06časopislaboratórnejmedicínyFEBRUÁR/2016

Slovenský TRISOMY test zaujal vo svete

Zahraničné inšpirácie v liečbe kmeňovými

bunkami

Reprodukčná imunológia už aj v Košiciach

ZOZNAM METODICKÝCH LISTOV

ED

ITO

RIÁ

L

OB

SAH

Vážené dámy a páni,prednedávnom sme vstúpili do nového roka a mnohí z nás sa pýtajú: aký bude rok 2016? Odpoveď na túto otázku nie je vôbec jednoduchá. Situácia okolo nás je v posled-nom období pomerne napätá, každý deň sledujeme utečeneckú krízu v  Európe s  jej následkami aj na medziľudských vzťahoch. V zdravotníctve a školstve na Slovensku nie je situácia omnoho lepšia, nespokojné nie sú len zdravotné sestry a učitelia, ale aj ostatní zdravotnícki pracovníci a  v  neposlednom rade aj samotní pacienti.

Uplynulo viac ako 26 rokov od Nežnej re-volúcie a  predstavy a  očakávania o  reforme zdravotníctva ostali pre mnohých nenaplnené. Fi-nancovanie v zdravotníctve nie je celkom prehľadné a  podchvíľou sa dozvedáme o  rôznych škan-dáloch, najmä v  súvislosti s  ve-rejným obstarávaním. Stačí, ak sa porovnáme so susedným Čes-kom, s  ktorým sme viac ako 70 rokov žili v spoločnom štáte. Ani tam nie je situácia ideálna, ale stav nemocníc sa nedá s našimi, bohu-žiaľ, porovnať. Za 25 rokov akoby sa systematickejšie venovali prob-lémom v  zdravotníctve a  snažili sa dostať, najmä odborne, na úro-veň vyspelých európskych krajín. O tom sa presviedčame na konfe-renciách a neraz im môžeme závidieť...

Na druhej strane aj my sa máme čím po-chváliť. Aj na Slovensku máme pracoviská, ktoré sa snažia držať krok so svetovou špič-kou, a  keď sa dozviem, že niektorá klinika alebo oddelenie zaviedli modernú metódu alebo postup, napĺňa ma to hrdosťou. Napo-sledy som ten pocit mal, keď práve Medirex uviedol do života neinvazívny prenatálny skríningový test, tzv. TRISOMY test. Toto jedinečné laboratórne zariadenie sa zaradi-

lo medzi 6 laboratórií na celom svete, ktoré vykonávajú túto diagnostiku, pričom softvér je vlastný, slovenský. V prenatálnej genetic-kej diagnostike sme nielen nastúpili do roz-behnutého vlaku, uháňajúceho ohromnou rýchlosťou, ale sme v prvej triede! To sa ne-stáva často, aby sa malá stredoeurópska kra-

jina zaradila medzi svetových lídrov. Nein-vazívne diagnostické metódy si čoraz viac získavajú priestor v  medicíne, pôrodníctvo nevynímajúc.

Keď sa zamýšľam, prečo to niekde ide, tak mi vychádza, že aj na Slovensku máme schopných ľudí, ktorí sledujú dianie vo sve-te, majú ambície a sú iniciatívni. Čo je však najdôležitejšie, túto iniciatívu podporuje aj manažment zdravotníckych zariadení, čím dokazuje známe príslovie: „Kde je vôľa, tam

je i cesta.“ Je to cesta, ktorá je dláždená efek-tivitou a  odhodlaním priniesť niečo nové a kvalitné pre pacientov. Nemusí to byť vždy jedinečná myšlienka, niekedy stačí prevziať, čo je vo svete odskúšané, a aplikovať to na domáce pomery. Ani to nie je ľahká cesta, všetci poznáme, ako ťažko niektorí ľudia prijímajú nové postupy, ako ťažko menia zaužívané stereotypy či správanie sa voči pacientom s  odôvodnením: „... takto sa to robilo vždy, načo to meniť?“ Pritom si ne-uvedomujú, že spadajú do šedého prieme-ru a v porovnaní s vyspelými krajinami do podpriemeru. Bohužiaľ, to neplatí len pre zdravotníctvo. Mám pocit, akoby sa u  nás

vývoj spomaľoval. Začíname byť za-hľadení do seba, mysliac si, že to, čo robíme, úplne postačuje a je správ-ne. Na druhej strane veľa ľudí je neprimerane kritických k práci os-tatných, na seba však majú odlišný meter. Ak niekto chce zmenu, treba začať od seba. Pozrieť sa na vlastnú prácu, začať si všímať potreby ostat-ných a  v  neposlednom rade začať sa konfrontovať (pokiaľ to ešte ide) s  vyspelým svetom. Predsa takto vznikli úspešné podniky nielen u  nás. Keď manažmenty pochopili tento jednoduchý princíp, presta-li sa spoliehať na pomoc zvonku (nadriadených orgánov) a  začali sa spoliehať viac na seba, svojich spolupracovníkov, ktorých správne

motivovali. Nielen finančne, aj keď aj to je veľmi potrebné. Je dokázané, že samotné fi-nancie k pokroku nevedú, k  tomu sa musí u ľudí vypestovať aj osobná hrdosť na svoju prácu, svoje pracovisko, svoju spoločnosť, kde sú zamestnaní. Len tak možno dosiah-nuť pocit naplnenia a realizovať svoje pred-stavy a ciele. Mojím želaním na rok 2016 je, aby čoraz viac zdravotníckych zariadení išlo touto ambicióznou cestou. Rovnako Vám všetkým prajem veľa zdravia, spokojných klientov a pacientov.

Genetika

Somatická mutácia v géne MYD88 L265PSyndróm fragilného chromozómu X (FRAXA)Calreticulin (CALR)

Imunológia

T-SPOT.TB

Biochémia

Žlčové kyselinyHolotranskobalamín

Hematológia

Antigén fibrinogénu (Ag – Fbg)anti-Xa

Imunohistochémia lymfoproliferatívnych ochorení

23 - 25

Aktuálne metodické listy

Indikačné obmedzenia ZP – 2. časť, genetika

Akútna intermitentnáporfýria

Cystický nefrómobličky

15 - 227 - 9

28 - 29

26 - 27

Inzercia_210x140_Sprievodca tehotenstvom.indd 2 21/01/16 15:08

Aj na Slovensku mámepracoviská, ktoré sa snažia

držať krok so svetovoušpičkou, a keď sa dozviem,

že niektorá klinika alebooddelenie zaviedli modernú

metódu alebo postup,napĺňa ma to hrdosťou.

MUDr. Vladimír Cupaník, CSc.Gynekologicko-pôrodnícka nemocnica GPN s. r. o.

3

Kazuistiky:

Spoločnosť PHADIA, výrobca a dodávateľ biočipu ISAC, koncom roka 2015 po viac ako roku obnovil výrobu a  distribúciu biočipov ISAC. Obnovenie výroby na-sledovalo po medzinárodnej štúdii, ktorá potvrdila odstránenie všetkých problé-mov a  odporučila jeho opätovné použitie v  klinickej praxi. Zloženie biočipu je ne-zmenené, nachádzajú sa na ňom také isté

komponenty ako pred pozastavením vý-roby. Zástupcovia firmy nás uistili, že vý-roba a distribúcia beží bez problémov a sú pripravení plniť všetky naše objednávky, o čom sme sa aj presvedčili. Vyšetrenie špe-cifických IgE protilátok prostredníctvom biočipu ISAC v  Medirexe už realizujeme a môžeme potvrdiť bezproblémovú a skorú diagnostiku.

Radi by sme vás informovali, že spoloč-nosť Medirex, a. s., člen skupiny MEDIREX GROUP, od 1. 2. 2016 rozširuje poskytovanie zdravotnej starostlivosti o medicínsky odbor klinickej mikrobiológie. Prosíme vás, aby ste v súvislosti s využívaním našich rozširujúcich sa služieb dodržiavali predanalytické požia-davky vzťahujúce sa na sérologicko-virolo-gické mikrobiologické vyšetrenia. Skúmavky s odobratým biologickým materiálom spolu s  vyplnenými žiadankami sérologicko-viro-logických vyšetrení posielajte prostredníc-tvom našich vodičov v  rámci pravidelných zvozov vzoriek v samostatnom transportnom vrecúšku, určenom na mikrobiologické labo-ratórne vyšetrenia.

Neustále sa snažíme zlepšovať úroveň la-boratórnej diagnostiky na Slovensku a po-núknuť vám ešte lepšie a  komplexnejšie služby:• včasné výsledky – vstup do klientskej

zóny (www.laboratornadiagnostika.sk) slúžiacej na on-line získavanie výsled-kov,

• pravidelný zber a  zvoz vzoriek biolo-gického materiálu podľa dohodnutého harmonogramu a  distribúciu výsledkov z laboratória,

• možnosť prepojenia informačných systé-mov eAmbulancia,

• sprievodné listy (žiadanky) k  vyšetre-niam,

• call centrum 0800 00 30 30, pričom na uvedené telefónne číslo môžete volať bezplatne,

• neustály prísun aktuálnych informácií vďaka časopisu laboratórnej medicíny labMED, ktorý so sebou prináša aj me-todické listy nových, nami zavádzaných vyšetrení.

V prípade potreby sa neváhajte obrátiť na naše bezplatné call centrum 0800 00 30 30, callcentrum@medirexgroup.sk, alebo na odborné medicínske reprezentantky prostredníctvom e-mailuobchod@medirexgroup.sk.

RO

ZHO

VOR

Už viac ako päť rokov sa oddelenie klinickej imunológie a alergológie v Medirexe v Bratislave zaoberá laboratórnou diagnostikou reprodukčnej imunológie. Od februára tohto roku je diagnostika porúch plodnosti dostupná aj pre lekárov a pacientov na východe Slovenska.

O  tom, že laboratórium zohráva dôležitú úlohu v  diagnostike imunologických príčin infertilít, sa rozprávame s RNDr. Elenou Tibenskou, PhD., ktorá je manažérkou klinickej imunológie a alergolórie pre západné Slovensko a členkou viacerých odborných spoločností. V laboratóriách Medirex zaviedla reprodukčnú imu-nológiu.

Čo Vás priviedlo k reprodukčnej imunológii? Bola to snaha pomôcť párom s poruchami plodnosti? Áno, je to tak. V súčasnej dobe počet týchto párov celosvetovo na-rastá. Príčiny sú rôzne. Mnohé sú známe, stále je však aj mnoho neidentifikovaných. Jednou z  nich môže byť aj porucha imunit-ného systému, resp. niektorej z jeho súčastí – uvádza sa, že podiel imunologických faktorov z celkového počtu infertilít „neznámej“ etiológie predstavuje asi 20 %. Niektoré zdroje uvádzajú aj vyššie čísla. Do dnešného dňa bolo popísaných už niekoľko desiatok rôz-nych imunopatologických stavov, ktorých dôsledkom môže byť neschopnosť počať alebo donosiť zdravé dieťa. Ich diagnostika má zásadný význam, keďže liečba býva podľa literárnych údajov úspešná až v 50 – 60 %.

Úspešnosť liečby, ktorú uvádzate, je pomerne vysoká. Stačia na diagnostiku imunologických faktorov porúch neplodnosti iba laboratórne výsledky? Reprodukčnú imunológiu nie je možné robiť len na úrovni la-boratórnej diagnostiky. Musí byť zabezpečená úzka spolupráca s  reprodukčným imunológom, ktorý sa tejto náročnej proble-matike venuje. Teší ma, že aj v tomto smere sa situácia na Slo-vensku zlepšuje a  máme niekoľko skvelých spolupracujúcich imunológov.

Problematika reprodukčnej imunológie je na Slovensku ešte len v rozvoji. Spolupracujete aj so zahraničnými odborníkmi? Naše pracovisko aktívne spolupracuje s MUDr. Karin Malíčkovou a jej pracoviskom z Prahy, ktorú môžeme v súčasnosti považovať za líderku reprodukčnej imunológie v Čechách. Na pražskom pra-covisku sme sa boli zaúčať do niektorých metodík a dodnes, keď potrebujeme poradiť, obraciame sa na kolegov s otázkami. Aj vďa-ka tejto spolupráci sa nám podarilo viacerým párom dopomôcť

k vytúženému dieťatku. Spomínam si na jeden z prvých prípadov, keď sa nám u ženy, ktorej sa nedarilo niekoľko rokov otehotnieť, podarilo diagnostikovať celiakiu. Po pol roku na bezlepkovej diéte, bez akejkoľvek inej liečby, spontánne otehotnela a dnes sa teší už z trojročného dieťatka. Ďalšie prípady už neboli takéto jednodu-ché. Keď sa nám v laboratóriu podarí identifikovať niektorú z prí-čin, nasleduje mnohokrát dlhotrvajúca imunologická liečba, pod dohľadom reprodukčného imunológa, na konci ktorej však môže čakať vytúžené dieťatko.

Od februára už poskytuje laboratórnu diagnostiku porúch plodnosti aj košické pracovisko Medirexu. Rozšírili ste diagnostiku o rovnaký rozsah vyšetrení ako v Bratislave? Rozsah diagnostiky je v Košiciach komplexný, rovnako ako v na-šom bratislavskom laboratóriu. Dôležité je, že aj na východe už máme spolupracujúcich imunológov. Preto verím, že sa nám aj tu podarí reprodukčnú imunológiu úspešne rozvinúť.

Aké máte ďalšie plány? Naším cieľom je problematiku laboratórnej reprodukčnej imuno-lógie neustále rozširovať a dopĺňať o nové testy v súlade s najnovší-mi vedeckými poznatkami.V rozvoji nám veľkou mierou pomôže aj účasť nášho pracovis-ka v Pracovnej skupine pre reprodukčnú imunológiu, na ktorej činnosti sa aktívne zúčastňujeme. Pracovná skupina vznik-la v  máji 2015 na XXI. sympóziu reprodukčnej imunológie a  biológie v  Třešti. Pracuje pod záštitou viacerých odborných spoločností. Jej úlohou bude okrem iného vypracovať spoloč-né diagnostické a terapeutické guideliny, odporúčať do labora-tórnej a  klinickej praxe nové postupy, ako aj zabezpečiť spo-luprácu klinických a  teoretických imunológov a  rozvíjať užšiu česko-slovenskú spoluprácu.

Kontakt:Bratislava: RNDr. Elena Tibenská, PhD.,+421 2 208 29 317, elena.tibenska@medirex.sk

Košice: RNDr. Marcela Popovňáková,+421 55 28 29 617, marcela.popovnakova@medirex.sk

Aj v laboratóriu môžeme pomôcť párom s poruchami plodnosti

5

DO

BR

É V

ED

IEŤ

Výroba biočipov ISACobnovená

Poskytujeme už aj sérologicko-virologickélaboratórne vyšetrenia

4

7

6

7

DE

JU

RE

PrinášameViac o indikačných obmedzeniach zdravotných poisťovní pre laboratórne výkony – 2. časť, genetikaOd roku 2011 zdravotné poisťovne postupne zaviedli indikačné obmedzenia, ktoré sú zamerané na odbornosti lekárov, na frekvenciu jednotlivých vyšetrení, ako i diagnóz, pri ktorých môžu byť dané vyšetrenia požadované. Prinášame vám prehľad indikačných obmedze-ní zdravotných poisťovní pri vykazovaní genetických laboratórnych vyšetrení.

DO

BR

É V

ED

IEŤ

Slovenský TRISOMY testzaujal vo sveteNeinvazívny prenatálny test na vylúčenie Downovho syndrómu a ďalších trizómií plodu z krvi matky, ktorý sme v Medirexe zaviedli v lete minulého roku, sa v praxi stretol s veľkým úspechom. Počas šiestich mesiacov ste ho svojim pacientkam odporučili už viac ako 1000-krát. Tešíme sa z pozitívnej odozvy aj z toho, že nám s TRISOMY testom tlmočíte dobré skúsenosti. Vďaka našej vzájomnej spolupráci sa TRISOMY test úspešne etabloval na Slovensku. Ale tu nekončíme. Od januára toto vyšetrenie zaviedli aj v susednej Českej republike miestne laboratóriá a pravdepodobne pôjde TRISOMY test ešte ďalej.

Z dielne slovenských vedcovTRISOMY test je úspechom slovenskej vedy, ktorý sa dá na Slovensku považovať za hotový unikát. Okrem Medirexu totiž dokáže neinvazívny prenatálny skríning reálne vyšetriť len 5 – 6 laboratórií vo sve-te. „Máme sa čím pochváliť. Aj na Sloven-sku máme pracoviská, ktoré sa snažia držať krok so svetovou špičkou, a keď sa dozviem, že niektorá klinika alebo oddelenie zaviedli modernú metódu alebo postup, napĺňa ma to hrdosťou. Naposledy som ten pocit mal, keď práve Medirex uviedol do života nein-vazívny prenatálny skríningový TRISOMY test,“ píše v  našom editoriáli riaditeľ Gy-nekologicko-pôrodníckej nemocnice Koch MUDr. Vladimír Cupaník, PhD.

Naše know-how využívajú v praxi aj české laboratóriáViac ako 1000 TRISOMY testov a zvyšu-júci sa dopyt po vyšetrení je dôvod, prečo TRISOMY test neostáva len na Slovensku.

„Vďaka kvalitne nastaveným procesom v la-boratóriu, rýchlemu vyhotoveniu výsledkov a  najnižšej cene na trhu sme v  Medirexe schopní pomáhať partnerským laboratóri-ám SPADIA LAB v Česku, aby aj oni mohli poskytovať toto jedinečné vyšetrenie. Pre budúce mamičky je to príležitosť prežiť po-kojné tehotenstvo bez hádaniek o zdraví ich budúceho potomka,“ vysvetľuje riaditeľ la-boratórnej divízie MEDIREX GROUP Ing. Jozef Gavlas, MSc.

Unikátne vyšetrenie sa teda postupne etab-luje aj v  Českej republike. „Koncom roka sme partnerom z Česka pomáhali s adaptá-ciou TRISOMY testu do ich lokálnych pod-mienok. U našich susedov však nekončíme, o  TRISOMY test je svetový záujem, a  to doslova. Dnes je však predčasné konkreti-zovať,“ hovorí MVDr. Juraj Kulčár, MBA, manažér pre strategické projekty a  rozvoj MEDIREX GROUP, ktorý TRISOMY test u nás aj v Česku koordinuje. „Prispôsobe-

nie tak špecifického testu do laboratória inej krajiny, so svojimi osobitosťami, lo-gistikou a  legislatívou, je náročný, niekoľ-komesačný proces. Nie je to jednoduché, ale je to výzva, ktorú sme sa u nás rozhodli prijať,“ dodáva riaditeľ laboratórnej divízie.

TRISOMY test dokáže spoľahlivo identifi-kovať Downov syndróm a  ďalšie trizómie plodu len z krvi matky. V prípade záujmu určí aj jeho pohlavie. Na vyšetrenie posta-čuje 10 ml krvi, ktorú v  ambulancii odo-berie zdravotná sestra. Vzorka následne putuje do Centrálneho laboratória Medirex v  Bratislave, ktoré zabezpečí jej analýzu a  vyhodnotenie výsledkov. Tie následne budúcej mamičke interpretuje ošetrujúci gynekológ alebo genetik, ktorý vyšetrenie indikoval. TRISOMY test nie je hradený z verejného zdravotného poistenia, posky-tuje sa na žiadosť pacientky a stojí 350 eur.

ZDRAVIE PLODU NIE JE HÁDANKAPríbeh vášho dieťatka môžete rozlúštiť už dnes

www.trisomytest.sk

SPOĽAHLIVO

BEZPEČNE

BEZBOLESTNE

SKORO

VYLÚČI

ODHALÍ

MINIMALIZUJE

URČÍ

s vysokou citlivosťou

bez rizika pre plod

z krvi matky

už od 11. týždňa tehotenstva*

prítomnosť trizómií chromozómov 21, 18, 13

falošne pozitívne výsledky biochemického skríningu

počet nutných amniocentéz

pohlavie plodu

TRISOMY test – spoľahlivý neinvazívny test na vylúčenie Downovho syndrómu a ďalších častých trizómií plodu z krvi matky

*V súlade s uznesením Etickej komisie MZ SR poskytuje laboratórium výsledok analýzy až po ukončenom 12. týždni tehotenstva.

→

Indikačné obmedzenia VšZP

Názov výkonu KódvýkonuIndikujúci

lekárOdbornosť laboratória

Určené prediagnózy

Frekvencia za **

deň

týžd

eň

mes

iac

štvr

ťrok

rok

1x z

a ži

vot

Laboratórna skríningová diagnostika HPV DNA 9505

009, 012, 019, 229 062

Z12.0; Z12.4; N87.0; N87.1; N87.2; N87.9; C53.0; C53.1; C53.8; C53.9; N76; N86; N88, D06

0 0 0 0 0 0

Detekcia mutácií v génoch NRAS (kodóny 12, 13, 59, 61, 117, 146) 9508a 019 062 C18*; C19; C20; C16; C78.5 0 0 0 0 0 0

HPV genotyp 9965a009, 012, 014, 018, 019, 229

062N87.0; N87.1; N87.2; N87.9; C53.8; C53.9; N34.3; D06; D37; N50.8

0 0 0 0 0 0

HPV– mRNA (expresia E6/E7) 9965 009, 019, 014, 229 062

D39.0; D39.1; D39.2; D39.7; D39.9; C53.0; C53.1; C53.8; C53.9; N87; D06; C01; C09; C10

0 0 0 0 0 0

Tabuľka č. 1: Poisťovňa VšZP – priamo hradené výkony od 1. 7. 2015

Indikačné obmedzenia Union zdravotnej poisťovne

Názov výkonu KódvýkonuUrčené pre

diagnózyIndikujúci

lekár

Frekvencia za **

deň

týžd

eň

mes

iac

štvr

ťrok

rok

1x z

a ži

vot

Detekcia HPV vírusu – DNA analýza (low risk, high risk typy)

9505 N87.0; N87.9; A63.0 009, 012, 229, 019 0 0 0 0 2 0

Detekcia HPV vírusu mRNA analýza (expresia E6/E7)

9965 N87.0; N87.9; D06.9; C53.0 009, 229, 019 0 0 0 0 1 0

HPV genotyp 9965a

D06.0; D06.1; 06.7; D06.9; D28.9; D39.0; D39.1; D39.2; D39.7; C53.0; C53.1; C53.8; C53.9; N87.0; N87.1; N87.2; N87.9; N88-N88.4; N88.8; N88.9

009, 229, 012, 019 0 0 0 0 1 0

Tabuľka č. 2: Union zdravotná poisťovňa – aktualizácia indikačných pravidiel od 1. 2. 2016

POZN.: Union zdravotná poisťovňa aktualizovala pravidlá vykazovania laboratórnych výkonov pre genetiku s účinnosťou od 1. 2. 2016, usmernenie je zverejnené na stránke www.union.sk.

8

9

Vyšetrenie karyotypu z periférnej krvi u jednéhoz partnerov pri infertilite 7230A N46*, N97* 062 0 0 0 0 0 1

Vyšetrenie delécií v AZF oblasti Y chromozómu (oblasti a/b/c) pri mužskej neplodnosti – fragmentačka 7230B N46* 062 0 0 0 0 0 1

Vyšetrenie SRY, alebo 1 mikrodelécie, alebo podrobnej diferenciácie dokázanej chromozómovej aberácie metó-dou FISH, alebo 1 sonda z aneutestu

7230D

E34*, E35*, E66*, F70* až F99*, N46*, N51*, Q52* až Q56*, Q64*, Q87*, Q89*, Q90* až Q99*

062 0 0 0 0 0 0

Vyšetrenie Gilbertovho syndrómu, detekcia polymorfizmov v UGT1A1 7234 E80*

062, 048, 154, 216, 007, 008, 001, 031, 019, 319, 043, 229, 322, 219, 350

0 0 0 0 0 1

Vyšetrenie na myeloprolif. ochorenia – esenciálna trombocytóza, PV, osteomylofibróza, MG 7236A

D45*, D47.1, D47.3, D75* 062, 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

Vyšetrenie na myeloprolif. ochorenia – esenciálna trombocytóza, PV, osteomylofibróza, MG + CG 7236B

D45*, D47.1, D47.3, D75* 062, 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

Základné vyšetrenie hemochromatózy, polymorfizmy 7238 E83.1 062, 048, 154, 216, 007, 008, 001, 031 0 0 0 0 0 1

Vyšetrenie trombofilných mutácií – základný set (faktor V a II) 7239A

bez väzby na diag-nózu

062, 031, 329, 342, 001, 004, 010, 009, 017, 008 0 0 0 0 0 1

Vyšetrenie trombofilných mutácií – každá ďalšia mutácia 7239C bez väzby na diag-nózu 062, 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

Vyšetrenie trombofilných mutácií – MTHFRpolymorfizmy C677T a A1298C, po predošlom vyšetrení homocysteínu

7239B bez väzby na diag-nózu062, 031, 329, 342, 001, 004, 010, 009, 017, 008 0 0 0 0 0 1

Vstupné vyšetrenie chimerizmu po transplantácii krvotvorných buniek, porovnanie DNA darcu a príjemcu

9999A

D45*, D46*, D47.1, D47.3, D75*, C83.7 až C83.9, C84.4, C84.5, C85*, C91* (okrem C91.1), C92.0, C92.1, C93.0, C93.4, C94.0, C95.0

031, 329, 342 0 0 0 0 0 1

Kontrolné vyšetrenie chimerizmu po transplantácii krvotvorných buniek, MG 9999B

D45*, D46*, D47.1, D47.3, D75*, C83.7 až C83.9, C84.4, C84.5, C85*, C91* (okrem C91.1), C92.0, C92.1, C93.0, C93.4, C94.0, C95.0

031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

Detekcia mutácie NRAS 9999N C18*– C20* 019, 062 0 0 0 0 0 0

MLPA, MLH1, MLH2 9999K C18*– C20* 019, 062 0 0 0 0 0 0

Vyšetrenie na zriedkavé choroby B: aCGH, aCGH – dif.dg FRAX, Akútna intermitentná porfýria-HMBS, Cowden sy-PTEN, Crouzon sy-FGFR2, Dysostosis cleidochanialis-RUNX2, Hereditárna pan-kreatitída-PRSS1 a SPINK1, Hereditárny angioedém-C1 inhibítor, Marfan sy-TGFBR2, McCune-Albright sy-GNAS, Popliteal Pterygium sy-IRF6

7231B 062 0 0 0 0 0 0

Tabuľka č. 3: Poisťovňa Dôvera – aktualizácia indikačných pravidiel od 1. 12. 2015 – agregované výkony

POZN.: *Platí aj pre všetky príslušné štvormiestne položky podľa MKCH. **Frekvencia vyšetrení stanovená podľa guidelinov k jednotlivým ochoreniam (ak nie je uvedená).

DE

JU

RE

DE

JU

RE

VypracovalMedirex, a. s.: RNDr. Renata Lukačková, vedúca úseku molekulovej biológie

→

Indikačné obmedzenia Dôvery zdravotnej poisťovne

Názov výkonu KódvýkonuUrčené pre

diagnózy Indikujúci

lekár

Frekvencia za **

deň

týžd

eň

mes

iac

štvr

ťrok

rok

1x z

a ži

vot

Detekcia mutácií K-RAS génu (kodóny 12 a 13) 7210 C18*, C19*, C20* 062, 019, 319, 219, 350 0 0 0 0 0 0

Detekcia mutácií génu BRAF(detekcia mutácií v kodóne 600) 9972

C18*, C19*, C20*, C43*, C73*

019, 350, 219, 319, 029, 062, 064, 153 0 0 0 0 0 0

Postnatálne vyšetrenie karyotypu z dlhodobej tkanivovej kultivácie 7214

bez väzby na diag-nózu 062 0 0 0 0 0 0

Postnatálne vyšetrenie karyotypu z kultivácie lymfocytov prúžkovaním 7215

bez väzby na diag-nózu 062 0 0 0 0 0 0

Vyšetrenie myelodysplastického syndrómu,CG + FISH s použitím 3 sond 7233A D46* 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

Rozšírené vyšetrenie myelodysplastického syndrómu,za každú ďalšiu sondu (doplnok k výkonu 7233A) 7216 D46* 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

ISH analýza v prípade pozitivity IHC HER2 neu 7240 C50*, C16* 062, 019, 229, 319, 322, 329, 219, 350, 029 0 0 0 0 0 0

Detekcia HPV vírusov (high risk, low risk skupiny) DNA 4744A A56*, A63*, N72*, N76.8, N87*, Z12.4 018, 009, 017, 029 0 0 0 0 0 0

AML prvovyšetrenie, CG + FISH(najmenej 5 sond bez riedenia) + MG 7216A

C92.0, C93.0, C94.0, C95.0 031, 329, 342 0 0 0 0 0 1

AML relaps, CG + FISH(najmenej 5 sond bez riedenia) + MG 7216B

C92.0, C93.0, C94.0, C95.0 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

AML kontrolné vyšetrenie, FISH + MG,v prípade potreby aj CG 7216C

C92.0, C93.0, C94.0, C95.0 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

CML prvovyšetrenie, CG + FISH + MG 7218A C92.1, C93.1 031, 329, 342 0 0 0 0 0 1

CML relaps, CG + FISH + MG 7218B C92.1, C93.2 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

CML kontrolné vyšetrenie, CG alebo FISH 7218C C92.1, C93.3 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

CML kontrolné vyšetrenie, MG 7218D C92.1, C93.3 031, 329, 342 0 0 0 1 0 0

CML detekcia mutačného statusu bcr/abl 7218E C92.1, C93.4 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

ALL prvovyšetrenie, CG + FISH + MG vrátane MLPA IKAROS 7221A

C83.7 až C83.9, C84.4, C84.5, C85*, C91* (okrem C91.1)

031, 329, 342 0 0 0 0 0 1

ALL relaps, CG + FISH + MG 7221BC83.7 až C83.9, C84.4, C84.5, C85*, C91* (okrem C91.1)

031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

ALL kontrolné vyšetrenie 7221CC83.7 až C83.9, C84.4, C84.5, C85*, C91* (okrem C91.1)

031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

CLL prvovyšetrenie, CG + FISH + MG 7223A C91.1 031, 329, 342 0 0 0 0 0 1

CLL relaps, CG + FISH + MG 7223B C91.1 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

CLL kontrolné vyšetrenie 7223C C91.1 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

CLL detekcia mutačného statusu IGHV(u pacientov pred transplantáciou) 7223D C91.1 031, 329, 342 0 0 0 0 0 0

Prenatálne vyšetrenie karyotypu ploduz dlhodobej tkanivovej 7227A O35*, Z36* 062 0 0 0 0 0 0

Prenatálna genetická diagnostika aneuploídií moleku-lárno-genetickými alebo cytogenetickými metódami (chromozómy 13, 18, 21 a XY)

7227B O35*, Z36* 062 0 0 0 0 0 0

Základné vyšetrenie mnohonásobného myelómus použitím 2 sond 7228A C90.0

062, 031, 329, 342, 029, 019, 350 0 0 0 0 0 0

Rozšírené vyšetrenie mnohonásobného myelómu,každá ďalšia sonda (doplnok k výkonu 7228A) 7228B C90.0

062, 031, 329, 342, 029, 019, 350 0 0 0 0 0 0

Novela zákona č. 578/2004 Z. z. o poskytovateľoch zdravotnej starostlivosti a súvisiacich právnych predpisov

10

DE

JU

RE

Dňa 15. 12. 2015 Národná rada Sloven-skej republiky prelomila prezidentské veto a  opätovne schválila novelu zákona č. 578/2004 Z. z. o  poskytovateľoch zdra-votnej starostlivosti, zdravotníckych pra-covníkoch, stavovských organizáciách v zdravotníctve a o zmene a doplnení nie-ktorých zákonov a novelu súvisiacich práv-nych predpisov.

Schválená novela nadobúda účinnosť 1. januára 2016 (okrem nového ustanove-nia § 79 ods. 1 písm. zy) zákona č. 578/2004 Z. z., ktoré nadobúda účinnosť dňa 1. júla 2017) a upravuje nasledovné oblasti: • upravujú sa ustanovenia v  súvislos-

ti s  činnosťou tkanivových zariadení, pričom sa vypúšťa biobanka z  druhov zdravotníckych zariadení, vzhľadom na skutočnosť, že tieto činnosti podľa smer-nice Európskej únie vykonáva tkanivové zariadenie; v  zmysle prechodných usta-novení sa povolenie na prevádzkovanie biobanky, vydané podľa predpisov účin-ných do 31. decembra 2015, považuje za povolenie na prevádzkovanie tkanivové-ho zariadenia podľa tohto zákona;

• ustanovuje sa systém kvality a bezpeč-nosti pre poskytovateľa, ktorý prevádz-

kuje tkanivové zariadenie (ide o doku-menty, ktoré musí mať každé tkanivové zariadenie v  písomnej a  elektronickej podobe) a  následne sa týmto poskyto-vateľom určuje aj povinnosť dodržiavať systém kvality a bezpečnosti počas celej doby prevádzkovania takéhoto zdravot-níckeho zariadenia; poskytovateľ, ktorý má povolenie na prevádzkovanie tkani-vového zariadenia alebo biobanky, vy-dané do 31. decembra 2015, je povinný vytvoriť systém kvality a  bezpečnosti najneskôr do 31. decembra 2016;

• upravujú sa niektoré povinnosti po-skytovateľov ústavnej zdravotnej sta-rostlivosti (napr. sa ustanovuje, aby poskytovateľ zdravotnej starostlivosti – všeobecná a  špecializovaná nemocni-ca – určil na pokyn operačného stredis-ka záchrannej zdravotnej služby lekára a  sestru na zabezpečenie poskytovania zdravotnej starostlivosti pri preprave dieťaťa transportným inkubátorom a pri preprave dieťaťa, ktorému zlyhávajú zák-ladné životné funkcie, ktoré bezprostred-ne ohrozujú jeho život, ak ide o prevoz takéhoto dieťaťa medzi zdravotníckymi zariadeniami ústavnej zdravotnej sta-rostlivosti) a  povinnosti poskytovateľov

tkanivových zariadení a  sankcie za ich porušenie;

• pre administratívnu náročnosť platnej právnej úpravy a  potrebu požiadaviek aplikačnej praxe využívať medzinárodnú klasifikáciu chorôb v elektronickej podo-be sa ustanovuje, že medzinárodnú kla-sifikáciu chorôb uverejňuje Ministerstvo zdravotníctva Slovenskej republiky na svojom webovom sídle;

• poskytovateľom ústavnej zdravotnej starostlivosti zaradeným v  pevnej sieti poskytovateľov sa stanovuje povinnosť vypracovať traumatologický plán na zabezpečenie poskytovania kvalitnej a bezpečnej zdravotnej starostlivosti pri udalostiach s  hromadným postihnutím osôb;

• stanovuje sa minimálna výška základ-nej zložky mzdy pre definovanú sku-pinu zdravotníckych pracovníkov pra-cujúcich v  zdravotníckych zariadeniach podľa § 7 ods. 2 u poskytovateľa zdra-votnej starostlivosti, ktorý prevádzkuje zariadenie ústavnej zdravotnej starost-livosti, a u poskytovateľa, ktorý prevádz-kuje ambulanciu záchrannej zdravotnej služby.

1. - Zákona č. 129/2002 Z. z. o integrovanom záchrannom systéme, - zákona č. 576/2004 Z. z. o zdravotnej starostlivosti, službách súvisiacich s poskytovaním zdravotnej starostlivosti a o zmene a dopl-

není niektorých zákonov, - zákona č. 577/2004 Z. z. o rozsahu zdravotnej starostlivosti uhrádzanej na základe verejného zdravotného poistenia a o úhradách

za služby súvisiace s poskytovaním zdravotnej starostlivosti, - zákona č. 579/2004 Z. z. o záchrannej zdravotnej službe a o zmene a doplnení niektorých zákonov, - zákona č. 580/2004 Z. z. o zdravotnom poistení a o zmene a doplnení zákona č. 95/2002 Z. z. o poisťovníctve a o zmene a doplnení

niektorých zákonov.

2. Ustanovenie zavádza povinnosť zdravotníckych zariadení ústavnej zdravotnej starostlivosti zaradených v pevnej sieti poskytovate-ľov vypracovať traumatologický plán na poskytovanie zdravotnej starostlivosti pri udalosti s hromadným postihnutím osôb.

Schválené znenie novely nájdete tu: http://www.nrsr.sk/web/Default.aspx?sid=zakony/zakon&ZakZborID=13&CisObdobia=6&CPT=1780

Spoznajte pohlavie svojho dieťatka rýchlo a spoľahlivo

s presnosťou vyšetrenia 99,5 %

odber krvi od 10. týždňa

spoľahlivoskorozo vzorky krvi výsledok spravidla

do 5 pracovných dní*

jednoducho rýchlo

Molekulárny test na určenie pohlavia plodu je dostupný na celom Slovensku:

www.babygen.sk

* V prípade, že je odber krvi realizovaný v 10. a 11. týždni tehotenstva, bude lehota na vydanie výsledku vyšetrenia primerane predĺžená. V sú-lade s uznesením Etickej komisie MZ SR môže laboratórium poskytnúť informáciu o pohlaví plodu až po ukončenom 12. týždni tehotenstva.

Bezplatné CALL CENTRUM laboratórií Medirex 0800 00 30 30

13

Pred časom sme na oddeleniach genetiky na-šich laboratórií zaviedli odberový systém VA-CUETTE® TempusTM na odber periférnej krvi a kostnej drene u hematoonkologických pacientov s cieľom stabilizácie RNA.

VACUETTE® TempusTM skúmavky obsa-hujú špeciálny stabilizačný roztok v objeme 6 ml zabraňujúci degradácii RNA, a preto sú používané výhradne na izoláciu RNA. U  hematoonkologického pacienta je do VACUETTE® TempusTM skúmavky po-trebné odobrať 3 ml periférnej krvi alebo kostnej drene. Ihneď po odbere je nutné skúmavku poriadne premiešať s  cieľom

stabilizácie RNA. Tieto skúmavky so stabi-lizačným roztokom na vyžiadanie poskyt-nú oddelenia genetiky našich centrálnych laboratórií.

Na izoláciu DNA vyžadujeme súčasné odobratie 5 ml periférnej krvi alebo kostnej drene do skúmavky s EDTA. U  všetkých hematoonkologických pacien-tov sa požaduje paušálne odoberať perifér-nu krv alebo kostnú dreň do VACUETTE® TempusTM skúmavky a  súčasne do skú-mavky s EDTA.

Oba typy skúmaviek sa uchovávajú do transportu a počas neho pri teplote 4 – 10 ºC.

Vzorky nie sú stabilné, preto by mali byť do laboratória dodané čo najskôr.

Pozor!Často sa stáva, že v skúmavkách VACUETTE® TempusTM prichádza do našich labora-tórií kostná dreň určená na cytogenetické vyšetrenie. Takto odobratá kostná dreň sa nedá použiť na cytogenetické vyšetrenie! K zámene pravdepodobne dochádza v dô-sledku rovnakej farby vrchnákov odbero-vých skúmaviek.

Kostnú dreň na cytogenetické vyšetrenie je potrebné odobrať do skúmavky s ružovým transportným médiom.

Na cytogenetické vyšetrenie sa odoberá 5 ml kostnej drene (resp. podľa možností) do skúmavky s heparínom lítnym LiH. Po dôkladnom premiešaní sa vzorka premiest-ni do skúmavky označenej bielym štítkom (Cytogenetika, FISH, KD), obsahujúcej 2 ml odberového a  transportného média IMDM zohriateho na 37 ˚C.

Skúmavky na odber kostnej drene na cyto-genetické vyšetrenie je potrebné uchovávať v  mrazničke do doby odberu. Tesne pred odberom sa skúmavky rozmrazia a zohre-jú na teplotu tela (cca 37˚C). Skúmavky na odber kostnej drene na cytogenetické vy-šetrenie vám na vyžiadanie dodá centrálne laboratórium – oddelenie genetiky. Vzorky sa do transportu a počas neho uchovávajú pri teplote 4 – 10 ˚C.

V  prípade akýchkoľvek otázok k  odberu kontaktujte:• RNDr. Miroslavu Eckertovú, PhD.,

+421 2 208 29 271, miroslava.eckertova@medirex.sk,

• odborné medicínske reprezentantky, obchod@medirexgroup.sk.

Slovenský mienkotvorný týždenník za-meraný na ekonomiku, financie a  pod-nikanie – TREND – vydal aj tento rok októbrovú ročenku TREND TOP V  ZDRAVOTNÍCTVE A  VO FARMÁ-CII. Na 36 stranách hodnotí a sumarizuje vývoj v  jednotlivých oblastiach zdravot-níctva a  farmácie za uplynulý rok 2014,

nevynímajúc laboratórnu medicínu. V  rebríčku, ktorý TREND zostavil, sme opäť obhájili vedúcu pozíciu a  s  35,4 % podielom na trhu slovenskej laboratórnej diagnostiky sme sa umiestnili na prvej priečke. Podľa autorov analýzy (analytici Health Policy Institute) je v  rámci TOP 10 samostatných poskytovateľov labora-

tórnej diagnostiky „na koni MEDIREX GROUP“, dvojkou Alpha medical group a  trojkou Skupina Klinická biochémia. V  rebríčku nasleduje Synlab Slovakia, Cythopatos, Analyticko-diagnostické la-boratórium a  ambulancie, RIA labora-tórium, AnalytX, Laboratóriá Piešťany a Skupina Hemo Medika.

TREND TOP: NA KONI JE MEDIREX GROUP

PripomínameAko odoberať vzorky na hematoonkologické molekulové vyšetrenie

časopis laboratórnej medicíny

1/2016

ISSN 1338-9661Ročník VII.

• Anémie – laboratórna diagnostika najčastejšie sa vyskytujúcich anémií Anemias – laboratory diagnostics of the most common types of anemia

• Likvorová diagnostika ochorení postihujúcich nervový systém Cerebrospinal fluid diagnosis of diseases affecting the nervous system

• Hormóny v diagnostike porúch reprodukčných funkcií Hormones in diagnostics of reproductive dysfunctions

• Monoklonové gamapatie – laboratórne vyšetrenia v diagnostike a monitorovaní Monoclonal gammopathies – laboratory tests used in diagnostics and monitoring

• Hodnotenie odpovede na liečbu u pacientov s chronickou myelocytovou leukémiou liečených s inhibítormi tyrozínkinázy Treatment response assessment of patients with chronic myeloid leukemia treated with tyrosine kinase inhibitors

Vo februári vychádza prvétohtoročné číslo časopisu Newslab V priebehu mesiaca február sa vám dostalo do rúk prvé tohtoročné číslo časopisu laboratórnej medicíny Newslab. Zamerali sme sa v  ňom na laboratórnu diagnostiku najčastejšie sa vyskytujúcich anémií, likvorovú diagnostiku ochorení postihujúcich nervový systém, hormóny v diagnostike porúch reprodukčných funkcií, monoklonové gamapatie a hodnotenie odpovede na liečbu u pacientov s chronickou myelocytovou leukémiou liečených s inhibítormi tyrozínkinázy. „Aj my sme v ostatných rokoch zaviedli a neustále zavádzame stanovenie nových parametrov, meníme filozofiu fungovania a organizácie našich laboratórií tak, aby sme boli schopní držať krok s meniacimi sa potrebami vás, klinických lekárov, a predovšetkým našich pacientov, keďže sa mení zastúpenie jednotlivých ochorení, na význame získavajú poruchy, ktoré ešte pred niekoľkými rokmi neboli zaujímavé,“ hovorí v úvode MUDr. Anna Stecová, CSc., medicínska riaditeľka Medirexu. Newslab je recenzovaný časopis laboratórnej medicíny, ktorý vychádza už 7. rok. Má pridelenú citačnú skratku, je indexovaný v Bibliographia Medica Slovaca (BMS) a citácie sú spracované v CiBaMed. V jeho druhom tohtoročnom vydaní okrem pôvodných prác nájdete aj najnovšie poznatky z vedy a výskumu, keďže našou snahou je vytvoriť úzke prepojenie medzi aplikovaným výskumom a  praxou. Prinesieme vám odborné publikácie našich kolegov z  akademickej pôdy, prezentujúce najnovšie poznatky z  vedeckovýskumnej činnosti.

12

PR

ED

ANAL

YTIK

A

Odber kostnej drene na cytogenetickévyšetrenie

VACUETTE® TempusTM skúmavka• Biele transportné médium • Modrý vrchnák s čiernym vrchom

Skúmavka na odber kostnej drene na cytogenetické vyšetrenie• Ružové transportné médium • Modrý vrchnák bez čierneho vrchu

Všímajte si rozdiely:

DO

BR

É V

ED

IEŤ

Všimli ste si?

Unikátna slovenská publikáciapre budúce mamičky

Sprievodca tehotenstvomJedinečná publikácia slovenských lekárov pod vedením MUDr. Vladimíra Cupaníka, CSc., a doc. MUDr. Jozefa Záhumenského, PhD., sa do kníhkupectiev dostala ešte pred Vianocami. Na takmer 300 stranách sumarizuje dôležité informácie o plánovaní rodičovstva, tehotenstve, o pôrode aj o  šestonedelí. Elegantná kniha s pútavou obálkou, ktorej autormi sú slovenskí špecialisti v odbore gynekológia a pôrodníctvo, je praktickým pomocníkom pre všetky budúce mamičky. Odpovedá na otázky z oblasti pôrodníctva vychádzajúce z praktických skúseností jej autorov. Čitateľky poteší aj DVD nosič so základnými cvičeniami počas tehotenstva a po pôrode, tehotenský preukaz, tehotenský kalendár s odporúčanými vyšetreniami a menštruačný kalendár, ktoré vydavatelia publikácie pribalili ku každej knihe ako bezplatný darček.

14

GE

NE

TIK

AM

ETO

DIC

KÉ

LIS

TY

Klinický významWaldenströmova makroglobulinémia (WM) je lymfoproliferatívne ochorenie zaraďujúce sa podľa klasifikácie WHO do skupiny lymfó-mov. Tvorí 1 až 2 % zo všetkých hemoblastóz. Je charakterizované infiltráciou kostnej drene klonálnymi B-lymfocytmi a prítomnosťou monoklonálneho imunoglobulínu IgM v sére. Medzi klinické prejavy tohto ochorenia patria: chronická únava, krvácanie z dutiny ústnej a nosnej, bolesti hlavy, kožná purpura a neuropatia. V súčasnej dobe je WM stále nevyliečiteľná, s mediánom prežitia 5 rokov. Z tohto dôvodu sa liečba zameriava hlavne na potlačenie príznakov s minimálnym poškodením vnútorných orgánov.MYD L265P je nová popísaná somatická mutácia vyskytujúca sa u 95 % pacientov s WM, v géne dochádza k zámene leucínu za prolín v kodóne 265 (L265P). Mutácia MYD88 L265P prostredníctvom aktivovaných signálnych dráh NF-κB a Akt-mTOR zvyšuje proliferáciu a prežívanie patologických buniek. Stanovenie tejto mutácie predstavuje nový diagnostický marker pri WM. V menšom percente sa vyskytuje u iných lymfoproliferatívnych ochoreniach (napr. CLL, DLBCL). Naopak táto mutácia nie je prítomná pri mnohopočetnom myelóme, preto slúži ako vhodný diagnostický marker pri stanovovaní presnej diagnózy. Mutácia v MYD88 je marker odlišujúci WM od iných lymfoproliferatívnych ochorení.

Indikácie• Diferenciálna diagnostika WM od mnohopočetného myelómu.

Predanalytické informácieOdbery• Vyšetrenie mutácie sa robí z  mononukleárnej frakcie buniek

z aspirátu kostnej drene alebo periférnej krvi v čase diagnózy.• Odoberá sa paralelne 2 – 5 ml vzorky kostnej drene do skúmav-

ky s K3EDTA a TEMPUS skúmavky.• Odoberá sa paralelne 2 – 5 ml vzorky periférnej krvi do skú-

mavky s K3EDTA a TEMPUS skúmavky.• Uchovávať pri teplote 4 – 10 °C.

Odberové dni• Pondelok, utorok, streda, štvrtok, piatok

MetódaAlelovo-špecifická PCR (AS-PCR) s následnou sekvenačnou ana-lýzou. Výsledok analýzy sa uvádza vo forme: prítomnosť/neprí-tomnosť mutácie MYD88 L265P a je dostupný do 1 mesiaca od doručenia vzorky do laboratória.

Dostupnosť vyšetreníCentrálne laboratórium BratislavaCentrálne laboratórium Košice

VypracovalMedirex, a. s.: RNDr. Renata Lukačková,vedúca úseku molekulovej biológie

Kontakt+421 908 290 824, renata.lukackova@medirex.skBratislava 7. 12. 2015

Literatúra1. Treon SP. How I treat Waldenstrom macroglobulinemia. Blood

2009;114:2375–2385.2. Treon SP, Xu L, Yang G, et al. MYD88 L265P somatic mutation

in Waldenstrom’s macroglobulinemia. N Engl J Med. 2012; 367: 826–833.

3. Treon SP, Hunter ZR. MYD88 L265P Somatic Mutation in IgM MGUS. N Engl J Med. 2012; 367: 2256–2257.

4. Xu L, Hunter ZR, Yang G, et al. MYD88 L265P in Waldenstrom macroglobulinemia, immunoglobulin M monoclonal gam-mopathy, and other B-cell lymphoproliferative disorders using conventional and quantitative allelespecific polymerase chain reaction. Blood 2013; 121: 2051–2058.

5. Varettoni M, Arcaini L, Zibellini S, et al. Prevalence and clinical significance of the MYD88 (L265P) somatic mutation in Wal-denstrom’s macroglobulinemia and related lymphoid neoplas-ms. Blood 2013;121: 2522–2528.

Indikačné obmedzenia

Poisťovňa Kód diagnózy Názov výkonu Indikujúca odbornosť Odbornosť pracoviska24 ZP nehradí - - -25 bez väzby na diagnózu PCR a sekvenovanie

(4990, 4993 a 4994)001; 002; 003; 004; 009; 029; 031; 040; 048; 062; 063; 104; 140; 154; 156; 163; 329; 331

062

27 bez väzby na diagnózu PCR a sekvenovanie(4990, 4993 a 4994)

001; 002; 003; 004; 009; 029; 031; 040; 048; 062; 063; 104; 140; 154; 156; 163; 329; 331

062

Somatická mutácia v géne MYD88 L265PDiagnostika pacientov s CML

si vyžaduje sústavné vzdelávanieNa rozhodnutia klinikov o liečbe pacientov s chronickou myelocytovou leukémiou (CML) má výrazný vplyv aj kvalita laboratórnych výsledkov a ich správna interpretácia ošetrujúcim lekárom. Úzka spolupráca a pravidelná komunikácia lekárov a klinických diagnostikov, zaoberajúcich sa CML, je pre pacientov veľmi prínosná.

Jednou z foriem takejto spolupráce je kaž-doročné edukačné podujatie organizované spoločnosťou Novartis Slovakia s. r. o. Mi-nuloročné, nazvané Štandardizované mo-lekulové testovanie – cesta k  lepšiemu ma-nažmentu pacientov s  CML na Slovensku, sa uskutočnilo 20. novembra 2015 v hoteli Chopin v Bratislave. Našich kolegov z od-delenia lekárskej genetiky Medirexu repre-zentovali RNDr. Renata Lukačková, RNDr. Andrea Blahová a RNDr. Miroslava Ecker-tová, PhD.

Lekári zastupujúci hematologické am-bulancie na celom Slovensku diskutovali s laboratórnymi diagnostikmi o kvalite la-boratórnych výsledkov. Následná diskusia

sa niesla v duchu interpretácie genetických výsledkov a rozhodnutiach klinika o liečbe pacientov s CML.

Aktuálny stav štandardizácie molekulové-ho testovania pacientov s CML v Medirexe prezentovala RNDr. Renata Lukačková: „Do novembra 2015 sme zastrešovali he-matologické centrá z  Bratislavy, Martina a  Banskej Bystrice. Od decembra 2015 sa presunulo monitorovanie z  Košíc do Bra-tislavy, a  to s  cieľom zjednotenia výsledkov na potreby testovania nového konverzného faktora (CF), potrebného k  štandardizácii merania hladín fúzneho transkriptu BCR-ABL, typického pre pacientov s týmto typom leukémie cestou referenčnej stupnice.“

Úspech podujatia potvrdila aj bohatá dis-kusia. Lekári sa zhodli na tom, aké je dô-ležité porozumieť laboratórnym výsledkom a ich vplyvu na kvalitnejšiu liečbu pacien-tov s chronickou myelocytovou leukémiou. Tiež veľmi pozitívne privítali presun diag-nostiky pacientov na oddelenie lekárskej genetiky Medirexu v Bratislave.

„Aj preto je naším cieľom naďalej skvalitňo-vať laboratórnu diagnostiku, a  tým aspoň sčasti prispieť k zlepšeniu života pacientov,“ hovorí RNDr. Miroslava Eckertová, PhD., laboratórny diagnostik na oddelení lekár-skej genetiky v Medirexe.

DO

BR

É V

ED

IEŤ

GE

NE

TIK

AM

ETO

DIC

KÉ

LIS

TY

PR

ÍPAD

Z P

RAX

EG

EN

ETI

KA

ME

TOD

ICK

É L

ISTY

Klinický významDo skupiny myeloproliferatívnych neoplázií (MPN) bez nálezu Philadelfia chromozómu (Ph-) patria polycytémia vera (PV), esenciálna trombocytémia (ET) a primárna myelofibróza (PMF). U väčšiny pacientov je identifikovaná mutácia JAK2V617F (50 – 60 %). Mutá-cie v MPL géne sú prítomné u 5 – 10 % ET a PMF. V súčasnosti boli identifikované somatické mutácie v géne kódujúcom calreticulin (CALR). CALR je chaperónový proteín v endoplazmatickom retikule, významne sa podieľa na regulácii signálnej transdukcie. Bolo popísané, že mutácie v exóne 9 CALR (inzercie a/alebo delécie) sa nachádzajú u 70 % JAK2-negatívnych ET a u 60 – 80 % pacientov s JAK2-negatívnou PMF a nenachádza sa u PV pacientov. Medzi najčastejšie typy mutácií patria 52-bp delécie (c.1092_1143del, L367fs * 46) a 5-bp inzercie (c.1154_1155insTTGCC, K385fs * 47) a celkovo zahŕňajú 85 % CALR mutácií v MPN. • Vyšetrenie mutácií v géne CALR v exóne 9 je indikované na potvrdenie predpokladanej diagnózy ET alebo PMF, ak sú JAK2V617F

a MPL (exón 10) negatívne. • ET a PMF s mutáciou CALR majú lepšiu prognózu (indolentnejší priebeh a dlhšie prežívanie).• CALR mutácie sa nevyskytujú u pacientov s PV.• CALR môže pomôcť pri diferenciálnej diagnostike reaktívnych trombocytóz a ET.• CALR testovanie poskytuje diagnostickú a prognostickú informáciu.Stanovenie mutácie CALR je súčasťou panelu vyšetrení Ph negatívnych MPN (JAK2V617F, CALR, MPL).

Klinický významSyndróm fragilného chromozómu X (FRAXA) je X-viazané dedič-né ochorenie, ktoré sa prejavuje mentálnou retardáciou. Mentálna retardácia asociovaná s fragilitou X chromozómu je najčastejšou for-mou dedičnej mentálnej retardácie u mužov. Postihnuté môžu byť aj ženy, približne polovica nosičiek plnej mutácie má miernu až stred-nú formu mentálnej retardácie. Syndróm sa vyskytuje s frekvenciou 1 : 4000 u mužov a 1 : 8000 u žien. Prejavuje sa počas detstva zaostá-vaním vo vývoji, vyskytujú sa poruchy intelektu asociované s poru-chami správania, prítomné sú poruchy nálady, úzkosť a agresivita. Fenotyp je u oboch pohlaví ovplyvnený len mierne, môže sa prejaviť ako úzka pretiahnutá tvár, prominujúce uši a čelo, hyperextenzibil-né kĺby prstov, pes planus a ako makroorchia u post-pubertálnych mužov. Je to X-recesívne ochorenie, zapríčinené expanziou tripletu „CGG“ nad 200 opakovaní na 5´- konci génu FMR1, ktorý je lo-kalizovaný v oblasti Xq27.3. Následná abnormálna hypermetylácia promotorovej oblasti spôsobí umlčanie expresie génu FMR1. Nor-málny počet repetícií (CGG)n je 6-44, najbežnejšie alely v populácii majú počet 29-30 opakovaní. Alely s  rozsahom počtu opakovaní 45-54 tvoria tzv. šedú zónu, nosiči majú zdravé deti, avšak existuje riziko vzniku alely s plnou mutáciou v ďalších generáciách. Alely s rozsahom 55-200 opakovaní bez abnormálnej metylácie označu-jeme ako premutácia. Frekvencia premutovaných alel v populácii je 1 : 300 u žien a 1 : 800 u mužov. Premutácie sú charakterizované od-lišným fenotypom ako pri FRAXA, zahŕňajú zvýšené riziko skorého rozvoja insuficiencie ovárií u žien (syndróm POF) a syndróm tre-moru/ataxie asociovaného s fragilným chromozómom X (syndróm FXTAS). Premutácie sú počas meiózy alebo včasnej embryogenézy nestabilné a ak je prenášačkou žena, hrozí expanzia CGG repetícií do plnej mutácie. Naopak premutácie prenášané mužom len výni-močne expandujú do plnej mutácie. Riziko vzniku plnej mutácie sa odvíja od dĺžky materskej premutácie, je viac ako 95 % u alel s viac ako 100 opakovaniami.

Indikačné obmedzeniaIndikuje klinický genetik. Vyžaduje sa genetická konzultácia pred zaslaním vzorky na molekulovú analýzu.

Indikácie• Mentálna retardácia, problémy s učením, oneskorený vývoj, au-

tistické správanie, hyperaktivita.• Zistené prenášačstvo.• Prenatálna diagnostika (odporúčané u žien s viac ako 55 opako-

vaniami).• Ženy s  reprodukčnými problémami spojenými so zvýšenými

hladinami FSH (folikulostimulačný hormón) alebo s  nízkou hodnotou AMH (anti-Mullerov hormón), najmä ak majú v ro-dinnej anamnéze výskyt predčasného ovariálneho zlyhania, mentálnu retardáciu alebo FRAXA.

• Ženy s predčasným ovariálnym zlyhaním alebo zvýšenou hladi-nou FSH pred 40. rokom.

• Syndróm tremoru/ataxie asociovaného s FRAXA (FXTAS).

Predanalytické informácieOdbery• Odoberá sa 5 ml vzorky periférnej krvi do skúmavky s EDTA.• Pacient nemusí byť nalačno.• Uchovávať pri teplote 4 – 10 °C.

Odberové dni• Pondelok, utorok, streda, štvrtok, piatok

MetódaTest na princípe PCR s následnou fragmentačnou analýzou. Kvan-tifikácia presného počtu repetícií. Výsledok analýzy sa uvádza vo forme: prítomnosť/neprítomnosť expanzie tripletu CGG s  pres-ným počtom opakovaní. Test má CE IVD certifikáciu na použitie v klinickej diagnostike.

Referenčné hodnoty• Alela s počtom opakovaní 6-44 – normálny počet – nespôsobuje

syndróm FRAXA.• Alela s počtom opakovaní 45-54 – šedá zóna – nespôsobuje syn-

dróm FRAXA.• Alela s počtom opakovaní 55-200 – premutácia – nespôsobuje

syndróm FRAXA, riziko syndrómu tremoru/ataxie asociova-ného s FRAXA (FXTAS) a/alebo predčasného zlyhania ovárií (POF).

• Alela s  počtom opakovaní > 200 – plná mutácia – syndróm FRAXA s variabilným klinickým obrazom.

Dostupnosť vyšetreníCentrálne laboratórium Bratislava

VypracovaliMedirex, a. s.: RNDr. Renata Lukačková, vedúca úseku molekulovej biológieMedirex, a. s.: MUDr. Peter Križan, CSc., odborný garant lekárskej genetiky

Kontakt+421 908 290 824, renata.lukackova@medirex.skBratislava 7. 12. 2015

Literatúra1. „Fragile X Site Mental Retardation 1; FMR1.“ Online Mendelian Inheritance in Man. March 6, 2001. http://www3.ncbi.nlm.nih.gov/Omim/.2. Tarleton J, Robert A. Saul. „Fragile X Syndrome.“ GeneClinics March 6, 2001. http://www.geneclinics.org.3. Hovatta O, Soderstrom-Anttila V, Aittomaki K. Pregnancies after oocyte donation in women with ovarian failure caused by an inactivating mutation in the follicle stimulating hormone receptor. Hum. Reprod. (2002);17: 124-127.

Syndróm fragilnéhochromozómu X (FRAXA)

Calreticulin(CALR)

Predanalytické informácieVyšetrenie sa realizuje zo vzorky 5 ml periférnej krvi (resp. kost-nej drene, ale nie je to nutné) odobratej do nezrážanlivého roztoku (EDTA) alebo do skúmaviek Tempus. Odber nemusí byť vykonaný nalačno.

InterferenciaNegatívny skríning na prítomnosť mutácií v exóne 9 nevylučuje prítomnosť mutácií mimo sledovaného úseku génu.

Metóda- Polymerázová reťazová reakcia (amplifikácia exónu 9), - HRM (High Resolution Melting), - sekvenovanie. Senzitivita: 96,4 % HRM, 89,3 % sekvenovanie.Špecificita: 96,3 % HRM, 100 % sekvenovanie.

Dostupnosť vyšetreniaCentrálne laboratórium Bratislava

VypracovalMedirex, a. s.: RNDr. Renata Lukačková, vedúca úseku molekulovej biológie

Medirex, a. s.: MUDr. Ján Lazúr, manažér hematológie a transfúziológie pre východné Slovensko

Kontakt+421 908 290 824, renata.lukackova@medirex.skBratislava 7. 12. 2015

Literatúra1. Klampfl T, et al. Somatic mutations of Calreticulin in myelopro-

liferative neoplasms. In N. Engl. J. Med. 2013;369, 2379.2. Nangalia J, et al. Somatic CALR mutations in Myeloproliferative

neoplasms with nonmutated JAK2. In N. Engl. J. Med. 2013;369, 2391.

3. Park JH, et al. Calreticulin mutations in myeloproliferative neo-plasms: Comparison of three diagnostic methods. In PLoS One, 2015, 10(10):e0141010. doi:10.1371/journal.pone.0141010.

Indikačné obmedzenia

Poisťovňa Kód diagnózy Názov výkonu Indikujúca odbornosť Odbornosť pracoviska24 D45*, D47.1, D47.3,

D75*Vyšetrenie na myeloproliferatív-ne ochorenia – agregovaný výkon 7236A alebo 7236B

062, 031, 329, 342

25 bez väzby na diagnózu PCR a  sekvenovanie (4990, 4993 a 4994)

001; 002; 003; 004; 009; 029; 031; 040; 048; 062; 063; 104; 140; 154; 156; 163; 329; 331

062

27 bez väzby na diagnózu PCR a  sekvenovanie (4990, 4993 a 4994)

001; 002; 003; 004; 009; 029; 031; 040; 048; 062; 063; 104; 140; 154; 156; 163; 329; 331

062

* Frekvencia vykazovania nie je stanovená ani pre jednu ZP.

BIO

CH

ÉM

IAM

ETO

DIC

KÉ

LIS

TY

PR

ÍPAD

Z P

RAX

EIM

UN

OLÓ

GIA

ME

TOD

ICK

É L

ISTY

Klinický významVyšetrenie sa odporúča stanoviť u osôb s podozrením na aktívnu či latentnú infekciu M. tuberculosis, u ktorých doposiaľ prevedené konvenčné diagnostické testy (RTG hrudníka, kultivačné vyšet-renie spúta, príp. PCR) nepreukázali túto diagnózu. Pacienti na imunosupresívnej terapii, po orgánovej trasplantácii, HIV pozitív-ni pacienti (kde sa infekcia M. tuberculosis predpokladá až u 1/3). Pacienti s hematologickými ochoreniami, chronickým renálnym zlyhaním, diabetici, zdravotnícki pracovníci, pacienti s  plánova-nou terapiou TNF alfa, osoby, ktoré boli v kontakte s pacientom s TBC, vojaci, väzni, imigranti z krajín s vysokou incidenciou TBC.

Takisto je možné ju použiť aj u pacientov s predpokladaným alebo dokázaným zníženým počtom T lymfocytov, keďže sa pri teste po-užíva vždy štandardný, vopred stanovený počet buniek.

Predanalytické informácieOdber sa vykonáva do Li-heparínovej skúmavky, bez nutnosti tre-pania.

U dospelých a detí nad 10 rokov: 2x 4 ml Li-Hep skúmavkaDeti 2 – 9 rokov: 1x 6 ml Li-Hep skúmavkaDeti do 2 rokov: 1x 4 ml Li-Hep skúmavka

V prípade, ak ide o imunokompromitovaného pacienta, odporú-ča sa odobrať viac skúmaviek, aby bolo dosiahnuté požadované množstvo PMBC (mononukleárne bunky periférnej krvi).

Odber krvi je nezávislý od Mantoux, nemusí teda byť robený pred aplikáciou Mantoux, prípadne v deň odčítania tak, ako je to pri teste Quantiferon TB-Gold.

Materiál musí byť spracovaný do 8 hodín od odberu, preto je nevy-hnutné dodať ho do laboratória čo najskôr po odbere.

Spracovanie vzorky vzhľadom na nutnosť 16 – 20-hodinovej in-kubácie trvá 2 po sebe nasledujúce dni. Výsledok sa stanovuje vizuálnym odpočtom počtu vzniknutých spotov laboratórnym pracovníkom.

U každého pacienta sa realizuje okrem testu s dvomi vyššie uvede-nými špecifickými antigénmi aj negatívna a pozitívna kontrola na overenie funkčnosti buniek.

Indikačné obmedzenieVšZP uznáva pre IGRA testy len indikáciu pneumológom.

MetódaIde o vysoko špecifickú (97,1 %) a vysoko senzitívnu (95,6 %) la-boratórnu metódu slúžiacu na diagnostiku aktívnej (pľúcnej i mi-mopľúcnej formy) a  takisto aj latentnej infekcie M. tuberculosis s využitím tzv. ELISPOT technológie, ktorá je podľa dostupných údajov senzitívnejšia než bežné ELISA metódy.

In vitro vyšetrovacia metóda je vypracovaná na princípe merania produkcie cytokínov (konkrétne IFN-gamma) aktivovanými T lymfocytmi reaktívnymi na M. tuberculosis a umožňuje kvantifi-káciu týchto efektorových buniek.

Jednou z výhod je, že táto metóda na rozdiel od kožného testu ne-vykazuje skríženú reaktivitu s BCG vakcínou a inými mycobakté-riami, a to vďaka využitiu dvoch, pre TBC špecifických antigénov ESAT-6 a CFP10.

Dostupnosť vyšetreniaCentrálne laboratórium BratislavaCentrálne laboratórium Košice

Test sa vykonáva v dňoch pondelok – streda.Vyšetrenie je potrebné vopred telefonicky dohodnúť na uvedených kontaktných telefónnych číslach.

Vypracoval Medirex, a. s.: RNDr. Elena Tibenská, PhD., manažér klinickej imunológie a alergológie pre západné Slovensko

KontaktBratislava: +421 2 208 29 326, +421 918 400 172Košice: +421 55 28 29 621, +421 918 824 811

Test T-SPOT.TB od februára 2016 vyšetrujeme aj v Centrálnom laboratóriu Medirex v Košiciach.

Bratislava 15. 12. 2015

T-SPOT.TB Žlčovékyseliny

Klinický významŽlčové kyseliny sa syntetizujú v  pečeni z  cholesterolu, predsta-vujú jedinú významnú cestu jeho eliminácie. V podobe svojich sodných a draselných solí sú dôležitou súčasťou žlče, majú silný emulzifikačný účinok na tuky a aktiváciou pankreatickej lipázy sa významnou mierou podieľajú na trávení a resorpcii tukov. Najdôležitejšou žlčovou kyselinou je kyselina cholová, druhá v po-radí je kyselina chenodeoxycholová. Spolu sa označujú ako pri-márne žlčové kyseliny. Aby sa zvýšila rozpustnosť žlčových kyselín vo vodnom prostredí a zabránilo sa ich precipitácii, vylučujú sa do žlče v podobe svojich taurínových a glycínových konjugátov. Den-ne sa v pečeni syntetizuje 200 – 500 mg žlčových kyselín. Žlčové kyseliny sa uskladňujú a  zahusťujú v  žlčníku, zo žlčníka je žlč vylučovaná do tenkého čreva pri príjme potravy a vplyvom cholecystokinínu. V terminálnom ileu sa aktívnym transportným systémom spätne resorbuje až 95 % žlčových kyselín, tieto sa por-tálnym systémom vracajú späť do pečene – hovoríme o enterohe-patálnom obehu žlčových kyselín. Len malá časť sa neresorbuje (cca 500 mg denne) a vylúči sa stolicou von z tela. Táto časť pred-stavuje hlavnú cestu eliminácie cholesterolu. V  čreve činnosťou bakteriálnej flóry dochádza ku zmene štruktúry žlčových kyselín, vznikajú sekundárne (kyselina deoxycholová, kyselina lithocholo-vá) a terciárne (kyselina ursodeoxycholová) žlčové kyseliny, ktoré sa výrazne horšie resorbujú. Kyselina ursodeoxycholová je najviac vo vode rozpustná žlčová kyselina a v súčasnosti sa využíva v tera-pii cholestázy.Hlavnou fyziologickou úlohou žlčových kyselín je napomáhať pri trávení, resorpcii lipidov a exkrécii cholesterolu. Pri nedostatočnom prísune žlčových kyselín do čreva vzniká porucha trávenia a resorpcie tukov (steatorea, hnačky) a vitamínov rozpustných v tukoch. V plazme sú žlčové kyseliny viazané na bielkoviny. Koncentrácia žlčo-vých kyselín v portálnej krvi je vysoká, ale v systémovej cirkulácii veľ-mi nízka (1 – 4,5 umol/l) následkom schopnosti hepatocytov vysoko

efektívne extrahovať žlčové kyseliny z portálneho obehu. Táto hodno-ta sa zvyšuje po jedle s maximom cca 2 h po najedení (8 – 11 umol/l).Pri ochoreniach pečene klesá eliminačná schopnosť pečene pre žlčové kyseliny jednak zníženou schopnosťou hepatocytov vychytávať žlčové kyseliny (zápal, nekróza), jednak poruchou perfúzie (portokaválne skraty, patologická prestavba) alebo kombináciou obidvoch príčin.Stanovenie žlčových kyselín u pacientov nalačno je veľmi citlivým ukazovateľom poruchy portobiliárnej funkcie alebo zníženého prietoku krvi pečeňou. Je senzitívnejším testom pečeňového po-škodenia ako stanovenie bilirubínu, AST alebo ALP.Vzostup koncentrácie žlčových kyselín je najcitlivejším indikáto-rom cholestázy. Jeho nevýhodou je nízka špecifickosť – koncentrá-cia žlčových kyselín sa zvyšuje aj pri iných, primárnych poruchách pečene, pri ktorých je cholestáza sekundárna a  klinicky málo významná. Nález normálnej koncentrácie žlčových kyselín však, prakticky s určitosťou, cholestázu vylučuje.Zvýšené hodnoty nachádzame u pacientov s akútnou alebo chro-nickou hepatitídou, pri alkoholickom poškodení pečene, pri cirhó-ze, pri extra a intrahepatálnej cholestáze. S najvyššími hodnotami sa stretávame pri primárnej biliárnej cirhóze a primárnej skleroti-zujúcej cholangitíde. Samostatnú indikáciu predstavuje intrahepa-tálna cholestáza gravidných (ICP).Intrahepatálna cholestáza gravidných (ICP) je ochorenie pečene indukované graviditou najčastejšie v III. trimestri. Na Slovensku postihuje približne 1 % tehotných žien. Častejšie sa vyskytuje pri viacplodových graviditách, u  tehotných s  pozitívnou rodinnou anamnézou a má tendenciu sa opakovať aj pri ďalšej gravidite. Pri tomto ochorení sa u  geneticky predisponovaných žien indukuje cholestáza, ktorá sa klinicky prejaví svrbením dlaní a chodidiel, zhoršujúcim sa v noci. Indukcia cholestázy u matky je prezento-vaná zvýšením hladiny endogénnych žlčových kyselín. Tieto ne-priaznivo ovplyvňujú fetoplacentárnu jednotku a môžu vyústiť do predčasného pôrodu alebo intrauterínneho odumretia plodu.

Predanalytické informácieOdber do štandardnej gélovej biochemickej skúmavky. Po centri-fugácii je stabilita vzorky 1 týždeň pri teplote 2 – 8 °C a 3 mesiace pri teplote -20 °C.

InterferenciaSo stanovením žlčových kyselín interferuje silná hemolýza a chy-lozita séra.

MetódaEnzymatická kolorimetria

Referenčné rozpätie2 – 10 umol/l

Kód vyšetrenia4458

Dostupnosť vyšetreniaCentrálne laboratórium Bratislava

VypracovalMedirex, a. s.: MUDr. Katarína Schenková,manažér klinickej biochémie pre západné Slovensko

KontaktCall centrum 0800 00 30 30, katarina.schenkova@medirex.sk

Bratislava 1. 10. 2015

Indikačné obmedzenia

25 – VšZP 24 – Dôvera 27 – Union Odb. Periodicita Dg. Odb. Periodicita Dg. Odb. Periodicita Dg.S – Žlč. kys

001,007,009, 048, 050, 060, 062, 153, 154, 216

1/deň 001,007,009, 048, 050, 060, 062, 153, 154, 216

1/týždeň

HE

MAT

OLÓ

GIA

ME

TOD

ICK

É L

ISTY

PR

ÍPAD

Z P

RAX

EB

IOC

HÉ

MIA

ME

TOD

ICK

É L

ISTY

Klinický významFibrinogén (Fbg), koagulačný faktor I, je glykoproteín s molekulo-vou hmotnosťou približne 340 000 daltonov. V koagulačnej kaská-de je substrátom trombínu (FIIa), ktorý z reťazca Aα odštiepuje fibrinopeptid A a z reťazca Bβ fibrinopeptid B za tvorby solubil-ných monomérov fibrínu. Tie polymerizujú do pevnej fibrínovej siete, čo je proces, ktorý vnímame ako zrazenie krvi. Fbg sa synteti-zuje v hepatocytoch. Je to reaktant akútnej fázy, jeho hladina stúpa pri zápaloch, nádoroch, pooperačne, v tehotenstve. Znížená hladi-na je častejšie následok spotreby (napr. syndróm DIC), menej často následok zníženej tvorby. Znížená tvorba je buď získaná porucha pri veľmi závažných chorobách pečene alebo vrodená porucha syntézy. Koagulačná hladina fibrinogénu sa stanovuje Claussovou metódou na princípe trombínového času. Hladina proteínu fibri-nogénu (antigén) sa stanovuje imunologickými metódami.Poruchy syntézy delíme na kvantitatívne (afibrinogenémia, hypo-fibrinogenémia) a kvalitatívne (dysfibrinogenémia). Afibrinogenémiu charakterizujú veľké poruchy (delécie, nezmy-selné a „frameshift“ mutácie a stop – kodón) na géne kódujúcom reťazec Aα, zriedkavo Bβ a γ. Choroba sa prejaví už po narodení dieťaťa krvácaním z pupočníka, neskôr kožným, sliznicovým a kĺ-bovým krvácaním a zhoršeným hojením rán. Laboratórne je prí-tomné predĺženie PT, APTT, TT a chýbanie Fbg.Príčinou vzniku hypofibrinogenémie sú heterozygotné mutácie najčastejšie na géne kódujúcom reťazec Bβ a γ. Prejavy krvácania sú miernejšie, často sa objavia až po traume, operácii. Laboratórne sú hodnoty Fbg 0,7 – 1,2 g/l. Pri vrodenej dysfibrinogenémii sa zistilo viac ako 300 bodových mutácií, ktoré môžu spôsobovať defektné štiepenie fibrinopepti-dov, abnormálnu polymerizáciu alebo poruchu stabilizácie fibrí-nu. U 55 % pacientov prebieha asymptomaticky, 25 % má mierne krvácanie (najmä po traume, operácii), u 20 % pacientov sa môže prejaviť trombóza v dôsledku zvýšenej rezistencie patologického fibrinogénu na fibrinolýzu. Dysfibrinogenémia je považovaná za rizikový faktor venóznej trombózy s prevalenciou 0,8 %. Súčasné krvácavé prejavy a trombózu pozorujeme u 27 %. Laboratórne je typická diskrepancia medzi koagulačne a imunologicky stanove-nou hladinou fibrinogénu. Hodnota Fbg stanovená koagulačnou Claussovou metódou je znížená ako pri hypofibrinogenémii, no hodnota Fbg stanovená imunologickou metódou je často v norme. Imunologické metódy detekcie hladiny antigénu fibrinogénu nám pomáhajú rozlíšiť hypofibrinogenémiu od dysfibrinoge-némie, pri ktorej hodnota koagulovateľného fibrinogénu je < 80 % jeho imunologickej hladiny. Všetky hypofibrinogenémie zistené štandardnou koagulačnou metódou, pre ktoré nenachádzame klinické zdôvodnenie, sú indi-káciou na vyšetrenie antigénu Fbg imunologickou metódou. Tak-tiež u pacientov s klinicky zjavným trombofilným stavom, u kto-rých sa ostatnými laboratórnymi vyšetreniami nezistí príčina, je vhodné vylúčiť dysfibrinogenémiu porovnaním výsledku koagu-lačného a imunologického vyšetrenia Fbg.

Keďže sa hladina fibrinogénu môže zo dňa na deň meniť, je nutné urobiť stanovenie fibrinogénu koagulačnou a imunologickou me-tódou z tej istej vzorky!

Indikačné obmedzeniaIndikovať môžu všetky odbornosti. Frekvencia: 2x denne

Predanalytické informácieOdber do citrátovej (hemokoagulačnej) skúmavky. Stabilita v plaz-me je 8 dní pri 2 – 8 °C, 1 rok pri -20 °C.

InterferenciaNefelometrické stanovenia nie sú vhodné na meranie vysoko li-pemických alebo hemolyzovaných vzoriek. N antisérum proti fib-rinogénu deteguje aj jeho degradačné produkty, preto sa na imu-nochemické stanovenie nesmú použiť vzorky s  obsahom týchto produktov, napr. vzorky pacientov s fibrinolytickou terapiou.

MetódaNefelometria

Referenčné rozpätie1,8 – 3,5 g/l

Kód vyšetrenia3848

Dostupnosť vyšetreniaCentrálne laboratórium BratislavaCentrálne laboratórium Košice

VypracovalMedirex, a. s.: Ing. Mária Sucháňová,poverená vedením hematológie a transfúziológiena západnom SlovenskuMedirex, a. s.: MUDr. Ján Lazúr,manažér hematológie a transfúziológie pre východné Slovensko

Kontakt Call centrum 0800 00 30 30, maria.suchanova@medirex.skBratislava 18. 12. 2015

Literatúra1. Sakalova A, Bátorová A, Mistrík M, et al. Klinická hematológia.

Martin, Slovakia: Osveta; 2010.2. Cunningham MT, Brandt JT, Laposat M, et al. Laboratory Diagno-

sis of Dysfibrinogenemia. Arch Pathol Lab. 2002; 126: 499-505.3. N Antisera to Human Coagulation Factors and C1 Inhibi-

tor, verzia 2012/12.Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH, Marburg, Germany.

Klinický významVitamín B12 sa v plazme viaže na 2 proteíny: transkobalamín a haptokorín. Tieto komplexy sa nazývajú holotranskobalamín a holohap-tokorín. Haptokorín prenáša väčšinu vitamínu B12, je ním skoro úplne saturovaný, ale jeho úloha v organizme nie je známa. Transkobalamín prenáša iba malú časť vitamínu B12 (asi 30 %) a jeho saturácia vitamínom B12 je tiež veľmi nízka, približne 10 %. Ale iba vitamín B12, prenášaný v podobe holotranskobalamínu, je formou, z ktorej ho bunky môžu prijímať (transkobalamín prenáša vitamín B12 do buniek v množstve približne 4 nmol B12/deň). Koncentrácia holotranskobalamínu sa preto, spolu s koncentráciou celkového vitamínu B12 a homocysteínu (v populácii s dostatočným príjmom folátov), považuje za jeden zo spôsobov, ktorým možno zistiť dostup-nosť vitamínu B12 v organizme, pričom holotranskobalamín sa považuje za jeden z najvýhodnejších ukazovateľov deficitu vitamínu B12.Transkobalamín je relatívne malá bielkovina (molekulová hmotnosť 40 kDa) a je filtrovaná glomerulami obličiek. U pacientov v renálnej insuficiencii sa preto koncentrácie holotranskobalamínu v krvi zvyšujú, na rozdiel od celkového B12, keďže väčšina je prenášaná hapto-korínom s vyššou molekulovou hmotnosťou, ktorý obličkami neprechádza. Transkobalamín sa tiež považoval za bielkovinu akútnej fázy, v súčasnosti sa predpokladá, že sa zvyšuje iba pri aktivácii makrofágov. Zvýšený je tiež pri pečeňových ochoreniach a v prípade tvorby protilátok proti transkobalamínu. Incidencia koncentrácií hotranskobalamínu < 35 pmol/l býva vysoká u vegánov (štúdie hovoria až o 76 %) a u lakto a laktoovovegetariánov (43 %). Distribúcia holotranskobalamínu nie je vo vekových skupinách odlišná, štúdie však ukazujú, že deficit vitamínu B12 má približne 10 – 15 % ľudí nad 65 rokov. U dialyzovaných pacientov je medián vysoký (približne 100 pmol/l), ale považuje sa za lepší ukazovateľ deficitu B12 ako koncentrácia celkového B12.

Holotranskobalamín Stanovenie hladiny fibrinogénu imunologickou metódou – antigén fibrinogénu (Ag – Fbg)

Indikačné obmedzeniaIndikovať môžu odbornosti: 001; 007; 031; 048; 060; 154; 329, 062.Frekvencia: 1x mesačne

Predanalytické informácieOdber ráno nalačno do štandardnej gélovej biochemickej skúmav-ky. Stabilita pri izbovej teplote 16 h, pri teplote 2 – 8 °C 3 dni, pri -20 °C 6 mesiacov.

InterferenciaHemolytické a zakalené séra nemožno na analýzu použiť.

MetódaEIA – enzýmová imunoassay

Referenčné rozpätieCut-off: 35 pmol/l

Kód vyšetrenia4383

Dostupnosť vyšetreniaCentrálne laboratórium Bratislava

Centrálne laboratórium Košice

VypracovalMedirex, a. s.: MUDr. Anna Stecová, CSc.,medicínsky riaditeľ

KontaktCall centrum 0800 00 30 30, anna.stecova@medirex.sk

Bratislava 30. 10. 2015

Literatúra1. Herrmann W, Obeid R, Schorr H, Geisel J. The usefulness of

holotranscobalamin in predicting vitamin B12 status in diffe-rent clinical settings [online]. Curr Drug Metab 2005. http://www.eurekaselect.com/60346/article. Accessed February, 2005;6(1):47–53.

2. Nexo E, Hoffmann-Lücke E. Holotranscobalamin, a marker of vitamin B-12 status: analytical aspects and clinical utility [onli-ne]. Am J Clin Nutr. 2011. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3127504/ Accessed Jul , 2011;94(1):359–365.

3. Axis-Shield active-B12 (holotranscobalamin) EIA, verzia 2013/04. Axis-Shield Diagnostics Ltd, Dundee, UK

Klinické využitie Posúdenie stavu vitamínu B12. Odporúčaný algoritmus:

Vitamín B12 celkový< 150 pmol/l 150 – 300 pmol/l > 300 pmol/l

Deficit B12 pravdepodobný Konfirmovať pomocou holotranskobalamínu

Deficit vitamínu B12 nepravdepodobný

Osoby s rizikom deficitu vitamínu B12Holotranskobalamín < 35 pmol/l Holotranskobalamín > 35 pmol/l

Deficit vitamínu B12 pravdepodobný Deficit vitamínu B12 nepravdepodobný*

*okrem pacientov s renálnou insuficienciou

PR

ÍPAD

Z P

RAX

EH

EM

ATO

LÓG

IAM

ETO

DIC

KÉ

LIS

TY

Klinický významHeparíny sú nepriame inhibítory koagulácie pôsobiace cez aktivá-ciu antitrombínu. Klasický nefrakcionovaný (NF) heparín inhibu-je rovnako faktor Xa (FXa) aj faktor IIa (FIIa), preto má výrazný antikoagulačný efekt s rizikom krvácania pri predávkovaní, čo vy-žaduje kontrolu liečby testom APTT. Nízkomolekulové (LMW) heparíny (enoxaparín, dalteparín, nandroparín, bemiparin) in-hibujú FXa 2 – 8-krát silnejšie než FIIa, z čoho vyplýva najmä antitrombotický efekt, s malým rizikom krvácania, preto ich po-užitie štandardne nevyžaduje laboratórnu kontrolu. V niektorých prípadoch je však vhodná kontrola aj LMW heparínov. Týka sa to pacientov s hmotnosťou nad 100 kg a pod 50 kg, pacientov s poruchou obličkových funkcií, pacientov s vysokým rizikom krvácania alebo trombózy, pacientov dlhodobo liečených a te-hotných žien. Pre LMW heparíny je test APTT nevhodný, stano-vuje sa anti-Xa aktivita.Test anti-Xa sa výnimočne môže použiť aj na monitorovanie liečby NF heparínom, ak test APTT je nehodnotiteľný pre interferenciu, napr. pri vysokej hladine FVIII alebo pri antifosfolipidovom syn-dróme s pozitivitou lupusového antikoagulans.

Indikačné obmedzeniaIndikovať môžu všetky odbornosti.Frekvencia: 1x denne

Predanalytické informácieOdber sa vykonáva do skúmavky na hemokoagulačné vyšetrenie (0,109 M citronan sodný). Odber má byť šetrný podľa pravidiel potrebných na hemokoagulačné vyšetrenia. Krv sa odoberá 3 – 4 hodiny po podkožnej aplikácii LMW heparínu. Na žiadanke treba vždy uviesť čas odberu a čas podania LMW heparínu.Vzorku je potrebné čo najskôr doručiť do laboratória (optimálne do jednej hodiny). Dlhším státím sa uvoľňuje z trombocytov PF4, ktorý inhibuje heparín. Ak nie je možné včas doručiť vzorku do laboratória, je potrebné ju centrifugovať (15 minút, 2000 – 2500 g).

Stabilita plazmy: • 2 hodiny pri 15 – 25 °C,• 4 týždne pri -20 °C.

MetódaPrincíp testu: LMW heparíny aktivujú antitrombín, ktorý in-hibuje FXa. Do testu sa pridá známe množstvo FXa, jeho časť je inhibovaná komplexom heparín/antitrombín. Zbytkový neinhibo-vaný FXa sa zmeria pomocou chromogénneho substrátu, čo nám umožní vypočítať množstvo inhibovaného FXa, ktoré je priamo úmerné hladine heparínu v krvi.

Referenčné rozpätieOdporúčané hladiny heparínu:• antitrombotická profylaxia: 0,2 – 0,4 IU/ml,• antikoagulačná liečba: 0,5 – 1,2 IU/ml.

Dostupnosť vyšetreniaCentrálne laboratórium Bratislava Centrálne laboratórium Košice

VypracovaliMedirex, a. s.: MUDr. Ján Lazúr, manažér hematológie a transfúziológie pre východné SlovenskoMedirex, a. s.: MUDr. Anna Čechová, odborný zástupca pre hematológiu a transfúziológiuMedirex, a. s., pre západné Slovensko

KontaktCall centrum 0800 00 30 30, callcentrum@medirexgroup.sk

Revidované v Košiciach 1. 2. 2016

Vyšetrenie anti-Xa od februára 2016 vyšetrujeme aj v Centrálnom laboratóriu Medirex v Košiciach.

Vyšetrenie anti-Xa aktivity na monitorovanie liečby nízkomolekulovými heparínmi

NA

PO

KR

AČO

VAN

IE

23

Imunohistochémia pre nepatológov

IMUNOHISTOCHEMICKÉ VYŠETRENIA PRI BIOPTICKEJ DIAGNÓZE

LYMFOPROLIFERATÍVNYCH OCHORENÍ

Diagnostický proces v hematopatológii Hematopatológia patrí k  najnáročnejším odvetviam patológie a  vyžaduje si veľkú skúsenosť a  erudíciu hodnotiaceho pato-lóga. Výsledná diagnóza vzniká na základe mikroskopického vyšetrenia štandardných preparátov farbených hematoxylínom a eo-zínom (HE), imunohistochemickej (IHC) analýzy a  v  ťažších prípadoch molekulo-vo-genetických vyšetrení (napríklad in situ hybridizačné metodiky – najmä FISH). Kľú-čová je však aj korelácia s klinickými údajmi a ďalšími laboratórnymi vyšetreniami (napr. prietoková cytometria, hematologické vy-šetrenia). Relevantné klinické údaje (vek, pohlavie, lokalita postihnutia, klinické prí-znaky, priložené výsledky laboratórnych vy-šetrení) môžu napomôcť patológovi pri zú-žení diferenciálnej diagnózy, a tým výrazne skrátiť čas vybavenia biopsie. Je to význam-né najmä v prípade niektorých agresívnych, akútne život ohrozujúcich lymfoproliferácií. Mikroskopické vyhodnotenie HE prepará-tov dokáže väčšinou v  závislosti od šikov-nosti hodnotiaceho patológa zúžiť diferen-ciálnu diagnózu lymfoproliferácie na dve až tri diagnózy. Samozrejme, v  typických prípadoch je možná priama diagnóza z HE preparátov okamžite – napríklad klasický Hodgkinov lymfóm, niektoré klasické typy NHL. Definitívna diagnóza je však väčšinou možná až po IHC analýze nádorového tka-niva. Vzhľadom na to, že existuje veľké množstvo rôznych lymfoproliferácií (ktoré mikrosko-picky vyzerajú niekedy takmer rovnako) s výrazne odlišnou prognózou a liečebným

prístupom, je správna a presná diagnóza ne-vyhnutnosťou. V  poslednom období došlo k  výraznému rozmachu IHC vyšetrení pri diagnóze LPO. V  bežnej praxi sa využíva niekoľko desia-tok rôznych protilátok, ktoré sú schopné detegovať celý rad antigénov prítomných v  nádorových lymfocytoch. Je to obrovský pokrok oproti nedávnej minulosti, keď bola diagnostika založená len na hodnotení HE preparátov. Význam IHC analýzy pri diagnostike lymfoproliferatívnych ochorení 1. Pomáha pri odlíšení nádorovej od nená-

dorovej lymfoproliferácie.2. Umožňuje presnú typizáciu lymfómov. 3. IHC analýza je dôležitá pre nasadenie cie-

lenej liečby (napríklad anti-CD20 terapia monoklonálnymi protilátkami).

4. Prognostický význam – napríklad stano-venie proliferačnej aktivity Ki-67, prípad-ne iných prognostických IHC markerov.

5. IHC analýza je cenný diagnostický ná-stroj pri malých a odberom poškodených vzorkách.

Zásady odberu materiálu pri podozrení na lymfoproliferatívne ochorenie 1. Správna fixácia materiálu. Nefixovaný,

autolyticky zmenený materiál je na IHC analýzu nevhodný. V  prípade, že je od-ber materiálu uskutočnený v  blízkosti oddelenia patológie, je možný okamžitý transport natívneho tkaniva do patologic-kého laboratória, kde sa tkanivo následne adekvátnym spôsobom spracuje. Výho-

dou tohto postupu je možnosť zhotovenia cytologických odtlačkových preparátov a  možnosť odberu tkaniva na niektoré molekulovo-genetické vyšetrenia. V  prí-pade, že sa odber materiálu uskutočňuje ďaleko od patologického laboratória (väč-šina prípadov), je nevyhnutná čo najrých-lejšia fixácia tkaniva v 10 % pufrovanom formalíne a  okamžitý transport tkaniva na oddelenie patológie. Pri podozrení na malígnu lymfoproliferáciu je fixovanie tkaniva v  iných typoch fixatív nežiaduce (napríklad Carnoyov roztok používaný na prejasnenie tukového tkaniva dokáže zlikvidovať mnohé antigény v  nádoro-vých bunkách, a  tým absolútne a  nená-vratne znemožniť IHC analýzu.)

2. Čím väčší je objem poskytnutého ná-dorového tkaniva, tým lepšie. Veľmi malý objem nádorových štruktúr (napríklad pri slizničnej biopsii) môže limitovať hodnotenie a  znemožniť IHC analýzu (vzhľadom na to, že pre každú protilát-ku potrebujeme vyhotoviť separátne rezy tkaniva). V  takýchto prípadoch je spra-vidla potrebné zopakovať odber suspekt-ného tkaniva z pacienta s väčším množ-stvom bioptických vzoriek.

3. Výrazne odberom poškodené tkanivo (rozdrvenie tkaniva, termické artefak-ty) absolútne znemožňuje morfologické hodnotenie HE preparátov a  taktiež ne-priaznivo interferuje s IHC analýzou, kto-rá môže byť nehodnotiteľná.

4. Nekroticky zmenené nádorové tkanivo, samozrejme, znemožňuje morfologické hodnotenie HE preparátov. Zaujímavos-

Úvod S malígnymi lymfoproliferatívnymi ochoreniami (Hodgkinov lymfóm (HL) a non-Hodgkinove lymfómy (NHL)) sa stretávame v na-šej každodennej praxi takmer vo všetkých typoch bioptických vzoriek. Okrem lymfatických uzlín a kostnej drene sú to najmä vzorky z gastrointestinálneho traktu, kože, slizníc v oblasti hlavy a krku, slinných žliaz, štítnej žľazy, prakticky však môže byť postihnutý každý orgánový systém. Správna a rýchla diagnóza je kľúčová pre adekvátnu liečbu a manažment pacientov, ktorý sa výrazne odlišuje od ma-nažmentu pacientov s tzv. solídnymi novotvarmi (napríklad karcinómy, sarkómy, melanómy). V tomto príspevku sa budeme venovať imunohistochemickej analýze lymfoproliferatívnych ochorení (LPO) vychádzajúcich z B a T lymfocytov a z ich prekurzorov.

→

24

NA

PO

KR

AČO

VAN

IE

NA

PO

KR

AČO

VAN

IE

25

ťou je, že najmä pri recentných nekrózach je dočasne zachovaná expresia niektorých cytoplazmatických a  membránových IHC markerov (napríklad CD20), ktorá umožňuje hodnotiacemu patológovi as-poň orientačne a predbežne vyjadriť po-dozrenie na malígnu lymfoproliferáciu. Hodnotenie jadrových IHC markerov (napríklad BCL6, Ki-67, MUM-1, TdT) je v nekrotickom tkanive nemožné.

Najčastejšie protilátky používané pri diagnostike LPO v našich patologických laboratóriách

Spravidla diagnózu konkrétneho typu lym-fómu nie je možné stanoviť len na základe jednej protilátky (ani jedna z protilátok nie je 100 % špecifická či senzitívna). Protilát-ky pri diagnóze LPO sa používajú väčšinou v tzv. paneloch – to znamená, že podľa mik-roskopickej morfológie v  HE preparátoch a  podľa predbežnej patologickej diferenci-álnej diagnózy sa použije viacero protilá-tok, ktoré indikuje po dôkladnom zvážení patológ. Každý panel obsahuje najmenej 5 až 10 rôznych protilátok. Napríklad pri Hodgkinovom lymfóme to bude panel po-zostávajúci napríklad z CD30, CD15, CD45,

CD20, PAX5, EMA, CD3. Pri podozrení na B bunkovú chronickú lymfatickú leukémiu/lymfóm (CLL/SLL) je to prinajmenšom CD20, CD3, CD5, CD23, BCL2. V tabuľke č. 1 uvádzame základný prehľad pozitivity a negativity niektorých protilátok v najčas-tejších malígnych LPO. Za mikroskopické hodnotenie IHC preparátov je zodpovedný skúsený patológ, pretože nádorové tkanivo je vo väčšine prípadov premiešané s poza-dím nenádorových lymfatických buniek, čo môže výrazne sťažovať interpretáciu a v ru-kách neskúseného lekára môže viesť k  ne-správnej diagnóze.

Vysvetlivky k tabuľke č. 1: CLL/SLL – chronic lymphocytic leukaemia/small cell lymphomaDLBCL – diffuse large B-cell lymphomaEMZL – extranodal marginal zone lymphoma (MALT lymphoma)FL – follicular lymphomaMCL – mantle cell lymphomaBL – Burkitt lymphomaHL – classical Hodgkin lymphoma

PCN – plasma cell neoplasmsALCL+ – anaplastic large cell lymphoma, ALK positiveT-ALL – T lymphoblastic leukaemia/lymphoma+ pozitívna expresia- bez expresie+/- pozitívna expresia vo väčšej časti prípadov-/+ pozitívna expresia v menšej časti prípadovvar – variabilná expresia

CLL/SLL DLBCL EMZL FL MCL BL HL PCN ALCL+ T-ALLCD45 + + + + + + - var var varCD20 + + + + + + - - - -PAX5 + + + + + + + - - -

CD79a + + + + + + - + - -/+CD3 - - - - - - - - -/+ +CD5 + -/+ - - + - - - +/- +/-BCL2 + +/- + +/- + - -/+ var - +BCL6 - var - + - + - - -/+ -CD10 - var - + - + - - - +/-CD23 + - - - - - - - - -CD30 - -/+ - - - - + - + -CD15 - - - - - - +/- - - -

CD138 - - var - - - - + - -ALK1 - -/+ - - - - - - + -TdT - - - - - - - - - +

Cycl.D1 - - - - + - - -/+ - -Tabuľka č. 1: Imunofenotyp najčastejších malígnych lymfoproliferácií

Obr. 1 Membránová a cytoplazmatická pozitivita CD3 (hnedá farba) v T bunkovej akútnej lymfoblastovej leukémii, objektív 20x.

Obr. 3 Membránová a bodkovitá pozitivita v oblasti Golgiho aparátu CD30 (hnedá farba) v Hodgkinovom lymfóme, objektív 20x.

Obr. 2 Membránová pozitivita CD5 (hnedá farba) v B bunkovej chronickej lymfocytovej leukémii – CLL/SLL, objektív 20x.

Obr. 4 Jadrová pozitivita cyklínu D1 (hnedá farba) v lymfóme z buniek plášťovej zóny, objektív 20x.

VypracovalMedicyt, s. r. o.: MUDr. Tomáš Torday, lekár

ALK1: Transmembránový tyrozín kinázový receptor. V  normálnych tkanivách je ALK proteín exprimovaný iba v  niektorých ty-poch buniek (niektoré gliové bunky, neuró-ny, endotélie, pericyty). Pozitivita môže byť asociovaná s translokáciou ALK génu (t(2;5)(p23;q35)). Typická pozitivita v  ALK pozi-tívnom variante ALCL (jadrová, cytoplaz-matická).BCL2: Antiapoptotický proteín s  membrá-novou pozitivitou. Normálna pozitivita v  T

lymfocytoch a v časti B lymfocytov (niektoré interfolikulárne B bunky, B bunky primár-nych folikulov, B bunky plášťovej zóny). Pa-tologická pozitivita vo väčšine B bunkových malígnych lymfoproliferácií (s  výnimkou Burkittovho lymfómu, malej časti folikulo-vých lymfómov…).BCL6: Jadrový proteín dôležitý pri diferenci-ácii B buniek v zárodočnom centre lymfatic-kých folikulov. Pozitivita (jadrová) je typická pre normálne B lymfocyty v  zárodočnom

centre. Patologicky je pozitivita prítomná najmä vo folikulovom lymfóme a  v  časti DLBCL. CD3: T bunkový antigén asociovaný s T-cell receptorom. Membránová a cytoplazmatická pozitivita. Jeden z  najdôležitejších a  naj-špecifickejších markerov T lymfocytov a  T bunkových lymfoproliferácií (vráta-ne prekurzorových lézií typu T-ALL – obr. 1). Možná je však aberantná strata expresie v časti prípadov T bunkových lymfómov.

V NASLEDUJÚCEJ ČASTI UVÁDZAME STRUČNÝ POPISNAJČASTEJŠÍCH NAMI POUŽÍVANÝCH PROTILÁTOK(VYSVE