Uso de Chlorella sorokiniana

biotipo 1 en dietas balanceadas

para tilapia roja

Gabriel Villafuerte

Introducción

• A escala global se experimenta

una reducción de los recursos

acuícolas.

• Se estima que en las últimas 4

décadas ha disminuido el 69% de

la fauna marina del mundo

(Hoegh-Guldberg et al., 2015).

• En el año 2012, 16 millones de

toneladas de pescado fueron

reducidas a harina (FAO, 2014).

Justificación

• Se proyecta que el precio del pescado se incremente a escala global durante los próximos 10 años (La demanda alcanzará 20,6 kg por persona al año para 2022) (HLPE, 2014).

• Se espera que la acuicultura llegue a representar el 53% del consumo humano total para 2022 y el 62% para 2030 (World Bank, 2013).

• Una alternativa para la acuicultura es la utilización de microalgas como complemento nutricional (Poot-López et al., 2012).

Justificación

• Varios estudios destacan la digestibilidad de las microalgas y su contenido de aminoácidos libres, ácidos grasos, así como la presencia de Fe y Ca (Ortiz, et al., 2015, Rozo et al., 2010, Andrade et al., 2007).

• Las microalgas del alto andino poseen propiedades únicas al desarollarse por acción de la luz a diferentes longitudes de onda (Ortiz et al., 2015).

• En Ecuador existe limitada información sobre este recurso.

Metodología

Metodología

• Recolección

• La microalga fue aislada de muestras de agua colectadas en el sistema lacustre de Papallacta a 3730 msnm, latitud 17M,818079, longitud 9964895.

• Las muestras fueron mantenidas bajo iluminación y se dividieron en volúmenes iguales manteniendo un grupo con fertilizante foliar y otro grupo sin nutriente durante 4 días.

• Transcurrido este tiempo se tomaron 50 μl de cada muestra para ser sembrados por inundación en cajas Petri con medio nutritivo (BG11, F2, Fertilizante foliar).

Metodología

• Aislamiento

• Con un asa de platino se tomaron las colonias sin signos de contaminación y fueron re-sembradas.

• Mediante técnicas moleculares se determinó que la cepa nativa aislada corresponde a la especie Chlorella sorokiniana Biotipo 1.

Chlorella sorokiniana biotipo 1 (40 X) Chlorella sorokiniana biotipo 1 (100 X)

Metodología

• Masificación

• Fue masificada utilizando como medio de cultivo fertilizante foliar compuesto por 17% N, 6% P y 18% K, en una dosificación de 1 g/l. Se empleó un ciclo de 18 horas de luz y 6 horas de oscuridad, con una irradiancia de 78,8 μmol quanta m-2 s-

1.

Metodología

• Cosecha

• Después de 19 días de cultivo se procedió a

cosechar la biomasa microalgal mediante la

técnica de centrifugación, secando el residuo

en una estufa a 30 °C durante 24 horas.

Metodología

• Análisis bromatológico

• La biomasa obtenida fue sometida a la prueba de Kjelndahl para determinar el contenido proteico.

• A través del método de Soxhlet se logró establecer el porcentaje de grasa.

• Mediante el método químico gravimétrico se precisó el contenido de fibra.

• Por técnicas de secado y calcinación se determinaron humedad y cenizas respectivamente.

Metodología

• Bioensayo de letalidad en Artemia salina

• Se disolvieron 60 mg de biomasa de microalga en 15 μl de DMSO y en 6 ml de agua destilada.

• De esta solución madre se prepararon diluciones de 1, 10, 100, 250, 500 y 1000 ppm, transfiriendo 0,5, 5, 50, 125, 250 y 500 μl respectivamente a tubos de ensayo.

• Estos contenían 10 nauplios de artemia y 5 ml de agua de mar.

• Después de 24 horas se cuenta el número de sobrevivientes por cada dilución.

Metodología

• Elaboración del balanceado

• Se preparó una dieta experimental base con 36,5% de harina de pescado, 36,5% de harina de torta de soya, 26,9% harina de maíz y 0,1% de premix de vitaminas y minerales.

• Fueron evaluados 5 tratamientos:

Metodología

• Ensayo con alevines de tilapia

• Se utilizó un DCA con 3 repeticiones por cada tratamiento.

• Las UE fueron peceras de 20 l, cada una con 5 alevines de tilapia roja de entre 1,5 a 2 g.

• Los peces fueron alimentados cuatro veces durante el día en intervalos de 2 horas. Cada 10 días fueron registrados los parámetros morfométricos.

Metodología

• Análisis histológico

• Se sacrificaron alevines de cada tratamiento y mediante técnicas de histología clásica

(tinción hematoxilina y eosina) se realizaron placas hepáticas.

Resultados

• Análisis bromatológicos y de toxicidad

• A través del ensayo de letalidad en Artemia

salina se evidenció que a una dosis de 520

ug/ml se obtuvo una mortalidad de 50% de

nauplios de artemia (DL 50).

• Chlorella sorokiniana biotipo 1 fue clasificada

como ligeramente tóxica.

Resultados

• Parámetros morfométricos (Peso)

• Mediante el método de Tukey se encontró una diferencia estadísticamente significativa entre los tratamientos T3 y T1 con un nivel del 95,0% de confianza (p=0,0017).

Resultados

• Parámetros morfométricos (Longitud Total)

• Fue analizada mediante un análisis de Tukey con un 95% de nivel de confianza, evidenciándose una diferencia estadísticamente significativa entre T1 y T3 (p=0,0104).

Resultados

• Relación entre las variables Peso y Longitud Total

• Existe una relación estadísticamente significativa entre peso y longitud total con un nivel de confianza del 95,0% puesto que p=0,000.

Resultados

• Parámetros productivos (Tasa de Crecimiento Específico)

• Mediante el método de Tukey se encontraron diferencias significativas entre T1 y T5, también entre T3 y T5, con un 95% de nivel de confianza (p=0,0139).

Resultados

• Parámetros productivos (Factor de Conversión Alimenticia)

• Mediante ANOVA se encontró un valor-P > 0,05, por lo cual se puede aseverar con un

95% de confianza que no se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos.

Resultados

• Parámetros productivos (Eficiencia Alimenticia)

• El ANOVA establece un valor-P > 0,05, por lo tanto se concluye con un 95% de confianza que no existen diferencias significativas en cuanto a la eficiencia alimenticia entre tratamientos.

Resultados

• Parámetros productivos (Índice de Condición Corporal)

• A través del método de Tukey con un 95% de nivel de confianza se puede establecer que se encontró una diferencia significativa entre los tratamientos T1 y T5 (p=0,0259).

Resultados

• Parámetros productivos (Mortalidad)

• La prueba de Tukey con un 95% de nivel de confianza establece que existen diferencias significativas entre los tratamientos T1 y T5, de igual forma entre T3 y T5 (p=0,0156).

Resultados: Análisis de cortes histológicos hepáticos (H y E)

Se ha evidenciado dilatación sinusoidal y vacuolización lipídica ligera en el T3, dichas

afectaciones son más severas en T4 y T5 en donde las vacuolas ocupan gran parte del

parénquima.

Conclusiones

• La biomasa de Chlorella sorokiniana biotipo 1 tiene un contenido proteico del 18,1%, un porcentaje de grasa de 17,08%, 3,7% de fibra, 4,33% de humedad y 12,60% de cenizas.

• Presenta una DL50 de 520 ug/ml por lo cual fue clasificada como ligeramente tóxica según la tabla de toxicidad del CYTED.

• Los resultados de los parámetros morfométricos demostraron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos, siendo T3 (inclusión de 100 ppm de microalga) el que presenta mayor ganancia de peso y longitud total (p<0,05).

• En cuanto a los parámetros productivos, en las variables TCE y mortalidad se evidenció que los tratamientos T1 y T3 tienen los mejores indicadores de crecimiento y supervivencia (p<0,05).

Muchas Gracias