I. PENDAHULUANA.Latar BelakangReaksi serologis dapat digunakan untuk diagnostik penyakit infeksi karena reaksinya bersifat spesifik. Selain itu, hasil uji memerlukan waktu yang lebih pendek dibandingkan uji diagnostik yang biasa dilakukan. Dalam uji diagnostik dilakukan pembiakkan dan identifikasi agen penyebab yang memerlukan waktu sekitar 1 minggu (Dwidjoseputro, 2005). Uji Widal dirancang secara khusus untuk membantu diagnosis demam typhoid dengan cara mengaglutinasikan basilus typhoid dengan serum penderita. Namun, istilah ini kadang-kadang diterapkan secara tidak resmi pada uji aglutinasi lain yang menggunakan biakan organisme yang dimatikan dengan panas selain Salmonella typhii (Pelczar and Chan, 1988).Pada uji widal diperlukan adanya antigen. Antigen merupakan suatu substansi yang bila memasuki inang vertebrata menimbulkan respon kekebalan yang membawa kepada terbentuknya kekebalan padatan. Respon ini mengakibatkan pembe ntukan antibody spesifik yang beredar dalam aliran darah (imunitas humoral) atau merangsang peningkatan jumlah sel-sel reaksi khusus yang disebut limfosit (Pelczar and Chan, 1988). Menurut Jawetz (1996), antibodi yaitu protein yang diproduksi sebagai akibat pemberian suatu antigen dan mempunyai kemampuan untuk bergabung dengan antigen yang merangsang produksinya.

B.Tujuan

Untuk menguji secara serologi mikroba patogen penyebab penyakit.

II. MATERI DAN METODEA. MateriAlat-alat yang digunakan dalam praktikum uji serologi untuk mendeteksi mikroba patogen penyebab penyakit kali ini adalah objek glass, mikropipet ukuran 5L, 10L, 20L, sprayer, alkohol dan pipet steril.Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum uji serologi untuk mendeteksi mikroba patogen penyebab penyakit kali ini adalah reagen widal (antigen H) dan serum (antibodi Salmonella typhii) dari pasien..B. Metode

40L antigen H20L antibody (serum)DiamatiAglutinasi (endapan seperti pasir) aglutinasi (tidak berlanjut)+ titer antibodi 20 x 1/1600 = 1/80(Infeksi ringan)dilanjutkan10L serum1 tetes antigenDiamati aglutinasi (tidak berlanjut)aglutinasi+ titer antibodi 10 x 1/1600 = 1/160(Infeksi sedang)5L serum1 tetes antigenDiamati aglutinasi (tidak berlanjut)aglutinasi+ titer antibodi 5 x 1/1600 = 1/320(Infeksi berat)dilanjutkan

III. HASIL DAN PEMBAHASANA. Hasil (Titer Ab + 1/80) Dengan mikropipet 20 L, terjadi aglutinasi

(Titer Ab + 1/160)

Dengan mikropipet 10 L, terjadi aglutinasi

B. Pembahasan

Reaksi widal adalah reaksi serum (sero-test) untuk mengetahiu ada tidaknya antibodi terhadap Salmonella typhii dengan jalan mereaksikan serum seseorang dengan antigen O, H, dan Vi dari laboratorium. Bila terjadi aglutinasi, maka reaksi widal positif, berarti serum orang tersebut mempunyai antibody terhadap Salmonella typhii, baik setelah vaksinasi, setelah sembuh dari penyakit tipus ataupun sedang menderita tipus. Reaksi widal negative artinya tidak memiliki antibodi terhadap Salmonella typhii (tidak terjadi aglutinasi). Kelebihan pemeriksaan Widal sering di lakukan untuk mendeteksi adanya antibodi (didalam darah) terhadap antigen kuman Salmonella typhii dan sebagai uji yang cepat sehingga dapat segera diketahui.Kelemahan uji Widal yaitu rendahnya sensitivitas dan spesifisitas serta sulitnya melakukan interpretasi hasil membatasi penggunaannya dalam penatalaksanaan penderita demam tifoid akan tetapi hasil uji Widal yang positif akan memperkuat dugaan pada tersangka penderita demam tifoid (penanda infeksi) (Jawetz, 1966).Salmonella typhii merupakan bakteri batang gram negatif yang bersifat motil, tidak membentukspora, tidak berkapsul, mempunyai flagel, fakultatif anaerob, ukuran 2 -4 mikrometer x 0.5 -0.8 mikrometer dan bergerak, pada biakan agar darah koloninya besar bergaris tengah 2-3 mm, bulat, agak cembung, jernih, licin dan tidak menyebabkan hemolisis dan bersifat patogen baik pada manusia maupun hewan dan sukrosa. Organisme Salmonella tumbuh secara aerob dan mampu tumbuh secara anaerob fakultatif pada suhu 15 - 41C (suhu pertumbuhan optimum 37C) dan pH pertumbuhan 68 (Pelczar dan Chan, 1988).Berdasarkan hasil pengamatan pada pengenceran 1:160 terjadi aglutinasi, gumpalan-gumpalan seperti pasir yang berwarna ungu kecoklatan. Semakin tinggi titernya berarti semakin parah penyakit Typus yang disebabkan oleh bakteri Salmonella typhii. Adanya aglutinasi menandakan bahwa penderita positif terinfeksi Salmonella typhii yang dapat dikategorikan sebagai berikut :1. Pada serum 20 l, titer Ab + 1/80 = infeksi ringan2. Pada serum 10 l, titer Ab + 1/160 = infeksi aktif (infeksi sedang)3. Pada serum 5 l, titer Ab + 1/320 = infeksi berat (Volk and Wheeler, 1988)Ada tiga spesies utama Salmonella sp yaitu Salmonella typhii, Salmonella choleraesuis dan Salmonella enteristidis. Demam tifoid adalah penyakit infeksi akut yang disebabkan oleh kuman Salmonella typhii dengan masa tunas 6-14 hari. Setiap orang dapat terjangkit tipus jika makan atau minum yang telah tersentuh oleh orang yang terkena bakteri S. typhii atau jika tempat pembuangan terkontaminasi dengan bakteri S. typhii juga jika masuk dalam air yang diminum atau air untuk mencuci makanan (David, 1990). Demam tifoid adalah suatu penyakit sistemik yang disebabkan oleh Salmonella typhii. Penyakit ini ditandai oleh panas yang berkepanjangan, di topang dengan bakteremia tanpa terlibat struktur endotelial atau endokardial dan invasi bakteri sekaligus multiplikasi ke dalam sel fagosit mononuklear dari hati, limpa, kelenjar limfe usus. Di daerah endemik demam typhoid, insiden tertinggi pada anak-anak. Orang dewasa sering mengalami infeksi yang sembuh sendiri dan dapat menjadi kebal. Insiden 70 80 % pada usia 12 30 tahun, 10 20 % pada usia 30 40 tahun, dan 5 10 % pada usia di atas 40 tahun, sedangkan insiden jenis kelamin antara laki-laki dan perempuan tidak ada perbedaan yang jelas (Sutedjo. 2008). Titter antibodi adalah tes laboratorium yang mengukur keberadaan dan jumlahantibodidalam darah.Tingkat antibodi dalam darah adalah refleksi dari paparan masa lalu keantigenatau untuk sesuatu yang tubuh tidak mengakui sebagai milik sendiri. Tubuh menggunakan antibodi untuk menyerang dan menghilangkan zat asing (Zmijewski, 1993). Gambar : Titer antibodiGenus Salmonella mempunyai tiga macam antigen yaitu antigen O (somatik), antigen H (flagela) dan antigen Vi.1. Antigen O (somatik)Antigen merupakan bagian dari dinding sel bakteri yang tahan terhadap pemanasan 1000C, alkali dan asam. Antigen O terdiri dari lipopolisakarida dan bila disuntikkan pada hewan akan merangsang pembentukan antibodi terhadap antigen O terutama yang berbentuk Ig. Antigen ini kurang imunogenik karena titer antibodi O sesudah infeksi atau imunisasi lebih rendah daripada titer antibodi H.2. Antigen H (flagel)Antigen H merupakan protein yang disebut flagelin yang bersifat termolabul dan rusak pada pemanasan 600C oleh alkohol dan asam. Antigen ditemukan dalam dua fase yaitu fase spesifik dan fase non spesifik. Organisme cenderung berubah dari fase satu ke fase lainnya, ini dinamakan variasi fase.3. Antigen Vi Antigen Vi merupakan antigen envelop dan terdapat pada permukaan bakteri terdiri dari polisakarida yang bersifat termostabil. Bakeri yang mempunyai antigen Vi bersifat virulen terhadap mencit dan mencit tersebut dapat dilindungi oleh antigen Vi (Wardhani, 2005).Masuknya kuman Salmonella typhii (S.typhii) dan Salmonella parathypii (S.parathypii) ke dalam tubuh manusia terjadi melalui mekanisme makanan yang terkontaminasi kuman. Sebagian kuman dimusnahkan dalam lambung, sebagian lolos masuk ke dalam usus dan selanjutnya berkembang biak. Bila respon imunitas humoral mukosa (IgA) usus kurang baik, maka kuman akan menembus sel-sel epitel (terutama sel M) dan selanjutnya ke lamina propria. Di lamina propria kuman berkembang biak dan difagosit oleh sel-sel fagosit terutama oleh makrofag. Kuman dapat hidup dan berkembang biak di dalam makrofag dan selanjutnya dibawa ke plak Peyeri ileum distal dan kemudian ke kelenjar getah bening mesenterika. Selanjutnya melalui duktus torasikum kuman yang terdapat pada makrofag ini masuk ke dalam sirkulasi darah (mengakibatkan bakterimia pertama yang asimptomatik) dan menyebar ke seluruh organ retikuloendothelial tubuh terutama di hati dan limfa. Di organ ini kuman meninggalkan sel-sel fagosit dan kemudian berkembang biak di luar sel atau ruang sinusoid dan selanjutnya masuk ke dalam sirkulasi darah lagi sehingga mengakibatkan bakterimia kedua kalinya dengan disertai tanda-tanda dan gejala penyakit infeksi sistemik (Paramita, 2011).Di dalam hati, kuman masuk ke dalam kandung empedu, berkembang biak, dan bersama cairan empedu diekskresikan secara intermiten ke lumen usus. Sebagian kuman dikeluarkan melalui feses dan sebagian masuk lagi ke dalam sirkulasi setelah menembus usus. Proses yang sama terulang kembali, berhubung makrofag telah teraktivasi dan hiperaktif maka saat fagositosis kuman Salmonella terjadi pelepasan beberapa mediator inflamasi yang selanjutnya akan menimbulkan gejala reaksi inflamasi sistemik seperti demam, malaise, mialgia, sakit kepala, sakit perut, instabilitas vaskuler, gangguan mental, dan koagulasi (Paramita, 2011).Di dalam plak Peyeri makrofag hiperaktif menimbulkan reaksi hiperplasia jaringan. Perdarahan saluran cerna dapat terjadi akibat erosi pembuluh darah sekitar plak Peyeri yang sedang mengalami nekrosis dan hiperplasia akibat akumulasi sel-sel mononuklear di dinding usus. Proses patologi jaringan limfoid ini dapat berkembang hingga ke lapisan otot, serosa usus, dan dapat menghasilkan perforasi. Endotoksin dapat menempel di reseptor sel endotel kapiler dengan akibat timbulnya komplikasi seperti gangguan neuropsikiatrik, kardiovaskular, pernafasan, dan gangguan organ lainnya (Paramita, 2011).

IV. KESIMPULAN DAN SARANA. Kesimpulan

Berdasarkan hasil percobaan dapat disimpulkan bahwa :1. Uji serologi dapat digunakan untuk menentukan jenis kuman yang diasingkan dari penderita, dimana serum darah yang mengandung antibodi direaksikan dengan reagen widal sehingga terjadi aglutinasi. 2. Hasil tes widal pada titer 1/80 dan 1/160, terjadi aglutinasi, ini menunjukkan bahwa penderita memiliki antibodi terhadap Salmonella typhii atau dengan kata lain mengalami infeksi demam tifoid berat.

B. Saran

Pada saat pelaksanaan paraktikum uji serologi ini disarankan kepada seluruh praktikan menggunakan sarung tangan dan masker agar tidak terinfeksi oleh bakteri Salmonella typhii. Untuk menghindari infeksi dari mikroorganisme patogen sebaiknya membiasakan diri hidup bersih dengan selalu menjaga kebersihan diri dan lingkungan. Berpola hidup sehat dengan mengkonsumsi makanan yang bergizi dan sehat serta diseimbangkan dengan melakukan olahraga secara teratur.

DAFTAR REFERENSIDavid, B.D. Renato. 1990. Microbiology 4th. Tippicoll Company, London.Dwidjoseputro, Prof. DR. D. 2005. Dasar Dasar Mikrobiologi. Djambatan, Jakarta.Jawetz, Melnick & Adelberg. 1966. Microbiologi Kedokteran. Buku Kedokteran, Jakarta.Paramita, Listya. 2011. Demam Typhoid. http://manosa.com/blog/?p=140. Diakses tanggal 16 April 2011.Pelczar and Chan. 1988. Dasar-Dasar Mikrobiologi 2. UI Press, Jakarta.Sherwa, BL et al. 2004. A Comparative Study of Typhidot and Widal Test in Patients of Typhoid Fever. Journal, Indian Academy of Clinical Medicine. 5 (3) : 244-246.Sutedjo. 2008.Mengenal Penyakit Melalui Hasil Pemeriksaan Laboratorium. Amara Books, Yogyakarta.Volk, W. A, and Wheeler, M. F. 1984. Mikrobiologi Dasar. Erlangga, Jakarta.Wardhani, Puspa,dkk. 2005. Kemampuan Uji Tabung Widal Menggunakan Antigen Import dan Antigen Lokal. Indonesian Journal of Clinical Pathology and Medical Laboratory. 12 (1) : 31-37.Zmijewski, C. M and Bellanti, J. A. 1993. Imunologi 3. UGM Press, Yogyakarta.

8