong 4 dịch chiết. Trong đó, dịch chiết dichloromethane xác định

Page 26: NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN …tailieuso.udn.vn/bitstream/TTHL_125/6217/1/PhamThiLe.TT.pdf · DỊCH CHIẾT CỦA CÂY BÒNG ... nghiên cứu bòng bong

24

được ít cấu tử nhất 6 cấu tử, dịch chiết methanol xác định nhiều cấu

tử nhất 12 cấu tử. Trong các dịch chiết trên hầu như đều có mặt

phytol, squalene, gama-sitosterol với hàm lượng khác nhau. Các chất

này đều có hoạt tính sinh học rất lớn. Đặc biệt là khả năng kháng

khuẩn, chống ung thư .

- Trong thân lá bòng bong Dẻo: đã xác định được 22 cấu tử

trong 4 dịch chiết. Trong đó, dịch chiết ethyl acetate xác định nhiều

cấu tử nhất 16 cấu tử, dịch chiết n-hexane xác định được ít cấu tử

nhất 9 cấu tử. Trong các dịch chiết trên đều có mặt beta-sitosterol,

vitamin , squalene với hàm lượng tương đối lớn, dịch chiết n-

hexane có hàm lượng squalene cao nhất 21,90 . Chất này có khả

năng kháng khuẩn, chống oxi hóa, kháng u, chống ung thư, kháng

viêm rất cao. Ngoài ra, với một số chất đã được định danh cũng có

hoạt tính sinh học cao như n-Hexadecanoic acid, 9,12,15-

octadecatrienoic acid, (Z, Z, Z)-…

3. Đã thử hoạt tính sinh học của các cao chiết

- Cao chiết n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate và

methanol của thân lá bòng bong nhật không có khả năng ức chế đối

với các chủng vi sinh vật gram (-), gram (+) và nấm ở nồng độ IC50<

128 µg/ml.

KIẾN NGHỊ

- Tiếp tục phân lập xác định cấu trúc các hợp chất có trong các

dịch chiết và thử hoạt tính sinh học đặc biệt là khả năng kháng ung

thư của các hợp chất phân lập được nhằm góp phần làm tăng giá trị

sử dụng cũng như chữa bệnh của thân lá bòng bong nhật và bong

bong dẻo.

- Tiếp tục nghiên cứu các bộ phận khác của bòng bong nhật và

bòng bong dẻo như rễ, bào tử.