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Produção de exopolissacarídeos por um Produção de exopolissacarídeos por um isolado fúngico do gênero isolado fúngico do gênero Pleurotus Pleurotus Clareana G. Ramos( 1 ), Cristhian F. Dias( 1 ), Gustavo N. Monteiro( 1 *) , Jairo L.Rodrigues( 1 ), Cleide A. Bomfeti( 1 ) 1 Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, ICET– Campus do Mucuri Teófilo Otoni - MG INTRODUÇÃO A crescente aplicação de processos de biorremediação através de microrganismos, envolve grande interesse econômico-social em solucionar ou minimizar problemas de poluição ambiental (DIAS, 2000). De acordo com Silva (2006), os expolissacarídeos constituem grande parte da biomassa fúngica e tem a capacidade de aderir enzimas na capa extracelular que forma ao redor do micélio fúngico, justificando o uso do EPS para produção e utilização em processos de biorremediação. OBJETIVOS • Determinar as melhores condições de tempo de cultivo em meio líquido de um isolado de fungo Pleurotus, através da determinação da produção de exopolissacarídeos. METODOLOGIA • Cultivado em meio sólido BDA contendo ampicilina [50 µg/mL]. • Inoculou-se 3 discos de 1 cm de diâmetro do micélio em 5 frascos de Erlenmeyers (125 mL) contendo 25 mL do meio mínimo líquido descrito por Pontecorvo (1953). • Incubado em estufa estática a 28ºC. • Foi avaliado aos 6, 9, 12, 15 e 18 dias de cultivo. • O meio de cultivo foi homogeneizado com um bastão de vidro e centrifugado a 5000 rpm por 15 min a 4ºC. Após centrifugação o sobrenadante foi transferido para um frasco de vidro (NAIAL, 1976). Na determinação de EPS totais, foi utilizada uma proporção 1:3 (sobrenadante/etanol) e refrigerado por aproximadamente 24 horas. •Após nova centrifugação, o precipitado foi desidratado a 60ºC e mensurado em miligramas após a obtenção da massa constante (NAIAL, 1976). RESULTADOS E DISCUSSÃO Após a análise do experimento, foi observada a curva de produção de exopolissacarídeos durante 18 dias de avaliação. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS DIAS, A. E. X. O. Biorremediação de áreas afetadas por resíduos sólidos tóxicos. In: SISINNO, C.L.S.; OLIVEIRA, R.M. (Org.) Resíduos Sólidos, Ambiente e Saúde: uma visão multidisciplinar. Rio de Janeiro: Editora Fiocruz, 142 p, 2000. NAIAL – Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. Métodos químicos e físicos para análise de alimentos. São Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 1020 p, 1976. MAZIERO, R.; CAVAZZONI, V.; BONONI, V. L. R. Screening of Basidiomycetes for the production of exopolysaccharide and biomass in submerged culture. Revista de Microbiologia, São Paulo, v. 30, p. 77-84, 1999. PONTECORVO, G. et al. The genetics of Aspergillus nidulans. Advances in Genetics, San Diego, v. 5, p. 141-238, 1953. SILVA, R. R.; COELHO, G. D. Fungos principais grupos e aplicações biotecnológica. São Paulo: Instituto de Botânica, 2006. . . • A síntese de EPS ocorreu de forma crescente até o 18º dia. • Não foi possível determinar a estabilidade ou declínio da produção de EPS, sendo necessário um aumento no período de avaliação. • O resultado obtido neste trabalho condiz com estudos relatados por Maziero, Cavazzoni e Bononi (1999), que apontam que várias espécies de fungos basidiomicetos produzem maior quantidade de exopolissacarídeos após 14 dias de cultivo. CONCLUSÃO • O isolado CCB001 apresentou uma taxa crescente de produção de EPS até o 18º dia , portanto pode ser utilizado para continuidades em estudos de biorremediação. Figura 1. Poluição do Rio Todos os Santos – Teófilo Otoni /MG . Fonte: Google Imagens Gráfico 1: Produção de EPS (mg/mL) pelo isolado de Pleurotus CCB001. Agradecimentos

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  • Produo de exopolissacardeos por umisolado fngico do gnero Pleurotus

    Clareana G. Ramos(1), Cristhian F. Dias(1), Gustavo N. Monteiro(1*), Jairo L.Rodrigues(1), Cleide A. Bomfeti(1)

    1 Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, ICET Campus do MucuriTefilo Otoni - MGINTRODUO

    A crescente aplicao de processos de biorremediao atravs de microrganismos, envolve grande interesse econmico-social em solucionar ou minimizar problemas de poluio ambiental (DIAS, 2000).

    De acordo com Silva (2006), os expolissacardeos constituem grande parte da biomassa fngica e tem a capacidade de aderir enzimas na capa extracelular que forma ao redor do miclio fngico, justificando o uso do EPS para produo e utilizao em processos de biorremediao.

    OBJETIVOS

    Determinar as melhores condies de tempo de cultivo em meio lquido de um isolado de fungo Pleurotus, atravs da determinao da produo de exopolissacardeos.

    METODOLOGIA

    Cultivado em meio slido BDA contendo ampicilina [50 g/mL].

    Inoculou-se 3 discos de 1 cm de dimetro do miclio em 5 frascos de Erlenmeyers (125 mL) contendo 25 mL do meio mnimo lquido descrito por Pontecorvo (1953).

    Incubado em estufa esttica a 28C.

    Foi avaliado aos 6, 9, 12, 15 e 18 dias de cultivo.

    O meio de cultivo foi homogeneizado com um basto de vidro e centrifugado a 5000 rpm por 15 min a 4C. Aps centrifugao o sobrenadante foi transferido para um frasco de vidro (NAIAL, 1976).

    Na determinao de EPS totais, foi utilizada uma proporo 1:3 (sobrenadante/etanol) e refrigerado por aproximadamente 24 horas.

    Aps nova centrifugao, o precipitado foi desidratado a 60C e mensurado em miligramas aps a obteno da massa constante (NAIAL, 1976). RESULTADOS E DISCUSSO

    Aps a anlise do experimento, foi observada a curva de produo de exopolissacardeos durante 18 dias de avaliao.REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

    DIAS, A. E. X. O. Biorremediao de reas afetadas por resduos slidos txicos. In: SISINNO, C.L.S.; OLIVEIRA, R.M. (Org.) Resduos Slidos, Ambiente e Sade: uma viso multidisciplinar. Rio de Janeiro: Editora Fiocruz, 142 p, 2000.NAIAL Normas Analticas do Instituto Adolfo Lutz. Mtodos qumicos e fsicos para anlise de alimentos. So Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 1020 p, 1976.MAZIERO, R.; CAVAZZONI, V.; BONONI, V. L. R. Screening of Basidiomycetes for the production of exopolysaccharide and biomass in submerged culture. Revista de Microbiologia, So Paulo, v. 30, p. 77-84, 1999.PONTECORVO, G. et al. The genetics of Aspergillus nidulans. Advances in Genetics, San Diego, v. 5, p. 141-238, 1953.SILVA, R. R.; COELHO, G. D. Fungos principais grupos e aplicaes biotecnolgica. So Paulo: Instituto de Botnica, 2006. .. A sntese de EPS ocorreu de forma crescente at o 18 dia.

    No foi possvel determinar a estabilidade ou declnio da produo de EPS, sendo necessrio um aumento no perodo de avaliao.

    O resultado obtido neste trabalho condiz com estudos relatados por Maziero, Cavazzoni e Bononi (1999), que apontam que vrias espcies de fungos basidiomicetos produzem maior quantidade de exopolissacardeos aps 14 dias de cultivo.CONCLUSO

    O isolado CCB001 apresentou uma taxa crescente de produo de EPS at o 18 dia , portanto pode ser utilizado para continuidades em estudos de biorremediao.Figura 1. Poluio do Rio Todos os Santos Tefilo Otoni /MG . Fonte: Google Imagens Grfico 1: Produo de EPS (mg/mL) pelo isolado de Pleurotus CCB001.Agradecimentos