Petrifilm 6404/6414 - multimedia.3m.commultimedia.3m.com/mws/media/708939O/notice-3mtm... · International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products –General

3

Petrifilm™

E. coli / Coliform Count PlateTest E. coli / ColiformE. coli / Coliform Count PlattePiastra per il conteggio E. coli / ColiformiPlacas para el Recuento de E.coli / ColiformesE. coli / Coliform Count PlaatE. coli / Coliform OdlingsplattaE. coli / Coliform Count PlatePlaca para Contagem de E.coli / ColiformesΠλακίδιο Μέτρησης E.Coli/ΚολοβακτηριδίωνペトリフィルムTM培地E.coliおよび大腸菌群数測定用プレート（ECプレート）

FR

GB

DE

IT

ES

NL

SE

FI

PT

GR

JP

6404/6414

1

6404/64143M™ Petrifilm™

E. coli / Coliform Count PlateDESCRIPTION

The 3M™ Petrifilm™ E. coli / Coliform Count (EC) Plate is a sample-ready-culture-medium system which contains Violet Red Bile (VRB) nutrients, a cold-water-soluble gelling agent, an indicator of glucuronidase activity, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-glucuronide (BCIG), and a tetrazolium indicator that facilitates colony enumeration. Petrifilm EC Plates are used for the enumeration of E. coli and coliforms in the food and beverage industries. Petrifilm EC Plate components are decontaminated though not sterilized. 3M Food Safety is certified to ISO (International Standards Organization) 9001.

WARNINGDo not use this plate for the detection of E. coli O157. Like most other E. coli/coliform media, this plate will not specifically indicate whether any O157 strain is present. Because most O157 strains are atypical E. coli, they will appear as non-E. coli coliforms (red with gas).

CAUTIONS 3M has not documented Petrifilm EC Plates for use in industries other than food and beverage. For example, 3M has not documented Petrifilm EC Plates for testing water, pharmaceuticals or cosmetics.

Petrifilm EC Plates have not been tested with all possible food products, food processes, testing protocols or with all possible strains of E. coli or other bacteria.

The Petrifilm EC Plate has been evaluated following AOAC / NordVal guidelines and has performed in representative samples of the following food categories: vegetables, meat, dairy, and processed foods.

Petrifilm EC Plates do not differentiate any one coliform strain from another or any one E. coli strain from another.

Do not use Petrifilm EC Plates in the diagnosis of conditions in humans or animals.

For information on documentation of product performance contact your official 3M Food Safety representative.

USER RESPONSIBILITYNo one culture medium will always recover the exact same strains or enumerate a particular strain exactly as does another medium. In addition, external factors such as sampling methods, testing protocols, preparation time and handling may influence recovery and enumeration.

It is the user’s responsibility in selecting any test method to evaluate a sufficient number of samples with particular foods and microbial challenges to satisfy the user that the chosen test method meets the user’s criteria.

It is also the user’s responsibility to determine that any test methods and results meet its customers’ or suppliers’ requirements.

As with any culture medium, Petrifilm EC Plate results do not constitute a guarantee of quality of food or beverage products or processes that are tested with the plates.

The user must train its personnel in proper testing techniques: for example, Good Laboratory Practices (U.S. Food and Drug Administration, Title 21, Part 58 of the Code of Federal Regulations) or ISO 17025.

DISCLAIMER OF WARRANTIES / LIMITED REMEDYUNLESS OTHERWISE PROHIBITED BY LAW, 3M DISCLAIMS ALL EXPRESS AND IMPLIED WARRANTIES, INCLUDING, BUT NOT LIMITED TO, ANY WARRANTIES OF MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR USE. If any 3M Petrifilm Plate is proven to be defective, 3M or its authorized distributor will replace or, at its option, refund the purchase price of any plate. These are your exclusive remedies. You must promptly notify 3M within sixty days of discovery of any suspected defect in a product and return the product to 3M. Please call Customer Service (1-800-328-1671 in the U.S.) or your official 3M Food Safety representative for a Returned Goods Authorization.

LIMITATION OF 3M LIABILITYUNLESS OTHERWISE PROHIBITED BY LAW, 3M WILL NOT BE LIABLE TO USER OR OTHERS FOR ANY LOSS OR DAMAGE, WHETHER DIRECT, INDIRECT, SPECIAL, INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING, BUT NOT LIMITED TO, LOST PROFITS. Except where prohibited by law, in no event shall 3M’s liability under any legal theory exceed the purchase price of the plates alleged to be defective. Customer may have additional rights and should seek advice in country of purchase.

STORAGE AND DISPOSAL Store unopened Petrifilm Plate pouches refrigerated or frozen at temperatures ≤8ºC (46ºF). Just prior to use, allow unopened pouches to come to room temperature before opening. Return unused plates to pouch. Seal by folding the end of the pouch over and taping shut. To prevent exposure to moisture, do not refrigerate opened pouches. Store resealed pouches in a cool dry place for no longer than one month. It is recommended that resealed pouches of Petrifilm Plates be stored in a freezer (see below) if the laboratory temperature exceeds 25ºC (77ºF) and/or the laboratory is located in a region where the relative humidity exceeds 50% (with the exception of air-conditioned premises).

(Great Britain / U.S.)

2

To store opened pouches in a freezer, place Petrifilm Plates in a sealable container. To remove frozen Petrifilm Plates for use, open the container, remove the plates that are needed and immediately return remaining plates to the freezer in the sealed container. Plates should not be used past their expiration date. The freezer that is used for open pouch storage must not have an automatic defrost cycle as this would repeatedly expose the plates to moisture which can damage the plates.

Do not use plates that show discoloration. Expiration date and lot number are noted on each package of Petrifilm Plates. The lot number is also noted on individual plates.

After use, Petrifilm EC Plates may contain microorganisms that may be a potential biohazard. Follow current industry standards for disposal.

INSTRUCTIONS FOR USESample Preparation 1. Use appropriate sterile diluents:

Butterfield’s phosphate buffer,1, 2 0.1% peptone water, peptone salt diluent,3 quarter-strength Ringer’s solution,4 saline solution (0.85-0.90%), bisulfite-free letheen broth or distilled water.

Do not use diluents containing citrate, bisulfite or thiosulfate with Petrifilm Plates; they can inhibit growth. If citrate buffer is indicated in the standard procedure, substitute with one of the buffers listed above, warmed to 40-45°C.

2. Blend or homogenize sample.

3. For optimal growth and recovery of microorganisms, adjust the pH of the sample suspension to 6.6 - 7.2. For acidic products, adjust the pH with 1N NaOH. For alkaline products, adjust the pH with 1N HCl.

Plating1. Place the Petrifilm EC Plate on a flat, level surface.

2. Lift the top film and with the pipette perpendicular dispense 1 mL of sample suspension onto the center of bottom film.

3. Roll the top film down onto the sample to prevent trapping air bubbles.

4. Place the plastic spreader with the flat side down on the center of the plate. Press gently on the center of the spreader to distribute the sample evenly. Spread the inoculum over the entire Petrifilm Plate growth area before the gel is formed. Do not slide the spreader across the film.

5. Remove the spreader and leave the plate undisturbed for at least one minute to permit the gel to form.

IncubationIncubate plates in a horizontal position with the clear side up in stacks of no more than 20 plates. Several incubation times and temperatures can be used depending on current local reference methods.

For example:AOAC® Official Methods

SM (998.08 Confirmed Escherichia coli Counts in Poultry, Meats and Seafood, Dry Rehydratable Film Method) Incubate Petrifilm EC Plates 24 h ± 2 h at 35ºC ± 1ºC.

AOAC® Official MethodsSM

(991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)

For coliform results incubate Petrifilm EC Plates 24 h ± 2 h at 35ºC ± 1ºC.

For E. coli results incubate Petrifilm EC Plates an additional 24 h ± 2 h (48 h ± 4 h total) at 35ºC ± 1ºC

Interpretation1. Petrifilm EC Plates can be counted using a standard colony counter or other illuminated magnifier. Do not count colonies on the foam dam

since they are removed from the selective influence of the medium. Do not count artifact bubbles that may be present.

The interpretation of E. coli colonies on the Petrifilm EC Plate varies by method. For example:

AOAC Official Methods (998.08 and 991.14) – enumerate blue to red-blue colonies associated with entrapped gas, regardless of size or intensity of color, as confirmed E. coli. Blue colonies without gas are not counted as E. coli.

Other coliform colonies are red and closely associated (within one colony diameter) with entrapped gas. Colonies not associated with gas (a distance greater than one colony diameter between colony and gas bubble) are not counted as coliforms. The total coliform count consists of both the red and blue colonies associated with gas at 24 h. Anytime within the validated method incubation period that a blue colony associated with gas appears, it is a confirmed E. coli.

Warning: Do not use this plate for the detection of E. coli O157. Because most E. coli O157 strains are atypical, for example they are glucuronidase negative, they will not produce a blue color, and will not be detected on Petrifilm EC plates.

2. The circular growth area is approximately 20 cm2. Estimates can be made on plates containing greater than 150 colonies by counting the number of colonies in one or more representative squares and determining the average number per square. Multiply the average number by 20 to determine the estimated count per plate.

3

3. When present in large numbers, Petrifilm EC Plates may have one or more of the following characteristics: a deepening of the gel color with many small, indistinct colonies; and many gas bubbles. High concentrations of E. coli will cause the growth area to turn blue, while high concentrations of coliforms (non-E. coli) will cause the growth area to turn dark red. When this occurs, record results as too numerous to count (TNTC). When an actual count is required, plate at a higher dilution.

4. Where necessary, colonies may be isolated for further identification. Lift the top film and pick the colony from the gel. Test using standard procedures.

5. If the plates cannot be counted within 1 hour of removal from the incubator, they may be stored for later enumeration by freezing in a sealable container at temperatures ≤ minus 15°C for no longer than one week.

For further information refer to the appropriate Petrifilm Plate “Interpretation Guide.” If you have questions about specific applications or procedures, please contact your official 3M Food Safety representative nearest you.

References1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.

2. International Standards Organization, ISO 6887-1:1999. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination.

3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products –General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions and decimal dilutions for microbiological examination.

Explanation of symbols

• Attention, see instructions for use

• The lot in a box and the hourglass symbols are symbols that represent lot number and expiration date. The hourglass is followed by a year and month which represents the expiration date (year and month: 2010-10). The entire line after the hourglass represents the lot number. (2010 - 10 AZ).

• Store below given temperature.

AOAC® is a registered trademark of AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM is a service mark of AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ

3M and Petrifilm are trademarks of 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

3M United States 3M Center, Bldg. 275-5W-05St. Paul, MN 55144-1000USA1-800-228-3957

3M CanadaPost Office Box 5757London, Ontario N6A4T1Canada1-800-563-2921

3M Europe and MEA3M Deutschland GmbHCarl-Shurz - Strasse 1D41453 Neuss/Germany+49-2131-14300

3M Latin AmericaAvenida Santa Fe 55, Santa FeC.P. 01210 Mexico CityMexico5255-5270-0400

3M AsiaPacific9 Tagore Lane,Singapore 78747265-64548611

3M Japan31-1, Tamagaradai, 2-ChomeSetagaya-Ku, Tokyo158-8583, Japan81-3-3709-8289

3M Australia/New Zealand9 - 15 Chilvers RoadThornleigh, NSW 2120Australia1300 363 878

3

3M Health CareSt. Paul, MN 55144-1000 U.S.A.www.3M.com/foodsafetyMade in U.S.A. of globally sourced materials.

1

6404/6414

(Français)

3M™ Petrifilm™

Test E. coli / ColiformDESCRIPTIONLe test 3M™ Petrifilm™ pour la numeration des E. coli et coliformes (EC) est un milieu de prêt à l’emploi qui contient culture qui contient des sels biliaires, du cristal violet et du rouge neutre (de type VRBL), un agent gélifiant soluble dans l’eau froide, un indicateur d’activité glucuronidase -bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-glucuronide (BCIG), et un indicateur au tetrazolium facilitant la lecture Les tests Petrifilm EC sont utilisés pour le dénombrement des E. coli et coliformes dans les industries alimentaires et des boissons. Les composants des tests Petrifilm EC sont décontaminés, mais pas stérilisés. 3M Sécurité des aliments est certifié ISO (International Standards Organization) 9001.

AVERTISSEMENT Ne pas utiliser ce test pour la détection d’ E. coli O157. Dans la mesure où la plupart des souches d’E. coli O 157 sont atypiques, et qu’en particulier, elles ne produisent pas de beta-glucuronidase, elles apparaîtront sous la forme de colonies non-E. coli (rouges avec gaz).

MISES EN GARDE 3M n’a pas documenté l’utilisation des tests Petrifilm EC dans les secteurs autres que l’industrie alimentaire et les produits laitiers. 3M n’a, par exemple, pas documenté son utilisation des tests Petrifilm EC pour l’analyse de l’eau, des produits pharmaceutiques ou des cosmétiques.

Les tests Petrifilm EC n’ont pas été évalués sur tous les aliments, tous les procédés agro-alimentaires, et tous les protocoles d’analyse possibles, ni sur toutes les souches de bactéries E. coli ou coliformes.

Le test Petrifilm EC a été évalué selon les règles AOAC / AFNOR / NordVal pour analyser des échantillons représentatifs des catégories suivantes d’aliments : produits végétaux, carnés, laitiers et transformés.

Le test Petrifilm SEC ne permet pas de faire de distinction entre différentes souches d’E. coli.

Ne pas utiliser les tests Petrifilm EC pour faire des diagnostics sur l’homme ou l’animal.

Pour obtenir une documentation sur la performance de ce produit, contacter un représentant officiel de 3M Sécurité des aliments.

RESPONSABILITE DE L’UTILISATEURDeux milieux de culture ne recouvrent jamais les mêmes souches et ne dénombrent jamais une souche particulière de manière strictement identique. En outre, des facteurs extérieurs tels que les méthodes de prélèvement, les protocoles d’analyse, le temps de préparation et la manipulation peuvent avoir une incidence sur le recouvrement et le dénombrement.

Il incombe à l’utilisateur, quand il sélectionne une méthode d’analyse, d’évaluer un nombre suffisant d’échantillons d’aliments variés présentant des contaminations microbiennes diverses pour s’assurer que la méthode correspond à ses critères.

Il incombe également à l’utilisateur de déterminer si une méthode d’analyse et ses résultats répondent aux exigences de ses clients ou fournisseurs.

Comme pour tout milieu de culture, les résultats des tests Petrifilm EC ne garantissent pas la qualité des produits ou procédés évalués.

L’utilisateur doit former son personnel à l’utilisation correcte des techniques d’analyse: par exemple, selon les Bonnes Pratiques de Laboratoire (U.S. Food and Drug Administration, Title 21, Part 58 of the Code of Federal Regulations) ou la norme ISO 17025.

GARANTIE LIMITÉESAUF INTERDICTION CONTRAIRE PAR LA LOI, 3M RENONCE À TOUTE AUTRE GARANTIE EXPLICITE OU IMPLICITE, Y COMPRIS, MAIS SANS S’Y LIMITER, À TOUTE GARANTIE DE QUALITÉ COMMERCIALE OU D’ADAPTATION À UNE UTILISATION PARTICULIÈRE. Si un test 3M Petrifilm s’avère défectueux, 3M ou son distributeur agréé s’engage à remplacer ou, selon son choix, rembourser le prix d’achat du produit. Il s’agit de vos recours exclusifs. Vous devez informer 3M dans les plus brefs délais et au plus tard dans les six mois de toute non-conformité suspectée d’un produit, avant de le renvoyer à 3M. Veuillez appeler le Service clientèle (1-800-328-1671 aux États-Unis) ou votre représentant 3M Sécurité des aliments pour obtenir une autorisation de renvoi.

LIMITATION DE RESPONSABILITÉ DE 3MSAUF INTERDICTION CONTRAIRE PAR LA LOI, 3M NE POURRA ÊTRE TENUE RESPONSABLE DE TOUTE PERTE OU DOMMAGE DIRECT, INDIRECT, PARTICULIER OU ACCIDENTEL, Y COMPRIS ET SANS S’Y LIMITER, DE LA PERTE DE BÉNÉFICES. Sauf interdiction par la loi, la responsabilité de 3M, quel que soit le principe juridique invoqué, ne pourra en aucun cas être supérieure au prix des tests 3M Petrifilm censés être défectueux. Le client peut jouir de droits supplémentaires et doit se renseigner dans le pays d’achat.

STOCKAGE ET DESTRUCTION Conserver les poches non ouvertes de tests Petrifilm, réfrigérées ou congelées, à une température inférieure ou égale à ≤8ºC (46ºF). Dans les zones de forte humidité où la condensation peut poser problème, mettre les poches à température ambiante avant leur ouverture. Après ouverture, replacer les tests Petrifilm non utilisés dans leur poche. Refermer hermétiquement les poches ouvertes avec un ruban adhésif après avoir plié sur lui-même le côté ouvrert. Ne pas réfrigérer les poches ouvertes pour éviter une exposition à l’humidité. Resceller les poches et les stocker dans un endroit frais et sec un mois au maximum. Lorsque la température du laboratoire dépasse 25°C (77°F), et/ou que ce laboratoire est situé dans une région où l’humidité relative dépasse 50% (à l’exception des locaux climatisés), il est recommandé de conserver les poches de tests Petrifilm refermées au congélateur.

2

Pour conservers les poches ouvertes dans un congélateur, fermer les poches avec du ruban adhésif et les placer dans un récipient étanche. Pour utiliser des tests Petrifilm congelés, sortir les tests à utiliser de leur récipient et remettre immédiatement les tests restant dans le congélateur, après les avoir replacés dans leur récipient étanche. Les tests Petrifilm ne doivent pas être utilisés au-delà de leur date de péremption. Le congélateur utilise pour le stockage de poches ouvertes de tests Petrifilm ne doit pas posséder de cycle de décongélation automatique, cela exposerait les tests Petrifilm à l’humidité et pourrait les endommager.

Ne pas utiliser de tests présentant une coloration anormale. La date d’expiration et le numéro de lot sont présents sur chaque poche de tests Petrifilm. Le numéro de lot est également présent sur chaque test Petrifilm.

Après usage, chaque test Petrifilm EC peut contenir des bactéries viables. Le détruire selon les normes en vigueur.

MODE D’EMPLOIPréparation de l’échantillon 1. Utiliser les diluants stériles appropriés :

Tampon phosphate Butterfield1,2, eau peptonée 0.1%, peptone-sel3, Ringer au quart4, solution saline (0.85-0.90%), bouillon de Letheen sans bisulfite ou eau distillée.

Ne pas utiliser de tampons contenant du citrate, du bisulfite ou du thiosulfate avec les tests Petrifilm, ils peuvent inhiber la croissance des bactéries. Si un tampon au citrate est employé, le remplacer par un tampon listé ci-dessus chauffé entre 40 et 45ºC.

2. Mélanger ou homogénéiser l’échantillon.

3. Pour obtenir des conditions de croissance optimales : ajuster le pH de l’échantillon dilué entre 6,6 et 7,2 à l’aide de NaOH 1N pour les produits acides. Ajuster le pH des produits acides à l’aide de NaOH 1N. Utilisation des tests Petrifilm.

Inoculation

1. Placer le test Petrifilm EC sur une surface de travail plane.

2. Soulever le film supérieur et déposer 1 ml d’échantillon ou d’échantillon dilué au centre du film inférieur.

3. Recouvrir délicatement l’échantillon avec le film supérieur pour éviter de piéger des bulles d’air.

4. Placer le diffuseur, côté lisse vers le bas, au centre du test Petrifilm. Répartir l’échantillon uniformément en exerçant une légère pression au centre du diffuseur en plastique. Répartir l’inoculum sur la totalité de la zone de croissance avant que le gel ne se forme. Ne pas faire glisser le diffuseur sur le film.

5. Retirer le diffuseur et laisser reposer pendant au moins une minute pour permettre la solidification du gel.

Incubation

Incuber les tests Petrifilm à l’horizontale, le film transparent vers le haut, sans empiler plus de 20 unités. Les conditions d’incubation ainsi que l’interprétation des tests Petrifilm varient selon les méthodes suivies.

Par exemple :


(998.08 E. coli confirmés dans la volaille, les viandes et les produits de la mer, méthode sur film sec réhydratable).

Incuber les tests Petrifilm EC 24 h ± 2 h à 35ºC ± 1ºC.


(991.14 Dénombrement des coliformes et des Escherichia coli dans tout type d’aliments, méthode sur film sec réhydratable)

Pour des resultats coliformes, incuber les tests Petrifilm EC 24 h ± 2 h à 35ºC ± 1ºC.

Pour les resultats E. coli, incuber les tests Petrifilm EC 24 h ± 2 h de plus (48 h ± 4 h au total) à 35ºC ± 1ºC.

Interprétation

1. Le dénombrement à l’aide des tests Petrifilm EC peut se faire sur un compteur de colonies standard ou au moyen d’une autre source de lumière intense. Ne pas compter les colonies sur le pourtour en mousse, la sélectivité du milieu y est modifiée. Ne pas compter les bulles artefacts éventuellement présentes.

L’interprétation des colonies d’E. coli varie selon les méthodes. Par exemple :

AOAC® Official MethodsSM (99808 et 991.14) – Enumérer les colonies bleu à rouge-bleu associées à des bulles de gaz, sans tenir compte de la taille ni de l’intensité de la couleur, comme E. coli confirmés. Les colonies bleues sans gaz ne sont pas comptées comme E. coli.

Les autres colonies de coliformes sont rouges et associées (à une distance approximativement équivalente au diamètre de la colonie) à des bulles de gaz. Les colonies non associées à des bulles de gaz (ou à une distance supérieure au diamètre de la colonie) ne sont pas comptées comme coliformes. La numeration totale en coliforme est la somme des colonies rouges et bleues associées à du gaz après 24h d’incubation. A n’importe quel moment de la période d’incubation qu’apparaisse une colonie bleue, il s’agit d’un E. coli confirmé.

3

Avertissement : Ne pas utiliser ce test pour la détection d’ E. coli O157. Etant donné que la plupart des souche E. coli O157 sont atypiques, elles sont par exemple glucuronidase négatives, elle ne produisent pas de couleur bleue, et ne seront pas détectées sur les tests Petrifilm EC.

2. La zone de croissance du test Petrifilm CC est de 20 cm2 environ. Des estimations sont possibles sur les tests Petrifilm contenant plus de 150 colonies en comptant le nombre de colonies dans un ou plusieurs carrés représentatifs et en déterminant le nombre moyen par carré. Multiplier ce nombre moyen par 20 pour déterminer le nombre estimé par test Petrifilm.

3. En cas de da présence d’une forte concentration de coloines, le test Petrifilm EC peut avoir une ou plusieurs des caractéristiques suivantes : Un assombrissement de la couleur du gel, un grand nombre de petites colonies indistinctes, et un grand nombre de bulles de gaz. De fortes concentrations d’E. coli entraineront une coloration bleue de la zone de croissance, et de fortes concentrations en coliformes entraineront une coloration rouge foncé de la zone de croissance. Si une ou plusieurs de ces caractéristiques est présente, noter le résultat comme incomptable (TNTC). Si une résultat chiffré est demandé, il convient de procéder à d’autres dilutions pour obtenir un dénombrement plus précis.

4. Les colonies peuvent être isolées pour effectuer une identification. Soulever le film supérieur et prélever la colonie du gel. Utiliser les procédures standard.

5. Après incubation, si les tests Petrifilm ne peuvent être interprétés dans l’heure qui suit, ils peuvent être stockés congelés, dans un contenant scellé, à une température inférieure ou égale à ≤ 15°C (5°F) durant au plus une semaine pour permettre une lecture différée.

Pour toute information complémentaire, se reporter au «Guide d’interprétation». Pour toute question sur des applications ou procédures spécifiques, veuillez prendre contact avec le représentant officiel 3M Sécurité des aliments le plus proche.

Références1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Appendix 3.64.

2. International Standards Organization, ISO 6887-1:1999. Microbiologie des aliments – Prépartion des échantillons, de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique.

3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Lait et produits laitiers – Lignes directrices générales pour la préparation des échantillons pour essai, de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique.

Explication des symboles:

• Attention, consulter la notice d’utilisation.

• Le mot « lot » dans une case et le sablier sont les symboles qui représentent le numéro du lot et la date d’expiration. Le sablier est suivi de l’année et du mois qui représentent la date d’expiration (année et mois : 2010 -10). La ligne complète représente le numéro du lot (2010-10 AZ).

• Stocker en dessous de la température indiquée.

AOAC® est une marque deposée de l’AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM est un service deposé de l’AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ








3


3M et Petrifilm sont des marques déposées de 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


E. coli / Coliform Count PlatteBESCHREIBUNGDie 3M™ Petrifilm™ E. coli / Coliform Count Platte (EC) ist ein gebrauchsfertiger Nährboden und enthält Kristallviolett-Galle (VRB) Nährstoffe, ein kaltwasserlösliches Geliermittel, einen Indikator für die Glucuronidase Aktivität (5-Brom-4-chlor-3-indolyl-b-D-glucuronid) und einen Tetrazolium-Indikator zur leichteren Zählung der Kolonien. Petrifilm EC- Platten werden zur Zählung von E. coli und coliformen Keimen in der Lebensmittel- und Getränkeindustrie eingesetzt. Petrifilm EC- Platten wurden dekontaminiert, aber nicht sterilisiert. 3M Lebensmittelsicherheit ist ISO (International Standards Organization) 9001 zertifiziert.

WARNHINWEISBenutzen Sie diese Platte nicht zur Zählung von E. coli O157. Wie andere E. coli/ Coliforme- Nährmedien zeigt auch diese Platte nicht die Anwesenheit von O157 an. Die meisten O157 verhalten sich als atypische E. coli und werden deshalb als Nicht-E. coli Coliforme (rote Kolonie mit Gasbildung) zu erkennen sein.

ACHTUNG 3M hat die Petrifilm EC- Platten nur für den Gebrauch in der Lebensmittel- und Getränkeindustrie dokumentiert. Die Petrifilm EC- Platten sind deshalb nicht zum Testen von Wasser, Pharmazeutika oder Kosmetika freigegeben.

Petrifilm EC- Platten wurden nicht mit allen erdenklichen Lebensmittelprodukten, Lebensmittelverarbeitungsprozessen, Testprotokollen oder allen möglichen Stämmen von E. coli oder anderen Bakterien getestet.

Petrifilm EC- Platten wurden nach den Richtlinien von AOAC/ NordVAL evaluiert und erfüllen die Validierungskriterien in repräsentativem Probenmaterial der folgenden Lebensmittelkategorien: Gemüse, Fleisch, Milchprodukte und verarbeitete Nahrungsmittel.

Petrifilm EC- Platten können nicht zwischen einzelnen coliformen Stämmen bzw. zwischen einzelnen E. coli Stämmen differenzieren.

Petrifilm EC- Platten nicht für Diagnostikzwecke bei Mensch oder Tier verwenden.

Für Informationen zu Dokumentationen über ein bestimmtes Produkt wenden Sie sich bitte an Ihren autorisierten Vertreter für 3M Lebensmittelsicherheit.

VERANTWORTLICHKEIT DES BENUTZERSEs gibt kein Nährmedium, welches im direkten Vergleich mit einem anderen Medium immer exakt die gleichen Stämme zeigt, bzw. von einem bestimmten Stamm immer die gleichen Zählergebnisse hervorbringt. Es liegt in der Verantwortung des Benutzers bei der Auswahl einer Testmethode diese mit einer ausreichenden Anzahl von Proben für bestimmte Lebensmittel und mikrobielle Anforderung zu prüfen, damit er die Gewissheit hat, dass die gewählte Methode seinen Anforderungen entspricht.

Der Benutzer ist verantwortlich dafür, festzustellen, ob die Testmethode und deren Ergebnisse den Anforderungen seiner Kunden oder Lieferanten entspricht.

Der Benutzer ist ebenfalls verantwortlich für die Feststellung, daß die angewendeten Testmethoden und Ergebnisse den Anforderungen seiner Kunden und Lieferanten entsprechen.

Wie jedes andere Kulturmedium bilden die Ergebnisse mit Petrifilm EC- Platten keine Garantie für die Qualität der Lebensmittel- oder Getränkeprodukte, bzw. Prozesse, die mit diesen Platten getestet wurden.

Der Benutzer muß sein Personal in den jeweiligen Testmethoden unterweisen: Zum Besipiel: Good Laboratory Practices (U.S. Food and Drug Administration, Title 21, Part 58 of the Code of Federal Regulations) oder ISO 17025.

HAFTUNGS- / GEWÄHRLEISTUNGSBESCHRÄNKUNGENSOWEIT DEM NICHT GESETZLICHE VORSCHRIFTEN ENTGEGENSTEHEN ÜBERNIMMT 3M WEDER EINE AUSDRÜCKLICHE NOCH EINE STILLSCHWEIGENDE GEWÄHRLEISTUNG FÜR DAS GELIEFERTE PRODUKT. DAS BEINHALTET AUCH, IST ABER NICHT BESCHRÄNKT, AUF DIE VERMARKTUNGSFÄHIGKEIT ODER DIE EIGNUNG ZU EINEM BESTIMMTEN ZWECK. Eine fehlerhafte 3M Petrifilm-Platte wird durch 3M oder deren autorisierten Fachhändler ersetzt, bzw. der Kaufpreis zurückerstattet. Das sind Ihre exklusiven Gewährleistungsansprüche. Sie müssen jeden vermeintlichen Schaden innerhalb von 60 Tagen nach dem dieser bekannt wurde bei 3M melden und das Produkt an 3M zurücksenden. Bitte rufen Sie dazu den Kundenservice (z.B. 1-800-328-1671 in den USA) oder Ihren autorisierten Vertreter für 3M Lebensmittelsicherheit an, und sprechen Sie mit ihm über die Rücksendung der Ware.

HAFTUNGSBESCHRÄNKUNG VON 3MSOWEIT DEM NICHT GESETZLICHE VORSCHRIFTEN ENTGEGENSTEHEN; WIRD 3M DEM ANWENDER ODER ANDEREN GEGENÜBER KEINE HAFTUNG FÜR VERLUST ODER SCHÄDEN, SEI ES DURCH DIREKTE- ODER INDIREKTE-; SPEZIELLE-, ZUFÄLLIGE- ODER FOLGESCHÄDEN ÜBERNEHMEN. DAS BEINHALTET AUCH, IST ABER NICHT BESCHRÄNKT, AUF VERLORENEN GEWINN. Soweit es kein explizites gesetzliches Verbot gibt, wird 3M in keinem Fall haftbar für einen Schaden sein, der den Kaufpreis der reklamierten beschädigten Platten überschreitet. Kunden können durchaus noch zusätzliche Rechte haben. Um diese in Anspruch zu nehmen, sollten Sie eine Rechtsauskunft im Lande des Kaufs einholen.

(Deutsch)

2

LAGERUNG UND ENTSORGUNG Petrifilm - Platten in ungeöffneten Beuteln gekühlt oder gefroren bei £8°C lagern. Den verschlossenen Beutel vor dem Öffnen auf Raumtemperatur erwärmen lassen. Nicht verwendete Platten wieder zurück in den Beutel legen. Den Beutel durch Umfalten des geöffneten Endes und Abkleben dicht verschliessen. Die bereits geöffneten Beutel dürfen nicht mehr im Kühlschrank gelagert werden, da sonst die Platten der Feuchtigkeit ausgesetzt wären. Die wieder verschlossenen Beutel nicht länger als einen Monat an einem trocknen und kühlen Platz aufbewahren. Falls die Labortemperatur 25°C (77°F) überschreitet und/oder das Labor in einer Region mit ≥ 50% relativer Luftfeuchte liegt, wird empfohlen, die wieder verschlossenen Beutel im Gefrierschrank zu lagern.

Dazu ist es notwendig, dass der bereits geöffnete Beutel mit den Petrifilm Platten zugeklebt und in einem verschließbaren Behälter gelagert wird. Bei Bedarf wird die benötigte Anzahl der gefrorenen Platten aus dem Behälter entnommen, und die restlichen Platten sofort wieder im verschlossenen Behälter eingefroren. Petrifilm-Platten nicht mehr nach Ablauf des Verfalldatums verwenden. Bitte beachten Sie, dass der Gefrierschrank keine automatische Abtaufunktion hat, da sonst die Platten durch eine wiederholte Feuchtigkeitsbelastung beschädigt werden können.

Benutzen Sie keine verfärbten Platten. Verfallsdatum und LOT – Nummer sind auf jeder Petrifilm Packung und jedem einzelnen Petrifilm angegeben. Die Lotnummer ist ebenfalls auf den einzelnen Platten angegeben.

Nach Gebrauch können die Petrifilm EC- Platten mit Mikroorganismen kontaminiert sein, und somit ein biologisches Gefährdungspotenzial darstellen. Die Platten entsprechend den jeweils gültigen Vorschriften und Gesetzen entsorgen.

GEBRAUCHSANLEITUNGVorbereiten der Probe 1. Nur geeignete sterile Verdünnungsmittel benutzen:

Butterfield´s Phosphatpuffer,1,2 0,1% Peptonwasser, Peptonsalzlösung,3 -starke Ringerlösung,4 Kochsalzlösung (0,85- 0,90%), bisulfitfreie Letheenbouillion oder destilliertes Wasser.

Keine Puffer benutzen, die Citrat, Bisulfit oder Thiosulfat enthalten. Sie können das Wachstum der Keime hemmen. Falls in der Standardmethode Citratpuffer vorgegeben wird, benutzen Sie statt dessen einen der oben aufgelisteten Puffer und wärmen Sie diesen auf 40-45°C vor.

2. Die Probe mischen oder homogenisieren.

3. Um optimale Wachstumsbedingungen zu erzielen, sollte der pH-Wert der Probe auf 6,6 – 7,2 eingestellt werden. Bei saueren Produkten pH mit 1N NaOH, bei alkalischen Produkten mit 1N HCl einstellen. Probe auf der Platte verteilen.

Beimpfen

1. Die Petrifilm EC- Platte auf eine flache Oberfläche legen.

2. Den oberen Film abheben und 1 ml der Probe in die Mitte des unteren Films pipettieren.

3. Rollen Sie den oberen Film langsam auf die Probe, um den Einschluß von Luftblasen zu vermeiden.

4. Den Stempel aus Plastik mit der flachen Seite nach unten auf die Mitte der Platte legen. Stempel leicht andrücken und Probe gleichmäßig verteilen. Die Probe muss über den vollständigen Wachstumsbereich der Platte verteilt sein, bevor sich das Gel verfestigt. Den Stempel nicht über den Film schieben.

5. Den Stempel wegnehmen und die Platte zur Gelbildung mindestens 1 Minute liegen lassen.

Inkubation

Die Platten werden in horizontaler Lage mit der durchsichtigen Seite nach oben bebrütet. Dabei dürfen maximal 20 Platten übereinander gestapelt werden. Abhängig von der örtlichen Referenzmethode können unterschiedliche Inkubationszeiten und Inkubationstemperaturen benutzt werden.

Zum Beispiel:


(998.08 Confirmed Escherichia coli Counts in Poultry, Meats and Seafood, Dry Rehydratable Film Method)

Petrifilm EC-Platten 24h ± 2h bei 35°C ± 1°C inkubieren.


(991.14 Coliform and Escherichia Coli Counts in Foods. Dry Rehydratable Film Methods)

Zur Bestimmung der coliformen Keime, Petrifilm EC- Platten 24h ± 2h bei 35°C ± 1°C inkubieren.

Zur Bestimmung von E. coli Petrifilm EC- Platten nochmals 24h ± 2h (48h ± 4h Gesamtdauer) bei 35°C ± 1°C inkubieren.

Interpretation

1. Petrifilm EC- Platten können mit einem Standardkoloniezähler oder unter einer vergrößernden Lichtquelle gezählt werden. Kolonien auf dem Schaumstoffrand werden nicht berücksichtigt, da sie dem direkten Einfluss des selektiven Nährmediums entzogen sind. Zählen Sie auch keine künstlich durch falsches Beimpfen erzeugte Gasblasen.

Die Interpretation, welche Kolonien als E. coli auf der Petrifilm EC- Platte gezählt werden, hängt von der Methode ab. Zum Beispiel:

AOAC Official Methods (998.08 and 991.14) –Zähle alle blauen bis rot-blauen Kolonien mit eingeschlossenem Gas als E. coli, ungeachtet ihrer Größe oder Farbintensität. Blaue Kolonien ohne Gas werden nicht als E. coli gezählt.

3

Andere Coliforme sind rot und stehen eng (innerhalb eines Koloniedurchmessers) mit eingeschlossenem Gas in Verbindung. Kolonien, die nicht direkt mit einer Gasbildung in Verbindung stehen (mehr als ein Koloniedurchmesser entfernt) werden nicht als Coliforme gezählt. Als Gesamtcoliforme werden sowohl die roten -, als auch die blauen Kolonien mit Gasbildung nach 24 h gezählt. Sobald innerhalb der validierten Inkubationszeit irgendeine blaue Kolonie mit Gasbildung zu erkennen ist, wird sie als E. coli bestätigt.

Achtung: Benutzen Sie diese Platte nicht zur Zählung von E. coli O157. Die meisten E. coli O157 Stämme verhalten sich atypisch auf Petrifilm EC-Platten und werden deshalb nicht erfasst. Zum Beispiel zeigen sie keine Glucuronidase Aktivität und somit keine blaue Färbung.

2. Der kreisförmige Wachstumsbereich ist etwa 20cm2 groß. Für Platten die mehr als 150 Kolonien aufweisen, kann eine Schätzung vorgenommen werden. Dazu werden die Kolonien in einem oder mehreren repräsentativen Quadraten ausgezählt und der Durchschnittswert pro Quadrat ermittelt. Zur Bestimmung der geschätzten Keimzahl auf der Platte wird der Durchschnittswert mit 20 multipliziert.

3. Bei einer hohen Koloniezahl können die Petrifilm EC-Platten eine oder mehrere der folgenden Eigenschaften aufweisen: Eine Verstärkung der Gelfarbe bei vielen kleinen nicht unterscheidbaren Kolonien und vielen Gasblasen. Hohe Konzentrationen von E. coli können den gesamten Wachstumsberiech blau färben, während hohe Konzentrationen von Coliformen (nicht E. coli) zu einer dunkelroten Färbung des Wachstumsbereiches führen. Falls dies zutrifft, wird als Ergebnis als DZZZ („der Zählung zu zahlreich“) notiert. Zur Keimzählung muss die Platte mit einer höheren Verdünnung angesetzt werden.

4. Kolonien können zur weiteren Identifikation isoliert werden. Dazu einfach die obere Folie anheben und die Kolonie aus dem Gel entnehmen. Zur weiteren Spezifikation Standardmethoden benutzen.

5. Falls die Platten nicht innerhalb einer Stunde nach Entnahme aus dem Inkubator ausgewertet werden können, kann man diese für eine spätere Auswertung bis zu einer Woche in einem verschließbaren Behälter im Gefrierschrank bei ≤ -15°C lagern.

Bitte beachten Sie die Interpretationshilfen für weitere Einzelheiten. Sollten Sie Fragen über bestimmte Anwendungen oder Verfahren haben, wenden Sie sich bitte an den nächsten autorisierten Vertreter von 3M Lebensmittelsicherheit.

Quellenangaben

1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.


3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products – General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions and decimal dilutions for microbiological examination.

Erklärung der Symbole

• Achtung, siehe Gerbrauchsanweisung

• Die mit einem Rahmen versehenen Buchstaben „LOT“ und die Sanduhr sind grafische Symbole für die Begriffe „Chargenbezeichnung“ und „Verwendbar bis...“. Hinter dem Symbol Sanduhr folgt die Angabe des Jahres und Monats des jeweiligen Verfallsdatums (Jahr und Monat: 2010-10). Die vollständige Zeile hinter der Sanduhr stellt die Chargenbezeichnung dar (2010-10 AZ).

• Nur unterhalb der angegebenen Temperatur lagern.

AOAC® ist das eingetragene Warenzeichen von AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM ist die Handelsmarke von AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ








3


3M und Petrifilm sind Warenzeichen von 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


Piastra per il conteggio E. coli / ColiformiDESCRIZIONELa piastra 3M™ Petrifilm™ E. coli / Coliformi (EC) è un sistema con terreno di coltura pronto per l’uso che contiene nutrienti Violet Red Bile (VRB), una sostanza gelificante solubile in acqua fredda, un indicatore dell’attività della glucoronidasi, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-glucuronide (BCIG), ed un indicatore al tetrazolio atto a facilitare il conteggio delle colonie. Le piastre Petrifilm EC sono utilizzate per il conteggio di E.coli e dei coliformi nelle industrie alimentari e delle bevande. I componenti delle piastre Petrifilm EC sono decontaminate seppure non sterilizzate. 3M Sicurezza degli alimenti è certificata ISO (International Standards Organization) 9001.

AVVERTENZANon utilizzare questa piastra per l’individuazione di E.coli 0157. Come la maggior parte delle colture per E. Coli/coliformi, questa piastra non evidenzia la presenza di ceppi 0157. Poichè la maggior parte dei ceppi 0157 sono E. Coli atipici, essi appaiono come coliformi diversi da E. Coli (rossi con gas).

ATTENZIONE 3M non ha documentato l’uso delle piastre Petrifilm EC nell’ambito delle industrie diverse da quelle alimentari e lattiero casearie. Ad esempio 3M non ha documentato l’uso delle piastre Petrifilm EC per l’analisi dell’acqua, di sostanze farmaceutiche o cosmetiche.

Le piastre Petrifilm EC non sono state testate con tutti i prodotti alimentari ed i protocolli di analisi possibili, con tutti i possibili ceppi di E.coli o altri batteri.

Le piastre Petrifilm EC sono state valutate seuendo le linee guida AOAC / NordVal e hanno soddisfatto i criteri di validazione in campioni rappresentativi nelle seguenti categorie di cibi: Vegetali, carne, prodotti lattiero caseari e alimenti lavorati.

Le piastre Petrifilm EC non differenziano tra loro nè i coliformi nè i diversi ceppi di E.coli.

Non utilizzare le piastre Petrifilm EC per la diagnosi di condizioni patologiche in esseri umani o animali.

Per informazioni sulla documentazione riguardante laperformance del prodotto rivolgersi al rappresentante ufficiale di zona di 3M Prodotti per la Sicurezza degli alimenti.

RESPONSABILITA’ DELL’UTENTENessun terreno di coltura darà gli stessi risultati rispetto ad un altro terreno di coltura in termini di stessi ceppi identificati o di esatta enumerazione di un ceppo. Inoltre fattori esterni come i metodi di campionamento, i protocolli di analisi, il tempo di preparazione e di maneggiamento possono influenzare l’enumerazione.

E’responsabilità dell’utente, nel selezionare un metodo di analisi,valutare un sufficiente numero di campioni, che presentano particolari caratteristiche alimentari o microbiche, al fine di soddisfare i criteri da se stesso stabiliti.

L’utente ha inoltre la responsabilità di determinare che tutti i metodi di analisi utilizzati ed i risultati ottenuti soddisfino i requisiti del proprio cliente o fornitore.

Come per altri terreni di coltura, i risultati delle analisi effettuate con piastre Petrifilm EC non costituiscono una garanzia di qualità per cibo o prodotti lattiero caseari o prodotti processati.

L’utente deve addestrare il proprio personale nelle tecniche di analisi appropriate Per esempio, Good Laboratory Practices (U.S. Food and Drug Administration, Title 21, Part 58 of the Code of Federal Regulations) o ISO 17025.

GARANZIA LIMITATA/RIMEDI LIMITATIFATTA ECCEZIONE PER I CASI ESPERESSAMENTE NON PREVISTI DALLA LEGGE LA 3M NON RICONOSCE ALCUNA ALTRA GARANZIA ESPLICITA O IMPLICITA, INCLUSE, MA NON AD ESSE LIMITATE, LE EVENTUALI GARANZIEMDI COMMERCIABILITA’ O DI IDONEITA’ AD UNO SCOPO PARTICOLARE. La 3M sostituirà o, a propria discrezione, rimborserà il prezzo di acquisto di qualsiasi piastra Petrifilm non conforme a quanto esperesso nella garanzia esplicita fornita dalla 3M. Questi sono i rimedi esclusivi. L’utente deve notificare entro sei giorni dall’acquisto qualsiasi sospetta non conformità del prodotto e restituire quest’ultimo alla 3M. Chiamare il servizio clienti (negli USA: 1-800-328-1671) o rivolgersi al rappresentante autorizzato dalla 3M per i prodotti per la Sicurezza degli alimenti per ottenere l’autorizzazione alla restituzione del prodotto.

LIMITAZIONE DELLA RESPONSABILITA’FATTA ECCEZIONE PER I CASI ESPERESSAMENTE NON PREVISTI DALLA LEGGE, LA 3M NON SI RITERRA’ RESPONSABILE DI QUALSIASI ALTRO DANNO DIRETTO, INDIRETTO, SPECIALE, CONSEGUENTE O INCIDENTALE, INCLUSA, MA NON AD ESSA LIMITATA, LA PERDITA DI PROFITTI. Ad eccezione di quanto proibito dalla legge, in nessun caso la responsabilità della 3M sotto ogni teoria legale è da considerarsi in difetto quando viene superato il prezzo di acquisto delle piastre. Il cliente può avere ulteriori diritti cui deve fare riferimento nel paese in cui è avvenuto l’acquisto.

(Italiano)

2

CONSERVAZIONE ED ELIMINAZIONE Conservare le buste di Petrifilm ancora chiuse in frigorifero o congelatore a temperature ≤ 8ºC (46ºF). Prima di aprire la busta, portare il prodotto a temperatura ambiente. Dopo l’apertura, le piastre inutilizzate vanno conservate nella busta originale. Sigillare le buste ripiegandone l’apertura e facendo aderire il nastro adesivo. Al fine di impedire l’esposizione all’umidità, non refrigerare confezioni aperte. La busta aperta e sigillata va conservata in un luogo fresco e asciutto e le piastre vanno utilizzate enrto un mese dall’apertura. Si raccomanda di conservare le confezioni risigillate nel congelatore(vedi sotto) se la temperatura in laboratorio supera i 25°C e/o il laboratorio è posto in un luogo dove l’umidità relativa supera il 50% (ad eccezione dei laboratori dotati di aria condizionata).

Per conservare le buste aperte in freezer, richiuderne con nastro adesivo l’estremità aperta e inserirle in un contenitore sigillabile. Per l’utilizzo delle piastre Petrifilm aprire il contenitore, togliere le piastre necessarie e immediatamente rimettere le rimanenti in freezer nel contenitore sigillato. Le piastre non andrebbero utilizzate successivamente alla data di scadenza. Il freezeer in cui riporre le piastre non deve essere dotato di ciclo di sbrinamento in quanto questo comporterebbe una ripetuta esposizione delle piastre all’ umidità che le danneggia.

Non utilizzare piastre in presenza scolorimenti. La data di scadenza ed il lotto sono riportati su ciascuna confezione di piastre Petrifilm. Il numero di lotto è riportato anche su ciascuna piastra.

Dopo l’uso le piastre Petrifilm EC possono contenere microrganismi che possono essere di potenziale pericolo biologico. Seguire le direttive correnti per l’industria in materia di smaltimento.

ISTRUZIONI PER L’USOPreparazione del campione 1. Usare i diluenti sterili appropriati:

Tampone fosfato di Butterfield1, 2, acqua peptonata allo 0,1%, diluente salino peptonato3, soluzione di Ringer alla quarta potenza4, soluzione salina (allo 0,85- 0,90%), brodo letheen privo di bisolfito di sodio o acqua distillata.

Non utilizzare tamponi contenti citrato o tiosolfato di sodio con le piastre Petrifilm. Se un tampone citrato è indicato nella procedura, sostituirlo con tampone fosfato Butterflied riscaldato a 40-45°C.

2. Micelare ed omogenizzare il prodotto.

3. Per una crescita ottimale ed un a ripresa della vitalità dei microrganismi, regolare il pH della sospensione del campione tra 6,6 –7,2. Per prodotti acidi regolare il pH con 1 N NaOH. Per prodotti alcalini regolare il pH con 1 N HCl.

Distribuzione del campione sulla piastra

1. Collocare la piastra Petrifilm EC su una superficie piana.

2. Sollevare la pellicola superiore e dosare 1 ml di campione o campione diluito sul centro della pellicola inferiore.

3. Abbassare la parte superiore della pellicola al fine di impedire l’intrappolamento di bolle d’aria.

4. Collocare il diffusore di plastica con la parte convessa rivolta verso il basso, sul centro della piastra. Applicare una leggera pressione sulla parte centrale del diffusore per distribuire il prodotto uniformemente. Distribuire l’inoculo su tutta la superficie destinata alla coltura prima che il gel si sia formato. Non fare scorrere il diffusore sulla pellicola.

5. Rimuovere la spatola e lasciare la piastra indisturbata per almeno 1 minuto per consentire la solidificazione del gel.

Incubazione

Incubare le piastre in posizione orizzontale, con la faccia trasparente rivolta verso l’alto, in pile di non più di 20 piastre. A seconda dei metodi di riferimento si possono utilizzare diversi tempi e temperature.

Per esempio:


(998.08 Conferma del conteggio di Escherichia coli in pollame, carne e alimenti ittici, metodo con film plastico reidratabile)

Incubare le piastre Petrifilm EC per 24 ± 2 h a 35°C ± 1°C

AOAC Official MethodsSM

(991,14 Conteggio dei coliformi e di E. coli nel cibo, metodi con film plastico reidratabile)

Per ottenere risultati sui coliformi incubare le piastre Petrifilm EC 24 h ± 2 h a 35ºC ± 1ºC.

Per ottenere risultati su E. coli incubare le piastre Petrifilm EC per altre 24 h ± 2 h (in tutto 48 h ± 4 h) a 35ºC ± 1ºC

Interpretazione

1. Le piastre Petrifilm EC possono essere sottoposte a conteggio mediante un conta colonie standard o un’altra sorgente di luce ingrandita. Non contare le colonie presenti sul film superiore dal momento che sono lontane dall’influenza selettiva del terreno. Non contare le bolle artefatte che possono essere presenti.

L’interpretazione delle colonie di E.coli sulle piastre EC varia a seconda del metodo utilizzato. Per esempio:

AOAC Official Methods (998.08 and 991.14) – Le colonie dal blu al blu rossastro, associate a bollicine di gas intrappolato, indipendentemente dalle loro dimensioni o dall’intensità del loro colore, vengono conteggiate come E. coliconfermati. Le colonie blu prive di gas non vengono conteggiate come E.coli.

3

Altre colonie di coliformi sono rosse e strettamente vicine (al Massimo ad una distanza pari al diametro della colonia) a bolle di gas. Le colonie non associate a bolle di gas (la distanza tra la colonia e la bolla in tal caso deve essere maggiore al diametro della colonia) non vengono conteggiate come coliformi. Il conteggio totale dei coliformi si effettua su entrambe le colonie blu e rosse associate a bolle di gas allo scadere delle 24 ore. Indipendentemente dal tempo di incubazione del metodo validato, tutte le colonie blu associate a bolle di gas sono E.coli confermati.

Avvertenze: Non utilizzare questa piastra per l’individuazione di E. coli 0157. Poichè la maggior parte dei ceppi di E. coli 0157 sono atipici, essi sono gluxcuronidasi negativi, non produrranno una colorazione blu e non verranno individuati dalle piastre Petrifilm EC.

2. La superficie dell’area di crescita circolare è di circa 20 cm2. E’ possible stimare i conteggi su piastre contenti più di 150 colonie contando il numero di colonie presenti in uno o più quadratini rappresntativi e determinando il numero medio per quadratino. Moltiplicare quindi il numero medio così ottenuto per 20 al fine di determinare il conteggio totale per la piastra.

3. Quando le colonie sono presenti in numero elevato, le piastre Petrifilm EC possono presentare una o più delle seguenti caratteristiche: una intensificazione del colore del gel con diverse colonie indistinte; e svariate bolle di gas. Alte concentrazioni di E.coli causano un viraggio dell’area verso il blu, mentre elevate concentrazioni di coliformi (non E. coli) causano un viraggio dell’area verso ilrosso scuro. Quando si verifica questa situazione il risultato è troppo numerose per essere contate (TNTC). Nel caso in cui sia necessario un conteggio preciso, seminare una diluizione maggiore.

4. Se è necessaria un conteggio più preciso seminare una diluizione più elevata. Allo scopo di isolare le colonie per un’ulteriore identificazione,sollevare la pellicola superiore ed asportare la colonia dal gel. Analizzare con procedura standard.

5. Se le piastre non possono essere esaminate entro un’ora da quando sono rimosse dall’incubatore, congelarle per non più di una settimana a temperature £ minori o uguali a 15°C all’interno di un contenitore sigillato.

Per ulteriori informazioni fare riferimento alla “Guida all’Interpretazione”. In caso di quesiti su applicazioni o procedure specifiche specifiche, rivolgersi al rappresentante autorizzato dei prodotti Sicurezza degli alimenti 3M della zona.

Riferimenti1. FDA. 1998. Manuale di analisi batteriologica, ottava edizione, Revisione A, Appendice 3.64.

2. Organizzazione Internazionale per la Standardizzazione, ISO 6887-1:1999. Microbiologia del cibo e argomenti di nutrizione animale – Preparazione dei campioni da analizzare, sospensione iniziale e diluizioni decimali per l’esame microbiologico.

3. Organizzazione Internazionale per la Standardizzazione, ISO 8261:2001. Latte e prodotti del latte – Guida generale per la preparazione dei campioni da analizzare, sospensione iniziale e diluizioni decimali per l’esame microbiologico.

Legenda simboli

• Attenzione, vedere le istruzioni per l’uso

• I simboli del lotto sulla confezione e dell’orologio rappresentano rispettivamente il numero del lotto e la data di scadenza. Il simbolo dell’orologio è seguito dall’anno e dal mese che costituiscono la data di scadenza (anno e mese: 2010-10). La linea intera al di sotto dell’orologio costituisce il numero di lotto (2010-10 AZ).

• Conservare al di sotto della temperatura ambiente.

AOAC® è un marchio registrato di AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM è un marchio di servizio di AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ








3


3M e Petrifilm sono marchi della 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1

6404/6414

(Español)

3M™ Petrifilm™

Placas para el Recuento de E.coli / ColiformesDESCRIPCIONLas Placas Petrifilm™ para Recuento de E. coli/ Coliformes (EC) es un medio de cultivo listo cuyo sistema contiene nutrientes, Rojo Bilis Violeta (VRB) un agente gelificante soluble en agua fría, un indicador de la actividad glucoronidasa, 5 bromo-4-cloro-3-indolyl-b-D- glucuronido (BCIG) y el indicador tretazolium que facilita la enumeración de las colonias. Las Placas Petrifilm para el Recuento de EC son utilizadas para la enumeración de E.coli y coliformes en la industria de alimentos y bebidas. Los componentes de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC no son esterilizados pero si son descontaminados. El departamento de Seguridad alimentaria 3M se encuentra certificado por las normas ISO 9001(Organización de Estándares Internacionales).

ADVERTENCIANo use las placas para determinar E. coli O157. Tales como otros medios para E. coli/coliformes, ya que estas placas no contienen un indicador especifico para detectar alguna cepa de E. coli O157 que pudiera desarrollarse. Por lo que las cepas E. coli O157 son atípicas, y ellas pudieran aparecer como Coliformes y no como E. coli (colonias de color rojo con producción de gas).

PRECAUCIONES 3M™ no ha documentado el uso de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC para otras industrias que no sean de alimentos o bebidas. Por ejemplo, 3M no ha documentado el uso de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC para realizar análisis de aguas, cosméticos u otros productos farmacéuticos.

El uso de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC no han sido evaluadas para analizar todos los alimentos, productos alimenticios, procesamiento alimenticios, análisis protocolares o para todas las posibles cepas de E.coli u otras bacterias.

Las Placas Petrifilm para el Recuento de EC han sido evaluadas mediante los lineamientos de la AOAC/AFNOR/NordVal y criterios de validación de muestras representativas de las siguientes categorías de alimentos: Vegetales, cárnicos, lácteos y alimentos procesados.

Las placas Petrifilm EC no son diferenciadoras para ninguna cepa de Coliformes ó de alguna cepa de E. coli.

No utilice las Placas Petrifilm para el Recuento de EC para diagnósticos en humanos o animales.

Para más información o documentos adicionales sobre este producto contáctese con su representante de Seguridad alimentaria de 3M.

RESPONSIBILIDADES DE USONingún medio de cultivo podrá siempre recuperar las mismas cepas exactamente o enumerar exactamente una cepa en particular. Adicionalmente factores externos tales como los métodos de muestreo, protocolos de análisis, tiempo de preparación y manipulación de la muestra influyen en la enumeración y recuperación de las bacterias.

Por lo que es responsabilidad del usuario la correcta utilización del método aplicado para el análisis así como la suficiente cantidad de muestras de un alimento en particular para poder obtener resultados confiables.

Por lo tanto el usuario será el responsable de determinar su método de análisis y satisfacer sus necesidades y las del cliente además determinar los requerimientos con los proveedores.

Ningún medio de cultivo, ó las Placas Petrifilm para el Recuento de EC constituyen una garantía de calidad en los productos ó procesos de alimentos o bebidas.

Para el uso deberá capacitarse y entrenarse al personal acerca de las técnicas de análisis: Por ejemplo, El Manual de Buenas Prácticas de Laboratorio (E.E.U.U. Administración de Drogas y Alimentos, Titulo 21, Parte 58 del Código de Regulaciones Federales) o ISO 17025.

RECHAZO DE GARANTIAS / LIMITESAL MENOS QUE SE PROHIBA POR LA LEY, 3M RECHAZA TODA GARANTIA INCLUIDA, IMPLICADA Y EXPRESA, PERO NO LIMITADA, ALGUNA GARANTIA DE COMERCIALIZACION O INADECUADO USO. Si alguna Placa Petrifilm ha sido defectuosa, 3M ó su distribuidor autorizado la reemplazara ó reembolsar el dinero de acuerdo al precio del producto. Estos son rectificaciones exclusivas. Por lo que deberá dirigirse rápidamente y notificar a 3M dentro de los 60 días de descubrir algún defecto del producto y entregarlo a 3M. Contáctese con Servicio al Cliente (1-800-328-1671 en EEUU) ó con su representante de Seguridad alimentaria de 3M para obtener Autorización de Devolución.

LIMITACION DE 3MAL MENOS QUE LO PROHIBA LA LEY, 3M NO TENDRA NINGUNA RESPONSABILIDAD POR PERDIDAS, DAÑOS DIRECTOS O INDIRECTOS, ESPECIALES, INCIDENTALES O CONSECUENCIALES. Excepto donde lo prohíba la ley, la responsabilidad de 3M no excederá ninguna teoría legal acerca de precios por la compra de sus placas. Defectuosas. Los clientes tendrán además derechos adicionales deberán acercarse a los locales específicos de cada ciudad donde realizaron la compra.

2

DISPOSICION DE ALMACENAMIENTO Las Placas Petrifilm Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus sin abrir deben ser colocadas en fundas y ser almacenadas a temperaturas de refrigeración o congelación ≤8ºC (46ºF). Antes de su utilización, las fundas sin abrir deberán permanecer a temperatura del área donde serán abiertas. Retorne las placas sin utilizar a las fundas. Selle la funda por el doblez y coloque un adhesivo. Para evitar el ingreso de la humedad las fundas abiertas ya no serán refrigeradas. Las fundas reselladas serán colocadas en un lugar seco por no más de un mes. Esto se recomienda en fundas reselladas las placas Petrifilm™ deberán almacenarse en un congelador (refiérase abajo) si la temperatura del laboratorio excede los 25ºC (77ºF) y/o el laboratorio se localiza en una región con humedad relativa que excede al 50% (con excepción del aire acondicionado).

Las fundas abiertas pueden almacenarse en un congelador, dentro de un contenedor. Para remover las placas de congelador para su uso, abra el contenedor, remueva las placas que necesita e inmediatamente retorne las placas al congelador en el contenedor sellado. Las placas que presenten fecha de expiración no deberán ser utilizadas. El congelador utilizado para almacenar las placas deberá contener un sistema de ciclo automático defrost para evitar la exposición de las placas a la humedad y de modo que no se dañaran las placas.

No utilice placas que presente decoloración. Ni placas que no presentan la fecha de expiración o un número claro de lote. Él número de lote es colocado individualmente sobre cada placa.

Luego de utilizar las Placas Petrifilm para el Recuento de EC estas pueden contener microorganismos que pueden ser un riesgo biológico potencial. Siga los estándares industriales para desechar las placas.

INSTRUCCIONES DE USOPreparación de la muestra 1. Uso apropiado de diluyentes estériles:

Buffer1,2 fosfato Butterfield, Agua de peptona 0.1%, Agua3 Peptonada Salada, Solución4 Ringer con un cuarto de concentración, Solución Salina (0.85 – 0.90%), Caldo Letheen libre de bisulfito ó Agua Destilada.

No utilice diluyentes que contengan citrato, bisulfito ó tiosulfato en placas Petrifilm; ya que ellos pueden inhibir el crecimiento microbiológico. El bufer citrato es un indicativo en el procedimiento estándar, el cual es sustituido con uno o más buferes de la lista mencionada, caliente a una temperatura de 40-45°C.

2. Homogenice la muestra.

3. Para un óptimo crecimiento y recuperación de microorganismo, ajuste el pH de la muestra diluida de 6.6 - 7.2. Para productos ácidos, ajuste el pH con una solución 1 Normal (1N ) de Hidróxido de Sodio (NaOH.) Para productos alcalinos, ajuste el pH con una solución 1Normal (1N ) de Acido Clorhídrico (HCl.)

Inoculación1. Coloque las Placas Petrifilm para el Recuento de EC sobre una superficie plana y lisa.

2. Levante la lamina superior y con la pipeta perpendicular dispense 1 mL de la muestra en el centro del botón de la lamina.

3. Deje caer la lámina hacia abajo sobre la muestra, evite la formación de burbujas de aire.

4. Coloque el esparcidor plástico con el lado plano hacia abajo sobre el centro de la lamina. Presione cuidadosamente sobre el centro y distribuya cuidadosamente la muestra. Distribuya el inoculo en la Placa Petrifilm sobre el área de crecimiento antes de que se forme el gel. No deslice el esparcidor a través de la lámina.

5. Remueva el esparcidor de la placa y espere que se gelatinice la placa.

Incubación

Incube las placas horizontalmente con el área limpia hacia arriba y no más de 20 placas una sobre otra. Tiempos severos de incubación y temperaturas pueden utilizarse dependiendo de la localidad y los métodos referenciales.

Por ejemplo:

MétodoSM Oficial AOAC® (Método de lamina Rehidratable 998.08 para Recuento y Confirmación de Escherichia coli en Aves, Cárnicos, y Mariscos).

Incube las placas Petrifilm EC por 24 h ± 2 h a 35ºC ± 1ºC.

AOAC® MétodosSM Oficiales (Método de Lámina Rehidratable 991.14 para Recuento de Coliformes y Escherichia coli en Alimentos)

Para obtener los resultados de las Placas Petrifilm para Recuento de Coliformes (EC) incubar a 24 h ± 2 h at 35ºC ± 1ºC.

Para obtener los resultados de las Placas Petrifilm para Recuento de E.coli (EC) incubar a 24 h ± 2 h (48 h ± 4 h) a 35ºC ± 1ºC.

Interpretación

1. Las Placas Petrifilm para el Recuento de EC pueden utilizarse para el Conteo estándar de colonias ú otras magníficamente iluminas. No cuente las colonias con burbujas ya que estas pueden ser removidas del medio selectivo. No cuente las burbujas que puedan están presentes.

3

La interpretacion de las colonias de E. coli sobre las placas Petrifilm EC varia dependiendo del método utilizado. Por ejemplo:

Métodos Oficiales AOAC (998.08 y 991.14) Enumeración de colonias de color azul a rojo – azulado asociados con formacion de burbujas de gas sin tomar en cuenta la intensidad del color y el tamaño de la colonia, como confirmación de E.coli. Colonias azules sin gas no serán enumeradas como E.coli.

Otras colonias de coliformes son de color rojo asociadas (dentro de un diametro de la colonia) con burbujas de gas. Colonias no asociadas con gas ( con una distancia mas grande qie un diametro entre colonias y burbujas de gas) no serán enumeradas como coliformes. El recuento toal de coliformes consiste en enumerar las colonias rojas y azules asociadas con gas en 24 horas. En cualquier momento dentro del periodo de incubación de método de validación todas las colonias de color azul asociadas con gas, se confirmaran como E.coli.

Advertencia: No use las placas para determinar E. coli O157. Porque la mayoría de las variedades de E. coli O157 son atípicas, por ejemplo son glucuronidasa negativa, ya que estas no producirán un color azul, y no serán detectadas sobre las Placas Petrifilm para Recuento de EC.

2. El área de crecimiento circular es de aproximadamente 20 cm2. La cual puede ser estimada sobre las placas que contengan un crecimiento de 150 colonias en dos o mas cuadrados representativos determinándose además un número promedio por centímetro cuadrado. Multiplique el numero promedio por 20 y determine el Conteo estimado para cada placa.

3. Cuando existan una gran cantidad de colonias, las Placas Petrifilm para Recuento EC afectaran el color del gel presentando las siguientes caracteristicas: se presentan como colonias pequeñas, indistintas del color y /ó algunas burbujas de gas. Altas concentraciones de E.coli, causaran oscurecimiento en el área de crecimiento tornandose de color azul, mientras que altas concentraciones de coliformes, (no E.coli) causaran un oscurecimiento del área de crecimiento tornandose de color rojo oscuro. Cuando esto ocurre el Conteo es muy alto (TNTC.) Por lo tanto se deberán realizar mayor numero de diluciones.

4. Cuando sea necesario las colonias deberán serán aisladas para una mejor identificación. Levante la lamina superior y tome una colonia del gel. Realice el análisis según los Procedimientos estándares

5. Si la placa no puede contarse en 1 hora remueva la del incubador y almacénela en el congelador en una contenedor sellado para una enumeración posterior.

Para más información acerca de las placas Petrifilm refiérase a la “Guía de Interpretación” Si tiene alguna pregunta especifica sobre la aplicación o los Procedimientos de análisis contáctese con el representante de Seguridad alimentaria de 3M.

Referencias1. FDA. 1998. Manual de Análisis Bacteriológico, 8ava edición., Revisión A, Apéndice 3.64.

2. Organización de Estándares Internacionales, ISO 6887-1:1999. Microbiología de alimentos y para alimentos animales – Preparación de muestras de análisis, suspensión inicial y diluciones decimales para análisis microbiológicos.

3. Organización de Estándares Internacionales, ISO 8261:2001. Leche y productos lácteos – Lineamientos generales para la preparación de muestras, suspensiones iniciales y diluciones decimales para análisis microbiológicos.

Explicación de símbolos

• Atención, observe las instrucciones de uso

• El lote dentro de la caja y los símbolos representan el número de lote y la fecha de expiración. La hora registrada especifica el año y el mes el cual representa la fecha de expiración (año y mes: 2010-10). La línea después de la hora representa el número del lote. (2010 - 10 AZ).

• Almacenamiento a temperaturas bajas.

AOAC® Marca registrada por la AOAC INTERNACIONAL

Métodos OficialesSM es un servicio de marca de la AOAC INTERNACIONAL

2010-10 AZ








3


3M y Petrifilm son marcas registradas de 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


E. coli / Coliform Count PlaatBESCHRIJVINGDe 3M™ Petrifilm™ E. coli / Coliformen Count (EC) Plaat is een kant en klaar medium welke Violet Red Bile (VRB) voedingsstoffen bevat, een gel die in koud water oplosbaar is, een glucuronidase-gevoelige indicator, 5-broom-4-chloor-3-indolyl-b-D-glucuronide (BCIG) en een tetrazolium-indicator, die kolonietelling vergemakkelijkt. Petrifilm EC platen worden gebruikt voor de telling van E. coli en coliformen in de levensmiddelen- en drankenindustrie. Petrifilm EC plaat componenten zijn gedecontamineerd in plaats van gesteriliseerd. 3M Food Safety is ISO (International Standards Organization) 9001 gecertificeerd.

WAARSCHUWINGGebruik deze plaat niet voor de bepaling van E. coli O157. Zoals de meeste andere E. coli/coliform media, zal deze plaat niet specifiek laten zien of een 0157 stam aanwezig is. Omdat de meeste 0157 stammen atypische E. coli zijn, zullen zij voorkomen als niet-E.coli coliformen (rood met gas).

OPGELET 3M heeft de geschiktheid van Petrifilm EC platen voor gebruik in andere dan de levensmiddelen- en drankenindustrie niet aangetoond. Zo heeft 3M bijvoorbeeld de geschiktheid van Petrifilm EC platen niet aangetoond voor gebruik bij het testen van water, farmaceutische producten of cosmetica.

Petrifilm EC platen zijn niet getest met alle mogelijke voedingsmiddelen, voedselprocessen, testprotocollen of met alle mogelijke stammen van E. coli of andere bacteriën.

De Petrifilm EC plaat is beoordeeld volgens richtlijnen van AOAC / NordVal en voldoet bij representatieve monsters uit de volgende voedselcategorieën: groente, vlees, zuivelproducten en bereid voedsel.

Petrifilm EC platen maken geen onderscheid mogelijk tussen coliforme stammen onderling of tussen verschillende E. coli stammen.

Gebruik Petrifilm EC platen niet voor het stellen van de diagnose voor mensen of dieren.

Gegevens over de aantoonbare prestaties van het product kunt u krijgen bij uw officiële vertegenwoordiger van 3M Food Safety.

VERANTWOORDELIJKHEID VAN DE GEBRUIKERGeen enkel kweekmedium produceert precies dezelfde stammen of geeft telling van een bepaalde stam als een ander kweekmedium. Bovendien kan de groei of het aantal ook worden beïnvloed door externe factoren zoals wijze van bemonsteren, testprotocollen, voorbereidingstijd en behandeling.

De gebruiker is verantwoordelijk voor de selectie van een testmethode waarbij een voldoende aantal monsters met bepaalde voedingsmiddelen en microbiële problemen wordt onderzocht zodat de gekozen testmethode voldoet aan de criteria van de gebruiker.

De gebruiker is tevens verantwoordelijk voor het bepalen of de testmethoden en resultaten aan de eisen van zijn klanten of leveranciers voldoen.

Zoals bij elk medium zijn de uit Petrifilm EC platen verkregen resultaten geen garantie voor de kwaliteit van voedingsmiddelen, dranken of processen die met de platen worden getest.

De gebruiker moet zijn medewerkers scholen in de juiste testtechnieken: bijvoorbeeld Good Laboratory Practices (U.S. Food and Drug Administration, Title 21, Part 58 of the Code of Federal Regulations) of ISO 17025.

AFWIJZING VAN GARANTIE / BEPERKT VERHAALBEHALVE INDIEN BIJ WET VERBODEN, WIJST 3M ALLE UITDRUKKELIJKE EN STILZWIJGENDE GARANTIES AF, MET INBEGRIP VAN DOCH NIET BEPERKT TOT GARANTIES VAN VERKOOPBAARHEID OF GESCHIKTHEID VOOR EEN BEPAALD DOEL. Indien een 3M Petrifilm defect blijkt, zal 3M of haar gemachtigde distributeur naar haar keus de plaat vervangen of de aankoopprijs van de plaat terugbetalen. Dit is het enige verhaal waarover u beschikt. Indien u een defect vermoedt in een product, dan moet u 3M daarvan binnen 60 dagen na de ontdekking van het defect in kennis stellen en het product naar 3M terugsturen. Bel onze klantenservice (1-800-328-1671 in de V.S.) of uw erkende 3M Food Safety vertegenwoordiger, die u autorisatie voor het retourneren van de goederen zal geven.

BEPERKING VAN AANSPRAKELIJKHEID VAN 3MBEHALVE INDIEN BIJ WET VERBODEN, IS 3M NIET AANSPRAKELIJK VOOR VERLIEZEN OF SCHADE VAN GEBRUIKERS OF ANDEREN, HETZIJ DIRECTE, INDIRECTE, SPECIALE, INCIDENTELE OF GEVOLGSCHADE, MET INBEGRIP VAN DOCH NIET BEPERKT TOT WINSTDERVING. Behalve waar bij wet verboden, zal de aansprakelijkheid van 3M, onder welke rechtstheorie dan ook, nooit meer bedragen dan de aankoopprijs van de platen die naar verluidt defect zijn. Het is mogelijk dat de klant over bijkomende rechten beschikt, en hij/zij dient in het land van aankoop om raad te vragen.

OPSLAG EN VERWIJDEREN Sla ongeopende pakjes Petrifilm platen gekoeld of bevroren op bij een temperatuur van ≤ 8ºC (46ºF). Laat vlak voor gebruik de ongeopende pakjes vóór het openen op kamertemperatuur komen. Ongebruikte platen kunnen terug in het pakje. Sluit geopende pakjes door het einde om te vouwen en met tape af te sluiten. Sla, om blootstelling aan vocht te vermijden, geopende zakjes niet in de koelkast op. Bewaar opnieuw gesloten zakjes niet langer dan een maand op een koele droge plaats. Het wordt aanbevolen de opnieuw gesloten pakjes Petrifilm platen in een diepvriezer te bewaren (zie hieronder) als de temperatuur in het laboratorium 25ºC (77ºF) overschrijdt en/of het laboratorium zich in een omgeving bevindt waar de relatieve vochtigheid boven 50% uitkomt (uitgezonderd gebouwen met airconditioning).

(Nederlands)

2

Om geopende pakjes in een diepvriezer te bewaren, plaats ze in een afsluitbare container. Haal de bevroren Petrifilm platen, indien deze voor gebruik nodig zijn, uit de container en plaats onmiddellijk de resterende platen terug in de vriezer in de gesloten container. Platen behoren niet gebruikt te worden na hun vervaldatum. De diepvriezer die wordt gebruikt voor het opslaan van geopende pakjes moet geen automatisch ontdooisysteem hebben omdat dit de platen herhaaldelijk zou blootstellen aan vocht wat schade toe kan brengen aan de platen.

Gebruik geen platen die verkleuring vertonen. De vervaldatum en partijnummer staan vermeldt op iedere verpakking Petrifilm platen. Het partijnummer staat ook vermeldt op iedere plaat.

Na gebruik kunnen Petrifilm EC platen micro-organismen bevatten die een bio-gevaar kunnen zijn. Volg de huidige algemeen aanvaarde branchenormen voor afvalverwerking.

GEBRUIKSAANWIJZINGVoorbereiding monster

1. Gebruik geschikte steriele verdunningsvloeistoffen:

Butterfield’s fosfaatbuffer1,2, 0.1% peptonwater, pepton-zout oplossing3, gebufferd pepton water4, -strength Ringeroplossing4, zoutoplossing (0.85-0.90%), bisulfiet-vrije letheenbouillon of gedistilleerd water.

Gebruik geen verdunningsvloeistoffen die citraat, bisulfiet of thiosulfaat bevatten bij Petrifilm platen; ze kunnen de groei onderdrukken. Als citraatbuffer wordt aanbevolen in de standaard procedure, vervang deze dan door één van de bovenstaande buffers, verwarmd tot 40-45°C.

2. Meng of homogeniseer het monster.

3. Breng voor optimale bacteriegroei de pH van de monstersuspensie op 6.6 - 7.2. Breng zure producten op de juiste pH met 1N NaOH. Basische producten moeten op pH gebracht worden met 1N HCl.

Op platen aanbrengen

1. Plaats de Petrifilm EC plaat op een vlakke ondergrond.

2. Licht de bovenste film en breng met de pipet loodrecht 1 ml van de monstersuspensie in het midden van de onderste film aan.

3. Rol de bovenste film over het monster om luchtbellen te voorkomen.

4. Plaats de plastic spreider met de gladde zijde naar beneden in het midden van de plaat. Verdeel het monster gelijkmatig d.m.v. zachte, neerwaartse druk op het midden van de spreider. Verspreidt het inoculum over het gehele Petrifilm groeioppervlak voordat zich gel heeft gevormd. De spreider niet over de film laten glijden.

5. Neem de spreider weg en laat de plaat minstens één minuut ongestoord liggen om de gel te laten stollen.

Incubatie

Incubeer platen horizontaal met de doorzichtige kant naar boven in stapels van maximaal 20 platen. Verscheidene incubatietijden and -temperaturen kunnen gebruikt worden afhankelijk van de geldende plaatselijke referentiemethoden.

Bijvoorbeeld:AOAC® Official MethodsSM (998.08 Confirmed Escherichia coli Counts in Poultry, Meats and Seafood, Dry Rehydratable Film Method) Incubeer Petrifilm EC-platen 24 ± 2 uur bij 35ºC ± 1ºC.

AOAC® Official MethodsSM (991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods) Voor bepaling van coliformen: incubeer Petrifilm EC platen 24 ± 2 uur bij 35ºC ± 1ºC.Voor bepaling van E.coli: incubeer Petrifilm EC platen 24 ± 2 uur langer (totaal 48 ± 4 uur) bij 35ºC ± 1ºC.

Interpretatie

1. Petrifilm EC platen kunnen geteld worden op een standaard kolonieteller of een ander vergrootglas met behulp van verlichting. Tel geen kolonies die op de kunststof rand groeien, daar zij buiten de selectieve invloed van het medium vallen. Tel geen aparte gasbellen die aanwezig kunnen zijn.

De interpretatie van E.coli kolonies op de Petrifilm EC plaat verschilt per methode. Bijvoorbeeld:

AOAC Official Methods (998.08 and 991.14) –tel blauwe tot roodblauwe kolonies met of zonder gasvorming, ongeacht hun grootte of kleurintensiteit als bevestigde E. coli. Blauwe kolonies zonder gasvorming worden niet als E. coli geteld.

Andere coliforme kolonies zijn rood en vertonen dichtbij (binnen één koloniediameter) een gasbel. Kolonies zonder gas (een afstand groter dan één koloniediameter tussen kolonie en gasbel) worden niet als coliformen geteld. Na 24 uur worden zowel de rode als de blauwe kolonies met gas geteld als het totaal aantal coliformen. Als binnen de incubatietijd van de gevalideerde methode blauwe kolonies met gas groeien, is het een altijd bevestigde E.coli.

Opgelet: Gebruik deze plaat niet voor de bepaling van E. coli O157. Omdat de meeste E. coli O157 stammen atypisch zijn, bijvoorbeeld ze zijn glucuronidase negatief, zullen ze geen blauwe kleur produceren en niet waargenomen worden op de Petrifilm EC platen als E.coli.

3

2. De grootte van het ronde groeioppervlak is ongeveer 20 cm2. Schattingen kunnen gemaakt worden bij platen waarop meer dan 150 kolonies groeien door het aantal kolonies te tellen in een of meer representatieve vierkantjes en het gemiddelde te bepalen per vierkant. Vermenigvuldig het gemiddelde aantal met 20 om de geschatte telling per plaat te bepalen.

3. Als ze in grote aantallen aanwezig zijn kunnen Petrifilm EC platen één of meer van de volgende eigenschappen vertonen: De gel kleurt donker met kleine, onduidelijke kolonies; en veel gasbellen. Bij hoge concentraties E. coli wordt de kleur van het medium blauw, terwijl hoge concentraties coliformen (niet-E. coli) het medium een donkerrode kleur geven. Indien dit zich voordoet, noteer de resultaten dan als te veel om te tellen (TNTC). Verdun verder als een werkelijk aantal is vereist.

4. Indien noodzakelijk kunnen kolonies worden geïsoleerd voor verdere identificatie. Licht de bovenste film op en neem de kolonie uit de gel. Test volgens standaard procedures.

5. Als de platen niet binnen 1 uur na het verwijderen uit de incubator geteld kunnen worden, kunnen zij gedurende ten hoogste één week bewaard worden door bevriezing in een sluitbare container bij temperaturen ≤ minus15°C om later geteld te worden.

Raadpleeg de juiste Petrifilm plaat “Interpretatiegids” voor verdere informatie. Als u vragen hebt over specifieke toepassingen of procedures, kunt u contact opnemen met uw dichtstbijzijnde officiële vertegenwoordiger van 3M Food Safety.

Referenties1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.

2. International Standards Organization, ISO 6887-1:1999. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination

3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products – General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions and decimal dilutions for microbiological examination

Legende

• Belangrijk, zie gebruiksaanwijzing

• Het woord “lot” in een kader en het zandlopersymbool staan voor het partijnummer en de vervaldatum. De zandloper gevolgd door het jaar en de maand geven de vervaldatum weer (jaar en maand: 2010-10). De gehele regel achter de zandloper staat voor het partijnummer (2010 - 10 AZ).

• Opslaan lager dan de aangegeven temperatuur.

AOAC® is een handelsmerk van AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM is een service merk van AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ








3


3M en Petrifilm zijn handelsmerken van 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


E. coli / Coliform OdlingsplattaBESKRIVNING3M™ Petrifilm™ E. coli / Coliform (EC) odlingsplatta är ett system, som är färdigt att använda och som innehåller Violet Red Bile (VRB) näringsämnen, ett gelbildande ämne (lösligt i kallt vatten), en indikator som påvisar glucuronidase aktivitet, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-glucuronide (BCIG), och tetrazolium indikator som underlättar räknandet av kolonier. Petrifilm EC odlingsplattor används för att räkna E. coli och andra coliformer inom livsmedelsindustrin. Beståndsdelarna i Petrifilm EC odlingsplatta är dekontaminerade men inte steriliserade. 3M Food Safety är certifierat enligt ISO (International Standards Organization) 9001.

VARNINGAnvänd inte denna platta för detektion av E. coli O157. Likt flertalet andra E. coli/coliform media, kommer denna odlingsplatta inte specifikt påvisa någon O157 stam. På grund av att de flesta O157 stammar är atypiska E. coli, kommer de att framträda som icke-E. coli coliformer (röda med gas).

OBSERVERA 3M har inte dokumenterat Petrifilm EC odlingsplattor för användning inom andra industrier än livsmedelsindustrin. 3M har till exempel inte dokumenterat användning av Petrifilm EC odlingsplattor för vattenprover, läkemedel eller kosmetika.

Petrifilm EC odlingsplattor har inte testats med alla upptänkliga livsmedel, livsmedelsprocesser, testprotokoll eller med alla tänkbara stammar av E. coli eller annan bakteria.

Petrifilm EC odlingsplatta har utvärderats enligt AOAC / NordVal’s riktlinjer och motsvarat valideringskraven för typexempel av prov inom följande livsmedelskategorier: grönsaker, kött, mejeri och behandlade livsmedel.

Petrifilm EC plattor särskiljer inte en coliform stam från en annan eller en E. coli stam från en annan.

Använd inte Petrifilm EC odlingsplattor för diagnostiserande av tillståndet hos människor eller djur.

För information beträffande dokumentation av produktens egenskaper, kontakta närmaste återförsäljare av 3M Food Safety produkter.

ANVÄNDARANSVARInget odlingsmedium kan alltid återge exakt samma stammar eller beräkning av en specifik stam på samma sätt som ett annat medium gör. Dessutom kan externa faktorer såsom provtagning, testprotokoll, förberedelsetid och hantering påverka återfinnande och antalsbestämning.

Vid val av testmetod är det användarens ansvar att utvärdera ett tillräckligt antal specifika livsmedels- och biologiska prover för att försäkra sig om att den valda testmetoden uppfyller användarens uppställda kriterier.

Det är också användarens ansvar att avgöra om testmetoder och testresultat uppfyller kraven från kunder och leverantörer.

Som med alla odlingsmedia, garanterar inte resultaten från Petrifilm EC odlingsplattor kvaliteten på livsmedlen eller de processer som testas med dessa plattor.

Användaren måste utbilda sina anställda i korrekt testteknik: for example, Good Laboratory Practices (U.S. Food and Drug Administration, Title 21, Part 58 of the Code of Federal Regulations) or ISO 17025.

FRÅNSÄGELSE AV GARANTIANSVAR/ BEGRÄNSAD ERSÄTTNINGSÅVIDA INTE FÖRBJUDET ENLIGT LAG, FRÅNSÄGER SIG 3M ALLA UTTRYCKLIGA ELLER UNDERFÖRSTÅDDA GARANTIER, VILKET INKLUDERAR MEN EJ BEGRÄNSAS TILL, ALLA GARANTIER AVSEENDE SÄLJBARHET ELLER LÄMPLIGHET FÖR VISST ÄNDAMÅL. Om någon 3M Petrifilm-platta befinnes vara defekt, kommer 3M, eller av 3M auktoriserad distributör, att byta ut, eller efter eget gottfinnande, återbetala inköpspriset för sådan platta. Detta är den enda ersättning som ges. Som kund måste Du meddela 3M inom 60 dagar efter upptäckt av misstänkt defekt hos en produkt och returnera produkten till 3M. Vänligen ring Kundtjänst (i USA: 1-800-328-1671) eller Din officiella 3M Food Safety representant för ett tillstånd avseende återsändande av produkt.

ANSVARSBEGRÄNSNING FÖR 3MSÅVIDA INTE FÖRBJUDET ENLIGT LAG, PÅTAGER SIG 3M INGET ANSVAR GENTEMOT ANVÄNDARE ELLER ANDRA FÖRLUST ELLER SKADA, VARE SIG DIREKT ELLER INDIREKT, SPECIFIK, OAVSIKTLIG ELLER BETYDANDE SKADA, VILKET INKLUDERAR MEN EJ BEGRÄNSAS TILL, FÖRLUST AV VINST. Såvida inte förbjudet enligt lag, skall 3Ms ansvar inte i någon situation eller enligt någon juridisk teori överstiga inköpspriset för sådana plattor som uppges vara defekta. Som kund kan Du eventuellt ha andra rättigheter och bör söka rådgivning i det land där produkten är inköpt.

FÖRVARING OCH HANTERING AV AVFALL Lagra oöppnade foliepåsar med Petrifilm i kylskåp eller frys i temperaturer ≤8°C (46°F). Låt foliepåsarna uppnå rumstemperatur omedelbart före användandet. Lägg tillbaka oanvända odlingsplattor i påsen. Försegla påsen genom att vika kanten och tejpa igen den. För att undvika att odlingsplattorna utsätts för fukt skall öppnade påsar inte förvaras i kylskåp. Förvara återförslutna påsar på ett svalt, torrt ställe i maximalt en månad. Om temperaturen i laboratoriet överstiger 25ºC och/eller är beläget i ett område med en luftfuktighet över 50% (och luftkonditionering saknas), rekommenderas att återförslutna påsar förvaras i frys (se nedan).

(Svenska)

2

För att förvara öppnade påsar i frys: placera Petrifilm-plattorna i en förslutningsbar behållare. Då plattor skall användas, öppna behållaren och tag ut önskat antal plattor och återförslut därefter behållaren och placera den omedelbart i frysen. Plattorna ska inte användas efter utgångsdatum. Den frys som används för förvaring av öppnade förpackningar får inte ha automatisk avfrostning eftersom detta skulle utsätta plattorna för upprepad fukt vilket kan skada dem.

Använd inte missfärgade plattor. Utgångsdatum och batchnummer finns på varje förpackning Petrifilm. Batchnumret finns också angivet på varje platta.

Efter användning kan Petrifilm EC odlingsplattor innehålla mikroorganismer som kan innebära en potentiell biologisk fara. Hantera och destruera dem därför enligt gällande rutiner för mikrobiologiskt avfall.

BRUKSANVISNINGFörberedelse av prov

1. Använd lämpliga sterila spädningsvätskor:

Butterfield’s fosfatbuffert1,2 0,1% peptonvatten, pepton-salt spädningsvätska3, quarter-strength Ringer’s lösning4, saltlösning (0,85-0,90%), bisulfit-fri letheen buljong eller destillerat vatten.

Använd inte spädningsvätskor som innehåller citrat, bisulfit eller tiosulfat tillsammans med Petrifilm odlingsplattor; de kan verka hämmande på tillväxten. Om citratbuffert finns med i Ert protokoll, ersätt då med någon av buffertarna som listats ovan, värmda till 40-45°C.

2. Blanda eller homogenisera provet.

3. För optimal tillväxt och återfinnande av mikroorganismerna, justera det utspädda provet till pH 6.6 - 7.2. För sura produkter, justera pH med 1N NaOH. For alkaliska produkter, justera pH med 1N HCl.

Provapplicering

1. Placera Petrifilm EC odlingsplatta på en plan yta.

2. Lyft den övre filmen och fördela 1 ml av det utspädda provet med lodrät pipett över mitten av den undre filmen.

3. Rulla ner den övre filmen över provet för att förhindra att det bildas luftubblor.

4. Placera spridarplattan med den plana sedan nedåt i mitten av odlingsplattan. Tryck försiktigt på mitten av spridarplattan för att fördela provet jämnt. Fördela provet över hela tillväxtområdet innan gelén bildas. Dra inte spridarplattan över filmen.

5. Lyft bort spridarplattan och undvik att röra odlingsplattan under minst en minut så att gelen kan stelna.

Inkubering

Inkubera plattorna horisontellt med den genomskinliga sedan uppåt i staplar om högst 20 plattor. Åtskilliga inkuberingstider och temperaturer kan användas beroende av lokalt gällande referensmetoder.

Till exempel:


(998.08 Confirmed Escherichia coli Counts in Poultry, Meats and Seafood, Dry Rehydratable Film Method)

Inkubera Petrifilm EC plattor 24 tim ± 2 tim vid 35ºC ± 1ºC.

AOAC® Officiell metodSM

(991.14 coliforma och Escherichia coli-räkning i livsmedel, dehydratiserad film metod)

För coliforma resultat inkubera Petrifilm EC odlingsplattor 24 h ± 2 h vid 35ºC ± 1ºC.

För E. coli resultat inkubera Petrifilm EC odlingsplattor ytterligare 24 h ± 2 h (48 h ± 4 h totalt) vid 35ºC ± 1ºC

Tolkning

1. Petrifilm EC plattor kan avläsas med en vanlig koloniräknare eller annat förstoringsglas med ljuskälla. Räkna inte kolonier utanför odlingsytan eftersom de inte har växt i mediats selektiva miljö. Räkna inte konstgjorda bubblor som eventuellt kan uppträda.

Tolkningen av E. coli kolonier på Petrifilm EC odlingsplatta varierar med metod: Till exempel:

AOAC Official Methods (998.08 and 991.14) –räkna blå till röd-blåa kolonier förenade med gasbubblor, oavsett storlek eller intensitet av färg, som konfirmerad E. coli. Blåa kolonier utan gas räknas inte som E. coli.

Andra coliforma kolonier är röda och nära förenade (inom en kolonidiameter) med gasbubbla. Kolonier utan gasbubbla (större avstånd mellan koloni och gasbubbla än en kolonidiameter) räknas inte som coliforma. Totala antalet coliforma består av både röda och blåa kolonier förenade med gas efter 24 timmar. När som helst inom den validerade metodens inkubationstid som en blå koloni med gas kan ses, är den en konfirmerad E. coli.

Varning: Använd inte denna platta för detektion av E. coli O157. Eftersom de flesta E. coli O157 stammar är atypiska, t. ex. är de glucuronidase negativa, producerar de inte blå färg och detekteras inte på Petrifilm EC odlingsplatta.

2. Det runda tillväxtområdet är cirka 20 cm2. Uppskattning kan göras på plattor som innehåller fler än 150 kolonier genom att räkna antalet kolonier i en eller flera representativa rutor och bestämma medeltalet per ruta. Multiplicera medeltalet med 20 för att bestämma det uppskattade antalet per platta.

3

3. När kolonier uppträder i stort antal, kan Petrifilm EC odlingsplatta ha en eller flera av följande kännetecken: en fördjupad färg av gelen med många små, otydliga kolonier; och många gasbubblor. Höga koncentrationer av E. coli ger en blå odlingsyta, medan en hög koncentration av coliformer (ej E. coli) ger en mörkröd odlingsyta. När detta inträffar ska resultatet dokumenteras som ”too numerous to count” (TNTC). Använd högre spädning när en bestämning av antalet krävs.

4. Om det krävs kan kolonier isoleras för vidare identifiering. Lyft upp den övre filmen och plocka kolonin från gelen på ytan. Testa enligt standardförfarande.

5. Om plattorna inte kan beräknas inom en timme efter avlägsnandet från inkubatorn kan dessa lagras för senare beräkning genom infrysning I en förslutningsbar behållare vid en temperatur ≤ minus15°C i maximalt en vecka.

För ytterligare information hänvisas till lämplig ”Tolkningsguide” för Petrifilm-plattor. Vid frågor avseende specifika tillämpningar eller procedurer, kontakta närmaste officiella representant för 3M Food Safety.

Referenser1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.

2. International Standards Organization, ISO 6887-1:1999. Mikrobiologin hos livsmedel och djurfoder – Beredning av prover, initial suspension och decimal spädning för mikrobiologisk undersökning.

3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Mjölk- och mejeriprodukter – Generell rådgivning för beredning av prover, initial suspensions och decimal spädning för mikrobiologisk undersökning

Förklaring av symboler

• Observera, se bruksanvisning

• Symbolerna LOT i en ruta och timglaset representerar batchnummer och utgångsdatum. Timglaset följs av ett årtal och månad som representerar utgångsdatum (år och månad: 2010-10). Hela numret efter timglaset representerar lotnumret (2010 - 10 AZ).

• Förvaras under angiven temperatur.

AOAC® is a registered trademark of AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM is a service mark of AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ








3


3M och Petrifilm är varumärken som tillhör 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


E. coli / Coliform Count PlateKUVAUS3M™ Petrifilm™ E. coli / Coliform (EC) -laskenta-alusta on käyttövalmis kasvualustajärjestelmä, joka sisältää Violet Red Bile (VRB) ravinteita, kylmään veteen liukenevaa geeliä, glukuronidaasiaktiivisuuden osoittavaa indikaattoria, 5-bromo-4-kloro-3-indolyyli-b-D-glukuronidia (BCIG), ja tetrazolium-indikaattoria, joka helpottaa pesäkkeiden laskentaa. Petrifilm EC -alustoja käytetään E. coli:n and koliformien laskentaan elintarvike- ja virvoitusjuomateollisuudessa. Petrifilm EC -alustojen komponentit on dekontaminoitu mutta ei steriloitu. 3M Food Safety on ISO (International Standards Organization) 9001 -sertifioitu.

VAROITUSÄlä käytä tätä alustaa E. coli O157:n toteamiseen. Kuten suurin osa muistakin E. coli/koliformialustoista, tämä alusta ei osoita spesifisesti minkään O157-kantojen läsnäoloa. Koska useimmat O157-kannat ovat epätyypillisiä E. coleja, ne ilmenevät non-E. coli koliformeina (punaisina kaasua sisältävinä pesäkkeinä).

VAROITUKSET 3M ei ole dokumentoinut Petrifilm EC -alustoja muiden kuin elintarvike- ja virvoitusjuomateollisuuden käyttöön. 3M ei ole dokumentoinut Petrifilm EC -alustoja esimerkiksi veden, lääkeaineiden tai kosmeettisten aineiden testaukseen.

Petrifilm EC -alustoja ei ole testattu kaikilla mahdollisilla elintarvikkeilla, elintarvikkeiden jalostusprosesseilla, testimenetelmillä tai kaikilla mahdollisilla E. coli -kannoilla tai muilla bakteereilla.

Petrifim EC -alustat on evaluoitu AOAC / NordVal -suositusten mukaisesti seuraaviin elintarvikeryhmiin kuuluvilla edustavilla näytteillä: vihannekset, liha, meijerituotteet ja einekset

Petrifilm EC -alustat eivät erota yksittäisiä koliformikantoja tai yksittäisiä E. coli -kantoja toisistaan.

Älä käytä Petrifilm EC -alustoja sairauksien diagnosointiin ihmisillä tai eläimillä.

Tietoja tuotteen käyttöön liittyvistä dokumenteista saat ottamalla yhteyttä viralliseen 3M Food Safety -edustajaan.

KÄYTTÄJÄN VASTUUMikään viljelyalusta ei aina löydä täsmälleen samoja kantoja tai anna tietylle kannalle täsmälleen samaa pesäkelukua kuin jokin toinen alusta. Lisäksi ulkoiset tekijät kuten näytteenottomenetelmät, testauskäytännöt, näytteen valmistusaika ja käsittelytapa voivat vaikuttaa tulokseen ja pesäkelukuun.

Käyttäjän vastuulla on testausmenetelmää valittaessa evaluoida riittävä määrä näytteitä tietystä elintarvikkeesta ja käyttäjää tyydyttävistä mikrobiologisista haasteista, jotta valittu testimenetelmä täyttäisi käyttäjän sille asettamat vaatimukset.

Käyttäjän vastuulla on myös selvittää, että testimenetelmät ja tulokset täyttävät sen asiakkaiden tai tavarantoimittajien vaatimukset.

Kuten muillakaan viljelyalustoilla, Petrifilm EC -alustalla saadut tulokset eivät takaa niillä testattujen elintarvike- tai virvoitusjuomatuotteiden tai prosessien laatua.

Käyttäjän on koulutettava henkilökuntansa hallitsemaan asianmukaiset testaustekniikat: esimerkiksi hyvät laboratoriotyötavat (Good Laboratory Practices, USA:n Elintarvike- ja lääkintöhallitus FDA, Liittovaltion lakikokoelma, nimike 21, osa 58) tai ISO 17025.

VAPAUS TUOTEVASTUISTA / RAJOITETTU TAKUULAIN SALLIMISSA RAJOISSA 3M TORJUU PÄTEMÄTTÖMINÄ KAIKKI NIMENOMAISET TAI OLETETUT TAKUUT, MYÖS NE, JOTKA KOSKEVAT MARKKINOITAVUUTTA TAI SOVELTUVUUTTA TIETTYYN KÄYTTÖTARKOITUKSEEN RAJOITTUMATTA KUITENKAAN NÄIHIN. Mikäli jokin 3M Petrifilm -alusta osoittautuu vialliseksi, 3M tai sen valtuutettu jakelija korvaa sen uudella tai, harkintansa mukaan, palauttaa sen hankintahinnan. Vastuumme rajoittuu yksinomaan tähän. 3M:lle on ilmoitettava viipymättä 60 päivän sisällä epäillyn tuotevirheen havaitsemisesta ja palautettava tuote 3M:lle. Ota yhteys asiakaspalveluumme (1-800-328-1671 USA:ssa) tai viralliseen 3M Food Safety -edustajaan palautuslupanumeron saamiseksi.

3M:N VASTUUN RAJOITUSLAIN SALLIMISSA RAJOISSA 3M EI OLE VASTUUSSA KÄYTTÄJÄLLE TAI MUILLE OSAPUOLILLE MISTÄÄN MENETYKSISTÄ TAI VAHINGOISTA, OLIVATPA NE SUORIA, EPÄSUORIA, ERITYISIÄ, TUOTTAMUKSELLISIA TAI SEURAUKSELLISIA VAHINKOJA, TALOUDELLISET MENETYKSET MUKAAN LUKIEN RAJOITTUMATTA KUITENKAAN NIIHIN. Ellei laki toisin määrää, missään tapauksessa 3M:n vastuu ei minkään lakiteorian mukaan ylitä viallisiksi väitettyjen tuotteiden hankintahintaa. Asiakkaalla voi olla muita oikeuksia, jotka on selvitettävä hankintamaassa.

VARASTOINTI JA HÄVITTÄMINEN Säilytä avaamattomat Petrifilm-pussit jääkaapissa tai pakastimessa ≤ 8°C (46°F) lämpötilassa. Anna avaamattomien pussien lämmetä huoneenlämpöisiksi juuri ennen avaamista ja käyttöä. Pane käyttämättömät alustat takaisin pussiin. Sulje taitettu pussin pää teipillä. Älä säilytä avattuja pusseja jääkaapissa, etteivät ne altistu kosteudelle. Säilytä uudelleen suljettuja pusseja viileässä, kuivassa paikassa enintään kuukausi. On suositeltavaa säilyttää uudelleen suljetut Petrifilm-pussit pakastimessa (katso alla), jos laboratorion lämpötila ylittää 25°C (77°F) ja/tai laboratorio sijaitsee alueella, jossa ilman suhteellinen kosteus ylittää 50% (poikkeuksena ilmastoidut tilat).

(Suomenkielinen)

2

Kun säilytät avattuja pusseja pakastimessa, aseta Petrifilm-alustat tiiviiseen rasiaan. Kun otat pakastettuja Petrifilm-alustoja käyttöön, avaa rasia, ota tarvitsemasi määrä alustoja ja palauta loput välittömästi pakastimeen tiiviissä rasiassa. Alustoja ei tule käyttää vanhenemmispäivämäärän jälkeen. Pakastimessa, jota käytetään avattujen pussien säilytykseen, ei saa olla automaattista sulatus_toimintoa, koska se altistaa alustat toistuvasti kosteudelle, joka voi vahingoittaa niitä.

Älä käytä alustoja, joissa on värimuutoksia. Vanhenemispäivämäärä ja eränumero on merkitty jokaiseen Petrifilm-pakkaukseen. Eränumero on merkitty myös yksittäisiin alustoihin.

Käytetyt Petrifilm EC -alustat voivat sisältää tartunta_vaarallisia mikro-organismeja. Noudata niiden hävittämisessä voimassa olevia ohjeita.

KäyttöohjeetNäytteen valmistus

1. Käytä sopivia steriilejä laimentimia:

Butterfieldin fosfaattipuskuri,1,2 0,1% peptonivesi, peptoni-suolalaimennin,3 neljännesvahvuuksinen Ringerin liuos,4 saliiniliuos (0,85-0,90%), bisulfiititon letheen broth tai tislattu vesi.

Älä käytä laimentimia, jotka sisältävät sitraattia, bisulfiittia tai tiosulfaattia Petrifilm-alustoilla; ne voivat estää kasvua. Jos vakiomenetelmässä kehotetaan käyttämään sitraattipuskuria, korvaa se jollain yllä mainituista puskureista lämmitettynä 40-45°C:seen.

2. Sekoita tai homogenoi näyte.

3. Optimaalisen mikro-organismien kasvun ja saannon varmistamiseksi näytesuspension pH on säädettävä välille 6,6 - 7,2. Happamien tuotteiden pH säädetään 1N NaOH:lla. Emäksisten tuotteiden pH säädetään 1N HCl:lla.

Maljaus

1. Aseta Petrifilm EC -alusta tasaiselle pinnalle vaakatasoon.

2. Nosta päällyskalvoa ja annostele pipetillä kohtisuoraan 1 ml näytesuspensiota pohjakalvon keskelle.

3. Rullaa päällyskalvo näytteen päälle varoen ilmakuplien muodostumista.

4. Aseta muovinen levitin litteä puoli alaspäin alustan keskelle. Paina levitintä hellävaraisesti keskeltä, jotta näyte leviää tasaisesti. Levitä näyte Petrifilm alustan koko kasvatusalueelle, ennen kuin geeli muodostuu. Älä vedä levitintä kalvoa pitkin.

5. Poista levitin ja anna alustan seistä häiriöttä vähintään minuutin ajan, jotta geeli saa muodostua rauhassa.

Inkubaatio

Inkuboi alustoja vaakasuorassa asennossa kirkas puoli ylöspäin enintään 20 kappaleen pinoissa. Kulloistenkin vertailumenetelmien mukaisesti voidaan käyttää useita inkubaatio_aikoja ja -lämpötiloja.

Esimerkkejä:

AOAC® Viralliset MenetelmätSM

(998.08 Varmistettu Escherichia coli -laskenta siipikarjasta, lihasta, kalasta ja äyriäisistä, Kuiva kostutettava kalvomenetelmä)

Inkuboi Petrifilm EC -alustoja 24 h ± 2 h, 35°C ± 1°C.

AOAC® Viralliset MenetelmätSM

(991.14 Koliformi ja Escherichia coli -pitoisuudet elintarvikkeissa, Kuiva kostutettava kalvo -menetelmät)

Koliformien laskemiseksi Petrifilm EC -alustoja inkuboidaan 24 h ± 2 h 35°C ± 1°C:ssa.

E. colin laskemiseksi Petrifilm EC -alustoja inkuboidaan edelleen 24 h ± 2 h (yhteensä 48 ± 4 h) 35°C ± 1°C:ssa.

Tulkinta

1. Petrifilm EC -alustat voidaan laskea tavallisella pesäkelaskurilla tai muulla valaistulla suurennuslasilla. Älä laske vaahdon patoamia pesäkkeitä, koska ne eivät ole elatusaineen selektiivisen vaikutuksen piirissä. Älä laske artefaktikuplia, joita saattaa esiintyä.

E. coli -pesäkkeiden tulkinta Petrifilm EC -alustalla vaihtelee menetelmän mukaan. Esimerkkejä:

AOAC Viralliset Menetelmät (998.08 ja 991.14) – laske siniset ja sinipunaiset pesäkkeet, joiden yhteydessä on kaasukupla, koosta tai värin voimakkuudesta riippumatta varmoiksi E. coli -bakteereiksi. Sinisiä pesäkkeitä, joissa ei ole kaasukuplaa, ei lasketa E. coliksi.

Muut koliformipesäkkeet ovat punaisia ja niiden lähellä (yhden pesäkkeen läpimitan päässä) on kaasukupla. Pesäkkeitä, joiden yhteydessä ei esiinny kaasukuplaa (pesäkkeen ja kaasukuplan etäisyys yli yksi pesäkkeen läpimitta), ei lasketa koliformeiksi. Kokonaiskoliformiluku sisältää sekä punaiset että siniset pesäkkeet, joiden yhteydessä on kaasukupla 24 h inkubointiajan jälkeen. Varmoja E. coleja ovat kaikki validoidun menetelmän inkubointiajan puitteissa ilmaantuvat siniset, kaasukuplalliset pesäkkeet.

Varoitus: Älä käytä tätä alustaa E. coli O157:n toteamiseen. Koska monet E. coli O157 -kannat ovat epätyypillisiä, esimerkiksi glukuronidaasinegatiivisia, ne eivät tuota sinistä väriä eikä niitä havaita Petrifim EC -alustalla.

2. Pyöreän kasvualustan koko on noin 20 cm2. Yli 150 pesäkettä sisältävän alustan pesäkeluku voidaan arvioida laskemalla pesäkkeet yhdestä tai useammasta edustavasta ruudusta ja määrittämällä keskimääräinen pesäkeluku ruutua kohti. Kun kerrot keskimääräisen luvun 20:llä, saat koko alustan arvioidun pesäkeluvun.

3

3. Kun bakteereita on paljon, Petrifilm EC -alustalla saattaa näkyä yksi tai useampia seuraavista merkeistä: tummuneella geelillä paljon pieniä, epämääräisiä pesäkkeitä ja paljon kaasukuplia. Suuret E. coli -pitoisuudet muuttavat kasvualueen siniseksi, kun taas suuret koliformipitoisuudet (non-E. coli) muuttavat kasvualueen tummanpunaiseksi. Tällöin tulos on liian suuri laskettavaksi (TNTC). Mikäli tarkka tulos tarvitaan, on tehtävä suurempi laimennos.

4. Tarvittaessa pesäkkeet voidaan eristää myöhempää tunnistusta varten. Nosta päällyskalvo ja poimi pesäke geeliltä. Käytä testaukseen vakiomenetelmiä.

5. Ellei alustoja voida laskea 1 tunnin sisällä inkubaattorista poistamisen jälkeen, ne voidaan säilyttää myöhempää laskentaa varten pakastimessa tiiviissä rasiassa ≤ -15°C:n lämpötilassa enintään viikon.

Lisätietoja saat kyseisen Petrifilm-alustan “Interpretation Guide” -tulkintaohjeesta. Mikäli sinulla on kysymyksiä tietyistä sovelluksista tai menetelmistä, ota yhteys lähimpään viralliseen 3M Food Safety -edustajaan.

Kirjallisuusviitteet:1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.

2. International Standards Organization, ISO 6887-1:1999. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination

3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products – General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions and decimal dilutions for microbiological examination.

Merkkien selitykset

• Huomio, katso käyttöohje

• Kehyksiin merkitty numero ja tiimalasi edustavat eränumeroa ja vanhenemispäivämäärää. Tiimalasin jälkeen on vanhenemispäivää merkitsevä vuosi ja kuukausi (2010-10). Tiimalasia seuraava koko rivi edustaa eränumeroa (2010 - 10 AZ).

• Säilytä annetun lämpötilan alapuolella.

AOAC® on AOAC INTERNATIONAL’in rekisteröity tavaramerkki.

Virallinen MenetelmäSM on AOAC INTERNATIONAL’in palvelumerkki.

2010-10 AZ








3


3M ja Petrifilm ovat 3M Company:n tavaramerkkejä© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


Placa para Contagem de E.coli / ColiformesDESCRIÇÃOA Placa Petrifilm™ 3M™ para Contagem de E. coli / Coliformes (EC) é um sistema pronto de meio de cultura que contém nutrientes do Vermelho Violeta Bile (VRB), um agente geleificante solúvel em água fria, e um indicador de atividade glicuronidásica, 5-bromo-4cloro-3-indolil-ß-D-glicuronídeo (BCIG), que facilita a enumeração da colônia. As placas Petrifilm EC são usadas para enumeração de E. coli e coliformes nas indústrias de alimentos e de bebidas. Os componentes das placas Petrifilm EC são descontaminados e não esterilizados. A 3M Segurança Alimentar é certificada para ISO (International Standards Organization) 9001.

ADVERTÊNCIANão utilize esta placa para detecção de E. coli O:157. Como quase todos os demais meios para E. coli e coliformes, esta placa não indica se uma cepa de 0:157 está presente ou não. Uma vez que a maioria das cepas de 0:157 são E. coli atípicas, elas terão características de coliformes e não E. coli (vermelhas com gás).

PRECAUÇÕES A 3M não tem documentação sobre o uso das placas Petrifilm EC para outras indústrias além das do setor alimentício e de bebidas. Por exemplo, a 3M não tem documentação sobre o uso das placas Petrifilm EC para análise de água, produtos farmacêuticos ou cosméticos.

As placas Petrifilm EC não foram testadas com todos os produtos alimentícios possíveis, assim como todos os processos alimentícios, protocolos de testes ou com todas as cepas de E.coli ou outra bactéria.

As placas Petrifilm (EC) foram avaliadas seguindo as recomendações da AOAC/NordVal e atingiram os critérios de validação em amostras representativas das seguintes categorias de alimentos: vegetais, carnes, laticínios e alimentos processados.

As placas Petrifilm EC não permitem diferenciar uma cepa de coliforme de outra, assim como, uma cepa de E. coli de outra.

Não use as placas Petrifilm EC para diagnóstico de problemas em seres humanos ou animais.

Para obter informações sobre a documentação de desempenho do produto, entre em contato com o representante da 3M Segurança Alimentar.

RESPONSABILIDADE DO USUÁRIONenhum meio de cultura recupera exatamente as mesmas cepas ou enumera uma determinada cepa da mesma forma que qualquer outro meio de cultura. Além disso, fatores externos como métodos de amostragem, protocolos de teste, tempo de preparo da amostra e manuseio poderão ter influência na recuperação e na enumeração.

Ao selecionar qualquer método de teste, o usuário é responsável pela avaliação do número suficiente de amostras de um determinado alimento e teste microbiológico que permita assegurar que o método escolhido satisfaça os critérios por ele estabelecidos.

É também da responsabilidade do usuário determinar se o método de teste e os resultados satisfazem as exigências de seus clientes ou fornecedores.

Como em qualquer outro meio de cultura, os resultados nas placas Petrifilm EC não constituem uma garantia da qualidade dos produtos ou dos processos que estão sendo com elas testados.

O usuário deverá dar treinamento adequado ao seu pessoal técnico: por exemplo, Boas Práticas de Laboratório (Food and Drug Administration dos Estados Unidos, Título 21, Parte 58 do Código de Regulamentações Federais) ou ISO 17025.

LIMITAÇÕES DA GARANTIAA 3M REJEITA TODOS OS TERMOS EXPRESSOS E IMPLÍCITOS DE GARANTIA, INCLUINDO, MAS SEM EXCLUSIVIDADE, QUAISQUER GARANTIAS DE COMERCIALIZAÇÃO OU DE ADEQUAÇÃO PARA UM DETERMINADO USO. Se ficar provado que uma placa 3M Petrifilm encontra-se defeituosa, a 3M ou o seu distribuidor autorizado procederá à respectiva substituição ou, se assim o decidir, restituirá o dinheiro da compra dessa placa. Estes são os seus únicos termos de recurso. A 3M deverá ser prontamente notificada, dentro de trinta dias da descoberta de qualquer defeito suspeito no produto e o mesmo deve ser devolvido à 3M. Telefone para o Centro de Relacionamento ao Cliente (0800-132333 – Linha Aberta 3M) ou para o seu representante oficial de Produtos para Segurança Alimentar 3M, a fim de obter uma Autorização de Devolução de Mercadoria. As limitações acima não se aplicam ao mercado consumidor no Brasil, devendo ser aplicado a legislação vigente local.

LIMITAÇÕES DE RESPONSABILIDADE DA 3MA 3M NÃO SERÁ RESPONSÁVEL POR QUAISQUER PERDAS OU DANOS, QUER ESSES DANOS SEJAM DIRETOS, INDIRETOS, ESPECIAIS, FORTUITOS OU SUBSEQÜENTES, INCLUINDO, MAS SEM EXCLUSIVIDADE, A PERDA DE LUCROS. Exceto quando for proibido por lei, em nenhuma circunstância nem ao abrigo seja de que teoria jurídica for, deverá a responsabilidade da 3M exceder o preço de compra das placas supostamente defeituosas. O cliente poderá gozar de outros direitos, devendo aconselhar-se, para esse efeito, no país onde foi efetuada a compra. As limitações acima não se aplicam ao mercado consumidor, no Brasil.

(Português)

2

ARMAZENAMENTO E DESCARTE Armazene as embalagens fechadas com placas Petrifilm refrigeradas ou congeladas a temperaturas ≤8°C (46°F). Deixe que os pacotes atinjam a temperatura ambiente antes de abri-los. Coloque as placas não utilizadas novamente no pacote. Feche o pacote dobrando a extremidade da embalagem e pressionando para vedar. Não refrigere os pacotes que tiverem sido abertos para evitar que fiquem expostos à umidade. Guarde os pacotes novamente lacrados em um local seco e fresco por um período de tempo não superior a um mês. Recomenda-se que os pacotes de placas Petrifilm que foram novamente lacrados sejam guardados em um freezer (veja abaixo), caso a temperatura do laboratório exceda 25°C (77°F) e/ou o laboratório encontre-se localizado em uma região onde a umidade relativa exceda 50% (com exceção de ar condicionado).

Para guardar os pacotes abertos em um freezer, coloque as placas Petrifilm em um recipiente que pode ser lacrado. Para retirar as placas Petrifilm congeladas para sua utilização, abra o recipiente, retire as placas necessárias e coloque as placas restantes imediatamente de volta no freezer dentro do recipiente fechado. As placas não devem ser utilizadas após sua data de validade. O freezer utilizado para guardar pacotes abertos não deve ter um ciclo de descongelamento automático, pois isso poderia expor as placas a uma umidade que poderia danificá-las.

Não utilize placas que apresentam descoloração. A data de vencimento e o número do lote estão impressos em todas as embalagens de placas Petrifilm. O número do lote também está impresso em cada placa individualmente.

Após serem usadas, as placas Petrifilm EC estarão contendo bactérias viáveis. Siga, portanto, as normas adequadas para o descarte (Boas Práticas de Laboratório).

INSTRUÇÕES DE USOPreparo da Amostra

1. Use diluentes estéreis apropriados:

Tampão fosfato de Butterfield,1,2 água peptonada 0.1%, diluente salina peptonada,3 solução de Ringer,4 solução salina (0.85-0.90%), caldo letheen sem bissulfito ou água destilada.

Não utilize diluentes que contenham citrato, bissulfito ou tiossulfato com placas Petrifilm; eles podem inibir o crescimento. Se o tampão citrato for indicado no procedimento padrão, substitua-o por um dos tampões listados acima, aquecido a 40-45°C.

2. Misture ou homogeneize a amostra.

3. Para um crescimento ótimo e recuperação dos microrganismos, ajuste o pH da amostra para 6.6 - 7.2. Para produtos ácidos, ajuste o pH com NaOH 1N. Para produtos alcalinos, ajuste o pH com HCl 1N.

Plaqueamento

1. Coloque a placa Petrifilm EC sobre uma superfície nivelada e plana.

2. Levante o filme superior e com a pipeta perpendicular dispense 1 mL da amostra ou da amostra diluída no centro do filme inferior.

3. Desça o filme superior sobre a amostra para evitar a formação de bolhas de ar.

4. Coloque o difusor plástico com o lado plano para baixo no centro da placa. Pressione delicadamente o centro do difusor para distribuir a amostra uniformemente. Espalhe o inóculo sobre toda a área de crescimento da placa Petrifilm antes do gel se formar. Não arraste o difusor sobre o filme.

5. Remova o difusor e deixe a placa em repouso durante, pelo menos, um minuto para permitir a formação do gel.

Incubação

Incube as placas na posição horizontal com o lado transparente para cima em pilhas que não ultrapassem 20 placas. Vários tempos e temperaturas de incubação podem ser usados dependendo dos métodos locais vigentes de referência.

Por exemplo:


(998.08 Confirmed Escherichia coli Counts in Poultry, Meats and Seafood, Dry Rehydratable Film Method).

Incubar as placas Petrifilm EC por 24 h ± 2 h a 35ºC ± 1ºC.


(991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)

Para resultados de coliformes incube as placas Petrifilm EC por 24 h ± 2 h a 35ºC ± 1ºC.

Para resultados de E. coli incube as placas Petrifilm EC por um tempo adicional de 24 h ± 2 h (total de 48 h ± 4 h) a 35ºC ± 1ºC.

Interpretação

1. As placas Petrifilm EC podem ser contadas usando um contador de colônias comum ou qualquer outra fonte de amplificação. Não enumere as colônias presentes na espuma, pois elas não estão sob a ação dos agentes de seletividade do meio. Não enumere bolhas de ar artificiais que podem estar presentes.

3

A interpretação das colônias de E. coli na placa Petrifilm EC varia de acordo com o método. Por exemplo:

AOAC Official Methods (998.08 and 991.14) – enumera colônias azuis a vermelha azuladas associadas ao gás formado, independente de tamanho ou intensidade de cor, como E. coli confirmada. Colônias azuis sem gás não são consideradas E. coli.

Outras colônias de coliformes são vermelhas e estão associadas ao gás formado (dentro do diâmetro de uma colônia). Colônias não associadas ao gás (uma distância maior que uma colônia de diâmetro entre a colônia e a bolha de gás) não são consideradas coliformes. A contagem de coliformes totais consiste da somatória das colônias vermelhas e azuis associadas ao gás em 24 h. Se a qualquer hora, dentro do período de incubação de um método validado, aparecer uma colônia azul associada ao gás, ela é uma E. coli confirmada.

Atenção: Não utilize esta placa para detecção de E. coli O:157. Devido ao fato de que a maioria das cepas de E. coli 0:157 é atípica, por exemplo elas são glicuronidase negativas, elas não produzirão uma cor azul, e não serão detectadas nas placas Petrifilm EC.

2. A área de crescimento circular é de aproximadamente 20 cm2. Em placas que contenham mais de 150 colônias, as contagens podem ser estimadas, contando-se o número de colônias em um ou mais quadrados representativos e determinando-se o número médio por quadrado. Multiplique o número médio por 20 para determinar a contagem estimada por placa.

3. Quando presentes em grandes quantidades, as placas Petrifilm EC podem apresentar uma ou mais das seguintes características: uma intensificação da cor do gel com colônias muito pequenas e indistintas; e muitas bolhas de gás. Altas concentrações de E. coli poderão tornar a área de crescimento azulada, enquanto altas concentrações de coliformes (não E. coli) poderão tornar a área de crescimento vermelha escura. Quando isto ocorrer, registre os resultados como incontável (INC). Quando for necessária uma contagem, uma diluição maior.

4. Se necessário, as colônias podem ser isoladas para identificação futura. Levante o filme superior e retire a colônia do gel. Utilize testes padrão de identificação.

5. Se as placas não podem ser contadas dentro de 1 hora após serem retiradas da incubadora, elas devem ser guardadas, em um recipiente que pode ser lacrado, e congeladas para posterior enumeração em temperaturas < -15°C por, no máximo, uma semana.

Para obter maiores informações, consulte o “Guia de Interpretação” apropriado à placa Petrifilm. Se tiver dúvidas sobre aplicações ou procedimentos específicos, favor entrar em contato com o representante oficial dos Produtos para Segurança Alimentar 3M mais próximo de você.

Referências1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.


3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products –General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions and decimal dilutions for microbiological examination.

Explicação de símbolos

• Atenção, veja instruções de uso

• A palavra LOT numa caixa e a ampulheta são símbolos que representam o número de lote e a data de validade. A ampulheta é seguida pelo ano e mês de validade (ano e mês: 2010-10). Todos os números e letras depois da ampulheta representam o número de lote (2010-10 AZ).

• Armazenar abaixo da temperatura assinalada.

AOAC® é uma marca comercial registrada da AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM é uma marca de serviço da AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ








3


3M e Petrifilm são marcas registradas da 3M© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


Πλακίδιο Μέτρησης E.Coli/ΚολοβακτηριδίωνΠΕΡΙΓΡΑΦΗΤο Πλακίδιο E.coli/ Κολοβακτηριδίων (EC) 3M™ Petrifilm™ είναι ένα σύστημα έτοιμου μέσου καλλιέργειας δείγματος με παράγοντα γέλης διαλυτό σε κρύο νερό, ένα δείκτη δραστηριότητας γλουκουρονιδιάσης, 5-βρωμο-4-χλωρο-3 –ινδοδυλο-b –D-γλουκουρονίδη (BCIG) και έναν δείκτη tetrazolium που διευκολύνει την απαρίθμηση αποικιών. Τα πλακίδια Petrifilm EC χρησιμοποιούνται για την απαρίθμηση των E. coli και των κολοβακτηριδίων στις βιομηχανίες τροφίμων και ποτών. Τα συστατικά των πλακιδίων Petrifilm EL έχουν απολυμανθεί όχι όμως αποστειρωθεί. Η 3M Microbiology έχει πιστοποιηθεί σύμφωνα με τα πρότυπα ISO (International Standards Organization) 9001.

Προειδοποίηση:Μη χρησιμοποιείτε αυτό το πλακίδιο για την ανίχνευση των E. coli 0157. Όπως τα περισσότερα άλλα μέσα καλλιέργειας των E. coli/κολοβακτηριδίων, το πλακίδιο δεν δηλώνει συγκεκριμένα την παρουσία στελέχους Ο157. Καθώς τα περισσότερα στελέχη Ο157 είναι άτυπα E. coli, θα εμφανιστούν ως κολοβακτηρίδια μη E. coli (ερυθρού χρώματος με αέριο).

ΕΠΙΣΗΜΑΝΣΕΙΣΗ 3Μ δεν διαθέτει τεκμηρίωση για τη χρήση των πλακιδίων Petrifilm EC σε βιομηχανίες εκτός της βιομηχανίας τροφίμων και ποτών. Παραδείγματος χάριν, η 3Μ δεν διαθέτει τεκμηρίωση για τη χρήση των πλακιδίων Petrifilm EC για τον έλεγχο του νερού, φαρμακευτικών προϊόντων ή καλλυντικών.

Τα πλακίδια Petrifilm EC δεν έχουν ελεγχθεί σε σχέση με όλα τα πιθανά προϊόντα διατροφής, διαδικασίες επεξεργασίας τροφίμων, πρωτόκολλα ελέγχου ή με όλα τα πιθανά στελέχη των E. coli ή άλλων βακτηριδίων.

Το πλακίδιο Petrifilm EC αξιολογήθηκε σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές της μεθόδου AOAC / NordVal και έχει δοκιμαστεί σε αντιπροσωπευτικά δείγματα των ακόλουθων κατηγοριών τροφίμων: Λαχανικά, κρέας, γαλακτοκομικά προϊόντα και επεξεργασμένα τρόφιμα.

Τα πλακίδια Petrifilm EC δεν διαφοροποιούν κανένα στέλεχος κολοβακτηριδίων από τα άλλα ή οποιοδήποτε στέλεχος E. coli από τα άλλα.

Μην χρησιμοποιείτε πλακίδια Petrifilm EC στη διάγνωση νόσων σε ανθρώπους ή ζώα.

Για πληροφορίες για την τεκμηρίωση σχετικά με την απόδοση του προϊόντος επικοινωνήστε με τον επίσημο αντιπρόσωπο της 3M Microbiology.

ΕΥΘΥΝΗ ΧΡΗΣΤΗΚανένα μέσο καλλιέργειας δεν εμφανίζει πάντα ακριβώς τα ίδια στελέχη ούτε απαριθμεί ένα συγκεκριμένο στέλεχος με τον ίδιο ακριβώς τρόπο που το απαριθμεί ένα άλλο μέσο καλλιέργειας. Επιπροσθέτως εξωτερικοί παράγοντες όπως μέθοδοι δειγματισμού, πρωτόκολλα ελέγχου, χρόνος προπαρασκευής και ο χειρισμός ενδέχεται να επηρεάσουν την εμφάνιση και την απαρίθμηση.

Η επιλογή οποιασδήποτε μεθόδου ελέγχου για την αξιολόγηση ικανού αριθμού δειγμάτων σε συγκεκριμένα τρόφιμα και φορτία μικροβίων είναι ευθύνη του χρήστη προκειμένου να πεισθεί ότι η επιλεγείσα μέθοδος ελέγχου πληροί τα κριτήρια χρήστη.

Είναι επίσης ευθύνη του χρήστη να προσδιορίσει εάν οποιεσδήποτε μέθοδοι ελέγχου και αποτελέσματα πληρούν τις απαιτήσεις των πελατών ή προμηθευτών του.

Όπως συμβαίνει με οποιοδήποτε μέσο καλλιέργειας, τα αποτελέσματα του πλακιδίου Petrifilm EC δεν αποτελούν εγγύηση ποιότητας των προϊόντων διατροφής ή των ποτών ή διαδικασιών που ελέγχονται με τα πλακίδια.

Ο χρήστης πρέπει να εκπαιδεύσει το προσωπικό του σε κατάλληλες τεχνικές ελέγχου: παραδείγματος χάριν, Καλές Εργαστηριακές Πρακτικές (Υπηρεσία Τροφίμων και Φαρμάκων των ΗΠΑ, Τίτλος 21, Ενότητα 58 του Κώδικα Ομοσπονδιακών Κανονισμών) (U.S. Food and Drug Administration, Title 21, Part 58 of the Code of Federal Regulations) ή ISO 17025.

ΑΠΟΚΗΡΥΞΗ ΕΓΓΥΗΣΕΩΝ / ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΕΝΗ ΑΠΟΚΑΤΑΣΤΑΣΗΕΚΤΟΣ ΕΑΝ ΑΠΑΓΟΡΕΥΕΤΑΙ ΜΕ ΑΛΛΟ ΤΡΟΠΟ ΑΠΟ ΤΟ ΝΟΜΟ, Η 3Μ ΑΠΟΚΗΡΥΣΣΕΙ ΟΛΕΣ ΤΙΣ ΡΗΤΕΣ ΚΑΙ ΥΠΟΝΟΟΥΜΕΝΕΣ ΕΓΓΥΗΣΕΙΣ, ΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΟΜΕΝΩΝ, ΜΕ ΕΝΔΕΙΚΤΙΚΗ ΑΝΑΦΟΡΑ, ΤΥΧΟΝ ΕΓΓΥΗΣΕΩΝ ΕΜΠΟΡΕΥΣΙΜΟΤΗΤΑΣ Ή ΚΑΤΑΛΛΗΛΟΤΗΤΑΣ ΓΙΑ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ. Εάν κάποιο πλακίδιο Petrifilm της 3Μ αποδειχτεί ελαττωματικό, η 3Μ ή ο εξουσιοδοτημένος διανομέας της θα το αντικαταστήσει ή, κατά την κρίση του, θα επιστρέψει το ποσόν της αξίας αγοράς οιουδήποτε πλακιδίου. Αυτά είναι τα μόνα μέσα αποκατάστασης που έχετε στη διάθεσή σας. Πρέπει να ενημερώσετε έγκαιρα την 3Μ εντός εξήντα ημερών μετά τον εντοπισμό οιουδήποτε πιθανολογούμενου ελαττώματος σε προϊόν και να επιστρέψετε το προϊόν στην 3Μ. Παρακαλείστε να καλέσετε την Υπηρεσία Πελατών (1-800-328-1671 στις ΗΠΑ) ή τον επίσημο αντιπρόσωπο της 3M Microbiology για την Άδεια Επιστρεφόμενων Αγαθών.

ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΕΥΘΥΝΗΣ ΤΗΣ 3ΜΕΚΤΟΣ ΕΑΝ ΑΠΑΓΟΡΕΥΕΤΑΙ ΜΕ ΑΛΛΟ ΤΡΟΠΟ ΑΠΟ ΤΟ ΝΟΜΟ, Η 3Μ ΔΕΝ ΘΑ ΦΕΡΕΙ ΕΥΘΥΝΗ ΕΝΑΝΤΙ ΤΟΥ ΧΡΗΣΤΗ Ή ΑΛΛΩΝ ΓΙΑ ΤΥΧΟΝ ΑΠΩΛΕΙΑ Ή ΖΗΜΙΑ, ΑΜΕΣΗ, ΕΜΜΕΣΗ, ΕΙΔΙΚΗ, ΣΥΜΠΤΩΜΑΤΙΚΗ Ή ΠΑΡΕΠΟΜΕΝΗ, ΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΟΜΕΝΩΝ, ΜΕ ΕΝΔΕΙΚΤΙΚΗ ΑΝΑΦΟΡΑ, ΤΩΝ ΔΙΑΦΥΓΟΝΤΩΝ ΚΕΡΔΩΝ. Με εξαίρεση τις περιπτώσεις όπου απαγορεύεται από το νόμο, σε καμία περίπτωση η ευθύνη της 3Μ υπό οποιαδήποτε νομική θεώρηση, δεν θα υπερβαίνει το ποσόν αγοράς των πλακιδίων τα οποία φέρονται ως ελαττωματικά. Ο πελάτης ενδέχεται να έχει επιπλέον δικαιώματα και πρέπει να αναζητήσει νομικές συμβουλές στη χώρα αγοράς.

ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ ΚΑΙ ΑΠΟΡΡΙΨΗΑποθηκεύστε τα πλακίδια Petrifilm πριν να ανοίξετε τα σακουλάκια σε θερμοκρασία μικρότερη ή ίση με <8°C (<46°F). Πριν τη χρήση, αφήστε τα σακουλάκια που δεν έχουν ανοιχθεί να αποκτήσουν θερμοκρασία δωματίου πριν τα ανοίξετε. Τοποθετείστε ξανά τα μη χρησιμοποιημένα πλακίδια στο σακουλάκι. Κλείστε ερμητικά το σακουλάκι διπλώνοντας από πάνω το άκρο του και κολλήστε την ταινία. Για να αποφύγετε την έκθεση σε υγρασία, μην ψύχετε τα ανοιγμένα σακουλάκια. Αποθηκεύστε τα ερμητικά κλεισμένα σακουλάκια σε δροσερό και ξηρό μέρος για διάστημα όχι μεγαλύτερο του ενός μηνός. Συνιστάται να μην αποθηκεύονται τα εκ νέου σφραγισμένα σακουλάκια σε δροσερό και ξηρό μέρος για διάστημα μεγαλύτερο του ενός μηνός. Συνιστάται να μην αποθηκεύονται τα εκ νέου ερμητικά κλεισμένα σακουλάκια με πλακίδια Petrifilm σε καταψύκτη (βλέπε πιο κάτω) εάν η θερμοκρασία του εργαστηρίου υπερβαίνει τους 25°C (<77°F) ή/και το εργαστήριο βρίσκεται σε περιοχή όπου η σχετική υγρασία υπερβαίνει το 50% (με εξαίρεση εγκαταστάσεις που κλιματίζονται).

(Eλληvικά)

2

Για να αποθηκεύσετε τα ανοιγμένα σακουλάκια σε καταψύκτη, τοποθετείστε τα πλακίδια Petrifilm σε δοχείο που κλείνει ερμητικά. Για να βγάλετε τα κατεψυγμένα πλακίδια Petrifilm για να χρησιμοποιηθούν, ανοίξτε το δοχείο, βγάλτε τα πλακίδια που χρειάζεστε και τοποθετείστε αμέσως ξανά τα υπόλοιπα πλακίδια στον καταψύκτη μέσα στο δοχείο που κλείνει ερμητικά. Τα πλακίδια δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται μετά την ημερομηνία λήξεώς τους. Ο καταψύκτης που χρησιμοποιείται για να αποθηκεύονται τα ανοιγμένα σακουλάκια δεν πρέπει να διαθέτει αυτόματο κύκλο απόψυξης διότι αυτό θα εξέθετε επανειλημμένα τα πλακίδια σε υγρασία η οποία δύναται να τους προκαλέσει βλάβες.

Μην χρησιμοποιείτε πλακίδια που εμφανίζουν αλλοίωση του χρώματος. Κάθε συσκευασία πλακιδίων Petrifilm αναγράφει την ημερομηνία λήξεως και τον αριθμό παρτίδας. Κάθε μεμονωμένο πλακίδιο αναγράφει επίσης των αριθμό παρτίδας.

Μετά τη χρήση, τα πλακίδια Petrifilm EL ενδέχεται να περιέχουν μικροοργανισμούς οι οποίοι ίσως να αποτελέσουν δυνητικό βιολογικό κίνδυνο. Ακολουθήστε τα ισχύοντα βιομηχανικά πρότυπα για την απόρριψη προϊόντων.

ΟΔΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣΠροπαρασκευή του δείγματος1. Χρησιμοποιήστε τα κατάλληλα στείρα διαλυτικά μέσα:

Ρυθμιστικό διάλυμα Butterfield φωσφορικών ιόντων, υδατικό διάλυμα πεπτόνης 0,1%1,2 αλατούχο διαλυτικό μέσο πεπτόνης, πεπτονικό διάλυμα σταθερού pH3, διάλυμα Ringer ¼ περιεκτικότητας3, αλατούχο διάλυμα (0,85-0,90%)4, αποσταγμένο νερό ή ζωμός letheen ελεύθερος από θειώδη ιόντα.

Μη χρησιμοποιείτε διαλυτικά μέσα που περιέχουν κιτρικά ιόντα, θειώδη ή θειοθειικά ιόντα με τα πλακίδια Petrifilm, διότι μπορούν να εμποδίσουν την ανάπτυξη. Εάν η τυπική διαδικασία αναφέρει κιτρικό ρυθμιστικό διάλυμα, αντικαταστήστε το με ένα από τα ρυθμιστικά διαλύματα που αναφέρονται πιο πάνω, αφού θερμανθεί σε θερμοκρασία 40-45°C.

2. Ανακατέψτε ή ομογενοποιείστε το δείγμα.

3. Για βέλτιστη ανάπτυξη και εμφάνιση των μικροοργανισμών, ρυθμίστε το pH του δείγματος εναιωρήματος σε 6,6-7,2. Για όξινα προϊόντα, ρυθμίστε το pH με κανονικό διάλυμα NaOH. Για τα αλκαλικά προϊόντα, ρυθμίστε το pH με κανονικό διάλυμα υδροχλωρίου.

Επίστρωση1. Τοποθετείστε το πλακίδιο Petrifilm EC σε επίπεδη και ομαλή επιφάνεια (βλέπε σχήμα a).

2. Ανασηκώστε την επάνω μεμβράνη και με τη πιπέτα σε κατακόρυφη θέση τοποθετείστε 1 mL δείγματος του εναιωρήματος στο κέντρο της κάτω μεμβράνης (βλέπε σχήμα b).

3. Τυλίξτε την επάνω μεμβράνη προς τα κάτω στο δείγμα για να αποφύγετε την παγίδευση φυσαλίδων αέρα (βλέπε σχήμα c).

4. Τοποθετήστε το πλαστικό εξάρτημα επάλειψης με την επίπεδη επιφάνεια προς τα κάτω στο κέντρο του πλακιδίου (βλέπε σχήμα d). Ασκήστε ελαφρά πίεση στο κέντρο του εξαρτήματος επάλειψης για να απλωθεί ομοιόμορφα το δείγμα. Απλώστε το υλικό ενοφθαλμισμού σε ολόκληρη την περιοχή ανάπτυξης του πλακιδίου Petrifilm πριν τον σχηματισμμό ζελατίνης. Μην σύρετε το εξάρτημα επάλειψης επάνω στη μεμβράνη.

5. Απομακρύνετε το εξάρτημα επάλειψης και αφήστε το πλακίδιο για ένα λεπτό σε ηρεμία για να μπορέσει να σχηματιστεί η ζελατίνη.

ΕπώασηΑφήστε σε συνθήκες επώασης τα πλακίδια σε οριζόντια θέση με την καθαρή πλευρά σε στοίβες που δεν υπερβαίνουν τα 20 πλακίδια. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφοροι χρόνοι και θερμοκρασίες επώασης ανάλογα με τις ισχύουσες τοπικές μεθόδους.

Παραδείγματος χάριν:Οι μέθοδοι AOAC® Official MethodsSM (998.08) Επιβεβαιωμένες Μετρήσεις Escherichia coli σε Πουλερικά, Κρέατα και Θαλασσινά, Μέθοδος Ξηρής Μεμβράνης που μπορεί να Επανυδατωθεί). Αφήστε τα πλακίδια Petrifilm EC σε συνθήκες επώασης για 24 h ± 2 h στους 35°C + 1°C.

AOAC® Official MethodsSM (991.14 Μετρήσεις Κολοβακτηριδίων και Εσερίχια στα Τρόφιμα. Μέθοδοι Ξηρής Μεμβράνης που Μπορεί να Επανυδατωθεί) 991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Food, Dry Rehydratable Film Methods)

Για τον εντοπισμό των κολοβακτηριδίων αφήστε σε συνθήκες επώασης τα πλακίδια Petrifilm EC για 24 h ± 2 h στους 35°C + 1°C.

Για τον εντοπισμό των E. coli αφήστε σε συνθήκες επώασης τα πλακίδια Petrifilm EC για επιπλέον διάστημα 24 h ± 2 h (συνολικά 48 h ± 4 h) στους 35°C + 1°C.

Ερμηνεία1. Οι αποικίες στα πλακίδια Petrifilm EC μπορούν να μετρηθούν με χρήση τυπικού απαριθμητή αποικιών ή άλλη φωτεινής συσκευής μεγέθυνσης. Μην απαριθμείτε τις αποικίες

που εμφανίζονται στο φράγμα του αφρού διότι έχουν απομακρυνθεί από την επιλεκτική επίδραση του μέσου καλλιέργειας. Μην απαριθμείτε τις φυσαλίδες ψευδών προϊόντων που ενδέχεται να υπάρχουν.

Η ερμηνεία αποικιών E. coli ποικίλλει ανάλογα με τη μέθοδο που χρησιμοποιείται. Παραδείγματος χάριν:

Οι AOAC Official Methods (998.04 και 991.14) – απαριθμούν κυανές έως ερυθροκύανες αποικίες που συνδέονται με παγιδευμένο αέριο, ανεξάρτητα από το μέγεθος την ένταση του χρώματος, ως διαπιστωμένο E. Coli. Οι κυανές αποικίες χωρίς αέριο δεν προσμετρούνται ως E. coli.

Άλλες αποικίες κολοβακτηριδίων έχουν ερυθρό χρώμα και συνδέονται στενά (εντός της διαμέτρου μιας αποικίας) με παγιδευμένο αέριο. Οι αποικίες που δεν συνδέονται με αέριο (απόσταση μεγαλύτερης της διαμέτρου μιας αποικίας μεταξύ αποικίας και φυσαλίδας αέρα) δεν μετρούνται ως κολοβακτηρίδια. Η συνολική μέτρηση των κολοβακτηριδίων αποτελείται από αποικίες τόσο ερυθρού όσο και κυανού χρώματος που παράγουν αέριο σε 24 h. Η αποικία κυανού χρώματος που συνδέεται με την παραγωγή αερίου και εμφανίζεται σε οποιαδήποτε στιγμή εντός του χρόνου επώασης σύμφωνα με την πιστοποιημένη μέθοδο είναι διαπιστωμένο E. coli (βλέπε σχήμα e).

Προσοχή: Μη χρησιμοποιείτε αυτό το πλακίδιο για την ανίχνευση των E. coli Ο157. Επειδή τα περισσότερα στελέχη των E. coli Ο157 είναι άτυπα, παραδείγματος χάρη είναι αρνητικά έναντι της γλουκουρονιδάσης, δεν θα προσδώσουν κυανή απόχρωση και δεν θα γίνει ανίχνευσή τους στα πλακίδια Pertifilm EC.

3

2. Η κυκλική επιφάνεια ανάπτυξης είναι περίοπου 20 cm2. Εκτιμήσεις δύνανται να πραγματοποιηθούν στα πλακίδια που περιέχουν περισσότερες από 150 αποικίες μετρώντας τον αριθμό των αποικιών σε ένα ή περισσότερα αντιπροσωπευτικά τετράγωνα και προσδιορίζοντας το μέσο αριθμό ανά τετράγωνο. Πολλαπλασιάστε τον μέσο αριθμό επί 20 για τον προσδιορισμό της εκτιμώμενης απαρίθμησης ανά πλακίδιο (βλέπε σχήμα f).

3. Όταν υπάρχουν μεγάλοι αριθμοί, τα πλακίδια Petrifilm EC δύνανται να παρουσιάσουν ένα ή περισσότερα από τα ακόλουθα χαρακτηριστικά: Βαθύτερη απόχρωση της γέλης με πολλές μικρές, μη διακριτικές αποικίες και πολλές φυσαλίδες αερίου. Υψηλές συγκεντρώσεις του E. coli θα προσδώσουν κυανή απόχρωση στην επιφάνεια ανάπτυξης (βλέπε σχήμα f) ενώ υψηλές συγκεντρώσεις κολοβακτηριοειδών (μη E. coli) θα προσδώσουν σκούρα ερυθρά απόχρωση στην επιφάνεια ανάπτυξης. Όταν συμβεί αυτό, καταγράψτε τα αποτελέσματα ως υπερβολικά πολυπληθή για να απαριθμηθούν (TNTC). Όταν απαιτείται πραγματική απαρίθμηση, επιστρώστε με μεγαλύτερη αραίωση.

4. Όπου κρίνεται αναγκαίο, οι αποικίες μπορούν να απομονωθούν για περαιτέρω αναγνώριση. Ανασηκώστε το πάνω φιλμ και πάρτε την αποικία από τη γέλη (βλέπε εικόνα h). Ελέγξτε χρησιμοποιώντας τυπικές διαδικασίες.

5. Εάν δεν είναι δυνατή η απαρίθμηση των αποικιών στα πλακίδια εντός 1 ώρας από την έξοδο από τον επωαστήρα μπορούν να αποθηκευτούν για μετέπειτα απαρίθμηση εάν ψυχθούν σε δοχείο που κλείνει ερμητικά σε θερμοκρασίες ≤ μείον 15°C για διάστημα όχι μεγαλύτερο της μια εβδομάδας.

Για περαιτέρω πληροφορίες ανατρέξτε στον αντίστοιχο «Οδηγό Ερμηνείας» των πλακιδίων Petrifilm. Εάν έχετε ερωτήματα για συγκεκριμένες εφαρμογές ή διαδικασίες, παρακαλείστε να επικοινωνήσετε με τον πλησιέστερο αντιπρόσωπο της 3Μ Microbiology.

Βιβλιογραφία1. FDA, 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.

2. International Standards Organization, ISO 6887-1:1999. Μικροβιολογία τροφίμων και ζωοτροφών – Προετοιμασία δειγμάτων δοκιμής, αρχικού εναιωρήματος και διαλυμάτων που έχουν προκύψει από εκάστοτε αραίωση κατά δέκα φορές του προηγούμενου διαλύματος για μικροβιολογικό έλεγχο.

3. International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products – Γενικές οδηγίες για την προετοιμασία των δοκιμαστικών δειγμάτων, αρχικών εναιωρημάτων και των διαλυμάτων που έχουν προκύψει από εκάστοτε αραίωση κατά δέκα φορές του προηγούμενου διαλύματος για μικροβιολογικό έλεγχο.

Επεξήγηση συμβόλων

• Προσοχή, βλέπε οδηγίες χρήσης

• LOT 2010-10 AZ . Η λέξη “LOT” μέσα σε πλαίσιο και η κλεψύδρα είναι σύμβολα που αντιπροσωπεύουν την παρτίδα και την ημερομηνία λήξης. Η κλεψύδρα ακολουθείται από ένα έτος και μήνα που αντιπροσωπεύουν την ημερομηνία λήξης (έτος και μήνας: 2010-10). Ολόκληρη η γραμμή μετά την κλεψύδρα αντιπροσωπεύει τον αριθμό παρτίδας. (2010-10 ΑΖ).

• Αποθηκεύστε σε θερμοκρασία μικρότερη της ενδεδειγμένης.

AOAC® είναι κατατεθημένο σήμα του AOAC INTERNATIONAL

Official MethodsSM είναι σήμα του AOAC INTERNATIONAL

2010-10 AZ








3


Οι επωνυμίες 3Μ και Petrifilm είναι εμπορικά σήματα της 3Μ© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

1


ペトリフィルムTM培地E.coliおよび大腸菌群数測定用プレート（ECプレート）はじめに3MTMペトリフィルムTM E.coliおよび大腸菌群数測定用プレート（ECプレート）は、VRB培地と冷水可溶性ゲル、グルクロニダーゼ指示薬（5-bromo-4-chloro-3-indoly-イ-D-glucuronide、BCIG）、TTCとで構\u25104 成されている、できあがり培地です。ペトリフィルムECプレートは食品や飲料中のE.coliおよび大腸菌群数の測定に使用します。ECプレートは滅菌されていませんが、汚染除去処理済みです。3Mの微生物関連製品はISO9001で認定されています。警告このプレートをE.coli O-157の検出に使用しないで下さい。他のほとんどのE.coli／大腸菌群数の培地のように、このプレートはO-157が現れたかどうかを明確に示しません。ほとんどの-157は通常のE.coliと異なりガス派生を伴う赤いコロニーとして現れます。注意3Mは、ペトリフィルムECプレートを食品と飲料以外の分野への使用を検証しておりません。3Mは、ペトリフィルムECプレートを水や医薬品、化粧品の分野への使用を検証しておりません。ペトリフィルムECプレートはあらゆる食品および、あらゆるE.coilや他の菌株に対して試験を行っているわけではありません。ペトリフィルムECプレートは、AOAやAFNOR、NordValのガイドラインに従い、以下の代表的な食品を用いて信頼性を確認しました。　野菜、肉、乳製品、加工食品。ECプレートは、大腸菌群の中から特定の1つの種を区別したり、E.coliの中から特定の1つ種を区別したりすることはできません。ペトリフィルムECプレートを人や動物の診断用に使用しないで下さい。製品性能の情報につきましては3Mまでお問い合わせ下さい。お客様の使用責任1枚のプレートが、もう1枚のプレートと常に同じ状態で同じ菌数を回収できたり、あるいは1つの特定の菌について2枚のプレートが全く同じ菌数に計測できたりするわけではありません。加えて、検体採取方法、検査手順、準備時間や処理時間のような外的要因が菌の回収や計測に及ぼすことがあります。選択した検査方法がお客様の要求する事項に適したものになるように、十分な検体数の特定の食品や微生物を評価する適切な検査方法の選択は、検査を行うお客様の責任になります。また、その検査方法および結果がお客様あるいは供給業者の要求を満たしているかについても、お客様の判断になります。他の培地と同様に、ペトリフィルムECプレートの結果は食品、飲料、工程の品質を保証するものではありません。検査に携わる者が、GLP（U.S.FDA、Title21、Part 58 of the Code of Federal Regulations）あるいはISO 17025などの正しい検査技術を身につけるように指導してください。保証制限および対応制限法において禁止されていない限り、3Mは目的以外の使用に対しては表記・非表記を問わず、質・特性を含む製品についてのあらゆる保証を負いかねます。3MペトリフィルムTMプレートに欠陥があった場合、3Mまたは取り扱い販売店で交換あるいは返品の処理をいたします。対応はこれのみとさせていただきます。商品の欠陥があった日から60日以内に、3Mまたは販売店まで現物を返送して下さい。返送の手続きについては3M担当者までお問い合わせください。3Mの保証責任範囲法において禁止されていない限り、3Mは直接的・間接的、特殊、必然・偶然を問わず、利益損失を含むあらゆる損失に対しての責任を負いかねます。法において禁止されている場合を除き、あらゆる法的論理に対しても3Mの保証責任範囲は欠陥品と認められたプレートの購入金額を超えることはありません。それ以上の保証を望まれるお客様は、購入されたそれぞれの国で適切な助言を求めるようお願いいたします。保存と廃棄未開封のペトリフィルムプレート包装パウチは、8以下で保管してください。ご使用の際には、開封前に製品を室温に戻してください。使用していないプレートは包装パウチに戻してください。開口部を折ってテープで封をして下さい。湿気を避けるために開封したパウチは再冷蔵しないで下さい。封をした包装パウチは、乾燥した冷所で保管し、一ヶ月以上は保存しないで下さい。一度開封した包装パウチは、エアコンが完備されている場合を除き検査室が25以上かつ／もしくは湿度50%以上の場合には、冷凍庫で保存することをお勧めします。

(日本語)

2

一度開封したプレートを冷凍保存する場合には、密閉できる容器にペトリフィルムプレートを入れてください。冷凍されたペトリフィルムプレートを使用する場合には、容器を開け必要な数のプレートを取り出し、残ったプレートを密閉容器に入れ、速やかに冷凍して下さい。使用期限を過ぎているプレートは使用しないで下さい。一度開封したパウチの保存は、自動霜取り装置が無い冷凍庫して下さい。プレートに対して悪影響を与えることがあります。変色しているプレートは使用しないで下さい。ペトリフィルムプレートの使用期限とロット番号は、各パウチに印字されています。ロット番号は、各プレートにも表示されています。ご使用後、ECプレートは、バイオハザードとなる菌を含んでいるかもしれません。お客様の廃棄基準に従って廃棄して下さい。使用手順検体の準備1. 適切な滅菌希釈液をご使用下さい。

リン酸緩衝希釈液、0.1%ﾍﾟﾌﾟﾄﾝ塩希釈液、生理食塩水（0.85% - 0.90%）、チオ硫酸フリーリージンブロスまたは滅菌水。クエン酸塩、重亜硫酸塩またはチオ硫酸塩が入っている緩衝液は、菌の増殖を阻害するので使用しないで下さい。クエン酸緩衝液が標準検査工程の中に入っている場合には、上記の適切な緩衝液を40―45に温めて使用して下さいい。

2. 検体を攪拌またはホモジナイズして下さい。3. 菌の成育を確実にするために、検体懸濁液のpHを6.6－7.2に調整して下さい。酸性の検体については1N NaOHを用

い、アルカリ性の検体については1N HClを用いて調整して下さい。プレートへの接種1. ECプレートを平らなところに置きます（写真a参照）。2. 上部フィルムを持ち上げ、検体懸濁液1mlを下部フィルムの中央部に滴下します（写真b参照）。3. 上部フィルムを巻いて液面に沿わせ、気泡が混入しないようにかぶせます。（写真c参照）。4. スプレッダーを平らな面を下にしてプレートの中心部に置きます。（写真d参照）。スプレッダーの中心部を軽く押

し、検体を均一に広げます。ゲルが固まる前に検体を広げます。フィルム上でスプレッダーを滑らせでないで下さい。5. スプレッダーを外し、ゲルが固まるまで最低1分間、放置します。培養上部フィルム側を上にして、20枚以内に重ねて培養します。参考とする方法により、培養時間と温度が異なります。参考とする方法：

食肉、鶏肉、魚介　AOAC® Official MethodSM (998.08 Confirmed Escherichia coli Counts in Poultry, Meats and Seafood, Dry Rehydratable Film Method)ペトリフィルムECプレート　3571 2472時間AOAC® Official MethodSM (991.14全食品中のE.coliおよび大腸菌群の測定)大腸菌群の判定、ペトリフィルムTMECプレート　3571 2472時間E.coliの判定　3571、さらに2472時間（合計4874時間）培養

判定1. ECプレートは、標準的なコロニーカウンターが拡大鏡を用いて測定できます。フォームダムには選択物質が無いた

め、フォーダム上に成育したコロニーは測定しないで下さい。人為的なものと見られる気泡は測定しないで下さい。ECプレート上に生じたE.coli判定は、試験方法によって異なります。参考とする方法：AOAC Official Methods (998.08、991.14)　確認大腸菌として、色の強さや大きさに関係なく、ガス発生した青いコロニー、もしくは赤みがかった青いコロニーを測定します。ガス無し青色コロニーは、大腸菌として測定しません。他の大腸菌のコロニーは赤色で、コロニーとガスの距離が1コロニー直径分以内にガスを伴います。ガスなしコロニー（コロニーとガスの距離が1コロニー直径分より離れている場合）は、大腸菌群として計測しません。総大腸菌群数は、24時間の培養でガス発生の赤色および青色コロニー両方の数です。培養時間に関係なく、ガス発生した青色コロニーは確認大腸菌です。（写真e参照）注意：このプレートをE.coli O-157の検出に使用しないで下さい。. E.coli O157の株は非典型コロニーであり、グルクロニダーゼ陰性です。従って、青色コロニーにならず、ECプレートで検出されません。

2. 培地の面積は約20 cmｲです。1プレートにつき150個以上のコロニーが存在する場合、1ヵ所かそれ以上の代表\u30340 的な1cmイ格子の中のコロニー数を測定して、結果を推定できます。全体で150以上のコロニーが存在していれば推定で測定ができます。（写真f参照）

3

3. コロニー数が多すぎると、CCプレートはゲル数の色が濃くなり、以下の2つの特徴を1つ以上そなえています。小さいコロニーが多数あること、②多数の気泡があることE.coliの数が多いとコロニーの成育域が濃い青色になります。（図f参照）、非E.coliの大腸菌群の数が多いとコロニーの成育域が濃い赤色になります。（写真g参照）このような場合、測定不能\u22810 多数（TNTC）として結果を記録します。こうした場合は、サンプルをより希釈して試験を再度行い、正確な数を測定します。

4. さらなる同定のためには、コロニーを個別に調べます。上部フィルムを持ち上げ、ゲルからコロニーを釣菌します。（写真h参照）標準操作手順で試験して下さい。

5. もし、培養を終えた後のプレートを培養器から取り出して1時間以内に計測できない場合、プレートを密封器に入れ1週間を超えない期間にｲ15以下で冷凍保存してください。

さらなる情報はペトリフィルムプレートの解説書を参照してください。用法および手順についてのお問い合わせは、お近くの3Mの担当者までお願いいたします。参考資料1. FDA. 1998. Bacteriological Analytical Manual, 8th ed., Revision A, Appendix 3.64.2. International Standard Organization, ISO 6687-1:1999. Microbiology of food and animal feeding stuffs ﾐ Preparation of

test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination.3. International Standard Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products ﾐ

General guidance for the preparation of test samples, initial suspensions and decimal dilutions for microbiological examination

参考資料

• 注意, 使用前にお読みください• 箱のロット番号や砂時計の記号は、ロット番号および使用期限を示します。砂時計の後は年・月で、使

用期限を示します。（年・月：2010-10）砂時計の記号以降がロット番号です。（2010 - 10 AZ）。• 指定した温度以下で保存してください。

AOAC®はAOAC INTERNATIONALの登録商標です。Official MethodsSMはAOAC INTERNATIONALのサービスマークです。

2010-10 AZ








3


3M およびペトリフィルムは 3M の商標です。© 2010. All rights reserved. 34-8706-6457-9

Documents

Petrifilm 6404/6414 - multimedia.3m.commultimedia.3m.com/mws/media/708939O/notice-3mtm... · International Standards Organization, ISO 8261:2001. Milk and milk products –General