14
Efek fluoxetine di air terhadap respon stres dan osmoregulasi pada ikan zebra Murilo S. Abreua, Ana Cristina V. Giacominia, b, Gessi Koakoskia, Thiago A. Oliveiraa, Darlan Gussob, Bernardo Baldisserotto, Leonardo JG Barcellosa, b, a 2015 *Universidade Federal Santa Maria (UFSM), Programa de Pos-Graduac ̧ ao em Farmacologia, Kampus Universitário, Camobi, Santa Maria, RS, Brasil b Universidade de Passo Fundo (UPF), Programa de Pos-Graduac ̧ ao em Bioexperimentac ̧ ao, Kampus I, Bairro São José, Caixa Postal 611, Passo Fundo, RS, Brasil. Keywords: obat Danio rerio Osmoregulasi Kortisol Homeostasis Psikotropika SSRI Abstrak Kehadiran fluoxetine di lingkungan perairan telah dilaporkan selama beberapa dekade. Kita menyelidiki efek dari paparan fluoxetine pada respon stres dan osmoregulasi ikan zebra. Kami membuktikan bahwa respon stres mengubah osmoregulasi. Fluoxetine dapat mempengaruhi perubahan yang berhubungan dengan stres dalam osmoregulasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kehadiran fluoxetine di ekosistem perairan dapat menyebabkan perubahan dalam respon terhadap stres dan osmoregulasi pada ikan. 1. Pengantar Ilmu farmasi (biokimia) di lingkungan perairan telah hadir sejak 1970-an (Calisto dan Esteves, 2009). Adanya obat-obatan, dengan mekanisme yang berbeda-beda dari tindakan di dalam air memungkinkan organisme akuatik endiami ekosistem yang buruk (Daughton dan Ternes, 1999). Selective serotonin reuptake inhibitor (SSRI) seperti fluoxetine biasa ditemukan dalam ekosistem tersebut,

Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

Embed Size (px)

DESCRIPTION

translateee

Citation preview

Page 1: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

Efek fluoxetine di air terhadap respon stres dan osmoregulasi pada ikan zebra

Murilo S. Abreua, Ana Cristina V. Giacominia, b, Gessi Koakoskia, Thiago A. Oliveiraa, Darlan Gussob, Bernardo Baldisserotto,

Leonardo JG Barcellosa, b,  a2015

*Universidade Federal Santa Maria (UFSM), Programa de Pos-Graduac 4 ao em Farmacologia, Kampus Universitário, Camobi, Santa Maria, RS, Brasil b Universidade de Passo Fundo (UPF), Programa de Pos-Graduac 4 ao em Bioexperimentac 4 ao, Kampus I, Bairro São José, Caixa Postal 611, Passo Fundo, RS, Brasil.

Keywords: obat Danio rerio Osmoregulasi Kortisol Homeostasis Psikotropika SSRI

Abstrak

Kehadiran fluoxetine di lingkungan perairan telah dilaporkan selama beberapa dekade. Kita menyelidiki efek dari paparan fluoxetine pada respon stres dan osmoregulasi ikan zebra. Kami membuktikan bahwa respon stres mengubah osmoregulasi. Fluoxetine dapat mempengaruhi perubahan yang berhubungan dengan stres dalam osmoregulasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kehadiran fluoxetine di ekosistem perairan dapat menyebabkan perubahan dalam respon terhadap stres dan osmoregulasi pada ikan.

1. Pengantar

Ilmu farmasi (biokimia) di lingkungan perairan telah hadir sejak 1970-an (Calisto dan Esteves, 2009). Adanya obat-obatan, dengan mekanisme yang berbeda-beda dari tindakan di dalam air memungkinkan organisme akuatik endiami ekosistem yang buruk (Daughton dan Ternes, 1999). Selective serotonin reuptake inhibitor (SSRI) seperti fluoxetine biasa ditemukan dalam ekosistem tersebut, dengan konsentrasi mulai ,012-1 g / L (Kolpin et al., 2002). Fluoxetine mdmberikannya efek anxiolytic dan dapat mengganggu aktivitas stres neuroendokrin sumbu (Abreu et al., 2014).

Respon Stres ikan dapat berupa perubahan fisiologis yang dipicu ketika ikan pertama bereaksi, ditandai dengan peningkatan kadar kortisol (Ramsay et al., 2009), yang merupakan indikator stres pada ikan. Kortisol memainkan peran dalam berbagai proses biologis, seperti fungsi kekebalan tubuh , metabolisme, reproduksi, dan osmoregulasi (Jentoft et al., 2005). Osmoregulasi sangat penting untuk homeostasis pada ikan. Perubahan konsentrasi ion air dapat mengganggu reproduksi, pertumbuhan, stres, dan dalam situasi yang ekstrim dapat mengganggu kelangsungan hidup (Almeida et al., 2013). Ikan zebra, Danio rerio, telah banyak digunakan dalam beberapa penelitian karena secara genetik hampir sama dengan manusia (Barbazuk et al., 2000). Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh ditularkan melalui air yang mengandung fluoxetine pada stres akut dan fluks ion ikan zebra.

Page 2: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

2. Bahan dan metode

2.1. Aspek etika

Penelitian ini disetujui oleh Komisi Etik Animal Penggunaan Universidade de Passo Fundo, Passo Fundo, RS, Brasil (Pro tocol # 20/2013) dan memenuhi pedoman dari Dewan Nasional untuk Hewan Penelitian Control.

2.2. Subyek

Dua ratus orang dewasa ikan zebra (wild type) dari kedua jenis kelamin, weigh- ing 0,8 ± 0,1 g, dibiakkan dan dipelihara di akuarium 60 L dengan

http://dx.doi.org/10.1016/j.etap.2015.09.001 1382 -6689 / © 2015 Elsevier All rights reservedur:.

Toksikologi Lingkungan dan Farmakologi 40 (2015) 704-707

daftar Isi tersedia dengan ScienceDirect

Toksikologi Lingkungan dan Farmakologijo nal ho me halaman  www.elsevier.com/lo cate / etap

Page 3: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

MS Abreu et al. / Toksikologi Lingkungan dan Farmakologi 40 (2015) 704-707 705

Page 4: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

air soda (DO 7,0 ± 0,5 mg / L, suhu 27 ± 1 ◦C, pH 7,1 ± 0,2). Respon stres dan evaluasi osmoregulasi didasarkan pada pengukuran hanya puncak (Koakoski et al., 2014). Berdasarkan pedoman kesejahteraan hewan didirikan, kami memilih satu titik metodologi evaluasi untuk mencegah kematian ikan lebih banyak dari yang diperlukan.

2.3. Percobaan 1: perjalanan waktu respon stres dan osmoregulasi

Dalam percobaan ini, kami menentukan kadar kortisol puncak dalam ikan zebra dan osmoregulasi setelah stres. Ikan dipindahkan ke ruang individu dengan 35 mL masing-masing (air dari tangki saham dengan DO, suhu dan pH identik dengan tangki ikan), didistribusikan ke dalam enam kelompok eksperimen: C15, C60, dan kelompok C240, kontrol tanpa stres dipertahankan selama 15, 60 , atau 240 menit dalam ruang, masing-masing; dan ST15, St60, dan St240, stres akut dipertahankan selama 15, 60, atau 240 menit di ruangan itu, masing-masing (20 ikan per kelompok). Stressor akut standar (paparan udara selama 60 s) diaplikasikan sebelum mentransfer ke ruang individu. Sampel air

dikumpulkanpada awal percobaan dan pada akhir setiap periode.

2.4. Percobaan 2: respon stres dalam fluoxetine terkena ikan

Dalam percobaan ini, kami bertujuan untuk mengevaluasi tindakan fluoxetine pada tingkat kortisol puncak. Ikan yang terkena fluoxetine 1 g / L (Kolpin et al., 2002) dalam kelompok enam ikan dalam 10-L akuarium selama 15 menit. (Abreu et al, 2014). (Kontrol tidak terkena fluoxetine), dipindahkan ke ruang individu, dan didistribusikan ke dalam empat kelompok eksperimen: C15 dan F15, kontrol dan fluoxetine dipertahankan selama 15 menit dalam ruang; dan ST15 dan FSt15, stres akut dan fluoxetine dipertahankan selama 15 menit dalam ruang (20 ikan per kelompok).

2.5. Percobaan 3: osmoregulasi di fluoxetine terkena ikan

Dalam percobaan ini, kami bertujuan untuk mengevaluasi tindakan fluoxetine di puncak perubahan osmoregulasi. Ikan yang terkena fluoxetine 1 g / L (Kolpin et al., 2002) selama 15 menit (kontrol tidak terkena fluoxetine), dipindahkan ke ruang individu, dan didistribusikan

Gambar. 1. Whole-tubuh kadar kortisol dan fluks ion di stres (percobaan 1) dan fluoxetine terkena ikan zebra (percobaan 2 dan 3). Stres akut peningkatan kadar kortisol 15 menit setelah stres (A, P <0,001) dan menginduksi masuknya Na + (B, P = 0,0061) dan K + (C, P = 0,026) 60 menit setelah stres. Fluoxetine ditekan peningkatan kortisol (D, P <0,001). Fluoxetine terbalik masuknya Na + (E, P = 0,001) dan K + (F, P = 0,0012) yang disebabkan oleh stres akut. Dua-way ANOVA, stres akut dan waktu setelah stres sebagai variabel independen, diikuti oleh Bonferroni post-test. Bar dinyatakan sebagai berarti ±SEM..

Page 5: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

706 MS Abreu et al  / Toksikologi Lingkungan dan Farmakologi 40 (2015) 704-707

Page 6: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

menjadi empat kelompok eksperimen: C60 dan F60, kontrol dan fluoxetine dipertahankan selama 60 menit dalam ruang; dan St60 dan FSt60, stres akut dan fluoxetine dipertahankan selama 60 menit dalam ruang (20 ikan per kelompok).

2.6. Seluruh tubuh analisis kortisol

Setelah periode dalam ruang, ikan diambil sebagai sampel untuk menentukan tingkat kortisol. Kortisol seluruh tubuh diekstraksi menggunakan metode yang dijelaskan oleh Sink dkk. (2007).

2.7. Fluks bersih analisis

sampel air yang dikumpulkan pada awal percobaan dan pada setiap akhir periode (15, 60, dan 240 menit) untuk analisis fluks bersih. Na + dan K + konsentrasi dalam air diukur dengan menggunakan metode yang dijelaskan oleh Baldisserotto dkk. (2008).

2.8. Statistik

Whole-tubuh konsentrasi kortisol dan Na + dan K + fluks dibandingkan dengan menggunakan dua arah ANOVA (dengan atau tanpa terjadinya stres akut dan "saat setelah stres" sebagai variabel independen [Gambar 1 (A) - (C).]; Dengan atau tanpa stres akut dan fluoxetine sebagai variabel independen [Gambar 1 (D) -. (F)]), diikuti oleh Bonferroni koreksi post-test. Beda dengan P <0,05 dianggap signifikan secara statistik. Uji Hartley dilakukan untuk memverifikasi homogenitas varians, dan uji Kolmogorov-Smirnov digunakan untuk memeriksa normalitas data.

3. Hasil

3.1. Percobaan 1

Zebrafish menunjukkan peningkatan tingkat sol kortikospinalis seluruh tubuh 15 menit setelah stres akut (Gbr. 1 (A), P <0,001, F

2,38

perubahan osmoregulasi terjadi 60 menit setelah stres akut. Penelitian telah ditunjukkan kortisol yang merangsang Na +, Cl-, dan Ca2 + serapan (Kumai et al., 2012) dan meningkatkan luas dari sel-sel klorida dalam insang.

Bahkan, salah satu mekanisme yang kortisol mengganggu proses osmoregulasi adalah diferensiasi sel klorida dan lation menstimulasi insang Na + / K + -ATPase (Dang et al., 2000). Paparan 500 nM kortisol selama dua hari secara signifikan meningkatkan penyerapan Na + di ikan zebra (Kumai et al., 2012).

fluoxetine Waterborne mengurangi masuknya Na + dan K + yang disebabkan oleh stres. blok Fluoxetine menekankan respon, seperti yang diamati oleh lebih rendah seluruh tubuh kadar kortisol, sehingga menghalangi efek latory osmoregu- dipicu oleh stres. Dalam baris ini, studi sebelumnya dari Gebauer et al. (2011) dan Abreu et al . (2014) telah menunjukkan bahwa eksposur jangka pendek (15 menit) untuk fluoxetine yang cukup untuk memperoleh efek mereka pada sistem saraf pusat.

5. Kesimpulan

Page 7: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa kehadiran ditularkan melalui air tine fluoxe- di ekosistem perairan dapat mempromosikan perubahan ekologis penting dalam stres dan tanggapan osmoregulatory  Konflikikan

dalamkepentingan

None menyatakanzebra..

Dokumen

TransparansiTransparansi dokumen yang terkait dengan artikel ini dapat ditemukan di onlineversi

Ucapan Terima Kasih

LJGB.memiliki persekutuan penelitian CNPq (301.992 / 2014-2). BB

= 12,4).

Memiliki persekutuan penelitian CNPq (301.156 / 2012-3) stres akut menginduksi masuknya Na + (Gambar. 1 (B), P = 0,0061, F

2,37

= 5,881) dan K + (Gambar. 1 (C ), P = 0,026, F

2,35

=4,016) 60 menit setelah stres.

Referensi

3.2. Percobaan 2

Abreu, MS, Koakoski, G., Ferreira, D., Oliveira, TA, Rosa, JGS, Gusso, D., Giacomini, ACV, Piato, AL, Barcellos, LJG, 2014. Diazepam dan fluoxetine

menurunkan respon stres di ikan zebra. PLoS ONE 9, e103232. Fluoxetine ditekan respon stres dan penurunan tingkat sol kortikospinalis per se (Gambar. 1 (D), P

<0,001, F

1,26

=24,66).

Almeida, DV, de Martinez Gaspar Martins, C., de Azevedo Figueiredo, M ., Lanes, CF, Bianchini, A., Marins, LF, 2013. Hormon pertumbuhan transgenesis

mempengaruhi modulasi dan energi metabolisme osmoreg- di ikan zebra (Danio rerio). Res transgenik. 22, 75-88. 3.3. Percobaan 3

Baldisserotto, B., Copatti, CE, Gomes, LC, Chagas, EC, Brinn, RP, Roubach, R., 2008. fluks ion Net di fakultatif udara nafas Hoplosternum littorale (tamoata) dan

wajib ber-nafas gigas Arapaima (pirarucu) terkena Fluoxetine yang berbeda terbalik masuknya Na + (Gambar. 1 (E), P = 0,001,

perairan Amazon. Ikan Physiol. Biochem. 34, 405-412. F

1,22

Page 8: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

= 14,27) dan K + ( Gambar. 1 (F), P = 0,0012, F

1,20

= 7,58) disebabkan oleh stres akut.

Barbazuk, WB, Korf, I., Kadavi, C., Heyen, J., Tate, S., Wun, E ., Bedell, JA, McPherson, JD, Johnson, SL, 2000. Hubungan syntenic dari ikan zebra dan genom

manusia. Genome Res. 10, 1351-1358. Calisto, V., Esteves, VI, 2009. farmasi Psikiatri di lingkungan. 4. Diskusi

Chemosphere 77, 1257-1274. Cruz, SA, Chao, PL, Hwang, PP, 2013. Kortisol mempromosikan diferensiasi ionocytes epidermal melalui faktor transkripsi Foxi3 di

ikan zebra (Danio rerio). Dalam studi ini, kami menunjukkan bahwa stres akut mengubah fluks ion dalam ikan zebra dewasa dan bahwa paparan akut blok fluoxetine

menekankan respon, akibatnya, menghambat perubahan terkait dengan stres di

Comp. Biochem. Physiol. 164, 249-257. Dang, Z., Balm, PH, Flik, G., Wendelaar Bonga, SE, Lock, RA, 2000. meningkat Kortisol Na + / K + -ATPase kepadatan di

membran plasma sel insang klorida dalam tawar ikan nila air Oreochromis mossambicus. J. Exp. Biol. 203, 2349-2355. osmoregulasi. Konsentrasi seluruh tubuh

kortisol-langkah

Daughton, CG, Ternes, TA 1999. Farmasi dan produk perawatan pribadi di sured setelah 60 dan 240 menit adalah sama pada kedua nilai-nilai kontrol, mengungkapkan puncak kortisol setelah 15 menit stres dalamkortisol:

lingkungan  agen perubahan halus? Mengepung. Perspect kesehatan. 107, 907-938. Gebauer, DL, Pagnussat, N., Piato, AL, Schaefer, IC, Bonan, CD, Lara, DR, 2011.

Pengaruh anxiolytics di ikan zebra: Persamaan dan perbedaan antara respon benzo- selama masa stres akut pada ikan zebra (Ramsay et al.,

diazepines, buspirone dan etanol. Pharmacol. Biochem. Behav. 99,. 480-486 2009). The ditularkan melalui air fluoxetine menurun puncak kortisol-nilai-nilai, menunjukkan efeknya memblokir pada neuroendokrin stres sumbu

Jentoft, S., Aastveit, AH, Torjesen, PA, Andersen, O. 2005. Pengaruh stres pada pertumbuhan, kortisol dan kadar glukosa di non-dijinakkan bertengger Eurasia (Perca

fluviatilis) dan dijinakkan rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Comp. (Abreu et al., 2014).

Biochem. Physiol. A 141, 353-358. Diamati penyerapan Na + dan K + di ikan zebra 60 menit setelah stres (Gambar. 1 (C) dan (E)), direkam pada ikan zebra (Cruz et al., 2013), perubahan osmoregulasi ikan zebra. Mungkin puncak

Koakoski, G., Quevedo, RM, Ferreira, D., Oliveira, TA, da Rosa, JG, de Abreu, MS, Gusso, D., Marqueze, A., Kreutz, LC, Giacomini, AC, Fagundes , M., Barcellos, LJ, 2014. Agrichemicals kronis menghambat respon kortisol terhadap stres pada ikan. Chemosphere 112, 85-91al..

Page 9: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

MS Abreu et  / Toksikologi Lingkungan dan Farmakologi 40 (2015) 704-707 707

Page 10: Translatean OSMO FIX KEL 10 - Reza

Kolpin, DW, Furlong, ET, Meyer, MT, Thurman, EM, Zaugg, SD, Barber, LB, Buxton, HT, 2002. Farmasi, hormon, dan lainnya organik kontaminan air limbah di AS sungai, 1999-2000: pengintai nasional. Mengepung. Sci. Technol. 36, 1202-1211. Kumai, Y., Nesan, D., Vijayan, MM, Perry, SF 2012. Kortisol mengatur Na + serapan di ikan zebra, Danio rerio, larva melalui reseptor glukokortikoid. Mol. Sel Endocrinol. 364, 113-125.

Ramsay, MJ, Feist, GW, Varga, ZM, Westerfield, M., Kent, ML, Schreck, CB, 2009. Whole-tubuh respon kortisol dari ikan zebra untuk akut stres penanganan bersih. Budaya Aqua- 297, 157-162. Wastafel, TD, Lochmann, RT, Fecteau, KA 2007. Validasi, penggunaan, dan kerugian dari enzim-linked immunosorbent assay kit untuk deteksi kortisol dalam ikan lele, largemouth bass, pacu merah dan shiners emas. Ikan Physiol. Biochem. 75, 165-171.