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天津中医药大学

中药药理学实验讲义 （供中药专业使用）

主编：王小莹 庄朋伟

主审：张密霞

天津中医药大学中药学院

药理教研室

2015 年 3 月

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目 录

第一章 中药药理实验基本知识 .................................................................................. 3

第二章 解表药常用实验方法 ...................................................................................... 8

实验一 麻黄配桂枝对大白鼠足跖汗液分泌的影响（着色法）...................... 12

第三章 清热药常用实验方法 .................................................................................... 15

实验二 柴胡注射液的解热作用 ............................................................................ 17

第四章 泻下药常用实验方法 .................................................................................... 19

实验三 生大黄、制大黄对小鼠小肠推进的影响............................................... 20

第五章 祛风湿药常用实验方法 ................................................................................ 22

实验四 秦艽的抗炎作用 ........................................................................................ 22

第六章 温里药常用实验方法 ........................................................................................ 25

实验五 附子及四逆汤对大鼠低血压状态的升压作用 .................................... 25

第七章 化痰止咳平喘药 .............................................................................................. 28

实验六 桔梗祛痰（桔梗酚红排泌） ................................................................... 29

第八章 止血药常用实验方法 ...................................................................................... 32

实验七 生三七粉对小白鼠凝血时间的影响（玻片法） ................................ 32

实验八 三七对小白鼠凝血时间的影响（毛细玻管法） ................................ 33

第九章 活血化瘀药常用实验方法 ............................................................................ 35

实验九 川芎对大鼠血液流变性的影响 ............................................................. 35

实验十 当归抗大鼠血栓形成的作用 ................................................................. 37

实验十一 丹参抗大鼠血小板聚集的作用 ......................................................... 39

第十章 补益药常用实验方法 .................................................................................... 41

实验十二 黄芪游泳................................................................................................. 42

实验十三 当归补血（失血性血虚） ................................................................... 44

第十一章 安神药常用实验方法 ................................................................................ 45

实验十四 酸枣仁自主活动 .................................................................................... 47

附录 实验动物给药量的计算 ........................................................................................ 49

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第一章 中药药理实验基本知识

一、中药药理实验报告基本要求

1. 实验前应仔细阅读实验讲义。结合实验内容，复习理论知识。科研实验还

应查阅有关文献资料，吸取他人经验。实验中应认真、仔细、耐心地观察所出现

的各种现象，实事求是记录，切忌夹杂主观因素。应坚持一丝不苟，严谨的科学

作风，决不允许抄袭别人的实验结果。

2. 教学实验往往每次是取一种动物，一种方法写实验报告。科研实验则应事

先设计好实验动物数，随机分组。新药研制还应设空白与已知药物对照组。科研

实验要说明的某一个作用，至少设 2～3 个以上剂量组，要两种以上的实验方法

等。

3. 实验条件应详细、明确，如仪器型号、试剂的浓度、中药的品种、复方的

组成、提取方法、浓度和剂量、给药途径、动物的来源、品种、体重、年龄、性

别、如何分组等都应写出。

4. 实验方法可简明扼要地叙述，但关键环节必须写清楚。科研报告还可以引

用文献上的方法，以节省文字。

5. 实验结果应根据实验获得的数据进行整理，对一个教学实验小组或全实验

室的数据进行整理、归纳、分析和对比，尽量总结出各种图表，进行统计学处理。

6. 讨论部分包括实验结果的分析、思考题的探讨、实验设计、实验方法及实

验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。讨论应注意结合中医药理论。

科研报告还可对比前人的实验进行分析，阐明从本实验获得的新发现或尚存在

问题。

7. 实验结束应及时地整理和总结实验结果，写出报告。实验报告内容应包括

实验名称、目的、原理、材料（包括仪器、药品、动物）、方法、结果、讨论及

结论。科研实验报告还应有前言，说明课题来源及本实验要解决的问题；报告后

应附有参考文献。

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二、中药药理实验样品注意事项

在进行单味中药或复方中药药理实验时，由于中药不同于西药，多数不是单

一化学成分，而是多种成分的综合作用或多种中药的综合作用。因此，在有效成

分不明确的情况下，制备药理实验用的中药样品，应注意多种因素的干扰，影响

实验结果。

1. 药材选择：中药品种、产地、采收季节、炮制加工、霉变虫蛀等多种因素

可以影响重要药理作用的实验结果，所以制备中药制剂应首先对中药样品经过鉴

定，选择合格中药材进行制备。如果是研究中药新药，受试药物应是处方固定，

生产工艺及质量稳定，与临床研究用药剂型相同，并应符合临床用药的质量标准。

2. 口服制剂：整体动物实验口服或十二指肠给药，对药材加工的中成药制剂，

如冲剂、浸膏、丸、丹、片剂等，可用蒸馏水或生理盐水配制成水溶液剂、混悬

剂，必要时可加入增溶剂和助悬剂。糖衣片可先剥除包衣再配制。含挥发油的药

材应先蒸馏取得挥发油，然后助溶或制成乳剂、混悬剂进行动物实验。若含有麝

香、牛黄之类不便提取加工的药材，可直接和水煎液配制成混悬液给药。

药效学研究

3. 离体实验和静脉注射：对于离体实验和注射给药的中药制剂，进行药效学

研究时，用不含赋形剂的提取物，应注意药物中的杂质、不溶物质、无机离子及

酸碱度对实验的干扰。如制剂中含钙离子进行心脏强心试验，含钾离子进行离体

心脏和平滑肌试验，含糅质进行局部止血试验和抗菌试验，含胆碱、腺苷、鞣质、

和无机离子静脉注射进行血压试验和血流动力学试验，获得阳性结果应持谨慎态

度，常常不能反映药物的真实作用，可能为假阳性结果。因此，最好经过提取和

处理。例如为防止阳离子干扰，提取物可通过阳离子树脂处理。必要时可提取有

效部位或有效单体进行试验。血管内注射如用乳剂实验，乳剂为油/水型分散相

粒子直径不能大于 4μm。油性注射剂，混悬剂则不可静脉给药。脑室和脊椎腔（椎

管）注射用注射剂必须以纯水为溶媒，不能加入任何助溶剂及抑菌剂。眼用混悬

剂药物微粒不能大于 50μm。一些药理实验为了除去供试药物中的鞣质、树脂、

淀粉及其它杂质，水提取物加入高浓度的乙醇进行沉淀处理，注意这样同时也除

去了多糖和蛋白质，如果进行免疫试验时，可能是该被试药物的有效成分。最好

是根据中药含有不同的有效成分，采用不同的提取方法和处理方法，制备药理试

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验样品。

4. 特殊成分处理：如果要研究某中药的多肽、蛋白质、酶、糖蛋白和其它不

稳定成分的药理作用，则需要在低温下制成被试药物或制成冻干剂。临用时加注

射用水或生理盐水进行实验。

三、中药药理实验制剂的浓度表示法

中药单味和复方制剂，一般以生药量浓度表示法。中药制剂名称在前，浓度

在后，通常以 g/mL 表示液体制剂，以 g/g 表示固体制剂。如生附子水煎液 0.125

g/mL 表示每毫升制剂中相当于生附子量为 0.125g，人生总皂苷 25mg/片表示每

片中含人参总皂苷 25mg。四逆汤水煎液 3g/mL（附子 9g、干姜 9g、甘草 12g，

煎成 10mL），表示每毫升制剂含有四逆汤总量的 3g。

对分子量已经明确的有效单体可用 mol/L 浓度表示。

四、常用实验动物的选择、捉持和给药方法

药理实验常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猫和犬，某些实验还可以

用青蛙、蟾蜍以及鸽、鸡、猴等。由于各种试验的观察目的和内容不同，对动物

的选择也有不同。下面介绍几种常用动物的选择、捉拿固定法和给药途径。

（一）小鼠

小鼠是药理实验常用的一种动物，常用于药物的筛选、LD50、ED50 的测定、

中枢神经系统药试验、抗炎免疫药试验、避孕药、抗肿瘤以及抗衰老药试验等。

常用体重 18～22g。

1．捉拿方法：

右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼）上面，轻向后拉其尾，用左手拇指和

食指捏住其头部皮肤及双耳，将小白鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以第四

指和小指夹住鼠尾。

2．给药途径：

（1）经口给药法：

口服（PO）：将受试药物放入饲料或溶于饮用水中，由动物自由提取的一

种方法。缺点是摄入剂量不够准确。

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灌胃（IG）：将小鼠固定后，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入

口腔，沿上腭插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再另插，以免穿破食道或误

入气管。灌注量为 0.1~0.3mL/10g 体重。

（2）皮下注射（SC）：常在背部皮下注射。一手固定动物，另一手注射，

注射量为 0.1~0.3mL/10g 体重。

（3）肌内注射（IM）：多注射于后肢股部肌肉，每侧不超过 0.1mL。

（4）腹腔注射（IP）：左手固定小鼠，右手持注射器，从下腹部外侧进针约

3~5mm，呈 450 角刺入腹腔，注射量 0.1~0.2mL/10g 体重。

（5）静脉注射（IV）：将小鼠至于固定筒内，使尾巴露在外面，用 70~75%

酒精棉球擦尾部，或将鼠尾浸入 45~50OC 温水中。待尾部左右侧静脉扩张后，

左手拉尾，右手进针。注射量不超过 0.5mL/只。

（二）大鼠

用途与小鼠相似，常用作抗关节炎药物试验、血压测定、利胆药实验等。常

用体重 150~200g。

1．捉拿方法：基本上同小鼠。将其放在粗糙物上，右手轻拉其尾，左手中

指和拇指放在大鼠左右前肢腋下，食指放入颈部，使大鼠伸开两前肢，便能将其

握住。

2．给药途径：灌胃、腹腔注射、皮下注射、静脉注射均同小鼠，给药量为

小鼠的 2~3 倍。

（三）豚鼠

豚鼠对组胺很敏感，研究平喘药和抗组胺药时常选用。常用体重 300~500g。

1.捉拿方法：豚鼠性温和，不咬人。捉拿是以拇指和中指从豚鼠背部伸入腋

下另一手放在臀部，托起即可。

2.给药途径：

（1）皮下、肌肉及腹腔注射。方法基本同小鼠，给药量分别为 0.5~1mL，

0.3~0.5mL、2~4mL。

（2）静脉注射：可选用后腿掌外侧的静脉或外颈静脉进行注射。采用前法，

可由一人抓持豚鼠并固定一条后腿，另一人剪去注射部位的毛，酒精棉球涂擦使

血管扩张。以小儿头皮针头刺入血管推注药物。注射量通常为 2~4mL。

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（四）家兔

家兔常用作观察药物对呼吸、心脏、血管、肠肌运动的影响，或用作解热药

试验及热源检查。雌兔常用作避孕药研究及观察药物对子宫的影响，以用于长期

毒性试验。常用体重为 1.5~2.5kg。

1.捉拿方法：一手抓住颈背部皮肤，轻轻将兔提起，另一手托其臀部，或将

其置于固定箱内。

2.给药途径：

（1）灌胃：二人合作。一人坐好，将兔夹于两腿之间，左手紧握双耳、固

定头部，右手抓住两前肢。另一人将开口器横放于兔口中，压在舌头上面，用一

8 号导尿管从开口器中央孔插入口内，再慢慢插入食道和胃。为避免误入气管，

可将胃管外口端放入清水中，如无气泡出现，即证明在胃内。然后灌入药液，给

药量通常为 10mL/kg。

（2）耳缘静脉注射：用酒精棉球涂擦兔耳或手指弹兔耳，使局部血管扩张。

以手指在耳根部压住静脉，然后注入药液。注射量为 2mL/kg。

（3）皮下、肌肉、腹腔注射方法与鼠类基本相同，最大给药量分别为 0.5mL，

1.0mL 和 5.0mL/kg。

（五）犬

犬常用于慢性实验，如高血压试验治疗、胃瘘、肠瘘，用于观察药物对冠

状血流的影响、利尿药实验以及长期毒性实验等。常用体重为 5~15kg。

1.捉拿方法：一人用长柄钳式捕狗夹夹住犬颈，另一人将犬嘴绑住。绑嘴方

法是将绳带从嘴下面绕上来，在鼻子上面打一结，再将绳带绕到最下面打一结，

然后将绳带拉到耳后颈部打结固定。

2.给药途径：

（1）腹腔注射：将犬夹住，用力将头、颈部压在地上。一人提起一侧后肢

并将药液注入腹腔。

（2）静脉注射：多从后肢外侧小隐静脉或前肢皮下头静脉注射。以手或橡

皮管把静脉向心端扎紧，使血管充盈，剪毛，酒精消毒，针向近心端刺入静脉。

回抽针栓，如见回血，表示针头在静脉内，即可推注药物。

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第二章 解表药常用实验方法

解表药是一类能发散表邪，解除表证，治疗外感性疾病为主要作用的单味中

药和复方的统称。根据外感六淫邪气和机体功能状态的不同，解表药有辛温解表、

辛凉解表、扶正解表之分，临床常用的单味中药有麻黄、桂枝、羌活、防风、白

芷、薄荷、银花、柴胡、桑叶等，常用复方有麻黄汤、桂枝汤、九味羌活汤、银

翘散、桑菊饮、升麻葛根汤、人参败毒散、参苏饮、加减葳蕤汤等。现代药理研

究结果证明，这类方药具有发汗、解热、抗炎、抗病原微生物、抗过敏、免疫调

节等作用，尚有镇痛、镇静、抗氧化、抗衰老、抗癌、降血糖、降血脂，保肝利

胆等作用。在研究解表药时，主要根据外感的主要症状（如汗出、发热、头痛、

咳嗽等）和外感六淫邪气（病原微生物）设计实验指标，具体到某一味中药或某

一个特定复方时，应紧密结合该药（处方）的功能主治设计其它研究指标。常用

的实验方法如下：

1. 发汗作用

发汗是中医临床治疗表证的重要手段之一，《内经》云：“其在皮者，汗而发

之”，指表证可通过发汗使外邪从汗而解。不少辛温解表方药能使汗腺兴奋，汗

腺活动增加，表现为汗液分泌增多。其发汗机理可能与抑制汗腺导管对钠离子的

重吸收或与兴奋外周 α-受体等有关。这种发汗作用有利于祛寒散热。

（1）目测法：小鼠是最常用实验动物。根据给药后机体发汗情况，按发汗

范围分五级目测打分。该法操作简单，对实验仪器无特殊要求，易于实行，但存

在着外界温度影响较大，主观性强，人为误差大等不足，可以作为药物发汗作用

的初筛研究。

（2）汗液着色法：大鼠、小鼠均可应用于实验。该法根据碘－淀粉接触汗

液呈蓝色的反应原理，根据显色反应后汗点（深紫色着色点）出现的时间、颜色

和数量判断药物的发汗强度，并可以粗略定量（汗点数）。该法操作简单易行，

但受环境因素影响大，在控制环境条件下，使用该法无疑是解表发汗方药初筛的

较好方法。

（3）汗液定量法：大鼠是最常用的实验动物。该法是利用硅胶吸湿力强的

特点，将大鼠双后肢足跖装入特制的集汗管内，按时用一定流量的干燥空气，将

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足跖部分泌的汗液吸入定量的干燥硅胶管内进行称重，比较给药前后干燥硅胶管

的重量变化；即可求出发汗量的多少，即：汗量（mg）=干燥管湿重—干燥管原

重。此法操作略为繁琐，需控制实验温度和湿度，但重复性好，具有较好的定量

作用，可以更加直观的反应药物发汗作用的强度。

（4）皮肤电生理技术法：该法的原理是在电流一致的条件下，汗腺分泌情

况可以间接的通过皮肤电压反射的潜伏期及电位振幅的改变来反映，尤其是皮肤

电反射可以作为观察汗腺分泌的一个灵敏指标。该法对实验仪器要求较高，但指

标反应灵敏，客观，是一种值得推广的研究方法。

（5）汗腺上皮组织形态学研究法：利用光镜和透射电镜技术观察汗腺上皮

细胞的细胞形态和超微结构变化，可以在皮肤表层无明显可见的汗液情况下，分

析汗腺细胞的分泌活动情况。尤其对发汗作用较弱的药物此法研究具有较大的优

势，但本法实验相对而言，对实验设备和经费要求较高。

（6）腋窝部皮肤汗腺导管内径测定法：根据发汗时皮肤汗腺导管就会扩张，

其扩张的程度与发汗量之间存在一定的正相关的机制，通过测定腋窝部皮肤汗腺

导管的内径可以反应药物的发汗作用和发汗强度。

2. 解热

发热是各型表证的常见症状，是由各种刺激因子影响机体产生内热源而引起

体温调节中枢调定点上移所致。解表方药中多数具有散热功效。实验和临床实践

证实，许多解表方药对异常升高的体温有明显的解热降温作用，显效快而维持时

间较短是其解热特点。解热机理较复杂，可能与抑制发热的多个环节，如内生性

致热源生成、释放、降低机体的产热过程有关。解热实验常用动物为大鼠、家兔，

实验时首先在正常的动物皮下或静脉注入一定量的致热源（如伤寒、副伤寒菌苗；

细菌培养液；内毒素；内生性致热源；啤酒酵母混悬液；松节油和二硝基苯酚等），

造成动物发热模型，然后给予试药物治疗，观察受试药物有无解热作用，解热强

度如何。大鼠发热模型主要用于药物解热作用的初筛，家兔模型发热反应典型而

稳定，药物解热作用强度和机理研究应选择家兔模型。一般研究中往往采用两种

发热模型相互验证，保证结果的科学性和可靠性。具体实验方法参考清热药。

3. 镇静、镇痛

头痛、身痛是表证的常见证候。解表药中出麻黄除中枢神经系统有明显的兴

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奋作用外，其余各药皆具有不同程度的镇静、镇痛作用，表现为自主活动减少，

延长催眠药的睡眠时间，有的还有抗惊厥作用，并能提高痛阈值。镇静作用常采

用活动计数法、延长睡眠时间法、抗惊厥法等，以观察药物对中枢神经系统的影

响；镇痛作用常利用动物的不同部位，进行热刺激、光电刺激、机械刺激和化学

刺激等方法引起疼痛反应，观察药物对痛觉的影响，了解药物有无镇痛效果，强

度如何，常用的研究方法有小鼠热板法、小鼠扭体法、大鼠尾尖部压痛法等。具

体实验方法参考安神药和祛风湿药。

4. 镇咳、祛痰、平喘

咳嗽是表证的常见症状，解表药大多数有镇咳祛痰的作用，有些药物还能扩

张支气管。镇咳作用常用的实验方法有浓氨水喷雾法、二氧化硫刺激法、电刺激

发等；化痰常用器官段酚红法、毛细玻管法、器官纤毛运动观察法等；平喘常用

喷雾致喘法、肺溢流法等，通过实验观察药物的镇咳、祛痰和平喘作用的有无与

强弱。具体实验方法参考止咳、化痰、平喘药。

5. 抗炎

呼吸道的炎症是引起咳、痰、喘症的重要原因，也是表证的基本临床表现。

不少解表方药能抑制炎症早期毛细血管的通透性，并能抑制肉芽形成。其抗炎机

理可能与兴奋垂体—肾上腺等有关。明显的抗炎效果有利于上呼吸道炎症的消

除。非特异性炎症可分为三个阶段（早、中、晚），各阶段都有多种实验方法，

如急性关节肿胀法、毛细管通适性测定法和白细胞游走实验法、棉球肉芽肿法以

及炎症介质测定法等；免疫性炎症模型有佐剂性关节炎、Ⅱ型胶原诱导的关节炎

及抗原性关节炎等模型。通过实验，观察药物对炎症各期的影响，了解药物的抗

炎强度、抗炎特点和抗炎机理或用以筛选炎症性疾病的有效药物和探讨作用机

理。具体实验方法参考祛风湿药。

6. 抗菌、抗病毒

表证是由外邪客表所致，细菌、毒素及病毒可视为外邪之一，解表方药对多

种细菌如金葡菌、溶血链球菌、痢疾杆菌等有抑制作用；此外对流感病毒、单纯

疱疹病毒等皆有较强的体内外抑制效果。

[1]抗菌研究方法：包括体外实验和体内实验（整体动物实验法）两种。

（1）体外实验：

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①连续稀释试验（二倍稀释法）。实验在试管内进行，用肉汤将中药制剂稀

释成各种浓度，然后在各管内接种等量的供试菌，置 37℃孵箱培养 18、24 小时，

观察各管内细菌生长情况，以判断该药的抑菌强度。本法是中药抗菌最常用的方

法，能较难确地测得药物抗菌力的大小；

②扩散实验（平皿法）。将供试菌先接种在琼脂表面，再挖小孔或放置铜圈，

并在孔内加入一定量的中药煎液，药液即向周围培养基扩散，置培养箱培养

18~24 小时，若有抗菌作用即在小孔周围形成抑菌圈，以抑菌圈直径的大小判断

药物抗菌力的强弱。具体方法较多：有平皿打孔法、泡沫海绵栓子法、管碟法、

贴纸片法、挖沟法、画线法等。本法操作简便，是常用的方法之一。此外，还有

挥发性物质的熏蒸试验法和氯化三苯四氮唑（TTC）快速试验法等测定药物的抗

菌效力。

（2）体内实验（实验治疗法）：本法是先在正常动物体内注入一定量的菌液

或毒素造成一定的感染模型，然后实验洽疗，观察药物抗感染的效果。

[2]抗病毒研究方法：病毒只在活细胞内繁殖，且只对一定的细胞有亲和力。

常用的方法有三种：组织培养法、鸡胚培养法和整体动物实验法。观察药物对体

外、体内病毒感染的影响。

7. 抗过敏

支气管哮喘是肺部过敏性疾病，不少解表方药能抑制过敏介质的释放，抑制

补体的活性和抗体的产生。常用的实验方法有肥大细胞脱颗粒实验、豚鼠过敏实

验、迟发性超敏反应等等。

8. 对免疫功能的影响

大部分解表方药对机体的非特异性免疫功能有促进作用。表现为天然杀伤细

胞（NK 细胞）活性升高，巨噬细胞或白细胞的吞噬功能加强。免疫功能的提高，

有利于机体抵御外邪的侵袭，“正气存内，邪不可干。”但对特异性免疫功能的影

响规律性不强，有些能促进细胞免疫和体液免疫；有的能抑制细胞免疫和抗体的

产生；还有些药物对免疫功能呈双向调节作用。本法以观察药物对免疫功能的影

响，阐明解表药作用的综合效应。具体实验方法参考补益药。

9. 其他

用电生理法（中枢放电）、生化测定法（cAMP、DNA、血糖、血脂等测定），

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了解解表药的作用机理；同时根据不同的药物功效和特点设计其它实验，如降血

糖、降血脂、保肝利胆等。

实验一 麻黄配桂枝对大白鼠足跖汗液分泌的影响（着色法）

【实验目的】

1. 学习用定性的方法观察辛温解表药对汗液分泌的影响。

2. 掌握麻黄、麻黄配桂枝发汗作用的异同。

【实验原理】

大鼠足跖部肉垫上有汗腺分布，可利用碘与淀粉遇汗液产生紫色反应的机

理，来观察和测定药物对大鼠汗液分泌的影响。

【实验材料】

实验对象：大鼠，体重 180～200g。

实验药品：麻黄水煎液（1g/mL）、麻桂水煎液（1g/mL）、毛果芸香碱溶液

（1mg/mL）、苦味酸液、蒸馏水、无水乙醇、和田－高垣氏液。

实验器材：大鼠固定器、大鼠灌胃器、固定架、医用胶布、注射器（2.5mL）、

放大镜、秒表、棉签、针头。

【实验方法】

1. 药液的制备：

麻桂水煎液：取麻黄 30g、桂枝 20g，常规制备，浓缩成 1g/mL 溶液。

麻黄水煎液：取麻黄 30～50g，常规制备，浓缩成 1g/mL 溶液。

和田—高垣氏液：A 液：取碘 2g 溶于 100mL 无水乙醇，振荡混匀即可。

B 液：取可溶性淀粉 50g，蓖麻油 100mL，两者混匀即成。

2. 取健康大鼠 12 只，称重，用苦味酸液标记，随机分为 4 组，每组 3 只。

3. 用棉签蘸无水乙醇擦干净大鼠足底部后，甲组大鼠灌服蒸馏水

（1mL/100g）、乙组大鼠腹腔注射毛果芸香碱溶液（3.5mg/100g）、丙组大鼠灌服

大黄水煎液（1mL/100g）、丁组大鼠灌服麻桂水煎液（1mL/100g），给药后分别

将大鼠固定于大鼠固定器中，暴露双下肢，并用医用胶布轻轻缚住，防治大鼠活

动时下肢回缩到固定器中。

4. 给药后 30min 棉签拭干大鼠足跖部原有汗液，然后在大鼠足跖部皮肤涂

上和田一高垣氏试剂 A 液，待干燥后，再薄薄涂上 B 液，然后用放大镜观察深

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紫色着色点（即汗点）出现时间、颜色和数量。待汗点出现后，连续观察 30min，

每 5 分钟观察记录一次。

【实验结果】 按下表形式记录

麻黄、麻黄配桂枝水煎液对大鼠足跖部汗液分泌的影响

组别 剂量（g/kg） 给药途径 汗点出现时间

(min) 给药后 1h 汗点数

甲组

乙组

丙组

丁组

【注意事项】

1. 固定大鼠时，操作应轻柔，尽量避免大鼠挣扎出汗而影响药效评价。

2. 为避免影响实验结果的准确性，观察大鼠足跖部汗点出现时间，在同一

批实验中务必一致。

3. 对于发汗作用不强的解表方药，可于第一次给药 1h后适量加强给药一次。

4. 实验室温度控制在 26±1℃左右，实验室湿度控制在 65±5%。

【其它几种发汗方法简介】

汗液测定主要有直接测定和间接测定。直接测定除着色法外，尚有目测法、

组织形态法、电生理法、汗液定量法、皮肤汗腺导管内径测定法几种；间接测定

法有唾液测定法、泪液测定法。目测法主观因素影响较多，可以作为药物是否有

发汗作用的初筛，着色法操作简单，不需特殊仪器，但对发汗作用较弱，如汗液

分泌不足者则不易鉴别；汗液定量测定法装置虽简单，但要求较高且影响因素较

多，不容易操作；组织形态观察法和皮肤汗腺导管内径测定法均是在显微镜下评

价，或观察汗腺细胞的形态变化，或测定汗腺导管内经，虽能较为客观而准确地

反映汗腺活动状态，但实验周期较长，成本较高，需要一些较为昂贵的仪器才能

完成；至于间接测定法可以作为发汗作用的一个测定方法，但不仅直接测定法直

观。具体试验中应根据研究的对象、目的等不同选用合适的实验方法。

【思考题】

1. 如何准确记录汗点出现数？

14

2. 麻黄发汗作用有何特点？

3. 麻黄配桂枝为何有协同发汗的作用？

15

第三章 清热药常用实验方法

清热药是指药性寒凉、以清泻里热为主要治疗作用的药物或方剂，临床常用

的清热药有黄芩、黄连、石膏、知母、玄参、丹皮、银花、连翘、板蓝根等，常

用的清热方剂有白虎汤、黄连解毒汤、清营汤、黄连解毒汤、茵陈蒿汤、当归六

黄汤等。现代药理研究证明，里热证主要是多种病原体感染所致的急性传染性、

感染性疾病，急性感染性疾病是清热药的主要适应症，这类药物多具有抗病原微

生物、抗毒素、解热、抗炎等作用，此外尚有免疫调节、抗肿瘤、降压、保肝等

作用。在研究清热药时，一般从抗病原微生物、解热、抗炎等方面设计实验指标，

并结合药物的具体功效和临床应用选择其他项目和指标进行实验。常用的实验方

法如下：

1. 抗病原微生物实验方法

急性感染性疾病是清热药的主要适应症，病原微生物是引起感染的病因，可

根据研究目的选用合适的病毒、细菌、真菌、螺旋体或原虫进行实验。用体外试

验（含细胞培养）观察药物的抗病原体作用的敏感谱及最低有效浓度，用感染动

物的保护作用试验观察药物的全身用药效果。

（1）抗菌试验

致病性细菌是引起急性感染的最主要病原微生物，应根据中药的临床功效选

择合适的细菌，但因中药对急性感染的治疗往往具有“广谱”的特点，因而在进

行清热药的抗菌试验时，宜选用较广泛的菌株进行体外抗菌试验，选用敏感菌株

进行感染动物的保护试验。

①体外抗菌试验：体外试验仅用于测定药物对细菌固有的敏感性，它以最小

量药物抑菌或杀菌浓度为终点，一般测定的是抑菌终点，而非杀菌终点。其优点

在于方法简便、用药量少、实验条件易于控制，实验周期短，药物可以定量。试

验条件应尽可能调整至类似体内的情况，使实验结果有参考价值。培养基应能使

被测细菌生长良好，培养温度和 pH 应符合生理情况。细菌必须生长新鲜丰盛，

细菌接种量必须定量标准化，培养时间应限制在 18 或 24 小时，为特殊目的可延

长培养时间，但必须所试样品在培养时间内不致变质。但体外实验也有一定的局

限性，易受多种因素的影响，尤其是中草药中杂质较多，一些非抗菌性成份（如

16

鞣质）可通过物理原因或非特异性抗菌原理抑制细菌生长，因此体外筛选阳性的

药物必须通过体内实验验证后方可肯定。

②体内抗菌实验：主要是观察药物与宿主相互作用，不仅可以反应药物对细

菌的固有直接作用，而且可以反应药物对机体反应性的影响，特别是非特异抗感

染力的影响、药物到达感染部位的能力、机体对药物的灭活与代谢等，实验结果

可以通过半数有效量、治疗指数等反应，是最重要的抗菌研究方法，是判定药物

有无临床价值的抗菌作用的最主要指标。

（2）抗病毒实验

抗病毒实验主要有细胞（组织）培养法、鸡胚培养法和整体动物实验法三

种。组织细胞培养法是观察药物对病毒感染组织细胞的代谢和病变的影响，主要

检测药物对病毒的直接作用，适应于大规模的筛选行研究；常用研究方法有抑制

病毒致细胞病变法、抑制病毒空斑形成试验法、血细胞吸附抑制试验法、荧光定

量 PCR 病毒定量法等等。鸡胚培养法主要观察药物对接种致死性病毒的鸡胚存

活率或延长寿命等指标的影响，从鸡胚死亡的程度或时间可以反应药物的抗病毒

活性；但因鸡胚细胞与哺乳动物细胞特别是人体细胞有一定的差异，现除药物初

选外已经较少应用。整体实验法较前两种方法相比与临床有较强的相关性，常通

过观察感染动物的致死量病毒来评价药物对病变的抑制率及死亡保护率等来反

应药物的抗病毒效果。

抗其它病原体如真菌、支原体、钩端螺旋体、阿米巴原虫等基本同抗细菌和

抗病毒实验。

（3）抗内毒素试验

抗内毒素研究可于体外、半体内及体内进行，可根据研究目的而选择，但常

需相互结合以说明问题。中药抗内毒素作用研究最常用方法是体外鲎试验、半体

内中和内毒素试验及动物保护试验相结合，体外鲎试验试验操作简单、可用定性

或定量 试剂进行，适应于大批样品初筛研究；半体外内试验是将药物与内毒素

体外孵育一段时间后再注射到小鼠、家兔或鸡胚以检测内毒素毒性的变化。上述

两种试验都可以测定药物的最低抗度浓度，研究药物对内毒素的直接解毒效果。

体内试验是观察药物对内毒素休克所致死亡的影响，是检测抗内毒素作用最终效

果的可靠方法。

17

2. 解热研究方法

解热作用是清热药的一个最重要的共性。发热是各种刺激因子影响机体产生

内热原所引起中枢体温调定点上移所致，故解热实验常用生物刺激因子（如伤寒、

副伤寒菌苗、细菌培养液、啤酒酵母混悬液等）或化学刺激因子（松节油、2，4

－二硝基苯酚、蛋白胨等），采用皮下或静脉注射给予，引起动物（常用家兔、

大鼠）机体发热，然后给予受试药物，观察有无退热作用。具体研究中应根据研

究目的和条件选择致热方法。解热作用研究首推内毒素所致家兔的发热反应；机

理分析或特殊研究目的，还可选用内生致热原生成及发热试验、微量 PGE 脑室

内或下丘脑注射致热试验、Lipid A、IL-1、干扰素及 TNF 性发热试验等等。

3. 抗炎试验

清热药主要对中、早期炎症有较好的疗效，部分药物对免疫性炎症有一定的

治疗作用。炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进、渗出和水肿；中期

主要是白细胞向炎灶聚集和血小板聚集；常用毛细血管通透性测定、鼠耳肿胀法、

大鼠足肿胀法、胸膜炎试验及大鼠气囊滑膜炎等炎症模型，观察清热药物的抗炎

作用。也可根据临床治疗疾病的不同选用其它炎症模型，如小鼠流感病毒性肺炎、

大鼠大肠杆菌性腹膜炎、家兔肺炎球菌性角膜炎等。免疫性炎症可选用小鼠迟发

行超敏反应、小鼠耳接触性皮炎、大鼠佐剂性关节炎、大鼠 PCA 试验等等。

实验二 柴胡注射液的解热作用

【实验目的】

1．观察柴胡的解热作用。

2．掌握内毒素大鼠发热模型的实验方法。

【实验原理】

柴胡具有非常明显的解热作用，对多种原因引起的动物实验性发热均有明显

的解热作用，并且可使正常动物体温降低；柴胡总皂苷具有明显的抗内毒素活性。

【实验器材】

天平、鼠笼、注射器、体温计等。

【实验药品】

18

柴胡注射液、生理盐水、内毒素。

【实验动物】

大鼠

【实验方法】

1. 脂多糖（LPS）诱导大鼠实验性发热模型的建立：将大鼠分为柴胡注射液

组和生理盐水组，每组 2 只，实验前 10h 禁食不禁水。实验当日在电子体温计探

头上涂凡士林，插入大鼠直肠 3cm（确保每次插入深度一致），待读数稳定以后

记录大鼠体温，取 3 次平均值作为基础体温。然后各组大鼠腹腔注射内毒素 100

μg/kg 以建立大鼠发热模型。

2. 检测柴胡注射液对脂多糖诱导大鼠实验性发热模型体温的影响：柴胡注射

液液组腹腔注射柴胡注射液 5mL/kg，生理盐水组腹腔注射等量生理盐水。分别

于给药后 0.5h、1h、1.5h、2h 后，如前法测量大鼠体温，将实验结果填入下表

中，检测胡注射液对脂多糖诱导大鼠实验性发热模型体温的影响。

【实验结果】将原始数据填入下表

柴胡注射液对脂多糖诱导大鼠实验性发热模型体温的影响

组别 剂量 给药前体温（℃） 给药后体温（℃）

0.5h 1h 1.5h 2h

生理盐水

柴胡注射液

【注意事项】

每次测量体温时，电子体温计插入大鼠直肠的深度保持一致。

【思考题】

1. 柴胡解热的作用及机制是什么？

2. 内毒素致大鼠发热的机制是什么？

19

第四章 泻下药常用实验方法

凡能引起腹泻或滑利大肠，促进排便的药物称泻下药，根据其作用和应用范

围的不同，可分为泻下药、攻下药和峻下逐水药三类。现代医学按泻下作用机理，

将它们分为刺激性泻药、容积性泻药（机械刺激性泻药）和滑润性泻药。泻下药

主要研究药物的功效和导泻机理（作用方式）以及致泻作用成份，同时也应研究

其毒性反应。实验动物，多采用小鼠，大鼠，亦可采用家兔或豚鼠。泻下药研究

方法主要有以下几方面，可根据需要选用。泻下药主要药理作用为泻下、利尿、

抗感染等。其研究方法主要有以下几方面：

（一）肠管运动在体实验法

1. 炭末排出时间测定法和排便频度实验

观察泻下药对动物排便活动的影响。实验动物：多用小动物（尤其以小鼠为

常用）。指示剂：炭末或墨汁。用含有指示剂的泻下药给动物灌服，观察泻下药

起效时间（即排出含指示剂粪便的时间），粪便性状，排便数量，并与对照组相

互比较，判断泻下药的药效。

2. 肠推进运动实验

以色素为标志，用含有色素（炭末或墨汁）的泻下药给动物灌服或结肠给药，

观察色素在肠道推进的距离，反映泻下药对肠道运动的影响判断其对小肠和大肠

的作用。常用方法有：小肠推进实验、大肠推进实验和酚红排空定量测定实验。

3. 在体肠道平滑肌实验记录整体动物不同部位肠管运动情况，观察泻下药

对其运动的影响。通常有肠管悬吊法、肠内压测定法、压敏传感器贴壁法和肠生

物电测定法。

（二）肠管运动离体实验法（离体肠管法）

记录肠平滑肌活动情况，观察泻下药对肠肌的作用。实验常采用豚鼠、大

鼠、家兔的离体肠管作材料，其中，十二指肠兴奋性、自律性较高，对药物反应

比较敏感；回肠（特别是豚鼠回肠）自发活动少，易获得稳定的基线。

此外，泻下方药攻里通下，在临床上有多方面应用，特别对于急腹症的治疗，

如急性肠梗阻、急性梗阻性胆管炎、急性阑尾炎、急性胰腺炎等，只要用药得当，

每获疗效。提示攻下方药不仅可明显增强肠蠕动，还可以改善肠缺血、抗病原微

20

生物、抗炎解热等，可进一步加强其机理研究，更好地应用于临床治疗。

实验三 生大黄、制大黄对小鼠小肠推进的影响

【实验目的】

1．了解生大黄、制大黄对小肠蠕动的影响。

2．掌握整体动物肠运动的实验方法。

【实验原理】

利用碳素墨水作为指示剂，观察印度墨水在肠道的推进距离。口服生大黄可

促进肠蠕动，发挥泻下作用。煎煮方法对可影响大黄的泻下作用，经炮制和久煎

后作用减弱。

【实验器材】

天平、鼠笼、手术器材、长尺、注射器、托盘等。

【实验药品】

100%生大黄水煎液（煎煮 12 分钟）、100%制大黄水煎（煎煮 12 分钟）、

0.9%NaCl（生理盐水），以上药液均含 10%碳素墨水（V/V）。

【实验动物】

小鼠。

【实验方法】

1．取禁食不禁水 24h，体重相近的小鼠 6 只，称重、编号、随机分为生大

黄组、制大黄组、生理盐水组，2 只/组。

2．给药：各组小鼠分别灌胃上述三种含碳素墨水的药液，0.3mL/10g（体重）。

给药 10min 后立即脱臼处死小鼠，打开腹腔，分离肠系膜，剪取上端至幽门，下

端至回盲部的肠管，置托盘上，将小肠拉直，测量幽门至回盲部的长度作为“小

肠长度”，幽门至碳末前沿的距离作为“碳末推进距离”。计算碳末推进百分率，

比较各组结果。碳末推进百分率（%）=（碳末推进距离/小肠长度）×100%

【实验结果】 将原始数据填入下表。

生大黄、制大黄对小鼠肠运动的影响（ ）

组别 剂量 小肠总长度 碳末推进距离 碳末推进率

21

生理盐水

生大黄

制大黄

【注意事项】

1．给药至处死动物的时间必须准确。

2．剪取肠管及将其置托盘上拉直时动作要轻，避免过度牵拉。

【思考题】

生大黄、制大黄泻下作用有何不同，其差异产生的机制是什么？

22

第五章 祛风湿药常用实验方法

祛风湿药是一类能祛除风湿、解除痹痛的药物。传统常用的祛风湿药有秦艽、

清风藤、汉防己、独活、五加皮、木瓜、雷公藤等以及它们所组成的各种复方。

现代药理学研究结果证明，这类药物多具有抗炎、镇痛、免疫调节作用，尚有镇

静、降压、抗过敏及抗菌等作用。在研究祛风湿药时，一般从抗炎、镇痛、免疫

调节、抗过敏等方面设计实验指标，并结合药物的具体功效和临床应用选择其他

项目和指标进行实验。常用的实验方法如下：

1．非特异性炎症模型 包括急性和亚急性时相的实验和增殖时相的实验。

（1）急性和亚急性时相实验：常用毛细血管通透性测定、鼠耳肿胀法、大

鼠足肿胀法、胸膜炎试验及大鼠气囊滑膜炎等炎症模型，观察药物对炎症反应中

血管通透性增高、炎性渗出、肿胀、白细胞游走聚集的作用。

（2）增殖相的实验：常用大鼠巴豆油气囊法、小鼠或大鼠棉球、海绵植入

法、玻璃棒肉芽肿、纸片法等，观察药物对炎症反应后期组织变性和纤维化的作

用。

2．免疫性炎症模型 常采用大鼠佐剂性关节炎、Ⅱ型胶原诱导的关节炎及

抗原性关节炎等模型，此类模型类似人类的类风湿性关节炎，用以筛选该类疾病

的有效药物。

3．镇痛实验：常选用小鼠热板法、小鼠扭体法、大鼠尾尖部压痛法等，观

察药物的镇痛作用。

4．免疫实验：常选用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、小鼠淋巴细胞增殖、小

鼠血清溶血素抗体测定及二硝基氯苯所致小鼠迟发性皮肤过敏反应等实验，观察

药物对非特异性免疫功能以及特异性免疫功能的作用。

5．其他：可根据祛风湿药的具体功效和应用的特点，安排其他相关实验，

如镇静、降压、抗过敏、抗菌等。

实验四 秦艽的抗炎作用

【实验目的】

1．观察秦艽煎剂的抗炎作用。

23

2．掌握二甲苯耳肿胀的实验方法。

【实验原理】

秦艽具有抗炎作用，其有效成分秦艽碱甲能通过兴奋下丘脑、垂体，使 ACTH

分泌增多，从而增强肾上腺皮质功能发挥抗炎作用。

【实验器材】

天平、鼠笼、打孔器、注射器等。

【实验药品】

秦艽水煎液、生理盐水、阿司匹林、二甲苯。

【实验动物】

小鼠。

【实验方法】

1. 100%秦艽水煎液制备方法：取秦艽 200g，加水浸泡 30min，煮沸后改文

火煎煮约 30min，倒出煎液，加水继续煎煮，合并两次煎液，滤过，浓缩至生药

1g/mL，置 4℃保存备用。阿司匹林，用生理盐水配成 2g/mL。

2. 秦艽水煎液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响：秦艽水煎液组、阿司匹林组

每日以生药 30g/kg（0.3mL/10g 体重）、0.15g/kg（0.3mL/10g 体重） 剂量灌胃给

药 1 次，空白对照组灌胃给予同等容积的生理盐水。连续灌胃给药 3d，末次给

药 30min 后，各组小鼠于右耳正反两面均匀涂抹二甲苯 50μL 致炎，1h 后脱颈

椎处死动物，用直径 9mm 打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片，于分析天平

上称重，计算耳廓肿胀度(耳廓肿胀度=右耳片重－左耳片重)，并计算耳廓肿胀

率，耳廓肿胀率=（右耳片重－左耳片重）/左耳片重×100%，将实验结果填入下

表中。

【实验结果】将原始数据填入下表

秦艽对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响

组别 剂量 耳廓肿胀度（mg） 耳廓肿胀率（%）

生理盐水

秦艽

【注意事项】

1. 二甲苯涂抹均匀，涂完后取耳片时间准确。

24

2. 耳片取完后立即称重，不要放置时间过长，否则会影响耳片重量。

【思考题】

秦艽抗炎作用的机理及主要成分是什么？

25

第六章 温里药常用实验方法

凡能温里助阳、散寒通脉，治疗里寒证为主要功能主治的药物称为温里药。

本类药物药性温热，多具辛味。温里药能温中祛寒，具有健运脾胃、散寒止痛的

功效；有的药物兼有助阳、回阳的功效。传统常用的温里药有附子、干姜、肉桂、

吴茱萸、丁香、花椒、荜茇等药物，常用的复方有四逆汤、黄芪健中汤、吴茱萸

汤等。现代药理学研究表明，温里药常作用于心血管系统、消化系统、血液系统

和神经系统，此外，这一类药物还具有抗炎、抗菌、局麻等作用。根据温里药的

作用特点及临床应用，实验时宜制作“里寒” 、“心阳衰微”及“亡阳证”等动

物病理模型以验证温里药的温里散寒、回阳救逆的作用，一般从温里药对心脏、

血流动力学、消化道平滑肌等方面的影响设计实验指标。常用的实验方法有：

1. 对心脏的作用：可用离体和在体动物的心脏。

（1）离体心脏：蛙心可用斯氏（Straub）法或八木氏法灌流，家兔、大白

鼠和豚鼠心脏则用 Langendorff 法灌流，以观察温里药对心肌收缩、心输出量、

冠脉流量及心率的影响。另外，可用豚鼠、兔、猫的乳头肌及兔、大白鼠和豚鼠

的心房来观察温里药对心肌的兴奋性、收缩性、不应期及自律性的影响。

（2）在体心脏：用蛙、兔、狗、猫的在体心脏，以心肌杠杆描记法或位移

换能器描记于记录仪上，同时记录血压和心电图，观察温里药对在体心脏和冠脉

流量的影响。用兔冠状动脉条可观察温里药对冠状动脉的作用。

2.对循环系统的影响：可观察温里药对大白鼠、兔、狗、猫等动物正常血压

和低血压状态的影响，以及对失血性休克、感染性休克、心源性休克的治疗作用。

观察温里药对血管的作用，可用狗肢体灌流法或兔耳灌流法以及大白鼠后肢

灌流法等。

实验五 附子及四逆汤对大鼠低血压状态的升压作用

【实验目的】

观察附子及四逆汤对大鼠低血压状态的影响。

【实验原理】

四逆汤为回阳救逆之代表方，主治四肢厥冷、脉微欲绝等亡阳厥逆证。本实

26

验以麻醉大鼠的低血压状态为模型，观察四逆汤的强心升压作用。

【实验材料】

实验对象: SD 大鼠，雌雄各半，250－300g。

实验药品：生理盐水、肝素钠 50mg/mL、乌拉坦 0.25g/mL、附片水煎液 2g/mL，

四逆汤水煎液 2g/mL。

实验器材：手术剪、眼科镊、止血钳、聚乙烯管（内径 1mm），玻璃气管插

管、二道生理记录仪。

【实验方法】

取大鼠，乌拉坦 100mg/100g 腹腔注射麻醉背位固定，做气管分离，气管插

管，分离一侧颈总动脉，插入动脉导管，以三通活塞连接二道生理记录仪上的压

力传感器。一侧股动脉插入一根 PE50 聚乙烯管用于放血，另一侧股静脉插管用

于注入 0.5mg/100g 肝素以防血凝并用于输血。给药前后作肢体Ⅱ导联心电图描

记。腹部手术，在幽门下找出十二指肠，插入聚乙烯管于肠管中并固定之，供给

药物。描记正常颈动脉血压曲线后，股动脉放血，使颈动脉血压持续稳定在

6.67kPa30min 左右，肠道给药 5g/100g，观察血压的变化。

【实验结果】 实验结果按下表进行记录。

附子、四逆汤对大鼠低血压状态的作用

组别 剂量 动脉收缩压

kPa（mmHg）

脉压差

kPa（mmHg）

心 率

（次/min）

附子

给药前

给药后

给药前后差

四逆汤

给药前

给药后

给药前后差

【注意事项】

（1）大鼠在实验前需禁食 24h，以免食物影响药物的吸收。

（2）大鼠不宜过小，至少在 250g 左右。

（3）股动脉放血不宜过快，如血压低于 6.67kPa，可由股静脉缓慢输回少量

27

血液，如血压降至 6.67kPa，由于自身调节作用，可能会回升，此时，由股动脉

放出少量血液，使血压持续稳定在 6.67kPa 左右。

（4）血压不宜放得过低，否则易引起失血性休克并死亡。

【思考题】

结合本实验结果，结合附子、四逆汤的研究文献来分析其回阳救逆的功效。

28

第七章 化痰止咳平喘药

化痰止咳平喘药是能祛痰、缓解或控制咳嗽、喘息的药物，如半夏、桔梗、

川贝母、苦杏仁、款冬花、紫菀、前胡、天南星、远志、麻黄及小青龙汤、百合

固金汤、川贝枇杷露等复方。现代药理学研究结果表明，这类药物具有平喘、祛

痰、止咳以及抗炎、镇静、镇痛等功效。在研究方法上，一般从平喘、祛痰、止

咳三个主要的方面设计实验指标，并结合药物的功能主治选择其他必要的方法和

指标进行实验。

常用的实验方法如下：

1. 平喘实验方法：至少要包括对气管平滑肌松弛作用的方法和抗过敏作用

的方法，另外，还可再分为整体实验、在体实验和离体实验三类。

（1）整体哮喘模型：多选用豚鼠和大鼠，又可分为喷雾致喘法和卵蛋白引

喘法。前者用恒压喷雾组胺和乙酰胆碱等致喘剂，引起动物出现“哮喘反应”，

通过观察引起“哮喘反应”的潜伏期来判断药物的平喘作用。后者动物以卵蛋白、

灭活百日咳杆菌疫苗和氢氧化铝干粉致敏，2 星期后再次喷雾卵蛋白作抗原攻击

致敏动物，引起“哮喘反应”。

（2）肺在体溢流法：常用豚鼠进行实验，通过人工呼吸机给豚鼠输送一定

量的空气，超过肺容量的空气将溢入另一装置，该装置可直接读出溢流的体积数，

该法可间接反映豚鼠支气管平滑肌的舒缩状态。

（3）离体气管哮喘模型：包括气管容积法、豚鼠气管片法、气管螺旋条法

和豚鼠肺条法。先制成离体气管段、气管片、气管螺旋条和肺条，放入恒温盛有

营养液的浴漕中，通过张力换能器，将致痉剂或受试药物对气管张力的作用变化

转变为电信号，通过计算机系统中的有关分析软件显示为舒缩曲线，进而分析药

物的作用。

2. 祛痰实验方法：药物祛痰作用大多为增强呼吸道腺体的分泌，使痰液变

稀，或裂解痰液中的粘液成分，使痰液的粘性下降，或增强粘膜上皮细胞的纤毛

运动，使痰液易于排出。

常用的实验方法有：

（1）酚红气管排泄法：利用酚红至小鼠或家兔腹腔注射后可从气管排泄的特

29

点，测定气管酚红的排泄量，以判断受试药物对气管分泌液量的影响。

（2）毛细玻管排痰量法：常用麻醉大鼠。利用插入气管的玻璃毛细管吸取其

中的痰液，以毛细管中痰液柱的长度来评价受试药物的效果。

（3）气管纤毛粘液流动速度测定法：常用家鸽、家兔，以墨汁为标记物（也

可用染料、炭粉、软木粒等），观察一定时间内墨汁在气管粘膜表面运动距离的

长短，进而判断受试药物的排痰效果。

3. 止咳实验方法：咳嗽反射是由感受器、传入神经、咳嗽中枢、传出神经四

个环节组成，从咳嗽反射弧来看，目前采用的诱发咳嗽的方法主要是刺激感受器

和传入神经。

常用的实验方法有：

（1）化学刺激法：将不麻醉动物置于恒定容积的密闭容器内，恒压喷入定

量的刺激药物（氨水、硫酸、枸橼酸或二氧化硫等）诱发咳嗽。

（2）电刺激法：用一定强度和频率的电流刺激动物（猫或豚鼠）的喉上神

经，或动物（豚鼠或狗）的气管粘膜，均可引起咳嗽。

（3）机械刺激法：通过猫、豚鼠等动物的气管插管，用猪毛、羽毛之类插

入气管，并上下抽动，引发咳嗽。

实验六 桔梗祛痰（桔梗酚红排泌）

【实验目的】

学习酚红从呼吸道排泄的实验方法；利用小鼠腹腔注射酚红的方法观察桔梗

的祛痰作用。

【实验原理】

酚红指示剂自小鼠腹腔注射并吸收后，可部分地由支气管粘液腺分泌入气

道，祛痰作用的药物在使支气管分泌液增加的同时，其由呼吸道粘膜排出的酚红

也随之增加。因而可从药物对气管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰作用。酚红

在碱性溶液中呈红色，将从道中洗出的液体，用比色法（分光光度计）测出酚红

的排泌量。从而观察药物的祛痰作用。

【实验材料】

实验对象：小白鼠，20±2g；

30

实验药品：受试药、0.5%酚红溶液、5%NaHCO3、生理盐水。

实验器材：分光光度计、电子秤，离心机、注射器、外科剪刀、眼科镊子、

小试管、试管架等。

【实验步骤】

1. 每组取小鼠 6 只，随机分成两组，禁食不禁水 8～12h，给予受试药物，

对照组给予同等剂量的 NS，45min 后给予 0.5%酚红 0.5mL，15min 后用脱颈椎

处死，分离气管。

2. 用 1mL 注射器吸取 0.5mLNaHCO3，推注入气管内，反复连续推抽 3 次

灌洗呼吸道，洗出液收集在试管中，按上述方法重复 3 次。

3. 洗出液沉淀并离心，用分光光度计（波长 546nm）测 OD 值，计算祛痰

指数，与对照组比较，进行统计学处理。

【注意事项】

1. 注射酚红后随着时间的延长，酚红的量会有明显变化，应严格把控时间。

2. 注意在冲洗气管过程中操作轻柔，避免损伤气管。

【实验结果】根据实验结果，对各药物进行分析，实验结果以三线表的形式呈现

例表如下：

桔梗祛痰作用研究

药物编号 给药量 冲洗液体积 吸光度值 祛痰指数

对照组

桔梗组

【注意事项】

1. 祛痰指数（%）=给药浓度/对照组浓度×100%

2. 一般采用三线格，表内只有横线无竖线，最上和最下的线用粗线而二者

之间的线用细线。

3. 表中数据如采用定性描述应注意描述语言相一致，不要对同一指标的相

同趋势变化使用不同的描述词语。如采用定量描述应注意数据的有效数字保持一

致，一般保留到小数点后 2 位。

4. 如采用 T 检验等统计检验的方法对数据进行显著性差异检验，在对应的

数据应添加标注*，并在表下方加注*所代表的含义。

31

【思考题】

1. 根据实验原理与结果讨论酚红排泌法考察祛痰作用的局限性。

2. 根据实验结果分析桔梗的临床应用。

3. 根据实验结果与现象分析桔梗祛痰的作用机制

32

第八章 止血药常用实验方法

实验七 生三七粉对小白鼠凝血时间的影响（玻片法）

【实验目的】

学习用玻片法测定小鼠凝血时间；观察生三七对小鼠凝血时间的影响。

【实验原理】

三七属止血药，有明显止血功效，常用于治疗咯血、衄血、崩漏、尿血等症。

【实验器材】

注射器、载玻片、大头针、秒表、眼科弯镊、棉花、鼠笼、天平。

【实验药品】

生三七水浸液 0.15g/mL、生理盐水、苦味酸溶液。

【实验动物】

小白鼠。

【实验方法】

取小鼠 6～8 只，随机分为 2 组，给药组灌胃三七水浸液 0.3mL/10g，对照

组灌胃生理盐水 0.3mL/10g。30min 后，用眼科弯镊迅速摘去一侧眼球，即有血

液流出。于载玻片的两端各滴一滴血，血滴直径约 5mm，立即用秒表计时。每

隔 30s 用清洁大头针自血滴边缘向里轻轻拨动一次，并观察有无血丝挑起。从采

血开始至挑起血丝止，所历时间即凝血时间。另一滴血供最后复验。记录凝血时

间。

【实验结果】按表记录数据。

生三七对小鼠凝血时间的影响

组别 剂量（mL/10g） 凝血时间（s）（ X ±SD）

给药组

对照组

【注意事项】

（1）凝血时间可受室温等因素影响，室温 15℃左右较好。

（2）每次挑血滴时，不应从各个方向多次挑动，以免影响纤维蛋白的形成。

【思考题】

33

（1）三七有何功效？止血用的主要方剂有哪些？

（2）三七止血的主要成分是什么？

实验八 三七对小白鼠凝血时间的影响（毛细玻管法）

【实验目的】

学习用毛细玻管测定凝血时间的办法；观察三七缩短凝血时间的作用。

【实验原理】

三七是祛瘀、定痛、止血药，能诱致血小板释放止血和凝血活性物质，增高

血液中凝血酶含量，从而缩短小鼠的正常凝血时间，达到止血之效。采用小鼠给

药后一定时间，取其血液在玻璃毛细管内折断时出现血凝丝所历时间为指标，即

可判明三七缩短凝血时间的作用。

【实验器材】

1mL 注射器、毛细玻管（内径 1mm、长 10cm）、灌胃针头、天平、秒表。

【实验药品】

生理盐水、三七水浸液 0.1g/mL、苦味酸。

【实验动物】

小白鼠。

【实验方法】

取小鼠 6 只，随机分为 2 组。2 组均按 0.2 mL/10g 剂量灌胃，分别给予生理

盐水、三七水浸液。2h 后用玻璃毛细管插入小鼠内眥球后静脉丛，深约 4～5mm。

自血液流进管内开始计时。血液注满后取出毛细管平放于桌上。每隔 30s，折断

两端毛细管约 0.5cm，并缓慢向左右拉开，观察折断处是否有血凝丝至血凝丝出

现为止，所历时间即为血凝时间。毛细管两端数据的平均值，即为该鼠的血凝时

间。计算凝血时间缩短百分率。

凝血时间缩短百分率=（对照组血凝时间－给药组血凝时间）/对照组凝血时

间×100%

【实验结果】 按表填写数据。

三七对小鼠凝血时间的影响（ X ±SD）

组别 剂量（mg/10g） 动物数 给药 2h 后 凝血时间缩短

34

凝血时间 百分率（%）

对照组

给药组

【注意事项】

（1）实验时室温最好在 15℃左右。

（2）测试用的毛细管内径应均匀一致。

（3）毛细玻管采血后不宜长时间拿在手中，以免影响凝血时间。

【思考题】

三七对凝血时间有何影响？此作用临床意义何在？

35

第九章 活血化瘀药常用实验方法

实验九 川芎对大鼠血液流变性的影响

【实验目的】

1. 学习测量血液流变性的实验方法；

2. 观察川芎的对急性“血瘀”证大鼠的防治作用，并分析其作用机制。

【实验原理】

中医理论认为“大怒致瘀”，“外寒也可致瘀”。给大白鼠注射大剂量肾上腺

素，模拟暴怒时机体状态，随之以冰水浸泡动物，模拟外寒侵袭。两种因素的综

合作用可复制出大白鼠血液流变性呈粘、浓、凝状态的急性“血瘀”证模型。

川芎活血行气通经，对血液粘、浓、凝状态有明显改善。可抑制血小板聚集,

有抗凝血作用，可改善血液流变性。

【实验材料】

动物：大鼠，雌雄各半，体重 250g 左右；

药品：15%川芎水煎液、0.5%阿司匹林混悬液、0.1g/dL 肾上腺素、生理盐

水、肝素钠、蒸馏水；

试剂：苦味酸溶液；

主要器材：全自动血液粘度测试仪（YDA-IV 型，北京宏润达科技发展有限

公司）、5mL 注射器、20mL 烧杯、小水桶及人造冰、红细胞压积管、试管、离

心机、大鼠灌胃器、天平、鼠笼。

【实验方法】

每组取大鼠 4 只，称重，标记，随机分为两组（甲、乙组）。甲组给予 15%

川芎水煎液，灌胃量为 2mL/100g，每日 1 次，连续 7 日，乙组给予同容积的生

理盐水。于第 7 天皮下注射肾上腺素 0.08mg/100g，2h 后将大鼠用冰水刺激

5min，过 2h 再次皮下注射肾上腺素 0.08mg/100g。处置后禁食不饮水，次晨取血

检测。

实验时，将动物用乙醚麻醉后，剖腹。腹主动脉取血 2mL 以上用于测定。

将血液全部注入肝素抗凝管充分抗凝。取其中 1mL 用穿刺针加入血沉管静置 1h，

再上离心机 4000 r/min，离心 20 min，从右边，自下而上读出压积值。启动仪器，

选择全血或血浆（3000 r/min ，离心 10min），取 0.8mL 加入切血槽，进行测定。

36

全自动血液粘度测试仪检测的相关指标有全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、

红细胞压积、纤维蛋白原、红细胞聚集指数等。

【实验结果】

统计全班各组实验结果，比较用药后对大鼠血液流变性的相关参数的影响。

药物对大鼠血液流变性的影响（ x ±s；n= ）

【注意事项】

1. 在进行全血粘度的测量时，注意有高切、中切和低切三种切变率；

2. 抗凝血样一般在室温下存放，不要存放于冰箱内，采血后，应在 4h 内完

成测量工作；

3. 将血样注入粘度仪前，使血样充分混匀，并使血样沿壁缓缓流入，不宜

出现气泡。

4. 全部做完后，必须清洗污水瓶，装回时瓶盖一定要拧紧，否则废液抽不

出来。

【思考题】

被试药物改善血液流变学的作用机制？

【附注】

1、肝素抗凝管的配置：取肝素钠一支（2mL，12500u）与 8mL 蒸馏水混匀，

每支试管加入 0.1mL，制作 100 支抗凝管干燥备用。

2、血液粘度计使用方法：

① 将粘度计调整水平，打开粘度计电源预热 15min。

② 抽取静脉空腹血 2mL 注入抗凝管充分抗凝（轻轻摇匀），取其中 1mL 用

穿刺针加入血沉管静置 1h，从左边，自上而下读出血沉值；再上离心机 4000rpm

离心 20min，从右边，自下而上读出压积值。

组 别 剂量

（g/kg）

全血粘度

（mpa.s）

红细胞压积

（%）

纤维蛋白原

（g/l）

红细胞聚集指数

生理盐水

川芎

（阿司匹林）

37

③ 开始测试，屏幕显示“全自动血液粘度测试仪”。按“确定”键选择全血

和血浆（3000rpm,10min）的切变率，移动光标选择全血或血浆，并取全血或血

浆 0.8mL 加入切血槽后，按“确认”键后自动测试，全血由高切到低切。

④ 测试完毕后按“打印”键，自动打印出设定切变率下的粘度值（如联机

操作数值直接传送到计算机）。

⑤ 测试完按“冲洗”键自动冲洗并吹干，如认为未干，也可单独按“吹干”

键吹干。

实验十 当归抗大鼠血栓形成的作用

【实验目的】

1. 学习利用体外血栓形成仪进行抗血栓形成的实验方法；

2. 观察当归抗血栓形成的作用，并分析其作用机制。

【实验原理】

根据流体力学原理，在一个恒速转动密闭圆环内的血液被动流动是一个复杂的

三维流动，这种产生的回流在圆环转动血液下降面上存在有向中心主流的冲击，这

种冲击可以启动血小板聚集进而形成血栓，而形成的血栓因重量的影响，使血液下

降面的冲击更加明显。

当归所含的阿魏酸能抑制体外血栓形成。小剂量阿司匹林抑制TXA2合成酶，

减少 TXA2 的合成，可抑制血小板聚集，防止血栓。

【实验材料】

动物：大鼠，雌雄各半，体重 200g 左右；

药品：100%当归水煎液、0.25%阿司匹林混悬液、生理盐水；

试剂：1%硅油（用乙醚稀释）、苦味酸溶液、麻醉乙醚；

主要器材：体外血栓形成仪 （YDA-IV 型，北京宏润达科技发展有限公司）、

2ml 硅化注射器、硅化硅胶血栓管、天平、玻璃培养皿、滤纸、恒温干燥箱、眼

科镊子、刻度尺、手术剪、秒表、大鼠灌胃器、鼠笼。

【实验方法】

每组取健康大鼠 4 只，称重，标记，随机分为两组（甲、乙组）。甲组给予

100%当归水煎液，灌胃量为 2mL/100g，每日 1 次，连续 5 日，乙组给予同容积

38

的生理盐水。

实验时，将动物用乙醚麻醉后，剖腹。用硅化注射剂自腹主动脉取血 2mL

以上用于测定。调节体外血栓仪，使其温度恒定在 370C，转速为 17r/min。将所

取血液注入已经标好刻度线（1.8mL）的硅胶血栓管中，套紧血栓管装入血栓形

成仪中，启动仪器，用秒表计时。仪器转动 15min 后，停机，取下血栓管环，打

开，将管内血液以及已经形成的血栓倾倒于铺有滤纸的玻璃培养皿上。用眼科镊

子轻提起血栓头，移放在另外干燥的滤纸上，测量血栓长度（mm）。用滤纸将血

栓表面血液吸干，将其放在已知重量的滤纸上，在天平上称重，所得重量减去滤

纸重量即为血栓的湿重（mg）。在上述血栓放置于 640C 恒温干燥箱中烘干 30min;

取出后称重所得重量为血栓干重（mg）。

【实验结果】

统计全班各组实验结果，比较用药后体外血栓长度、湿重及干重的变化。

药物对体外血栓形成的影响 （ x ±s；n= ）

组 别 剂量

（g/kg）

血栓长度

（mm）

血栓湿重

（mg）

血栓干重

（mg）

生理盐水

当归

【注意事项】

1. 自动物腹主动脉取血易发生出血现象，操作应小心；

2. 每次注入血栓管的血液应恒定量；

3. 测定血栓长度时，切勿用力拖拉血栓；

4. 测定血栓湿重时，务必用滤纸吸干血栓表面的血液；

5. 烤干血栓时，须严格掌握考箱温度和烘烤时间，避免血栓发生炭化。

【思考题】

1. 被试药物抗血栓形成的作用机制？

2. 进行本实验操作时应注意掌握哪些要点？

39

实验十一 丹参抗大鼠血小板聚集的作用

【实验目的】

1. 熟悉血小板聚集仪的操作，学习使用血小板聚集仪观测药物抗血小板聚

集的实验方法；

2. 观察丹参（阿司匹林）抗血小板聚集的作用以及作用的环节。

【实验原理】

血小板悬浮在血浆中呈现轻度混浊，这种血浆称为富血小板血浆（PRP）。

当一束聚集光通过它时，透光率与血浆浊度成反比；而血浆浊度与血小板数成正

比。将可以引起血小板聚集的物质（例如 ADP、胶原、肾上腺素等）加入不断

搅拌的 PRP 时，随着血小板聚集，血小板数目减少，则透光率增加。以贫血小

板血浆（PPP）的透光率为 100%血小板聚集，PRP 的透光率为 0 血小板聚集；

将随着血小板聚集产生的透光率变化，通过光敏元件转换为电量变化，并以曲线

形式记录下来，就成为反映血小板聚集的速度和程度的客观指标。

丹参所含的丹参素、丹参酮ⅡA 磺酸钠等均能抑制血小板聚集。小剂量阿

司匹林抑制 TXA2 合成酶，减少 TXA2 的合成，可抑制血小板聚集，防止血栓。

【实验材料】

动物：大鼠，体重 200g 左右；

药品：100%丹参水煎液、0.5%阿司匹林混悬液、生理盐水；

试剂： 0.01%二磷酸腺苷（ADP）、0.2mol/L 磷酸缓冲液、3%戊巴比妥钠、

3.8%枸橼酸钠、1%硅油（以乙醚稀释）、苦味酸溶液；

主要器材：多功能血液凝聚仪（MPG-3E 型，上海斯隆医电设备有限公司）、

离心机、硅化离心管、硅化注射器（10mL）、手术剪、手术镊、眼科镊、微量进

样器（10µL、200µL）、大鼠灌胃器、天平、2mL 注射器、4 号针头、5mL 注射

器、7 号针头、鼠笼。

【实验方法】

各组取健康雄性大鼠 4 只，称重，标记，随机分为两组（甲、乙组）。甲组

给予 100%丹参水煎液（阿司匹林），灌胃量为 1mL/100g，每日 1 次，连续 5 日，

乙组给予同容积的生理盐水。末次给药后，大鼠禁食不禁水 12h 后用于实验。将

大鼠以戊巴比妥钠（0.1mL/100g）腹腔注射麻醉，剖腹用注射器自腹主动脉取血；

40

将血液与枸橼酸钠抗凝液以 9：1 比例在硅化离心管中轻轻混匀：血液以 800r/min

离心 4min；吸取上层米黄色液体即为富血小板血浆（PRP）；所余血液 3000r/min

离心 8min，所得上清液即为贫血小板血浆（PPP）。打开聚集仪和记录仪开关，

使仪器预热；调节聚集仪恒温保持在 37±10C。取 3 只方型测量杯，其中两只各

加入 PPP200µL，另外一只加入 PRP200µL，置于聚集仪中预热 5min；以 PPP 杯

校正血小板计数表至“0”；以 PPP 稀释 PRP 杯，使 PRP 的血小板计数在 24 万～

26 万/mm3 范围内。

将调好血小板数的 PRP 和 PPP 测定杯置于聚集仪测量槽内预热至恒温

（36.8～370C）；以 PRP 调记录仪零点，以 PPP 调节幅度。将搅拌小棒加入测定

杯中，温育 3min 后，启动聚集仪的记录仪开关，加入 ADP10µL，描记 6min 的

聚集曲线。在描记的两组动物的血小板聚集曲线上计算 1min、3min、5min 的聚

集强度（1A、3A、5A）、最大聚集强度（MA）、到达最大聚集强度时间（TMA）、

1/2 最大聚集强度时间（T1/2MA）；并以 MA 比较两组的聚集抑制百分率。

聚集抑制率= 对照组最大聚集强度-药物组最大聚集强度/对照组最大聚集强度

【实验结果】

统计全班各组实验结果，比较用药后对血小板聚集各参数的变化。

药物抗血小板聚集作用（ x ±s；n= ）

组 别 剂量

（g/kg）

聚集曲线幅度（mm）

1A 3A 5A MA

TMA

（min）

T1/2M 聚集抑制率（%）

（min）

生理盐水

丹参

（阿司匹林）

【注意事项】

1. 取血注射器及离心管必须用硅油硅化；

2. 取血后必须在 2h 内完成测定工作；

3. 向测量杯中加液时，不得有气泡出现。

【思考题】

1. 丹参（阿司匹林）抑制血小板聚集的作用点是什么？

2. 影响本实验的因素有哪些？

41

第十章 补益药常用实验方法

凡能补充物质，增强机能，提高机体抗病能力，消除虚弱征候的药物，称为

补益药。补益药根据其作用和应用范围的不同分为补气药、补血药、补阴药和补

阳药四类。传统常用的补益药有人参、黄芪、当归、熟地黄、麦冬、枸杞子、鹿

茸、冬虫夏草等以及它们所组成的各种复方。现代药理学研究结果证明，这类药

物的药理作用非常广泛，能提高机体免疫功能、神经内分泌功能及中枢神经系统

功能，促进物质代谢，延缓衰老，增强某些重要器官和系统的功能，抗肿瘤等。

在研究补益药时，一般从影响免疫功能，抗应激能力，益智，促进造血功能，促

进物质代谢，影响内分泌功能，延长寿命，促进消化、吸收功能等方面设计实验

指标，并结合药物的具体功效和临床应用选择其他项目和指标进行实验。常用的

实验方法如下：

1、 影响免疫功能实验

（1）影响非特异性免疫功能的实验方法：常选用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功

能测定法，小鼠碳粒廓清法，小鼠免疫器官重量法等实验，观察药物对非特异性

免疫功能的作用。

（2）影响体液免疫功能的实验方法（特异性免疫功能实验方法之一）：常选

用小鼠血清溶血素抗体测定法，鸡红细胞作免疫原的溶血素测定法，单向免疫扩

散法等实验，观察药物对体液免疫功能的作用。

（3）影响细胞免疫功能的实验方法（特异性免疫功能实验方法之二）：常选

用二硝基氯苯（DNCB）所致小鼠迟发性皮肤过敏反应，小鼠外周血液中 T 淋巴

细胞酶标记染色法等实验，观察药物对细胞免疫功能的作用。

2、抗应激能力实验：实验方法主要包括耐缺氧、耐疲劳、耐高温、耐寒冷、

抗辐射等。常选用小鼠耐缺氧能力，小鼠游泳时间，小鼠耐寒能力，小鼠耐高温

能力等实验，观察药物抗应激能力的作用。

3、益智实验：实验方法主要包括跳台、避暗、穿梭箱、爬杆、迷津、小鸡

的一次性味觉、操作式条件反射和突触传递长时程增强（LTP）等。常选用药物

对小鼠记忆获得障碍的影响（跳台法），药物对小鼠空间辨别能力的影响（迷路

法）等实验，观察药物的益智作用。

42

4、促进造血功能实验：血虚动物模型的制备方法有：失血法、化学物质损

伤法、辐射损伤法、营养法等。常选用药物对失血性血虚小鼠的补血作用观察，

药物对乙酰苯肼所致小鼠血虚的补血作用等实验，观察药物促进造血功能的作

用。

5、促进物质代谢实验：常选用药物对小鼠超氧化物歧化酶（SOD）活性的

影响（邻苯三酚法），药物对小鼠血浆过氧化脂质（LPO）的影响等实验，观察

药物促进物质代谢的作用。

6、其他：可根据补益药的具体功效和应用的特点，安排其他相关实验，如影响

内分泌功能，延长寿命，促进消化、吸收功能等实验。

实验十二 黄芪游泳

【实验目的】

掌握强迫游泳实验方法和用途；观察黄芪的抗疲劳作用。

【实验原理】

强迫游泳实验系统主要用于抗抑郁、抗疲劳和益智药物的药效学与作用机制

研究的抗应激实验方法。其中负重游泳实验是评价药物抗疲劳作用的动物模型。

将小鼠尾部 1/3 ～ 2/3 处负重（ 体重的 5 %～1 0 %）后投人水槽中游泳，观察

和记录小鼠自入水后到沉入水中不能浮出水面（处于力竭状态）的时间。此负重

游泳时间被看作是定量客观评价疲劳程度的指标。若负重游泳时间越长，则表明

药物的抗疲劳效果越佳。实验中水温 25 度左右，所负重物为铅丝或橡皮泥球。

无负重游泳也可以使小鼠疲劳，但观察其达到力竭状态所需的时间比较长。

【实验材料】

实验对象：小鼠，20±2g；

实验药品：受试药物，生理盐水。

实验器材：强迫游泳记录系统、电子秤，温度计、水桶、灌胃器等。

【实验步骤】

1. 每组取小鼠 6 只，随机分成两组，给予受试药物。

2. 小鼠被单独放入盛有水的塑料圆柱体水槽中，水深保证小鼠无法逃脱且

无法挨近塑料圆柱体的底部。

43

3. 记录小鼠被迫待在塑料圆柱体中的时间，当小鼠在塑料圆柱体中终止挣

扎，保持漂浮的状态（仅有微小的动作以保持头部露出水面）则被认为是固定不

动。

【注意事项】

1. 注意控制好给药时间。

2. 水温对实验小鼠的影响比较大。

3. 注意观察小鼠的固定不动状态。

【实验结果】根据实验结果，对药物进行分析，结果以三线表的形式呈现，例表

如下：

黄芪对强迫游泳小鼠游泳时间的影响

实验分组 给药剂量 持续时间

正常

黄芪

【实验结果表格制作注意事项】

1. 一般采用三线格，表内只有横线无竖线，最上和最下的线用粗线而二者

之间的线用细线。

2. 表中数据如采用定性描述应注意描述语言相一致，不要对同一指标的相

同趋势变化使用不同的描述词语。如采用定量描述应注意数据的有效数字保持一

致，一般保留到小数点后 2 位。

3. 如采用 T 检验等统计检验的方法对数据进行显著性差异检验，在对应的

数据应添加标注*，并在表下方加注*所代表的含义。

【思考题】

1. 根据实验原理与结果讨论强迫游泳实验的影响因素。

2. 根据实验结果分析黄芪的临床应用。

44

实验十三 当归补血（失血性血虚）

【实验目的】

掌握失血性血虚实验方法；观察当归补血作用。

【实验原理】

实验动物血虚时表现有白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板反映时血细胞数

量的变化。肝脾系数、骨髓有核细胞计数两项指标可以在一定程度反映小鼠骨髓

造血功能。

【实验材料】

实验对象：小鼠，20±2g；

实验药品：受试药物，生理盐水。

实验器材：血象分析仪、电子秤，玻璃毛血管、灌胃器等。

【实验步骤】

1. 每组取小鼠 6 只，随机分成两组，给予受试药物。

2. 每只小鼠眼眶放血 0. 5 mL，造成急性失血性血虚模型。

3. 复制模型后连续给药一周，断尾法测定造模后第 1，4，7 天的外周血液

指标变化。主要观察血虚小鼠白细胞计数( WBC) ，红细胞计数( RBC) ，血红蛋

白( HGB) ，红细胞比容( HCT) ，血小板计数( PLT) 的影响。

4. 末次给药 1h 测完血象后，处死全部小鼠，测定其肝脾系数、骨髓有核细

胞数。

【注意事项】

1. 放血时注意不要将小鼠压迫致死。

2. 注意各组小鼠放血的量要尽量保持一致。

【实验结果】

根据实验结果，对药物进行分析，结果以三线表的形式呈现，例表如下：

当归对血虚实验小鼠血象的影响

实验

分组

给药

剂量

红细胞计

数( RBC)

白细胞计数

( WBC)

血红蛋白

( HGB)

红细胞比

容( HCT)

血小板计

数( PLT)

正常

当归

45

【实验结果表格制作注意事项】

1. 一般采用三线格，表内只有横线无竖线，最上和最下的线用粗线而二者

之间的线用细线。

2. 表中数据如采用定性描述应注意描述语言相一致，不要对同一指标的相

同趋势变化使用不同的描述词语。如采用定量描述应注意数据的有效数字保持一

致，一般保留到小数点后 2 位。

3. 如采用 T 检验等统计检验的方法对数据进行显著性差异检验，在对应的

数据应添加标注*，并在表下方加注*所代表的含义。

【思考题】

1. 根据实验原理与结果讨论失血性血虚实验的局限性。

2. 根据实验结果分析当归的临床应用。

46

第十一章 安神药常用实验方法

凡以安定神智为主要功效的药物称为安神药。传统常用药物有酸枣仁、灵芝，

多用于心气虚、心血虚或心火盛以及其他原因所致的心神不宁，烦躁易怒，失眠

多梦，头晕目眩等证。现代药理学研究证明，多数安神药及安神方剂具有中枢抑

制作用，另外还具有镇静、催眠、抗惊厥等药理作用。

凡具有平肝息风或潜阳镇静作用的药物称为平肝息风药。传统常用羚羊角、

钩藤、天麻、全蝎等药物及其复方制剂。这一类药物主要用于肝阳上亢、肝风内

动所致内风诸病，如阳邪热盛所致高热神昏，四肢抽搐之证等。平息肝风药主要

具有镇静、抗惊厥、降压等药理作用，另外还有抗炎、镇痛、解热，抗肿瘤、影

响机体免疫功能，影响心血管系统功能以及调节消化系统功能等作用。由于平息

肝风药可以作用于中枢神经系统及心血管系统，所以在研究这类药物时，一般从

降压和对中枢神经系统方面的影响来设计实验动物模型和实验指标。常用的实验

方法如下：

1．降压实验：先在麻醉动物身上观察急性降压作用，再用高血压动物模型

进行慢性实验治疗，之后将筛选出来的有效药物进一步研究其降压机理。急性降

压实验用来观察药物有无降压作用，多将犬、猫和大鼠等动物麻醉后直接颈动脉

测压。也可用不麻醉动物间接测定血压的变化，如大鼠尾容积测压法、犬动脉皮

桥测压法、大鼠测压仪测后肢血压等。或直接观察清醒大鼠的血压变化。判断一

个药物有无降压作用，需要进行 3-5 次，实验结果一致时 3 次即可，倘不一致，

则要进行 5 次或更多次。一般认为，降压数值应为原来水平的 40％或更多，维

持 30min 以上才能认为有降压效果，则可进行慢性实验治疗。慢性实验的高血压

动物模型有肾型、神经原型和内分泌型等，其中以肾型高血压较为常用。对已形

成的高血压动物，每天测压 1 次，测定时间一般为 10d。如果血压不降可加大剂

量，延长给药期 10d。停药后测压，直至血压恢复到给药前水平为止。如果收缩

压和舒张压下降 2.66kPa（20mmHg）以上者，则可进行统计学处理，根据结果

判断是否有效。如果下降不足 1.33kPa（10mm Hg）则认为无效。

2．中枢神经抑制实验：包括镇静、催眠、抗惊厥实验以及镇痛和解热实验。

一般常用小白鼠腹腔或灌胃给药后，观察是否出现安静、活动减少、群聚、嗜唾

47

或睡眠等外观行为的改变，或用光电管法、吊笼法、踏轮法观察药物对小鼠自由

活动的影响。以及与巴比妥类药物的协同作用。巴比妥类是典型的中枢抑制药，

凡是对中枢神经有抑制作用的药物，一般都能增强其中枢抑制作用。对此，常用

延长戊巴比妥所致睡眠时间及对巴比妥阈下催眠剂量的影响来进行研究。对抗中

枢兴奋药的作用，是利用它们能减低兴奋药的过度自发活动来筛选．也可用其对

抗中枢兴奋药毒性，以提高半数致死量来衡量；还可以利用其对抗某种兴奋药的

效应来确定作用部位。抗惊厥实验，主要是利用电刺激和化学制剂引起动物惊厥

发作，观察药物的影响。常用致惊剂有戊四唑、士的宁、苦味毒、氨基脲等。镇

痛实验常用化学刺激法、热刺激法、电刺激法、机械刺激法等各种致痛方法引起

疼痛，观察此类中药的致热物质有菌苗液、细菌内毒索、酵母混悬液等，使动物

发热后观察此类中药的解热作用，多用家兔作实验动物。

实验十四 酸枣仁自主活动

【实验目的】

掌握自主活动的实验方法；观察酸枣仁对实验动物在新异环境中的自主行

为、探究行为与紧张度的影响。

【实验原理】

自主活动实验也叫旷场实验（open field test）又称敞箱实验，是评价实验动

物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。以实验动物在新奇环

境之中某些行为的发生频率和持续时间等，反应实验动物在陌生环境中的自主行

为与探究行为，以尿便次数反应其紧张度。

【实验器材】

实验对象：小鼠，20±2g；

实验药品：受试药物，戊巴比妥钠，生理盐水。

实验器材：电子秤，旷场反应箱和数据自动采集和处理系统。

【实验步骤】

1. 每组取小鼠 6 只，随机分成三组，给予受试药物。

2. 实验在安静的环境下进行。将动物放入箱内底面中心，同时进行摄像和

计时。观察一定时间后停止摄像，观察时间可根据实验拟定，一般为 3～5 min。

48

3. 清洗方箱内壁及底面，以免上次动物余留的信息（如动物的大、小便、

气味）影响下次测试结果。更换动物，继续实验。

4. 根据计算机软件设计不同可观察的参数不同，如单位时间内动物在中央

格停留时间，某一肢体越过的格子数为水平得分（crossing），后肢站立次数为垂

直得分（rearing），修饰次数，尿便次数；运动速度，运动距离，休息时间，沿

边运动距离，中央运动距离等。

【注意事项】

1. 小鼠的自主活动个体差异较大, 实验环境安静与否影响其结果。

2. 动物在 24 h 内有其活动周期，故每次实验应选择在同一时间段内完成。

3. 实验应在隔音，光强度和温、湿度适宜且保持一致的行为实验室内进行。

4. 两次实验之间清洗实验设备，以免上次动物余留信息影响下次实验结果。

【实验结果】

根据实验结果，对药物进行分析，实验结果以三线表的形式呈现，例表如下：

酸枣仁对实验小鼠自主活动的影响

药物编号 给药剂量 中央格

停留时间 尿便次数 运动距离 休息时间

正常

酸枣仁

戊巴比妥钠

【思考题】

1. 根据实验原理与结果讨论自主活动实验的影响因素与局限性。

2. 根据实验结果分析酸枣仁的临床应用。

3. 根据实验结果分析酸枣仁的作用机制。

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附录 实验动物给药量的计算

实验动物的给药量常按 g/kg（体重）、mg/kg（体重）、mL/kg（体重）或按体

表面积来计算，一般是通过动物之间或动物与人之间的计量换算而得。换算方法

大致有以下几种。

(1）按体型分数换算法：通常采用下列公式：

3

3

B

A

A

B

W

W

R

RdAdB

式中 dB 是欲求算的 B 种动物（包括人）的 kg 体重剂量，dA 是已知 A 种动

物（包括人）的 kg 体重剂量；WA、WB是已知动物 A、B 的体重；RA、RB是动

物的体型系数见表 1。

表 1 动物与人的体型系数

动物种类 小鼠 大鼠 豚鼠 兔 猫 猴 犬 人

R（体型系数） 0.06 0.09 0.099 0.093 0.082 0.111 0.104 0.11

例：已知家兔 2kg，用药 50mg/kg，求算家犬 5kg 体重的用药量。

dA=50、RB=0.104、RA=0.093、 WA=2、WB=5，代入上述公式：

kgmgkgmgdB /2.415

2

093.0

104.0/50

3

3

（2）按动物与人体表比换算法：见表 2，表 3。

表 2 实验动物与人体表面积比

小鼠

20g

大鼠

200g

豚鼠

400g

兔

1.5kg

猫

2.0kg

猴

4.0kg

狗

12.0kg

人

70.0kg

小鼠 20g 1.0 7.0 12.25 27.8 29.7 64.1 124.2 387.9

大鼠 200g 0.14 1.0 1.74 3.9 4.2 9.2 17.8 56.0

豚鼠 400g 0.08 0.57 1.0 2.25 2.4 5.2 4.2 31.5

兔 1.5kg 0.04 0.25 0.44 1.0 1.08 2.4 4.5 14.2

猫 2.0kg 0.03 0.23 0.41 0.92 1.0 2.2 4.1 13.0

猴 4.0kg 0.016 0.11 0.19 0.42 0.45 1.0 1.9 6.1

狗 12.0kg 0.008 0.06 0.10 0.22 0.23 0.52 1.0 3.1

人 70.0kg 0.0026 0.018 0.031 0.07 0.078 0.16 0.32 1.0

50

例：已知体重 12kg 的犬，其每日服药剂量为 10mg/kg（体重），每日总量为

120mg，试求人的日服药量。

人日服总量=人日服总量*人与犬体表比

=120*3.1=372mg

例：某利尿中药大鼠给药的剂量为 250mg/kg（体重），试粗略估计犬灌胃给

药时可以试用的剂量。

解 1：直接计算法

实验用大鼠的体重一般在 200g 左右，其体表面积（A 鼠）为：

方重的注：体表面积大约是体鼠 2/3m0311.010000

2001.9A 2

32

250mg/kg 的剂量如改以 mg/m2 表示，即为：

2m/mg16080311.0

2.0250

表 3 不同种类动物间用药剂量换算时的常用数据

动物种类 体重（kg） 体表面积

（m2）

mg/kg—mg/m2 转换

因子

每 1kg 体重占有体

表面积相对比值

小鼠

0.018 0.0036 2.9

粗略值 3

1.0 0.020 0.0067 3.0

0.022 0.0071 3.1 （0.02kg）

0.024 0.0076 3.2

大鼠

0.10 0.0196 5.1

粗略值 6

0.47 0.15 0.0257 5.8

0.20 0.0311 6.4 （0.20kg）

0.25 0.0361 6.9

豚鼠

0.30 0.0439 6.8

粗略值 8

0.40 0.40 0.0532 7.6

0.50 0.0617 8.1 （0.40kg）

0.60 0.0697 8.6

家兔 1.50 0.1323 11.3

粗略值 12

0.24 2.00 0.1603 12.4

51

2.50 0.1860 13.4 （2.0kg）

猫

2.00 0.1571 12.7

粗略值 14

0.22 2.50 0.1824 13.7

3.00 0.2058 14.6 （2.5kg）

狗

5.00 0.3275 15.3

粗略值 19

0.16 10.00 0.5199 19.2

15.00 0.6812 22.0 （10.0kg）

猴

2.00 0.1873 10.7

粗略值 12

0.24 3.00 0.2455 12.2

4.00 0.2973 13.5 （3.0kg）

人

40.00 1.2398 32.2

粗略值 35

0.08 50.00 1.4386 34.8

60.00 1.6246 36.9 （50.0kg）

解 2：利用表 3“mg/kg—mg/m2”计算法

将某动物按 mg/kg 计算的剂量乘以相应的转换因子，即为按 mg/m2 计算的

剂量。

kg

mg79

19

6250

犬的转换因子

大白鼠的转换因子犬的试用剂量

解 3：利用表 3“每 1kg 体重占有体表面积相对比值”计算法

kg

mg85

47.0

16.0250

大白鼠的体表面积比值

犬的体表面积比值犬的试用剂量