61
ĐỒ ÁN CHUYÊN MÔN Đề tài: PHÂN TÍCH CHẤT LƯỢNG SỮA TIỆT TRÙNG LỜI NÓI ĐẦU hất lượng sản phẩm thực phẩm là vần đề nóng hiện nay. Do đó trong cuốn đồ án chuyên môn này chúng tôi sẽ gởi đến bạn đọc cùng thầy cô các bước tiến hành để đánh giá chất lượng sản phẩm thực phẩm( ở đây chúng tôi giới thiệu về sữa tiệt trùng). Do thời gian hạn hẹp và kiến thức còn hạn nên chúng tôi không thể trình bày một cách đầy đủ và chi tiết được. Mong các bạn thông cảm. C Đà Nẵng, ngày 15/11/2007 Người viết Nguyễn Văn Hảo GVHD: Trần Thị Thanh Mẫn Trang 1 SVTH: Nguyễn Văn Hảo - Lớp 05C1

Phan Tich Chat Luong Sua Tuoi Tiet Trung

Embed Size (px)

DESCRIPTION

hay

Citation preview

LI NI U

N CHUYN MN ti: PHN TCH CHT LNG SA TIT TRNG

LI NI UC

ht lng sn phm thc phm l vn nng hin nay. Do trong cun n chuyn mn ny chng ti s gi n bn c cng thy c cc bc tin hnh nh gi cht lng sn phm thc phm( y chng ti gii thiu v sa tit trng). Do thi gian hn hp v kin thc cn hn nn chng ti khng th trnh by mt cch y v chi tit c. Mong cc bn thng cm. Nng, ngy 15/11/2007

Ngi vit

Nguyn Vn Ho

Phn 1 :GII THIU CHUNG

Phn 1: GII THIU CHUNG

1.1. Gii thiu v sa ti:

1.1.1.Ngun cung cp sa:

Trong nhng nm gn y, vic chn nui b ly sa ngy cng c m rng, sn xut sa ti tng ng k. V d in hnh l lng sa ti c thu mua t cng ty sa Vit Nam tng t 1 triu lt nm 1991 ln 24 triu lt nm 1997. Tuy nhin, vic pht trin n b sa ging cn gp mt s kh khn (do ging nhp t nc ngoi li phi thch nghi vi iu kin kh hu Vit Nam), do lng sa ti cung cp vn cha cho nhu cu sn xut v vy vic nhp nguyn liu t nc ngoi ch bin cc sn phm sa cho tiu dng vn ang tip din v s cn ko di trong nhng nm ti.

1.1.2.Cc tnh cht ca sa ti: Sa l mt dung dch sinh hc c to thnh t cc tuyn sa ca ng vt. Sa cha y cc cht dinh dng, cc enzym, hoocmon, khong cht, vitamin cn thit cho s pht trin ca tr em v ng vt cn non v c tnh ca sa l tnh hi ho cn i. 1.1.2.1.Tnh cht vt l :

Sa l mt cht lng mu trng c, c nht ln hn hai ln so vi nc, c v ng nh v c mi t r nt. Sa c nhng tnh cht sau: - Mt quang 150C l:1,030 1,034 - T trng 15,50C:1,0306 (g/cm3)- im ng: - 0,540C - 0,590C - pH : 6,5 6,7 - acid tnh bng Dornic (0D):16 18 (decigam acid lactic/ 1 lt sa) - Ch s khc x 200Cl: 1,35 1.1.2.2Tnh cht ho hc: i vi cc loi ng vt khc nhau th thnh phn ho hc ca sa s khc nhau, ngay c nhng ng vt cng loi cng khng ging nhau. Thnh phn v cht lng ca sa cc loi hay nhng ng vt cng loi lun thay i ph thuc vo nhiu yu t nh: thnh phn thc n, iu kin chn nui, sc kho, trng lng ca con vt, thi k tit sa, phng php vt sa, loi ging v nhiu yu t khc. a. Prtin: Prtin c trong sa tn ti di ba dng: casein, albumin, globulin b. Cht bo: Cht bo trong sa chim khong t 3 - 5,2% (khong trn di 40g trong 1 lt sa) trong gm 2 loi: Cht bo n gin,Cht bo phc tp c. Gluxid: ng c trong sa ch yu l ng lactoza do lactoza cn c gi l ng sa. Trung bnh trong mi lt sa cha khong 50g lactoza (tng ng 4,7%). Ngoi lactoza trong sa cn c glucoza, galactoza, fructoza, maltoza.

d. Cc cht khong: Cc cht khong c trong sa khng nhiu, nhng s c mt cc cht khong ng vai tr quan trng trong cn bng cc cht dinh dng ca sa. e. Vitamin: Sa l mt loi thc n cha rt nhiu loi vitamin nhng hm lng vitamin trong sa khng cao lm. Cc vitamin ny thuc 2 nhm: - Nhm tan trong cht bo: A, D, E. - Nhm tan trong nc: B1, B2, PP, C. f. Cc cht min dch: Trong sa c nhiu cht min dch khc nhau, cc cht min dch ny c tc dng bo v sa khi b h hng. Hm lng cc cht min dch khng nhiu nhng chng ng vai tr quan trng i vi c th.

Cht min dch rt d b ph hy nhit 65 700C. Trong sa c cc cht min dch nh antioxin, opsonin, bacteriolyzin, precipitin, aglutimin, ngoi ra sa cn cha mt lng nh bch cu. g. Cc cht kh: Trong sa tn ti cc cht kh nh CO2 (chim 50 70%), O2 (chim 5 10%), NO2 (chim 20 30%). Ngoi ra trong sa cn pht hin c Ca2NH3.Trong qu trnh bo qun v ch bin sa, hm lng cc cht kh ny thay i. S c mt ca cc kh ny gy kh khn khi gia nhit, lm sa d tro bt khi kh trng. 1.1.2.3.H vi sinh vt sa v vai tr ca n: Trong sa c rt nhiu loi vi sinh vt t nhng ngun gc khc nhau. Trong chng, mt s c ngha tch cc, mt s v hi, mt s gy h hng sa v cc sn phm sa, mt s gy bnh cho ngi tiu dng.

1.1.2.3.1. Cc vi sinh vt bnh thng ca sa:a. Vi khun: - Nhm vi khun lactic Nhm trc khun ng rut Coli-aerogenes Vi khun butyric (Clostridium) - Vi khun propionic - Vi khun gy thi - Cc vi khun hoi sinh khc trong sa : a s cc vi khun ny c

hi cho vic bo qun sa. T cu khun Staphylococcus lm ng sa rt nhanh. - Tetracoccus pht trin km trong sa v khng th lm ng sa

c. - Bacillus megatherium, Bacilluemycoides pht trin tt trong sa,

ho tan cc cc sa. - Bacillus sporogenes pht trin trong sa gy pepton ha nhanh

chng casein ca sa nhng khng lm ng sa. b. Nm men : Cc loi nm men trong sa gm c Saccharomyces, Mycoderma, Torula. Trong s chng c nhng loi c kh nng to bo t, c nhng loi th khng; chng ln men ng lactoza to acid cacbonic v ru. Mt s nm men thuc loi Mycoderma c kh nng to enzym phn hy prtin v lipid to nn trong cc sn phm sa v ng kh chu. c. Nm mc : Nm mc c kh nng phn gii prtin v lipid nn thng gy v ng trong cc sn phm sa. Nm mc thng pht trin sau nm men, v th ngi ta thng thy chng trong cc sn phm sa b hng nng hay trn fomat mm. Mt s loi nm mc c trong sa nh Endomyces lactic, ging Mucor, Aspergillus, Penicillium, Oidium. 1.1.2.3.2 Cc vi sinh vt khng bnh thng trong sa : Cc vi khun gy h hng sa ch yu thm nhp vo sa t h vi sinh vt v. 1.1.2.3.3. Vi sinh vt gy bnh : a. Cc vi sinh vt ch yu t ng vt cho sa truyn sang ngi tiu dng

b. Mt s vi sinh vt gy bnh t ngi bnh qua sa sang ngi tiu dng 1.1.3. Phng php hn ch s xm nhp ca vi sinh vt vo sa khi sa va mi c vt : Sa sau khi c vt hu nh khng c s dng ti ngay tc thi hay em ch bin ngay m phi lu li mt thi gian sau khi vt v vn chuyn sa khi nng tri. Do trong giai on ny nht thit sa phi c bo qun trong nhng iu kin nht nh nhm n nh cht lng ban u ca sa v nu khng th sa rt d b nhim vi sinh vt do sa l mt mi trng cha rt nhiu cht dinh dng thch hp cho vi sinh vt pht trin. 1.2. L do chn ti:

- Sa ti l ngun cung cp cht dinh dng c coi l nhiu nht trong cc loi snphm cung cp cht dinh dng cho con ngi . V ng thi sa l thc phm c hm lng vi sinh vt kh ln. Nu ch bo qun khng tt s lm cho sa b bin i cht lng rt nhanh gy nh hng sac kho cho ngi s dng.

- Hin nay trn th trng c rt nhiu tin tc bn v cht lng sa ti gy cm gic hoang man, lo lng cho ngi tiu dng trn c nc.Nhiu sn phm sa cn trong hn s dng m b bin i cht lng nh: i mu, c v chua nng hoc c mi kh chu,....y l vn nhc nhi ca cc cp lnh o v mi tn lp x hi.

- L sinh vin khoa cng ngh thc phm thuc trng cao ng lng thc thc phm Nng, vi nhng kim thc c hc nh trng, em quyt nh chn ti Phn tch cht lng sa ti vi mong mun hiu c mt phn no v cht lng sa ti trn th trng.

- Vi sinh vin nh chng em, do kin thc cn hn hp nn khng th trnh khi thiu st mong thy c thng cm.

Phn 2:TNG QUAN TI LIUPhn 2: TNG QUAN TI LIU2.1. Quy trnh cng ngh sn xut sa ti ( sa tit trng ):2.2.1. Quy trnh sn xut:Nguyn liu

Phn loi

Lm lnh

Vn chuyn v nh my

Kim tra cht lng

Tip nhn

Lm lnh

Tiu chun ho

Lm lnh

ng ho, tit trng

Rt hp

Lu kho, bo qun

Kim tra cht lng

Xut kho, vn chuyn2.2.2. Thuyt minh quy trnh:

2.2.2.1. Nguyn liu:

Sa ti c khai thc t n b sa ca cc h nng dn chn nui b ly sa.

2.2.2.2. Phn loi, lm sch:

Sau khi tip nhn sa ti t cc h nng dn, nhng ngi thu mua s dng cc thit b th nghim kim tra cht lng sa v cc thit b lm lnh bo qun sa sau khi thu mua. Cn b thu mua c trch nhim kim tra cht lng sa v cn ong lng sa cho tng h vo hai bui sng, chiu theo ng qui nh. Sa ng tiu chun c bo qun trong bn lnh c nhit 2 40C. Cn b k thut thu mua mang mu sa nguyn liu v kim tra cht lng sn phm tin hnh kim tra cc ch tiu. Sa ti hng ngy c ht qua h thng bm ln xe v vn chuyn v nh my. 2.2.2.3. Kim tra cht lng, tip nhn v lm sch:

Cc xe bn ch sa v nh my c cc phng kim tra cht lng tin hnh ly mu v kim tra cc ch tiu thnh phn, cht lng vi sinh, nhit , t trng, hm lng cht kh, cht bo, vi sinh,.Sau khi c kt qu kim tra, sa ti c ht t xe bn vo h thng thit b tip nhn c nhim vi lc li v cn ong trc khi cho vo h thng lm lnh.

Sa sau khi qua thit b lc v ong m c chuyn ti thit b lm lnh t 3 60C trc khi chuyn vo cc bn cha. Cc cng on ny wocj thc hin bi cc thit b tin tin bn cc vt liu Inox dng trong cng ngh ch bin sa hng u chu u.

2.2.2.4. Tiu chun ho:

Khi ni n tiu chun ho ngi ta nhc n mt ch tiu duy nht l cht bo. Khi tiu chun ho sa, ngi ta cho thm cream( nu hm lng cht bo trong sa thp hn yu cu) hoc cho thm sa gy( nu hm lng cht bo trong sa cao hn yu cu).

C th tin hnh bn hai phng php: bng my li tm tiu chun ho t ng hoc bn my phi trn. Tt nht l dng my li tm - iu chnh t ng lm ng thi hai nhim v: lm sch v tiu chun ho cht bo.Ngi ta a sa vo my thanh trng kiu khung bn. un nng 40 450C ri chuyn sang my li tm lm sch, li tm tiu chun ho. Sau khi iu chnh ti hm lng cht bo t yu cu ngi ta a sa i lm lnh.

2.2.2.5. ng ho, tit trng, rt hp:

Cc nguyn liu sa ti, ng knh, ca cao,.. t cht lng sau khi tip nhn v nh my c chuyn ti cc thit b ch bin theo cng ngh hin i. y sa c ng nht v tin hnh tit trng nhit 1390C trong thi gian 4 giy. Qa trnh tit trng xong sa c h nht xung 20 250C chuyn sang thit b rt hp t ng. 2.2.2.6. Lu kho, bo qun, kim tra cht lng:

Sa sau khi rt hp xong enm i lu kho bo qun. Trong sut qu trnh lu kho phi lun lun kim tra cht lng ca sn phm ng thi pht hin p thi nhng h hng x l.

2.2.2.7. Xut kho, vn chuyn:

Cc nh sn xut vn chuyn sa tit trng ti cc nh phn phi chnh. T cc nh phn phi sn phm sa tit trng c cung cp ti cc i l v ngi tiu dng.2.2. Phng php phn tch:

- Phng php cm quan

- Phng php ho l

- Phng php vi sinh

2.3. Cc ch tiu cn kim tra:

2.3.1. Ch tiu cm quan:

- Trng thi sa

- Mu sc

- Mi v

2.3.2. Ch tiu ho l:

- T trng

- chua

- Hm lng lipid

- Hm lng protid

- Hm lng glucid

- Hm lng Canxi

- Hm lng cc kim loi nng: ng (Cu), Ch (Pb), Km (Zn),Thic (Sn ), Asen (As),

2.3.3. Ch tiu vi sinh:

- Xc nh Coliorms- Xc nh E.Coli

- Xc nh Staphylococus Aureus

- Xc nh vi khun k kh sinh H2S

- Xc nh tng s vi khun hiu kh sinh H2S

- Xc nh tng s nm men, nm mc

Phn 3: TIN HNHKIM TRACHT LNG

Chng 1: PHNG PHP LY MU

1. Gi thiu chung v phng php ly mu:

1.1. ngha ca vic ly mu:

- Ly mu l giai on quan trng trong vic nh gi cht lng ca l sn phm.

- Ly mu thng nhm cc mc ch sau:

Kim tra qu trnh sn xut.

Kim tra nghim thu.

Xc nh c trng ca l hng.

tin hnh cc php th.

nh gi th trng.

2. Tin hnh:

2.1. Ly mu:

- Tu theo khi lng ca mi l hng m quy nh s mu ly nh sau:

+ Khi lng sa = 10000 lt/ngy th ly 5 mu

- Thi gian ly 2 mu lin tc khng cch nhau qu 15 pht. Mi mu ti thiu l 500ml.

- Khi vn chuyn ch nn sa nhit thp v chai t theo v tr nm nghing, trnh b vn cc ng di y chai.

- Mu sa c a v phng kim nghim c a i phn tch ngay.

2.2. Chun b mu th:

- Trc khi kim nghim phi a mu th v nhit quy nh 20 50C

- Sau lm cho mu ng u bng cch lc u chai ng mu sa mt cch nh nhng.

Chng 2: PHN TCH CM QUAN

1.Gii thiu chung v phng php cm quan:

Phn tch cm quan l k thut s dng cc c quan cm gic ca con ngi tm hiu, m t v nh lng cc tnh cht cm quan ca mt sn phm thc phm nh mu sc, hnh thi, mi, v v cu trc.

2. Quy trnh cm quan:

Mu Phng cm quan

Dng c

Danh mc ch tiu v h s quan trng

Chun b mu th

Chun b thanh v

Tin hnh th

Bng im

X l v bo co kt qu

3.Tin hnh:

3.1. Xc nh trng thi sa:

- Xc nh trng thi ca sa, ngi ta ch n s ng nht ca dch sa.

- Cch xc nh: + Rt sa vo cc thu tinh kh, sch. + Quan st s ng nht ca dch sa.

- Sa tt dng nh tng ng u, khng vn cc, khng c lp b ni vng trn b mt, khng c ln rc, rm, c,.....

3.2. Xc nh mu sc:

- Quan st k sa di c thu tinh di nh sng.

- Sa tt phi c mu trng hc vng nht.

- Mu sc ca sa c th cho bit s b khi nim v cht lng ca sa.

- V d: + Sa cng vng khi hm lng b qu nhiu.

+ Sa c mu xanh l c th sa b ly bt b hoc pha thm nc

+ Sa c mu xm hoc nht c th do v b b vim hoc c th do nh hng ca thc n l.

+ Nhng vi sinh vt nhim sa c th lm thay i mu sc ca sa thm ln hoc nht i.

3.3. Xc nh mi v:

- Xc nh mi v ca sa bn cch th nm.

- Ch : Ch th nm mi v ca sa i vi sa c mu sc ca sa tt.

- Sa tt c mi v thm ngon c bit ca sa.

- Sa c mi v ng c th do nh hng ca thc n chn nui.

- Sa c mi v ca thuc st trng do b nh hng ca thuc dng st trng chung tri, dng c cha ng, dng c vt sa,....

- Sa c mi v kim loi, c th do dng c bng kim loi b ho tan vo.

- Sa c v chua, chy, ng,...do b nh hng ca vi sinh vt nhim sa gy nn.

- Sa c mi i kh do sa b phn hu cht bo.

4. Kt qu: Sau khi tin hnh nh gi cht lng cm quan sa bn hai phng php profil v cho m ta c bng kt qu nh sau:

4.1. nh gi bng phng php profil:- Php th gm hai mu sa tit trng Zinzin (A) v sa tit trng Flex (B). - Cc yu cu ca php th:

+ Chn cc c tnh cn nh gi : v ngoi hnh (mu sc, trng thi,), ngi sn phm v nm sn phm.

+Thc hin cc php th s b cc thnh vin thng nht s dng.

+ nh gi cng cc c tnh c la chn nh gi.

+ V biu di dng th biu din kt qu.

Sau khi th ko ta c th biu din kt qa ca cc kim nghim vin nh sau:A. Ngoi hnh:

- Mu sc: 1.2.3..4.5.6..789

- Trng thi:

- Tp cht l:

B. Ngi sn phm:

- Mi thm:

- Mi chua:

- Mi kht:

- Mi kim loi:

- Mi i kh:

- Mi thuc hhc:

- Mi b:

C. Nm sn phm: B A- V ngt:

- V chua:

- V ng:

- V tanh kim loi:

Ch thch: sa tit trng ZinZin (A) sa tit trng Flex (B) - Da vo th ta c nhn xt sau:

+ Mu A c cht lng tt hn mu B.

+ Mu sc v mi thm ni tri hn (y l tnh cht c gi tr cm quan ln nht). + Cc ch tiu khc ca mu A cng hn mu B.

Tm li da vo phng php ny ta so snh c cht lng gia hao mu th. V ko cng bc h (A) t cht lng v gi tr cm quan.4.1. nh gi bng phng php cho im: - L phng php c s dng nh gi tng qut mc cht lng ca mt sn phm so vi nhng sn phm cn li trn tt c cc ch tiu cm quan nh: mu sc, mi v, tnh trng cht lng ca mi ch tiu c nh gi bng im. Ga tr im tng theo mc tng ca cht lng.

- Cc im c cho theo quy nh ca tiu chun Vit Nam:

TCVN 3215 79 gm 20 im v 6 bc.

- Sau khi cc kim nghim vin nh gi cht lng cm quan ta c bng kt qu sau:

Tn ch tiuim ca cc

kim nghim vinTng s

imTB cha

c trng

lngH s

quan

trngTB c

trng

lng

KNV1KNV2KNV3KNV4KNV5

T/cht bn trong453442040,83,2

T/cht bn ngoi44455224,41,04,4

Mi44445214,20,20,84

V55445234,62,09,2

im chung16,64

Loi sa tit trng c im chung l 16,64 v im trung bnh cha c trng lng ca ch tiu quan trng nht ( mi v) >= 4,7 nn theo TCVN 3215 79 th sa tit trng t cht lng loi kh.Chng 3: PHN TCH L HO

1.Gii thiu chung v phng php l ho:

L phng php dng nh gi cc ch tiu ho l ca sn phnm thc phm nh: t trng, chua, hm lng ng, chy bo, prott,...

2. Tin hnh:

2.1. Xc nh t trng:

2.1.1. Nguyn tc:

L phng php xc nh khi lng ca sa 200C so vi khi lng ca nc ct 200C

Khi lng sa 200C

d =

Khi lng ca nc ct 200C

2.1.2. Thit b, dng c, ho cht:

- T trng k sa 200C

- Sa tit trng.

- Nhit k, ng ong.

2.1.3. Tin hnh:

- Mu th c lm ng u, h nhit xung 16 170C.

- Cho mu th vo ng ong t t trnh si bt.

- Cho t trng k tht nh nhng vo sa, trnh chm vo thnh ng, cho ti khi chm ti vch 1,030 b tay ra tht nh nhng.

- c kt qu trn t trng k.

- Ghi nhit bng nhit k.

2.1.4. Kt qu:

T trng ca sa c tnh theo cng thc:

d = dQX + 0,0002(t 20)

Trong : dQX: t trng c c trn t trng k.

t : nhit ca mu lc xc nh.

2.2. Xc nh chua:

Sa tit trng coa phn ng axit yu. Khi bo qun axit ca sa tng ln do tch t axit lactic - sn phm ca s chuyn ho ng lactoza do qu trnh ln men lactic.

2.2.1. Nguyn tc:

Nguyn tc xc nh da vo phn ng trung ho:

H+ + OH- = H2O

Dng dung dch NaOH 0,1N chun ht lng axit c trong mu vi ch th phenolphtalein.2.2.2. Thit b, dng c, ho cht:

- ng ong, phu thu tinh- Buret, pipet

- Bnh nn 250ml- Cc thu tinh

- Phenolphtalein- Sa thit trng

2.2.3. Tin hnh:

- Ly 10ml sa cho vo bnh nn thm vo bnh nn 20ml nc ct v 3 git phenolphtalein, lc u.

- Chun dung dch trong bnh nn bng NaOH 0,1N cho n khi xut hin mu hng bn trong 30 giy l dng.

- Ghi VNaH tiu tn.

2.2.4. Kt qu:

axit ca sa tnh bng Tecne: S ml NaOH 0,1N dng chun 100ml sa

T = = VNaOH x 10 ( 0T)Ch : axit ca sa tit trng khong 16 180T v < 220T l c th dng c.

2.3. Xc nh hm lng cht bo (phng php chit bng dung dch Adam):2.3.1. Nguyn tc:

Dung dch Adam l mt hn hp ca ru tylic, amniac v este sunfuric c kh nng tch cht bo ca sa ra khi cc thnh phn khc c mt trong sa. Bng cch chit trong phu chit, tch ly cht bo, sy kh v cn n trng lng khng i s tnh c hm lng cht bo trong sa.

2.3.2. Thit b, dng c, ho cht:

- Cn phn tch, t sy- Bnh ht m

- Phu chit dung tch 100ml- Cc dung tch 100ml

- Dung dc amniac 25% - Ete sunfuric

- Dung dch Adam: Trn ln 228ml ru tylic 90% vi 7ml amniac 25%. Ly 10ml dung dch ny trn vi 11ml ete sunfuric c 21ml dung dch Adam.- Phenolphtalein- Dung dch ru 1%2.3.3. Tin hnh:

Ht 10ml sa, cho vo phu chit dung tch 100ml, thm vo 30ml nc ct nng 70 - 800C v 3 - 5 git phenolphtalein v 21ml dung dch Adam. Lc nh ri mnh dn phu chit cht bo ho tan trong ete sunfuric. yn phu chit trong 30 pht.

Chit ly lp di tht cn thn vo cc th nht, lp trn ( lpcht bo ) vo cc th hai( bit trng lng). Chuyn dung dch trong cc th nht vo li phu chit bng 10ml ete sunffuric. Lc mnh, yn trong 15 pht, ri li tch lp di vo c th nht, lp trn cho vo cc th hai. Tip tc lm nh vy 3 ln.

Cui cng cc cha cht bo ngoi khng kh cho bay hi ht ete, sy 1050C n trng lng khng i.

2.3.4. Kt qu:

Hm lng cht bo tnh bng % theo cng thc:

X = ( g/ml )

Trong : m: khi lng ca cc v cht bo saukhi sy (g)

M0: khi lng ca cc (g)

VM: th tch ca mu em phn tch (ml)

2.4. Xc nh hm lng protid:

2.4.1. Nguyn tc:- Cc cht protid c v c ho bn acid sunfuric m c. Lm xc tc cho qu trnh v c ho l ng sunfat, hyrogien peroxit, thu ngn, selen, kali pemangenat v cc hn hop khc.Dng kali sunfat hoc Nti sunfat ln tng nhit si ca acid sunfuric, y nhanh qu trng oxi ho. Sn phm ca s v c ho protit l amniac:

H2SO4 , t0CxHyOzNt + O2 (KK) NH3 + SO2 + CO2 + H2O + ...

CuSO4, K2SO4

- NH3 va mi sinh ra tc dng ngay vi H2SO4 ():

2NH3 + H2SO4 = (NH4)2SO4- Dng kim mnh NaOH y NH3 t mui (NH4)3SO4 ra dng t do:

2NaOH + (NH4)2SO4 = 2NH3 + Na2SO4 + H2O

- Ct NH3 dng H2SO4 0,1N ( bit trc th tch) hp ph NH3- Chun lng H2SO4 0,1N d bn NaOH 0,1N

- T lng NaOH 0,1N tiu tn tnh lng Nit

- Sau khi tnh c hm lng Nit, mun tnh hm lng protid ton phn trong thc phm ta tnh nh sau:

- Protid ton phn = 6,38 x hm lng Nit ton phnVi 6,38 l h s.

2.4.2. Thit b, dng c, ho cht:

My ct mCn phn tch

Cc thu tinhPipet, buret

Bp un, bnh tam gicBnh nh mc

Sa tit trngK2SO4, CuSO4, H2SO42.4.3. Tin hnh:

2.4.3.1. Ly mu:

Tu hm lng protid c trong thc phm hc tu theo dng sn phm m c cch ly mu nh sau: Dng pipet ly chnh xc 2 - 5ml mu cho vo bnh Kendan.2.4.3.2. V c ho mu:

Thm vo bnh Kendan cha mu 1g K2SO4, 2g CuSO4, 3ml H2SO4 m c, dng t nc sch trng sch c bnh, t ming phu ln ming bnh Kiendan, cp bnh Kiendan vo gi, t y bnh nghing mt gc 450 t tn bp in hoc n cn.

un nh, sau vi pht chuyn sang un mnh cho n khi ton b dung dch trong bnh Kiendan c mu xanh ca sunfat ng hoc xanh vng th ngng.

ngui bnh n nhit phng, chuyn sang bnh nh mc 100ml, trng bnh Kiendan bn nc ct ri thm nc ct n vch nh mc, lc u.2.4.3.3. Ct mu:

Tin hnh trn my ct m

un xong ngui ri lp bnh Kiendan vo my ct m

Ht 20ml H2SO4 0,1N cho vo bnh tam gic 250ml, 5 - 10ml nc ct v 3 - 5 git ch th hn hp ri t bnh vo u di sinh hn ca mycats m, sach u ng sinh hn phi nhng ngp dung dch trong bnh nn.

Dng pipet ly 10ml dung dch bnh nh mc cho vo bu ct ca my ct m thm v 10 -15ml NaOH 30%( nh vo 5 git ch th phenolphtalein 15 v cho t t NaOH 30% qua phu vo bu ct, nu dung dch trong bu ct cha chuyn qua mu hng th thm NaOH cho n khi xut hin mu hng m), nt kn.

Cho ncct vo khong 2/3 th tch bnh cu, m nc lm lnh chy vo ng lm lnh.

un si dung dch trong bnh cu khong 20 - 25 pht, dng giy qu th vi nc ngng thot ra khng cn phn ng kim l c. Ct xong dng bnh tia ra sch acid bm ng ngng nhng trong bnh tam gic.2.4.3.4. Chun :

Chun lng H2S04 0,1N d trong bnh tam gic bng NaOH 0,1N n khi dung dch trong bnh tam gic chuyn sang mu xanh l cy l c.

2.4.3.5. Ct mu trng:

Ct mu trng vi lng thuc th v thao tc nh trn nhng thay 10ml dung dch trong bnh nh mc bng 10ml nc ct.

2.4.4. Kt qu:

Hm lng Nit ton phn c tnh nh sau:

X = (g/l)

Trong : V0: th tch bnh nh mc (ml)

V: th tchdung dch mu ly ct (ml)

V1: s ml NaOH 0,1N tiu tn chun mu trng (ml)

V2: s ml NaOH 0,1N tiu td chun mu th (ml)

V: s ml mu phn tch (ml)

0,0014: lng Nit ng vi 1ml NaOH 0,1N (g)2.4. Xc nh hm lng glucid ( l xc nh ng kh lactozza):2.4.1. Nguyn tc: - Trong mi trng kim, ng kh d dng kh Cu2+ trong dung dch felin to Cu+ di dang Cu2O kt ta mu gch.

Dung dch felin A : CuSO4Dung dch felin B : NaOH, Kali natri tacrat

- Phn ng xy ra khi trn felin A v felin B:

CuSO4 + 2NaOH = Cu(OH)2 + Na2SO4 HO CH COOK O CH - COOK

Cu(OH)2 + = Cu + 2H2O

HO CH - COONa O CH COONa Kali natri tacrat

- ng kh kh hn hp felin:

O CH - COOK HO CH - COOK

R CHO + 2Cu + 2H2O = Cu2O +

O CH - COONa

HO CH - COONa

+ R - COOH

- Ho tan Cu2O kt ta bng dung dch Fe2(SO4)3 trong mi trng H2SO4 m c:

Cu2O + Fe2(SO4)3 + H2SO4 = 2CuSO4 + 2FeSO4 + H2O

- Dng cht chun KMnO4 0,1N chun d lng FeSO4 to thnh:

2KMnO4 + FeSO4 + H2SO4 = K2SO4 + Fe2(SO4)3 + MnSO4 + H2O

- Ti thi im kt thc nh phn, dung dch c mu hng. T lng KMnO4 0,1N tiu tn s tnh c hm lng ng kh. 2.4.2. Thit b, dng c, ho cht:

- Cc thu tinh- Bnh inh mc

- Phu thu tinh, giy lc- Pipet, buret

- My lc chn khng- Bnh nn

- Sa tit trng- Felin A, Felin B

- KMnO4 0,1N- Fe2(SO4)3

2.4.3. Tin hnh:

a) Chun b mu: Cn chnh xc G(g) ko vo c thu tinh v ho tan hon ton bng nc ct. Chuyn sang bnh nh mc 100ml. Trng cc bng nc ct cho vo bnh nh mc trn. Thm nc ct n vch nh mc.

Thm mt t ch axeetat bt ( 1,5g ) lc u v cho qua giy lc. Hng dung dch lc vo cc kh sch

b) To kt ta: Cho vo bnh nn 250ml: 10ml dung dch mu, 10ml felin A, 10ml felin B, lc nh.

t bnh nn trn bp in, un si, si ng 3 pht.

Ly bnh nn ra nghing cho kt ta lng xung. Dung dch bn trn kt ta Cu2O phi c mu xanh. Nu khng cn ngha l lng Cu2+ khng phi lm li.

c) Gn lc kt ta:

Khi kt ta Cu2O lng xung gn phn nc bn trn v lc qua phu lc xp cm xuyn qua nt cao su ca bnh lc c nhnh ni vi my ht chn khng

Ra kt ta bng nc ct un si v gn lc sau cho tip vo phu cho n khi trong bnh nn mt mu xanh l c. Trong qu trnh gn, khng kt ta Cu2O lt qua phu v lun lun gi c mt lp nc trn mt Cu2O trnh tip xc vi khng kh d) Ho tan kt ta: Ln cui cng gn ht nc v cho ngay 10 20ml Fe2(SO4)3 ho tan Cu2O trong bnh nn

Thay bnh lc ny bng bnh lc khc. dung dch Fe2(SO4)3 ho tan Cu2O trong bnh nn vo phu lc. Trng bnh nn v ra bng Fe2(SO4)3 cho n khi khng cn vt Cu2O trong bnh nn v phu. Trng phu ra li bng nc ct un si ri c vo phu v ht ht xung bnh lc. e) Chun :Ly bnh lc ht ra v chun ngay bng KMnO4 0,1N cho n khi xut hin mu hng bn trong 30 giy.

2.4.4. Kt qu:

Hm lng ng kh lactoza c tnh bng cng thc:

Rs =

Trong : a: lng glucoza c tra t s ml KMnO4 tiu tn

V0: th tch bnh nh mc ( ml )

V: th tch dung dch ly th ( ml )

G: lng cn mu ( g )

Ch : Hm lng ng khng qu 30%. Nu cao qu ko d ht nc do d m v d chua.

2.4. Xc nh hm lng Canxi :

2.4.1. Nguyn tc:

- Dng cht chun Trilon B xc nh nng Ca2+ vi ch th Muretxit v dng NaOH iu chnh pH >= 11.- Khi cha chun trong bnh nn Muretxit kt hp vi Ca2+ to ra phc c mu .

- Khi nh phn bng Trilon B v n im tng ng th ch th c gii phng hon ton dng t do, dung dch chuyn sang mu tm.

- nh phncho n khi dung dch chuyn t mu sang mu tm th ngng chun .

2.4.2. Thit b, dng c, ho cht:

- Bnh nn, pipet, buret.- Cht ch th Muretxit.

- Dung dch NaOH 20%.2.4.3. Tin hnh:

- Trn buret cha dung dch Trilon B.

- Trong bnh nn dung tch 250ml ( trng ra bnh bng nc ct) cha 50ml sa, 1ml dung dch NaOA 20% v vi git Muretxit, lc u.

- Xy ra hai trng hp:

+ Nu dung dch trong bnh nn c mu tm th chng t trong sa khng c Ca2+.

+ Nu trong bnh nn c mu th ta tin hnh chun cho n khi dung dch trong bnh nn xut hin mu tm th dng li.

- Ghi th tch Trilon B tiu tn.2.4.4. Kt qu:

- Ta c nng ng lng ca Canxi l:

NCanxi = (N)

- Vy hm lng Canxi c trong sa l:aCanxi = (g/l)

Trong : N: nng ng lng ca Canxi.

: khi lng ng lng ca Canxi ( Ca = 40).

V: th tch mu.2.5. Xc nh hm lng cc kim loi nng (Dng phng php Ditizon):

2.5.1. Xc nh ng (Cu), Ch (Pb), Km (Zn):

Bn cht ca phng php Ditizon: NH-NH-C5H6 S=C

N=N- C5H6Ditizon tan trong cacbontetraclorua v cloroform c mu xanh l cy.

Trong mi trng nc Ditizon tn ti cn bng: HDz Dz- + H+Do trong mi trng trung tnh hay axit, Ditizon dng phn t nhiu hn nn chng t tan.

Trong mi trng kim Ditizon tan nhiu hn do dng ion nhiu hn.

Ditizon to vi cc ion kim loi thnh cc Ditizonnat c mu, t tan trong nc nhng tan nhiu trong cacbontetraclorua v cloroform.

Cc Ditizon tn ti 2 dng tu thuc vo pH ca mi trng:

- pH 7: Chng tn ti dng xeton

- pH 7: Chng tn ti dng enol.

Nguyn tc chung ca phng php:

- Dng phng php chit

- Dng dung mi cacbontetraclorua hay cloroform.

- Cho cc ditizon tc dng vi kim loi cn xc nh to thnh Ditizonat.

- iu chnh pH Ditizonnat tch ra khi dung mi.Nguyn tiu kin chit

Mu ca DitizonpH chit hon tonDung mi chit

Ch

ng

KmMi trng kim:

Mi trng axit: tm

Trung tnh hay kim yu:7-10

2-5CCl4

CCl4

CCl4

Chun b dung dch xc nh ng, Ch, Km:

Cc kim loi ny c trong thc phm vi lng nh do phi v c ho mu xc nh chng.

C 2 phng pp v c ho mu:

*V c ho mu bng phng php kh: t chy hon ton cc cht hu c c trong mu bng l nung. Trong qu trnh t c b sung thm cht MgO2 v (CH3COO)2Ca tng tc t chy v ngn to thnh cc hp cht bay hi ca kim loi.-Dng c, ho cht: + Capxun dung tch 250ml

+ Bnh nh mc dung tch 250ml

+ Bp cch ct, l nung

+ Phu, pipet 100ml, cn k thut

+ Giy lc, bp in

+ Ho cht: MgO2 v (CH3COO)2Ca , HNO3 m c.-Tin hnh:

Ly mu

V c ho mu

nh mc mu

+ Ly mu: Dng pipet ht 100ml mu cho v capxun

+ V c ho mu: Thm vo acpxun 0,5g MgO2 v 0,5g (CH3COO)2Ca. t capxun ln bbp cc t cho mu chy thnh than, sau t vo l nung nhit t= 600-700oC, n khi mu bin thnh tro xm hon ton. V sau ly capxun ra khi l nung, ngui, cho vo capxun 20ml HNO3 m c v 50 ml nc ct 2 ln. t capxun ln bp in un cho tan ht mui bm trn capxun, un si thn 10 pht na.

+ nh mc mu: Chuyn ton b dung dch t capxun vo bnh nh mc 250 ml, trng ra capxun nhiu ln, sau thm nc ct n vch nh mc, lc k.

*V c ho mu bng phng php t: t chy hon ton cht hu c trn bp in vi xc tc H2SO4 m c, l nhng cht oxy ho mnh lm tng tc t chy.

- Dng c: Nh phng php kh.

- Ho cht:

+ H2SO4 m c (d=1,84)

+ HNO3 m c(d=1,4)

+ Amonxetat :NH4CH3COO

- Tin hnh :

+ Ly mu ging nh phng php kh.

+ Thm vo capxun ng mu 3ml HNO3 m. c, 50ml H2SO4 m c. t capxun ln bp in v un si daung dch traong capxun, tip tc un c 10 pht nh 5-20 git HNO3 m c, kh NO2 s thot ra . Nu thy mu trong capxun sm li th thng cng nh HNO3 v khi dung dch tr nn nht mu th gim nh HNO3 li n khi dung dch khng mu th thi.

+ Tip tc un cho n kh khi trng bc ht, tip tc un thm 10 pht na. Nu dung dch khng mu th vic v c ho xong.

+ Ly capxun ra khi bp in, nh 0,2g NH4CH3COO, khuy cho tan ht.

+ nh mc dung dch trong capxun thnh 250ml, nu thy dung dch trong capxun c th lc trc khi nh mc.

2.5.2. Xc nh hm lng ng( Cu):

2.5.2.1. Nguyn tc:Ditizon tc dng vi ion Cu2+ xy ra cc phn ng sau:

Cu2+ + 2H2Dz = Cu(HDz)2 + 2H+Cu2+ + Cu(HDz)2 = 2CuDz + 2H+Cu2+ + H2Dz = CuDz + 2H+Cu(HDz)2 : mu tn

CuDz : mu vng nu

Cu(Dz)2 v CuDz u tan trong dung mi hu c v khng tan trong nc

- Trong mi trng axit yu v c d ditizon th vic to thnh Cu(HDz)2 thun li hn

- Trong mi trng trung tnh th c 3 phn ng trn u xy ra

- nnng cao v pH=2 vic to thnh CuDz xy ra thun li hn

Trong phn dung mi hu c, Cu(HDz)2 d b phn ly to thnh CuDz:

Cu(HDz)2 = CuDz + H2Dz

- Do cc iu kin trn, xc nh ng bng ditizon, thng tin hnh pH=3-4 thu Cu2+ di dng Cu(HDz)2 l hon ton.2.5.2.2. Thit b, dng c, ho cht:

- Cn phn tch - Cc thu tinh 250ml

- Bnh nh mc dung tch 1000 ml - Giy th pH.

- Phu chit dung tch 100ml. - Buret 100ml

- Amoniac 2N

- Dung dch Ditizon trong cloroform 50M.

- H2SO4 2N: Ho tan 55ml H2SO4 (d = 1,84) vo nc ct thnh 1000ml.

- Dung dch ng tiu chun 25 M: Ho tan 19,64 g CuSO4.5H2O tinh khit loi I trong nc ct hai ln, i thnh 1000ml. 1ml dung dch ny cha 5( ng.2.5.2.3. Tin hnh:

- Loi Sn2+ dung dch mu: Ly 25ml dung dch t bnh nh mc ( v c ho) cho vo cc thu tinh dung tch 250ml, cho vo cc 10ml Br2 lng v un tren bp in ui ht SnBr4.tip tc un, thm nc ct vo ri tip tc un cho n khi dung dch khng cn mu ca brom. Lc ny dung dch ch cn cc ion Cu2, Zn2+, Fe2 , Pb2+

- Cho dung dch loi ch vo phu chit, iu chnh pH ca dung dch n c pH = 3 4 bng amoniac 2N hay H2SO4 2N (dng giy th pH).- Chit chun : Np Ditizon 50M vo buret. Nh 1ml Ditizon vo phu chit cha dung dch mu, lc 30 giy. Nu c Cu2+ th trong phn dung mi cloroform s c mu ca ch ditizonat. Chit b phn mu tm (phi chit tht cn thn dung dch mu khng chy ra )

Li cho thm 1ml dung dch Ditizon vo phu chit, lc 30 giy v li tch b mu tm. C tip tc nh th cho n khi phn dung mi trong phu cht km , khi lng ng trong dung dch gim rt nhiu. Lc nh 0,2ml ditizon vo phu chit, lc v tch nh trn cho n khi nh ditizon vo phu chit ditizon vn gi c mu xanh sau khi lc 30 giy th thi. Ghi tng s ml Ditizon dng chun ion ng.

- Xc nh chun ca Ditizon:

Ly chnh xc 10ml dung dch ch tiu chun vo phu chit sch. Np dung dch Ditizon 50M vo buret. Tin hnh chun nh trn v cn c vo chun ca Ditizon ny tnh kt qu hm lng ng.

2.5.2.4. Kt qu:

Tnh: 1ml dd ditizon ng vi bao nhiu g ng

1ml CuSO4.5H2O 25M cha 5( ch

Vy: 1ml dd Ditizon ng vi s g ch

Hm lng ch tnh bng gam cha trong 1lt sa l:

Trong :

3,45: S gam ng tng ng vi 1ml dd ditizon

a: Th tch dung dch ditizon dng chun (ml)

V: Dung tch bnh nh mc(ml)

V1: Th tch dung dch ht t bnh em phn tch

Vo : Th tch sa ly phn tch

2.5.3. Xc nh hm lng Ch( Pb):

2.5.2.1. Nguyn tc:- Trong mi trng trung tnh hay kim, ion Pb2+ to vi Ditizon to thnh ch ditizonat mu tan trong dung mi hu c:

Pb2++2H2DZ = Pb(Dz)2 + 2H+- V Pb(Dz)2 tan rt t trong dung mi hu c do khi dng mmi trng trung tnh tt nht nn dng nng Ditizon trong CCl450M(micro phn t gam :12,81mg/l). Trong CHCl3, Pb(Dz)2 tan gn 17 ln trong CCl4. Do xc nh Pb ngi ta thng dng CHCl3 ho tan ditizon.

- pH > 7 vic thu Pb2+ vo dng Pb(Dz)2 l hon ton. Tuy nhin pH>9,5 th Pb(Dz)2 trong CHCl3 b phn hu.

- Trong dung dch sau khi v c ho c th c mt ca oin Sn2+, Cu2, Zn2+, Fe2+Cc ion ny c th b che du bi KCN, tuy nhin Sn2+ khng b che bi KCN do phi tch ion ny ra khi dung dch trc khi xc nh ch.2.5.2.2. Thit b, dng c, ho cht:

- Cn phn tch - Cc thu tinh 250ml

- Bnh nh mc dung tch 1000 ml - Giy th pH.- Phu chit dung tch 100ml. - Buret 100ml - Dung dch tiu chun 25M(ho tan 8,28mg Pb(NO3)2 tinh khit loi 1 trong nc ct 2 ln, n thnh 1000ml, 1ml dung dch ny cha 1,175( ch)

- Dung dch amoniac 2N

- KCN tinh th

- Dung dch Ditizon tiu chun (Dung dch Ditizon trong Cloroform 50M): Cn chnh xc 12,81mg Ditizon tinh khit cho vo cc, thm 200ml CHCl3 vo cc v khuy nh cho tan Ditizon, nh mc trong 1000ml, lc k.

- Hydroxylamin hydroclorua (NH2OH.HCl) tinh th.

2.5.2.3. Tin hnh:

- Loi Sn2+ra khi dung dch mu:

Ly 25ml dung dch t bnh nh mc ( v c ho) cho vo cc thu tinh dung tch 250ml, cho vo cc 10ml Br2 lng v un tren bp in ui ht SnBr4.tip tc un, thm nc ct vo ri tip tc un cho n khi dung dch khng cn mu ca brom. Lc ny dung dch ch cn cc ion Cu2, Zn2+, Fe2 , Pb2+

- Che du cc ion Cu2, Zn2+, Fe2 , :

Chuyn dung dch loi Sn2+vo phu chit. Cho vo phu chit vi tinh th NH2OH.HCl lc cho tan ht. Cho vo phu mt lng KCN (bng ht ng), lc cho tan ht. iu chnh pH dung dch n pH>7,5 bng NH4OH 2N hoc HNO3 2N.

- Chit chun :

Np Ditizon 50M vo buret. Nh 1ml Ditizon vo phu chit cha dung dch mu, lc 30 giy. Nu c Pb2+ th trong phn dung mi cloroform s c mu ca ch ditizonat. Chit b phn mu tm (phi chit tht cn thn dung dch mu khng chy ra )

Li cho thm 1ml dung dch Ditizon vo phu chit, lc 30 giy v li tch b mu tm. C tip tc nh th cho n khi phn dung mi trong phu cht km , khi lng ch trong dung dch gim rt nhiu. Lc nh 0,2ml ditizon vo phu chit, lc v tch nh trn cho n khi nh ditizon vo phu chit ditizon vn giu c mu xanh sau khi lc 30 giy th thi. Ghi tng s ml Ditizon dng chun ion ch.

- Xc nh chun ca Ditizon:

Ly chnh xc 10ml dung dch ch tiu chun vo phu chit sch. Np dung dch Ditizon 50M vo buret. Tin hnh chun nh trn v cn c vo chun ca Ditizon ny tnh kt qu hm lng ch.

2.5.2.4. Kt qu:

Tnh: 1ml dd ditizon ng vi bao nhiu g ch

1ml Pb(NO3)2 25M cha 5,175( ch

Vy: 1ml dd Ditizon ng vi s g ch

Hm lng ch tnh bng gam cha trong 1lt sa l:

Trong :

3,45: S gam ch tng ng vi 1ml dd ditizon

a: Th tch dung dch ditizon dng chun (ml)

V: Dung tch bnh nh mc(ml)

V1: Th tch dung dch ht t bnh em phn tch

Vo : Th tch sa ly phn tch

2.5.3. Xc nh hm lng Km( Zn):

2.5.3.1. Nguyn tc:

- Trong mi trng trung tnh hay kim yu, Zn2+ tc dng vi ditizon to thnh phc cht Zn(HDz)2 mu .

Zn2+ + 2H2Dz = Zn(HDz)2 + 2H+- Phn ng tren thch hp khi pH=6,3 tng ng vi dung dich cha dung dch m citrat.

- Nng ca Zn2+ cng ln mu ca Zn(HDz)2 cng m.

- em o mu ca dung dch to phc cht mu s xc nh nng ca Zn2+ trong mu.

- Phi loi b ion Cu2+, Pb2+ trc khi xc nh Zn2+ .

2.5.3.2. Thit b, dng c, ho cht:

-Cn phn tch -Cc thu tinh 250ml

-Bnh nh mc dung tch 1000 ml -Giy th pH.

- Phu chit dung tch 100ml. - Buret 100ml

- Amoniac 2N

- Kali-Natri tactrac dung dch 20%.

- Dung dch Natrisunfua Na2S bo ho

- Dung dch Ditizon trong Cloruaform 50M

- Dung dch km tiu chun: cn 43,97mg ZnSO4.7H2O tinh khit loi 1 cho vo bnh nh mc dung tch 1000ml, thm vo 10ml H2SO4 2N, thm nc ct n vch nh mc v lc k. 1ml dung dch cha 10(km.

2.5.3.3. Tin hnh:

Loi b Cu2+Chit km bng Ditizon v loi b ch

o mu dung dch mu

o mu dung dch km tiu chun- Loi b Cu2+ :

+ Ly 25ml dung dch v c ho cho vo phu chit. Trung ho bng NH3 2N n pH=7 vi giy th pH. Cho vo phu chit 5ml dung dch ditizon, lc mnh phu chit 1-2 pht ri yu cho phn lp.

+ Tch b lp di c phc ng-ditizonat c mu tm. Thm ditizon v tip tc lc cho n khi khng cn mu tm phn ditizon.

- Chit km bng Ditizon v loi b ch:

+ Cho phn dung dch ditizon v mt cc, cho vo cc 3ml kili-natri tactrac dung dch 20% chng kt ta cc hydroxyt khin loi trung ho amoniac.

+ Chuyn ton bb dung dch t cc vo phu chit, lc k. Dung dch s c mu ca km-ditizonat. Cho vo phu 10ml Natrisunfua dung dch bo ho ( loi ch v ditizon d), lc k, yn cho tch lp. loi b lp di, tip tc ra vi Natrisunfua cho n khi lp di khng mu th thi.

- o mu dung dch mu:

+Chuyn dung dch mu ca km-ditizonat vo bnh nh mc dung tch 25ml, thm cloruaform n vch nh mc, lc k.

+ em dung dch ny o mu trn my o mu, tr s c c l mt quang ca mu phn tch: D1

- o mu dung dch km tiu chun: Ly 10ml dung dch km tiu chun vo phuchit khc. Tin hnh chun Zn2+ vi ditizon v cng thu phn dung mi cha km-ditizonat mu vo bnh nh mc 25ml, thm nc ct n vch nh mc v tiien hnh o mu dung dch ny. Tr s o c l mt quang ca mu chun: Do2.5.3.4. Kt qu:

Hm lng Km trong sa c tnh theo cng thc:

Trong :

V2 : S ml km tiu chun

Do : Tr s o mt quang i vi mu chun

D1: Tr s o mt quang i vi mu phn tch

Vo : Th tch bnh nh mc ( phn v c ho)

V1 : Th tch dung dich mu ly chun

V :Th tch sa ly phn tch

2.5.4. Xc nh hm lng Thic:

2.5.4.1. Nguyn tc:- Sau khi v c ho mu thc phm, dng dch cha thic c hai dng Sn2+ v Sn4+.

- Dng hyro kh ton b lng Sn4+ v dng Sn2+.

- Cho I2 d tc dng vi Sn2+ trong mi trng acid.

- Xc nh I2 tha bng cht chun Na2S2O3. T tnh c hm lng Sn c trong mu.( Cc phn ng xy ra trong qu trnh xc nh thic:

( Khi t mu HNO3 v H2SO4 tc dng vi nhau to thnh acid nitro zynsunfic, cht ny c tc dng oxy ho mnh cc cht hu c v c Sn2+, Sn c trong mu.

HO

SO2 + HOH = H2SO4 + NO + NO2

ONO

NO v NO2 bc i khi un mnh

Khi un nng v s c mt ca cc cht hu c, HNO3 phn gii theo phng trnh:

2HNO3 = H2O + 2NO = 3O

Oxy ho hot ng ny s oxy ho cc hp cht hu c thnh H2O v CO2, CO2 s bc i khi t.H2SO4 ht nc v ph huye cc lin kt phc tp ca protic. Glucid, lipid. Ngoi ra n cng b kh mt phn thnh SO2H2SO4 = H2O + SO2 + O

Oxy ny gip cho qu trnh oxy ho cc cht hu c, cn SO2 bc i khi un.

( Khi nhm gp HCl xy ra phn ng:

Al + 3HCl = AlCl3 + 3H

Hydro ny s kh Sn4+ thnh Sn2+SnCl4 + 2H = SnCl2 + 2HCl

Hoc Sn2+ thnh Sn kim loi

SnCl2 + 2H = Sn + 2HCl

Sn khim loi ny tan trong HCl

Sn + 2HCl = SnCl2 + 2H

( Khi CaCO3 gp HCl se to ra CO2CaCO3 + 2HCl = CaCl2 + CO2 + H2O

Phn ng ny thc hin trong bnh kn.

( Sn2+ oxy ho bi It trong mi trng HClSnCl2 + I2 + 2HCl = SnCl4 + 2HI

( Phn ng chun I2 bng Na2S2O3I2 + Na2S2O3 = 2NaI + Na2S4O62.5.4.2. Thit b, dng c, ho cht:

- Pipet 50, 25ml- Bnh t Kiendan dung tch 500ml

- Bnh kp- Nt cao su

- ng thu tinh- Buret, cn k thut

- H2SO4 m c (d= 1,84)- HNO3 m c (d=1,4)

- Amn oxalat (NH4C2O4) tinh th- HCl m c (d = 1,19)

- Nhm kim loi (ht hoc bt)- Canxi cacbonat (CaCO3)

- I2 dung dch 0,02N- Na2S2O3 0,01N

- H tinh bt 1%

2.5.4.3. Tin hnh:

1. V c ho mu: Ly mu: Ht 50ml sa, cho vo bnh t Kiendan. Thm vo bnh 50ml H2SO4 v 10ml HNO3 m c, lc u.

un bnh Kiendan trn bp in dung dch trong bnh si mnh hi nc v khi trng bc ln (lm trong t hi nc). Sau cho HNO3 vo tng git mt (n ht 3 4ml) v tip tc un cho n khi dung dch trong bnh c mu vng nht lc ngui khng mu mi thi.

Cho vo bnh 5g amon oxalat tiinh th kh ht cc hp cht cha Nit. un tip trn bp in cho ti khi c khi trng bc ln.

2. nh mc:

Sau khi ngui, chuyn ton b dung dch th bnh t Kiendan sang bnh nn dung tch 500ml. Dng nc ct trng bnh t nhiu ln, nc trng cng cho vo bnh nn. Thm vo bnh nn 50ml dung dch HCl m c.

3. Chuyn Sn4+ v dng Sn2+:

y bnh nn bn nt cao su c hai l, mt l cm ng thu tinh dn kh CO2 vo, ng ny cm st xung y bnh nn. L kia cm mt ng thu tinh khc di 10cm v su xung qu nt 3cm. Cho 0,5d Nhm (khng cha thic) vo bnh nn v bt u dn kh CO2 t bnh kp vo. CO2 ui oxy ca khng kh ra khi bnh nn, chng s oxy ho Sn2+. un si dung dch trong bnh nn, nu thy c kt ta Sn th un k cho tan ht.

ngui bnh xung n nhit 15 200C vo bnh nn.

4. Cho Sn2+ tc dng vi I2:

Nhanh chng tho bnh nn ra khi bnh kp, m nt v cho nhanh 25ml dung dch I2 0,01N (cha trong buret) lc mnh v u. Dng nc ct trng tt c cht lng dnh nt, ng thu tinh v thnh trong bnh vo bnh nn.

5. Chun lng I2 d:

Cho vo bnh nn 1ml tinh bt 1%, chun I2 d bng Na2S2O3 0,01N n khi dung dch mt mu xanh.

Phi chun tht nhanh, trnh oxy khng kh vo nhiu nh hng n kt qu phn tch.

6. Lm mu trng:

Ly 25ml I2 0,01N vo bnh nn mi, thm 100ml nc ct v 1ml tinh bt 1%, chun I2 bng Na2S2O3 0,01N n khi dung dch mt mu xanh.2.5.4.4. Kt qu:

Hm lng thic c tnh bng cng thc:

0,5935(a b).100

Sn = (mg/l)

V

Trong :

a: s ml Na2S2O3 0,01N dng chun mu trng

b: s ml Na2S2O3 0,01N dng chun mu phn tch

V: th tch ly mu sa phn tch

2.5.5. Xc nh hm lng Asen( As):

2.5.5.1. Nguyn tc:- Hp cht asen c trong mu c kh bi hyro to thnh asen hyrua (AsH3).

- Asen hyro phn ng vi thu ngn clorua tm trn giy lc to thnh hp cht mu nu.

- So snh mu ca giy ny vi dy giy tm HgCl2 tiu chun, s tnh c lng Asen c trong mu.

( Cc phn ng xy ra trong qu trnh xc nh Asen:1. Khi t lng mu sa, Asen dng kim loi hoc oxyt u c chuyn sang dng As5+6As + 10HNO3 = 3As2O5 + 10NO + 5H2O

As2O5 + 3H2O = H3AsO43 H3AsO4 + 2MgO = MgHAsO4 + 2H2O

2. Khi km gp HCl s c phn ng:

Zn + 2HCl = ZnCl2 + 4H2O

Hydro ny tc dng vi cc mui asen to thnh Asen hyrua:

H3AsO4 + 8H = AsH3 + 4H2O

V AsH3 phn ng vi HgCl2 AsH3 + HgCl2 = Hg3As (mu nu)

3. Phng php ny xc nh lng asen nh v v AsH3 l cht d bay hi, nn dng c xc nh asen phi phi tht kn, nu khng s lm gim kt qu phn tch, nt cao su khng y kn bnh nn th phi trt mt lp parafin.2.5.5.2. Thit b, dng c, ho cht:

- ng ong- Pipet 110ml, 25ml, 5ml

- Bnh nh mc 1000ml- Capxun 250ml

- Cn k thut- Cn phn tch

- Bp in, bp cch ct- L nung iu chnh nhit 4005000C

- Bnh nn 100ml- Giy lc ct thnh di h nht (0,5x15cm)

- HNO3 m c (d=1,4)- HCl m c (d=1,19)

- MgO bt- Km ht (khng cha Asen)

- Ch axtat 3%- HgCl2 tinh khit loi I

- ng thu tinh di 30cm, ng knh 0,7cm, c mt l ng knh 0,3cm cch u di ng 22cm, ng c cm qu l ca nt cao su 3cm. Giy tm HgCl2 c t vo trong ng khong gia nt v l. Giy lc tm ch axtat c cun trn li v t pha trn l.

- Giy tm HgCl2, nhng ngp giy tm lc (1x8cm) vo ch axtat vt ra, kh, cun trn giy thnh ng hnh tr, cho vo u trn ng thu tinh.2.5.5.3. Tin hnh:1. Chun b dung dch th:

Dng pipet ly 100ml sa cho vo capxun 250ml. Thm vo capxun 1b MgO v 10ml HNO3 m c, khuy u.

t capxun ln bp cch ct, un dung dch trong capxun cho ti kh. a capxun vo l nung, nung nht t = 400 5000C, nung n tro.

ngui, cho vo capxun 10ml HCl m c vo 20ml nc ct/

t capxun ln bop in un ho si dung dch n khi lp tro tan ht. ngui, lc ly dung dch t capxun vo bnh nh mc 50ml, thm nc ct n vch nh mc, lc k.

2. Xc nh:

Dng pipet ht ly 25nl dung dch

Dng pipet ht ly 25ml dung dch trong binhd nh mc, cho vo bnh nn 100ml, thm vo 5ml nc ct, cho tip vo bnh nn 10ml HCl m c v 3g km, nhanh chng y nt li. Nt cao su c gn ng thu tinh cha giy tm dung dch HgCl2 5% sy kh v giy tm ch axtat 3%. Asen phn ng vi hyro mi sinh ra trong 30 pht (k t khi y nt). Trong qu trnh ny, giy tm HgCl2 s c mu nu nu mu c Asen. Sau khi m nt ra khi bnh nn, ly giy em so mu vi giy tm HgCl2 tiu chun. Tnh kt qu theo lng Asen ghi trn giy tm HgCl2 tiu chun, nu mu ca giy lm mu th v giy tiu chun trng nhau.3. Chun b giy tm HgCl2 tiu chun: Cn chnh xc 1,32g As2O3 tinh khit loi I, cho vo bnh nh mc 1000ml. Thm vo bnh nh mc 10ml H2SO4 m c, thm nc ct n vch nh mc, lc k.

Dng pipet ht ly 10ml dung dch pha trn, cho vo bnhnh mc dung tch 1000ml khc, thm nc ct n vch nh mc, lc k, 1ml dung dch ny cha 10( As Ln lt cho vo 10 bnh nn dung tch 100ml:

+ Bnh 1: 2ml dung dch trn ng vi 20( As+ Bnh 1: 4ml dung dch trn ng vi 40( As

.

+ Bnh 1: 20ml dung dch trn ng vi 200( As

Sau thm nc ct vo tng bnh nn ch 30ml v cho vo mi bnh 10ml HCl m c v 3g km. y nt bnh.

Nt c gn ng thu tinh cha giy tm HgCl2 v giy tm ch axtat ri lm nh cch lm mu th.

Sau 30 pht, cc giy tm HgCl2 hin mu y . Tho nt, ly cc tm giy ra, ghi lng As ng vi mi giy ln tng giy, c dy mu tiu chun.

Tu lng Asen tng dn m cc tm giy khi c cng mu tng dn (t vng n nu v nu m) v chiu di on mu tng dn t 0,5cm n 5cm

2.5.5.4. Kt qu:

- Mu th c mu trng vi mu no ca giy tiu chun th lng Asen c trong mu khong .- T tnh lng Asen c trong 1 lt sa.

Chng 4: PHN TCH VI SINH

1. Gii thiu v phng php vi sinh: L phng php xc nh hm lng vi sinh vt c trong sa bng cch nui cy chng trong mi trng v m s lng.

( Mt s mi trng s dng trong nui cy vi sinh vt:

Mi trng Sabourand:

- Thch: 20g

- Pepton: 20g

- Glucoza (hoc maltoza): 40g

- Nc: 100ml

un cho tan ht, iuchnh pH = 5,5 hp tit khun 1200C trong 20 pht.

Mi trng thch thng:

- Pepton: 10g

- Cao tht: 3g

- NaCl: 5g

- Agar: 12g

un ta cc hp cht trn vi 1 lit nc ct, pH = 7, hp 1210C trong 15 pht.

Mi trng nc pepton:

- Pepton: 10g

- NaCl: 10g

un tan cc hp cht trn vi 1lit nc ct, pH = 7,2 v hp 1210C trong 15 pht. Mi trng Wilson Blair Agar:

- NaCl: 5g

- Pepton: 10g

- Glucoza: 10g

- Cao tht: 3g

- Agar: 10g

un tan cc hp cht trn vi 1 lit nc ct, hp 1210C trong 15 pht.2. Tin hnh:

2.1. Xc nh Coliforms:

2.1.1. Nguyn tc: Mu c ng nht ho c cy mt lng nht nh ln mi trng thch chn lc thch hp c cha lactose. Trn mi trng Endo c cha Natri sulfit v fucsin, c kh nng c ch cc vi khun Gram ( + ). Trong qu trnh pht trin trn mi trng ny, Coliforms ln men ng lactose to thnh aldehyt v acid, aldehyt tc ng n phc cht fucsin sulfit v gii phng fucsin. Fucsin nhum cc khun lc t mu hng n mu cnh sen, trn, b u, c th c nh kim hoc khng . 2.1.2. Thit b, dng c, ho cht:

- a petri - Dng c ng nht mu

- ng nghim - Pipet

- T sy - Cn 700- T hp - T m

- T lnh - Ko, kp

2.1.3. Ho cht, mi trng:- Mi trng lactose lc sng mt b

- Mi trng EMB

- Mi trng Endo

- Mi trng Istrati

Tt c cc dng c phi kh trng trc khi tin hnh th nghim. Mi trng c pha ch trc, cho vo cc a petri, lm kh b mt trong iu kin v trng v cbo qun trong t lnh, trnh nh sng trc khi s dng.

2.1.4. Tin hnh:

Chun b dung dch gc v cc dung dch pha long: Pha long mu cho n khi c nng pha long 10-1, 10-2, 10-3

- Gieo cy: Cy 1 git mu pha long cc nng vo cc a petri c cha mi trng thch Endo, mi pha long lm a lp li. Trng u mu trn mt thch.

- Nui : a a cy vo t m nhit 370C trong thi gian 48 72h.

Quan st v ghi nhn cc a petri nui c cc khun lc c mu hng n mu cnh sen, trn, b u, c th c nh kim.

2.1.5. Kt qu:

m cc khun lc c mu hng n trong cc a petri c trong khong

15 150 khun lc

S lng Coliforms c trong 1g mu c tnh theo cng thc:

N = ( CFU/ml, CFU/g )

Trong : tng s khun lc m c trn tt c cc a

n1:s a m nng pha long th1 n2 : s a m nng pha long th2

f1: h s pha long ca a m th 1

V : th tch mu cy vo mi a petri

2.2. Xc nh E.Coli :

2.2.1. Nguyn tc:Mu c ng nht ho c cy mt lng nht nh ln mi trng thch chn lc thch hp c cha lactose. Trn mi trng Endo c cha Natri sulfit v fucsin, c kh nng c ch cc vi khun Gram ( + ). Trong qu trnh pht trin trn mi trng ny, Coliforms ln men ng lactose to thnh aldehyt v acid, aldehyt tc ng n phc cht fucsin sulfit v gii phng fucsin. Fucsin nhum cc khun lc t mu hng n mu cnh sen, trn, b u, c th c nh kim hoc khng . Nu khun lc c mu hng c nh kim c th gi nh l E.Coli th kim tra c sinh Indol hay khng.

2.2.2. Thit b, dng c, ho cht:

- a petri - Dng c chn b mu

- ng nghim - Pipet

- T sy - Cn 700 - T hp - T m

- T lnh - Ko, kp

2.2.3. Ho cht, mi trng:

- Mi trng thch lactose lc sng mt b.

- Mi trng EMB

- Mi trng Endo

- Mi trng Istrati

- Dung dch Trypton ( pepton )

- Thuc th Indol

-Tt c cc dng c phi kh trng trc khi tin hnh th nghim. Mi trng oc pha ch trc, cho vo cc a petri, lm kh b mt trong iu kin v trng v c bo qun trong t lnh, trnh nh sng trc khi s dng

2.2.4. Tin hnh:

Chun b dung dch gc v cc dung dch pha long: Pha long mu cho n khi c nng pha long 10-1, 10-2, 10-3.

- Gieo cy: Cy 1 git mu pha long cc nng vo cc a petri c cha mi trng thch Endo, mi pha long lm a lp li. Trng u mu trn mt thch.

- Nui : a a cy vo t m nhit 370C trong thi gian 48 72h.

Quan st v ghi nhn cc a petri nui c cc khun lc c mu hng n mu cnh sen, trn, b u, c th c nh kim tin hnh khng nh l E.Coli.

- Php th khng nh:

Kim tra hnh thi:

Nhum Gram,soi knh cc nh Gram ( - ), trc khun nh di. T ng cnh trng cy ria sang mi trngEndo hoc EMB t trong t m 370C trong 24h. Nu pht hin thy nhng khun lc nh kim chng ta cy tip sang mi trng thch thng thc hin phn ng IMVIC

Phn ng IMVIC:

Phn ng sing Indol:

Dng que cy vngchuyn dchmu t cc ng nghim c cha mi trng EC dng tnh sang cc ng nghim c cha Trypton. cc ng cy vo t m nhit 440C trong 48h.

Thm 0,5 ml thuc th indol vo cc ng nghim c cha Ttrypton nui cy, lc u v sau 1 pht th quan st v ghi nhn s lng cc ng c mu .

Phn ng MR:

Cy chuyn vi khun nghi ng t thch thng vo mi trng Clark Lubs. Nui t m 370C trong 48 96h. Sau ht 5ml mi trng cho vo mt ng nghim khc dng cho phn ng VP. Mi trng Clark Lubs cn li cho 5 git metyl 0,2% vo. Phn ng dng khi mi trng c mu ngay sau khi cho thuc th vo. Phn ng VP:

Phng php 1 : Cho 5ml dung dch amonium sulfat ng vo mi trng Clark Lubs phn trn. Quan st phn ng: phn ng dng khi c mu xut hin trong vng 15 20 pht sau khi cho thuc th vo.

Phng php 2: Cho 3ml dung dch napton 5% v 1ml dung dch KOH 40% vo mi trng Clark Lubs phn trn. Quan st phn ng: phn ng dng khi c mu xut hin trong vng 15 20 pht sau khi cho thuc th vo.

Phn ng citrate:

Cy chuyn vi khun nghi ng t thch thng vo mi trng Simonos Citrate. Nui t m 370C trong 24h. Phn ng dng khi mi trng i sang mu xanh dng.

2.2.5. Kt qu:

Da vo s khun lc nghi ng l E.Coli m c trn cc a, t l s ng nghim th Indol dng tnh ( c mu ) v tng s ng th Indol tnh kt qu.

S lng E.Coli c trong 1g mu c tnh theo cng thc:

N = x R ( CFU/ml, CFU/g )

Trong : : tng s khun lc m c trn tt c cc a

n1:s a m nng pha long th1 n2 : s a m nng pha long th2

f1: h s pha long ca a m th 1

V : th tch mu cy vo mi a petri

R: s ng th Indol dng tnh/tng s ng th

2.3. Xc nh Staphylococus Aureus:

2.3.1. Nguyn tc:Da vo tnhcht c bit ca Staphylococus Aureus l pht trin trn mi trng mui manitol cng nh trn mi trng Chapma to khun lc mu vng hoc trn mi trng Baird - Packer cho khun lc mu en.

Nu sau khi nui cy, khng c khun lc mc trn mi trng thch chn lc ni trn th cng cha khng nh l khng c Staphylococus Aureus trong mu phn tch v vi khun ny lng rt nh. Trong trng hp ny nn tng lng vi khun ny bng cch nui cy trn mi trng thch Chapman chn lc. Nh vy ta c th xc nh c s lng t nht ca Staphylococus Aureus trong th tch sn phm ban u. 2.3.2. Thit b, dng c, ho cht:- Dng c chun b mu - a petri

- T sy - Pipet 2, 5, 10, 50ml

- T hp - T lnh

- T m - Ko, kp

- Cn 700 - ng nghim

- Cn k thut

2.3.3. Mi trng, ho cht:

- Mi trng Chapman lng ( cc mn )

- Mi trng Chapman

- Mi trng Baird - Packer

- Mi trng c pha ch trc, cho vo ng nghim, tit trng v c bo qun trong t lnh nu cha s dng ngay.

2.3.4. Tin hnh:

- Chun b mu th to thnh mt th ng nht v pha long mu nu thy cn thit. Trong trng hp d on l lng vi khun Staphylococus Aureus t th c th nui cy tng sinh nh sau: ly 1ml mu nguyn hay 1ml dch huyn ph ( nu mu dng rn cho vo ng nghim c cha 9ml mi trng Chapman lng v nui t m 370C trong 24h.Nu nhn thy c s pht trin ca vi sinh vt th tip tc cc th nghim tip theo.

- Cho 0,05ml hoc 1 git mu pha long hay mu qua nui cy tng sinh v cy ln trn b mt thch Chapman hoc Baird - Parker

- Nui trong t m 370C trong 24 - 72h

- Quan st khun lc mc trn a.

- Trn mi trng Chapman, m khun lc trn, mu vng, nh

- Trn mi trng Baird- Parker m nhng khun lc c mu en bng, c mt mp vin mu trng xm, xung quanh khun lc c mt vng sng trong rng

Nu kim tra cc khun lc di knh hin vi l vi khun Gram ( + ), to thnh tng chm nh cc chm nho th nghi ng c th l Staphylococus aureus v nn lm phn ng sinh ho coagulase khng nh

Php th khng nh:

Phn ng ng huyt tng:

y l phn ng rt quan trg xc nh Staphylococus aureus. Cho vo ng nghim nh 0,5ml huyt tng th, dung que cy cng chuyn vi khun t nhng khun lc nghi ng trn mi trng phn lp. Lc nh cho hai mi trng trn u, 370C, tip tc kim tra mu sau mi 2h. Mi s ngng kt to thnh mt th ng trong ng nghim gi l dng tnh. Nu sau 4h phn ng vn m tnh cn 370C trong 24h pht hin nhng chng men glucose yu. Tip tc nui cy n 24h th ngng nu khng thy xut hin khi kt t.

Nu thc hin thm 2 th nghim khc i chng nh sau:

Mt ng i chng m tnh khng c vi khun m ch cy huyt tng th vi vi git nc ct tit trng

Mt ng i chng cy sn t cu gy bnh.

2.3.5. Kt qu:

Cn c vo nhng c tnh sau kt lun mu c nhim

Staphylococus aureus l:

- Sp xp thnh chm nho in hnh

- Ln men ng manitol

- ng huyt tng

Cng thc tnh :

N = ( CFU/ml, CFU/g )

Trong : tng s khun lc m c trn tt c cc a

n: S a petri nui cy

f: H s pha long ca mu

v : th tch mu cy vo mi a petri. R: S ng th phn ng coagulase dng tnh/ tng s ng th

2.4. Xc nh vi khun k kh sinh H2S ( ch yu l vi khun k kh):

2.4.1. Nguyn tc:L phng php nui cy vi sinh vt k kh trong mi trng thch c cha natri sunfit v phn st, sau m s lng.2.4.2. Thit b, dng c, ho cht:- ng nghim, cn.

- Pipet, bp un. 2.4.3.Mi trng, ho cht:

Mi trng thch Wilson Blair

Dung dch Na2SO3Dung dch phn st 5% ( FeSO4.7H2O)

2.4.4. Tin hnh:

Pha long mu: Tu theo mc nhim bn ca mu m pha long dung dch mu thnh cc pha long khc nhau.

Gieo cy: Cho 1ml dung dch mu vo ng cha sn 2ml dung dch natri sufit 20% v 5 git phn st 5%. Sau thch Wilson Blair un tan chy v lm ngui n 45 - 500C vo khong 2/3 ng nghim. Cho mt git parafin lng trn mt thch ng nghim cy mu.

un cch thu 750C trong 5 pht. Lm ng ngay bng cch vo t lnh hoc ngm vo nc lnh. 370C trong 24 - 48h, nu mi trng c c xem nh l dng tnh. Cc khun lc Clostridium Welchi trn mi trng ny c mu en, trn u.

2.4.5. Kt qu:

Tt c cc khun lc en, to, nh mc trong ng nghim u l vi khun k kh sinh H2S.

2.5. Xc nh tng s vi khun hiu kh sinh H2S:

2.5.1. Nguyn tc:L phng php nui cy vi sinh vt hiukh trn mi trng pepton ni giy ch axttat.2.5.2. Thit b, dng c, ho cht:

- ng nghim, cn.

- Pipet, bp un.

- Mi trng pepton.

- Giy ch axtat.2.5.3. Tin hnh:

Pha long mu:

Tu theo mc nhim bn ca sa m pha long dung dch 1:10, 1:100 Gieo cy:

- Dng haing nc pepton c thm 2ml Na2SO3 c:

+ 1 ng 10ml sa cha pha long.

+ 1 ng 1ml sa cha pha long.

- Dng hai ng nc pepton khc c thm 2ml Na2SO3 25%:

+ 1ng cy 10ml mu pha long 1:10.

+ 1 ng cy 1ml mu pha long 1:100.

Trn mi ng u treo mt giy ch axtat. Ch axtat c c tnh i vi vi khun, v vy khng nn giychm vo dch nui.

- 370C trong t m 48 - 72 gi. Nu c vi khun hiu kh sinh H2S th giy tm ch axtat c mu en.2.5.4. Kt qu:

- i vi mu trng khng xut hin khun lc, khng b c, khng to kt ta, khng sinh kh to bt, khng to mng l t yu cu.

- i vi muphn tch: xut hin mt trong cc hin tng trn. Sau ta m s lng ng nghim dng tnh mi nng . Sau tra bng v tnh ra kt qu.2.6. Xc nh tng s nm men, nm mc:

2.6.1. Nguyn tc:- L phng php nui cy chng ln mi trng sau m s lng v tnh kt qu.2.6.2. Thit b, dng c, ho cht:

- T sy- a petri

- Ni hp- Pipet 1, 10ml.

- T m- Bnh tam gic 100, 250ml

- T lnh- Ko, kp

- Cn 700- ng nghim, gi ng.

- Cn k thut- Mi trng Sabourand.

- DG 18- DGBG

Tt c cc dng c phi c kh trng trc khi a vo s dng.2.6.3. Tin hnh:- Chun b dung dch gc v cc dung dch pha long:

Pha long mu cho n khi c c d pha long cn thit m c khun lc trn hp petri nh d nh.- Gieo cy:

Ly 7 hp petri, cho vo mi hp 1ml dung dch pha long nng pha long thch hp, thng thng cy 2- 3 nng lin tc. Ht 1ml dung dch pha long u tin cho vo hai hp, 1ml dung dh pha long tip theo vo hai hp khc, 1ml dung dch pha long tip theo cho vo hai hp khc v cui cng l 1ml nc ct cho vo hp (mu trng).

Rt mi trng thch dinh dng un chy v gi nhit 45 - 500C vo trong a petri, mi a mt ng nghim mi trng chun b sn, Trn u bng cch xoay nh a theo hai chiu.

- Nui :

a vo t m nui nhit 24 10C trong thi gian 3 - 5 ngy. 2.6.4. Kt qu:

m slng khun lc mc trn cc a sau 3 ngy nui .

S nm mc c trong 1ml sn phm c tnh theo cng thcX = ( CFU/ml)

Trong : : tng s khun lc m c trn tt c cc an1: s a m nng pha long th nhtn2: s a m nng pha long th hai

D: h s thp phn ccp a m c pha long th nhtChng 5: CC NGUYN NHN GY SAI S

1. Sai s trong phng php ly mu:1.1. Sai s trong qu trnh ly mu:

V tr v s mu ly khng chnh xc, mu khng i din cho c l hng.

Khng tum th quy trnh ly mu.

Thi gian ly mu qu di.

Bo qun mu nhit qu cao, t mu sau khi ly khng chnh xc.

Mu em v khng em phn tch ngay m phi ch i.

Dng c ly mu khng c v sinh sch s v kh ro trc khi ly mu.

1.2. Sai s trong qu trnh chun b mu:

Nhit ca mu th khng t yu cu (t0 = 20 50C l t yu cu).

Khi tin hnh phn tch khi sa khng c lm ng nht.2. Sai s trong qu trnh phn tch cm quan:2.1. Sai s trong vic xc nh t trng:

- Cc thu tinh cha sa khng kh, khng sch.

- Ngi kim nghim vin khng quan st k, khng ch tm vo cng vic.

- Quy trnh nh gi khng chnh xc.

2.2. Sai s trong qu trnh xc nh mu sc:

- Quan st khng k, ni ti, thiu nh sng.

- Cc cha sa c mu ti, khng kh, khng sch, c ln tp cht.

- Quy cch thc hin khng chnh xc, sc kho ca ngi cm quan khng tt..

2.3. Sai s trong vic xc nh mi v:

- Cc cha sa khng sch, c mi v l.

- Tm trng ca ngi kim nghim khng tt.

3. Sai s trong qu trnh phn tch ho l: T trng k b hng.

Khi kim tra t trng k chm vo thnh ng ong.

c kt qu, tnh ton khng chnh xc.

Nhit ca sa lc xc nh khng t yu cu.

Khi a t trng k vo ng ong trong lc sa trong ng ong ang c nhiu bt.

Dng cc pipet ht mu v ho cht khng kh, khng sch. Ho cht s dng trong qu trnh xc nh khng tinh khiy, c ln tp cht.

Qa trnh chun khng ng (kt thc phn ng qu sm hoc qu mun).

Qa trnh ht mu v cc ho cht khng ng (b sai s).

Pha ch dung dch Adam (trong xc nh hm lng lipit) khng ng.

Qa trnh v c ho mu khng trit ,ly mu khng chnh xc.

Thi igan ct m qu ngn (trong xc nh hm lng prtin).

Qa trnh to kt ta Cu2O (trong xc nh hm lng ng lactoza) qu ngn, phn ng cha xy ra hon ton.

Qa trnh gn lc kt ta khng chnh xc, lng kt ta cn st li trong bnh tam gic nhiu.

Ho tan kt ta khng ht.

c kt qu v tnh ton khng ng.

4. Sai s trong qu trnh phn tch vi sinh: Qu trnh chun b mi trng khng ng, mi trng b nhim vi sinh vt, hm lng cc cht trong mi trng khng t yu cu.

Cc ho cht s dng to mi trng c tinh khit thp.

Qa trnh thao tc sai, khi thc hin cy khng m bo v trng v cc cy v ly mu khng ng.

Pha long mu khng t yu cu, thi gian nui cy ngn hoc qu di, nhit nui cy khng t yu cu.

m s lng v tnh ton kt qu sai.

TI LIU THAM KHO 3,45.a.V.100

X= ((/l)

V1.Vo

10.V2.Do.Vo 1000

Zn2+= ((/l)

D1.V V1

3,45.a.V.100

X= ((/l)

V1.Vo

GVHD: Trn Th Thanh Mn Trang 1 SVTH: Nguyn Vn Ho - Lp 05C1

_1173863296.unknown

_1252950165.unknown

_1255940682.unknown

_1173866305.unknown

_1173866390.unknown

_1173863368.unknown

_1173606247.unknown

_1173690868.unknown

_1173690882.unknown

_1173690827.unknown

_1173690835.unknown

_1173690204.unknown

_1173603604.unknown