SEMINOGRAMA 20 mayo 2015
FUNDAMENTO: el seminograma est indicado para valorar la
capacidad reproductora de un varn. Tambin cundo se realice un
estudio postvasectoma, con la intencin de comprobar si los
espermatozoides han desaparecido totalmente del eyaculado.
OBJETIVO: observar las caractersticas que determinan la calidad
seminal
MATERIALES: Probeta o tubo de ensayo graduado. Papel indicador
de pH Portaobjetos y cubreobjetos de 22 x 22. Pipetas Pasteur
Varilla de vidrio. Cmara de Neubauer. Bao termosttico Microscopio
con objetivo de inmersin x100 Estufa Cmara hmeda.
REACTIVOS: Eosina azulada al 1% en agua destilada. Nigrosina al
10% en agua destilada o SSF Formol al 40% Bicarbonato sdico.
Colorante panptico rpido o Giemsa. Metanol.
MUESTRA Semen obtenido por masturbacin, despus de 3-4 das de
abstinencia sexual. Debe recogerse en un bote de boca ancha, limpio
y seco (el preservativo no es vlido como mtodo de recogida). La
muestra debe mantenerse a temperatura cercana a los 37 C y
analizarse lo antes posible. El semen es potencialmente infeccioso,
por lo que deben mantenerse con l las mismas normas de seguridad
que con la sangre.
PROCEDIMIENTO:
1. EXAMEN FSICO: Color: por observacin. (Normal. Blanquecino
opalescente)
Coagulacin y Licuefaccin: por observacin, manteniendo la muestra
en el bao a 37C. La coagulacin se produce a los 30 segundos de la
emisin de la muestra, por la accin de una enzima sobre un
precursor, similar al fibringeno, que es transformado en fibrina.
Posteriormente se degrada la fibrina por accin de enzimas
prostticas. La licuefaccin debe ser completa a los 20-30 minutos
posteriores a la emisin, a una temperatura de 37 C. Se observa
colocando el tubo con la muestra en un bao Mara a 37 C y
controlando el tiempo.
Volumen: en probeta graduada o tubo de ensayo graduado, ambos
precalentados a 37C. (Normal 2-6 ml)
Viscosidad y Filancia: La viscosidad se prueba con pipeta
pasteur, viendo cmo gotea la muestra. La filancia se prueba
introduciendo la varilla en la muestra e impregnndola con ella, y
retirar lentamente. La unin entre la varilla y la muestra puede ser
menor a 1 cm o llegar hasta 10 cm, en funcin de lo filante o
viscosa que sea la muestra. (Normal 2 cm)
pH: con tiras de papel indicador, dejando caer una gota sobre
ellas, esperando unos segundos y leyendo el color en comparacin con
la carta de colores del envase. En el lquido seminal se encuentran
la secrecin acida prosttica y la secrecin alcalina de las vesculas
seminales Se debe determinar lo antes posible, ya que con el paso
del tiempo la muestra se alcaliniza.. (Normal entre 7-8,1).
2. EXAMEN MICROSCPICO:
Examen microscpico directo: poner una gota de lquido seminal
homogeneizado entre porta y cubreobjetos. Observar la presencia o
ausencia de espermatozoides y clulas espermticas, su concentracin
aproximada, movilidad, formas anormales, aglutinacin de los
espermatozoides, presencia de cristales de fosfato de espermina (en
forma de agujas), espermiofagia (fagocitosis de los espermatozoides
por leucocitos), presencia de leucocitos y presencia de hemates.
Anotar los datos de la observacin.
Movilidad: dejar caer una gota de semen sobre un porta
precalentado a 37C, colocar el cubre procurando que no se formen
burbujas y observar al microscopio con objetivo seco de x40. Sellar
los bordes del cubre con vaselina para evitar la desecacin.
Observar varios campos con el objetivo de 40x y contar al menos 200
espermatozoides. Enfocar el fondo del campo microscpico, ya que
pueden encontrarse formas inmviles.
Informe: nmero de espermatozoides con movimiento rpido y
rectilneo, nmero de espermatozoides con movimiento progresivo pero
menos rectilneo, nmero de espermatozoides con movimiento sin
progresin, nmero de espermatozoides inmviles.
Vitalidad: mezclar 50 L de semen con 50 L de eosina azulada al
1%, esperar 20-30 segundos y aadir 100 L de nigrosina al 10%.
Agitar y realizar una extensin sobre portaobjetos. Tras el secado
de la preparacin, observar al microscopio con objetivo de inmersin
de x100. Las forma muertas se teirn, no en cambio las formas vivas.
(Normal menos de un 40% de formas teidas)
Recuento: diluimos el semen al 1/21 en la solucin de
Macomber-Saunders (5g de bicarbonato sdico, 1 mL de formol al 40% y
agua destilada hasta 100 mL); para lograr la dilucion, ponemos 50 L
de semen con 1 mL de solucin. Montamos y cargamos la cmara de
Neubauer y, tras 2 minutos de reposo en cmara hmeda, la ponemos al
microscopio y contamos los 16 cuadraditos de una de las
esquinas.
Morfologa: realizamos una extensin sobre portaobjetos con una
gota de semen y dejamos que seque perfectamente. Posteriormente
fijamos con metanol y teimos con panptico rpido. Tras secar,
pasamos la preparacin al microscopio y observamos con el objetivo
de inmersin 200 espermatozoides. (Normal ndice de malformacin
inferior al 30 %)
