Upload
dinhtram
View
219
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
i
EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG DEKOK BIJI
Persea americana Mill. TERHADAP AKTIVITAS ALT-AST
SERUM PADA TIKUS TERINDUKSI
KARBON TETRAKLORIDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Menenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Ike Kumalasari A
NIM: 108114052
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2013
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Mintalah, maka akan diberikan kepadamu; carilah, maka kamu akan mendapat;
ketoklah, maka pintu akan dibukakan bagimu. Karena setiap orang yang
meminta, menerima dan setiap orang yang mencari, mendapat
dan setiap orang yang mengetok, baginya pintu dibukakan
(Mat 7:7-8)
Aku persembahkan karya kecilku ini untuk... Yesus Kristus sumber kekuatan dan harapanku
Bunda Maria penolongku Ibu, Bapak, Adik, serta keluarga besarku atas segala doa,
dukungan dan kasih sayang Sahabat-sahabatku yang terkasih
Serta Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas
kasih, berkat, dan karunia-Nya yang melimpah, sehingga penulis dapat
menyelesaikan skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif Jangka Panjang
Dekok Biji Persea americana Mill. Terhadap Aktivitas ALT-AST Serum
Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida” ini dengan baik. Skripsi ini
disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.
Farm) program studi Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Penulis menyadari bahwa dalam pelaksanaan dan penyusunan skripsi ini
tentunya tidak lepas dari bantuan dan campur tangan dari berbagai pihak. Oleh
karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengijinkan
penulis menjalankan pembelajaran selama masa studi.
2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing skripsi atas
segala kesabaran dalam membimbing, memberi masukan, dan motivasi
kepada penulis selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.
3. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas
bantuan dan masukkan demi kemajuan skripsi ini.
4. Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas
bantuan dan masukkan demi kemajuan skripsi ini.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
5. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt. selaku Kepala Penanggung Jawab
Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam
penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.
6. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah memberikan bantuan dalam
determinasi biji Persea americana Mill.
7. Pak Heru, Pak Parjiman, dan Pak Kayat selaku laboran bagian Farmakologi
dan Toksikologi, Pak Wagiran selaku laboran Farmakognosi Fitokimia, Pak
Ottok selaku pengelola gudang kefarmasian atas segala bantuan selama
pelaksanaan skripsi ini.
8. Teman-teman “Persea Ceria” Irene, Angelia Rosari, Yudhytha Anggarhani,
Ni Luh Dian Putu, Inneke Devi P, Lydia Setiawan, Gidion Krisnadi , Liana
Risha, Robert Dwijantara, Priscilla Diana, Maria Malida, Rotua Winata,
Komang Ayu, Adrienne Roma atas kerja sama, bantuan, suka duka, dan
perjuangan dalam menyelesaikan skripsi sampai akhir.
9. Sahabat-sahabatku Valentina Feti, Yohana Nicoli, Lucia Suci, Elisabeth Dwi,
Maria Windri atas motivasi, doa, kebersamaan, dan persahabatannya.
10. Seluruh dosen dan teman-teman FSM B 10, FST A 10, serta seluruh angkatan
2010 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
11. Semua pihak yang penulis tidak dapat sebutkan satu per satu yang turut
membantu selama penyusunan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh
karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun demi
kemajuan di masa yang akan datang.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................ ii
HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ..................................................................... iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ........................................................ v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ....................................... vi
PRAKATA ..................................................................................................... vii
DAFTAR ISI .................................................................................................. x
DAFTAR TABEL .......................................................................................... xiv
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xvi
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xviii
INTISARI ....................................................................................................... xx
ABSTRACT ..................................................................................................... xxi
BAB I. PENGANTAR ................................................................................... 1
A. Latar Belakang ......................................................................................... 1
1. Perumusan masalah ............................................................................ 4
2. Keaslian penelitian ............................................................................. 4
3. Manfaat penelitian .............................................................................. 5
B. Tujuan Penelitian ..................................................................................... 6
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
1. Tujuan umum ..................................................................................... 6
2. Tujuan khusus .................................................................................... 6
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ............................................................ 7
A. Hati .......................................................................................................... 7
1. Anatomi dan fisiologi hati ................................................................ 7
2. Jenis kerusakan hati .......................................................................... 9
3. Hepatotoksin ..................................................................................... 11
4. ALT dan AST ................................................................................... 12
5. Evaluasi kerusakan hati ..................................................................... 13
B. Karbon Tetraklorida ................................................................................ 15
C. Persea americana Mill. .......................................................................... 18
1. Taksonomi ......................................................................................... 18
2. Nama daerah ..................................................................................... 19
3. Morfologi .......................................................................................... 19
4. Kandungan kimia biji P. americana Mill. ........................................ 20
D. Curliv® Plus Syrup .................................................................................. 20
E. Dekok ...................................................................................................... 21
F. Keterangan Empiris ................................................................................ 21
BAB III. METODE PENELITIAN ................................................................ 22
A. Jenis dan Rancangan Penelitian .............................................................. 22
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ......................................... 22
1. Variabel utama .................................................................................. 22
2. Variabel pengacau ............................................................................. 22
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
3. Definisi operasional .......................................................................... 23
C. Bahan Penelitian ..................................................................................... 23
1. Bahan utama ...................................................................................... 23
2. Bahan kimia ...................................................................................... 24
D. Alat Penelitian ......................................................................................... 25
E. Tata Cara Penelitian ................................................................................ 25
1. Determinasi serbuk kering biji P. americana Mill. .......................... 25
2. Penetapan kadar air serbuk kering biji P. americana Mill. .............. 26
3. Pembuatan dekok biji P. americana Mill. ........................................ 26
4. Penetapan dosis dekok biji P. americana Mill. ................................ 26
5. Pembuatan larutan karbon tetraklorida konsentrasi 50% .................. 27
6. Uji pendahuluan ................................................................................ 27
7. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji ....................................... 27
8. Pembuatan serum .............................................................................. 28
9. Pengukuran aktivitas ALT dan AST ................................................. 29
F. Tata Cara Analisis Hasil ......................................................................... 30
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 31
A. Penyiapan Bahan ..................................................................................... 31
1. Hasil determinasi tanaman ..................................................................... 31
2. Penetapan kadar air serbuk biji P. americana Mill. ........................... 32
B. Uji Pendahuluan ...................................................................................... 32
1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida ................................. 32
2. Penentuan waktu pencuplikan darah ...................................................... 33
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
3. Penetapan lama pemejanan dekok biji P. americana Mill. ................ 36
4. Penetapan dosis dekok biji P. americana Mill. ................................. 37
C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. ................. 37
1. Kontrol negatif olive oil dosis 2 mL/kgBB ............................................. 43
2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ................. 45
3. Kontrol positif Curliv®
dosis 4,05 mL/kgBB .................................... 46
4. Kontrol dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB ...... 47
5. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71;
642,06; dan 1142,86 mg/kgBB pada tikus jantan galur Wistar
terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB .................................. 48
D. Rangkuman Pembahasan ............................................................................. 54
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 57
A. Kesimpulan .................................................................................................. 57
B. Saran ............................................................................................................. 57
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 58
LAMPIRAN ........................................................................................................ 62
BIOGRAFI PENULIS ......................................................................................... 104
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel I. Peningkatan relatif dari beberapa enzim pada cedera hati .......... 18
Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen ALT ..................................... 24
Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST .......................... 25
Tabel IV. Rata-rata aktivitas ALT tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam (n=3) ......................................................................... 33
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam ................................................................................... 34
Tabel VI. Rata-rata aktivitas AST tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam (n=3) ......................................................................... 35
Tabel VII. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam ................................................................................... 36
Tabel VIII.Purata ± SE aktivitas serum ALT dan % hepatoprotektif
tikus praperlakuan dekok biji P. americana Mill. terinduksi
karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB (n=5) ............................... 38
Tabel IX. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada kelompok
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
perlakuan ................................................................................... 40
Tabel X. Purata ± SE aktivitas serum AST tikus praperlakuan dekok
biji P. americana Mill. terinduksi karbon tetraklorida dosis
2 mL/kgBB (n=5) ...................................................................... 41
Tabel XI. Hasil uji Mann Whitney aktivitas serum AST tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada
kelompok perlakuan .................................................................. 42
Tabel XII. Rata-rata aktivitas serum ALT dan AST tikus setelah
pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu
0 dan 24 jam (n=5) .................................................................... 43
Tabel XIII. Hasil uji t berpasangan aktivitas serum ALT dan AST tikus
setelah pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang
waktu 0 dan 24 jam ................................................................... 44
Tabel XIV. Hasil penetapan kadar air serbuk biji P. americana Mill. ......... 98
Tabel XV. Dosis, % efek hepatoprotektif, dan % daya hepatoprotektif
masing-masing kelompok perlakuan ......................................... 101
Tabel XVI. Hasil validitas dan reliabilitas ALT .......................................... 102
Tabel XVII. Hasil validitas dan reliabilitas AST ........................................... 102
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar1. Struktur mikroskopik hati ....................................................... 8
Gambar 2. Struktur molekul karbon tetraklorida ..................................... 15
Gambar 3. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon
tetraklorida ............................................................................. 16
Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam ..................................... 34
Gambar 5. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam ..................................... 35
Gambar 6. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
praperlakuan biji P. americana Mill. satu kali sehari
selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB ...... 39
Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
praperlakuan biji P. americana Mill. satu kali sehari
selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB ...... 41
Gambar 8. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
Setelah pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada
selang waktu 0 dan 24 jam ..................................................... 43
Gambar 9. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
Setelah pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada
selang waktu 0 dan 24 jam ..................................................... 44
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Foto serbuk biji P. americana Mill. ........................................ 63
Lampiran 2. Foto panci infusa .................................................................... 63
Lampiran 3. Foto pembuatan dekok ........................................................... 63
Lampiran 4. Dekok biji P. americana Mill. ................................................ 64
Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi biji P. americana Mill. ............ 65
Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee (MHREC) ............................................................ 66
Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada uji
pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ................................................ 67
Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum AST pada uji
pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ................................................ 69
Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan
dekok biji P. americana Mill. setelah induksi karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ................................................ 72
Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum AST perlakuan
dekok biji P. americana Mill. setelah induksi karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ................................................ 78
Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xix
perlakuan kontrol negatif olive oil dosis 2 mL/kgBB ............ 95
Lampiran 12. Penetapan kadar air serbuk biji P. americana Mill. ............... 98
Lampiran 13. Perhitungan penetapan peringkat dosis dekok biji
P. americana Mill. kelompok perlakuan ............................... 98
Lampiran 14. Perhitungan konversi dosis dekok biji P. americana Mill.
dari tikus ke manusia .............................................................. 99
Lampiran 15. Perhitungan dosis Curliv® ...................................................... 100
Lampiran 16. Perhitungan efek hepatoprotektif ........................................... 100
Lampiran 17. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas ............................... 102
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xx
INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan informasi tentang pengaruh
efek hepatoprotektif dari pemberian jangka panjang dekok biji P. americana Mill.
untuk menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus terinduksi karbon
tetraklorida, serta mendapatkan besar dosis optimumnya.
Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap
pola searah. Penelitian yang dilakukan menggunakan tikus jantan galur Wistar,
umur 2-3 bulan, dan berat ± 150-250 gram. Tikus dibagi secara acak ke dalam
tujuh kelompok perlakuan. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB secara i.p. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil 2
mL/kgBB. Kelompok III (kontrol positif) diberi Curliv® plus syrup 4,05
mL/kgBB. Kelompok IV (kontrol dekok) diberi dekok biji P. americana Mill.
1142,86 mg/kgBB. Kelompok V-VII (perlakuan) berturut-turut diberi dekok biji
P. americana Mill. dosis 360,71; 642,06; dan 1142,86 mg/kgBB secara oral sekali
sehari selama enam hari berturut-turut kemudian pada hari ke tujuh semua
perlakuan diberi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB secara i.p. Dua puluh
empat jam sesudahnya, darah diambil dari sinus orbitalis mata untuk diukur
aktivitas serum ALT dan AST. Data serum ALT dan AST yang didapat dianalisis
secara statistik.
Berdasarkan hasil penelitian, dekok biji P. americana Mill. memberikan
efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada
tikus yang terinduksi karbon tetraklorida. Terdapat kekerabatan dosis dengan
respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan dekok biji P.
americana Mill. yang diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif. Jadi
dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71; 642,06; dan 1142,86 mg/kgBB
memiliki efek hepatoprotektif berturut-turut 64,3; 70,9; dan 97,6%. Nilai dosis
optimum hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. adalah 1142,86 mg/kgBB.
Kata kunci: P. americana Mill., dekok, hepatoprotektif, karbon tetraklorida,
jangka panjang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xxi
ABSTRACT
This research has purpose to get information about long term
hepatoprotective effect of decoction P. americana Mill. seed for reducing activity
of ALT and AST serum in rats induced by carbon tetrachloride and get an optimal
dose.
This research was experimentally pure with direct sampling design. This
research used Wistar male rats, age 2-3 months, and weight ± 150-250 g. The rats
were divided into seven treatment groups. The first group (hepatotoxin control)
was given carbon tetrachloride 2 mL/kgBW i.p. Then, the second group (negative
control) was given olive oil 2 mL/kgBW. Third group (positive control) was given
Curliv® plus syrup 4.05 mL/kgBB. Fourth group (decoction control) was given
decoction of P. americana Mill. seed 1142.86 mg/kgBW. The fourth until sixth
group (treatment) was given decoction of P. americana Mill. seed dose 360.71;
642.06; and 1142.86 mg/kgBW orally once a days for six days successively and
then in the seventh day all of the treatments group were given carbon tetrachloride
2 mL/kgBB by i.p. Twenty-four hours later, blood was collected from the orbital
sinus eye to be measured ALT and AST serum activity. It was analyzed
statistically.
Based of the result of the research, decoction of P. americana Mill. seed
give hepatoprotective effects for reducing activity of ALT and AST serum in rats
induced by carbon tetrachloride. There was a relation between dose and response
which was seen from the greater pre-experimental dose decoction of P. americana
Mill. given, thus the hepatoprotective was bigger. Hepatoprotective effect with
dose of 360.71; 642.06; and 1142.86 mg/kgBW successively were 64.3; 70.9; and
97.6%. The value of optimal dose hepatoprotective of decoction of P. americana
Mill. seed was 1142.86 mg/kgBW.
Keywords: P. americana Mill., decoction, hepatoprotective, carbon tetrachloride
long term
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Hati merupakan organ tubuh terbesar dan memiliki peranan penting dalam
proses metabolisme. Salah satu fungsi hati adalah sebagai tempat detoksifikasi
yang berarti bahwa hepatosit memiliki resiko cukup besar sebagai tempat
pembongkaran senyawa-senyawa toksik (Stine dan Brown, 1996). Jika kelenjar
tubuh ini mengalami kerusakan maka fungsinya dalam tubuh juga akan terganggu.
Kerusakan yang terjadi pada sel-sel hati dapat disebabkan oleh infeksi virus
hepatitis, zat-zat toksik seperti alkohol, dan obat-obatan tertentu (Direktorat Bina
Farmasi Komunitas dan Klinik, 2007).
Menurut Badan Kesehatan Dunia (WHO) tahun 2012, hingga saat ini
sekitar dua miliar orang terinfeksi virus hepatitis B di seluruh dunia dan 350 juta
orang di antaranya berlanjut jadi infeksi hepatitis B kronis. Diperkirakan 600.000
orang meninggal dunia per tahun karena penyakit tersebut. Angka kejadian infeksi
hepatitis B kronis di Indonesia diperkirakan mencapai 5-10% dari jumlah
penduduk. Hepatitis B termasuk pembunuh diam-diam karena banyak orang yang
tidak tahu dirinya terinfeksi sehingga terlambat ditangani dan terinfeksi seumur
hidup (WHO, 2012).
Kerusakan hati dapat berupa perlemakan hati (steatosis), nekrosis,
kolestasis, hingga sirosis. Prevalensi penyakit perlemakan hati di Indonesia adalah
30,6% (Sofia, Nurdjanah, dan Ratnasari, 2009). Di Indonesia penelitian obat baru
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
untuk masalah kerusakan hati belum banyak dilakukan, sehingga perlu dilakukan
Indonesia sebagai negara dengan biodiversitas tinggi memiliki 30.000
jenis tumbuhan dan 7.000 di antaranya merupakan tanaman obat (Sampurno,
2003). Alpukat (Persea americana Mill.) merupakan salah satu tanaman yang
berkhasiat dalam pengobatan. Eksplorasi terhadap tanaman P. American Mill.
memang telah banyak dilakukan, namun eksplorasi terhadap biji buah P.
american Mill. belum banyak dilakukan terutama di Indonesia. Menurut Arukwe
dkk., (2012), kandungan biji P. americana Mill. adalah saponin, tanin, flavonoid,
cyanogenic glycosides, alkaloid, fenolik, dan steroid. Pelarut yang bersifat polar,
mampu mengekstrak senyawa alkaloid kuartener, komponen fenolik, dan tanin
(Marinova, Ribarova, dan Atanassova, 2005).
Pada umumnya, masyarakat Indonesia memanfaatkan tanaman obat
dengan cara direbus dan air rebusan tersebut dikonsumsi dalam jangka waktu
yang lama. Akan tetapi, dalam bidang kefarmasian tidak dikenal sediaan rebusan.
Sediaan yang proses pembuatannya mendekati rebusan adalah infusa dan dekok,
karena sama-sama dilakukan pemanasan serta penyari yang digunakan adalah air.
Infusa dan dekok berbeda pada lama pemanasannya, selain itu dalam pembuatan
infusa maupun dekok bahan obat tidak dipanaskan secara langsung seperti saat
membuat rebusan. Menurut Badan Pengawas Obat dan Makanan RI tahun 2010,
infusa dibuat dengan mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90oC
selama 15 menit, sedangkan pada dekok ekstraksi dilakukan selama 30 menit.
penelitian terhadap sumber daya hayati sebagai alternatif pengobatan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
Bentuk sediaan yang digunakan pada penelitian ini adalah dekok, karena
dengan waktu ekstraksi yang lebih lama maka kemungkinan kontak antara penyari
dan dan bahan obat lebih lama dibandingkan dengan infusa, sehingga diharapkan
senyawa yang akan tersari lebih banyak. Senyawa dalam biji P. americana Mill.
yang dapat tersari dengan pelarut air adalah tannin, flavonoid, dan fenolik. Tanin
dan flavonoid termasuk senyawa polifenol yang merupakan sumber antioksidan
alami yang terdapat dalam tumbuhan (Arts dan Hollman, 2005).
Karbon tetraklorida merupakan salah satu senyawa model yang dapat
digunakan untuk menimbulkan kerusakan hati. Dalam endoplasmik retikulum hati
CCl4 dimetabolisme oleh sitokrom P-450 (CYP2E1) menjadi radikal bebas
triklorometil (•CCl3) (Gregus dan Klaaseen, 2001). Reaksi radikal bebas
triklorometil dapat menghasilkan peroksidasi lipid. Peroksidasi lipid dapat
menyebabkan gangguan integritas membran dengan keluarnya berbagai isi
sitoplasma antara lain serum ALT (Alanin Transaminase), sehingga serum ALT
dalam darah meningkat (Wahyuni, 2005).
Antioksidan sangat diperlukan dalam menangkal radikal bebas yang
merupakan salah satu penyebab kerusakan hati. Keberadaan antioksidan dalam
tikus terinduksi karbon tetraklorida. Penelitian dilakukan secara jangka panjang
sebagai pendekatan karena masyarakat biasa mengkonsumsi obat herbal dalam
jangka waktu yang lama.
biji P. americana Mill. diharapkan dapat memberikan efek hepatoprotektif pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
1. Perumusan masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan permasalahan
sebagai berikut.
a. Apakah pemberian jangka panjang dekok biji P. americana Mill.
mempunyai pengaruh hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum
ALT (Alanin Transaminase) dan AST (Aspartat Transaminase) pada tikus
jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida?
b. Berapa besar nilai dosis optimum hepatoprotektif dekok biji P. americana
Mill. pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida?
2. Keaslian penelitian
Penelitian menggunakan biji P. americana Mill. pernah dilakukan oleh
Arukwe dkk. (2012) yang melaporkan bahwa biji P. americana Mill. mengandung
saponin, tanin, flavonoid, cyanogenic glycosides, alkaloid, fenolik, dan steroid.
Kandungan fenolik dalam biji P. americana Mill. menunjukkan angka yang
paling tinggi jika dibandingkan dengan daun dan buah biji P. americana Mill.
(Arukwe dkk., 2012).
Carpena, Morcuende, Andrade, Kylli, dan Estevez (2011) menentukan
kandungan fenolik total serta melakukan penelitian terhadap aktivitas antioksidan
kulit, daging buah, dan biji P. americana Mill. secara in vitro. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa kulit dan biji memliki kandungan fenolik total yang lebih
tinggi dari pada daging buah P. americana Mill., kulit dan biji juga memiliki
aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dari pada daging buah P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
Ozoula, Anaka, Okpo, dan Idogun (2009) melakukan uji toksisitas akut
dan subakut ekstrak air biji P. americana Mill. pada tikus. Dosis yang digunakan
pada uji toksisitas akut adalah 2, 4, 6, 8, dan 10 g/kgBB, sedangkan dosis pada uji
toksisitas subakut sebesar 10 g/kgBB. Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak air biji
P. americana Mill. tidak menunjukkan adanya toksisitas baik saat pemberian
secara akut maupun subakut.
Penelitian terhadap efek antidiabetes ekstrak air biji P. americana Mill.
pada tikus terinduksi aloksan dilakukan oleh Alhassan, Sule, Atiku, Wudil,
Abubakar, dan Mohammed pada tahun 2012. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa ekstrak air biji P. americana Mill. mampu menurunkan kadar glukosa pada
tikus. Selain itu, ekstrak biji P. americana Mill. memiliki daya antibakteri
terhadap Streptococcus alpha yang resisten antibiotik (Pratiwi, 2012). Sejauh
penelusuran pustaka yang dilakukan, penelitian efek hepatoprotektif jangka
panjang dekok biji P. americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST serum pada
tikus terinduksi karbon tetraklorida belum pernah dilakukan.
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis
Hasil penelitian ini diharapkan mampu memberikan sumbangan
dan tambahan ilmu pengetahuan khususnya ilmu kefarmasian dalam
penggunaan tanaman obat terutama sebagai hepatoprotektor jangka
panjang.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
b. Manfaat praktis
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dosis
optimal dekok biji P. americana Mill. bagi masyarakat khususnya sebagai
hepatoprotektor jangka panjang.
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Tujuan umum dari penelitian ini adalah untuk mengetahui kemampuan
dekok biji P. americana Mill. terhadap perbaikan fungsi hati tikus jantan galur
Wistar akibat terinduksi karbon tetraklorida.
2. Tujuan khusus
a. Pemberian jangka panjang dekok biji P. americana Mill. mempunyai
pengaruh hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan
AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
b. Mengetahui besar dosis optimum hepatoprotektif dekok biji P. americana
Mill. pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Hati
1. Anatomi dan fisiologi hati
Hati adalah kelenjar terbesar dalam tubuh dengan berat rata-rata sekitar
1500 g atau 2,5% berat badan pada orang dewasa normal. Bagian atas hati
berbentuk cembung dan terletak di bagian kanan bawah diafragma dan sebagian di
sebelah kiri bawah. Bagian bawah hati berbentuk cekung dan melindungi ginjal
kanan, lambung, pankreas, dan usus (Price dan Wilson, 2005).
Terdapat dua lobus utama yang menyusun hati yaitu lobus kanan dan
lobus kiri. Setiap lobus pada hati dibagi menjadi struktur-stuktur yang disebut
lobulus. Lobulus terdiri dari lempeng-lempeng sel hati yang berbentuk kubus dan
tersusun mengelilingi vena sentralis. Di antara lempeng-lempeng sel hati terdapat
kapiler-kapiler yang disebut sinusoid yang merupakan cabang vena porta dan
arteri hepatica. Sinusoid dibatasi oleh sel Kupffer (Gambar 1). Sel Kupffer ini
memiliki fungsi utama menelan bakteri dan benda asing lain dalam darah. Oleh
sebab itu, hati merupakan salah satu organ utama sebagai pertahanan terhadap
invasi bakteri dan agen toksik (Price dan Wilson, 2005).
Selain cabang-cabang vena porta dan arteri hepatika yang melingkari
bagian perifer lobulus hati, juga terdapat saluran empedu seperti ditunjukkan pada
Gambar 1. Saluran empedu interlobular membentuk kapiler empedu yang sangat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
kecil dinamakan kanalikuli, yang berjalan di tengah-tengah lempengan sel hati
(Price dan Wilson, 2005).
Gambar 1. Struktur mikroskopok hati (Ganong dan McPhee, 2011)
Hati menerima darah dari vena porta hepatis (70%) dan arteri hepatika
(30%). Arteri hepatika membawa darah yang berisi oksigen yang berasal arteria
hepatica communis, di sebelah kiri ductus choledocus dan di depan vena porta
(Wibowo dan Paryana, 2009), sedangkan vena porta membawa darah vena dari
usus halus yang kaya akan nutrien yang baru diserap, obat, dan racun langsung ke
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
hati. Vena porta membentuk jalinan khusus yang memungkinkan setiap hepatosit
dibasuh langsung oleh darah porta (Ganong dan McPhee, 2011).
Hati mempunyai bermacam-macam fungsi dengan tiga fungsi utama
dalam tubuh yaitu untuk sintesis, ekskresi, dan metabolisme (Chandrasoma dan
Taylor, 1995). Sebagai tempat sintesis hati mampu memproduksi albumin, faktor-
faktor pembekuan darah, dan juga plasma globulin (Fox, 2004). Selain itu, hati
juga mengekskresikan bermacam-macam bahan ke dalam empedu, antara lain
blirubin (Chandrasoma dan Taylor, 1995). Hati juga mempunyai peranan penting
dalam metabolisme karbohidrat, lemak, protein, dan juga dalam detoksifikasi.
Detoksifikasi di hati dapat melalui tiga cara yaitu dengan mengekskresi empedu,
fagositosis oleh sel Kupffer, dan dengan perubahan kimia dari molekul toksik di
dalam hepatosit (Fox, 2004).
Hati yang normal mempunyai kapasitas cadangan yang besar untuk
melakukan fungsinya. Dalam keadaan normal, 80% bagian dari hati dapat
dihentikan aktivitasnya tanpa harus mengurangi fungsinya (Chandrasoma dan
Taylor, 1995).
2. Jenis kerusakan hati
Toksikan dapat mengakibatkan berbagai jenis kerusakan hati seperti:
a. Perlemakan hati (steatosis)
Perlemakan hati terjadi bila penimbunan lemak melebihi 5% dari
berat hati atau mengenai lebih dari separuh jaringan sel hati. Perlemakan
hati ini sering berpotensi menjadi penyebab kerusakan hati dan sirosis hati.
Steatosis adalah respon umum untuk banyak pemejanan akut tetapi tidak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
semua hepatotoksin. Sering kali toksin yang menginduksi steatosis adalah
reversibel dan tidak menyebabkan kematian hepatosit. Perlemakan hati
dapat berasal dari satu atau lebih peristiwa berikut: kelebihan pasokan
asam lemak bebas ke hati, gangguan pada siklus trigliserida, penurunan
oksidasi asam lemak, dan penurunan sintesis lipoprotein densitas sangat
rendah (Gregus dan Klaaseen, 2001). Toksikan-toksikan yang
menyebabkan penimbunan lipid dalam hati dengan mekanisme yang
paling umum yaitu adanya kerusakan pelepasan trigliserida hati ke plasma.
Karbon tetraklorida terutama bekerja melalui metabolit reaktifnya, radikal
triklorometil yang secara kovalen mengikat protein dan lipid tidak jenuh
dan menyebabkan peroksidasi lipid (Lu, 1995).
b. Kematian sel (nekrosis)
Nekrosis merupakan kematian sel-sel hati yang ditandai dengan
pembengkakan sel, kebocoran, hancurnya inti, dan masuknya sel-sel
radang. Ketika nekrosis pada hepatosit terjadi, kebocoran plasma membran
dapat dideteksi secara kimiawi dengan menguji kadar enzim yang berasal
dari sitosol di plasma atau serum. Keterangan yang informatif adalah
tingkat aktivitas ALT sebagai enzim hepatosit yang paling utama (Treinen
dan Moslen, 2001).
c. Kolestasis
Menutut Stine dan Brown (1996), kolestasis merupakan
pemberhentian aliran empedu yang menyebabkan jaundice, suatu kondisi
yang ditandai dengan warna mata dan kulit yang kekuningan. Keadaan ini
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
disebabkan karena terjadi kenaikan jumlah pigmen empedu yaitu bilirubin
hingga melebihi batas normalnya yaitu 0,8 mg/dL (Chandrasoma dan
Taylor, 1995). Banyak jenis bahan kimia termasuk logam, hormon, dan
obat-obatan menyebabkan kolestasis (Gregus dan Klaaseen, 2001).
d. Sirosis
Sirosis merupakan bentuk kerusakan yang terakhir, sering fatal,
dan merupakan tahap kerusakan hati kronis. Sirosis ditandai dengan
akumulasi sejumlah jaringan fibrosa yang luas, khususnya serabut-serabut
kolagen, sebagai respon terhadap kerusakan atau terhadap peradangan.
Akibat peradangan zat kimia berulang kali, sel-sel hepatik yang hancur
digantikan dengan jaringan parut fibrotik. Akibat endapan kolagen yang
terus-menerus, anatomi hati terganggu oleh jaringan parut fibrotik yang
saling berhubungan. Sirosis bersifat irreversibel, memiliki harapan hidup
kecil, biasanya merupakan hasil paparan berulang zat kimia beracun
contohnya alkohol (Gregus dan Klaaseen, 2001).
3. Hepatotoksin
Obat-obat dan senyawa yang dapat menyebabkan kerusakan hati
diklasifikasikan menjadi dua, yaitu:
a. Hepatotoksin teramalkan
Senyawa yang bila diberikan dapat mempengaruhi sebagian besar
orang yang menelan senyawa tersebut dalam jumlah yang cukup untuk
menimbulkan efek toksik. Hepatotoksin ini bergantung pada dosis
pemberian (Forrest, 2006). Contoh hepatotoksin teramalkan yang dapat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
menimbulkan kerusakan nekrosis hepatoseluler adalah racun jamur
(Amanita phalloides), aflatoksin, karbon tetraklorida, kloroform,
parasetamol, dan lain sebagainya (Chandrasoma dan Taylor, 2995).
b. Hepatotoksin tak teramalkan
Merupakan obat atau senyawa yang tidak besifat toksik pada hati
tetapi jika diberikan kepada orang tertentu akan dapat menimbulkan efek
toksik. Jenis ini tidak bergantung pada dosis pemberian dan frekuensi
terjadinya sangat jarang. Contoh obat-obat tipe ini adalah isoniazid,
halothane, dan chlorphromazine (Forrest, 2006).
4. ALT dan AST
Kerusakan hepatoseluler dapat dideteksi dengan mengukur indeks
fungsional dan dengan mengamati produk hepatosit yang rusak atau nekrotik. Uji
enzim sering menjadi satu-satunya petunjuk adanya cedera sel pada penyakit hati
dini karena perubahan ringan kapasitas ekskretorik mungkin tersamar akibat
kompensasi dari bagian hati lain yang masih fungsional (Sacher dan McPherson,
2002).
Dua enzim yang sering berkaitan dengan kerusakan hepatoseluler adalah
aminotransferase. Aminotransferase mengkatalisis pemindahan reversibel satu
gugus amino antara asam amino dan sebuah asam alfa-keto, yang berfungsi dalam
pembentukan asam-asam amino yang dibutuhkan untuk penyusunan protein di
hati. Alanin aminotransferase (ALT) berfungsi memindahkan satu gugus amino
antara alanin dan asam alfa-ketoglutamat. Aspartat aminotransferase (AST)
berfungsi memerantai reaksi antara asam aspartat dan asam alfa-ketoglutamat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
(Sacher dan McPherson, 2002). Penentuan enzim AST dan ALT adalah cara
paling umum untuk mendeteksi kerusakan hati, enzim yang dibebaskan beberapa
kali lipat dalam 24 jam pertama setelah kerusakan (Timbrell, 2008).
Sebagian besar AST terdapat di hati dan otot rangka, serta tersebar ke
seluruh jaringan. Meskipun enzim ALT terdapat pula pada beberapa bagian
jaringan, tetapi konsentrasi terbesarnya pada semua spesies adalah di hati
sehingga ALT merupakan petunjuk yang lebih spesifik terhadap nekrosis hati
daripada AST (Zimmerman, 1999). Transaminase ini sebagai nilai indeks
kemungkinan kerusakan hati, dalam mendeteksi adanya toksisitas pada hati atau
perubahan dalam membran sel hati (Edem dan Akpanabiatu, 2006).
5. Evaluasi kerusakan hati
Menurut Plaa dan Charbonneau (2001) uji-uji yang digunakan dalam
mengevaluasi kerusakan hati, yaitu uji enzim serum, uji ekskretori hati, perubahan
konstituen hati, dan analisis histologi.
a. Uji enzim serum
Untuk mengidentifikasi kerusakan hati, dapat digunakan enzim
serum didasarkan spesifikasi dan sensitivitas berbagai tipe kerusakan hati.
Berbagai parameter dapat diukur dalam plasma. Dengan demikian,
penentuan AST dan ALT enzim adalah cara paling umum untuk
mendeteksi kerusakan hati, enzim yang dihasilkan beberapa kali lipat
dalam 24 jam pertama setelah kerusakan (Timbrell, 2008). Namun, ada
sejumlah enzim lain yang dapat digunakan sebagai penanda.
Alkalinfosfatase dan gamma-glutamiltranspeptidase (-GT), kenaikan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
aktivitas enzim-enzim serum tersebut menunjukkan kerusakan kolestatik
(Plaa dan Charbonneau, 2001).
b. Uji ekskretori hati
Zat kimia yang memasuki sirkulasi sistemik dapat diekskresikan
oleh hati dalam bentuk tidak berubah atau diubah di dalam hepatosit.
Senyawa seperti bilirubin dan xenobiotika lainnya digunakan untuk
mendeteksi dan menentukan kerusakan hepatik (Plaa dan Charbonneau,
2001). Plasma bilirubin juga dapat diukur, yang meningkat pada kerusakan
hati, dan albumin plasma menurun oleh kerusakan hati (meskipun juga
oleh kerusakan ginjal) (Timbrell, 2008).
c. Perubahan konstituen hati
Zat hepatotoksik yang dapat menyebabkan perubahan struktural
dan fungsional hepatik berguna untuk mendeteksi dan menetapkan
besarnya tingkat kerusakan hati yang terjadi. Perubahan efek farmakologis
obat dapat digunakan untuk mendeteksi dan menentukan disfungsi hati
(Plaa dan Charbonneau, 2001).
d. Analisis histologi
Analisis potensi hepatotoksik zat kimia tidak lengkap tanpa
deskripsi histologi kerusakan yang dihasilkan. Ciri-ciri kerusakan hati
ditentukan dengan pengamatan mikroskopik cahaya (Plaa dan
Charbonneau, 2001).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
B. Karbon Tetraklorida
Gambar 2. Struktur molekul karbon tetraklorida
(Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995)
Karbon tetraklorida (Gambar 2) merupakan cairan jernih mudah menguap,
tidak berwarna, dan memiliki bau khas. Senyawa ini memiliki BM 153,82 dan
sangat sukar larut dalam air (Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan,
1995). Penggunaan senyawa ini antara lain untuk sintesis senyawa organik
terklorinasi, pembuatan cairan pendingin, sebagai fumigan pertanian, serta
aplikasi laboratorium (U.S. EPA, 2010).
Karbon tetraklorida merupakan molekul sederhana yang jika diberikan
kepada berbagai spesies menyebabkan nekrosis sentrilobuler dan perlemakan hati.
Pemejanan secara kronis menyebabkan sirosis hati, tumor hati, dan juga
kerusakan ginjal. Hati menjadi target utama dari ketoksikan karbon tetraklorida
karena ketoksikan senyawa ini tergantung pada metabolisme aktivasi oleh
sitokrom P-450 (CYP2E1). Dosis rendah karbon tetraklorida hanya menyebabkan
perlemakan hati dan destruksi sitokrom P-450. Destruksi sitokrom P-450 terjadi
terutama di sentrilobular dan daerah tengah hati. Senyawa ini selektif untuk
isoenzim tertentu, pada tikus diketahui selektif untuk CYP2E1 sedangkan pada
isoenzim lain seperti CYP1A1 tidak terpengaruh. Destruksi CYP2E1 tampaknya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
dipengaruhi oleh jumlah oksigen yang tersedia, yang mana menjadi lebih besar
ketika lebih banyak oksigen tersedia (Timbrell, 2008).
Gambar 3. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida
(Timbrell, 2008)
Sebagai enzim mikrosomal CYP2E1 akan mempengaruhi aktivasi
metabolit dari senyawa yang terbentuk, hal ini dapat meningkatkan atau
mengurangi sifat toksik dari senyawa induk. Dalam hal ini CYP2E1 berfungsi
sebagai agen pereduksi dan mengkatalis adisi elektron dan mengakibatkan
hilangnya satu ion klorin sehingga membentuk radikal bebas triklorometil (CCl3)
(Gambar 3) yang merupakan metabolit reaktif. Radikal bebas triklorometil ini
dengan adanya O2 akan berubah menjadi radikal bebas trilkorometilperoksi
(OOCCl3) yang lebih reaktif (Gambar 3) (Gregus dan Klassen, 2001).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
Radikal triklorometil yang dihasilkan dapat mengalami salah satu dari
beberapa reaksi. Senyawa reaktif tersebut merusak sekitar sitokrom P-450,
termasuk enzim CYP2E1 itu sendiri, dan retikulum endoplasma. Radikal bebas
triklorometil dapat berikatan secara kovalen dengan lemak mikrosomal dan
protein, serta akan bereaksi secara langsung dengan membran fosfolipid dan
kolesterol yang bersifat toksik. Reaksi radikal bebas triklorometil ini juga akan
menghasilkan kloroform, yang merupakan salah satu metabolit dari karbon
tetraklorida. Hasil lain dari reaksi ini adalah radikal lipid yang akan mengaktifkan
senyawa oksigen reaktif selanjutnya mengakibatkan perokaidasi lipid (Gambar 3)
(Timbrell, 2008).
Peroksidasi lipid dapat menyebabkan kerusakan membran sel dan
kerusakan mitokondria. Kerusakan ini berupa gangguan integritas membran yang
menyebabkan keluarnya berbagai isi sitoplasma, antara lain enzim ALT. Enzim
ALT yang ada di dalam sel akan keluar dan masuk peredaran darah sehingga
jumlah enzim ALT meningkat. Berdasarkan Zimmerman (1999) terdapat
peningkatan serum enzim yang berbeda untuk toksikan yang berbeda (Tabel. I).
Terjadinya penghambatan sintesis protein juga diakibatkan adanya
gangguan keluarnya lipid dari hati yang disebabkan karena hambatan sintesis
lipoprotein yang membawa trigliserida meninggalkan hati sehingga menimbulkan
steatosis (perlemakan hati). Pada keadaan steatosis ini, struktur retikulum
endoplasma mengalami distorsi, sintesa protein menjadi lambat, selanjutnya akan
terjadi penyimpangan dengan cepat terhadap aktivitas enzim yang berada di
retikulum endoplasma (Wahyuni, 2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
Tabel. I Peningkatan relatif dari beberapa serum enzim pada cedera hati
Toxicant
Lesion Degree of increasse in serum
enzyme levels
Zona
necrosis steatosis AST ALT
OCT,
SDH
CCl4 + + 4+ 3+ 4+
Thioacetamide + - 4+ 3+ 4+
Tetracycline - + 2 + 1+
Ethionine - + + - +
Phosphorous + + 1-2+ 1-2+ 1-2+
(Zimmerman, 1999).
Peningkatan aktivitas serum ALT yang menyebabkan steatosis akibat
induksi karbon tetraklorida mencapai tiga kali lipat dari kondisi normal (Tabel I)
dan peningkatan aktivitas serum AST mencapai empat kali lipat dari kondisi
normal (Zimmerman, 1999). Rajendran, dkk. (2009) dalam penelitian daun
Mimosa pudica menyebutkan aktivitas serum ALT akibat induksi karbon
tetraklorida mencapai kurang lebih dua kali lipat dibanding kelompok kontrol
pada tikus terinduksi karbon tetraklorida. Tubuh manusia sebenarnya mempunyai
sistem pertahanan untuk mengatasi radikal bebas, salah satunya yaitu glutation-S-
transferase (GSH) yang berperan sebagai antioksidan endogen. Jika terdapat
radikal bebas di dalam tubuh, senyawa ini akan menangkap radikal bebas tersebut
(Timbrell, 2008).
C. Persea americana Mill.
1. Taksonomi
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Super Divisi : Spermatophyta
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliophyta
Sub Kelas : Magnoliidae
Ordo : Laurales
Familia : Lauraceae
Genus : Persea
Spesies : Persea americana Mill. (Yasir, Das dan Kharya, 2010).
2. Nama daerah
Avokad, alpukat (Indonesia), apokat, alpokat (Melayu), arpuket (Sunda),
alpokat (Jawa), alpuket (Betawi) (Suhono, dkk., 2010).
3. Morfologi
Tanaman P. americana Mill. berasal dari Amerika tropis, Meksiko,
Guatemala, dan Hindia barat. Avokad berupa pohon besar, dengan kulit batang
berwarna cokelat, tinggi batang 8-20 m, dan diameternya 25-40 cm. Daun
tunggal, berwarna hijau tua, berbentuk lonjong, atau memanjang. Daun bertangkai
dan mengumpul pada ujung ranting, berukuran 8 x 17 cm. Bunga berkelamin
ganda, berwarna putih kekuningan, dan wangi (Suhono dkk., 2010).
Buah P. americana Mill. termasuk buah buni, berbentuk bulat atau lonjong
seperti bola lampu. Buah berwarna hijau, hijau kekuningan, dan cokelat
keunguan. Buah berukuran 3-30 cm, dengan berat 100-600 g. Daging buah
berwarna hijau kekuningan atau kuning. Daging buah tebal, berminyak, terasa
hambar, atau sedikit manis. Daging buah banyak mengandung lemak dan protein.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
Biji tunggal, berukuran besar, berbentuk bulat atau lonjong, ditutupi oleh selaput
biji (Suhono dkk., 2010).
4. Kandungan kimia biji P. americana Mill.
Kandungan biji P. americana Mill. adalah saponin, tanin, flavonoid,
cyanogenic glycosides, alkaloid, fenolik, dan steroid. Biji P. americana Mill.
memiliki kandungan fenolik paling tinggi jika dibandingkan dengan daun dan
buah P. americana Mill. (Arukwe dkk., 2012).
D. Curliv® Plus Syrup
Curliv® plus syrup mengandung ekstrak Silymarin, Schisandrae Fructus,
Curcuma xanthorrhiza Rhizoma, Liquirite Radix, dan Vitamin B6. Indikasi
Curliv® plus syrup adalah sebagai suplemen untuk memelihara kesehatan fungsi
hati (Soho, 2012).
Silymarin berkhasiat sebagai hepatoprotektor atau untuk mengobati
penyakit hati (Rotblatt dan Ziment, 2002). Schisandrae Fructus bermanfaat
sebagai penangkal radikal bebas, meningkatkan detoksifikasi racun di hati, dan
meningkatkan sistem kekebalan tubuh (Yang, Wu, Wang Zhou, Zhang, dan
Wang, 2011). Curcuma xanthorrhiza Rhizoma mempunyai bebeapa kandungan
senyawa kimia antara lain berupa feladren, turmerol, kamfer, tolilmetilkarbinol,
kurkumin, zingiberen, kuzerenon, germakron, β-tumeron, dan xanthorizol (Agoes,
2010). Kurkumin yang terdapat pada tumbuhan ini bermanfaat sebagai anti
inflamasi, anti hepatotoksik, dan acnevulgaris (Arisandi dan Andriani, 2006).
Liquirite Radix berkhasiat sebagai antiinflamasi, ekspektoran, anti rematik, dan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
mencegah keracunan hati (WHO, 1999). Di dalam tubuh, vitamin B6 diperlukan
dalam metabolisme protein dan lemak, mambantu dalam pembentukan sel darah
merah, garam empedu, serta membantu dalam pencegahan kavitas (Goodner dan
Roth, 1994).
E. Dekok
Dekok adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi sediaan
herbal dengan air pada suhu 90oC selama 30 menit. Dekok dapat dibuat dengan
mencampur simplisia dengan derajat halus yang sesuai dalam panci dengan air
secukupnya, panaskan di atas tangas air selama 30 menit terhitung mulai suhu
90oC sambil sekali-sekali diaduk. Serkai selagi panas melalui kain flanel,
tambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume dekok
yang dikehendaki (Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2010).
F. Keterangan Empiris
Penelitian ini bersifat eksploratif untuk mengetahui pengaruh
hepatoprotektif pemberian jangka panjang dekok biji P. americana Mill. dengan
menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan galur Wistar
terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan
rancangan acak lengkap pola searah.
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional
1. Variabel utama
a. Variabel bebas
Variabel bebas penelitian ini adalah variasi dosis dalam pemberian
jangka panjang dekok biji P. americana Mill.
b. Variabel tergantung
Variabel tergantung penelitian ini adalah penurunan aktivitas
serum ALT dan AST serum akibat pemberian jangka panjang dekok biji P.
americana Mill. terhadap sel hati tikus jantan galur Wistar terinduksi
karbon tetraklorida.
2. Variabel pengacau
a. Variabel pengacau terkendali
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah kondisi
hewan uji, yaitu tikus jantan galur Wistar dengan berat badan 150-250 g
dan umur 2-3 bulan, frekuensi pemberian dekok biji P. americana Mill.
satu kali sehari selama enam hari berturut-turut dengan waktu pemberian
BAB III
METODE PENELITIAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
yang sama, dan cara pemberian senyawa pada tikus dilakukan secara per
oral (p.o) dan intraperitonial (i.p).
b. Variabel pengacau tak terkendali
Variabel pengacau tak terkendali dalam penelitian ini adalah
kondisi patologis dari tikus jantan galur Wistar yang digunakan.
3. Definisi operasional
a. Penurunan aktivitas ALT dan AST serum
Didefinisikan sebagai kemampuan dekok biji P. americana Mill.
pada dosis tertentu untuk menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada
tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
b. Jangka panjang
Pemberian dekok biji P. americana Mill. satu kali sehari selama
enam hari berturut-turut.
C. Bahan Penelitian
1. Bahan utama
a. Hewan uji yang digunakan berupa tikus jantan galur Wistar dengan umur
2-3 bulan dan berat badan 150-250 g yang diperoleh dari Laboratorium
Hayati Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
b. Serbuk biji P. americana Mill. yang diperoleh dari Padang, Sumatera
Barat pada bulan Januari 2013
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
2. Bahan kimia
a. Bahan hepatotoksin yang digunakan adalah karbon tetraklorida pro
analisis produksi E. Merck yang diperoleh dari Laboratorium Kimia
Analisis Fakultas Farmasi Universtas Sanata Dharma Yogyakarta
b. Air suling sebagai pelarut yang digunakan untuk pembuatan sediaan uji
yang diproduksi oleh Laboratorium Kimia Organik Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
c. Aqua bidestilata untuk blanko pengujian aktivitas serum ALT dan AST,
yang diproduksi oleh Laboratorium Kimia Analisis Instrumental Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
d. Kontrol serum ALT-AST TruLab N
e. Olive oil Bertolli®
f. Reagen ALT
Reagen yang digunakan adalah reagen ALT diasys. Komposisi dan
konsentrasi dari reagen ALT adalah sebagai berikut.
Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen ALT
R1: TRIS pH 7.15 140 mmol/L
L-Alanine 700 mmol/L
LDH
(lactate dehydrogenase)
≥ 2300 U/L
R2: 2-Oxoglutarate 85 mmol/L
NADH 1 mmol/L
Pyridoxal-5-phosphate FS: Good’s buffer pH 9.6 100 mmol/L
g. Reagen AST
Reagen yang digunakan adalah reagen ALT diasys. Komposisi dan
konsentrasi dari reagen ALT adalah sebagai berikut.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen ALT
R1: TRIS pH 7.65 11 mmol/L
L-Aspartate 320 mmol/L
MDH
(malate dehydrogenase)
≥ 800 U/L
LDH
(lactate dehydrogenase)
≥ 1200 U/L
R2: 2-Oxoglutarate 65 mmol/L
NADH 1 mmol/L
Pyridixal-5-phosphate FS: Good’s buffer pH 9.6 100 mmol/L
Pyrodoxal-5-phosphate 13 mmol/L
D. Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi: panci infusa,
termometer, sendok, stopwatch, gelas beker, gelas ukur, labu ukur, cawan
porselen, batang pengaduk, penangas air, timbangan analitik, kain flanel, moisture
balance, tabung reaksi, spuit injeksi p.o untuk tikus, spuit injeksi i.p, pipa kapiler,
mikro pipet, blue tip, yellow tip, mikrolab 200, stopwatch, vortex, sentrifuge,
Eppendorf.
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi serbuk biji P. americana Mill.
Serbuk kering biji P. americana Mill. dari Padang, Sumatera Barat
dibandingkan secara mikroskopik dengan serbuk kering biji P. americana Mill.
standar. Bila penampakan mikroskopik kedua serbuk sama, maka dapat dipastikan
serbuk tersebut merupakan serbuk biji P. americana Mill. Determinasi dilakukan
oleh Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si. dosen Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
2. Penetapan kadar air serbuk kering biji P. americana Mill.
Serbuk kering biji P. americana Mill. yang sudah diayak, dimasukkan ke
dalam alat moisture balance sebanyak 5,0 g kemudian diratakan. Bobot serbuk
kering biji tersebut ditimbang sebagai bobot sebelum pemanasan (bobot A),
setelah itu dipanaskan pada suhu 105oC. Serbuk kering biji P. americana Mill.
yang sudah dipanaskan ditimbang kembali dan dihitung sebagai bobot setelah
pemanasan (bobot B). Kemudian dilakukan perhitungan terhadap selisih bobot A
dan bobot B yang merupakan kadar air serbuk biji P. americana Mill.
3. Pembuatan dekok biji P. americana Mill.
Serbuk kering biji P. americana Mill. ditimbang sebanyak 8,0 g,
dimasukkan ke dalam panci infusa dan dibasahi dengan 16 mL aquadest, lalu
ditambah dengan 100,0 mL aquadest. Selanjutnya dilakukan pemanasan dengan
suhu 90oC selama 30 menit. Waktu 30 menit dihitung ketika suhu campuran
mencapai 90oC. Setelah 30 menit, campuran tersebut diambil dan diperas
ditambahkan aquadest melalui ampas serbuk biji P. americana Mill. yang terdapat
pada kain flanel hingga diperoleh volume 100 mL.
4. Penetapan dosis dekok biji P. americana Mill.
Penelitian ini menggunakan tiga peringkat dosis dekok biji P. americana
Mill. yang diberikan secara p.o. Dosis 360,71 mg/kgBB merupakan dosis rendah,
dosis 642,06 mg/kgBB merupakan dosis tengah, dan dosis 1142,86 mg/kgBB
merupakan dosis tinggi.
menggunakan kain flanel. Bila volume yang didapatkan kurang dari 100 mL, maka
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
5. Pembuatan larutan karbon tetraklorida konsentrasi 50%
Larutan karbon tetraklorida dibuat dalam konsentrasi 50% dimana
perbandingan volume karbon tetraklorida dan pelarut adalah 1:1 (Janakat dan Al-
Merie, 2002). Larutan karbon tetraklorida dibuat dengan cara dilarutkan dengan
volume yang sama dengan olive oil.
6. Uji pendahuluan
a. Penetapan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida
Pemilihan dosis karbon tetraklorida dilakukan untuk mengetahui
pada dosis berapa karbon tetraklorida mampu menyebabkan kerusakan
hati tikus yang ditandai dengan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST
paling tinggi. Dosis hepatotoksik yang digunakan dalam penelitian ini
mengacu pada penelitian Janakat dan Al-Merie (2002) serta Windrawati
(2012) bahwa dosis 2 mL/kg BB terbukti mampu meningkatkan aktivitas
ALT dan AST serum pada tikus bila diberikan secara i.p.
b. Penetapan waktu pencuplikan darah
Untuk mendapatkan waktu pencuplikan darah dilakukan orientasi
dengan tiga ekor tikus. Setiap ekor tikus diambil darahnya melalui sinus
orbitalis mata menggunakan pipa kapiler pada jam ke-0, 24, dan 48
setelah pemejanan karbon tetraklorida. Kemudian diukur aktivitas serum
ALT dan AST.
7. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji
Sejumlah tiga puluh lima ekor tikus dibagi secara acak ke dalam tujuh
kelompok perlakuan masing-masing sejumlah lima ekor tikus.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
a. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi larutan karbon tetraklorida :
olive oil (1:1) dosis 2 mL/kgBB secara i.p.
b. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil dosis 2 mL/kgBB secara i.p.
c. Kelompok III (kontrol positif) diberi Curliv® plus syrup dosis 4,05
mL/kgBB.
d. Kelompok IV (kontrol dekok) diberi dekok biji P. americana Mill. dosis
tinggi (1142,86 mg/kgBB) selama enam hari berturut-turut secara p.o.
e. Kelompok V (dosis rendah) diberi dekok biji P. americana Mill. dosis
360,71 mg/kgBB secara p.o sekali sehari selama enam hari berturut-turut.
f. Kelompok VI (dosis tengah) diberi dekok biji P. americana Mill. dosis
642,06 mg/kgBB secara p.o sekali sehari selama enam hari berturut-turut.
g. Kelompok VII (dosis tinggi) diberi dekok biji P. americana Mill. dosis
1142,86 mg/kgBB secara p.o sekali sehari selama enam hari berturut-turut.
Pada hari ke tujuh kelompok III, V, VI dan VII diberi larutan karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB secara i.p. Setelah 24 jam diambil darahnya melalui
8. Pembuatan serum
Darah diambil melalui bagian sinus orbitalis mata tikus, kemudian
ditampung dalam tabung Eppendorf. Darah didiamkan selama 15 menit. Darah
disentrifugasi selama 15 menit dengan kecepatan 10000 rpm dan bagian
supernatannya diambil menggunakan mikro pipet.
sinus orbitalis mata, lalu diukur aktivitas serum ALT dan AST.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
9. Pengukuran aktivitas ALT dan AST serum
Alat yang digunakan untuk menganalisis aktivitas serum ALT dan AST
adalah Mikrolab 200 Merck®. Aktivitas enzim dinyatakan dengan satuan U/l.
pengukuran aktivitas serum ALT dan AST dilakukan di laboratorium Biokimia-
Anatomi Fisiologi Manusia, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma,
Yogyakarta.
a. Penetapan aktivitas serum kontrol
Bertujuan untuk validitas dan reliabilitas alat yang digunakan. Analisis
dilakukan dengan cara mencampur 1000 μL reagen I dengan 100 μL serum
kontrol TruLab N (rentang nilai 26,2-41,8 U/l untuk ALT dan 35,4-56,6 U/l
untuk AST) . Campuran divortex selama lima detik dan didiamkan selama dua
menit. Setelah itu, ditambahkan 250 μL reagen II, divortex selama lima detik,
dan serapan dibaca setelah satu menit.
b. Penetapan aktivitas serum ALT dan AST
Analisis serum ALT dan dilakukan dengan cara mencampur 1000 μL
reagen I dengan 100 μL serum. Campuran divortex selama lima detik dan
didiamkan selama dua menit. Setelah itu, ditambahkan 250 μL reagen II,
divortex selama lima detik, dan serapan dibaca setelah satu menit. Untuk
analisis serum AST dan dilakukan dengan cara mencampur 1000 μL reagen I
dengan 100 μL serum. Campuran divortex selama lima detik dan didiamkan
selama dua menit. Setelah itu, ditambahkan 250 μL reagen II, divortex selama
lima detik, dan serapan dibaca setelah satu menit.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
F. Tata Cara Analisis Hasil
Data aktivitas serum ALT dan AST diuji dengan Kolmogorov-Smirnov
untuk mengetahui distribusi data dan analisis varian untuk melihat homogenitas
varian antar kelompoknya sebagai syarat analisis parametrik. Jika data
terdistribusi normal dan homogen maka dilanjutkan dengan analisis variansi pola
searah (one way ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui
perbedaan masing-masing kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji Scheffe
untuk melihat perbedaan antar kelompok bermakna (signifikan) (p ≤ 0,05) atau
tidak bermakna (tidak signifikan) (p > 0,05). Bila distribusi data tidak normal atau
variansi tidak homogen, dilakukan analisis dengan Kruskal Wallis untuk
mengetahui perbedaan aktivitas serum ALT dan AST antar kelompok. Kemudian
dilanjutkan uji dengan Mann Whitney untuk melihat perbedaan antar kelompok
bermakna (signifikan) (p ≤ 0,05) atau tidak bermakna (tidak signifikan) (p >
0,05).
Perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap hepatotoksin karbon
tetraklorida diperoleh dengan rumus:
𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝐶𝑙4 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑜𝑙𝑖𝑣𝑒 𝑜𝑖𝑙 − (𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑝𝑒𝑟𝑙𝑎𝑘𝑢𝑎𝑛 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑜𝑙𝑖𝑣𝑒 𝑜𝑖𝑙)
𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝐶𝑙4 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑜𝑙𝑖𝑣𝑒 𝑜𝑖𝑙 𝑥 100%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian dan besar
dosis optimum hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. pada tikus jantan
galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida. Dosis optimum merupakan dosis yang
mampu menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus terinduksi karbon
tetraklorida, hingga aktivitas serum sama dengan aktivitas serum ALT dan AST
kontrol negatif olive oil. Tolok ukur hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill.
dievaluasi secara kuantitatif berdasarkan uji enzim serum ALT dan AST. Uji
enzim serum dilakukan dengan metode GPT-ALAT untuk mengukur serum ALT
dan metode GOT-ASAT untuk mengukur serum AST. Kemampuan dekok biji P.
americana Mill. sebagai hepatoprotektor dapat dilihat dari daya hambatnya
terhadap kenaikan aktivitas serum ALT dan AST kelompok perlakuan
dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida. Semakin besar
penurunan aktivitas serum ALT dan AST, maka semakin baik kemampuan dekok
biji P. americana Mill. sebagai hepatoprotektor.
A. Penyiapan Bahan
1. Hasil determinasi tanaman
Pada penelitian ini digunakan serbuk biji P. americana Mill. sebagai
bahan uji. Tujuan dari determinasi tanaman adalah untuk membuktikan bahwa
bagian dari tanaman yang digunakan benar berasal dari tanaman P. americana
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
Mill., sehingga tidak terjadi kesalahan dalam penyiapan bahan yang digunakan.
Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia,
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Determinasi dilakukan dengan cara
mencocokkan kesamaan ciri mikroskopik serbuk biji P. americana dari Padang,
Sumatera Barat, dengan standar serbuk biji P. americana Mill. Hasil dari
determinasi membuktikan bahwa serbuk yang digunakan benar berasal dari biji P.
americana Mill.
2. Penetapan kadar air serbuk kering biji P. americana Mill.
Penetapan kadar air bertujuan untuk mengetahui kandungan air dalam
serbuk biji P. americana Mill., sehingga dapat diketahui serbuk biji P. americana
Mill. memenuhi salah satu persyaratan serbuk yang baik atau tidak. Kadar air
serbuk yang baik, yaitu kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat
dan Makanan RI, 1995). Penetapan kadar air serbuk biji P. americana Mill.
dilakukan dengan alat moisture balance menggunakan metode Gravimetri. Serbuk
yang akan digunakan dipanaskan pada suhu 105oC selama 15 menit. Hasil
perhitungan menunjukkan bahwa serbuk biji P. americana Mill. memiliki kadar
air 7,40%. Hal ini menyatakan bahwa serbuk biji P. americana Mill. memenuhi
persyaratan yang ditetapkan.
B. Uji Pendahuluan
1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida
Pada penelitian ini digunakan karbon tetraklorida sebagai hepatotoksin.
Tujuan dari penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida adalah untuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
mengetahui pada dosis berapa karbon tetraklorida dapat menyebabkan kerusakan
hati ringan, yaitu steatosis pada hati tikus yang ditandai dengan terjadinya
peningkatan aktivitas serum ALT dan AST. Pada steatosis, peningkatan serum
ALT dan AST mencapai tiga kali lipat terhadap kontrol (Zimmerman, 1999).
Dosis yang digunakan pada penelitian ini mengacu dari penelitian Janakat dan Al-
Merie (2002) serta Windrawati (2012), yaitu karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
sudah menimbulkan efek hepatotoksik pada tikus.
2. Penentuan waktu pencuplikan darah
Penentuan waktu pencuplikan darah bertujuan untuk mengetahui selang
waktu dimana karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB dapat memberikan efek
hepatotoksik maksimal yang ditunjukkan dengan aktivitas serum ALT dan AST
tertinggi pada selang waktu tertentu. Karbon tetraklorida dosis 2 mL/kg BB
diujikan pada tikus jantan, kemudian dilakukan pencuplikan darah melalui sinus
orbitalis mata dengan selang waktu tertentu yaitu jam ke-0, 24, dan 48.
Data aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam tersaji pada Tabel IV serta Gambar
4 dan data aktivitas serum AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam tersaji pada Tabel VI serta
Gambar 5.
Tabel. IV Rata-rata aktivitas ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida
dosis 2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam (n=3)
Selang waktu
(jam)
Purata aktivitas serum
ALT ± SE (U/l)
0 68,0 ± 9,6
24 203,3 ± 15,9
48 54,7 ± 5,5
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan
48 jam
Hasil analisis dengan Kolmogorov-Smirnov menunjukkan bahwa data
ALT terdistribusi normal, sehingga dapat dilanjutkan dengan analisis pola searah.
Berdasarkan analisis pola searah (One Way ANOVA) data ALT tikus setelah
terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kg BB, diketahui memiliki signifikansi
0,143 (p > 0,05). Hal tersebut menunjukkan bahwa variansi data homogen,
sehingga dapat dilanjutkan ke uji Scheffe. Dengan menggunakan uji Scheffe, dapat
diketahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok. Hasil analisis dari uji Scheffe
dapat dilihat pada Tabel V.
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Selang waktu (jam) 0 24 48
0 - B TB
24 B - B
48 TB B -
Keterangan:
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Menurut Hastuti (2008) nilai normal serum ALT pada tikus adalah 29,8-
77,0 U/l. Pada Tabel IV, terlihat aktivitas ALT yang paling tinggi pada jam ke 24,
yakni 203,3 ± 15,9 U/l yang memberikan peningkatan ALT yang signifikan dan
berbeda bermakna dibandingkan dengan jam ke 0 dan 48 (V). Aktivitas tersebut
mengalami penurunan pada jam ke 48 (54,7 ± 5,5 U/l), yang berbeda tidak
bermakna terhadap jam ke 0. Ini berarti aktivitas ALT pada jam ke 48 sudah
kembali normal.
Tabel VI. Rata-rata aktivitas AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida
dosis 2 ml/kg BB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam (n=3)
Selang waktu
(jam)
Purata aktivitas serum
AST ± SE (U/l)
0 88,3 ± 3,8
24 446,3 ± 19,3
48 147,3 ± 7,5
Gambar 5. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan
48 jam
Data aktivitas AST tikus setelah terinduksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB terdistribusi normal, hasil analisis pola searah (One Way ANOVA)
diperoleh signifikansi 0,115 (p > 0,05). Hal tersebut menunjukkan bahwa variansi
data homogen, sehingga dapat dilanjutkan ke uji Scheffe. Dengan menggunakan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
uji Scheffe, dapat diketahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok. Hasil
analisis dari uji Scheffe dapat dilihat pada Tabel VII.
Tabel VII. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Selang waktu (jam) 0 24 48
0 - B B
24 B - B
48 B B -
Keterangan:
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Dari Tabel VI dan Gambar 5 dapat dilihat aktivitas AST paling tinggi
terjadi pada jam ke 24, yakni 446,3 ± 19,3 U/l, yang menunjukkan adanya
perbedaan bermakna antara jam ke 0 dan 48 (Tabel VII). Seperti halnya aktivitas
ALT, aktivitas AST pada jam ke 48 juga mengalami penurunan dan memberikan
perbedaan bermakna terhadap jam ke 0 dan 24. Hal ini berarti aktivitas AST pada
jam ke 48 menurun, namun penurunan yang terjadi belum mencapai keadaan
normal. Berdasarkan hasil tersebut maka pada penelitian ini menggunakan waktu
pencuplikan darah pada jam ke 24 setelah pemberian karbon tetraklorida.
3. Penetapan lama pemejanan dekok biji P. americana Mill.
Kurniawati, Adrianto, dan Hendra (2011), dalam penelitian efek
hepatoprotektif ekstrak metanol-air M. tanarius terhadap tikus terinduksi
parasetamol, menjelaskan bahwa praperlakuan ekstrak metanol-air daun M.
tanarius pada kelompok hewan uji diberikan selama enam hari dan pada hari ke 7
diberikan hepatotoksin.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
Penetapan waktu praperlakuan dekok biji P. americana Mill. didasarkan
pada penelitian Kurniawati, dkk. (2011) yang mengikuti model pemberian
praperlakuan selama 6 hari dan pada hari ke 7 diberi karbon tetraklorida dosis 2
ml/kgBB. Hal ini dikarenakan peneltian ini merupakan skrining awal untuk
melihat efek hepatoprotektif dari dekok biji P. americana Mill.
4. Penetapan dosis dekok biji P. americana Mill.
Penetapan dosis dekok biji P. americana Mill. bertujuan untuk
menentukan besarnya dosis dekok biji P. americana Mill. yang akan digunakan
dalam penelitian ini. Penentuan dosis dekok biji P. americana Mill. didasarkan
pada konsentrasi maksimal dekok biji P. americana Mill. yang mampu dibuat dan
volume maksimal dekok biji P. americana Mill. yang dapat dipejankan pada tikus
secara per oral. Dari orientasi diketahui bahwa konsentrasi tertinggi dekok biji P.
americana Mill. yang dapat dibuat adalah 8%. Dari hasil ini diperoleh dosis
maksimal dekok biji P. americana Mill. adalah sebesar 1142,86 mg/kgBB.
Kemudian ditentukan 3 tingkatan dosis dekok biji P. americana Mill. yaitu
1142,86; 642,06; dan 360,71 mg/kgBB.
C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Dekok Biji P. americana Mill.
Efek hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. dievaluasi dari
penurunan aktivitas serum ALT dan AST akibat praperlakuan dekok biji P.
americana Mill. satu kali sehari selama enam hari secara per oral berturut-turut
pada tikus terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB. Data aktivitas ALT
serum dianalisis dengan analisis pola searah (One Way ANOVA) menunjukkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
signifikansi 0,091 (p > 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa variansi data homogen,
sehingga dapat dilanjutkan ke uji Scheffe untuk mengetahui kebermaknaan
perbedaan antar kelompok. Hasil analisis statistik serum AST menunjukkkan
bahwa variansi data tidak homogen sehingga tidak bisa dilanjutkan ke analisis
pola searah. Analisis dilakukan dengan Kruskal Wallis untuk mengetahui
perbedaan aktivitas serum AST antar kelompok. Dari uji menggunakan Kruskal
Wallis, diketahui signifikansi 0,00 (p ≤ 0,05), hal ini menunjukkan terdapat
perbedaan bermakna diantara kelompok. Oleh karena itu, untuk melihat perbedaan
tiap kelompok dilanjutkan uji dengan Mann Whitney. Aktivitas ALT dan AST
serum dinyatakan dalam satuan U/l yang disajikan dalam bentuk purata ± SE pada
Tabel VIII dan X serta Gambar 6 dan 7.
Kelompok
Perlakuan
Purata aktivitas
serum ALT ±
SE (U/l)
%
hepatoprotektif
% daya
hepatoprotektif
I
Kontrol hepatotoksin
karbon tetraklorida 2
mL/kgBB 183,2 ± 5,1 0 -
II Kontrol negatif olive oil 2
mL/kgBB 47,6 ± 2,0 100 -
III
Kontrol positif Curliv® 4,05
mL/kgBB + karbon
teraklorida 2 mL/kgBB 105,4 ± 7,4 57,4 100
IV DBPA 1142,86 mg/kgBB 49,0 ± 1,8 - -
V
DBPA 360,71 mg/kgBB +
karbon teraklorida 2
mL/kgBB 96,0 ± 6,0 64,3 110,8
VI
DBPA 642,06 mg/kgBB +
karbon teraklorida 2
mL/kgBB 87,0 ± 6,4 70,9 120,2
VII
DBPA 1142,86 mg/kgBB +
karbon teraklorida 2
mL/kgBB 50,8 ± 3,8 79,6 141,2
Keterangan:
DBPA = Dekok biji P. americana Mill.
Tabel VIII. Purata ± SE aktivitas serum ALT dan % hepatoprotektif
praperlakuan dekok biji P. americana Mill. pada tikus terinduksi karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB (n=5)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
Gambar 6. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus
praperlakuan dekok biji P. americana Mill. satu kali sehari selama 6 hari
terinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
Data aktivitas serum ALT dianalisis dengan analisis variansi satu arah
menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (p ≤ 0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa
antar kelompok terdapat perbedaan. Selanjutnya, untuk mengetahui kebermaknaan
perbedaan antar kelompok digunakan uji Scheffe. Hasil analisis dari uji Scheffe
dapat dilihat pada Tabel IX.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
Tabel IX. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada kelompok perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
Hepatotoksin
CCl4 2
mL/kgBB
Kontrol
negatif
olive oil 2 mL/kg
BB
Kontrol
positif
Curliv®
4,05
mL/kg BB
+ CCl4 2
mL/kg
BB
DBPA
1142,8
6
mg/kg
BB
DBPA
360,71
mg/kg
BB +
CCl4 2
mL/kgB
B
DBPA
642,06
mg/kg
BB +
CCl4 2
mL/kg
BB
DBPA
1142,86
mg/kg
BB +
CCl4 2
mL/kg
BB
Kontrol
Hepatotoksin
CCl4 2
mL/kgBB
- B B B B B B
Kontrol
negatif olive oil 2
mL/kgBB
B - B TB B B TB
Kontrol
positif Curliv®
4,05
mL/kgBB +
CCl4 2
ml/kgBB
B B - B TB TB B
DBPA
1142,86
mg/kgBB B TB B - B B TB
DBPA 360,71
mg/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
B B TB B - TB B
DBPA 642,06
mg/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
B B TB B TB - B
DBPA
1142,86
mg/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
B TB B TB B B -
Keterangan:
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
DBPA = Dekok biji P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
Tabel X. Purata ± SE aktivitas serum AST tikus praperlakuan dekok biji P.
americana Mill. terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB (n=5)
Kelompok
Perlakuan
Purata aktivitas serum
AST ± SE (U/l)
I Kontrol hepatotoksin karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB 476,8 ± 14,3
II Kontrol negatif olive oil 2
mL/kgBB 60,2 ± 2,4
III
Kontrol positif Curliv® 4,05 mL
/kgBB + karbon tetraklorida 2 mL
/kgBB
377,0 ± 15,3
IV DBPA 1142,86 mg/kgBB 61,2 ± 1,3
V DBPA 360,71 mg/kgBB + karbon
tetraklorida 2 mL /kgBB 152,2 ± 12,0
VI DBPA 642,06 mg/kgBB + karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB 193,2 ± 8,9
VII DBPA 1142,86 mg/kgBB +
karbon tetraklorida 2 mL /kgBB 125,2 ± 12,5
Keterangan:
DBPA = Dekok biji P. americana Mill.
Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus
praperlakuan dekok biji P. americana Mill. satu kali sehari selama 6 hari
terinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
Tabel XI. Hasil uji Mann-Whitney aktivitas serum AST tikus setelah pemberian
karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada kelompok perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
Hepatotoksin
CCl4 2 mL/
kgBB
Kontrol
negatif
olive oil
2 mL /kg
BB
Kontrol
positif
Curliv®
4,05
mL/kg BB
+ CCl4 2
mL/kgBB
DBPA 1142,86
mL /kg
BB
DBPA
360,71
mg/kg BB
+ CCl4 2
mL/kgBB
DBPA
642,06
mg/kg
BB +
CCl4 2
mL /kg
BB
DBPA
1142,86
mg/kg
BB +
CCl4 2
mL /kg
BB
Kontrol
Hepatotoksin
CCl4 2 mL
/kgBB
- B B B B B B
Kontrol
negatif olive
oil 2 mL
/kgBB
B - B TB B B B
Kontrol
positif
Curliv® 4,05
ml/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
B B - B B B B
DBPA
1142,86
mg/kgBB B TB B - B B B
DBPA 360,71
mg/kgBB +
CCl4 2 mL
/kgBB
B B B B - B TB
DBPA 642,06
mg/kgBB +
CCl4 2 mL
/kgBB
B B B B B - B
DBPA
1142,86
mg/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
B B B B TB B -
Keterangan:
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
DBPA = Dekok biji P. americana Mill.
Hasil analisis statistik serum AST menunjukkan bahwa variansi tidak
homogen sehingga tidak bisa dilanjutkan ke analisis pola satu arah. Analisis
dilakukan dengan Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan aktivitas serum
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
AST antar kelompok. Dari uji Kruskal Wallis, diketahui signifikansi 0,000 (p ≤
0,05), hal ini menunjukkan terdapat perbedaan bermakna diantara kelompok. Oleh
karena itu, untuk melihat perbedaan tiap kelompok dilanjutkan uji dengan Mann
Whitney. Hasil analisis dari uji Mann Whitney dapat dilihat pada Tabel XI.
1. Kontrol negatif olive oil dosis 2 mL/kgBB
Tujuan dari pengujian kelompok kontrol negatif adalah untuk memastikan
bahwa peningkatan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus adalah akibat
pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida dan bukan akibat pemberian pelarut
yaitu olive oil. Pemilihan dosis olive oil sebesar 2 mL/kgBB sesuai dengan dosis
pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida. Hal ini dimaksudkan untuk
mengetahui apakah dengan dosis yang sama, olive oil memberikan pengaruh
terhadap aktivitas serum ALT dan AST atau tidak.
Tabel XII. Rata-rata aktivitas serum ALT dan AST tikus setelah pemberian olive
oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam (n=5)
Selang waktu
(jam)
Purata aktivitas serum
ALT ± SE (U/L) Purata aktivitas serum
ALT ± SE (U/L)
0 41,6 ± 1,1 50,2 ± 2,2
24 47,6 ± 2,0 60,2 ± 2,4
Gambar 8. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah
pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
Gambar 9. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah
pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Tabel XIII. Hasil uji t berpasangan aktivitas serum ALT dan AST tikus setelah
pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Selang waktu (jam) Aktivitas serum ALT Aktivitas serum AST
0 24 0 24
Aktivitas
serum ALT
0 - B
24 B -
Aktivitas
serum AST
0 - B
24 B - Keterangan:
B = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p
> 0,05)
Berdasarkan hasil pengukuran ALT yang tersaji pada Tabel XII dan
Gambar 8, terlihat rata-rata nilai ALT jam ke-0, yaitu sebelum pemberian olive oil
adalah 41,6 ± 1,1 U/L. Rata-rata nilai ALT jam ke-24, yaitu setelah pemberian
olive oil adalah sebesar 47,6 ± 2,0 U/L. Secara statistik, hasil ini memberikan
perbedaan yang bermakna (p ≤ 0,05) antara kelompok kontrol olive oil jam ke-0
dengan kelompok kontrol olive oil jam ke-24, tetapi nilai ALT pada jam ke-0 dan
24 masih berada dalam batas normal yaitu 29,8-77,0 U/L (Hastuti, 2008),
sehingga dapat dikatakan bahwa pemberian olive oil tidak meningkatkan aktivitas
serum ALT. Hasil pengukuran aktivitas AST sebagai data pendukung, diperoleh
rata-rata nilai AST jam ke-0 yaitu sebelum pemberian olive oil adalah 50,2 ± 2,2
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
U/L. Rata-rata nilai AST jam ke-24 yaitu setelah pemberian olive oil adalah
sebesar 60,2 ± 2,4 U/L (tersaji dalam Tabel. XII). Hasil ini memberikan
perbedaan yang bermakna (p ≤ 0,05) antara kelompok kontrol olive oil jam ke-0
dengan kelompok kontrol olive oil jam ke-24. Menurut Hastuti (2008) nilai AST
normal pada tikus adalah 19,3-68,9 U/L, sehingga hasil pengukuran AST masih
dalam batas normal.
Data pengukuran aktivitas ALT dan AST serum menunjukkan bahwa
pemberian olive oil 2 mL/kgBB tidak memberikan peningkatan terhadap aktivitas
ALT dan AST, artinya apabila terjadi peningkatan terhadap aktivitas ALT dan
AST bukan karena penggunaan olive oil sebagai pelarut. Nilai ALT dan AST
kelompok kontrol negatif ini akan dijadikan dasar nilai normal ALT dan AST
penelitian selanjutnya.
2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Kontrol hepatotoksin dibuat untuk mengetahui pengaruh induksi karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB terhadap sel hati tikus yang ditunjukkan dengan
peningkatan aktivitas ALT dan AST, serta digunakan sebagai patokan dalam
menganalisis efek hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. Uji ini dilakukan
dengan memejankan karbon tetraklorida 2 mL/kgBB pada tikus secara
intraperitonial, kemudian pada jam ke-24 diambil darahnya untuk diukur aktivitas
serum ALT dan AST. Hasil pengukuran ini terlihat pada Tabel VIII, yaitu terjadi
peningkatan aktivitas ALT hingga 183,2 ± 5,1 U/L yang memberikan perbedaan
bermakna (p ≤ 0,05) terhadap kelompok kontrol negatif olive oil. Hasil
pengukuran ini menunjukkan terjadi kenaikan ALT sekitar tiga kalinya dari nilai
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
rata-rata kontrol negatif olive oil, yaitu 47,6 ± 2,0 U/L. Parameter utama
terjadinya kerusakan hati adalah aktivitas serum ALT. Hasil menunjukkan terjadi
kerusakan ringan sel hati tikus, yaitu steatosis. Menurut Zimmerman (1999), nilai
serum ALT kerusakan hati ringan steatosis meningkat mencapai tiga kali lipat
terhadap nilai normal. Hal ini dapat diartikan hasil penelitian sudah sesuai dengan
teori.
Serum AST kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB sebagai
parameter pendukung kerusakan sel hati menunjukkan adanya perbedaan
bermakna (p ≤ 0,05) terhadap kelompok kontrol negatif olive oil (Tabel VIII).
Aktivitas serum AST kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
sebesar 476,8 ± 14,3 U/L, sedangkan kontrol olive oil sebesar 60,2 ± 2,4 U/L.
Dengan adanya kenaikan rata-rata aktivitas ALT dan AST menegaskan bahwa
karbon tetraklorida 2 mL/kgBB memiliki efek hepatotoksik pada tikus jantan.
3. Kontrol positif Curliv® dosis 4,05 mL/kgBB
Kontrol positif Curliv® digunakan untuk mengetahui pengaruh pemberian
Curliv yang telah terbukti memiliki efek hepatoprotektif terhadap sel hati tikus
yang diinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB, ditunjukkan dengan penurunan
aktivitas serum ALT dan AST. Pemilihan dosis sebesar 4,05 mL/kgBB sesuai
dengan dosis pemakaian pada manusia. Uji ini dilakukan dengan memberikan
Curliv® plus syrup pada tikus secara oral selama enam hari, pada hari ke-7 tikus
diinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB secara intraperitonial, dan hari ke-8
diambil darahnya kemudian diukur aktivitas serum ALT dan AST. Pada Tabel.
VIII, kontrol positif Curliv® 4,05 mL/kgBB memberikan nilai aktivitas ALT
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
sebesar 105,4 ± 7,4 U/L. Rata-rata nilai ALT kontrol hepatotoksin adalah 183,2 ±
5,1. Secara statistik, hasil ini memberikan perbedaan bermakna (p ≤ 0,05) antara
kelompok kontrol positif Curliv® dengan kelompok kontrol hepatotoksin. Kontrol
positif Curliv® secara statistik juga memberikan perbedaan bermakna bila
dibandingkan dengan kontrol olive oil yang memiliki purata nilai ALT sebesar
47,6 ± 2,0. Selain itu, juga dilakukan pengukuran terhadap aktivitas AST sebagai
data pendukung. Melalui pengukuran tersebut, diperoleh rata-rata nilai AST
kontrol positif Curliv® sebesar 377,0 ± 15,3. Rata-rata nilai AST kontrol
hepatotoksin adalah 476,8 ± 14,3 (tersaji dalam Tabel X). Hasil ini memberikan
perbedaan bermakna (p ≤ 0,05) antara kelompok kontrol positif Curliv® dengan
kelompok kontrol hepatotoksin. Rata-rata nilai AST kontrol olive oil adalah 60,2
± 2,4, hasil tersebut bila dibandingkan dengan kontrol Curliv® menunjukkan
perbedaan yang bermakna. Dengan demikian, dapat disimpulkan bahwa
pemberian Curliv® 4,05 mL/kgBB memberikan penurunan terhadap aktivitas
serum ALT dan AST, namun penurunan yang terjadi belum kembali pada keadaan
normal.
4. Kontrol dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB
Tujuan dilakukannya kontrol dekok biji P. americana Mill. adalah untuk
melihat bahwa pemberian dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB
tidak memberikan pengaruh terhadap aktivitas ALT dan AST. Digunakan dosis
sebesar 1142,86 mg/kgBB sesuai dengan dosis terbesar dekok biji P. americana
Mill. dengan harapan hasil kelompok ini berlaku untuk praperlakuan dekok biji P.
americana Mill.dari dosis rendah 360,71 mg/kgBB hingga dosis tertinggi 1142,86
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
mg/kgBB. Uji ini dilakukan dengan memberikan dekok biji P. americana Mill.
pada tikus secara oral selama enam hari berturut-turut, dan pada hari ke-7 diambil
darahnya kemudian diukur aktivitas ALT dan AST. Pada Tabel. VIII, kontrol
dekok biji P. americana Mill. 1142,86 mg/kgBB memberikan nilai aktivitas ALT
sebesar 49,0 ± 1,8 U/L, yang memiliki perbedaan tidak bermakna (p > 0,05)
terhadap kelompok kontrol negatif olive oil.
Aktivitas serum AST kontrol dekok biji P. americana Mill. adalah 61,2 ±
1,3 U/L (Tabel X). Secara statistik, bila dibandingkan dengan aktivitas serum
AST kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB sebesar 60,2 ± 2,4 U/l terdapat
perbedaan tidak bermakna (p > 0,05). Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa
dengan pemberian dekok biji P. americana Mill. selama enam hari tidak
memberikan pengaruh terhadap peningkatan aktivitas serum ALT maupun AST.
5. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71; 642,06;
dan 1142,86 mg/kgBB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Evaluasi terhadap efek hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. pada
tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida didasarkan pada ada tidaknya
penurunan aktivitas ALT dan AST serum akibat praperlakuan dekok biji P.
americana Mill. Tabel VIII dan X menunjukkan bahwa ada kekerabatan dosis
dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan dekok
biji P. americana Mill. yang diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif.
Hal ini berarti semakin besar perlindungan yang diberikan pada sel hati tikus,
terbukti dengan terjadinya penurunan aktivitas serum ALT dan serum AST tikus.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71 mg/kgBB
terlihat aktivitas ALT serum sebesar 96,0 ± 6,0 U/L. Bila dibandingkan dengan
kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB secara statistik
terdapat perbedaan bermakna (Tabel IX). Aktivitas serum ALT perlakuan dekok
biji P. americana Mill. dosis 360,71 mg/kgBB memberikan perbedaan bermakna
terhadap kelompok kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB. Hal yang sama juga
terlihat pada aktivitas serum AST perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis
360,71 mg/kgBB terhadap kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB. Aktivitas serum
AST pada kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71
mg/kgBB dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2
mL/kgBB berbeda bermakna secara statistik. Hal ini berarti dekok biji P.
americana Mill. memiliki efek hepatoprotektif, namun kerusakan yang
ditimbulkan belum bisa kembali seperti keadaan normal. Hal ini kemungkinan
terjadi karena kandungan antioksidan pada dosis terendah yaitu 360,71 mg/kgBB
belum cukup untuk menurunkan aktivitas serum AST akibat induksi karbon
tetraklorida. Parameter utama kerusakan hati adalah serum ALT sehingga
diartikan bahwa kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71
mg/kgBB mampu melindungi sel hati dari induksi karbon tetraklorida 2
mL/kgBB.
Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB
memiliki aktivitas serum ALT sebesar 87,0 ± 6,4 U/L. Bila dibandingkan dengan
kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB secara statistik
terdapat perbedaan bermakna (Tabel IX). Aktivitas serum ALT kelompok
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB memberikan
perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB. Hal
yang sama juga terlihat pada aktivitas serum AST kelompok perlakuan dekok biji
P. americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB terhadap kontrol negatif olive oil 2
mL/kgBB. Aktivitas serum AST pada kelompok perlakuan dekok biji P.
americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB dibandingkan dengan kontrol
hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB berbeda bermakna secara statistik.
Hal ini berarti dekok biji P. americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB memiliki efek
hepatoprotektif, namun kerusakan yang ditimbulkan belum bisa kembali seperti
keadaan normal. Hal ini kemungkinan terjadi karena kandungan antioksidan pada
dosis tengah yaitu perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB
belum cukup untuk menurunkan aktivitas serum ALT dan serum AST akibat
induksi karbon tetraklorida.
Aktivitas serum ALT pada kelompok dekok biji P. americana Mill. dosis
1142,86 mg/kgBB terlihat aktivitas serum ALT sebesar 50,8 ± 3,8 U/L. Bila
dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2
mL/kgBB secara statistik terdapat perbedaan bermakna (Tabel IX). Aktivitas
serum ALT dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB memberikan
perbedaan tidak bermakna terhadap kelompok kontrol negatif olive oil 2
mL/kgBB. Dengan demikian, dekok biji P. americana Mill. dosis dosis 1142,86
mg/kgBB memberikan efek hepatoprotektif hingga keadaan hati bisa kembali
seperti normal. Aktivitas serum AST dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86
mg/kgBB dibandingkan dengan kontrol olive oil 2 mL/kgBB secara statistik
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
berbeda bermakna, hal yang sama juga terlihat pada aktivitas serum AST dekok
biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB terhadap kontrol hepatotoksin
karbon tetraklorida 2 mL/kgBB. Hal ini bisa terjadi akibat kerja otot rangka atau
jantung karena enzim aspartat di dalam tubuh, sebagian besar tidak spesifik
berada di dalam hati saja, tetapi berada dalam otot rangka, jantung, serta tersebar
ke seluruh jaringan tubuh.
Ketiga dosis dekok biji P. americana Mill. menunjukkan bahwa terdapat
kekerabatan dosis dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis
praperlakuan dekok biji P. americana Mill. yang diberikan, maka semakin besar
efek hepatoprotektif yang dihasilkan. Hal ini terlihat dari aktivitas ALT dekok biji
P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB secara statistik berbeda bermakna
terhadap dosis 360,71 dan 642,06 mg/kgBB (Tabel IX). Kelompok perlakuan
dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB merupakan kelompok yang
memiliki tingkat kerusakan hati paling rendah. Sedangkan aktivitas serum ALT
kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71 dan 642,06
mg/kgBB secara statistik berbeda tidak bermakna memiliki tingkat kerusakan
lebih besar (Tabel IX). Bila dibandingkan dengan kontrol positif Curliv® dosis
4,05 mL/kgBB, kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71
dan 642,06 mg/kgBB berbeda tidak bermakna secara statistik (Tabel IX). Hal ini
berarti kemampuan efek hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. dosis
360,71 dan 642,06 mg/kgBB sama dengan kemampuan efek hepatoprotektif
Curliv® dosis 4,05 mL/kgBB. Aktivitas serum ALT kelompok kontrol positif
Curliv® dosis 4,05 mL/kgBB secara statistik berbeda bermakna terhadap
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB.
Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa kemampuan efek hepatoprotektif
dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB lebih besar dari pada
Curliv® dosis 4,05 mL/kgBB.
Dari ketiga penurunan nilai aktivitas serum ALT dan AST pada peringkat
dosis tersebut maka dapat ditentukan nilai dosis optimum hepatoprotektif. Hasil
perhitungan menunjukkan % hepatoprotektif dosis 360,71; 642,06; dan 1142,86
mg/kgBB berturut-turut adalah 64,3; 70,9; dan 97,6% (Tabel VIII). Bila daya
hepatoprotektif Curliv®
diasumsikan bernilai 100%, maka daya hepatoprotektif
dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71; 642,06; dan 1142,86 mg/kgBB
berturut-turut adalah 112,1; 123,7; dan 170,2% (Tabel VIII).
Dengan demikian, dosis optimum dekok biji P. americana Mill. yang
dapat menghambat kenaikan aktivitas serum ALT dan AST terbesar adalah
1142,86 mg/kgBB. Bila dikonversikan ke manusia dengan berat badan 70 kg
adalah sebesar 12,80 g. Agar dapat diperoleh nilai ED50, perlu dilakaukan
penelitian lanjutan dengan dosis di bawah 360,71 mg/kgBB. Selain itu, penelitian
ini merupakan penelitian pendahuluan yang bersifat eksploratif untuk mengetahui
efek hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill., sehingga perlu dilakukan
penelitian lanjutan dengan model hepatotoksin lain seperti parasetamol untuk
mempertegas hasil yang didapatkan dari penelitian ini.
Pemejanan dosis rendah karbon tetraklorida dapat menyebabkan terjadinya
perlemakan hati (steatosis). Proses ini diperantarai oleh aktivasi CYP2E1
sehingga membentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3). Radikal triklorometil
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
tersebut dapat merusak retikulum endoplasma sel hati, selain itu juga dapat
mengaktifkan senyawa oksigen reaktif selanjutnya mengakibatkan peroksidasi
lipid. Setelah pemejanan karbon tetraklorida selama satu sampai tiga jam,
trigliserida menumpuk di hepatosit dan terlihat sebagai droplet lipid. Lipid dalam
hati yang terbentuk ini dapat menghambat sintesis protein sehingga menurunkan
produksi lipoprotein, yang mana lipoprotein ini bertanggung jawab dalam
transport lipid untuk keluar dari hepatosit. Akibat menurunnya produksi
lipoprotein akan terhambat sehingga menyebabkan steatosis (Timbrell, 2008).
Proses peroksidasi lipid juga dapat menghasilkan produk yang dapat
menyebarkan kerusakan membran sel dan kerusakan mitokondria (Timbrell,
2008). Kerusakan ini berupa gangguan integritas membran yang menyebabkan
keluarnya berbagai isi sitoplasma, antara lain serum ALT. Serum ALT yang ada
di dalam sel hati akan keluar dan masuk ke dalam peredaran darah sehingga
jumlah enzim serum ALT dalam darah meningkat (Wahyuni, 2005).
Kandungan dalam biji P. americana Mill. adalah senyawa polifenol
seperti tanin dan flavonoid yang dapat tersari oleh pelarut yang bersifat polar.
Pada penelitian ini digunakan air yang bersifat polar sehingga kemungkinan besar
senyawa polifenol akan tertarik dalam pelarut tersebut. Menurut Arts dan
Hollman (2005), senyawa polifenol berperan sebagai antioksidan. Kemungkinan
mekanisme kerja antioksidan dalam melindungi sel hati yang ditunjukkan dengan
penurunan ALT dan AST adalah penangkapan radikal bebas triklorometil (•CCl3)
yang merupakan metabolit reaktif, sehingga serangkaian peristiwa yang akan
menyebabkan steatosis pada hati akan terhenti. Selain sebagai antioksidan,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
kemungkinan senyawa polifenol mampu meningkatkan sintesis enzim GSH dalam
hati yang berfungsi sebagai enzim penetralisir setiap metabolit reaktif, sehingga
dapat dieliminasi dengan mudah oleh tubuh. Adanya kemungkinan mekanisme
efek hepatoprotektif antioksidan dalam biji P. americana Mill., maka dapat
dilakukan pembuatan formulasi sediaan untuk pengembangan obat herbal.
D. Rangkuman Pembahasan
Hasil penelitian menunjukkan bahwa praperlakuan dekok biji P.
americana Mill. dosis 360,71; 642,06; dan 1142,86 mg/kgBB mampu
menurunkan aktivitas serum ALT dan AST tikus jantan galur Wistar terinduksi
karbon tetraklorida. Ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul terlihat
dari semakin besar dosis praperlakuan dekok biji P. americana Mill. yang
diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif yang dihasilkan. Hal ini
terbukti dari perolehan hasil purata ± SE aktivitas serum ALT dari dosis rendah
hingga tinggi berturut-turut sebesar 96,0 ± 6,0; 87,0 ± 6,4; dan 50,8 ± 3,8 U/L.
Sedangkan hasil purata ± SE untuk aktivitas serum AST berturut-turut adalah
152,2 ± 12,0; 193,2 ± 8,9; dan 125,2 ± 12,5 U/L. Hasil ini menjawab
permasalahan pertama dalam penelitian ini yaitu pemberian dekok biji P.
americana Mill. mempunyai pengaruh pada tikus jantan galur Wistar terinduksi
karbon tetraklorida dengan cara menurunkan serum ALT dan AST.
Aktivitas serum ALT kelompok kontrol dekok biji P. americana Mill.
1142,86 mg/kgBB secara statistik menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna
dibandingkan kelompok kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB. Hal yang sama juga
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
terjadi pada aktivitas serum AST kelompok dekok biji P. americana Mill. 1142,86
mg/kgBB dengan kelompok kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB. Dapat
disimpulkan bahwa pemberian dekok biji P. americana Mill. tidak memberikan
pengaruh terhadap sel hati tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
dan kenaikan serum ALT dan AST akibat induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB.
Persen hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71; 642,06;
dan 1142,86 mg/kgBB berturut-turut adalah 64,3; 70,9; dan 99,6%, sedangkan
daya hepatoprotektifnya berturut-turut adalah 112,1; 123,7; dan 170,2%.
Berdasarkan data tersebut, dosis dekok biji P. americana Mill. yang paling
optimum memberikan efek hepatoprotektif adalah 1142,86 mg/kgBB. Pada dosis
1142,86 mg/kgBB ini dapat menurunkan aktivitas ALT dan AST serum yang
paling besar dibandingkan dua dosis lainnya. Agar dapat diperoleh nilai ED50
dekok biji P. americana Mill., perlu dilakaukan penelitian lanjutan dengan dosis
di bawah 360,71 mg/kgBB. Selain itu, dilakukan penelitian lanjutan dengan
model hepatotoksin lain seperti parasetamol untuk mempertegas hasil yang
didapatkan dari penelitian ini.
Kandungan dalam biji P. americana Mill. adalah senyawa polifenol yang
dapat tersari oleh pelarut yang bersifat polar. Menurut Arts dan Hollman (2005),
senyawa polifenol berperan sebagai antioksidan. Kemungkinan mekanisme kerja
antioksidan dalam melindungi sel hati yang ditunjukkan dengan penurunan ALT
dan AST adalah penangkapan radikal bebas triklorometil (•CCl3) yang merupakan
metabolit reaktif, sehingga serangkaian peristiwa yang akan menyebabkan
steatosis pada hati akan terhenti. Selain sebagai antioksidan, kemungkinan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
senyawa polifenol mampu meningkatkan sintesis enzim GSH dalam hati yang
berfungsi sebagai enzim penetralisir setiap metabolit reaktif, sehingga dapat
dieliminasi dengan mudah oleh tubuh.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil yang diperoleh dan analisis statistik yang telah dilakukan, maka
dapat disimpulkan sebagai berikut.
1. Pemberian dekok biji P. americana Mill. pada dosis 360,71; 642,06; dan
1142,86 mg/kgBB mempunyai pengaruh hepatoprotektif pada tikus jantan
galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida berupa penurunan aktivitas
serum ALT dan AST.
2. Dosis optimum hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. pada tikus
jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida adalah sebesar 1142,86
mg/kgBB.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut antara lain:
1. Uji efek hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. dengan variasi
dosis di bawah 360,71 mg/kgBB agar dapat diperoleh nilai ED50.
2. Uji efek hepatoprotektif dekok biji P. americana Mill. pada tikus jantan
dengan induksi hepatotoksin lain seperti parasetamol.
.
.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, A., 2010, Tanaman Obat Indonesia, Buku 1, Penerbit Salemba Medika,
Jakarta, pp. 99.
Alhassan, A. J., Sule, M. S., Atiku, M. K., Wudil, A. M., Abubakar, H.,
Mohammed, S.A., Effects of aqueous avocado pear (Persea americana)
seed extract on alloxan induced diabetes rats, 2012, GJMS, 2 (1), pp. 5-11.
Arisandi, Y., dan Andriani, Y., 2006, Khasiat Berbagai Tanaman untuk
Pengobatan, Eska Media, Jakarta, pp. 471.
Arts, I. C., dan Hollman, P. C., Polyphenols and Disease Risk in Epidemiologic
studies, Am J Clin Nutr, 81, pp. 317-325.
Arukwe, U., Amadi, B. A., Duru, M. K. C., Agomuno, E. N., Adindu, E. A.,
Odika, P. C., Lele, K. C., Egejuru, L., Anudike, J., 2012, Chemical
Composition of Persea americana Leaf, Fruit, and Seed, IJRRAS, 11 (2),
pp. 246-348.
Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2010, Acuan Sediaan Herbal, Direktorat
Obat Asli Indonesia, Jakarta, pp. 3-4.
Carpena, J., Morcuende, D., Andrade, M., Kylli, P., Estevez, M., 2011, Avocado
(Persea americana Mill.) Phenolics, In Vitro Antioxidant and
Antimicrobial Activities, and Inhibition of Lipid and Protein Oxidation in
Porcine Patties, JAFC, 59, pp. 5625-5636.
Chandrasoma, P., dan Taylor C. R., 1995, Concise Pathology, 2nd
edition, FRC
Path Prentice Hall International, USA, pp. 621-628.
Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan Klinik, 2007, Pharmaceutical Care
Untuk Penyakit Hati, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, pp. 7.
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope
Indonesia, jilid IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta,
pp.46.
Edem, D. O., dan Akpanabiatu, M.I., 2006. Effects of palm oil-containing diets on
enzyme activities of rats. Pakistan J Nutr, 5(4), pp. 301- 305.
Forrest, E., 2006, Hepatik Disorders, in Lee, A., (Ed.), Adverse Drug Reaction,
2nd
ed, Pharmaceutical Press, London, pp. 193, 201-202.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Fox, S. I., 2004, Human Physiology, 8th
edition, McGraw-Hill, New York, pp.
575-580.
Ganong, W.F., dan McPhee, S.J., 2011, Patofisiologi Penyakit: Pengantar
Menuju Kedokteran Klinis, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp.
421-422.
Goodner, B., dan Roth, L. S., 1994, Panduan Tindakan Keperawatan Klinik
Praktis, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 176.
Gregus dan Klaaseen, C. D., 2001, Mchanism of Toxicity, in Klaaseen, C. D.,
Cassarett and Doull’s Toxicology: the Basic Science Poisons, 6th
edition,
McGraw-Hill, New York, pp. 57-64.
Hastuti, T., 2008, Aktivitas enzim Transaminase dan Gambaran Histopatologi
Tikus yang Diberikan Kelapa Kopyor Pasca Induksi Parasetamol, Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Laporan Penelitian, Institut
Pertanian Bogor, Bogor.
Janakat, S., dan Al-Merie, H., 2002, Optimization of the dose and route of
injection, and characterization of the time course of carbon tetrachloride-
induced hepatotoxicity in the rat, J. Pharm. Tox. Methods, 48, pp. 41-44.
Kurniawati, A.Y., Adrianto, E.E., dan Hendra, P., 2011, Uji Praklinik Ekstrak
Metanol-Air Macaranga tanarius L. Kajian: Aktivitas Antiinflamasi dan
Hepatoprotektif, Kongres Ilmiah dan Rapat Kerja Nasional IAI 2011, IAI,
Manado.
Lu, F.C., 1995, Toksikologi Dasar, Edisi 2, UI Press, Jakarta, pp. 209-210.
Marinova, D., Ribarova, F., Atanassova, M., 2005, Total phenolic and total
flavonoids in Bulgarian fruits and vegetables, J. University Chem. Tech.
Metallurgy, 40 (3), pp. 255-260.
Ozula, R. I., Anaka, O. N., Okpo, S. O., Idogun, S. E., 2009, Acute and Subacute
Toxilcological Assesment of The Aqueous Sees Extract of Persea
americana Mill. (Lauraceae) in Rats, Afr. J. Trad. CAM, 6(4), pp. 573-
578.
Plaa, G.L., dan Charbonneau, M., 2001, Detection and Evaluation of Chemically
Induced Liver Injury, in Hayes, W.A., Principles and Methods of
Toxicology, 4th
edition, Taylor and Francis, Philadelphia, pp. 1148-1175.
Pratiwi, E., 2009, Daya Antibaktari Ekstrak Biji Alpukat (Persea americana
Mill.) terhadap Streptococcus alpha yang Resisten Antibiotik, Skripsi,
http://digilib.fk.umy.ac.id/gdl.php?mod=browse&op=read&id=yoptumyfk
pp-gdl-erlizanivo-411, diakses tanggal 3 Oktober 2013
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Price, S.A., dan Wilson, L.M., 2005, PATOFISIOLOGI: Konsep Klinis Proses-
Proses Penyakit, Edisi 6, Vol 1, Penerbit EGC, Jakarta, pp. 473-476.
Rajendran, R., Hemalatha, S., Akasakalai, K., MadhuKrishna, C.H., Sohil, B.,
Vittal, Sundaram, R. M., 2009, Hepatoprotective activity of Mimosa
pudica leaves against Carbontetrachloride induced toxicity, I J. Nat. Prod.,
2, pp. 116-122.
Rotblatt, M., Zument, I., 2002, Evidence-based herbal medicine, Hanly & Belfus
Inc., Philadelphia, pp. 266.
Sacher, R.A., dan McPherson, R.A., 2002, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan,
Edisi 11, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 369-370.
Sampurno, 2003, Obat Herbal dalam Prespektif Medik dan Bisnis,
http://mot.farmasi.ugm.ac.id/files/13OBAT%20HERBAL_Sampurno.pdf,
diakses tanggal 3 Desember 2013.
Soho, 2012, Curliv® plus syrup, http://www.sohogroup.com/pharma/
hepatoprotector-1/curliv-curliv-plus-curliv-plus-syrup-2, diakses tanggal
20 September 2013.
Sofia, N.A., Nurdjanah, S., dan Ratnasari, N., 2009, Kadar Leptin pada Populasi
Non Diabetes dengan dan Tanpa Non Alcoholic Fatty Liver (NAFL),
Berkala Kesehatan Klinik, 15 (1), 49-55.
Stine, K.E., and Brown, T.M., 1996, Principles of Toxicology, Lewis Publishers,
New York, pp. 149-157.
Suhono, B, Yuzammi, Witono, J. R., Hidayat, S., Handayani, T., Sugiarti,
Mursidawati, S., Triono, T., Astuti, I. P., Sudarmono, Wawaningrum, H.,
2010, Ensiklopedia Flora, Jilid 5, Kharisma Ilmu, Jakarta, pp.16.
Timbrell, J. A. 2008, Principles of Biochemical Toxicology, 4th
edition, Informam
Healthcare, New York, pp. 308-311.
Treinen, M., dan Moslen, 2001, Toxic Responses of The Liver, in Klaassen, C.D.,
Cassarett and Doull’s Toxicology: The Basic Science of poisons, 6th
edition, Mc. Graw Hill Companies, Inc., New York, pp. 467-481.
U.S. EPA, 2010, Toxicological Review Of Carbon Tetrachloride, U.S.
Environmental Protection Agency, Washington DC, pp. 3-4.
WHO, 1999, WHO Monographs on Selected Medicinal Plants,
http://apps.who.int/medicinedocs/en/d/Js2200e/, diakses tanggal 24
Oktober 2013.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
WHO, 2012, Hepatitis B, http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs204/en/,
diakses tanggal 1 Mei 2013
Wahyuni, S., 2005, Pengaruh Daun Sambiloto (Andrographis paniculata Ness)
Terhadap kadar ALT dan AST Tikus Putih, GAMMA, 1 (1), pp. 45-53.
Wibowo, D.S., dan Paryana, W., 2009, Anatomi Tubuh Manusia, Graha Ilmu,
Bandung, pp. 347-352.
Windrawati, T. G., 2012, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol:Air (50:50) daun
Macaranga tanarius L. Terhadap Kadar ALT-AST Serum pada Tikus
Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,
Yogyakarta.
Yang, J., Wu, Y., Wang, Q., Zhou, G., Zhang, L., Wang, D., 2011, The Chemical
and Pharmacological Effects of Fructus Schisandrae and its Application
Prospect, BIOMIRROR, 2(11), pp. 1-9.
Yasir, M., Das, S., dan Kharya, M. D., 2010, The Phytochemical and
Pharmacological Profile of Persea americana Mill, NCBI,
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3249906/, diakses tanggal
4 Desember 2013.
Zimmerman, H. J., 1999, Hepatotoxicity, Appleton Century Crofts, New York,
pp. 167-171.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto serbuk biji P. americana Mill.
Lampiran 2. Foto panci infusa
Lampiran 3. Foto pembuatan dekok
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Lampiran 4. Dekok biji P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi biji P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee (MHREC)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada uji pendahuluan
penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
Jam_0 3 68.0000 16.70329 50.00 83.00
Jam_24 3 2.0333E2 27.53785 185.00 235.00
Jam_48 3 54.6667 9.45163 44.00 62.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Jam_0 Jam_24 Jam_48
N 3 3 3
Normal Parametersa Mean 68.0000 2.0333E2 54.6667
Std. Deviation 1.67033E1 2.75379E1 9.45163
Most Extreme Differences Absolute .238 .353 .304
Positive .193 .353 .219
Negative -.238 -.253 -.304
Kolmogorov-Smirnov Z .412 .611 .527
Asymp. Sig. (2-tailed) .996 .850 .944
a. Test distribution is Normal.
Descriptives
ALT
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for
Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 0 3 68.0000 16.70329 9.64365 26.5067 109.4933 50.00 83.00
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 24 3 2.0333E2 27.53785 15.89899 134.9255 271.7412 185.00 235.00
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 48 3 54.6667 9.45163 5.45690 31.1875 78.1458 44.00 62.00
Total 9 1.0867E2 73.18470 24.39490 52.4119 164.9214 44.00 235.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Test of Homogeneity of Variances
ALT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.732 2 6 .143
ANOVA
ALT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 40594.667 2 20297.333 54.046 .000
Within Groups 2253.333 6 375.556
Total 42848.000 8
Multiple Comparisons
ALT
Scheffe
(I) Orientasi_CCl4 (J) Orientasi_CCl4
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 0
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 24 -135.33333
* 15.82310 .000 -186.0821 -84.5846
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 48 13.33333 15.82310 .715 -37.4154 64.0821
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 24
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 0 135.33333
* 15.82310 .000 84.5846 186.0821
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 48 148.66667
* 15.82310 .000 97.9179 199.4154
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 48
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 0 -13.33333 15.82310 .715 -64.0821 37.4154
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB
jam ke 24 -148.66667
* 15.82310 .000 -199.4154 -97.9179
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum AST pada uji pendahuluan
penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
Jam_0 3 89.3333 8.08290 82.00 98.00
Jam_24 3 4.4633E2 33.50124 410.00 476.00
Jam_48 3 1.4733E2 13.01281 134.00 160.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Jam_0 Jam_24 Jam_48
N 3 3 3
Normal Parametersa Mean 89.3333 4.4633E2 1.4733E2
Std. Deviation 8.08290 3.35012E1 1.30128E1
Most Extreme Differences Absolute .232 .246 .187
Positive .232 .194 .181
Negative -.192 -.246 -.187
Kolmogorov-Smirnov Z .402 .425 .324
Asymp. Sig. (2-tailed) .997 .994 1.000
a. Test distribution is Normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Descriptives
AST
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval
for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 0 3 88.3333 6.50641 3.75648 72.1705 104.4961 82.00 95.00
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 24 3 4.4633E2 33.50124 19.34195 363.1116 529.5550 410.00 476.00
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 48 3 1.4733E2 13.01281 7.51295 115.0077 179.6590 134.00 160.00
Total 9 2.2733E2 167.22515 55.74172 98.7927 355.8740 82.00 476.00
Test of Homogeneity of Variances
AST
Levene Statistic df1 df2 Sig.
3.169 2 6 .115
ANOVA
AST
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 221046.000 2 110523.000 248.552 .000
Within Groups 2668.000 6 444.667
Total 223714.000 8
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
Multiple Comparisons
AST
Scheffe
(I) Orientasi_CCl4 (J) Orientasi_CCl4
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 0
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 24 -358.00000
* 17.21756 .000 -413.2212 -302.7788
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 48 -59.00000
* 17.21756 .039 -114.2212 -3.7788
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 24
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 0 358.00000
* 17.21756 .000 302.7788 413.2212
CCl4 Dosis 2 m:/kgBB
jam ke 48 299.00000
* 17.21756 .000 243.7788 354.2212
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 48
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 0 59.00000
* 17.21756 .039 3.7788 114.2212
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB jam ke 24 -299.00000
* 17.21756 .000 -354.2212 -243.7788
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan dekok biji P.
americana Mill. setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
kontrol_hepatotoksin 5 1.8320E2 11.43241 168.00 197.00
kontrol_olive_oil 5 47.6000 4.39318 43.00 54.00
kontrol_Curliv 5 1.0540E2 16.53179 89.00 131.00
kontrol_dekok 5 49.0000 4.00000 43.00 54.00
perlakuan_dosis_rendah 5 96.0000 13.32291 79.00 110.00
perlakuan_dosis_tengah 5 87.0000 14.30035 73.00 111.00
perlakuan_dosis_tinggi 5 50.8000 8.40833 42.00 60.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
kontrol_
hepatotoksin
kontrol_
olive_oil
kontrol_
Curliv
kontrol_
dekok
dosis_
rendah
dosis_
tengah
dosis_
tinggi
N 5 5 5 5 5 5 5
Normal Parametersa Mean
183.2000 47.6000 105.40
00
49.000
0
96.000
0
87.000
0
50.800
0
Std. Deviation 11.43241 4.39318
16.531
79
4.0000
0
13.322
91
14.300
35
8.4083
3
Most Extreme Differences Absolute .163 .242 .273 .201 .195 .328 .252
Positive .136 .242 .273 .201 .174 .328 .252
Negative -.163 -.148 -.161 -.201 -.195 -.164 -.203
Kolmogorov-Smirnov Z .363 .541 .610 .450 .437 .733 .564
Asymp. Sig. (2-tailed) .999 .931 .851 .987 .991 .656 .908
a. Test distribution is Normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Descriptives
ALT
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval
for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB 5 1.8320E2 11.43241 5.11273 169.0048 197.3952 168.00 197.00
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 5 47.6000 4.39318 1.96469 42.1452 53.0548 43.00 54.00
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 mL/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 1.0540E2 16.53179 7.39324 84.8731 125.9269 89.00 131.00
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
5 49.0000 4.00000 1.78885 44.0333 53.9667 43.00 54.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 96.0000 13.32291 5.95819 79.4574 112.5426 79.00 110.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 87.0000 14.30035 6.39531 69.2438 104.7562 73.00 111.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
5 50.8000 8.40833 3.76032 40.3597 61.2403 42.00 60.00
Total 35 88.4286 46.46332 7.85373 72.4679 104.3893 42.00 197.00
Test of Homogeneity of Variances
ALT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.055 6 28 .091
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
ANOVA
ALT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 69832.571 6 11638.762 91.336 .000
Within Groups 3568.000 28 127.429
Total 73400.571 34
Multiple Comparisons
ALT
Scheffe
(I)
Kelompok_Perlakuan (J) Kelompok_Perlakuan
Mean
Difference (I-
J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2
mL/kgBB
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 135.60000
* 7.13943 .000 108.2535 162.9465
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 mL/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
77.80000* 7.13943 .000 50.4535 105.1465
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
134.20000* 7.13943 .000 106.8535 161.5465
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
87.20000* 7.13943 .000 59.8535 114.5465
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
96.20000* 7.13943 .000 68.8535 123.5465
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
132.40000* 7.13943 .000 105.0535 159.7465
Kontrol Negatif Olive
Oil Dosis 2 mL/kgBB
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB -135.60000
* 7.13943 .000 -162.9465 -108.2535
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 ml/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-57.80000* 7.13943 .000 -85.1465 -30.4535
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
-1.40000 7.13943 1.000 -28.7465 25.9465
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-48.40000* 7.13943 .000 -75.7465 -21.0535
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-39.40000* 7.13943 .001 -66.7465 -12.0535
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
-3.20000 7.13943 1.000 -30.5465 24.1465
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 mL/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB -77.80000
* 7.13943 .000 -105.1465 -50.4535
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 57.80000
* 7.13943 .000 30.4535 85.1465
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
56.40000* 7.13943 .000 29.0535 83.7465
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
9.40000 7.13943 .937 -17.9465 36.7465
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
18.40000 7.13943 .383 -8.9465 45.7465
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
54.60000* 7.13943 .000 27.2535 81.9465
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis
1142,86 mg/kgBB
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB -134.20000
* 7.13943 .000 -161.5465 -106.8535
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 1.40000 7.13943 1.000 -25.9465 28.7465
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 mL/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-56.40000* 7.13943 .000 -83.7465 -29.0535
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-47.00000* 7.13943 .000 -74.3465 -19.6535
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-38.00000* 7.13943 .002 -65.3465 -10.6535
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
-1.80000 7.13943 1.000 -29.1465 25.5465
Dekok Biji P.
americana Dosis
360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB -87.20000
* 7.13943 .000 -114.5465 -59.8535
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 48.40000
* 7.13943 .000 21.0535 75.7465
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 mL/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-9.40000 7.13943 .937 -36.7465 17.9465
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
47.00000* 7.13943 .000 19.6535 74.3465
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
9.00000 7.13943 .949 -18.3465 36.3465
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
45.20000* 7.13943 .000 17.8535 72.5465
Dekok Biji P.
americana Dosis
642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB -96.20000
* 7.13943 .000 -123.5465 -68.8535
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 39.40000
* 7.13943 .001 12.0535 66.7465
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 mL/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-18.40000 7.13943 .383 -45.7465 8.9465
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
38.00000* 7.13943 .002 10.6535 65.3465
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
77
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-9.00000 7.13943 .949 -36.3465 18.3465
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB
+ CCl4 2 mL/kgBB
36.20000* 7.13943 .003 8.8535 63.5465
Dekok Biji P.
americana Dosis
1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
Kontrol Hepatotoksin
CCl4 Dosis 2 mL/kgBB -132.40000
* 7.13943 .000 -159.7465 -105.0535
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 3.20000 7.13943 1.000 -24.1465 30.5465
Kontrol Positif Curliv®
Dosis 4,05 mL/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-54.60000* 7.13943 .000 -81.9465 -27.2535
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
1.80000 7.13943 1.000 -25.5465 29.1465
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-45.20000* 7.13943 .000 -72.5465 -17.8535
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
-36.20000* 7.13943 .003 -63.5465 -8.8535
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
78
Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum AST perlakuan dekok biji P.
americana Mill. setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
kontrol_hepatotoksin 5 4.7680E2 31.87789 441.00 521.00
kontrol_olive_oil 5 60.2000 5.26308 55.00 69.00
kontrol_Curliv 5 3.7700E2 34.22718 344.00 419.00
kontrol_dekok 5 61.2000 2.86356 58.00 65.00
perlakuan_dosis_rendah 5 1.5220E2 26.79925 133.00 198.00
perlakuan_dosis_tengah 5 1.9320E2 19.96747 164.00 215.00
perlakuan_dosis_tinggi 5 1.2520E2 27.90520 101.00 166.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
79
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
kontrol_
hepatotoksin
kontrol_
olive_oil
kontrol_
Curliv®
kontrol_
dekok
dosis_
rendah
dosis_
tengah
dosis_
tinggi
N 5 5 5 5 5 5 5
Normal Parametersa Mean 476.8000 60.2000 377.0000 61.2000 152.2000 193.2000 125.2000
Std. Deviation 31.87789 5.26308 34.22718 2.86356 26.79925 19.96747 27.90520
Most Extreme
Differences
Absolute .172 .315 .225 .179 .302 .233 .282
Positive .172 .315 .225 .179 .302 .137 .282
Negative -.131 -.162 -.193 -.135 -.237 -.233 -.193
Kolmogorov-Smirnov Z .385 .705 .503 .400 .675 .522 .630
Asymp. Sig. (2-tailed) .998 .703 .962 .997 .752 .948 .822
a. Test distribution is Normal.
Test of Homogeneity of Variances
AST
Levene Statistic df1 df2 Sig.
3.719 6 28 .008
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank
AST Kontrol Hepatotoksin CCl4 Dosis 2 mL/kgBB 5 33.00
Kontrol Negatif Olive Oil Dosis 2 mL/kgBB 5 4.80
Kontrol Positif Curliv® Dosis 4,05 mL/kgBB + CCl4
2 mL/kgBB 5 28.00
Kontrol Dekok Biji P. americana Dosis 1142,86
mg/kgBB 5 6.20
Dekok Biji P. americana Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB 5 17.00
Dekok Biji P. americana Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB 5 22.40
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
80
Dekok Biji P. americana Dosis 1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB 5 14.60
Total 35
Test Statisticsa,b
AST
Chi-Square 31.937
df 6
Asymp. Sig. .000
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 mL/kgBB 5 8.00 40.00
Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
81
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 mL/kgBB 5 8.00 40.00
Kontrol Positif Curliv® Dosis
4,05 mL/kgBB + CCl4 2
mL/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 mL/kgBB 5 8.00 40.00
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
82
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 mL/kgBB 5 8.00 40.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.619
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
83
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 mL/kgBB 5 8.00 40.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Hepatotoksin CCl4
Dosis 2 mL/kgBB 5 8.00 40.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
84
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 5 3.00 15.00
Kontrol Positif Curliv® Dosis
4,05 mL/kgBB + CCl4 2
mL/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
85
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 5 4.80 24.00
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
5 6.20 31.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 9.000
Wilcoxon W 24.000
Z -.736
Asymp. Sig. (2-tailed) .462
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .548a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 5 3.00 15.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
86
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.619
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 5 3.00 15.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
87
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Negatif Olive Oil
Dosis 2 mL/kgBB 5 3.00 15.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Positif Curliv® Dosis
4,05 mL/kgBB 5 8.00 40.00
Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
88
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Positif Curliv® Dosis
4,05 mL/kgBB + CCl4 2
mL/kgBB
5 8.00 40.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.619
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
89
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Positif Curliv® Dosis
4,05 mL/kgBB + CCl4 2
mL/kgBB
5 8.00 40.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Positif Curliv® Dosis
4,05 mL/kgBB + CCl4 2
mL/kgBB
5 8.00 40.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
90
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
5 3.00 15.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.619
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
91
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
5 3.00 15.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB+
CCl4 2 mL/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol Dekok Biji P.
americana Dosis 1142,86
mg/kgBB
5 3.00 15.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
92
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.611
Asymp. Sig. (2-tailed) .009
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.40 17.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 7.60 38.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 2.000
Wilcoxon W 17.000
Z -2.200
Asymp. Sig. (2-tailed) .028
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .032a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
93
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Dekok Biji P. americana
Dosis 360,71 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 6.60 33.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 4.40 22.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 7.000
Wilcoxon W 22.000
Z -1.152
Asymp. Sig. (2-tailed) .249
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .310a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
Ranks
Kelompok_Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Dekok Biji P. americana
Dosis 642,06 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 7.80 39.00
Dekok Biji P. americana
Dosis 1142,86 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
5 3.20 16.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
94
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 1.000
Wilcoxon W 16.000
Z -2.402
Asymp. Sig. (2-tailed) .016
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable:
Kelompok_Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
95
Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST
perlakuan kontrol negatif olive oil dosis 2 mL/kgBB
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
Jam_0 5 41.6000 2.50998 40.00 46.00
Jam_24 5 47.6000 4.39318 43.00 54.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Jam_0 Jam_24
N 5 5
Normal Parametersa Mean 41.6000 47.6000
Std. Deviation 2.50998 4.39318
Most Extreme Differences Absolute .394 .242
Positive .394 .242
Negative -.262 -.148
Kolmogorov-Smirnov Z .882 .541
Asymp. Sig. (2-tailed) .418 .931
a. Test distribution is Normal.
Paired Samples Statistics
Mean N Std. Deviation Std. Error Mean
Pair 1 Jam_0 41.6000 5 2.50998 1.12250
Jam_24 47.6000 5 4.39318 1.96469
Paired Samples Correlations
N Correlation Sig.
Pair 1 Jam_0 & Jam_24 5 .866 .058
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
96
Paired Samples Test
Paired Differences
t df
Sig. (2-
tailed)
Mean
Std.
Deviation
Std. Error
Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair 1 Jam_0 -
Jam_24
-
6.00000 2.54951 1.14018 -9.16563 -2.83437 -5.262 4 .006
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
jam_0 5 50.2000 4.96991 43.00 54.00
jam_24 5 60.2000 5.26308 55.00 69.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
jam_0 jam_24
N 5 5
Normal Parametersa Mean 50.2000 60.2000
Std. Deviation 4.96991 5.26308
Most Extreme Differences Absolute .313 .315
Positive .222 .315
Negative -.313 -.162
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
97
Kolmogorov-Smirnov Z .701 .705
Asymp. Sig. (2-tailed) .710 .703
a. Test distribution is Normal.
Paired Samples Statistics
Mean N Std. Deviation Std. Error Mean
Pair 1 Jam_0 50.2000 5 4.96991 2.22261
Jam_24 60.2000 5 5.26308 2.35372
Paired Samples Correlations
N Correlation Sig.
Pair 1 Jam_0 & Jam_24 5 .543 .344
Paired Samples Test
Paired Differences
t df
Sig. (2-
tailed)
Mean
Std.
Deviation
Std. Error
Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair 1 Jam_0 -
Jam_24
-
1.00000
E1
4.89898 2.19089 -16.08289 -3.91711 -4.564 4 .010
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
98
Lampiran 12. Penetapan kadar air serbuk biji P. americana Mill.
Penetapan kadar air dilakukan menggunakan alat moisture balance dengan
metode Gravimetri. Pemanasan serbuk biji P. americana Mill. dilakukan pada
suhu 105oC selama 15 menit.
Tabel XIV. Hasil penetapan kadar air serbuk biji P. americana Mill.
Bobot Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Sebelum pemanasan 5,000 5,000 5,000
Sesudah pemanasan 4,624 4,636 4,630
Kadar air 7,52% 7,28% 7,40%
Rata-rata kadar air 7,4%
Kadar air = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑠𝑒𝑏𝑒𝑙𝑢𝑚 𝑝𝑒𝑚𝑎𝑛𝑎𝑠𝑎𝑛 −𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑠𝑒𝑠𝑢𝑑𝑎 ℎ 𝑝𝑒𝑚𝑎𝑛𝑎𝑠𝑎𝑛
𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑠𝑒𝑏𝑒𝑙𝑢𝑚 𝑝𝑒𝑚𝑎𝑛𝑎𝑠𝑎𝑛 𝑥 100%
1. Replikasi I 5,000 − 4,624
5,000 𝑥 100% = 7,52 %
2. Replikasi II 5,000 − 4,636
5,000 𝑥 100% = 7,28 %
3. Replikasi III 5,000 − 4,630
5,000 𝑥 100% = 7,40 %
Kadar air serbuk yang dipersyaratkan adalah kurang dari 10%. Kadar air
serbuk biji P. americana Mill. 7,40% sehingga memenuhi persyaratan.
Lampiran 13. Perhitungan penetapan peringkat dosis dekok biji
P. americana Mill. kelompok perlakuan
Dosis pada perlakuan ini adalah 4 g/70 kgBB manusia. Konversi manusia
(70 kg ke tikus 200 g) = 0,018.
Dosis untuk 200 g tikus = 0,018 x 4000 mg
= 72 mg/200 gBB tikus
Dosis untuk 1 g tikus = 0,36 mg/gBB
= 360 mg/kgBB
Kemudian dilakukan orientasi konsentrasi tertinggi dari dekok biji P.
americana Mill. untuk ditetapkan sebagai dosis tertinggi. Konsentrasi tertinggi
yang didapat yaitu 8 g/100 mL.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
99
Untuk perhitungan dosis tertinggi yaitu:
D = 𝐶 𝑥 𝑉
𝐵𝐵
= 8 g/ 100 mL x 5 mL : 350 g
= 1142,86 mg/kgBB tikus
Faktor pengali = 𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑡𝑖𝑛𝑔𝑔𝑖
𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑟𝑒𝑛𝑑𝑎 ℎ
= 1142,86 mg /kgBB
360 mg /kgBB
= 1,78
Kemudian dibuat peringkat dosis berikut ini:
1. Dosis I = 360,71 mg/kgBB tikus
2. Dosis II = 642,06 mg/kgBB tikus
3. Dosis III = 1142,86 mg/kgBB tikus
Lampiran 14. Perhitungan konversi dosis dekok biji P. americana dari tikus
ke manusia
Konversi dosis tikus 200 g ke manusia 70 kg = 56,0
1. Dosis I
360,71 mg/kgBB = 0,36071/1000 gBB = 0,0721 g/200 gBB
0,0721 g/200 gBB x 56,0 = 4,04 g/70 kgBB manusia
2. Dosis II
642,06 mg/kgBB = 0,64206 g/1000 gBB = 0,1284 g/200 gBB
0,1284 g/200 gBB x 56,0 = 7,19 g/70 kgBB manusia
3. Dosis III
1142,86 mg/kgBB = 1,14286 g/1000 gBB = 0,2286 g/200 gBB
0,2286 g/200 gBB x 56,0 = 12,80 g/70 kgBB manusia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
100
Lampiran 15. Perhitungan dosis Curliv®
Dosis Curliv® untuk manusia 70 kg = 45 mL
Konversi dosis manusia 70 kg ke tikus 200 g = 0,018
Dosis untuk tikus 200 g = 0,018 x 45 mL
= 0,81 mL/200 gBB
= 4,05 mL/kgBB
Lampiran 16. Perhitungan efek hepatoprotektif
Rumus perhitungan efek hepatoprotektif:
𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝐶𝑙4 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑜𝑙𝑖𝑣𝑒 𝑜𝑖𝑙 − (𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑝𝑒𝑟𝑙𝑎𝑘𝑢𝑎𝑛 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑜𝑙𝑖𝑣𝑒 𝑜𝑖𝑙)
𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝐶𝑙4 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑜𝑙𝑖𝑣𝑒 𝑜𝑖𝑙 𝑥 100%
Maka perhitungan efek hepatoprotektif ALT serum sebagai berikut:
1. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71 mg/kgBB
(po) + induksi karbon tetraklorida (ip):
183,2 − 47,6 − (96,0 − 47,6)
(183,2 − 47,6) 𝑥 100% = 64,3 %
2. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB
(po) + induksi karbon tetraklorida (ip):
183,2 − 47,6 − (87,0 − 47,6)
(183,2 − 47,6) 𝑥 100% = 70,9 %
3. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB
(po) + induksi karbon tetraklorida (ip):
183,2 − 47,6 − (50,8 − 47,6)
(183,2 − 47,6) 𝑥 100% = 97,6 %
Rumus perhitungan daya hepatoprotektif:
𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝐶𝑙4 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝑢𝑟𝑙𝑖𝑣® − (𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝑝𝑒𝑟𝑙𝑎𝑘𝑢𝑎𝑛 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝑢𝑟𝑙𝑖𝑣®)
𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝐶𝑙4 − 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐴𝐿𝑇 𝐶𝑢𝑟𝑙𝑖𝑣® 𝑥 100%
Maka perhitungan efek hepatoprotektif ALT serum sebagai berikut:
1. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 360,71 mg/kgBB
(po) + induksi karbon tetraklorida (ip):
183,2 − 105,4 − (96,0 − 105,4)
(183,2 − 105,4) 𝑥 100% = 112,1 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
101
2. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 642,06 mg/kgBB
(po) + induksi karbon tetraklorida (ip):
183,2 − 105,4 − (87,0 − 105,4)
(183,2 − 105,4) 𝑥 100% = 123,7 %
3. Kelompok perlakuan dekok biji P. americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB
(po) + induksi karbon tetraklorida (ip):
183,2 − 105,4 − (50,8 − 105,4)
(183,2 − 105,4) 𝑥 100% = 170,2 %
Tabel XV. Dosis, % efek hepatoprotektif, dan % daya hepatoprotektif masing-masing
kelompok perlakuan
Perlakuan
% efek
hepatoprotektif
% daya
hepatoprotektif
Kontrol hepatotoksin karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB 0 -
Kontrol negatif olive oil 2
mL/kgBB 100 -
Kontrol positif Curliv® 4,05
mL/kgBB + karbon teraklorida 2
mL/kgBB 57,4 100
DBPA 1142,86 mg/kgBB - -
DBPA 360,71 mg/kgBB +
karbon teraklorida 2 mL/kgBB 64,3 121,1
DBPA 642,06 mg/kgBB +
karbon teraklorida 2 mL/kgBB 70,9 123,7
DBPA 1142,86 mg/kgBB +
karbon teraklorida 2 mL/kgBB 97,6 170,2
Berdasarkan % hepatoprotektif dan daya hepatoprotektif yang terbesar,
maka dosis efektif dekok biji P. americana Mill. pada tikus jantan terinduksi
karbon tetraklorida 2 mL/kgBB adalah 1142,86 mg/kgBB.
Perhitungan konversi dosis efektif hepatoprotektif untuk manusia:
Angka konversi Tikus 200 g ke Manusia 70 kg = 56,0
Dosis untuk manusia = Dosis untuk tikus 200 g x (angka konversi ke
manusia)
Maka, 1142,86 mg/kgBB = 1142,86 mg/1000 gBB = 228,572 mg/200 gBB
228,572 mg/200 gBB x 56,0 = 12,80 g/70 kgBB manusia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
102
Lampiran 17. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas
Tabel XVI. Hasil validitas dan reliabilitas ALT
Dilihat dari serum kontrol (26,2-41,8 U/l)
x (U/l) x x - x ( x - x )2
30
30,6
-0,6 0,36
31 0,4 0,16
31 0,4 0,16
31 0,4 0,16
30 -0,6 0,36
Σ 1,2
SD = Σ ( x − x ) 2
(𝑛−1)
= 1,2
4
= 0,5
Range = x ± SD
= 30,6 ± 0,5
= 30,1 – 31,1
CV = 𝑆𝐷
x 𝑥 100%
= 0,5
30,6 𝑥 100%
= 1,6 %
Syarat CV yang baik
≤ 2%.
Tabel XVII. Hasil validitas dan reliabilitas AST
Dilihat dari serum kontrol (35,4-56,6 U/l)
x (U/l) x x - x ( x - x )2
39
38,8
0,2 0,04
39 0,2 0,04
39 0,2 0,04
38 0,8 0,16
39 0,2 0,04
Σ 0,32
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
103
SD = Σ ( x − x ) 2
(𝑛−1)
= 0,32
4
= 0,3
Range = x ± SD
= 38,8 ± 0,3
= 38,5 – 39,1
CV = 𝑆𝐷
x 𝑥 100%
= 0,3
38,8 𝑥 100%
= 0,8 %
Syarat CV yang baik
≤ 2%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
104
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif Jangka
Panjang Dekok Biji Persea americana Mill. Terhadap
Aktivitas ALT-AST Serum Pada Tikus Terinduksi
Karbon Tetraklorida” memiliki nama lengkap Ike
Kumalasari A. Penulis lahir di Sleman pada tanggal 27
November 1992, merupakan putri pertama dari dua bersaudara dalam keluarga
pasangan Paulus Suhartono dan Yustina Widiyati. Penulis mengawali masa
pendidikannya di TK Kanisius Klepu Sleman (1997-1998) kemudian melanjukan
pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD Negeri Sejati Sleman (1998-2004).
Pendidikan Sekolah Menengah Pertama ditempuh oleh penulis di SMP Pangudi
Luhur Moyudan Sleman (2004-2007), kemudian melanjutkan pendidikan di SMA
Pangudi Luhur Sedayu Bantul (2007-2010). Penulis kemudian melanjutkan
pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
pada tahun 2010. Semasa menempuh kuliah, penulis aktif dalam berbagai
kepanitiaan. Penulis pernah menjadi peserta Kampanye Informasi Obat Ismafarsi
(2011), volunteer Hari Anti Tembakau (2011), anggota divisi konsumsi panitia
Komisi Pemilihan Umum Fakultas Farmasi (2013). Penulis pernah menjadi
asisten praktikum Botani Farmasi (2011) dan Farmakologi-Toksikologi (2013).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI